Khảo Sát Thành Phần Hóa Học Cao Ethyl Acetate Lá Ô Môi Cassia Grandis L. Họ Vàng (Caesalpiniaceae)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH KHOA HĨA HỌC  KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CAO ETHYL ACETATE LÁ Ô MÔI CASSIA GRANDIS L HỌ VANG (CAESALPINIACEAE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC CHUYÊN NGÀNH : HÓA HỮU CƠ Hướng dẫn khoa học: TS LÊ TIẾN DŨNG Sinh viên thực hiện: TRƯƠNG THỊ THU THỦY TP HỒ CHÍ MINH - 2012 LỜI CẢM ƠN - - Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành giử lời cảm ơn đến:  TS Lê Tiến Dũng, ThS.Phạm Thị Nhật Trinh - Phịng hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học, thầy (cơ) tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, cung cấp kiến thức, động viên, tạo điều kiện giúp em hồn thành đề tài khóa luận tốt nghiệp  TS Mai Đình Trị-Phịng hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học-thầy giúp đỡ, cho em ý kiến quí báu để em hồn thành đề tài  Thầy Cơ mơn hóa hữu – Khoa hóa – Trường đại học Sư Phạm thành phố Hồ Chí Minh Thầy Cô Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện giúp đỡ em hồn thành khóa luận tốt nghiệp  Chị Lưu Thị Ngọc Anh học viên cao học trường Đại học Cần Thơ truyền đạt ý kinh nghiệm quý báu trình thực đề tài  Các anh chị khóa trước bạn khóa làm phịng 19, phịng 47Cơng nghệ Việt Nam , bạn lớp hóa 4C, động viên giúp đỡ tơi q trình thực đề tài  Các bạn phịng trọ quan tâm, động viên, tạo điều kiện thuận lợi trình thực đề tài  Con xin cảm ơn Bố Mẹ động viên, hỗ trợ mặt suốt trình học tập, thực đề tài khóa luận tốt nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2012 Sinh viên: Trương Thị Thu Thủy DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT brs Broad singlet Mũi đơn rộng 13 Carbon-13 Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance carbon 13 C – NMR CTPT Công thức phân tử d Doublet Mũi đôi dd Double of doublet Mũi đôi đôi DMSO Dimethyl sulfoxide DMSO-d6 Dimethyl sulfoxide-d6 DPPH 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid ESI-MS Electron Spray Ionization Mass Phổ khối lượng phun mù điện tử Spectrum EtOAc Ethyl acetate EtOH Ethanol g Gram Hz Hertz H n-Hexane HMBC Heteronuclear Multiple Bond Phổ tương tác dị nhân qua Coherence nhiều liên kết HSQC Heteronuclear Single Quantum Phổ tương tác dị nhân qua Correlation liên kết Proton Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance proton J Coupling constant Hằng số ghép m Multiplet Mũi đa MDA Malonyldialdehyde MeOH Methanol H – NMR mg Miligram MHz Mega Hertz MIC Minimum Inhibitory concentration mp Melting Point Điểm chảy ppm Part per million Một phần triệu R p 18 Reversed Phase 18 Pha đảo C18 s Singlet Mũi đơn SKC Sắc ký cột SKLM Sắc ký lớp mỏng STT Số thứ tự t Triplet TMS Tetramethylsilane δ Chemical shift Mũi ba Độ dịch chuyển hoá học DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Kết sắc ký cột sephadex cao CGA5 (0.57g)…………………………………30 Bảng Kết sắc ký cột sephadex cao CGA7 (25 g)……………………………… 32 Bảng Kết sắc ký cột cao CGA7.3(0.75 g)……………………………………….33 Bảng 4: Số liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất CGAVII 39 Bảng 5: Số liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất CGAV 43 Bảng 6: Số liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất CGAVII 47 Bảng 7: Số liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất CGAIX .51 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ Quy trình điều chế cao thơ từ Ơ mơi……………………………………28 Sơ đồ Quy trình điều chế phân đoạn từ cao EtOAc …………………………… 29 Sơ đồ Quy trình điều chế CGAV từ phân đoạn CGA5……………………………….32 Sơ đồ Quy trình điều chế CGAVII từ phân đoạn CGA7.2.4…………………………33 Sơ đồ Quy trình điều chế CGAVIII từ phân đoạn CGA7.2.3……………………… 34 Sơ đồ Quy trình điều chế CGAIX từ phân đoạn CGA7.2.2………………………… 35 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Cây Ơ mơi 12 Hình Lá Ơ mơi 12 Hình Hoa Ơ mơi 13 Hình Trái Ơ môi 13 Hình Lá Ơ mơi khơ…………………………………………………………… 27 Hình Tương quan HMBC vịng A CGAVII 38 Hình 7: Tương quan HMBC vòng B CGAVII 41 Hình : Tương quan HMBC vịng A CGAVA………………………….42 Hình 9: Tương quan HMBC vòng A CGAVIII .45 Hình 10: Tương quan HMBC vịng B CGAVIII .46 Hình 11: Tương quan HMBC vòng Acủa CGAIX 49 Hình 12: Tương quan HMBC vịng Bcủa CGAIX 50 MỤC LỤC Chương 12 1.1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 12 1.1.1 Đặc điểm Ơ mơi 12 1.1.1.1 Mơ tả Ơ mơi 1,5 12 1.1.1.2 Phân bố, thu hái chế biến1,5: 14 1.1.2 Tác dụng dược lý Ơ mơi 15 1.2 NHỮNG CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU VỀ CÂY Ơ MƠI 15 1.2.1 Thành phần hóa học chung Ơ mơi1,5 15 1.2.2 Các cơng trình nghiên cứu giới 16 1.2.2 Các cơng trình nghiên cứu Việt Nam 23 Chương 25 THỰC NGHIỆM 25 2.1 HÓA CHẤT-THIẾT BỊ-PHƯƠNG PHÁP 25 2.1.1 Hoá chất 25 2.1.2 Thiết bị 25 2.1.3 Phương pháp tiến hành 26 2.1.3.1 Phương pháp cô lập hợp chất 26 2.1.3.2 Phương pháp xác định cấu trúc hoá học hợp chất 26 2.2 NGUYÊN LIỆU 26 2.2.1 Thu hái nguyên liệu 26 2.2.2 Xử lý mẫu nguyên liệu 26 2.3 CÔ LẬP CÁC HỢP CHẤT TỪ CAO THÔ 27 2.3.1 Điều chế cao thô 27 2.3.2 Cô lập chất từ cao CGA5 30 2.3.2 Cô lập chất từ cao CGA7 (21 g) 32 2.3.2.1 Cô lập chất từ phân đoạn 7.3 (0.75 g) 32 2.3.2.1.1 Cô lập chất từ phân đoạn 7.2.4 33 2.3.2.1.2 Cô lập chất từ phân đoạn 7.2.3 33 2.3.2.1.3 Cô lập chất từ phân đoạn 7.2.2 34 Chương 36 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 36 3.1 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤT 36 3.1.1 HỢP CHẤT CGAVII: 36 3.1.2 HỢP CHẤT CGAVA: 39 3.1.3 HỢP CHẤT CGAVIII: 44 3.1.4 HỢP CHẤT CGAIX 50 Chương 52 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 52 4.1 KẾT LUẬN 52 4.2 KIẾN NGHỊ 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO Error! Bookmark not defined Tài liệu tiếng Việt 54 Tài liệu tiếng Anh 55 MỞ ĐẦU - - Từ thời xa xưa,con người biết dùng cỏ làm phương tiện phòng chữa bệnh,phát triển y học dân gian y học cổ truyền dân tộc Ngày nay,mặc dù hóa học tổng hợp hữu đạt nhiều thành tựu quan trọng nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học cịn khó tổng hợp,hoặc tổng hợp chi phí đắt Ngồi có tác dụng phụ khơng mong muốn Cho nên,việc nghiên cứu phát triển nguồn dược phẩm từ nguồn nguyên liệu tự nhiên đóng góp mạnh mẽ vào lĩnh vực điều trị bao gồm chống ung thư, chống nhiễm khuẫn,chống viêm,điều chỉnh miễn dịch bệnh thần kinh…theo thống kê, năm 20002005,hơn 20 thuốc sản phẩm thiên nhiên dẫn xuất từ thiên nhiên16 Vốn nước thiên nhiên ưu đãi,nằm vùng nhiệt đới gió mùa,Việt Nam có thảm thực vật vơ phong phú đa dạng với 12.000 loài thực vật bậc cao khác xếp hạng thứ 16 giới phong phú loài thực vật Đây lợi lớn việc nghiên cứu hóa học hợp chất thiên nhiên Cây Ơ mơi có tên khoa học Cassia grandisL., thuộc họ Vang loại quen thuộc với người dân miền Nam, chúng mọc hoang trồng lấy Quả Ơ mơi thường dùng ngâm rượu làm thuốc bổ, nấu cao mềm để kích thích tiêu hóa, nhuận tràng, trị bị cạp cắn, Ơ mơi không loại ngon độc đáo vùng đồng sơng Cửu Long mà cịn vị thuốc bổ so sánh ngang với Canh-ki-na Chính thứ cơm màu nâu đen đặc sền sệt chứa Ơ mơi người dân ta ngâm rượu làm thuốc bổ uống Rượu Ơ mơi có màu đỏ đẹp màu rượu Canh-ki-na có tác dụng rượu canh-ki-na, nên Ơ mơi cịn gọi “Canh-ki-na Việt Nam” Tuy nhiên, cơng trình nghiên cứu thành phần hố học hoạt tính sinh học loài chưa nghiên cứu nhiều giới Việt Nam Do vậy, đề tài “Nghiên cứu thành phần hố học Ơ môi Cassia grandis L họ Vang (Caesalpiniaceae)” làm sở khoa học ban đầu cho nghiên cứu tiếp theo, nhằm sớm đưa Ơ mơi thành vị thuốc có giá trị đóng góp thêm hiểu biết thành phần Hóa-thực vật lồi Cassia grandis L mọc Đồng sơng Cửu Long, qua nâng cao giá trị sử dụng loài thực vật PHỤ LỤC 1.2: PHỔ 13C-NMR CỦA HỢP CHẤT CGAVII PHỤ LỤC 1.3: PHỔ DEPT CỦA HỢP CHẤT CGAVII PHỤ LỤC 1.4: PHỔ HMBCCỦA HỢP CHẤT CGAVII PHỤ LỤC 2.1:PHỤ PHỔLỤC H-NMR CỦAHSQC HỢP CHẤT CGAVA 1.4: PHỔ CỦA HỢP CHẤT CGAVII PHỤ LỤC 2.3: PHỔ DEPT CỦA HỢP CHẤT CGAVA PHỤ LỤC 2.2: PHỔ 13C-NMR CỦA HỢP CHẤT CGAVA PHỤ LỤC 2.4: PHỔ HMBC CỦA HỢP CHẤT CGAVA PHỤ LỤC 2.5: PHỔ HSQC CỦA HỢP CHẤT CGAVA PHỤ LỤC 3.1: PHỔ 1H-NMR CỦA HỢP CHẤT CGAVIII PHỤ LỤC 3.5: PHỔ HSQC CỦA HỢP CHẤT CGAVIII PHỤ LỤC 4.1: PHỔ 1H-NMR CỦA HỢP CHẤT CGAIX PHỤ LỤC 3.5: PHỔ HMBC CỦA HỢP CHẤT CGAVIII PHỤ LỤC 4.2: PHỔ 13C-NMR CỦA HỢP CHẤT CGAIX PHỤ LỤC 3.3: PHỔ DEPT CỦA HỢP CHẤT CGAIX PHỤ LỤC 2.4: PHỔ HMBC CỦA HỢP CHẤT CGAIX ... cứu thành phần hố học hoạt tính sinh học lồi chưa nghiên cứu nhiều giới Việt Nam Do vậy, đề tài “Nghiên cứu thành phần hố học Ơ mơi Cassia grandis L họ Vang (Caesalpiniaceae)? ?? làm sở khoa học. .. đại học Sư Phạm thành phố Hồ Chí Minh Thầy Cơ Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện giúp đỡ em hồn thành khóa luận tốt nghiệp  Chị Lưu Thị Ngọc Anh học viên cao học trường Đại học Cần... (51g) Cao EtOA (330 g) Cao MeOH (588 g) Sơ đồ Quy trình điều chế cao thơ từ Ô môi Trong luận văn này, khảo sát cao EtOAc Thực sắc ký cột cao EtOAc (330 g) cột sắc ký silica gel với hệ dung môi rửa