Nghề nuôi cua đã và đang được mở rộng và phát triển ở nhiều vùng nuôi ở nước ta trong những năm gần đây do hiệu quả kinh tế mang lại. Đặc biệt sản phẩm cua lột rất được ưa chuộng do giá trị dinh dưỡng và lợi nhuận cao.
VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II NGHIÊN CỨU BỔ SUNG CHẾ PHẨM ECDYSONE TẠO CUA (Scylla serrata) LỘT Trần Văn Khanh1*, Lê Hoàng1, Nguyễn Thành Trung1, Trần Thị Lệ Trinh1, Nguyễn Văn Nguyện1 TĨM TẮT Nghề ni cua mở rộng phát triển nhiều vùng nuôi nước ta năm gần hiệu kinh tế mang lại Đặc biệt sản phẩm cua lột ưa chuộng giá trị dinh dưỡng lợi nhuận cao Tuy nhiên, thực tế cho thấy việc kiểm soát chủ động việc tạo sản phẩm cua lột vấn đề phức tạp mẻ nghề nuôi cua Nghiên cứu tập trung vào việc đánh giá hiệu chế phẩm ecdysone để tạo cua lột thương phẩm Thí nghiệm bố trí gồm 05 nghiệm thức, nghiệm thức lặp lại 03 lần Cua giống (35,0 ± 1,4 g/ con) cho ăn cá tạp (D0) thức ăn chứa hàm lượng ecdysone từ 0,3; 0,5 0,7 μg/g (D1, D2, D3) 01 nghiệm thức sử dụng 0,5% cholesterol (D4) Cua cho ăn theo dõi 45 ngày ni Kết thí nghiệm cho thấy cua ăn thức ăn chứa nồng độ 0,7 μg/g ecdysone có tỉ lệ lột ngày thứ 17 đạt cao (63,3%) Tính giai đoạn, nghiệm thức 0,7 μg/g cá tạp có tỉ lệ cua lột tốt 79,3% 80,2%, nhiên thời gian lột nghiệm thức sử dụng thức ăn ecdysone giảm xuống 02 ngày so với thức ăn cá tạp (19 ngày) Kết nghiên cứu cho thấy ecdysone có ảnh hưởng rõ rệt đến tượng lột vỏ rút ngắn thời gian lột vỏ cua Từ khóa: bổ sung ecdysone, cua lột I ĐẶT VẤN ĐỀ Nghề nuôi cua biển (Scylla spp.) phát triển nước ta đầu năm thập niên 1990 Cua nuôi tập trung vùng ven biển với phương thức nuôi ao nuôi chung với tôm cá, cho ăn thức ăn tươi từ còng cá tạp xay nhỏ (Christensen ctv., 2004) Giá trị kinh tế cao từ nghề ni cua đặc biệt cua lột hình thành phát triển nghề nuôi cua nhiều địa phương nước Tuy nay, thức ăn cho nuôi cua chủ yếu cá tạp số nơi sử dụng thức ăn nuôi tôm Vì vậy, liên quan đến hàng loạt vấn đề ô nhiễm thức ăn dư thừa mầm bệnh từ cá tạp, nhu cầu dinh dưỡng vấn đề lột vỏ để tạo thành sản phẩm cua lột thương phẩm Nguyễn Thị Bích Thuỷ ctv., 2003 nghiên cứu sử dụng nhiều giải pháp khác nhau, bao gồm sử dụng loại hormone, chitosan, cắt cuống mắt, v.v… để thử nghiệm khả kích thích lột vỏ ghẹ xanh (blue swimming crab, Portunus pelagicus) Đề tài dùng 1% chitosan trộn với cá tươi cho ghẹ ăn đạt hiệu lột vỏ tới 70% Sản phẩm thương mại có chứa hormone β-ecdysone sử dụng để kích thích khả lột xác ghẹ xanh thương phẩm, cho thấy ghẹ ăn thức ăn trộn β-ecdysone với tỷ lệ ppm có khả đạt hiệu lột vỏ 71-75% sau 20 ngày thí nghiệm Tuy nhiên giải pháp cắt mắt cho thấy khơng có tác dụng rõ rệt lên hiệu lột vỏ ghẹ Mặt khác, tỷ lệ lột vỏ đồng loạt không nghiên cứu đề tài Trong nghiên cứu Sue, 1992 cua Uca (Uca pugilator) kết cho thấy khơng có khác biệt tỷ lệ lột vỏ lơ thí nghiệm, chưa có chứng rõ ràng ảnh hưởng việc cắt hai mắt đến thời gian lột vỏ cua Uca mà tác giả cho thời gian năm có ảnh hưởng đến tỷ lệ lột vỏ loài cua Cholesterol sterol động vật quan trọng, tiền chất nhiều phức hợp sinh lý Trung tâm Công nghệ Thức ăn Sau thu hoạch Thủy sản, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II *Email: tvkhanh76@yahoo.com 96 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ 13 - THÁNG 6/2019 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II hormone giới tính, hormone lột vỏ, corticoid thượng thận, axit mật vitamin D (Teshima Kanazawa, 1971, Sheen, 2000) Hầu hết động vật tổng hợp sterol từ acetate (muối axit axetic với kiềm) ngoại trừ loài giáp xác (Teshima Kanazawa, 1971) Do cholestetol thức ăn có vai trị quan trọng tăng trưởng, tồn lột vỏ lồi giáp xác Bổ sung cholesterol vào thức ăn khơng thúc đẩy tăng trưởng, gia tăng tần suất lột xác, nâng cao tỉ lệ sống mà nâng cao hàm lượng lipid tích trữ, nồng độ ecdysterone hoạt động enzymes hệ thống miễn dịch cua biển giai đoạn lột tiền lột xác (intermoult) (Tao ctv., 2014) Ecdysteroid hormone kích thích chu kỳ lột xác tác động việc chuyển từ giai đoạn trung gian đến giai đoạn tiền lột xác (Skinner, 1985) Hàm lượng ecdysteroid gia tăng giai đoạn tiền lột xác premolt (Soumoff Skinner, 1983) Do đó, thúc đẩy q trình lột xác cách sử dụng hormone ecdysteroid rút ngắn thời gian lột xác Một số nghiên cứu thời gian lột xác số loài giáp xác rút ngắn cách tiêm cho ăn với phytoecdysone thu từ chiết xuất thực vật, loài V glabrata (Hutacharoen ctv., 1989; Putchakarn, 1991) Những tác động ecdysteroids ngoại sinh nghiên cứu nhiều loài Nhiều nghiên cứu báo cáo phytoecdysteroids khả đóng vai trị quan trọng ni trồng nhiều lồi thủy sản (Hutacharoen et al., 1989; Putchakarn, 1991; Cho Itami, 2004) Về bản, ecdysteroid diện mức thấp (5 ng/ml) giai đoạn lột trung gian (intermolt) tăng rõ rệt giai đoạn tiền lộc xác premolt (44 ng/ml) nơi mà kích thích điều phối integumental dẫn đến lột xác (Soumoff Skinner, 1983) Kết nghiên cứu Sorach ctv., 2013 cho thấy phytoecdysone hiệu để kích thích lột xác P pelagicus với chi phí thấp Tác giả nghiên cứu ảnh hưởng phytoecdysone cho thấy chu kỳ lột vỏ ghẹ xanh giảm đáng kể tiêm hormone cho ghẹ với liều 0,4-1 µg/g trọng lượng thân Hàm lượng phytoecdysone khác cho ảnh hưởng khác lên giai đoạn lột xác cụ thể Những phát nghiên cứu rõ ràng chứng minh liều tiêm phytoecdysone chiết xuất từ V glabrataand cho cua P pelagicus giai đoạn B, C2, D1 làm giảm đáng kể thời gian lột xác Tác giả lưu ý thời điểm tiêm hormone có ý nghĩa quan trọng Đối với cua biển (Scylla sp.), có nhiều cơng trình nghiên cứu nuôi cua biển cua biển lột vỏ (Michel J., 1997; Allan, G., Fielder, D., 2003; Hải ctv., 2006; Holme, 2008; Ngọc N.T.B 2014) Nhu cầu dinh dưỡng thức ăn cho cua lột dựa nghiên cứu Richardson, Ketut Thạch Úc, Indonesia Việt Nam cho cua nuôi điều kiện phịng thí nghiệm (FIS/2000/065) Thức ăn cho cua lột xây dựng dựa nghiên cứu phần ăn cho tôm hùm Panulirus ornatus (Smith ctv., 2005) Tuy nhiên chưa có nhiều cơng bố xây dựng cơng thức thức ăn sử dụng chất kích thích lột vỏ cho cua Bên cạnh đó, dù có nhiều nghiên cứu dinh dưỡng cho cua nuôi với kết nhiều bàn cãi (Phương, 2008; Hải ctv., 2006) tính chất vật lý thức ăn kích cỡ viên, hình dạng độ cứng viên thức ăn thực phù hợp cho cua vấn đề chưa quan tâm nghiên cứu Việc thiếu loại thức ăn với chi phí hiệu quả, có khả kích thích cua lột hàng loạt hạn chế khả mở rộng vùng nuôi cua hạn chế nỗ lực để phát triển kỹ thuật nuôi Do việc nghiên cứu nâng cao hiệu suất lột vỏ tỷ lệ lột vỏ đồng loạt cần thiết, đặc biệt việc tạo thức ăn có khả kích lột vỏ đồng loạt giúp người nuôi chủ động quản lý, giảm thiểu công lao động, hiệu cao, tăng suất, tiến tới cơng nghiệp hố, chun mơn hố nghề ni cua lột TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ 13 - THÁNG 6/2019 97 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Vật liệu 2.1.1 Cua Cua dùng cho thí nghiệm gồm 350 cua khỏe mạnh, chân nguyên, với trọng lượng ban đầu 30 ± 10 g/con lựa chọn từ trại giống xã Lý Nhơn, huyện Cần Giờ, Tp.HCM đưa dưỡng thời gian tuần để làm quen với môi trường trước đưa vào ni thử nghiệm thức 2.1.2 Thức ăn ni cua gồm cá thức ăn D1, D2, D3 có chứa hormone kích thích lột vỏ (ecdysone) với nồng độ từ 0,3 (EDS: 0,3), 0,5 (EDS: 0,5), 0,7 (EDS: 0,7) μg/g trọng lượng cua thức ăn D4 có chứa 0,5% cholesterol (CHO) Ngồi cịn có nghiệm thức thức ăn cá tạp (D0) để đánh giá tỷ lệ hiệu suất lột xác cua so với việc bổ sung ecdysone cholesterol Thành phần nguyên liệu tỷ lệ sử dụng để chế biến thức ăn thí nghiệm tính tốn dựa phần mềm BESTMIX version 3.33 Công thức loại thức ăn viên thí nghiệm trình bày Bảng Các loại thức ăn ni cua thí nghiệm bao Bảng Cơng thức thức ăn cho cua ni thí nghiệm Thành phần (%) Nguyên liệu Bột cá 65 CP a Khô đậu nành b Bột mì c Bột gan mực d Gluten bột mì e Dầu mực f Dầu cá g Lecithin h Mono calcium phosphate i 20-Beta-Hydroxyecdysterone j Cholesterol k Premix vitamin m Premix khoáng n Stay C 35% o Choline chloride 60% p Chống mốc q D1 (EDS 0,3) D2 (EDS 0,5) D3 (EDS 0,7) D4 (CHO) 36,00 20,00 26,35 5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 1,00 0,3 μg 0,30 0,30 0,25 0,20 0,10 36,00 20,00 26,35 5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 1,00 0,5 μg 0,30 0,30 0,25 0,20 0,10 36,00 20,00 26,35 5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 1,00 0,7 μg 0,30 0,30 0,25 0,20 0,10 36,00 20,00 25,85 5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 1,00 0,50 0,30 0,30 0,25 0,20 0,10 Minh Tâm, Kiên Giang, Việt Nam U.S.A Soybean Meal, The Scoular Company, Hoa Kỳ c Uniflour, Uni President Việt Nam Co., Ltd d Squid Liver Powder, Hana Industrial Co., Ltd, Hàn Quốc e Vital Wheat Gluten, Anhui Ante Co., Ltd, Trung Quốc f Squid Liver Oil, Gem Corporation Co., Ltd, Hàn Quốc g Chilean Stabilized Salmon Fishoil, Pesquera Pacific Star S.A, Chile h Soy Lecithin AGD, Aceitera General Deheza, Argentina i Mono calcium phosphate, Kunming chuan Jin Nuo Chemical Co., Ltd, Trung Quốc j Ecdysone, Shaanxi Yuantai Biological Technology Co., Ltd, Trung Quốc k Cholesterol, N & R Industries, Inc., Trung Quốc a b 98 SH_Vitamin 0,3%, Provimi, Việt Nam Thành phần/kg: Vitamin A 2.666.667 IU; Vitamin B1 13.334 mg; Vitamin B2 11.667mg; Vitamin B6 13.334 mg; Vitamin C Monophosphate 66.667 mg; Vitamin D3 1.000.000 IU; Vitamin B12 6.700 mcg; Vitamin E 33.334 mg; Vitamin K3 6.667 mg; Axit Folic 1.667 mg; Biotin 334.000 mcg; D-Caplan 40.000 mg; Inositol 90.000 mg; Niacin 23.334 mg n SH_Mineral 0,3%, Provimi, Việt Nam Thành phần/kg: ZnO 33.340 mg; FeSO4.H2O 16.670 – 36.674 mg; CuSO4.5H2O 16.670 – 18.337 mg; MnO 6.000 – 6.600 mg; CoCO3 1.340 – 1.474 mg; Ca(IO3)2.H2O 335 – 369 mg; Na2SeO3 135 – 149 mg o Choline Chloride 60%, Shandong Aocter Chemical Co., Ltd, Trung Quốc p Rovimix stay – C 35%, DSM Vitamins Co., Ltd q Micofung, Dex Ibérica, S.A, Tây Ban Nha m TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ 13 - THÁNG 6/2019 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II Các loại thức ăn sản xuất hệ thống ép đùn tạo viên chìm, có kích thước viên thức ăn mm, độ bền nước giờ, có mùi hấp dẫn phù hợp với thói quen tập tính ăn cua thương phẩm Mẫu thức ăn phân tích thành phần dinh dưỡng (ẩm, protein, lipid, xơ, tro, canxi, phosphorus axit béo thành phần) Thức ăn bảo quản túi nilon hai lớp, để nơi khô thống mát nhằm chống mốc, trùng ảnh hưởng đến chất lượng Riêng thức ăn cá tạp (được lấy mẫu đem phơi khô nhằm xác định hệ số quy đổi trọng lượng tươi-khô), chọn loại cá cơm đem rửa qua nước nhiều lần sau cắt nhỏ cho vào túi nilon bảo quản tủ đông cho ăn dần 2.2 Bố trí thí nghiệm chăm sóc quản lý Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên với lần lặp lại, thể Bảng Hệ thống bể nuôi thể Hình Bảng Bố trí thí nghiệm đánh giá hiệu bổ sung hormone kích thích lột vỏ TT Nghiệm thức D0 Cá tạp xay 404 – 406 – 411 D1 Thức ăn viên chứa 0,3 μg/g ecdysone 402 – 408 – 414 D2 Thức ăn viên chứa 0,5 μg/g ecdysone 401 – 407 – 410 D3 Thức ăn viên chứa 0,7 μg/g ecdysone 403 – 409 – 415 D4 Mô tả thức ăn thí nghiệm Thức ăn viên cholesterol D4 Thức ănchứa viên chứa cholesterol Ký hiệu bể nuôi 405 – 412 – 416 405 – 412 – 416 Hệ thống bể ni cua bố trí thí nghiệm Hình Hệ Hình thống bể ni cua bố trí thí nghiệm Sau thời gian dưỡng, cua giống (35,0 ± 1,4 g/con) lựa chọn ngẫu nhiên cho vào giỏ có gắn nắp (1 con/giỏ) sau chuyển vào bể nuôi với mật độ 10 con/bể 300L Sau thời gian dưỡng, cua giống (35,0 trì hàm lượng oxy hịa tan ln đạt mức ≥ nước (Hình 1) Hệ thống nuôi thử nghiệm bao gồm 15 bể composite thể tích 500L, hình trịn (D ± 1,4 g/con) lựa= 1,2m) chọn ngẫu nhiên cho vào 4,0 mg/L Nước ni cua có độ mặn từ 10-15‰, hệ thống bể dự trữ nước nuôi độ mặn, đảm bảo lượng nước ổn định xuyên giỏ có gắn nắp (1 chuyển pha suốt con/giỏ) trình ni, sau thay vàđó cấp nước Tất bể ni đượctừ lắpnước hệ thốngbiển sục khí vùng nhằm Vũng Tàu nước trì hàm lượng oxy hịa tan đạt mức ≥ 4,0 mg/L Nước nuôi cua có độ mặn từ 10-15‰, vào bể ni với mật độ 10 con/bể 300L nước thủy cục (độ mặn nước nuôi tương đương từ nước biển vùng Vũng Tàu nước thủy cục (độ mặn nước nuôi tương đương (Hình 1) Hệ thống niphathử nghiệm bao gồm với độ mặn nơi ương nuôi cua giống) với độ mặn nơi ương nuôi cua giống) 15 bể composite thể tíchCho 500L, hình trịn (D = cua ăn cua ăn ngày lần vào lúc sáng 5Cho chiều với lượng thức ăn ngày từ 3-5% lần vào lúc 1,2m) hệ thống bểlượng dựthân, trữtheo nước nuôi cùngxuyên thức trọng dõi kiểm tra thường ăn để điều chỉnh lượng sáng vàcác5 giỏ chiều với thức lượng thức ăn từ 3-5% ăn phù hợp cho lần ổn ăn tiếpđịnh theo Nghiệm thức sử dụng cá tạp, cua cho ăn theo trọng lượng độ mặn, đảm bảo lượng nước xuyên trọng lượng thân, theo dõi kiểm tra thường khô tương ứng với nghiệm thức sử dụng thức ăn viên Trong suốt thời gian ni thí suốt q trình ni, quy thay cấp nước Tất xuyên thức ăn giỏ để điều chỉnh lượng bể nuôi lắp hệ thống sục khí nhằm thức ăn phù hợp cho lần ăn Nghiệm TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ 13 - THÁNG 6/2019 99 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II thức sử dụng cá tạp, cua cho ăn theo trọng lượng quy khô tương ứng với nghiệm thức sử dụng thức ăn viên Trong suốt thời gian ni thí nghiệm, tiêu nước ni nhiệt độ, pH, oxy hồ tan theo dõi hàng ngày; độ mặn N-NH3 kiểm tra 01 lần/tuần để có phương án thay cấp nước nhằm đảm bảo mơi trường thích hợp cho cua nuôi Ghi nhận lượng thức ăn thừa hàng ngày số cua chết thời gian thí nghiệm 45 ngày Trong giai đoạn cua lột, quan sát cua giờ/lần, sau cua lột vỏ thu cua lột đem cân đo để phục vụ cho việc tính toán tỷ lệ tăng trưởng, tỷ lệ sống, tỷ lệ lột vỏ ngày, hiệu suất cua lột thời gian lột 2.3 Phương pháp kiểm tra, phân tích xử lý số liệu 2.3.1 Phân tích thức ăn Thức ăn đánh giá chất lượng, hàm lượng ẩm (%) theo phương pháp TCVN 4326:2001, protein thô (%) theo TCVN 43281:2007, lipit thô (%) theo Folch AOAC 920.39, tro (%) theo TCVN 4327-2007, xơ (%) theo TCVN 4329:2007, canxi (%) TCVN 15261:2007 phosphor TCVN 1525:2001 2.3.2 Kiểm tra thông số môi trường - Nhiệt độ ( C) pH: đo 02 lần/ngày (vào sáng chiều) pH meter hãng HANA o - Hàm lượng oxy hòa tan (mg/L): đo 01 lần/ ngày (vào 10 sáng) DO meter hãng HANA - Độ mặn (‰): đo 01 lần/tuần khúc xạ kế - Hàm lượng NH3-N (mg/L): đo 01 lần/tuần Test kit hãng SERA 2.3.3 Đánh giá tăng trọng, tỷ lệ sống tỷ lệ lột vỏ - Tăng trọng (WG): WG (%) = (Wf-Wi)/ Wi * 100 - Tỷ lệ sống (SR): SR (%) = Nf/Ni *100 - Tỷ lệ lột vỏ (MR): MR (%) = Nm/(Ni-Nd) * 100 Trong đó: Wi (g) trọng lượng cua ban đầu; Wf (g) trọng lượng cua lột; Nm tổng số lượng cua lột; Ni tổng số lượng cua bắt đầu; Nd tổng số cua chết; Nf tổng số lượng cua cuối 2.3.4 Phân tích số liệu Các số liệu ghi nhận bao gồm tỷ lệ tăng trưởng, tỷ lệ sống, tỷ lệ lột vỏ ngày, hiệu suất cua lột thời gian lột nhập tính tốn chương trình Excel Phân tích thống kê phương pháp ANOVA, sử dụng phép thử Duncan mức ý nghĩa (P