Nghiên cứu này đánh giá hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase của dịch chiết từ 7 loài rong nâu (Colpomenia sinuosa, Padina australis, Sargassum aquifolium, Sargassum mcclurei, Sargassum duplicatum, Sargassum polycystum và Sargassum swartzi). Kết quả nghiên cứu cho thấy tất cả các mẫu rong nghiên cứu đều có hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase, với giá trị IC50 dao động từ 154,27 đến 426,27 µg/mL. Mời các bạn tham khảo chi tiết nội dung bài viết này.
90 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Alpha-glucosidase inhibitory activity of some brown seaweeds collected in Nha Trang bay, Khanh Hoa province Han T Nguyen1∗ , Yen T P Nguyen2,3 , & Duong T H Ngo2 Faculty of Food Technology, Nha Trang University, Nha Trang, Vietnam Insitute of Biotechnology and Environment, Nha Trang University, Nha Trang, Vietnam Quality Management Department of Agriculture, Forestry and Fisheries, Lam Dong, Vietnam ARTICLE INFO ABSTRACT Research Paper Diabetes has become a global problem in recent years Inhibition of α-glucosidase is one of the effective approaches to control the postReceived: December 16, 2019 prandial blood gluccose and thereby mananging diabetes This study evaluated inhibitory activity of seven brown seaweed extracts (Colpomenia Revised: January 28, 2020 Accepted: February 25, 2020 sinuosa, Padina australis, Sargassum aquifolium, Sargassum mcclurei, Sargassum duplicatum, Sargassum polycystum Sargassum swartzi ) against α-glucosidase The results indicated that all seaweed extracts Keywords inhibited enzyme activity with the IC50 values ranging from 154.27 to 426.27 µg/mL The seaweed Sargassum mcclurei showed the highest α-glucosidase inhibitor α-glucosidase inhibitory activity The effects of extraction conditions Brown seaweeds and extraction solvent fractions on α-glucosidase inhibitory activity of Diabetic Sargassum mcclurei were investigated The suitable extraction conditions Extraction conditions were found to be the solid to liquid ratio (g/mL) of 1/40, the extraction Sargassum mcclurei time of 60 and the extraction temperature of 60o C The ethyl acetate extracted fraction showed the highest α-glucosidase inhibitory activity ∗ Corresponding author compared with other fractions Nguyen The Han Email: hannt@ntu.edu.vn Cited as: Nguyen, H T., Nguyen, Y T P., & Ngo, D T H (2020) Alpha-glucosidase inhibitory activity of some brown seaweeds collected in Nha Trang bay, Khanh Hoa province The Journal of Agriculture and Development 19(2), 90-98 Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 19(2) www.jad.hcmuaf.edu.vn 91 Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Hoạt tính ức chế enzyme alpha-glucosidase số loài rong nâu thu mẫu Vịnh Nha Trang, tỉnh Khánh Hòa Nguyễn Thế Hân1∗ , Nguyễn Thị Phương Yến2,3 & Ngơ Thị Hồi Dương2 Khoa Công Nghệ Thực Phẩm, Trường Đại Học Nha Trang, TP Nha Trang Viện Công Nghệ Sinh Học Môi Trường, Trường Đại Học Nha Trang, TP Nha Trang Chi Cục Quản Lý Chất Lượng Nông Lâm Sản Thủy Sản, Tỉnh Lâm Đồng THƠNG TIN BÀI BÁO TĨM TẮT Bài báo khoa học Trong năm gần đây, đái tháo đường trở thành vấn đề lớn toàn cầu Một cách hiệu để kiểm soát bệnh đái tháo đường ức chế hoạt động enzyme α-glucosidase Nghiên cứu Ngày nhận: 16/12/2019 Ngày chỉnh sửa: 28/01/2020 đánh giá hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase dịch chiết từ loài Ngày chấp nhận: 25/02/2020 rong nâu (Colpomenia sinuosa, Padina australis, Sargassum aquifolium, Sargassum mcclurei, Sargassum duplicatum, Sargassum polycystum Sargassum swartzi ) Kết nghiên cứu cho thấy tất mẫu rong Từ khóa nghiên cứu có hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase, với giá trị IC50 dao động từ 154,27 đến 426,27 µg/mL Dịch chiết rong Sargassum Bệnh đái tháo đường mcclurei có hoạt tính ức chế enzyme cao Ảnh hưởng điều Chất ức chế α-glucosidase kiện chiết phân đoạn dung mơi chiết đến hoạt tính ức chế enzyme Điều kiện chiết α-glucosidase rong Sargassum mcclurei nghiên cứu Điều kiện Rong nâu chiết thích hợp xác định sau: tỷ lệ nguyên liệu/dung môi chiết Sargassum mcclurei (g/mL) 1/40, thời gian chiết 60 phút, nhiệt độ chiết 60o C Trong phân đoạn dung môi chiết, phân đoạn dịch chiết ethyl acetate có hoạt ∗ Tác giả liên hệ tính ức chế enzyme mạnh Nguyễn Thế Hân Email: hannt@ntu.edu.vn Đặt Vấn Đề Đái tháo đường bệnh nguy hiểm trở thành vấn đề sức khỏe toàn cầu giai đoạn Người mắc bệnh đái tháo đường có hàm lượng đường glucose máu cao thời gian dài (Alberti & Zimmet, 1998) Bệnh đái tháo đường xảy tụy không sản xuất đủ insulin thể giảm đáp ứng với tác dụng insulin Theo tổ chức y tế giới, số người mắc đái tháo đường từ năm 2008 đến năm 2014 tăng từ 108 đến 422 triệu (Roglic, 2016) Theo dự báo, năm 2030 bệnh đái tháo đường đứng đầu bệnh gây tử vong giới Việt Nam nước có số người mắc đái tháo đường cao khu vực tây Thái Bình Dương với khoảng 3,5 triệu người năm 2015 Bệnh đái tháo đường gây nhiều biến chứng nguy hiểm bệnh tim mạch vành, tai biến mạch máu não, mù mắt, suy www.jad.hcmuaf.edu.vn thận liệt dương Theo thống kê, 90% bệnh nhân đái tháo đường thuộc type Tăng đường huyết sau bữa ăn vấn đề khó kiểm sốt đái tháo đường type mục tiêu kiểm soát bệnh (Chatterjee & ctv., 2017) Một phương pháp để kiểm soát đường huyết sau bữa ăn ức chế enzyme chuyển hóa carbohydrate α-amylase α-glucosidase Bên cạnh số loại thuốc ức chế enzyme α-glucosidase dạng tổng hợp sử dụng để điều trị đái tháo đường, gần nhiều nghiên cứu thực để tìm kiếm chất có nguồn gốc từ tự nhiên Vùng biển Khánh Hịa có ba ngành rong đỏ, rong lục rong nâu Trong đó, rong nâu phổ biến với nhiều lồi có sản lượng thu hoạch lớn Theo Titlyanov & ctv (2015), vịnh Nha Trang có 85 lồi rong nâu Rong nâu đánh giá có hoạt tính sinh học chống oxy hóa, kháng khuẩn, kháng tế bào ung thư Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 19(2) 92 thu nhận số thành phần có giá trị alginate, fucoidan, phlorotannin (Cuong & ctv., 2016) Tuy nhiên, đến nghiên cứu hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase lồi rong nâu cịn hạn chế Xuất phát từ vấn đề trên, nghiên cứu thực nhằm sàng lọc hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase số loài rong nâu thu hoạch vùng biển Khánh Hòa xác định điều kiện chiết thích hợp cho lồi rong tiềm Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh bao gồm: dung môi chiết 100% methanol, thời gian chiết 60 phút nhiệt độ chiết 60o C Các tỷ lệ NL/DM (g/mL) nghiên cứu gồm: 1/10, 1/20, 1/30, 1/40 1/50 Để nghiên cứu ảnh hưởng thời gian chiết, điều kiện chiết khác giữ cố định bao gồm: dung môi chiết 100% methanol, tỷ lệ NL/DM lựa chọn từ thí nghiệm trước nhiệt độ chiết 60o C Các thời gian chiết nghiên cứu gồm: 15, 30, 45, 60, 75 90 phút Để nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ chiết, điều kiện chiết khác giữ cố định bao gồm: dung môi chiết 100% methanol, tỷ lệ 2.1 Mẫu rong biển hóa chất NL/DM thời gian chiết lựa chọn từ thí nghiệm trước Các nhiệt độ chiết nghiên cứu Nghiên cứu sử dụng loài rong nâu: gồm: 30, 40, 50 60o C Colpomenia sinuosa, Padina australis, SargasTrong tất thí nghiệm điều kiện chiết, sum aquifolium, Sargassum mcclurei, Sargassum 10 g rong khô chiết với 100% methanol duplicatum, Sargassum polycystum, Sargassum điều kiện chiết thí nghiệm Sau trình chiết, swartzi Mẫu rong nguyên liệu thu hoạch hỗn hợp lọc giấy lọc Whatman No.40 khoảng thời gian từ tháng đến tháng để thu dịch chiết Dịch chiết cô quay chân năm 2017 khu vực biển gần bờ: Sông Lô, không nhiệt độ ≤ 60o C để loại hết dung mơi Hịn Chồng, Bãi Tiên thuộc vịnh Nha Trang, tỉnh Khánh Hòa Các mẫu rong định danh chiết đánh giá hoạt tính ức chế enzyme αphương pháp hình thái học ThS Đỗ Anh Duy glucosidase (Viện Nghiên cứu Hải sản, Hải Phòng) Vật Liệu Phương Pháp Nghiên Cứu 2.4 Tách phân đoạn Enzyme α-glucosidase từ nấm men chất p-nitrophenyl-α-D-glucopyranosid cung cấp Rong khô (50 g) chiết điều kiện cơng ty Sigma-Aldrich (Hoa Kỳ) Các dung chiết thích hợp xác định Tiếp theo, tiến môi methanol, n-hexan, ethyl acetate, butanol, hành loại dung môi dịch chiết thiết bị DMSO cung cấp công ty Merck (Đức) cô quay chân không Dịch chiết sau loại hết dung môi methanol tách phân đoạn sử dụng 2.2 Sàng lọc hoạt tính ức chế enzyme α- dung mơi có độ phân cực tăng dần bao gồm: glucosidase loài rong nâu n-hexane, ethyl acetate, butanol nước Dịch chiết sau đuổi dung mơi hịa vào 200 mL Kế thừa kết nghiên cứu trước (Kim & nước cất Hỗn hợp sau đổ vào bình tách lỏngctv., 2008; Kim & ctv., 2010), để sàng lọc hoạt lỏng (separatory funnel) Tiếp theo, lượng tính ức chế enzyme α-glucosidase lồi rong, 200 mL dung mơi n-hexane cho vào bình trình chiết thực sau: 10 g rong khô tách, lắc mạnh hỗn hợp dung môi thời gian chiết 100% methanol, tỷ lệ nguyên phút để đứng yên giá đỡ khoảng liệu/dung môi chiết (NL/DM) (w/v): 1/40, nhiệt thời gian 30 phút Sau đó, thu phân đoạn dịch độ chiết: 60o C thời gian chiết: 60 phút Sau chiết n-hexane cách mở van đáy thiết trình chiết, hỗn hợp lọc giấy Whatbị tách lỏng-lỏng Tiếp tục cho lượng thể man No.40 Dịch chiết quay chân khơng tích 200 mL vào bình tách lỏng - lỏng lặp lại nhiệt độ ≤ 60o C để loại hết dung môi chiết thao tác Quá trình thu phân đoạn đánh giá khả ức chế enzyme α-glucosidase dung môi n-hexane tiến hành đến quan sát phân đoạn dung môi không màu Phân 2.3 Ảnh hưởng điều kiện chiết đến hoạt đoạn dịch chiết n-hexane thu cách trộn tính ức chế enzyme α-glucosidase rong lại sau lần tách phân đoạn Quá trình tách Sargassum mcclurei phân đoạn dung môi ethyl acetate butanol tiến hành tương tự với n-hexane Cuối Để nghiên cứu ảnh hưởng tỷ lệ NL/DM thu phân đoạn dung môi chiết: nchiết, điều kiện chiết khác giữ cố định Tạp chí Nông nghiệp Phát triển 19(2) www.jad.hcmuaf.edu.vn 93 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Bảng Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase số lồi rong nâu STT a-e Loài rong Colpomenia sinuosa Padina australis Sargassum aquifolium Sargassum mcclurei Sargassumduplicatum Sargassum polycystum Sargassum swartzi Khả ức chế enzyme α-glucosidase (IC50 , µg/mL)* 426,27 ➧ 33,46d 361,64 ➧ 12,95e 314,09 ➧ 5,82d 154,27 ➧ 7,49a 190,20 ➧ 2,89b 261,32 ➧ 9,70c 278,85 ➧ 5,92c Các chữ khác cột khác có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) hexane, ethyl acetate, butanol nước Các phân đoạn dịch chiết đuổi hết dung môi thiết bị cô quay chân không Phân đoạn dung môi thu sau loại hết dung môi xác định khả ức chế enzyme α-glucosidase chiết/phân đoạn dịch chiết cho hoạt tính ức chế 50% (giá trị IC50 thấp, hoạt tính ức chế enzyme cao) 2.7 Phương pháp xử lý số liệu Tất thí nghiệm thực lần độc lập Kết thí nghiệm biểu diễn giá trị trung bình ➧ độ lệch chuẩn Giá trị Dịch chiết phân đoạn ethyl acetate trung bình phân tích ANOVA theo phép thử rong Sargassum mcclurei định tính Ducan, giá trị P < 0,05 khác có số nhóm chất bao gồm: phenolic, flavonoid, ter- ý nghĩa thống kê sử dụng phần mềm SPSS phiên penoid, carotenoid, saponin tannin Trong 16,0 thí nghiệm, cho 0,5 mL dịch chiết/phân đoạn dịch chiết vào ống nghiệm chứa 1,5 mL thuốc thử Tiếp Kết Quả Thảo Luận theo, quan sát màu dung dịch để nhận biết nhóm chất (Yadav & ctv., 2014) 3.1 Khả ức chế enzyme α-glucosidase 2.5 Định tính số thành phần dịch chiết số loài rong nâu 2.6 Xác định hoạt tính ức chế enzyme Kết nghiên cứu hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase lồi rong nghiên cứu thể Bảng Tất lồi rong nâu sử dụng có hoạt tính ức chế enzyme αglucosidase, với giá trị IC50 Colpomenia sinuosa, Padina australis, Sargassum aquifolium, Sargassum mcclurei, Sargassum duplicatum, Sargassum polycystum Sargassum swartzi 426,27; 361,64; 314,09; 154,27; 190,20; 261,32 278,85 µg/mL Như vậy, lồi rong Sargassum mcclurei có hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase mạnh loài rong nghiên cứu Theo Nguyen & ctv (2018), giá trị IC50 loài rong nâu Turbinaria ornate, Sargassum oligocystem Sargassum microcystem thu mẫu vùng biển Khánh Hòa dao động từ 530 đến 2.890 µg/mL Như vậy, lồi rong nâu thu hoạch vùng Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase (%) = biển Khánh Hịa có hoạt tính ức chế enzyme α[(A0 – A1 )/A0 ] Ư 100; đó: glucosidase khác đáng kể Sự khác A1 : Độ hấp thụ quang mẫu thí nghiệm hoạt tính lồi rong thành phần A0 : Độ hấp thụ quang mẫu trắng hàm lượng chất có hoạt tính sinh học Sự Giá trị IC50 (µg/mL) nồng độ dịch khác cịn thời điểm thu hoạch, Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase xác định theo phương pháp Kim & ctv (2008) Cho 0,1 mL mẫu (hòa tan dung môi dimethyl sulfoside – DMSO) vào hỗn hợp gồm 0,1 mL enzyme (0,25 U/mL) 2,2 mL đệm phosphate (0,01 M; pH 7.0) Hỗn hợp lắc ủ 37o C phút Tiếp theo, 0,1 mL dung dịch chất chất p-nitrophenyl-α-Dglucopyranosid (3 mM) thêm vào hỗn hợp để thực trình phản ứng Hỗn hợp giữ nhiệt độ 37o C 30 phút Để kết thúc phản ứng, cho 1,5 mL dung dịch Na2 CO3 (0,1 M) vào hỗn hợp đo độ hấp thụ quang học bước sóng 405 nm Hoạt tính ức chế enzyme αglucosidase tính theo cơng thức: www.jad.hcmuaf.edu.vn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 19(2) 94 Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Hình Ảnh hưởng tỷ lệ NL/DM (g/mL) đến hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase dịch chiết từ rong Sargassum mcclurei Các chữ khác khác có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) phương pháp thu hoạch, xử lý bảo quản mẫu rong Dựa vào kết nghiên cứu, loài rong Sargassum mcclurei lựa chọn để thực nghiên cứu dung mơi dẫn tới thời gian lọc sau trình chiết kéo dài, dẫn đến biến tính chất có hoạt tính sinh học làm giảm hoạt tính Việc sử dụng nhiều dung mơi gây lãng phí gánh nặng môi trường Như vậy, 3.2 Ảnh hưởng điều kiện chiết đến hoạt tỷ lệ NL/DM 1/40 (g/mL) xác định tính ức chế enzyme α-glucosidase rong tỷ lệ thích hợp để chiết chất có hoạt tính Sargassum mcclurei ức chế enzyme α-glucosidase từ rong Sargassum mcclurei 3.2.1 Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/dung môi 3.2.2 Ảnh hưởng thời gian chiết Kết nghiên cứu ảnh hưởng tỷ lệ NL/DM đến khả ức chế enzyme αglucosidase rong Sargassum mcclurei thể Hình Hoạt tính ức chế enzyme tăng theo chiều giảm tỷ lệ NL/DM khoảng từ 1/10 đến 1/40 (g/mL) Khi tiếp tục tăng tỷ lệ lên 1/50 (g/mL) hoạt tính ức chế enzyme không tiếp tục tăng Cụ thể, dịch chiết thu nhận tỷ lệ NL/DM 1/10, 1/20, 1/30, 1/40 1/50 41,33%; 51,12%; 58,94%; 67,03% 69,81% Kết phù hợp với lý thuyết trình chiết Khi tỷ lệ NL/DM tăng đến giới hạn định, trình chiết bão hịa, hiệu chiết chất có hoạt tính sinh học khơng tiếp tục tăng Ngồi ra, sử dụng lượng lớn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 19(2) Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian chiết đến hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase rong Sargassum mcclurei thể Hình Hoạt tính ức chế enzyme tăng dần theo thời gian chiết từ 15 phút đến 60 phút Cụ thể, thời gian chiết 15 phút khả ức chế 19,47%; tăng thời gian chiết lên 30 phút khả ức chế enzyme tăng lên 27,11% đạt 41,24 51,38% thời gian 45 60 phút Tuy nhiên, tiếp tục tăng thời gian chiết lên 75 phút hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase dịch chiết rong Sargassum mcclurei không tiếp tục tăng (P > 0,05) có xu hướng giảm tăng thời gian chiết lên 90 phút Kết phù hợp với số nghiên www.jad.hcmuaf.edu.vn Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh 95 Hình Ảnh hưởng thời gian chiết đến hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase dịch chiết từ rong Sargassum mcclurei Các chữ khác khác có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) cứu đối tượng tương tự Theo Nguyen & ctv (2018), hoạt tính ức chế enzyme αglucosidase rong nâu Turbinaria ornate tăng dần theo chiều tăng thời gian chiết từ 15 đến 75 phút giảm tiếp tục tăng thời gian chiết lên 90 phút Như vậy, số chất có hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase có rong Sargassum mcclurei khơng bền điều kiện nhiệt độ cao Một số nghiên cứu polyphenol chất ức chế enzyme α-glucosidase phổ biến rong biển Các hợp chất polyphenol có hoạt tính ức chế α-glucosidase số lồi rong nâu chứng minh không bền nhiệt độ chiết cao (Yuan & ctv., 2018) Dựa vào kết nghiên cứu, 60 phút lựa chọn thời gian thích hợp để chiết chất có hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase từ rong Sargassum mcclurei 3.2.3 Ảnh hưởng nhiệt độ chiết Sargassum mcclurei thể Hình Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase tăng theo chiều tăng nhiệt độ chiết từ 30 đến 60o C; hoạt tính ức chế dịch chiết nhiệt độ 30, 40,50 60o C 35,24; 45,62; 50,29 56,95% Như vậy, phạm vi nghiên cứu, 60o C nhiệt độ thích hợp để thu nhận dịch chiết có hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase cao Sự ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến hoạt tính sinh học từ nguyên liệu tự nhiên phụ thuộc vào đặc tính chất cần chiết, đặc điểm nguyên liệu phương pháp chiết sử dụng Nhiệt độ thích hợp để thu nhận dịch chiết có hoạt tính ức chế enzyme αglucosidase cao từ rong biển khác theo loài rong Theo Catarino & ctv (2019), hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase dịch chiết từ rong nâu Fucus vesiculosus cao chiết nhiệt độ thấp (từ 17 đến 25o C) so với nhiệt độ cao (từ 37 50o C) Nhiệt độ chiết thích hợp để thu nhận dịch chiết có hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase từ lồi rong 20o C Ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến hoạt tính Theo kết thí nghiệm ức chế enzyme α-glucosidase dịch chiết rong nhận thấy, điều kiện chiết cho www.jad.hcmuaf.edu.vn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 19(2) 96 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Hình Ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase dịch chiết từ rong Sargassum mcclurei Các chữ khác khác có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) kết không đồng Ví dụ, dịch chiết thu nhận điều kiện chiết (dung môi chiết: methanol, tỉ lệ NL/DM: 1/40 (g/mL), thời gian: 60 phút, nhiệt độ: 60o C) cho hoạt tính ức chế enzyme khác Cụ thể, hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase dịch chiết Hình (ảnh hưởng tỷ lệ NL/DM) 67,03%; đó, Hình (ảnh hưởng thời gian chiết) 51,38% Hình (ảnh hưởng nhiệt độ chiết) 56,95% Sự khác kết thí nghiệm mẫu rong sử dụng nghiên cứu không đồng tính chất vật lý thành phần hóa học Do đó, nghiên cứu cần đảm bảo tính đồng nguyên liệu rong đánh giá ảnh hưởng điều kiện chiết tanol nước) sử dụng để tách chiết chất có hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase từ rong Sargassum mcclurei (Hình 4) Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase phân đoạn ethyl acetate cao nhất, phân đoạn butanol, n-hexane nước Cụ thể, nồng độ 300 µg/mL, phân đoạn ethyl acetate, butanol, n-hexane nước ức chế enzyme α-glucosidase 83,63; 38,79; 26,12 16,57% Giá trị IC50 phân đoạn dung môi ethyl acetate, butanol, n-hexane nước lần lươt 35,76; 384,97; 568,58 863,69 µg/mL Phân đoạn dung mơi chiết ethyl acetate thường sử dụng để tách chiết sơ chất có hoạt tính sinh học từ ngun liệu tự nhiên Phân đoạn ethyl acetate từ năm loài rong nâu thu hoạch vùng biển Indonesia có hoạt tính ức chế en3.3 Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase zyme α-glucosidase cao phân đoạn dung môi phân đoạn dịch chiết từ rong Sarchiết lại (ethanol, n-hexane nước) (Firgassum mcclurei daus & Prihanto, 2014) Phân đoạn ethyl acetate từ dịch chiết rong nâu Fucus vesiculosus có hoạt Các hợp chất có hoạt tính sinh học rong tính ức chế enzyme α-glucosidase mạnh nhiều biển có độ phân cực khả hịa tan khác so với phân đoạn lại (n-hexane nước) Trong nghiên cứu này, dung môi có độ (Kim & ctv., 2008; Catarino & ctv., 2019) Phân phân cực tăng dần (n-hexane, ethyl acetate, buđoạn ethyl acetate rong Sargassum mcclurei Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 19(2) www.jad.hcmuaf.edu.vn 97 Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Hình Hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase phân đoạn dung môi chiết từ rong Sargassum mcclurei cho hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase cao nhất, cho thấy nhóm chất có hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase thuộc nhóm chất có độ phân cực thấp trung bình polyphenol, phlorotannin flavonoid tố môi trường sống rong Nghiên cứu số thành phần có ba lồi rong Sargassum angustifolium, Sargassum oligocystum Sargassum boveanum thu hoạch vùng biển Ấn Độ, cho thấy ba lồi rong có tannin, alkaloid, saponin, flavonoid (Mehdinezhad & ctv., 2016) 3.4 Nhận biết số nhóm chất có dịch Các nhóm chất phenolic, flavonoid, terpenoid chiết rong Sargassum mcclurei tannin phân đoạn dịch chiết ethyl acetate chứng minh thành phần có hoạt Kết định tính số thành phần phổ biến tính ức chế enzyme α-glucosidase rong biển có dịch chiết phân đoạn dịch chiết từ (Kim & ctv., 2008; Firdaus & Prihanto, 2014) rong nâu Sargassum mcclurei thể Bảng Dịch chiết rong Sargassum mcclurei có Kết Luận chứa tất thành phân nghiên cứu: alkaloid, phenolic, flavonoid, carotenoid, terpenoid, Tất loài rong nâu thu hoạch vùng saponin tannin Trong đó, phân đoạn ethyl biển Khánh Hịa có khả ức chế enzyme acetate có xuất bốn nhóm chất: α-glucosidase; đó, Sargassum mcclurei có phenolic, flavonoid, terpenoid tannin Kết hoạt tính ức chế enzyme cao Nghiên cứu nghiên cứu phù hợp với số nghiên xác định điều kiện chiết thích hợp cho trước đối tượng rong nâu Thành rong Sargassum mcclurei Phân đoạn ethyl acphần nhóm chất có rong biển phụ thuộc etate có hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase vào điều kiện tách chiết tác động yếu cao phân dung môi nghiên cứu www.jad.hcmuaf.edu.vn Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 19(2) 98 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Bảng Định tính số nhóm chất có dịch chiết phân đoạn dịch chiết từ rong Sargassum mcclurei Nhóm chất Alkaloid Phenolic Flavonoid Terpenoid Carotenoid Tannin Saponin Dịch chiết methanol +* + + + + + + Phân đoạn ethyl acetate -** + + + + - *“+”: Có xuất hiện; **“-”: Khơng xuất Một số nhóm chất phân đoạn bao gồm: phenolic, flavonoid, terpenoid tannin Nghiên cứu cần tinh hợp chất có hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase từ rong Sargassum mcclurei thử nghiệm hoạt tính kháng đái tháo đường lồi rong mơ hình in vivo Lời Cảm Ơn Nghiên cứu tài trợ Quỹ Phát triển khoa học công nghệ Quốc gia (NAFOSTED) đề tài mã số 106-NN.05- 2016.73 Tài Liệu Tham Khảo (References) Cuong, D X., Boi, V N., & Van, T T T (2016) Effect of storage time on phlorotannin content and antioxidant activity of six Sargassum species from Nhatrang Bay, Vietnam Journal of Applied Phycology 28(1), 567-572 Firdaus, M., & Prihanto, A A (2014) α-Amylase and αglucosidase inhibition by brown seaweed (Sargassum sp) extracts Research Journal of Life Science 1(1), 06-11 Kim, K Y., Nam, K A., Kurihara, H., & Kim, S M (2008) Potent α-glucosidase inhibitors purified from the red alga Grateloupia elliptica Phytochemistry 69(16), 2820-2825 Kim, K Y., Nguyen, T H., Kurihara, H., & Kim, S M (2010) α-Glucosidase inhibitory activity of bromophenol purified from the red alga Polyopes lancifolia Journal of Food Science 75(5), 145-150 Mehdinezhad, N., Ghannadi, A., & Yegdaneh, A (2016) Phytochemical and biological evaluation of some Sargassum species from Persian Gulf Research in Pharmaceutical Sciences 11(3), 243-249 Nguyen, T H., Nguyen, T K N., & Nguyen, V M (2018) Evaluation of α-glucosidase inhibitory activity of some selected seaweed extracts Journal of Fisheries Science and Technology 1, 24-33 Roglic, G (2016) WHO global report on diabetes: A summary International Journal of Noncommunicable Diseases 1(1), 3-8 Titlyanov, E A., Titlyanova, T V., & Belous, O S (2015) Checklist of the marine flora of Nha Trang Bay (Vietnam, South China Sea) and decadal changes in the species diversity composition between 1953 and 2010 Botanica Marina 58(5), 367-377 Alberti, K G M M., & Zimmet, P Z (1998) Definition, diagnosis and classification of diabetes mellitus and its complications Part 1: diagnosis and classification of diabetes mellitus Provisional report of a WHO consultation Diabetic Medicine 15(7), 539-553 Yadav, M., Chatterji, S., Gupta, S K., & Watal, G (2014) Preliminary phytochemical screening of six medicinal plants used in traditional medicine International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences 6(5), 539-542 Catarino, M D., Silva, A., Mateus, N., & Cardoso, S M (2019) Optimization of phlorotannins extraction from fucus vesiculosus and evaluation of their potential to prevent metabolic disorders Marine Drugs 17(3), 162 Yuan, Y., Zhang, J., Fan, J., Clark, J., Shen, P., Li, Y., & Zhang, C (2018) Microwave assisted extraction of phenolic compounds from four economic brown macroalgae species and evaluation of their antioxidant activities and inhibitory effects on α-amylase, αglucosidase, pancreatic lipase and tyrosinase Food Research International 113, 288-297 Chatterjee, S., Khunti, K., & Davies, M J (2017) Type diabetes The Lancet 389(10085), 2239-2251 Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển 19(2) www.jad.hcmuaf.edu.vn ... 3.1 Khả ức chế enzyme α-glucosidase 2.5 Định tính số thành phần dịch chiết số lồi rong nâu 2.6 Xác định hoạt tính ức chế enzyme Kết nghiên cứu hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase loài rong nghiên... ngành rong đỏ, rong lục rong nâu Trong đó, rong nâu phổ biến với nhiều lồi có sản lượng thu hoạch lớn Theo Titlyanov & ctv (2015), vịnh Nha Trang có 85 loài rong nâu Rong nâu đánh giá có hoạt tính. ..91 Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Hoạt tính ức chế enzyme alpha-glucosidase số lồi rong nâu thu mẫu Vịnh Nha Trang, tỉnh Khánh Hòa Nguyễn Thế Hân1∗ , Nguyễn Thị Phương Yến2,3 &