Phân Tích Đa Dạng Sinh Học Một Số Loài Lan Rừng Thuộc Chi Dendrobium Bằng Kỹ Thuật RAPD

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NC& PT CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC PHÂN TÍCH ĐA DẠNG SINH HỌC MỘT SỐ LỒI LAN RỪNG THUỘC CHI Dendrobium BẰNG KỸ THUẬT RAPD Cán Bộ Hướng Dẫn: NGUYỄN THỊ PHA Viện NC& PT Công Nghệ Sinh Học Sinh Viên Thực Hiện: Nguyễn Thị Hoàng Nhung MSSV: 3064406 LỚP : CNSH - K32 Cần Thơ, 5/2010 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN Nguyễn Thị Pha Nguyễn Thị Hoàng Nhung DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày tháng năm 2010 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (ký tên) LỜI CẢM TẠ Vậy bốn tháng thực đề tài luận văn kết thúc, để có kết hơm thân em nỗ lực nhiều nhờ giúp đỡ, động viên Thầy Cơ, Gia đình Bạn bè Lời em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến cô hướng dẫn Nguyễn Thị Pha, cô cố vấn Trần Thị Xuân Mai, Nguyễn Thị Liên, tận tình hướng dẫn, bảo, lắng nghe thắc mắc, khó khăn em, ln giúp em tìm cách giải vấn đề tạo điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành đề tài Em xin cảm ơn Thầy, Cô Viện NC & PT Công Nghệ Sinh Học, Trường Đại Học Cần Thơ, tận tình giảng dạy, truyền thụ kiến thức cho em suốt thời gian học tập Xin cám ơn Anh, Chị thuộc phịng thí nghiệm Sinh Học Phân Tử nhiệt tình giúp đỡ em Xin cám ơn bạn lớp Công Nghệ Sinh Học K32, bạn bên cạnh lúc khó khăn qng thời gian làm đề tài suốt năm đại học Con gửi đến Ba Mẹ lịng biết ơn vơ vàng, Ba Mẹ cho nhiều, Ba Mẹ ni nấng với tất tình u thương hy vọng Cần Thơ, ngày tháng năm 2010 Nguyễn Thị Hoàng Nhung Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32-2010 Trường ĐHCT TĨM TẮT Lan loài hoa ưa chuộng thị trường hoa nước giới Lan rừng có hoa đẹp, hương thơm, kiểu dáng phong phú trang nhã người yêu hoa đánh giá cao, nguồn gen lan rừng xem nguồn nguyên liệu vô quý giá lai tạo Tuy nhiên, nước ta, lan rừng bên bờ suy kiệt nạn khai thác bừa bãi, có nhiều lồi bị tuyệt chủng Với đề tài : “Phân Tích Đa Dạng Sinh Học Một Số Loài Lan Rừng Thuộc Chi Dendrobium Bằng Kỹ Thuật RAPD” nhằm mục tiêu đánh giá đa dạng di truyền số loài lan rừng góp phần vào cơng tác bảo tồn nhân giống, lai tạo, loài lan rừng Việt Nam Đề tài thực loài lan rừng quỹ thời gian kinh phí có hạn, nhiên kết đánh giá sơ kiểu hình đồng thời phân nhóm loài lan rừng loài lan lai dựa phân tích kiểu gen kỹ thuật RAPD DNA ly trích theo phương pháp có sử dụng CTAB, điện di kiểm tra DNA gel có nồng độ 0.8% Phản ứng PCR-RAPD tiến hành với 12 primer, tất cho tính đa hình cao (gần 100% band đa hình) Các band thu cho điểm theo hệ nhị phân để phân nhóm di truyền Kết phân tích 12 lồi lan Dendrobium chia làm nhóm với hệ số tương đồng khoảng 58-95% Từ khóa : RAPD, DNA, primer, band, lan rừng, đa dạng di truyền Chuyên ngành Công Nghệ Sinh Học i Viện NC & PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32-2010 Trường ĐHCT MỤC LỤC Trang PHẦN KÝ DUYỆT LỜI CẢM TẠ TÓM TẮT .i MỤC LỤC ii DANH SÁCH BẢNG iv DANH SÁCH HÌNH v CÁC TỪ VIẾT TẮT vii CHƯƠNG : ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG : LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 PHÂN LOẠI VÀ ĐẶC ĐIỂM CHUNG CỦA HỌ LAN (Orchidaceae) 2.1.1 Cấu tạo quan sinh dưỡng .2 2.1.1.1 Đặc điểm thân a Nhóm lan đa thân .2 b Nhóm lan đơn thân 2.1.1.2 Đặc điểm .4 2.1.1.3 Đặc điểm cấu tạo rễ 2.1.2 Cấu tạo quan sinh sản 2.2 ĐẶC ĐIỂM RIÊNG VÀ ĐIỀU KIỆN NUÔI DƯỠNG CỦA CHI Dendrobium 2.2.1 Một số đặc điểm bật chi Dendrobium .6 2.2.2 Điều kiện nuôi dưỡng chi Dendrobium .7 2.2.2.1 Nhiệt độ, ẩm độ, nước 2.2.2.2 Ánh sáng .8 2.2.2.3 Phân bón 2.2.2.4 Cấu tạo giá thể, thay chậu 2.2.2.5 Mùa nghỉ 2.3 PHƯƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG SINH HỌC Chuyên ngành Công Nghệ Sinh Học ii Viện NC & PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32-2010 Trường ĐHCT 2.3.1 Phản ứng chuỗi PCR (Polymerase Chain Reaction) 2.3.2 Phương pháp điện di .11 2.3.2.1 Gel agarose .12 2.3.2.2 Gel polyarylamide .12 2.3.3 Kỹ thuật RAPD- Amplification of Random Polymorphic DNA 12 2.4 PHẦN MỀM NTSYSpc 2.1 14 CHƯƠNG : PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .15 3.1 PHƯƠNG TIỆN 15 3.1.1 Thiết bị, dụng cụ .15 3.1.2 Hóa chất 15 3.1.3 Vật liệu .16 3.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .16 3.2.1 Thu thập mẫu 16 3.2.2 Đánh giá sơ kiểu hình 16 3.2.3 Đánh giá đa dạng kiểu gen kỹ thuật RAPD .17 3.2.3.1 Trích DNA mẫu 17 3.2.3.2 Điện di kiểm tra độ tinh mẫu 18 3.2.3.3 Thực phản ứng PCR 18 3.2.4 Phân tích kết RAPD phần mềm tin sinh học NTSYSpc 2.1 19 CHƯƠNG : KẾT QUẢ - THẢO LUẬN 21 4.1 ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI 21 4.2 PHÂN TÍCH ĐA DẠNG DI TRUYỀN KIỂU GEN 29 3.2.1 Kết ly trích DNA .29 3.2.2 Kết phân tích RAPD 29 CHƯƠNG : KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 5.1 KẾT LUẬN 39 5.2 KIẾN NGHỊ 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO .40 Chuyên ngành Công Nghệ Sinh Học iii Viện NC & PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32-2010 Trường ĐHCT DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng : Nồng độ hóa chất cần thiết cho phản ứng PCR 18 Bảng : Chương trình nhiệt độ cho phản ứng PCR 19 Bảng : Trình tự lồi thực phản ứng PCR 29 Bảng : 12 loại primer sử dụng thí nghiệm 30 Bảng : Tổng hợp kết phân nhóm 12 lồi Dendrobium 38 Chun ngành Cơng Nghệ Sinh Học iv Viện NC & PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32-2010 Trường ĐHCT DANH SÁCH HÌNH Trang Hình : Vi khuẩn Thermus aquaticus 10 Hình : Lá cá thể loài Hoàng thảo tuyết mai 22 Hình : Lan Hồng thảo điểm hồng - Dendrobium draconis Rchb.f 25 Hình : Lan Hoàng thảo báo hỉ - Dendrobium secundum (BI.) Lindl 25 Hình : Lan Hồng thảo tuyết mai - Dendrobium crumenatum Sw 25 Hình : Lan Hồng thảo thái bình – Dendrobium moschatum (Buchd - Hamd) Sw 26 Hình : Lan Hồng thảo Nhất điểm hoàng - Dendrobium heterocarpum Lindl 26 Hình : Lan Hồng thảo thủy tiên trắng – Dendrobium palpebrae Lindl 26 Hình : Lan Hoàng thảo hương duyên- Dendrobium ellipsophyllum Tang et Wang 27 Hình 10 : Lan Hoàng thảo kim điệp Dendrobium chrysotoxum Lindl 27 Hình 11 : Lan Hồng thảo trúc- Dendrobium salaccense (BI.) Lindl 28 Hình 12 : Dendrobium sonia 28 Hình 13 : Dendrobium thong-chai gold 28 Hình 14 : Kiểm tra mẫu DNA sau ly trích 29 Hình 15 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng Primer OPF 01 31 Hình 16 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng Primer OPF 02 31 Hình 17 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng Primer OPF 03 32 Hình 18 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng Primer OPF 04 32 Hình 19 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng Primer OPF 05 32 Hình 20 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng Primer OPF 07 33 Hình 21 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng Primer OPF 08 33 Hình 22 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng Primer OPF 09 33 Hình 23 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng Primer OPR 07 34 Hình 24 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng Primer OPR 12 34 Hình 25 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng Primer OPA 08 34 Chuyên ngành Công Nghệ Sinh Học v Viện NC & PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32-2010 Trường ĐHCT Hình 26 : Kết điện di sản phẩm PCR sử dụng primer OPA 12 35 Hình 27 : Cây phả hệ (phylogenetic tree) 12 loài Dendrobium 37 Chuyên ngành Công Nghệ Sinh Học vi Viện NC & PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32-2010 Trường ĐHCT CÁC TỪ VIẾT TẮT  PCR - Polymerase Chain Reaction  DNA - Deoxyribonucleic Acid  dNTPs - Deoxyribonucleotide triphosphate  RAPD - Amplification of Random Polymorphic DNA  EDTA - Disodium ethylenedia minetera acetate  EB - Extraction bufer- Tris HCl (pH 8), NaCl, EDTA, 2-mercaptho ethanol  CTAB – Cetyl trimethylammonium bromide  TE – Tris pH = 8, EDTA pH=8  SDS – Sodium dodecyl sulfate  TBE – Tris base, boric acid, EDTA  Taq – Taq DNA polymerase Chuyên ngành Công Nghệ Sinh Học vii Viện NC & PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32-2010 Trường ĐHCT TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bùi Chí Bửu & Nguyễn Thị Lang 1999 Những Nguyên Tắc Cơ Bản Trong Chọn Giống Cây Trồng Di Truyền Phân Tử, nhà xuất Nông Nghiệp, thành phố Hồ Chí Minh Đái Duy Ban 2006 Cơng Nghệ Gen Nhà xuất Khoa Học Và Kỹ Thuật, Hà Nội Đặng Thanh Sơn 2003 Khảo Sát Hiện Trạng Đa Dạng Sinh Học Và Bệnh Vàng Lá Gân Xanh Trên Cây Có Múi (Citrus) Huyện Gị Quao Tỉnh Kiên Giang Luận văn thạc sĩ, Đại Học Cần Thơ Hoàng Thị Sản 2002 Phân loại thực vật Nhà xuất giáo dục, Hà Nội Huỳnh Văn Thới 1996 Cẩm Nang Nuôi Trồng Và Kinh Doanh Phong Lan Nhà xuất Trẻ, thành phố Hồ Chí Minh Khuất Hữu Thanh 2006 Kỹ Thuật Gen - Nguyên Lý Và ứng Dụng Nhà xuất Khoa Học Và Kỹ Thuật, Hà Nội Nguyễn Công Nghiệp 2000 Trồng Hoa Lan Nhà xuất trẻ, thành phố Hồ Chí Minh Nguyễn Thị Pha 2003 Ứng Dụng Đánh Dấu (Marker) Phân Tử Trong Chọn Giống Lúa Kháng Bệnh Bạc Lá (Xanthomonas oryzae pv oryzae) Luận văn thạc sĩ, Đại Học Cần Thơ Nguyễn Thiện Tịch et al 2006 Kỹ Thuật Nuôi Trồng Hoa Lan Nhà Xuất Bản Nơng Nghiệp, thành phố Hồ Chí Minh Phạm Hồng Hộ 1999 Cây Cỏ Việt Nam (tập 3) Nhà xuất Trẻ, thành phố Hồ Chí Minh Phạm Thị Thanh Liên 2008 Đánh Giá Đa Dạng Di Truyền Của Dưa Hấu Đồng Bằng Sông Cửu Long Bằng Phương Pháp Chỉ Thị Phân Tử Luận văn thạc sĩ, Đại Học Cần Thơ Trần Hợp 1998 Phong Lan Việt Nam Nhà xuất Nơng Nghiệp, thành phố Hồ Chí Minh Chun ngành Công Nghệ Sinh Học 40 Viện NC & PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32-2010 Trường ĐHCT Trần Thị Thiên An Bùi Cách Tuyến 2005 Xác Định Hai Loài Ruồi Đục Lá Quan Trọng Ở Việt Nam Liriomyzae sativae B Liriomyza huidobrensis B Bằng Kỹ Thuật RAPD-PCR Tạp chí KHKT Nơng Lâm Nghiệp, số 3/2005 Trần Văn Bảo 1999 Kỹ Thuật Nuôi Trồng Phong Lan Nhà xuất Trẻ, thành phố Hồ Chí Minh Trần Văn Huân & Văn Tích Lượm 1998 Kỹ Thuật Ni Trồng Cấy Lan Nhà Xuất Bản TP Hồ Chí Minh .Trình Đình Đạt 2007 Công nghệ sinh học (tập 4) công nghệ di truyền Nhà xuất Giáo Dục Tiếng Anh Inthawong S et al 2006 Analysis of Intersectional Hybrids of Dendrobium by RAPD Technique Kasetsart J (Nat Sci.) 40 : 456 – 461 Khosravi, A R et al 2009 RAPD analysis of colchicine induced variation of the Dendrobium Serdang beauty African Journal of Biotechnology Vol (8), pp 1455-1465 Lim SH et al 1999 RAPD analysis of some species in the genus Vanda (Orchidaceae) Annals of Botany 83, pp 193-196 Maria D et al 2008 Characteristics of RAPD markers in breeding of Cucumis sativus L Roumanian Biotechnological Letters Vol 13, No 4, pp 3843-3850 Niknejad.A et al 2009 Molecular characterization and phylogenetic relationships among and within species of Phalaenopsis (Epidendroideae: Orchidaceae) based on RAPD analysis African Journal of Biotechnology Vol (20), pp 5225-5240 Sheidai M et al 2008 RAPD analysis of somaclonal variation in banana (Musa acuminate L.) cultivar Valery Acta Biologica Szegediensis Vol 52(2) : 307-311 Sun M and K C Wong 2001 Genetic structure of three orchid species with contrasting breeding systems using RAPD and Allozyme markers American Journal of Botany 88(12) : 2180–2188 Zha XQ et al 2009 Genetic characterization of the nine medicinal Dendrobium species usinh RAPD, African Journal of Biotechnology Vol (10), pp 20642068 Chuyên ngành Công Nghệ Sinh Học 41 Viện NC & PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 32-2010 Trường ĐHCT Trang Web http://www.hoalanvietnam.org/Article.asp?ID=227 (3/12/2009) http://www.hoalanvietnam.org/Article.asp?ID=262 (9/12/2009) http://www.longdinh.com/phonglan/?act=chitiet&ID=2004 (9/12/2009) http://new.dalatrose.com/View/119/2138/1/candat/ (14/3/2010) http://www.vncreatures.net/chitiet.php?page=12&loai=2&img=1&ID=3397 (11/4/2010) http://www.fermentas.com (ngày 15/04/2010) Chuyên ngành Công Nghệ Sinh Học 42 Viện NC & PT Công Nghệ Sinh Học PHỤ LỤC Phụ lục 1: KÍCH THƯỚC THANG CHUẨN a b (a) - Thang chuẩn 100 -10,000 bp (b) - thang chuẩn 100-1000 bp (*Nguồn http://www.fermentas.com ngày 15/04/2010) Phụ lục 2: SỐ LIỆU PHÂN TÍCH CÁC DẤU PHÂN TỬ BẰNG KỸ THUẬT RAPD TRÊN CHI LAN RỪNG Dendrobium Primer OPF 01 Band Loài 10 11 12 190bp 0 0 0 0 0 220bp 0 0 0 0 250bp 0 1 0 0 0 290bp 0 1 1 0 0 300bp 0 0 0 0 1 320bp 0 0 0 0 0 350bp 0 0 1 1 0 390bp 0 0 0 0 1 400bp 1 0 0 1 1 490bp 0 0 1 0 500bp 0 0 0 0 0 590bp 1 0 1 1 1 1 600bp 0 1 0 0 620bp 0 1 0 0 0 700bp 0 0 0 0 0 750bp 0 0 0 0 0 800bp 1 0 1 0 0 900bp 0 0 0 0 1000bp 0 0 0 0 0 1100bp 0 0 0 0 0 1200bp 0 0 0 0 0 OPF 02 OPF 03 150bp 0 0 0 0 0 180bp 1 0 0 0 0 190bp 0 0 0 0 0 200bp 0 0 0 1 1 220bp 0 0 0 0 0 250bp 1 1 0 0 280bp 0 0 1 0 1 310bp 1 1 1 1 1 340bp 0 0 0 0 1 390bp 1 1 1 1 1 400bp 0 1 0 0 0 420bp 0 1 1 1 1 500bp 1 1 1 0 0 550bp 1 1 1 1 600bp 0 0 0 0 650bp 0 0 0 0 0 700bp 1 1 0 1 1 800bp 1 1 0 0 900bp 1 1 0 0 0 0 1000bp 1 0 1 1 1100bp 0 0 0 1 1 1200bp 1 0 0 0 1500bp 0 0 0 0 0 180bp 1 0 0 0 0 0 200bp 0 0 0 0 0 210bp 0 0 1 0 0 0 OPF 03 OPF 04 280bp 0 0 1 0 0 0 300bp 0 0 0 0 0 310bp 0 1 0 1 0 350bp 0 0 0 0 1 450bp 0 0 1 1 1 500bp 1 0 1 0 0 550bp 1 0 0 1 1 600bp 1 0 0 0 1 650bp 1 0 0 0 0 0 700bp 0 0 0 1 800bp 0 1 0 0 0 900bp 0 0 0 0 1000bp 0 0 0 1 1 1100bp 0 0 0 0 1200bp 0 0 0 1 1 1500bp 0 0 1 0 0 150bp 0 0 0 0 180bp 1 0 0 0 0 200bp 0 0 0 0 230bp 0 0 0 0 0 250bp 0 0 0 0 0 280bp 1 0 1 0 0 290bp 0 0 0 0 0 300bp 0 0 0 0 0 310bp 0 1 0 0 320bp 1 0 1 1 1 OPF 04 OPF 05 380bp 0 0 0 0 0 400bp 1 1 1 1 410bp 0 0 1 1 480bp 1 0 0 0 500bp 0 0 0 1 0 510bp 0 0 1 1 0 550bp 0 0 0 0 1 600bp 0 0 0 1 1 650bp 1 0 0 0 690bp 1 1 0 0 700bp 0 0 0 0 0 790bp 1 0 1 0 0 800bp 0 0 0 0 850bp 0 1 1 1 950bp 0 0 0 1 1 1150bp 0 0 0 0 0 1200bp 1 1 0 1 1 1300bp 0 0 0 0 0 1500bp 0 0 1 150bp 0 0 0 1 1 180bp 0 0 0 0 0 200bp 0 1 0 0 210bp 0 0 0 1 1 220bp 1 0 0 1 1 290bp 0 0 0 0 310bp 1 0 0 0 0 OPF 05 OPF 07 350bp 0 0 0 0 0 390bp 0 1 1 1 400bp 0 0 1 0 0 410bp 0 0 1 1 490bp 0 0 1 0 0 500bp 0 0 1 0 0 550bp 0 0 0 0 600bp 1 0 0 0 650bp 0 0 0 0 0 680bp 0 1 0 0 0 750bp 0 0 0 0 0 800bp 0 0 0 1 1 850bp 0 1 0 0 0 950bp 0 1 1 1100bp 0 0 0 0 0 1300bp 0 0 0 0 0 1700bp 0 0 0 1 0 280bp 1 0 0 0 300bp 1 0 0 0 390bp 0 0 1 0 450bp 1 0 1 0 0 490bp 0 0 0 0 500bp 1 0 1 1 1 550bp 0 0 0 1 0 600bp 1 0 0 0 0 620bp 0 0 0 0 OPF 07 OPF 08 690bp 0 0 1 0 750bp 1 0 1 1 850bp 0 0 0 0 1 1 900bp 0 0 0 0 0 1000bp 1 0 1 1 1 1200bp 0 0 0 0 0 1500bp 0 0 0 1 0 2000bp 0 0 0 1 1 250bp 0 0 0 0 0 280bp 1 1 0 0 300bp 0 0 0 0 0 350bp 0 0 0 0 400bp 0 0 0 0 0 450bp 1 0 0 1 1 500bp 0 0 1 0 0 0 550bp 1 0 0 0 0 590bp 1 0 0 0 0 600bp 0 1 1 0 750bp 0 0 0 0 800bp 0 0 0 0 0 850bp 0 0 0 0 0 900bp 0 0 0 0 0 950bp 0 0 0 0 0 1000bp 0 0 0 0 1100bp 1 0 0 0 0 1200bp 0 0 0 0 0 OPF 08 OPF 09 OPR 07 1500bp 1 0 0 0 2000bp 1 0 0 0 0 0 250bp 0 0 1 0 0 280bp 1 0 0 0 300bp 1 0 0 0 1 350bp 1 0 1 0 1 400bp 0 0 0 0 0 420bp 0 1 1 0 0 480bp 0 0 0 1 500bp 0 0 0 0 0 550bp 1 1 0 0 0 600bp 0 0 1 1 700bp 0 0 1 1 750bp 0 0 0 0 0 800bp 1 1 1 1 1 950bp 0 0 0 0 0 1000bp 1 0 0 0 0 1300bp 0 0 1 1 1 200bp 0 0 0 0 0 250bp 0 0 0 0 0 260bp 0 0 0 1 290bp 0 0 1 1 300bp 1 0 0 0 0 320bp 0 0 0 0 0 390bp 0 1 0 1 400bp 0 0 0 0 0 OPR 07 OPR 12 420bp 0 0 1 0 490bp 1 1 1 1 1 500bp 0 0 1 0 0 510bp 1 0 1 0 0 550bp 0 0 0 1 1 600bp 0 0 0 0 0 650bp 1 1 1 0 0 700bp 1 0 0 0 1 750bp 0 1 0 0 0 800bp 0 1 0 0 850bp 0 0 1 1 1000bp 1 0 1 1 1100bp 1 0 0 0 0 1200bp 0 0 0 1 1500bp 0 0 0 0 0 200bp 0 0 1 1 1 220bp 0 0 0 1 280bp 1 0 1 1 1 320bp 1 0 0 1 1 390bp 0 1 0 0 0 410bp 0 0 1 1 500bp 0 0 0 0 1 650bp 0 0 0 1 0 700bp 0 1 1 1 1 800bp 0 0 0 1 1 1000bp 0 0 0 1 0 OPR 12 OPA 08 OPA 12 1100bp 0 1 0 1 1 1400bp 0 0 0 1 1 1700bp 0 0 1 1 150bp 0 1 0 0 0 190bp 0 0 0 0 0 210bp 1 0 0 0 0 220bp 0 1 0 0 270bp 1 0 0 0 300bp 1 1 1 1 370bp 1 1 0 1 410bp 1 1 1 1 1 450bp 1 0 0 0 0 500bp 0 0 0 510bp 1 1 1 1 1 600bp 0 0 1 0 1 650bp 1 1 1 1 750bp 1 0 0 0 0 800bp 0 0 1 810bp 1 0 0 0 900bp 0 0 0 0 1 1000bp 0 0 0 1 1 1100bp 0 0 0 1 1 1300bp 0 0 0 0 1700bp 0 0 0 0 0 190bp 0 0 0 0 220bp 0 1 1 0 0 OPA 12 290bp 0 0 0 0 0 300bp 0 1 0 0 0 320bp 1 0 0 1 350bp 0 1 0 0 0 0 390bp 0 0 0 0 400bp 1 1 1 1 450bp 1 1 1 1 1 500bp 1 1 1 0 550bp 1 1 1 1 1 1 600bp 0 0 0 1 1 650bp 0 1 0 0 700bp 0 0 0 0 750bp 0 0 0 0 800bp 0 0 1 1 850bp 0 0 0 0 950bp 0 0 0 1 1100bp 0 0 1 0 0 1200bp 0 1 0 0 0 0 1400bp 1 0 1 1 1500bp 0 0 0 1 1 Phụ lục 3: TƯƠNG QUAN DI TRUYỀN GIỮA CÁC CÁ THỂ TRONG QUẦN THỂ 1.0000000 0.6586345 0.6385542 0.5903614 0.5582329 0.6184739 0.6345382 0.5702811 0.5983936 0.6024096 0.5943775 0.6546185 1.0000000 0.5702811 0.6104418 0.5702811 0.5903614 0.5903614 0.5502008 0.5702811 0.5823293 0.5903614 0.5783133 1.0000000 0.6546185 0.5903614 0.6184739 0.5943775 0.4899598 0.5421687 0.5140562 0.5060241 0.6305221 1.0000000 0.6465863 0.6586345 0.6425703 0.5783133 0.6144578 0.5702811 0.5863454 0.6305221 1.0000000 0.5863454 0.6024096 0.5863454 0.6224900 0.5863454 0.5783133 0.6064257 1.0000000 0.6706827 0.5742972 0.5622490 0.5662651 0.5823293 0.6345382 1.0000000 0.6224900 0.5863454 0.5903614 0.6064257 0.5702811 1.0000000 0.8273092 0.8072289 0.7831325 0.5863454 10 11 1.0000000 0.8514056 1.0000000 0.8192771 0.9518072 0.6546185 0.6104418 12 1.0000000 0.6104418 1.0000000 ... nước ta, lan rừng bên bờ suy kiệt nạn khai thác bừa bãi, có nhiều lồi bị tuyệt chủng Với đề tài : ? ?Phân Tích Đa Dạng Sinh Học Một Số Loài Lan Rừng Thuộc Chi Dendrobium Bằng Kỹ Thuật RAPD? ?? nhằm... lan tảng tạo nên thành cơng lai tạo Việc vừa tiết kiệm chi phí cơng sức cho q trình thử nghiệm lai tạo ban đầu Đề tài nghiên cứu : ? ?Phân Tích Đa Dạng Sinh Học Một Số Loài Lan Rừng Thuộc Chi Dendrobium. .. lồi lan rừng thuộc chi Dendrobium ghi nhận Ngồi có lồi lan lai Dendrobium Thongchai-gold Dendrobium sonia chọn để có so sánh kiểm nghiệm phân nhánh chúng phả hệ phân tích đa dạng di truyền kỹ thuật