Phương pháp mới chẩn đoán xác định nhanh bệnh dại

Bài viết trình bày phương pháp chẩn đoán phát hiện nhanh chóng và chính xác bệnh dại là điều kiện tiên quyết trong điều trị dự phòng sau phơi nhiễm ở người và kiểm soát bệnh dại ở động vật. Hiện tại, chỉ có xét nghiệm kháng thể huỳnh quang trực tiếp (DFA) được WHO và OIE khuyến nghị sử dụng để chẩn đoán bệnh dại.

KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVI SỐ - 2019 PHƯƠNG PHÁP MỚI CHẨN ĐOÁN XÁC ĐỊNH NHANH BỆNH DẠI Trần Đình Từ Hội Thú y Việt Nam Giữa năm 2018, CDC (Center for Disease Control and Prevention, USA) công bố nghiên cứu phát triển thành công xét nghiệm để chẩn đoán phát bệnh dại Chẩn đốn phát nhanh chóng xác bệnh dại điều kiện tiên điều trị dự phịng sau phơi nhiễm người kiểm sốt bệnh dại động vật Hiện tại, có xét nghiệm kháng thể huỳnh quang trực tiếp (DFA) WHO OIE khuyến nghị sử dụng để chẩn đoán bệnh dại Xét nghiệm thiết kế để sử dụng động vật, chẩn đốn bệnh dại dễ dàng xác hơn, theo nghiên cứu công bố gần PLOS One Xét nghiệm LN34 đơn giản dễ sử dụng xét nghiệm dùng Trong q trình nghiên cứu thí điểm, phương pháp khơng tạo âm tính giả, dương tính giả xét nghiệm trước Nó cho phép bác sĩ bệnh nhân đưa định sáng suốt cần phải tiêm chủng phịng bệnh dại, bệnh gần ln ln gây tử vong có triệu chứng xuất Xét nghiệm LN34 thực thiết bị Real time RT-PCR sử dụng rộng rãi phịng thí nghiệm Hoa Kỳ nhiều nước khác tồn giới mà khơng cần đào tạo thêm nguồn nhân lực Nó cho kết mô não động vật bị phân hủy “Tiêu chuẩn vàng” chẩn đoán xét nghiệm bệnh dại động vật phương pháp kháng thể huỳnh quang trực tiếp (DFA), đánh giá nhân viên phịng thí nghiệm có kỹ chun mơn cao, đào tạo chun sâu cần phải có kính hiển vi huỳnh quang Mặc dù RT-PCR sử dụng rộng rãi để xác định diện nhiều mầm bệnh virus, chưa có xét nghiệm RT-PCR chấp nhận sử dụng chẩn đoán xác định bệnh dại Các chuyên gia CDC phát triển thành công kỹ thuật multiplex real-time RT-PCR phát tất lồi lyssavirus Kỹ thuật có tên LN34 sử dụng kết hợp cặp mồi thối hóa đầu dò sửa đổi để đạt độ bao phủ tồn chi Lyssavirus trì độ nhậy độ đặc hiệu xét nghiệm Các mồi đầu dò xét nghiệm LN34 thiết kế nhằm bắt cặp vào vùng gene leader không mã hóa, có độ bảo tồn cao phần trình tự mã hóa nucleoprotein (gene N) gene lyssavirus để đảm bảo độ bền vững xét nghiệm Xét nghiệm LN34 phát tất biến thể virus gây bệnh dại (RABV) lyssavirus khác, phân lập từ hầu hết khu vực giới đại diện 13 loài Lyssavirus Xét nghiệm LN34 sử dụng thành công chẩn đoán trước sau chết 200 mẫu bệnh phẩm mẫu giám sát có nguồn gốc thực địa Trong nghiên cứu gần triển khai 14 phịng thí nghiệm tồn cầu tham gia đánh giá gần 3.000 mẫu não động vật tiếp nhận từ Châu Mỹ, Châu Âu, Châu Phi Châu Á, 1.000 trường hợp biết chắn bị nhiễm virus dại Các mẫu đến từ 60 lồi động vật có vú nghi mắc bệnh dại, bao gồm chó, gấu trúc, chồn hôi, cáo 91 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVI SỐ - 2019 dơi LN34 xác định xác tất mẫu dương tính với DFA dương tính Ngồi ra, cịn cho kết xác 80 mẫu khơng thể kết luận kiểm chứng xét nghiệm DFA 29 mẫu số phát dương tính với bệnh dại Trong số 3.000 mẫu kiểm tra, xét nghiệm LN34 xác định xét nghiệm DFA cho kết âm tính giả 11 xét nghiệm DFA cho kết dương tính giả Chỉ có mẫu không xác định hai xét nghiệm nói Đây nghiên cứu có phạm vi quy mô lớn từ trước đến để xác nhận việc sử dụng real time RT-PCR chẩn đoán bệnh dại động vật Xét nghiệm LN34 sử dụng real time RT-PCR, tảng thiết bị mà phần lớn phịng thí nghiệm tồn giới sử dụng để kiểm tra cúm, HIV bệnh lao… Trong đó, thử nghiệm DFA yêu cầu cần phải có kính hiển vi huỳnh quang, thiết bị khơng phải lúc có sẵn sở hạ tầng y tế thú y công cộng Xét nghiệm LN34 sử dụng mơ động vật tươi, đông lạnh, phân hủy cố định khối parafin để làm bất hoạt virus Thử nghiệm DFA thực mẫu mô não bảo quản lạnh, gây khó khăn khu vực khơng có lưới điện đáng tin cậy Điều đáng ngạc nhiên nhà nghiên cứu phát LN34 phát lượng nhỏ vật liệu di truyền virus dại, mẫu q cũ bị hóa lỏng Hơn nữa, tình trạng mẫu khơng ảnh hưởng đến độ xác xét nghiệm Bệnh dại giết chết khoảng 70.000 người năm, chủ yếu Châu Phi Châu Á Bệnh vài tháng để phát triển sau người tiếp xúc với vật mắc bệnh dại Một triệu chứng xuất hiện, bệnh dại ln gây tử vong, việc xác định trường hợp mắc bệnh định điều trị sớm quan trọng sống sót bệnh nhân Có xét nghiệm nhanh chóng, dễ thực xác để biết liệu vật cắn bị bệnh dại hay khơng, giúp bác sĩ đưa định nhanh chóng có cần điều trị dự phịng hay khơng 92 Xét nghiệm giúp cải thiện việc chẩn đốn xác định bệnh dại khơng Hoa Kỳ mà nước phát triển Hiện tại, sở xét nghiệm nhiều quốc gia Châu Phi Châu Á – nơi bị ảnh hưởng nhiều bệnh dại, thường có sẵn thiết bị cần thiết Ở quốc gia này, thiết bị xét nghiệm cung cấp vắc-xin phòng bệnh dại thường tổ chức khu vực đô thị tập trung, vài ngày du lịch từ nơi có người bị cắn - vắc-xin bệnh dại tốn vài tháng tiền lương Vì vậy, biết rõ vật cắn bị bệnh dại thơng tin có giá trị Hiện nay, xét nghiệm DFA xét nghiệm tổ chức quốc tế WHO OIE phê duyệt dùng cho chẩn đoán bệnh dại động vật Tuy nhiên, Tổ chức Y tế Thế giới Tổ chức Thú y Thế giới xem xét bổ sung xét nghiệm dựa PCR, xét nghiệm LN34, sử dụng làm xét nghiệm độc lập để xác nhận bệnh dại, thay sử dụng với kiểm tra DFA CDC làm việc với Hiệp hội phịng thí nghiệm y tế cơng cộng để xây dựng hướng dẫn xét nghiệm bệnh dại giúp bác sĩ lâm sàng nhân viên phịng thí nghiệm định thử nghiệm tình khác xét nghiệm sử dụng để xác nhận bệnh dại, đơn lẻ kết hợp với xét nghiệm khác Ở Việt Nam, có hai phịng thí nghiệm thú y có đủ điều kiện cần thiết để chẩn đoán bệnh dại dựa xét nghiệm DFA, Trung tâm Chẩn đoán Thú y (Cục Thú y) Chi cục Thú y Tp Hồ Chí Minh Trong đó, ngồi Trung tâm Thú y vùng, cịn nhiều phịng thí nghiệm thú y khác có trang bị real time RT-PCR dùng chẩn đốn Xét nghiệm LN34 có độ nhạy đạt tới 99,90% độ đặc hiệu 99,68%, thật xét nghiệm đạt chuẩn “trên tuyệt vời” Vậy không phổ biến sử dụng xét nghiệm LN34 để chẩn đoán phát sớm bệnh dại phịng thí nghiệm có sẵn thiết bị real time RT-PCR?./ KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVI SỐ - 2019 CÁC NGUYÊN TẮC ĐẠO ĐỨC THÚ Y CỦA HIỆP HỘI THÚ Y HOA KỲ (AVMA) Trần Thị Dân, Nguyễn Ngọc Tuân dịch từ ngyên tiếng Anh I GIỚI THIỆU Bác sỹ Thú y (BSTY) thành viên nghề nghiệp có tính học thuật cao, sở hữu cấp trường đại học tổ chức giáo dục tương đương BSTY hành nghề khám phòng-trị bệnh cho nhiều loài động vật nhiều hoàn cảnh điều kiện khác Hành xử nghề nghiệp gương mẫu chứng thực chân giá trị nghề thú y Tất BSTY ước mong gắn kết với quy tắc tiến đạo đức ngành nghề, nguyên tắc đạo đức thú y (Principles of Veterinary Medical Ethics/ PVME) PVME bao gồm chín nguyên tắc giải thích thêm cho nguyên tắc II CÁC NGUYÊN TẮC BSTY ln tận tâm có lực chăm sóc sức khỏe bệnh, với lịng vị tha tôn trọng phúc lợi động vật sức khỏe người BSTY cung cấp dịch vụ chăm sóc sức khỏe lâm sàng mối quan hệ BSTY thân chủ - thú bệnh BSTY giữ vững nâng cao tiêu chuẩn nghề, thành thật quan hệ nghề nghiệp, báo cáo đến tổ chức phù hợp trường hợp đồng nghiệp thiếu tính cách (character) thiếu lực (competence) BSTY phải tôn trọng pháp luật nhận thức trách nhiệm theo dõi thay đổi luật pháp quy định có chiều hướng trái ngược với quyền lợi tốt thú bệnh sức khỏe người BSTY tôn trọng lẽ phải khách hàng, đồng nghiệp, nghề nghiệp khác liên quan sức khỏe, phải bảo mật thông tin sức khỏe thú theo quy định pháp luật BSTY không ngừng học tập, ứng dụng, cập nhật kiến thức khoa học, trì cam kết hoạt động giáo dục thú y, sẵn sàng cung cấp thơng tin thích hợp đến khách hàng, đồng nghiệp, cộng đồng, sẵn sàng tư vấn cho ý kiến cần Ngoại trừ trường hợp cấp cứu, BSTY có quyền chọn để phục vụ, cần liên kết, có quyền chọn mơi trường để cung cấp dịch vụ chăm sóc thú y điều kiện thích hợp BSTY phải nhận trách nhiệm tham gia hoạt động góp phần cải thiện cộng đồng sức khỏe dân cư tốt Khi BSTY nhìn nhận, đánh giá đối xử với người lãnh vực chuyên môn hồn cảnh quan hệ cá nhân với cá nhân dựa khả năng, phẩm chất đặc điểm liên quan thân người III GIẢI THÍCH THÊM VỀ CÁC NGUYÊN TẮC ĐẠO ĐỨC THÚ Y BSTY tận tâm có lực chăm sóc sức khỏe thú, với lịng vị tha tôn trọng phúc lợi động vật sức khỏe người a BSTY nên quan tâm trước hết đến nhu cầu thú bệnh để ngăn ngừa giảm nhẹ tình trạng bệnh, đau đớn, khả bị thương tật trình làm giảm thiểu đau sợ hãi thú b Dù cho nơi tiếp nhận thú thuộc quyền sở hữu ai, có BSTY định việc chẩn đoán điều trị thú bệnh dựa mối quan tâm đến thú bệnh, khách hàng cộng đồng 93 ... vật mắc bệnh dại Một triệu chứng xuất hiện, bệnh dại ln gây tử vong, việc xác định trường hợp mắc bệnh định điều trị sớm quan trọng sống sót bệnh nhân Có xét nghiệm nhanh chóng, dễ thực xác để... để biết liệu vật cắn bị bệnh dại hay khơng, giúp bác sĩ đưa định nhanh chóng có cần điều trị dự phịng hay khơng 92 Xét nghiệm giúp cải thiện việc chẩn đốn xác định bệnh dại khơng Hoa Kỳ mà nước... vắc-xin bệnh dại tốn vài tháng tiền lương Vì vậy, biết rõ vật cắn bị bệnh dại thơng tin có giá trị Hiện nay, xét nghiệm DFA xét nghiệm tổ chức quốc tế WHO OIE phê duyệt dùng cho chẩn đoán bệnh dại