Nhận xét tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF trên bệnh nhân ung thư đại trực tràng tại bệnh viện bạch mai

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƢỢC VŨ THỊ NHUNG NHẬN XÉT TÌNH TRẠNG ĐỘT BIẾN GEN KRAS, NRAS, BRAF TRÊN BỆNH NHÂN UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG TẠI BỆNH VIỆN BẠCH MAI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH Y ĐA KHOA HÀ NỘI - 2018 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, em xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Thuận Lợi ThS Hu ỳnh Thị Nhung người hướng dẫn tận tình giúp đỡ, truyền đạt kiến thức ũng kinh nghiệm quý báu giúp em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Trong q trình nghiên cứu, thầy cô hỗ trợ tạo điều kiện tốt để em thực tốt đề tài khóa luận Em xin bày tỏ lịng biết ơn tới thầy cơng tác Khoa Y – Dược, đặc biệt em xin chân thành cảm ơn PGS TS Lê Thị Luyế n chủ nhiệm môn liên chuyên khoa Ban lãnh đạo Trung tâm Y học hạt nhân Ung bướu, đặc biệt GS TS Mai Trọng Khoa, PGS TS Trần Đình Hà PGS TS Phạm Cẩm Phương toàn thể bác sĩ điều dưỡng Trung tâm, quan tâm, tạo điều kiện thuận lợi cho em trình thực luận án Em xin cảm ơn tồn thể thầy cơ, anh chị, nghiên cứu viên Đơn vị Gen - Trung Tâm YHHN Ung bướu Bệnh Viện Bạch Mai giúp đỡ em trình thu thập số liệu phụ vụ cho nghiên cứu Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn vè người thân quan tâm, động viên tinh thần su ốt trình học tập thực luận văn tốt nghiệp Tuy nhiên, kiến thứ c chun mơn hạn chế thân thiếu nhiều kinh nghiệm thực tiễn nên nội dung khóa luận khơng tránh khỏi thiếu xót, em mong nhận góp ý để khóa luận hồn thiện Hà Nội, ngày 25 tháng năm 2018 Vũ Thị Nhung MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƢƠNG 1- TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG 1.1.1 Giới thiệu chung .3 1.1.2 Các yếu tố nguy ung thư đại trực tràng 1.1.3 Chẩn đoán giai đoạn ung thư đại trực tràng 1.1.4 Chẩn đoán mô bệnh học ung thư đại trực tràng 1.1.5 Các chất điểm u thường dùng .9 1.1.6 Điều trị ung thư đại trực tràng 10 1.2 TỔNG QUAN VỀ CÁC GEN KRAS, NRAS, BRAF TRONG UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG 13 1.2.1 Con đường tín hiệu MAPK (Mitogen ctivated protein kinase) ung thư đại trực tràng 13 1.2.2 Đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF ung thư đại trực tràng .14 1.2.3 Tình hình nghiên cứu đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF Việt Nam .15 CHƢƠNG – ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 ĐỐI TƢỢNG, ĐỊA ĐIỂM, THỜI GIAN NGHIÊN CỨU .17 2.1.1 Đối tượng nghiên c ứu 17 2.1.2 Địa điểm nghiên c ứ u 17 2.1.3 Thời gian nghiên cứu 17 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 17 2.2.2 Cỡ mẫu phương pháp chọn mẫu 17 2.2.3 Nội dung nghiên cứu 18 2.2.4 Phương pháp thu thập số liệu 23 2.2.5 Xử lý số liệu 23 2.2.6 Đạo đức nghiên cứu 23 CHƢƠNG - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 24 3.1 MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG – CẬN LÂM SÀNG CỦA BỆNH NHÂN UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG 24 3.1.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 24 3.1.2 3.1.3 3.1.4 3.1.5 Vị trí khối u nguyên phát 25 Lý vào viện 25 Đặc điểm cận lâm sàng 26 Giai đoạn bệnh tình trạng di xa 27 3.2 TÌNH TRẠNG ĐỘT BIẾN GEN KRAS, NRAS, BRAF CỦA BỆNH NHÂN UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG 28 3.2.1 Tỷ lệ đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF 28 3.2.2 Tỷ lệ dạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF 29 3.3 MỐI LIÊN QUAN GIỮA TÌNH TRẠNG ĐỘT BIẾN GEN KRAS, NRAS, BRAF VỚI MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG – CẬN LÂM SÀNG CỦA BỆNH NHÂN UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG 31 3.3.1 Mối liên quan tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF với đặc điểm tuổi giới tính 31 3.3.2 Mối liên quan tình trạng đột bi ế n gen KRAS, NRAS, BRAF với đặc điểm khối u đại trực tràng 32 3.3.3 Mối liên quan tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF với xét nghiệm CEA CA19-9 huyết 33 3.3.4 Mối liên quan tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF với giai đoạn bệnh tình trạng di xa 34 CHƢƠNG – BÀN LUẬN 35 4.1 MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG – CẬN LÂM SÀNG CỦA BỆNH NHÂN UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG 35 4.1.1 Đặc điểm phân bố nhóm tuổi giới tính 35 4.1.2 Vị trí khối u nguyên phát 36 4.1.3 Lý vào viện 36 4.1.4 Đặc điểm cận lâm sàng 37 4.1.5 Giai đoạn bệnh tình trạng di xa 38 4.2 TÌNH TRẠNG ĐỘT BIẾN GEN KRAS, NRAS, BRAF CỦA BỆNH NHÂN UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG 39 4.3 MỐI LIÊN QUAN GIỮA TÌNH TRẠNG ĐỘT BIẾN GEN KRAS, NRAS, BRAF VỚI MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG – CẬN LÂM SÀNG CỦA BỆNH NHÂN UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG 40 4.3.1 Mối liên quan tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF với đặc điểm tuổi giới tính 41 4.3.2 Mối liên quan tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF v ới đặc điểm khối u đại trực tràng 42 4.3.3 Mối liên quan tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF với xét nghiệm CEA CA19-9 huyết 43 4.3.4 Mối liên quan tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF với giai đoạn bệnh tình trạng di 43 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC MẪU BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU PHỤC LỤC DANH SÁCH BỆNH NHÂN NGHIÊN CỨU DANH MỤC HÌNH Hình Thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGFR) đường tín hiệu MAPK 14 Hình Vị trí khối u đại trực tràng nguyên phát 25 Hình Lý vào viện bệnh nhân 25 Hình Phân loại giai đoạn bệnh ung thư đại trực tràng 27 Hình Tỷ lệ dạng đột biến gen KRAS theo vị trí phát 29 Hình Tỷ lệ dạng đột biến gen NRAS theo vị trí phát 29 Hình Tỷ lệ dạng đột biến gen BRAF theo vị trí phát 30 DANH MỤC BẢNG Bảng Phân loại Dukes cải tiến (Astler – Coller) Bảng Phân chia giai đoạn theo hệ thống TNM củ AJCC Bảng Phân tích kết đột biến gen KRAS 20 Bảng Phân tích kết đột biến gen NRAS 22 Bảng Phân tích kết đột biến gen BRAF 23 Bảng Đặc điểm chung bệnh nhân 24 Bảng Đặc điểm cận lâm sàng bệnh nhân 26 Bảng Các vị trí di xa ung thư đại trực tràng 28 Bảng Tỷ lệ phát đột biến g n KRAS, NRAS, BRAF 28 Bảng 10 Các loại đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF theo vị trí phát 30 Bảng 11 Mối liên quan tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF với tuổi giới tính 31 Bảng 12 Mối liên quan gi ữ a tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF với đặc điểm khối u đại trực tràng 32 Bảng 13 Mối liên quan tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF với xét nghiệm CEA CA19-9 huyết 33 Bảng 14 Mối liên quan tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF với giai đoạn bệnh di xa 34 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT STT Từ CA 19-9 CEA CT DNA EGF EGFR FDA FFPE MAPK 10 MRI 11 mTOR 12 PET/CT 13 PI3K 14 PTEN 15 TNM 16 UTĐTT 17 VEGF ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư đại trực tràng ung thư phổ biến giới Hàng năm, triệu người chẩn đoán ung thư đại trực tràng nguyên nhân xếp thứ tư gây tử vong ung thư giới [48] Theo GLOBOCAN 2012, Việt Nam có khoảng 8800 trường hợp m c dự kiến đến năm 2020 ó khoảng 11000 trường hợp/ năm [49] Chẩn đoán sớm lựa chọn phác đồ điều trị giúp tăng khả sống sót bệnh nhân Hiện nay, phương pháp điều trị ung thư đại trực tràng bao gồm phẫu thuật, xạ trị, hóa chất điều trị đích Tuy nhiên, phẫu thuật, điều trị hóa chất xạ trị đơn có hiệu giai đoạn sớm bệnh lại hiệu giai đoạn tiến triển Trong năm gần đây, phương pháp điều tr ị đích sinh học bao gồm kháng thể đơn dòng g n với yếu tố phát triển n ội mô mạch máu (VEGF - vascular endothelial growth factor) thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGFR - epidermal growth factor receptor) cải thiện đáng kể kế t điều trị bệnh nhân m c ung thư đại trực tràng [34] Các thuốc điều trị đích ức chế thụ thể EGFR (cetuximab, panituximab) đời chứng m nh ó hiệu điều trị ung thư đại trực tràng Sử dụng riêng lẻ kết hợp thuốc với phác đồ hóa trị chuẩn cải thiện thời gian sống sót trung bình bệnh nhân ung thư đại trực tràng [97, 98] Sự kích hoạt EGFR chất g n đóng vai trò chủ chốt gây tăng sinh tế bào, tăng sinh mạch máu, di ức chế chết theo chương trình (apotosis) thơng qua hệ thống tín hiệ u RAS/RAF/MAPK PI3K/AKT/m-TOR Các đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF hạ lưu thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì hoạt hóa đường tín hiệu độc lập với thụ thể Do đó, đột biến gen làm cho khối u không đáp ứng với thuốc ức chế EGFR Như vậy, xét nghiệm đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF có vai trị quan trọng cần thiết để lựa chọn phác đồ điều trị ban đầu phù hợp cho bệnh nhân, t nâng cao hiệu điều trị, chất lượng sống c bệnh nhân tránh chi phí điều trị khơng cần thiết Trên giới có nhiều cơng trình nghiên cứu đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF Tuy nhiên, Việt Nam, gen KRAS BRAF triển khai thực thường quy số bệnh viện lớn, gen NRAS bước đầu triển khai có tác giả Trịnh Lê Huy nghiên cứu 39 bệnh nhân UTĐT điều trị khoa Ung bướu Chăm sóc giảm nhẹ Bệnh viện Đại học Y Hà Nội khơng phát trường hợp có đột biến NRAS Qua tìm hiểu phân tích tình hình nghiên cứu giới Vi ệ t Nam, thấy gen KRAS, NRAS, BRAF dấu ấn sinh họ có ý nghĩa điều trị ung thư đại trực tràng Do đó, chúng tơi tiến hành đề tài “Nhận xét tình trạn đột bi n gen KRAS, NRAS, BRAF b n n ân un ƣ đại trực tràng B nh vi n Bạch Mai” với hai mục tiêu sau: Mô tả số đặc điểm lâm sàng – cận lâm sàng tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF bệnh nhân ung thư đại trực tràng Bệnh viện Bạch Mai Mô tả mối liên quan tình trạng đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF với số đặc điểm lâm sàng – cận lâm sàng bệ h nhân ung thư đại trực tràng Bệnh viện Bạch Mai CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG 1.1.1 Giới thi u chung Ung thư đại trực tràng ung thư nguyên phát t đại tràng hoặ trực tràng gọi tên tùy thuộc vào vị trí xuất ung thư Tùy thuộc vào vị trí khối u khung đại tràng hay trực tràng mức độ lan rộng khối u sang tạng hay quan khác (di căn) biểu triệu chứng k ác Các triệu chứng thường gặp có máu phân, thay đổi thói quen đại tiện, thay đổi khuôn phân, đau vùng hạ vị, cảm giác ngồi khơng hết phân, mệt mỏi, sút cân Tuy nhiên, triệu trứng không đặc hiệu, gặp hi ề u bệnh khác Ung thư đại trực tràng loại ung thư phổ biế thứ ba nam giới (sau ung thư phổi, ung thư tiền liệt tuyến) đứng thứ hai nữ giới (chỉ sau ung thư vú) [31] Hàng năm, triệu người chẩn đoán u g thư đại trực tràng nguyên nhân xếp thứ tư gây tử vong ung thư giới [48] Ở nước phát triển, bệnh phổ biến (chiếm 55% trường hợp), lệ m c tỷ lệ tử vong giữ ổn định có xu hướng giảm nhẹ, nhiên nước có thu nhập thấp trung bình tỷ lệ ngày tăng nhanh chóng Th o liệu GLOBOCAN 2012, Việt Nam có khoảng 8800 trường hợp m c, gần 6000 trường hợp tử vong dự kiến đến năm 2020 có khoảng 11000 trường hợp m c/ năm [49] 1.1.2 Các y u tố n uy un ƣ đại trực tràng Hiện nay, cịn nhiều tranh cãi ngun nhân xác gây bệnh ung thư đại trực tràng, nhiên có số yếu tố làm tăng khả hình thành phát triển bệnh đượ nghiên cứu nhiều thập kỉ qua 1.1.2.1 Yếu tố lối sống dinh dưỡng Hơn 75 – 95% người m c ung thư đại trực tràng có gần không liên quan đến nguy di truyền [41, 104] Các yếu tố nguy bao gồm tuổi cao, gi ới tính nam [41] yếu tố khác liên quan tới lối sống chế độ dinh dưỡng n ăn nhiều chất béo, ăn thịt đỏ, thực phẩm đóng hộp, uống rượi, hút thuốc lá, hoạt động thể chất [39, 104] Thực phẩm nhiều mỡ, thịt động vật làm tăng hàm lượng acid mật thúc đẩy vi khuẩn lòng ruột phát triển, đặc biệt vi khuẩn yếm khí Clostridia Acid mật tác dụng vi khuẩn biến đổi thành TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Tuấn Anh (2016), Bước đầu khảo sát số gen có tiềm ứng dụng hỗ trợ điều trị ung thư đại trực tràng, Luận văn Thạc sỹ Đại học Khoa học tự nhiên Đào Thị Thanh Bình (2010), Nhận xét đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng xác định số yếu tố nguy tái phát, di ung thư đại tràng bệnh viện K, Luận văn Thạc sĩ Y học, Đại học Y Hà Nội Nguyễn Đại Bình (2010), "Đánh giá thời gian sống thêm sau điều trị ung thư đại trực tràng Khoa ngoại Tam Hiệp Bệnh viện K", Tạp chí Ung thư học Việt Nam 1, 369-342 Bùi Diệu Trần Văn Thuấn (2013), Ung thư đại trực tràng Thực hành điều trị nội khoa bệnh ung thư, Nhà xuất Y học, Hà N ội Nguyễn Kiến Dụ (2017), Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen KRAS, BRAF bệnh nhân ung thư đại tr ực tràng, Luận án Tiến sĩ Y học, Đại học Y Hà Nội Chu Văn Đức Đặng Tiến Hoạt (2007), "Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, mô bệnh học bộc lộ dấu ấn hóa mơ miễn d ịch CK7, CK20, f53 ung thư trực tràng", Tạp chí Y học thực hành 11(589), 47-51 Nguyễn Thị Hằng (2016), Tìm hiểu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng ung thư đại trực tràng giai đoạn IV, Khóa luận tốt nghiệp Bác sĩ y khoa, Đại học Y Hà Nội Phan Văn Hạnh (2004), Nhận xét tổn thương ung thư đại tràng qua nội soi ống mềm đối chiếu với lâm sàng giải phẫu bệnh bệnh viện K từ 2000 đến 2004, Luận văn Bác sĩ chuyên khoa acấp II, Đại học Y Hà Nội Nguyễn Văn Hiếu (2016), "Đánh giá kết điều trị phác đồ Folfox4 kết hợp Bevacizumab ung thư đại trực tràng di căn", Tạp chí Nghiên cứu Y học 3(101), 25-27 10 Nguyễn Quang Hùng (2006), Nghiên cứu mức xâm lấn ung thư trực tràng qua lâm sàng chụp cộng hưởng từ Bệnh viện K, Luận văn Bác sĩ nội trú, Đại học Y Hà Nội 11 Trịnh Lê Huy (2018), Nghiên cứu kết điều trị ung thư đại tràng di hóa ch ất phác đồ FOLFOXIRI, Luận án Tiến sĩ, Đại học Y Hà Nội 12 Lê Quang Minh (2012), Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học biến đổi biểu gen ung thư biểu mô đại trực tràng phương pháp Microarray, Luận án Tiến sĩ Y học, Học viện Quân y 13 Nguyễn Ngân (2002), Nghiên cứu đặc điểm hình thái học - lâm sàng ung thư đại trực tràng bệnh viện 103 từ năm 1997 đến năm 2002, Luận văn Thạc sĩ Y học, Đại học Y Hà Nội 14 Nguyễn Thúy Oanh, Quách Trọng Đức, Lê Quang Nhân (2011), "Đặc điểm lâm sàng – nội soi nhóm có tiền gia đình ung thư đại trực tràng", Y học TP Hồ Chí Minh 15(1), 26-30 15 Lê Văn Thiệu (2013), Nghiên cứu đột biến gen KRAS mối liên quan đột biến gene KRAS với số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh ung thư đại trực tràng, Luận án Tiến sỹ Y học, Học viện Quân Y 16 Trần Quốc Tiến (2007), Đánh giá kết nội soi nhuộm màu Indigo Carmin để làm rõ tổn thương điểm sinh thiết ung thư polyp đại tr ự c tràng, Luận văn Bác sĩ chuyên khoa cấp II, Đại học Y Hà Nội 17 Bùi Ánh Tuyết (2017), Nghiên cứu số đặc điểm lâm sàng, ận lâm sàng tình trạng đột biến gen KRAS ung thư đại trực tràng Bệnh viện K, Luận án Tiến sĩ, Đại học Y Hà Nội 18 Bùi Ánh Tuyết Trần Văn Thuấn (2016), "Tỉ lệ đột biến gen KRAS mối liên quan với số đặc điểm bệnh học ung thư đại trực tràng", Y học Việt Nam 2, 123-127 19 Hoàng Anh Vũ Hứa Thị Ngọc Hà (2013), " hát đột biến gen KRAS ung thư đại trực tràng kỹ thuật COLD -PCR giải trình tự DNA", Y học TP Hồ Chí Minh 17(3), 50-54 20 Ahlquist T, Bottillo I, Danielsen SA, et al (2008), "RAS Signaling in Colorectal Carcinomas through Alteration of RAS, RAF, NF1, and/or RASSF1A", Neoplasia 7(10), 680-6 21 Akman T, Oztop I, Baskin Y, t al (2016), "The association of clinicopathological features and survival in colorectal cancer patients with KRAS mutation status", Journal of Cancer Research and Therapeutics 12(1), 234-237 22 Amado RG, Wolf M, Peet rs M, et al (2008), "Wild-type KRAS is required for panitumumab efficacy in patients with metastatic colorectal cancer", J Clin Oncol 10(26), 1626-34 23 Andreyev HJ, Norman AR, Cunningham D, et al (2001), "Kirsten ras mutations in patients with col rectal cancer: the 'RASCAL II' study", Br J Cancer 5(85), 695-6 24 Artale A and Sartore-Bianchi A (2013), "Mutations of KRAS and BRAF in primary and matched metastatic sites of colorectal cancer", J Clin Oncol 25(26), 4217-4219 25 Astler VB and Coller FA (1954), "The prognostic significance of direct extension of carcinoma of the colon and rectum", Ann Surg 139(846) 26 Barault L, Veyrie N, Jooste V, et al (2008), "Mutations in the RASMAPK, PI(3)K (phosphatidylinositol-3-OH kinase) signaling network correlate with poor survival in a population-based series of colon cancers", Int J Cancer 10(122), 2255-9 27 Berg M, Danielsen SA, Ahlquist T, et al (2010), "DNA sequence profiles of the colorectal cancer critical gene set KRAS-BRAF-PIK3CAPTENTP53 related to age at disease onset", PLoS One 11(5), e13978 28 Berkovich L, Shpitz B, Ghinea R, et al (2014), "Evaluation of peritoneal CEA levels following colorectal cancer surgery", Journal of Surgical Oncology 110(4), 458-462 29 Berlin J (2013), "Beyond exon the developing story of RAS mutations in colorectal cancer", N Engl J Med 11(369), 1059-60 30 Bibbins-Domingo K, Grossman DC, Curry SJ, et al (2016), "S reening for colorectal cancer: US preventive services task force re ommendation statement", Journal of the American Medical Association 315(23), 2564-2575 31 Bray F, Ren JS, Masuyer E, et al (2013), "Estimates of global cancer prevalence for 27 sites in the adult population in 2008", Int J Cancer 132(5), 1133-45 32 Brink M, De Goeij AF, Weijenberg MP, et al (2003), "K-ras oncogene mutations in sporadic colorectal cancer in The Net erlands Cohort Study", Carcinogenesis 4(24), 703-10 33 Canavan C, Abrams KR, Mayberry J, et al (2006), "Meta-analysis: colorectal and small bowel cancer risk in patients with Crohn's disease", Aliment Pharmacol Ther 23(8), 1097-104 34 Cao Y (2014), "VEGF-targeted canc r therapeutics-paradoxical effects in endocrine organs", Nat Rev Endocrinol 10(9), 530-9 35 Chalya PL, Mchembe MD, Mabula JB, et al (2013), "Clinicopathological patterns and challenges of management of colorectal cancer in a resource-limited setting: a Tanzanian exper ence", World J Surg Oncol 11, 88-92 36 Cho M, Akiba C, Lau C, et al (2016), "Impact of RAS and BRAF mutations on carcinoembryonic antigen pro uction and pattern of colorectal metastases", World J Gastrointest Oncol 8(1), 128-135 37 Ciardiello F and Tortora G (2008), "EGFR antagonists in cancer treatment", N Engl J Med 358(11), 1160-74 38 Cohen AM and Minsky BB (2015), "Cancer of the colon", Julie Goolsby, chủ biên, Cancer: Principles and practice of Oncology, LippincottRaven, New York 39 Colorectal Cancer 2011 Report (2011), Food, Nutrition, Physical Activity, and the Prevention of Colorectal Cancer, World Cancer Research Fund & American Institute for Cancer Research 40 Crohn B and Rosenberg H (1925), "The sigmoidoscopic picture of chronic ulcerative colitis (non- specific)", The American Journal of the Medical Sciences 170, 220-8 41 Cunningham D, Atkin W, Lenz HJ, et al (2010), "Colorectal cancer", Lancet 375(9719), 1030-47 42 De Roock W, Claes B, Bernasconi D, et al (2010), "Effects of KRAS, BRAF, NRAS, and PIK3CA mutations on the efficacy of cetuximab plus chemotherapy in chemotherapy-refractory metastatic colorectal cancer: a retrospective consortium analysis", Lancet Oncol 11(8), 753-762 43 Denecke T, Rau B, Hoffmann KT, et al (2005), "Comparison of CT, MRI and FDG-PET in response prediction of patients with locally advanced rectal cancer after multimodal preoperative therapy: Is there a benefit in using functional imaging? ", European Radiology 15, 1658-1666 44 Di Nicolantonio F, Martini M, Molinari F, et al (2008), "Wild-t pe BRAF is required for response to panitumumab or cetuximab in metastatic colorectal cancer", J Clin Oncol 35(26), 5705-12 45 Duffy MJ (2001), "Carcinoembryonic Antigen as a Marker for Colorectal Cancer: Is It Clinically Useful? ", Clinical Chemistry 47(4), 624– 630 46 Duffy MJ, Van Dalen A, Haglund C, et al (2003), "Clinical utility of biochemical markers in colorectal cancer: European Group on Tumour Markers (EGTM) guidelines", European journal of cancer 39(6), 718-727 47 Feng Q, Liang L, Ren L, et al (2015), "A specific KRAS codon 13 mutation is an independent predictor for colorectal cancer metachronous distant metastases", Am J Cancer Res 5(2), 674-688 48 Ferlay J, Soerjomataram I, Dikshit R, et l (2014), "Cancer incidence and mortality worldwide: sources, methods nd major patterns in GLOBOCAN 2012", International Journal of Cancer 136(5), 359-386 49 Ferlay J, Soerjomataram I, Ervik M (2013), GLOBOCAN 2012 V1.0, Cancer Incidence and Mortality Worldwide: IARC Cancerbase No 11 [internet] , truy cập ngày, trang web http://globo an.iarc.fr 50 Goonetilleke KS and Siriwardena AK (2007), "Systematic review of carbohydrate antigen (CA 19-9) as a biochemical marker in the diagnosis of pancreatic cancer", Eur J Surg Oncol 33(3), 266-70 51 Gyde SN, Prior P, Macartney J, et al (1980), "Malignancy in Crohn's disease", Gut 21(12), 1024 - 52 Half E, Bercovich D, Rozen P, et al (2009), "Familial adenomatous polyposis", Orphanet Journal of Rare Diseases 4(22) 53 Haller DG, Catalano PJ, Macdonald JS, et al (2005), "Clinical and pharmacokinetic studies of high-dose levamisole in combination with 5fluoroura il in patients with advanced cancer", Cancer Chemother Pharmacol 41(6), 477-484 54 Higashi D, Futami K, Kawahara K, et al (2007), "Study of colorectal cancer with Crohn’s disease", Anticancer Res 27, 3771–3774 55 Howard W, Bruckne R and Pitrell IJ (2000), "Section 20: Neoplasms of the alimentary cancal, chaper 103: Adenocarcinoma of the colon and rectum", Cancer Medicine, B.C Decker Inc, tr 1472-520 56 Howlader N, Krapcho M and Garshell J (2013), SEER cancer statistics review, 1975–2010 [Internet] Bethesda: National Cancer Institute [cited 2013 Jul 20], truy cập ngày, trang web http://seer.cancer.gov/csr/1975_2010/ 57 Hugen N, Van De Velde CJ, de Wilt JH, et al (2014), "Metastatic pattern in colorectal cancer is strongly influenced by histological subtype", Ann Oncol 3(25), 651-657 58 Huxley RR, Ansary AM, Clifton P, et al (2009), "The impact of dietary and lifestyle risk factors on risk of colorectal cancer: A quantitative overview of the epidemiological evidence", Int J Cancer 125, 171-180 59 Imperiale TF, Wagner DR, Lin CY, et al (2002), "Results of screening colonoscopy among persons 40 to 49 years of age", N Engl J Med 346, 1781– 1785 60 Irahana N, Baba Y, Nosho K, et al (2010), "NRAS mutations are rare in colorectal cancer", Diagn Mol Pathol 19(3), 157-163 61 Jancik S, Drabek J, Jitka B, et al (2012), "A comparison of Direct sequencing, Pyrosequencing, High resolution melting analysis, TheraScreen DxS, and the K-ras StripAssay for detecting KRAS mutations in non-small cell lung carcinomas", J Exp Clin Cancer Res 31(1), 79 62 Juhn E and Khachemoune A (2010), "G rd er syndrome: skin manifestations, differential diagnosis and managem nt " , American Journal of Clinical Dermatology 11(2), 117-22 63 Karapetis CS, Khambata S, Jonker DJ, et al (2008), "K-ras mutations and benefit from cetuximab in advan ed colorectal cancer.", N Engl J Med 359(17), 1757-1765 64 Kodaz H, Hacibekiroglu I, Er ogan B, et al (2015), "Association between specific KRAS mutations and the clinicopathological characteristics of colorectal tumors", Mol Clin Oncol 1(3), 179-184 65 Koo HY, Park KJ, Oh JH, et al (2013), "Investigation of clinical manifestations in korean colorectal cancer patients", Ann Coloproctol 4(29), 139-43 66 Krasinskas AM (2011), "EGFR Signaling in Colorectal Carcinoma", Pathology Research International 2011, 932932 67 Kwon MJ, Lee SE, Kang SY, et al (2011), "Frequency of KRAS, BRAF, and PIK3CA mutations in advanced colorectal cancers: Comparison of peptide nucleic a id-mediated PCR clamping and direct sequencing in formalinfixed, paraffin-embedded tissue", Pathol Res Pract 207(12), 762-768 68 Lee IM, Shiroma EJ, Lobelo F, et al (2012), "Effect of physical inactivity on major non-communicable diseases worldwide: an analysis of burden of disease and life expectancy", The Lancet 380(9838), 219-29 69 Li W, Qiu T, Zhi W, et al (2015), "Colorectal carcinomas with KRAS codon 12 mutation are associated with more advanced tumor stages", BMC Cancer 15, 340 70 Lieberman DA, Weiss DG, Bond JH, et al (2000), "Use of colonoscopy to screen asymptomatic adults for colorectal cancer: Veterans Affairs Cooperative Study Group 380", N Engl J Med 343, 162-168 71 Luisa F, Giovanna DM, Pella N, et al (2015), "Prognostic role of KRAS, RAS, BRAF and PIK3CA mutations in advanced colorectal cancer", Future Oncol 11(4), 629-640 72 Luy LG, Maldonado LG, Chinga AE, et al (2000), "Clinical characteristics in colon cancer E Rebaglitati Martins Hospital 1995-1999", Rev Gastroenterol Peru 4(20), 406-413 73 Mais DD (2009), ASCP Quick Compendium of Clinical Pathology, ASCP Press, Chicago 74 Mao C, Liao RY, Chen Q, et al (2010), "BRAF mutation p edicts resistance to anti-EGFR monoclonal antibodies in wild-type KRAS metastatic colorectal cancer", J Cancer Res Clin Oncol 136(8), 1293-4 75 Mao C, Liao RY, Qiu LX, et al (2011), "BRAF V600E mutation and resistance to anti-EGFR monoclonal antibodies in patients with metastatic colorectal cancer: a meta-analysis", Mol Biol Rep 38(4), 2219 -23 76 Modest DP, Ricard I, Heinemann V, et al (2016), "Outcome according to KRAS-, NRAS- and BRAF-mutation s well as KRAS mutation variants: pooled analysis of five randomized trials in metastatic colorectal cancer by the AIO colorectal cancer study group", Annals of Oncology 27(9), 1746-1753 77 Murtaza M, Jayaram M, Muniandy RK, et al (2016), "Colorectal Cancer: Pathogenesis, Management and Prevention", IOSR Journal of Dental and Medical Sciences 15(5), 94-100 78 Negru S, Papadopoulou E, Angela A, et al (2014), "KRAS, NRAS and BRAF mutations in Greek and Romanian patients with colorectal cancer: a cohort study", BMJ Open 4(5), 004652 79 Nelson H, Petrelli N, Carlin A, et al (2001), "Guidelines 2000 for colon and rectal cancer surgery", Natl Cancer Inst 93(8), 583-596 80 Neugut AI, Jacobs n JS, De Vivo I, et al (1993), "Epidemiology of colorectal adenomatous p yps " , Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2, 159176 81 Ogino S, Meyerhardt JA, Irahara N, et al (2009), "KRAS mutation in stage III colon cancer and clinical outcome following intergroup trial CALGB 89803", Clin Can er Res 15(23), 7322-7329 82 Perkins G, Slater E, Sanders G, et al (2003), "Serum tumor markers", American family physician 68(6), 1057-1082 83 Perkins GL, Slater ED, Sanders GK, et al (2003), "Serum tumor markers", Am Fam Physician 68(6), 1075-1082 84 Rabeneck L, El-Serag HB, Davila JA, et al (2003), "Outcomes of colorectal cancer in the United States: no change in survival (1986–1997)", Am J Gastroenterol 98, 471-477 85 Saidi HS, Karuri D, Nyaim EO, et al (2008), "Correlation of clinical data, anatomical site and disease stage in colorectal cancer", East Afr Med J 6(85), 259-262 86 Samowitz WS, Curtin K, Schaffer D, et al (2000), "Relationship of Kiras Mutations in Colon Cancers to Tumor Location, Stage, and Survival: A Population-based Study", Cancer Epidemiology, Biomarkers & Prevention 9(11), 1193-1197 87 Sanz-Garcia E, Grasselli J, Argiles G, et al (2016), "Current and advancing treatments for metastatic colorectal cancer", Expert Opin Biol Ther 16(1), 93-110 88 Selcukbiricik F, Bilici A, Tural D, et al (2013), "Are high initi l CEA and CA 19-9 levels associated with the presence of K-ras mutation in patients with metastatic colorectal cancer?", Tumour Biol 34(4), 2233-2239 89 Shen Y, Wang J, Han X, et al (2013), "Effectors of epidermal growth factor receptor pathway: the genetic profiling ofKRAS, BRAF, PIK3CA, NRAS mutations in colorectal cancer characteristics and personalized medicine", PloS One 8(12), e81628 90 Stec R, Semeniuk-Wojtas A, Charkiewicz R, et al (2015), "Mutation of the gene as a prognostic factor in patients with colorectal cancer", Oncol Lett 3(10), 1423-1429 91 Stefanius K, Ylitalo L, Tuomisto A, et al (2011), "Frequent mutations of KRAS in addition to BRAF in colorectal s rrated adenocarcinoma", Histopathology 58(5), 679-692 92 Stein E (2003), Anorectal and Colon Diseases: Textbook and Color Atlas of Proctology, Stein E, ed, Springer 93 Stiksma J, Grootendorst DC, Van der Linden PW, et al (2014), "CA 199 as a marker in addition to CEA to monitor colorectal cancer", Clin Colorectal Cancer 13(4), 239-44 94 Strul H, Kariv R, Leshno M, et al (2006), "The prevalence rate and anatomic location of colorectal adenoma and cancer detected by colonoscopy in average-risk individuals aged 40–80 years", Am J Gastroenterol 101, 255–262 95 Tejpar S, Celik I, Schlichting M, et al (2012), "Association of KRAS G13D tumor mutati ns with outcome in patients with metastatic colorectal cancer treated with first-line chemotherapy with or without cetuximab", J Clin Oncol 30(29), 3570-3577 96 Tuppurainen K, Mäkinen JM, Junttila O, et al (2005), "Morphology and microsatellite instability in sporadic serrated and non-serrated colorectal cancer" , J Pathol 207, 285-294 97 Van Cutsem E, Köhne CH, Hitre E, et al (2009), "Cetuximab and chemotherapy as initial treatment for metastatic colorectal cancer", N Engl J Med 360(14), 1408-17 98 Van Cutsem E, Köhne CH, Láng I, et al (2011), "Cetuximab plus irinotecan, fluorouracil, and leucovorin as first-line treatment for metastatic colorectal cancer: updated analysis of overall survival according to tumor KRAS and BRAF mutation status", J Clin Oncol 29(15), 2011-9 VietnaLab BRAF Mutations, truy cập ngày 25/3-2018, trang web http://www.viennalab.com/products/cancer/braf_stripassay 100 VietnaLab KRAS & NRAS Mutations, truy cập ngày 23-3-2018, trang web http://www.viennalab.com/products/cancer/kras-nras stripassay 101 Vigil D, Cherfils J, Rossman KL, et al (2010), "Ras superfamily GEFs and GAPs: validated and tractable targets for cancer therapy?", Nat Rev Cancer 10(12), 842-857 102 Vogelstein B, Fearon ER, Hamilton SR, et al (1988), "Genetic lterations during colorectal-tumor development", N Engl J Med 319(525-532) 103 Wangefjord S, Sundstrom M, Zendehrokh N, et al (2013), "Sex differences in the prognostic significance of KRAS codons 12 and 13, nd BRAF mutations in colorectal cancer: a cohort study", Biol Sex Differ 1(4), 17 104 Watson AJ and Collins PD (2011), "Colon cancer: a civilization disorder", Digestive Diseases 29(2), 222-8 105 Weedon DD, Shorter RG, Ilstrup DM, et al (1973), "Crohn's disease and cancer", N Engl J Med 289(21), 1099-103 106 Wilson PM, LaBonte MJ, Lenz HJ, t l (2010), "Molecular markers in the treatment of metastatic colorectal canc r" , Cancer Journal 16(3), 262-72 107 Yothers G, O'Connell MJ, Allegra CJ, t al (2011), "Oxaliplatin as adjuvant therapy for colon cancer: updated results of NSABP C-07 trial, including survival and subset analyses", J Cl n Oncol 29(28), 3768-3774 108 Zahrani A, Kandil M, Badar T, et al (2014), "Clinico-pathological study of K-ras mutations in colorectal tumors in Saudi Arabia", Tumori 1(100), 75-9 109 Zhang J, Zheng J, Yang Y, t al (2015), "Molecular spectrum of KRAS, NRAS, BRAF and PIK3CA mutations in Chinese colorectal cancer patients: analysis of 1,110 cases", Sci Rep 5, 18678 110 Zhu XL, Cai X, Zhang L, et al (2013), "KRAS and BRAF gene mutations in correlation with c inicopathologic features of colorectal carcinoma in Chinese", Zhonghua Bing Li Xue Za Zhi 9(41), 584-9 99 PHỤ LỤC MẪU BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU Mã số bệnh án: …………… I.THÔNG TIN CHUNG Họ tên bệnh nhân: …………………………………………………………… Tuổi: …… Lý vào viện: □ Đau bụng □ Đi phân đen □ Gày sút cân □ Đi ngồi phân lỏng □ Táo bón □ Thiếu máu □ hác II ĐẶC ĐIỂM KHỐI U VÀ XÉT NGHIỆM CẬN LÂM SÀNG Vị trí u: □ Đại tràng ph ả i □ Đại tràng trái □ Trực tràng Kích thước u: ………… (cm) Giai đoạn bệnh: □ Giai đoạn I □ Giai đoạn II □ □ □ □ □ □ □ □ Di xa: Di gan Di phổi Di thận Di não Di buồng trứng Di phúc mạc hác Kết qu gi i phẫu bệnh: Ung thư biểu mô tuyến □ Giai đoạn III □ Giai đoạn IV □ □ □ Ung thư biểu mô tuyến nhày Ung thư biểu mô tế bào nhẫn hác Mức độ biệt hóa: □ Biệt hóa cao □ Biệt hóa v a □ Biệt hóa thấp Xét nghiệm miễn dịch: CEA:…… CA19-9: …… Nội soi đại trực tràng:  ích thước khối u so với chu vi: □ Dưới 1/4 □ T 1/4 đến 1/2 □ Trên 1/2 đến 3/4 □ Trên 3/4  Dạng tổn thương nội soi: □ Nhú lồi, phẳng □ Sùi □ Loét □ Thâm nhiễm □ hông phân loạ i III XÉT NGHIỆM ĐỘT BIẾN GEN KRAS, NRAS, BRAF Phương pháp lấy mẫu: □ Phẫu thuật Kết qu đột biến gen KRAS □ Phát đột biến Vị trí đột biến: ……………… Kết qu đột biến gen NRAS □ Phát đột biến Vị trí đột biến: ……………… Kết qu đột biến gen BRAF □ Phát đột biến Vị trí đột biến: ……………… PHỤC LỤC DANH SÁCH BỆNH NHÂN NGHIÊN CỨU TẠI TRUNG TÂM Y HỌC HẠT NHÂN VÀ UNG BƢỚU BỆNH VIỆN BẠCH MAI STT Họ n Bùi Đăng L Bùi Quang L Bùi Thị B Bùi Thị L Bùi Thị V Bùi Văn T Đàm Viết M Đặng Hữu L Đặng Thị Bích D 10 Đặng Thị L 11 Đào Xuân Đ 12 Đinh Thị C 13 Đinh Thị Tân H 14 Đinh T ị T 15 Đỗ Thanh B 16 Đỗ Thị Hoàng O 17 Đỗ Vinh Q 18 Đoàn Thị C 19 Giáp Văn C 20 Hà Vân A 21 Hoàng Thị N 22 Lài Xướng 23 Lê Đức L 24 Lê Hùng M 25 Lê Thị M 26 Lê Thị N 27 Lê Văn 28 Lưu Xuân H 29 Lý Bá T 30 Nghiêm Trọng T 31 Ngô Đăng H 32 Ngô Đức L 33 Ngô Thị Minh H 34 Ngô Thị M 35 Ngô Thị P 36 Nguyễn Bá Đ 37 Nguyễn Bá T 38 Nguyễn Đức H 39 Nguyễn Đức S 40 Nguyễn Hữu T 41 Nguyễn Quốc T 42 Nguyễn Quốc T 43 Nguyễn Quý T 44 Nguyễn Thế N 45 Nguyễn Thị Bích L 46 Nguyễn Thị H 47 Nguyễn Thị 48 Nguyễn Thị 49 Nguyễn Thị L 50 Nguyễn Thị M 51 Nguyễn Thị Thanh H 52 Nguyễn Thị T 53 Nguyễn Thị Thu H 54 Nguyễn Thị T 55 Nguyễn Thị T 56 Nguyễn Thị V 57 Nguyễn Trọng Q 58 Nguyễn Văn Q 59 Nguyễn Văn V 60 Nguyễn Văn V 61 Nguyễn Viết T 62 Phạm Duy T 63 Phạm Thị 64 Phùng Thị N 65 Thái Thị L 66 Tô Thị L 67 Trần Đăng Q 68 Trần Thị N 69 Trần Thị P 70 Trần Văn 71 Trương Thanh S 72 Võ Thị Hồng N 73 Vương Đình D ... TÌNH TRẠNG ĐỘT BIẾN GEN KRAS, NRAS, BRAF CỦA BỆNH NHÂN UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG 3.2.1 Tỷ l đột bi n gen KRAS, NRAS, BRAF ng Tỷ lệ phát đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF Tình trạng đột bi n Có đột biến. .. đoạn bệnh tình trạng di xa 38 4.2 TÌNH TRẠNG ĐỘT BIẾN GEN KRAS, NRAS, BRAF CỦA BỆNH NHÂN UNG THƢ ĐẠI TRỰC TRÀNG 39 4.3 MỐI LIÊN QUAN GIỮA TÌNH TRẠNG ĐỘT BIẾN GEN KRAS, NRAS, BRAF. .. bệnh nhân chẩn đốn xác định kết mơ bệnh học ung thư đại trực tràng định xét nghiệ đột biến gen KRAS, NRAS, BRAF  - Tiêu chuẩn lựa chọn Bệnh nhân đồng ý xét nghiệm gen KRAS, NRAS, BRAF Bệnh nhân