Tiếp tục nghiên cứu bào chế phytosome rutin

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƢỢC ĐOÀN THỊ PHƢƠNG TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ PHYTOSOME RUTIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HỌC HÀ NỘI - 2018 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƢỢC ĐOÀN THỊ PHƢƠNG TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ PHYTOSOME RUTIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HỌC Khóa: QH.2013Y Người hướng dẫn: ThS NGHUYỄN VĂN KHANH HÀ NỘI - 2018 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Rutin 1.1.1 Tên gọi, công thức 1.1.2 Tính chất vật lý .2 1.1.3 Định tính 1.1.4 Định lượng 1.1.5 Tác dụng sinh học 1.1.6 Ứng dụng rutin 1.1.7 Một số sản phẩm rutin thị trường 1.1.8 Một số nguồn chiết Rutin 1.1.9 Phương pháp chiết Rutin 1.2 Tổng quan phytosome 1.2.1 Khái niệm .5 1.2.2 Thành phần cấu tạ o 1.2.3 Đặc điểm Phytosme 1.2.4 So sánh phytosome liposome .9 1.2.5 Phương pháp bào chế phytosome 1.2.6 Một số sản phẩm phytosome thị trường 11 1.2.7 Các phương pháp giảm kích thước tiểu phân 11 1.2.8 Các phương pháp đánh giá liên kết hình thành phospholipid dược chất 11 1.2.9 Một số nghiên cứu bào chế phytosome 14 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢƠNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị, đối tượng nghiên cứu 21 2.1.1 Nguyên liệu, hóa chất 21 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 21 2.1.2 Đối tượng nghiên cứu 22 2.2 Nội dung nghiên cứu 22 2.3 Phương pháp nghiên cứu 22 2.3.1 Định lượng rutin phương pháp đo quang 22 2.3.2 Bào chế phytosome rutin 23 2.3.3 Xác định độ tan, hệ số phân bố rutin, phytosome rutin bào chế 25 2.3.4.Phương pháp làm giảm kích thước tiểu phân 26 2.3.5 Phương pháp đánh giá số đặc tính phytosome 26 2.3.6 Phương pháp đánh giá khả tạo phức dược chất phospholipid 27 2.3.7 Phương pháp đánh giá hiệu suất phun sấy phytosome rutin 27 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 27 CHƢƠNG : THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 28 3.1 Định lượng rutin phương pháp đo quang 28 3.2 Khảo sát hệ số phân bố dầu nước độ tan môi trường rutin 29 3.3 Bào chế phytosome Rutin 30 3.3.1 Lựa chọn dung môi 30 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ phản ứng 31 3.3.3 Khảo sát ảnh hưởng thời gian phản ứng 33 3.3.4 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ mol chất tham gia phản ứng 34 3.3.5 Khảo sát ảnh hưởng cholesterol đến độ ổn định phytosome rutin36 3.3.6 Lựa chọn phương pháp loại dung môi 37 3.3.7 Khảo sát điều kiện phun sấy 39 3.4 Đánh giá số đặc tính phytosome bào chế 40 3.6 Đánh giá khả tạo phức hợp rutin phospholipid phytosome phương pháp vật lý 42 3.7 Bàn luận 45 3.7.1 Về phương pháp bào chế phytosome rutin 45 3.7.2 Về xây dựng công thức bào chế phytosome rutin 45 3.7.3 Về đặc tính phytosome rutin sau bào chế 45 3.7.4 Đánh giá khả tương tác dược chất phopsholipid 46 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 47 KẾT LUẬN 47 ĐỀ XUẤT 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới: ThS Nguyễn Văn Khanh PGS TS Nguyễn Thanh Hải Là người thầy tận tình bảo, hướng dẫn giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận Đồng thời thầy ln động viên để tơi vượt qua khó khăn suốt q trình thực hiện, giúp tơi hồn thiện khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn đến tồn thể thầy cô Bộ môn Bào chế Công nghệ dược phẩm thầy cô Bộ môn Dược lý - Dược lâm sàng, Dược cổ truyền, Hóa dược Kiểm nghiệm thuốc giúp đỡ t ạo điều kiện q trình làm khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn tới th ầ y ban giám hiệu, phịng ban cán nhân viên Khoa Y Dược – Đại h ọc Quốc gia Hà Nội, người dạy bảo suốt năm học tập trường Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè người giúp đỡ, động viên q trình học tập làm khóa luận Hà Nội, tháng năm 2018 Sinh viên Đoàn Thị Phương DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Nội dung 1H-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân CH Cholesterol DĐVN Dược điển Việt Nam DSC Phân tích nhiệt vi sai FTIR Quang phổ hồng ngoại chuyển đổi HPLC Sắc kí lỏng hiệu cao HSPC Phosphatidylcholin đậu nành hydrogen hóa (Hydrogenated Soy Phosphatidylcholin) KTTP Kích thước tiểu phân NSX Nhà sản xuất PC Phosphatidylcholin PDI Chỉ số phân bố KTTP SEM Kính hiển vị điện tử quét SKD Sinh kh ả dụng TKHH Tinh khiết hóa học TEM Kính hiển vi điện tử truyền qua XRD Nhiễu xạ tia X (X-Ray diffraction) DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Cấu trúc Rutin [2] Hình 1.2 Cấu tạo phytosome [2] Hình 1.3 Cấu trúc phân tử phosphatidylcholin đậu nành hydrogen hóa [16] Hình 2.1 Sơ đồ quy trình bào chế Phytosome rutin 24 Hình 3.1 Quét độ hấp thụ quang dung dịch rutin chuẩn bước sóng từ 800 nm đến 200 nm 28 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn độ hấp thụ quang rutin theo nồng độ bước sóng 257 nm 29 Hình 3.3 KTTP PDI hỗn dịch phytosome rutin theo nhiệt độ phản ứng 32 Hình 3.4 KTTP, PDI hỗn dịch phytosome rutin theo thời gian phản ứng 34 Hình 3.6 KTTP PDI hỗn dịch phytosome rutin theo tỉ lệ mol Ru:PC:CH .37 Hình 3.7 KTTP, PDI phytosome rutin bào chế theo hai phương pháp khác 38 Hình 3.8 Sơ đồ quy trình bào chế phytosome rutin phương pháp phun sấy .40 Hình 3.10 Phổ IR Rutin, PC, CH phytosome 43 Hình 3.11 Hình ảnh phổ nhiễu xạ tia X Rutin, PC, CH phytosome .43 DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Một số sản phẩm rutin thị trường Bảng 1.2 Sự khác phytosome liposome Bảng 1.3 Một số sản phẩm phytosome thị trường 11 Bảng 1.4 Một số nghiên cứu bào chế phytosome giới 14 Bảng 1.5 Một số nghiên cứu bào chế phytosome Việt Nam 17 Bảng 2.1 Nguyên liệu, hóa chất nghiên cứu 21 Bảng 3.1 Độ hấp thụ quang rutin theo nồng độ bước sóng 257 nm 29 Bảng 3.2 Một số đặc tính rutin (n=3) 30 Bảng 3.3 Các thông số kĩ thuật bào chế phytosome rutin phương pháp bốc dung môi, sử dụng dung môi khác 30 Bảng 3.4 Một số đặc tính phytosome bào chế theo hai phương pháp hiệu suất phytosome hóa (n=3) 31 Bảng 3.5 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch phytosome rutin theo nhiệt độ phản ứng (n=3) 32 Bảng 3.6 KTTP, PDI, th ế zeta hỗn dịch phytosome rutin theo thời gian phản ứng (n=3) 33 Bảng 3.7 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch phytosome rutin theo tỉ lệ mol Rutin:PC (n=3) 35 Bảng 3.8 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch phytosome rutin theo tỉ lệ mol rutin:PC:CH (n = 3) 36 Bảng 3.9 KTTP, PDI, zeta phytosome rutin bào chế theo hai phương pháp bốc dung môi phun sấy (n=3) 38 Bảng 3.10 Hiệu suất phun sấy phytosome rutin thu phun sấy với nhiệt độ khác 39 Bảng 3.11 Hiệu suất phun sấy phytosome rutin thu phun sấy với tốc độ khác 39 Bảng 3.12 Một số đặc tính phytosome rutin bào chế phương pháp phun sấy (n=3) 41 [27] Zahra Hooresfand et al (2015), "Preparation and characterization of rutin - loaded nanophytosomes", Pharm Sci, 21 (3), 145-151 [28] Malay K et al (2013), "Phytosomes: an overview", Biologically Active Products from Nature, (3), 7-11 [29] Joseph A Kareparamban et al (2012), "Phytosome: a novel revolution in herbal drugs", IJRPC, (2), 299-310 [30] Junaid Khan et al (2013), "Recent advances and future prospects of phyto-phospholipid complexation technique for improving pharmacokinetic profile of plant actives", Journal of controlled release, 168 (1), 50-60 [31] Wonhwa Lee et al (2012), "Barrier protective effects of rutin in LPS-induced inflammation in vitro and in vivo", Food and chemical toxicology, 50 (9), 3048-3055 [32] Jing Li et al (2015), "A review on phospholipids and their main applications in drug delivery systems", Asian journal of pharmaceutical sciences, 10 (2), 81-98 [33] G Monica et al (2014), "Herbosomes: A potential carriers for the bioavailability enhancement of herbal extracts", World journal of pharmacy and pharmaceutical sciences, (10), 1052-1079 [34] Navneet Nagpal et al (2016), "Designing of a phytosome dosage form with Tecomella undulata as a novel drug delivery for better utilization", Pakistan journal of pharmaceutical sciences, 29 (4) [35] Chetan K Nimbalkar et al (2017), "PHYTOSOMES-NOVEL DRUG DELIVERY SYSTEM", Indian Journal of Drugs, (1), 16-36 [36] Medina OP et al (2004), "Nanoparticles in cancer", Current Pharm Des, 10 (2981-2989) [37] Raja Kumar Parabathina et al (2010), "Vitamin-E, Morin, Rutin, Quercetin prevents tissue biochemical changes induced by Doxorubicin in oxidative stress conditions: Effect on heart, liver and kidney homogenates", J Chem Pharm Res, (4), 826-834 [38] Soo Nam Park et al (2013), "Preparation of quercetin and rutinloaded ceramide liposomes and drug-releasing effect in liposome-in-hydrogel complex system", Biochemical and biophysical research communications , 435 (3), 361-366 [39] Carla Aparecida Pedriali et al (2008), "The synthesis of a water- soluble derivative of rutin as an antiradical agent", Química Nova, 31 (8), 21472151 [40] Solmaz Rasaie et al (2014), "Nano phytosomes of quercetin: A promising formulation for fortification of food products with antioxidants", Pharmaceutical sciences, 20 (3), 96 [41] Rudra Pratap Singh et al (2015), "Preparation and evaluation of phytosome of Lawsone", International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research, (12), 5217 [42] Alejandro Sosnik et al (2015), "Advantages and challenges of the spray-drying technology for the production of pure drug particles and drugloaded polymeric carriers", Advances in colloid and interface science, 223 (40-54 [43] Surendra Tripathy et al (2013), "A review on phytosomes, their characterization, advancement & potential for transdermal application", Journal of Drug Delivery and Therapeutics, (3), 147-152 PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: Hình ảnh phytosome rutin bào chế theo phương pháp phun sấy Hình 1.1 Hình ảnh phytosome rutin bào chế theo phƣơng pháp phun sấy PHỤ LỤC 2: Hình ảnh phổ hồng ngoại IR Hình 2.1: Phổ hồng ngoại IR rutin Hình 2.2 Phổ hồng ngoại IR phospholipid (PC) Hình 2.3 Phổ hồng ngoại IR cholesterol Hình 2.4 Phổ IR Phytosome PHỤ LỤC 3: Hình ảnh phổ nhiễu xạ tia X Faculty of Chemistry, HUS, VNU, D8 ADVANCE-Bruker - M3 2500 2400 d=36.445 2300 2200 2100 2000 1900 1800 1700 1600 1400 1300 1200 1100 1000 800 700 d=17.538 900 d=29.525 Lin (Cps) 1500 600 500 400 300 200 100 10 20 30 40 2-Theta - Scale File: PhuongYDuoc M3.raw - Type: 2Th/Th locked - Start: 2.000 ° - End: 59.990 ° - Step: 0.030 ° - Step time: 0.5 s - Temp.: 25 °C (Room) - Time Started: 13 s - 2-Theta: 2.000 ° - Theta: 1.000 ° - Chi: 0.00 ° - Phi: 0.00 ° - X: Hình 3.1 Phổ nhiễu xạ tia X rutin Hình 3.2 Phổ nhiễu xạ tia X phospholipid (PC) 50 Lin (Cps) Faculty of Chemistry, HUS, VNU, D8 ADVANCE-Bruker - M2 600 500 d=8.578 300 d=10.566 d=17.159 d=12.522 400 200 100 10 2-Theta - Scale File: PhuongYDuoc M2.raw - Type: 2Th/Th locked - Start: 2.000 ° - End: 59.990 ° - Step: 0.030 ° - Step time: 0.5 s - Temp.: 25 °C (Room) - Time Started: 12 s - 2-Theta: 2.000 ° - Theta: 1.000 ° - Chi: 0.00 ° - Phi: 0.00 ° - X: Hình 3.3 Phổ nhiễu xạ tia X Cholesterol Faculty of Chemistry, HUS, VNU, D8 ADVANCE-Bruker - M1 1000 900 800 700 Lin (Cps) 600 500 400 300 200 100 10 20 30 40 50 2-Theta - Scale File: PhuongYDuoc M1.raw - Type: 2Th/Th locked - Start: 2.000 ° - End: 59.990 ° - Step: 0.030 ° - Step time: 0.5 s - Temp.: 25 °C (Room) - Time Started: 10 s - 2-Theta: 2.000 ° - Theta: 1.000 ° - Chi: 0.00 ° - Phi: 0.00 ° - X: Hình 3.4 Phổ nhiễu xạ tia X Phytosome PHỤ LỤC 4: Hình ảnh phổ nhiệt vi sai DSC DSC131 HeatFlow/mW Exo -2 Peak :102 -4 Onset Poin Enthalpy /J -6 -8 -10 50 Hình 4.1 Phổ nhiệt vi sai DSC rutin Hình 4.2 Phổ nhiệt vi sai DSC phospholipid (PC) Figu 23/0 DSC131 HeatFlow/mW Exo 10 Peak :65.2133 °C Onset Point :58.1585 °C Enthalpy /J/g : 16.7774 (Endothermic effect) -2 Onset Point :130.7260 °C Enthalpy /J/g : 31.0918 (Endothermic effect) -4 -6 50 75 100 125 150 175 200 Furnace temperature /°C Hình 4.3 Phổ nhiệt vi sai DSC cholesterol Figu 23/0 DSC131 HeatFlow/mW Exo -5 -10 -15 -20 -25 Peak :183.6188 °C Onset Point :165.5644 °C Enthalpy /J/g : 158.5566 (Endothermic effect) -30 -35 50 75 100 125 150 175 200 Furnace temperature /°C Hình 4.4 Phổ nhiệt vi sai DSC phytosome rutin bào chế đƣợc PHỤ LỤC 5: KTTP, phân bố KTTP, zeta mẫu phytosome rutin bào chế phƣơng pháp phun sấy Hình 5.1 KTTP, PDI mẫu phytosome rutin Hình 5.2 Thế zeta mẫu phytosome rutin PHỤ LỤC 6: Tiêu chuẩn sở rutin nguyên liệu Hình 6.1 Tiêu chuẩn sở rutin nguyên liệu 10 ... ban đầu) x 100 % [11] 13 1.2.9 Một số nghiên cứu bào chế phytosome Bảng 1.4 Một số nghiên cứu bào chế phytosome giới Phytosome phƣơng pháp bào chế Phytosome rutin [22] - Phương pháp: Bốc dung môi... số nghiên cứu bào chế phytosome giới 14 Bảng 1.5 Một số nghiên cứu bào chế phytosome Việt Nam 17 Bảng 2.1 Nguyên liệu, hóa chất nghiên cứu 21 Bảng 3.1 Độ hấp thụ quang rutin. .. quy trình bào chế có nhược điểm sử dụng dung môi hữu độc hại methanol, diclomethan, n-hexan Do thực đề tài ? ?Tiếp tục nghiên cứu bào chế phytosome rutin? ?? với hai mục tiêu chính: Tiếp tục hồn thiện