Bài viết đánh giá tỷ lệ thai sinh hóa và thai lâm sàng các cặp vợ chồng vô sinh không có tinh trùng bằng phương pháp chọc hút tinh trùng từ mào tinh/ tiêm tinh trùng vào bào tương noãn và một số yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ có thai.
Tạp chí phụ sản - 11(2), 139 - 142, 2013 kết yế tố ảnh hưởng đến kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn tinh trùng lấy từ mào tinh Hồ Sỹ Hùng(1), Trần Thị Phương Mai(2) (1) Bệnh viện Phụ Sản Trung ương, (2) Trường Đại học Y Hà Nội Tóm tắt Mục tiêu: đánh giá tỷ lệ thai sinh hóa thai lâm sàng cặp vợ chồng vơ sinh khơng có tinh trùng phương pháp chọc hút tinh trùng từ mào tinh/ tiêm tinh trùng vào bào tương noãn số yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ có thai Phương pháp: nghiên cứu tiên cứu can thiệp, sử dụng phần mềm SPSS 16.0 để phân tích kết Kết quả: 170 cặp vợ chồng với 226 chu kỳ IVF/PESA/ICSI Tuổi trung bình vợ 28,45 + 4,5 năm, chồng 32,41 + 5,7 năm, số năm vô sinh trung bình 4,09 + 3,4 năm năm Số nỗn trung bình 8,62 + 4,3 nỗn (1947 nỗn) Số phơi trung bình 5,92 + 3,4 phơi (1337 phôi) Tỷ lệ thụ tinh 68,67% Tỷ lệ thai sinh hóa thai lâm sàng số chu kỳ kích thích buồng trứng tương ứng 39,4% 36,3% Từ khố: tỷ lệ thai sinh hóa, tỷ lệ thai lâm sàng, tiêm tinh trùng vào bào tương noãn, tinh trùng từ mào tinh I ĐẶT VẤN ĐỀ Vô sinh khơng có tinh trùng mẫu tinh dịch chiếm khoảng 2-5% quần thể nam giới Nếu trước cặp vợ chồng khơng thể có đứa sinh học (biological child) ngày với phát triển kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI) Palermo báo cáo lần năm 1992 tạp chí Lancet [1] kỹ thuật trích xuất tinh trùng từ mào tinh tinh hoàn giúp đỡ nguyện vọng đáng họ Mục tiêu nghiên cứu đánh giá tỷ lệ thai sinh hóa thai lâm sàng trường hợp tiêm tinh trùng vào bào tương nỗn tinh trùng trích xuất từ mào tinh số yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ có thai II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Đối tượng Đối tượng nghiên cứu gồm 170 cặp vợ chồng vơ sinh chồng khơng có tinh trùng điều ABSTRACT RESULTS AND FACTORS AFFECTING THE INTRA CYTOPLASMIC SPERM INJECTION WITH SPERM ASPIRATED FROM EPYDIDYMIS Objectives: to assess biochemical pregnancy rate, clinical pregnancy rate and factors affecting pregnancy rate in treatment azoospermic men by PESA/ICCSI method Methods: prospective study intervention, using SPSS 16.0 software to analyze the results Results: 170 couples with 226 cycles of IVF/PESA/ICSI The average age of the wives was 28.45 + 4.5 years, husband was 32.41 + 5.7 years, the average duration of infertility was 4.09 + 3.4 years The average number of oocytes 8.62 + 4.3 (1947 oocytes) The average number of embryos 5.92 + 3.4 embryos (1337 embryos) Fertilization rate was 68.67% Biochemical pregnancy rate and clinical pregnancy per cycles of ovarian stimulation, 39.4% and 36.3% respectively Keywords: biochemical pregnancy rate, clinical pregnancy rate, intra cytoplasmic sperm injection , percutainous epydidymis sperm aspiration trị phương pháp thụ tinh ống nghiệm/ tiêm tinh trùng lấy từ mào tinh vào bào tương noãn 226 chu kỳ thụ tinh ống nghiệm với tổng số 1947 noãn tiến hành tiêm tinh trùng vào bào tương 2.2 Phương pháp nghiên cứu: phương pháp nghiên cứu tiến cứu can thiệp Các bước nghiên cứu − Các cặp vợ chồng vơ sinh chồng khơng có tinh trùng, vợ có khơng kèm theo ngun nhân vô sinh Được khám làm xét nghiệm cần thiết; − Kích thích buồng trứng theo phác đồ thụ tinh ống nghiệm; − Chọc hút noãn đủ điều kiện/chọc hút tinh trùng từ mào tinh hồn người chồng vào ngày chọc hút nỗn; − Xử lý noãn (tách noãn), lọc rửa mẫu tinh trùng; Tạp chí Phụ Sản Tập 11, số 02 Tháng 5-2013 139 VÔ SINH & HỖ TRỢ SINH SẢN Hồ Sỹ Hùng, Trần Thị Phương Mai − Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn; − Ủ noãn sau tiêm tủ cấy 370C với nồng độ CO2 5%; − Đánh giá thụ tinh sau tiêm tinh trùng vào bào tương nỗn 16-18 − Chuyển phơi sau ni cấy phơi − Xác định thai sinh hóa xét nghiệm βhCG máu, xác định thai lâm sàng siêu âm Các biến số nghiên cứu Bảng Kết điều trị Chỉ số nghiên cứu Phác đồ ngắn Phác đồ kích thích Phác đồ dài buồng trứng Phác đồ antagonist Tổng liều FSH trung bình (IU) Số nỗn trung bình Số phơi trung bình Số phơi chuyển trung bình Tỷ lệ thụ tinh Tỷ lệ làm tổ Tỷ lệ thai sinh hóa (%) Tỷ lệ đẻ thai lâm sàng (%) Kết 37 (16,4%) 162 (71,7%) 27 (11,9%) 1943,58 + 633,3 8,62 + 4,3 (1947) 5,92 + 3,4 (1337) 3,5 + 1,2 68,67% (1337/1947) 121/783 (15,45%) 39,4 36,3 − Tuổi người vợ; − Tuổi người chồng; − Thời gian vô sinh, loại vơ sinh; − Phác đồ kích thích buồng trứng, liều lượng FSH sử dụng; − Số noãn, số phôi thu được, chất lượng phôi sau Nhận xét: Số nỗn trung bình 8,62 + 4,3 nỗn, thụ tinh; tổng số nỗn 1947 nỗn Số phơi trung bình − Tỷ lệ thụ tinh sau tiêm tinh trùng vào bào 5,92 + 3,4 phôi, tổng số phôi 1337 phơi Tỷ lệ thụ tương nỗn; tinh 68,67% Tỷ lệ thai sinh hóa thai lâm sàng − Số trường hợp phôi đông lạnh; số chu kỳ kích thích buồng trứng tương ứng − Kết chọc hút tinh trùng từ mào tinh 39,4% 36,3% − Số nỗn, số phơi thu được, chất lượng phơi sau thụ tinh; Xử lý số liệu: Số liệu thu thập xử lý − Tỷ lệ thụ tinh sau tiêm tinh trùng vào bào tương noãn; 16.0 So sánh giá trị trung 3.3 Một số yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ có thai − phần Số trườngmềm hợp phôiSPSS đông lạnh; test sotinh sánh tỷ lệ χ2 test *Tuổi thời gian vô sinh − bình Kết quảbằng chọc hút T tinh trùngvà từ mào Xử Sự lý sốkhác liệu: Sốbiệt liệu thu xử lý phần mềm 16.0 sánh giá trị trung Bảng Tuổi người vợ, thời gian vô sinh tỷ lệ có thai cóthậpý nghĩa thống kê SPSS p < So 0,05 bình T test so sánh tỷ lệ χ2 test Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê p < 0,05 III KẾT QUẢ III KẾT QUẢ 3.1 < 35 Tuổi (năm) > 35 < 10 Thời gian vô sinh (năm) > 10 3.1 Đặc điểm cặp vợ chồng nghiên cứu Đặc điểm cặp vợ chồng nghiên cứu Đặc điểm cặp vợ chồng Tuổi vợ Tuổi chồng Số năm vô sinh Ngun nhân vơ sinh Khơng có tinh trùng Tắc vịi tử cung LNMTC Loại vơ sinh vợ Vô sinh I Vô sinh II 28,45 100 7,1 1,2 89,4 10,6 50 100 Tỷ lệ thai lâm sàng (%) 38,5 (77/200) 21,7 (5/23) 38,5 (80/208) 13,3 (2/15) χ2 p 2,49 0,114 3,80 0,051 Nhận xét: - Khơng có khác biệt tỷ lệ thai lâm sàng hai nhóm tuổi người vợ 35 35 tuổi với χ2 = 2,49, p > 0,05 - Khơng có khác biệt tỷ lệ thai lâm sàng hai nhóm bệnh nhân có thời gian vơ sinh 10 năm với χ2 = 3,8; p > 0,05 32,41 4,09 Yếu tố 150 *Tỷ lệ thai lâm sàng chất lượng phôi chuyển Biểucặp đồvợ1.chồng Đặc điểm cặp vợ chồng vô sinh Biểu đồ Đặc điểm vô sinh Nhận xét: 170 cặp vợ chồng tham gia nghiên Bảng Chất lượng phôi liên quan tỷ lệ thai lâm sàng Nhận xét: 170 cặp vợ chồng tham gia nghiên cứu có tuổi trung bình vợ 28,45 + 4,5 năm, cứu có tuổi trung bình vợ 28,45 + 4,5 năm, χ2 Tỷ lệ thai lâm sàng (%) p chồng 32,41 + 5,7 năm Số năm vơ sinh trung bình 4,09 + 3,4 năm, lâu 19 năm chồng 32,41 + 5,7 năm Số năm vô sinh trung phơi tốt 2,5 (1/40) năm Tất chồng khơng có tinh trùng, nhiên có 7,1% kèm theo vợ bị tắc 11,81 0,001 bình 4,09 + 3,4 năm, lâu 19 năm phơi tốt 32,3 (10/31) vịi tử cung, 1,2% bị lạc nội mạc tử cung Có 10,6% vợ bị vô sinh thứ phát 89,4% vợ bị vô phôi tốt 31,8 (14/44) năm sinhlà ngun phát Tất chồng khơng có tinh trùng, 5,52 0,019 > phôi tốt 52,8 (57/108) kèmtrứng theo vợquả bị điều tắctrịvòi tử cung, 1,2% 3.2.nhiên Đặc điểmcó kích7,1% thích buồng kết bị1.lạc nộiđiều mạc Nhận xét: Bảng Kết trị tử cung Có 10,6% vợ bị vô sinh thứ Chỉ89,4% số nghiênvợ cứubị vô sinh nguyên phát Kết phát - Có khác biệt tỷ lệ có thai nhóm Phác đồ ngắn 37 (16,4%) chuyển phơi tốt với nhóm khơng có phơi tốt Phác đồ kích thích Phác đồ dài 162và (71,7%) 3.2 Đặc điểm kích thích buồng trứng kết với χ2 = 11,81; p < 0,05 buồng trứng 27 (11,9%) - Có khác biệt tỷ lệ có thai nhóm điều trị Phác đồ antagonist Tạp chí Phụ Sản 140 Tập 11, số 02 Tháng 5-2013 Tạp chí phụ sản - 11(2), 139 - 142, 2013 chuyển phơi tốt với nhóm chuyển phôi tốt với χ2 = 5,52; p < 0,05 thụ tinh ống nghiệm IV BÀN LUẬN Tỷ lệ thụ tinh tính tổng số phơi/ tổng số noãn chọc hút Trong số 170 cặp vợ chồng điều trị vô sinh với 226 chu kỳ kích thích buồng trứng thu tổng số 1947 nỗn thực tiêm tinh trùng vào bào tương, tổng số thụ tinh 1337 phôi, đạt tỷ lệ thụ tinh 68,67% Tỷ lệ thụ tinh nghiên cứu tương tự nghiên cứu Du Jin tương ứng 71,4% 73.29% [3, 4] cao nghiên cứu Mansour 56,6% [5] Tuy nhiên nghiên cứu chúng tơi có chu kỳ khơng có phơi chuyển khơng thụ tinh, ngun nhân chất lượng nỗn xấu Tỷ lệ làm tổ tính số túi thai/tổng số phơi chuyển Trong nghiên cứu có 121 túi thai tổng số 783 phôi chuyển vào buồng tử cung, đạt tỷ lệ làm tổ 15,45% Kết tương đương nghiên cứu Friedler cộng có tỷ lệ thụ tinh 13% (6) Đặc điểm cặp vợ chồng vô sinh Tổng số 170 cặp vợ chồng điều trị phương pháp thụ tinh ống nghiệm/tiêm tinh trùng vào bào tương noãn tinh trùng lấy từ mào tinh với tổng cộng 226 chu kỳ kích thích buồng trứng, 223 chu kỳ chuyển phôi tươi chu kỳ khơng chuyển phơi khơng có phơi chuyển Tuổi trung bình người vợ 28,45 + 4,5 năm, tuổi trung bình chồng 32,41 + 5,7 năm Có 7,1% vợ bị tắc vịi tử cung 1,2% bị lạc nội mạc tử cung kèm theo nguyên nhân vơ sinh chồng khơng có tinh trùng Các trường hợp tắc vịi tử cung có tiền sử bị mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục viêm nhiễm tiểu khung Ngồi có 10,6% trường hợp vô sinh thứ phát, trường hợp chồng bị vô sinh thứ phát người vợ có với chồng thứ Đặc điểm kích thích buồng trứng Một đặc điểm điều trị vô sinh nam giới nguyên nhân vô sinh nam giới việc điều trị lại chủ yếu tiến hành người vợ kết thành công phụ thuộc nhiều vào yếu tố tiên lượng người phụ nữ Một yếu tố ảnh hưởng tuổi người vợ, mức độ đáp ứng buồng trứng kích thích nang nỗn, thời gian vơ sinh Có 71,7% bệnh nhân dùng phác đồ dài, 16,4% dùng phác đồ ngắn 11,9% dùng phác đồ sử dụng chất đối vận Tổng liều FSH sử dụng cho chu kỳ theo phác đồ 1943,58 + 633,3 đơn vị Tổng liều FSH sử dụng nghiên cứu thấp so với nghiên cứu Rosenlund cộng [2] Sở dĩ nghiên cứu tổng liều FSH sử dụng bệnh nhân chúng tơi cịn trẻ, dự trữ buồng trứng cịn tốt Đây đặc điểm cặp vợ chồng vơ sinh khơng có tinh trùng, bệnh nhân thường khám phát sớm nên tuổi người vợ khơng q cao, người vợ kèm theo ngun nhân vô sinh khác kèm theo Tổng số 226 chu kỳ kích thích buồng trứng với 1947 nỗn chọc hút được, với số nỗn trung bình 8,62 + 4,3 nỗn/chu kỳ, số lượng noãn hợp lý cho chu kỳ kích thích buồng trứng Tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ làm tổ Tỷ lệ thai sinh hóa tỷ lệ thai lâm sàng Theo định nghĩa tổ chức y tế giới, thai sinh hóa trường hợp định lượng βhCG máu 25 đơn vị/ml chưa phát triển thành thai lâm sàng, thai lâm sàng trường hợp thai siêu âm có túi thai khơng tính đến vị trí làm tổ túi thai Trong nghiên cứu tỷ lệ thai sinh hóa 39,4% tỷ lệ thai lâm sàng 36,3% tổng số chu kỳ kích thích buồng trứng Tỷ lệ thai lâm sàng tương tự với nghiên cứu Mansour cộng 37% [5] cao so với nghiên cứu Friedler va cộng 29% [6] tác giả xác định tỷ lệ thai tổng số chu kỳ chuyển phơi cịn nghiên cứu chúng tơi tổng số chu kỳ kích thích buồng trứng Một số yếu tố ảnh hưởng đến kết thụ tinh phương pháp tiêm tinh trùng vào bào tương noãn Theo nghiên cứu nhiều tác giả giới yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ có thai sau thụ tinh ống nghiệm/tiêm tinh trùng vào bào tương noãn kết luận tuổi người vợ, số năm vô sinh không ảnh hưởng đến kết thụ tinh Trong nghiên cứu chúng tơi thấy khơng có mối liên quan tuổi người vợ Tạp chí Phụ Sản Tập 11, số 02 Tháng 5-2013 141 VÔ SINH & HỖ TRỢ SINH SẢN số năm vô sinh với tỷ lệ thụ tinh, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê với p > 0,05 (bảng 2) Tuy nhiên tỷ lệ thai lâm sàng liên quan chặt chẽ với chất lượng phôi chuyển số lượng phôi tốt chuyển Nếu bệnh nhân khơng có phơi tốt chuyển tỷ lệ có thai 2,5% bệnh nhân có phơi tốt chuyển tỷ lệ có thai tăng lên tới 32,3% chuyển phơi tốt tỷ lệ có thai 52,8% (bảng 3) Nghiên cứu Zorn cộng lại cho thấy kết thụ tinh thai nghén phụ thuộc vào phác đồ loại FSH sử dụng kích thích buồng trứng [7] Một yếu tố quan trọng thực tiêm tinh trùng vào bào tương noãn kỹ người thực kỹ thuật khơng tốt làm tổn thương màng tế bào nỗn hay làm tổn thương thoi vơ sắc làm giảm tỷ lệ thụ tinh giảm tỷ lệ có thai, nhiên để đánh giá kỹ thuật khó nghiên cứu chúng tơi có số người thực nên giảm đáng kể sai số V KẾT LUẬN Qua nghiên cứu 170 cặp vợ chồng với 226 chu kỳ kích thích buồng trứng, 223 chu kỳ chuyển phơi thu 1947 nỗn, 1337 phơi Tỷ lệ thai sinh hóa số chu kỳ kích thích buồng trứng 39,4% tỷ lệ thai lâm sàng 36,3% Tỷ lệ có thai khơng liên quan đến tuổi vợ thời gian vơ sinh có liên quan đến chất lượng phơi chuyển Tạp chí Phụ Sản 142 Tập 11, số 02 Tháng 5-2013 Hồ Sỹ Hùng, Trần Thị Phương Mai TÀI LIỆU THAM KHẢO Palermo G, Joris H, Devroey P Pregnancies after intracytoplasmic sperm injection of single spermatozoon into an oocyte Lancet 1992; 340: 17–8 Rosenlund B; Westlander G; Wood M; Lundin K; Reismer E; Hillensjo T Sperm retrieval and fertilization in repeated percutaneous epididymal sperm aspiration Human reprod 1998, vol.13, no10, pp 2805-2807 Du Q, Yang DL, Pan BC, He LX, Wang XX, Song YS, Wu B Intracytoplasmic sperm injection for obstructive azoospermia Zhonghua Nan Ke Xue 2010 Oct;16(10):922-4 Jin L, Jiang LY, Zhu GJ, Liu Q, Wei YL, Hu J, Ren XL Comparison between the results of ICSI with fresh and with frozen-thawed sperm obtained by PESA to treat azoospermia Zhonghua Nan Ke Xue 2006 May;12(5):443-5, 449 R.T.Mansour, A.Kamal, I.Fahmy, N.Tawab, G.I.Serour, M.A.Aboulghar Intracytoplasmic sperm injection in obstructive and non-obstructive azoospermia Human Reproduction ; 1997; vol.12 no.9 pp.1974–1979 S.Friedler, A.Raziel, D.Strassburger, Y.Soffer, D.Komarovsky and R.Ron-El Testicular sperm retrieval by percutaneous fine needle sperm aspiration compared with testicular sperm extraction by open biopsy in men with nonobstructive azoospermia Human Reproduction , 1997; vol.12 no.7 pp.1488–1493 Zorn B, Virant-Klun I, Drobni S, Sinkovec J, Meden-Vrtovec H Male and female factors that influence ICSI outcome in azoospermia or aspermia Reprod Biomed Online 2009 Feb;18(2):168-76 ... số yếu tố ảnh hưởng đến kết thụ tinh phương pháp tiêm tinh trùng vào bào tương noãn Theo nghiên cứu nhiều tác giả giới yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ có thai sau thụ tinh ống nghiệm /tiêm tinh trùng. .. Hùng, Trần Thị Phương Mai − Tiêm tinh trùng vào bào tương noãn; − Ủ noãn sau tiêm tủ cấy 370C với nồng độ CO2 5%; − Đánh giá thụ tinh sau tiêm tinh trùng vào bào tương noãn 16-18 − Chuyển phôi sau... trứng [7] Một yếu tố quan trọng thực tiêm tinh trùng vào bào tương noãn kỹ người thực kỹ thuật khơng tốt làm tổn thương màng tế bào noãn hay làm tổn thương thoi vơ sắc làm giảm tỷ lệ thụ tinh giảm