Định lượng đồng thời sulfamethoxazol và trimethoprim trong chế phẩm bằng quang phổ tử ngoại kết hợp với toán hóa

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ NGỌC THỤY ĐỊNH LƢỢNG ĐỒNG THỜI SULFAMETHOXAZOL VÀ TRIMETHOPRIM TRONG CHẾ PHẨM BẰNG QUANG PHỔ TỬ NGOẠI KẾT HỢP VỚI TỐN HĨA KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI - 2020 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ NGỌC THỤY MÃ SINH VIÊN: 1501488 ĐỊNH LƢỢNG ĐỒNG THỜI SULFAMETHOXAZOL VÀ TRIMETHOPRIM TRONG CHẾ PHẨM BẰNG QUANG PHỔ TỬ NGOẠI KẾT HỢP VỚI TỐN HĨA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Vũ Đặng Hồng Nơi thực hiện: Bộ mơn Hóa phân tích – Độc chất HÀ NỘI - 2020 LỜI CẢM ƠN Khoá luận đƣợc thực Bộ mơn Hóa phân tích độc chất trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Lời em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới PGS.TS Vũ Đặng Hồng - Giảng viên cao cấp Bộ mơn Hóa phân tích độc chất Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội dành nhiều thời gian, công sức, tận tình hƣớng dẫn, giúp đỡ em suốt trình nghiên cứu hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn chị Lƣu Thị Ngọc Hân (Trung tâm Kiểm nghiệm Thuốc, Mỹ phẩm, Thực phẩm Hà Nội) bạn Lã Thị Phƣơng Thảo nhiệt tình giúp đỡ đồng hành em suốt thời gian thực khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô, anh chị kỹ thuật viên Bộ mơn Hóa phân tích độc chất – Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội tận tình bảo tạo điều kiện tốt để em hồn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu, phòng ban, thầy tồn thể cán cơng nhân viên Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội trực tiếp giảng dạy giúp đỡ em suốt trình học tập hoạt động trƣờng Cuối em xin gửi lời cảm ơn tới ngƣời thân, bạn bè ln động viên khuyến khích em trình học tập nhƣ thời gian em thực đề tài Hà Nội, tháng 06 năm 2020 Sinh viên Nguyễn Thị Ngọc Thụy MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan đối tƣợng nghiên cứu 1.1.1 Một số đặc điểm lý hóa sulfamethoxazol trimethoprim 1.1.2 Một số phương pháp định lượng sulfamethoxazol trimethoprim 1.2 Phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với tốn hóa 1.2.1 Định luật Lambert-Beer 1.2.2 Phương pháp hiệu chuẩn nhị biến 10 1.2.3 Phương pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với tốn hóa 11 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Đối tƣợng - nguyên liệu thiết bị 16 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 16 2.1.2 Nguyên liệu thiết bị 16 2.2 Phƣơng pháp thực nghiệm 18 2.2.1 Xây dựng phương pháp định lượng đồng thời SUL TRI quang phổ tử ngoại kết hợp với tốn hóa 18 2.2.2 Ứng dụng phương pháp quang phổ nêu để định lượng đồng thời thử độ hoà tan số chế phẩm chứa SUL TRI 18 2.2.3 Xử lý kết thực nghiệm 18 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ BÀN LUẬN 19 3.1 Chuẩn bị mẫu nghiên cứu 19 3.1.1 Chuẩn bị dung môi 19 3.1.2 Chuẩn bị mẫu nghiên cứu 19 3.2 Xây dựng phƣơng pháp kết định lƣợng 20 3.2.1 Xác định khoảng cộng tính 20 3.2.2 Phương pháp nhị biến 21 3.2.3 Phương pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với toán hóa 23 3.2.4 Khảo sát tính thích hợp thuật toán áp dụng 24 3.2.5 Độ phương pháp 25 3.2.7 Kết định lượng 26 3.2.8 Thử độ hòa tan 28 3.3 Bàn luận 30 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tiếng Anh C Concentration CLS Classical Least Squares HPLC High Performance Liquid Chromatography Tiếng Việt Nồng độ Bình phƣơng tối thiểu thơng thƣờng Sắc ký lỏng hiệu cao Bình phƣơng tối thiểu nghịch ILS Inverse Least Squares RSD Relative standard deviation Độ lệch chuẩn tƣơng đối SD Standard deviation Độ lệch chuẩn STT SUL đảo Số thứ tự Sulfamethoxazole Sulfamethoxazol TB Trung bình TLTK Tài liệu tham khảo TRI UPLC UV – Vis Trimethoprim Ultra Performance Liquid Chromatography Ultraviolet - Visible Trimethoprim Sắc ký lỏng siêu hiệu Tử ngoại – Khả kiến DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số đặc điểm lý hóa sulfamethoxazol trimethoprim Bảng 1.2 Một số phƣơng pháp định lƣợng sulfamethoxazol trimethoprim Bảng 3.1 Phƣơng trình hồi quy tuyến tính bƣớc sóng lựa chọn 21 Bảng 3.2 Giá trị tuyệt đối ma trận K 22 Bảng 3.3 Các dung dịch ma trận nồng độ X 23 Bảng 3.4 Kết định lƣợng 11 dung dịch ma trận nồng độ X thuật toán (nhị biến, CLS ILS) 24 Bảng 3.5 Phần trăm tìm lại so với lƣợng thêm vào 100% 25 Bảng 3.6 Kết định lƣợng SUL chế phẩm nghiên cứu (% so với nhãn, n=3) 26 Bảng 3.7 Kết định lƣợng TRI chế phẩm nghiên cứu (% so với nhãn, n=3) 26 Bảng 3.8 Kết so sánh kiểm định thống kê t cặp (độ tin cậy 95%) quang phổ tử ngoại kết hợp với CLS HPLC 27 Bảng 3.9 Kết so sánh kiểm định thống kê t cặp (độ tin cậy 95%) quang phổ tử ngoại kết hợp với ILS HPLC 28 Bảng 3.10 Phần trăm hoạt chất hòa tan so với nhãn chế phẩm viên nén, viên nang 60 phút 30 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1 Phổ hấp thụ dung dịch chuẩn SUL 40 mg/L, TRI mg/L, phổ cộng phổ hỗn hợp với hàm lƣợng SUL, TRI tƣơng ứng 20 Hình 3.2 Đƣờng cong hòa tan viên nang Sulfareptol (n=6) 29 Hình 3.3 Đƣờng cong hịa tan viên nén Biseptol (n=6) 29 ĐẶT VẤN ĐỀ Cotrimoxazol phối hợp gồm sulfamethoxazol trimethoprim theo tỷ lệ 5:1 Sulfamethoxazol sulfonamid, có tác dụng kìm khuẩn cách ức chế tạo thành dihydrofolic acid vi khuẩn Trimethoprim dẫn chất pyrimidin, cách ức chế enzyme dihydrofolat reductase vi khuẩn, trimethoprim ức chế tạo thành acid tetrahydrofolic từ acid dihydrofolic Phối hợp sulfamethoxazol trimethoprim ức chế hai bƣớc liên tiếp chuyển hóa acid folic cotrimoxazol có tính chất hiệp đồng kháng khuẩn Cơ chế hiệp đồng chống lại phát triển vi khuẩn kháng thuốc làm cho thuốc có tác dụng vi khuẩn kháng lại thành phần thuốc [3] Cotrimoxazol đƣợc dùng để điều trị số bệnh nhiễm khuẩn nhƣ nhiễm khuẩn đƣờng tiết niệu; nhiễm khuẩn đƣờng hô hấp; đợt cấp viêm phế quản mạn nhiễm khuẩn đƣờng tiêu hóa Để định lƣợng đồng thời sulfamethoxazol trimethoprim chế phẩm, phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) thƣờng đƣợc sử dụng kiểm nghiệm thuốc thƣờng quy theo hƣớng dẫn Dƣợc điển Việt Nam V [2] Với mong muốn đề xuất phƣơng pháp định lƣợng đồng thời hai hoạt chất dạng bào chế khác (viên nén, viên nang, bột pha dung dịch ) kỹ thuật quang phổ tử ngoại (sử dụng dung mơi, hóa chất thông dụng, không qua chiết tách riêng thành phần) kết hợp với thuật toán nhƣ lựa chọn hai bƣớc sóng thích hợp (nhị biến), bình phƣơng tối thiểu thơng thƣờng (CLS) bình phƣơng tối thiểu nghịch đảo (ILS), đề tài: “Định lượng đồng thời sulfamethoxazol trimethoprim chế phẩm quang phổ tử ngoại kết hợp với tốn hóa” đƣợc tiến hành với hai mục tiêu sau: - Xây dựng phép định lƣợng đồng thời sulfamethoxazol trimethoprim hỗn hợp hai thành phần phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với tốn hóa - Ứng dụng phƣơng pháp để định lƣợng đồng thời thử độ hòa tan sulfamethoxazol trimethoprim số chế phẩm lƣu hành thị trƣờng Trung bình 102,5 88,1 99,8 101,0 99,8 99,4 SD 1,6 4,1 1,5 2,7 0,3 0,1 RSD (%) 1,6 4,6 1,6 2,7 0,3 0,1 Kết cho thấy, áp dụng phƣơng pháp nhị biến cho phép định lƣợng TRI dễ gây sai số lớn (RSD > 4%) Do vậy, để định lƣợng SUL TRI chế phẩm hai thành phần, hai thuật toán CLS ILS đƣợc sử dụng 3.2.5 Độ phương pháp Độ phƣơng pháp dựa phần trăm tìm lại chất chuẩn đƣợc thêm vào mẫu thử điều kiện Tiến hành khảo sát chế phẩm (nang Sulfareptol, thuốc bột Supertrim viên nén Trimeseptol), chế phẩm làm mẫu thử (n=3) Thêm xác đồng thời lƣợng dung dịch chuẩn SUL TRI (tƣơng đƣơng 100% nồng độ dung dịch thử) vào mẫu thử Kết phần trăm tìm lại đƣợc trình bày bảng 3.5 Bảng 3.5 Phần trăm tìm lại so với lƣợng thêm vào 100% CLS ILS SUL TRI SUL TRI Nang 102,0 99,2 96,7 93,4 Sulfareptol 101,9 98,7 103,7 95,3 103,3 96,7 105,3 97,6 Bột 98,7 99,9 98,3 94,9 Supertrim 98,5 95,2 99,9 96,2 102,4 95,3 103,3 94,0 nén 102,8 96,5 98,1 95,3 Trimeseptol 100,7 99,5 103,9 104,1 102,7 96,7 103,3 96,1 Viên 25 3.2.7 Kết định lượng Bảng 3.6 Kết định lƣợng SUL chế phẩm nghiên cứu (% so với nhãn, n=3) Chế phẩm Viên nén Trimeseptol Viến nén Cotrimstada Viên nén Biseptol Viên nang Sulfareptol Bột uống Supertrim Hàm lƣợng phần trăm so với nhãn (TB ± SD) CLS ILS HPLC - DĐVN V 95,2 ± 0,9 98,2 ± 0,4 96,7 ± 0,2 97,0 ± 0,5 101,0 ± 1,9 97,8 ± 0,5 99,1 ± 1,7 106,0 ± 0,5 97,7 ± 0,7 96,3 ± 0,6 102,8 ± 0,8 98,7 ± 0,2 100,6 ± 1,0 105,1 ± 2,0 97,9 ± 0,6 Bảng 3.7 Kết định lƣợng TRI chế phẩm nghiên cứu (% so với nhãn, n=3) Chế phẩm Viên nén Trimeseptol Viến nén Cotrimstada Viên nén Biseptol Viên nang Sulfareptol Bột uống Supertrim Hàm lƣợng phần trăm so với nhãn (TB ± SD) CLS ILS HPLC - DĐVN V 99,5 ± 0,7 98,9 ± 1,0 99,3 ± 0,3 98,9 ± 1,3 95,8 ± 1,1 98,3 ± 0,3 97,4 ± 1,1 93,4 ± 0,2 99,4 ± 0,5 100,3 ± 0,9 98,8 ± 1,0 100,8 ± 0,4 95,8 ± 0,2 94,0 ± 1,0 98,1 ± 0,5 26 Trong nghiên cứu này, HPLC theo quy định DĐVN V đƣợc sử dụng làm phƣơng pháp đối chiếu với điều kiện sắc ký: máy sắc ký: Shimadzu LC 2030C 3D Plus; cột sắc ký: InertSustain C18 (250 mm x 4,6mm, µm) - GL Sciences Inc; pha động (nƣớc : acetonitril : triethylamin, pH 5,9); tốc độ dịng 1,8 mL/phút; thể tích tiêm 20µL; detector DAD: 254 nm So sánh kết định lƣợng phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với tốn hóa với phƣơng pháp HPLC theo quy định DĐVN V phần mềm EXCEL với kiểm định thống kê t cặp với độ tin cậy 95% (bảng 3.8 3.9) Bảng 3.8 Kết so sánh kiểm định thống kê t cặp (độ tin cậy 95%) quang phổ tử ngoại kết hợp với CLS HPLC SUL Biến TRI Biến Biến Biến Trung bình 97,8 97,6 99,2 98,4 Phƣơng sai 0,5 4,8 1,2 3,2 5 5 n Tƣơng quan Pearson 0,3 0,7 0 4 t tính 0,1 1,4 p (T ≤ t) hai đuôi 0,9 0,2 t bảng hai 2,8 2,8 Sai khác trung bình theo giả thiết Bậc tự 27 Bảng 3.9 Kết so sánh kiểm định thống kê t cặp (độ tin cậy 95%) quang phổ tử ngoại kết hợp với ILS HPLC SUL TRI Biến Biến Biến Biến Trung bình 97,8 102,6 99,2 96,2 Phƣơng sai 0,5 9,9 1,2 6,7 n 5 5 Tƣơng quan Pearson 0,6 0,6 0 Bậc tự 4 t tính -3,9 3,1 p (T ≤ t) hai đuôi 0,02 0,04 t bảng hai đuôi 2,8 2,8 Sai khác trung bình theo giả thiết Kiểm định thống kê (t cặp với độ tin cậy 95%) cho thấy phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với CLS khơng có khác biệt đáng kể độ so với HPLC (p > 0,05) với giá trị RSD phép định lƣợng < 2% Trái lại, hàm lƣợng SUL chế phẩm thƣờng có giá trị cao (p < 0,05) TRI nhỏ đáng kể (p < 0,05) đƣợc xác định phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với ILS so với HPLC Vì vậy, áp dụng phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với CLS định lƣợng thử độ hòa tan chế phẩm chứa SUL TRI 3.2.8 Thử độ hòa tan Tiến hành thử độ hòa tan chế phẩm: viên nén Biseptol, Cotrimstada, Trimeseptol viên nang Sulfareptol theo chuyên luận viên nén Cotrimoxazol DĐVN V 3.2.8.1 Quy trình thử - Cho 900 mL dung dịch HCl 0,1N vào bình thiết bị thử hồ tan - Làm ấm môi trƣờng đến nhiệt độ 370C 28 - Cho vào bình thử bình mẫu thử Hạ cánh khuấy cho máy chạy, thời gian thử hoà tan bắt đầu tính - Sau khoảng thời gian 5; 10; 20; 30; 45; 60 phút lấy khoảng mL mẫu, lọc, hút xác mL dịch lọc cho vào bình định mức 10 mL thêm dung dịch HCl 0,1N đến vạch - Xác định nồng độ SUL TRI phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với thuật toán CLS 3.2.8.2 Kết 120 120 Viên nén Biseptol 100 100 80 80 % hòa tan % hòa tan Viên nang Sulfareptol 60 60 SUL 40 TRI SUL TRI 40 20 20 0 20 40 60 80 20 Thời gian (phút) 40 60 Thời gian (phút) Hình 3.2 Đƣờng cong hịa tan Hình 3.3 Đƣờng cong hòa tan viên nang Sulfareptol (n=6) viên nén Biseptol (n=6) 80 Hình 3.2 3.3 cho thấy viên nang Sulfareptol viên nén Biseptol hòa tan nhanh Sau khoảng 10 phút, hàm lƣợng SUL TRI đƣợc giải phóng 80% Sau 20 phút, hai viên nén Trimeseptol Cotrimstada có hàm lƣợng SUL TRI hòa tan > 70% Tại 60 phút, hàm lƣợng SUL TRI đƣợc giải phóng chế phẩm đƣợc trình bày bảng 3.10: 29 Bảng 3.10 Phần trăm hoạt chất hòa tan so với nhãn chế phẩm viên nén, viên nang 60 phút Chế phẩm Phần trăm hòa tan (TB ± SD %) (n=6) SUL TRI Viên nén Trimeseptol 90,1 ± 1,7 93,4 ± 2,3 Viên nén Cotrimstada 90,8 ± 3,3 99,5 ± 1,5 Viên nén Biseptol 103,7 ± 1,9 91,7 ± 4,7 Viên nang Sulfareptol 96,2 ± 2,2 93,7 ± 2,2 3.3 Bàn luận Định lƣợng đồng thời SUL TRI chế phẩm thƣờng đƣợc tiến hành với phƣơng pháp HPLC quan kiểm nghiệm Tuy nhiên, việc định lƣợng kỹ thuật HPLC đòi hỏi phải sử dụng nhiều dung môi hữu số lƣợng mẫu phân tích lớn (ví dụ: thử độ hịa tan) Trong khóa luận này, phép định lƣợng đồng thời SUL TRI dạng chế phẩm khác đƣợc thực quang phổ tử ngoại kết hợp với tốn hóa, sử dụng phần mềm EXCEL (nhị biến) MATLAB (CLS, ILS) để xử lý số liệu Phƣơng pháp nhị biến tiến hành đơn giản, định lƣợng nhanh chóng nhiên cho kết đạt đƣợc có độ xác khơng cao (đặc biệt TRI) Với phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với tốn hóa (CLS, ILS), việc lựa chọn ma trận nồng độ bƣớc sóng định lƣợng yếu tố ảnh hƣởng đến độ xác kết định lƣợng Vì hỗn hợp SUL TRI (có nồng độ tƣơng đƣơng với mẫu thử) có cộng tính ánh sáng khoảng bƣớc sóng 235-300 nm, nên dải bƣớc sóng (251 bƣớc sóng với Δλ = 0,1 nm từ 235,0 – 250,0 nm Δλ = 0,5 nm từ 250,5 – 300,0 nm) đƣợc sử dụng cho phép định lƣợng thuật tốn CLS CLS có độ xác cao số bƣớc sóng sử dụng tăng lên Ngƣợc lại, với thuật tốn ILS tín hiệu mẫu phân tích phải đƣợc ghi số bƣớc sóng mà phản ánh đầy đủ tín hiệu tất chất hỗn hợp Vì ma trận hệ số P tính theo thuật tốn ILS ma trận nghịch đảo nên 30 kích thƣớc ma trận phải số bƣớc sóng sử dụng phải nhỏ số dung dịch chuẩn đem dùng Do vậy, 10 bƣớc sóng (245, 250, 255, 260, 265, 270, 275, 280, 285 290 nm) đƣợc lựa chọn cho thuật tốn ILS Kết kiểm tra tính thích hợp thuật toán CLS ILS cho thấy phƣơng pháp quang phổ có độ xác cao Hai phƣơng pháp quang phổ đƣợc ứng dụng để định lƣợng đồng thời SUL TRI chế phẩm sử dụng phƣơng pháp HPLC (theo quy định DĐVN V) làm phƣơng pháp đối chiếu Kết định lƣợng quang phổ tử ngoại kết hợp với CLS ILS cho hàm lƣợng dƣợc chất SUL TRI chế phẩm nằm khoảng cho phép (93-107 %) Kiểm định thống kê (t cặp với độ tin cậy 95%) cho thấy phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với CLS khơng có khác biệt đáng kể độ so với HPLC với giá trị RSD phép định lƣợng < 2% Trái lại, hàm lƣợng SUL TRI chế phẩm thƣờng có giá trị cao thấp tƣơng ứng đƣợc xác định phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với ILS so với HPLC Do đó, chúng tơi áp dụng thuật tốn CLS phép thử độ hòa tan Trong phép thử độ hòa tan theo quy định DĐVN V, tất chế phẩm đạt u cầu: khơng 70% lƣợng SUL TRI so với lƣợng ghi nhãn đƣợc hòa tan 60 phút 31 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ * Dựa vào kết nghiên cứu đề tài, rút số nhận xét sau: - Xây dựng đƣợc phép định lƣợng đồng thời SUL TRI hỗn hợp cách trực tiếp khơng qua q trình tách chiết quang phổ tử ngoại kết hợp với thuật toán CLS có độ tƣơng đƣơng với phƣơng pháp HPLC theo quy định DĐVN V độ lặp với RSD < 2% - Xây dựng đƣợc đƣờng cong hoà tan SUL TRI chế phẩm viên nén nang phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với thuật toán CLS - Phƣơng pháp quang phổ trình bày có u cầu kĩ thuật đơn giản sử dụng hố chất, dung mơi đơn giản nên áp dụng vào công tác kiểm nghiệm thuốc tiết kiệm thời gian, giảm thiểu chi phí - Khơng có sai khác đáng kể hàm lƣợng thực tế SUL TRI mẫu thuốc đƣợc kiểm nghiệm so với hàm lƣợng ghi nhãn * Trên sở kết đạt đƣợc chúng tơi có số đề nghị sau: - Tiếp tục nghiên cứu ứng dụng phƣơng pháp quang phổ UV kết hợp với hồi quy đa biến vào kiểm nghiệm dạng bào chế đa thành phần (2–3 hoạt chất) lƣu hành thị trƣờng - Ứng dụng phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với thuật toán CLS vào công tác kiểm nghiệm dạng bào chế có chứa SUL TRI (đã đƣợc nghiên cứu) xí nghiệp sản xuất đơn vị kiểm nghiệm dƣợc phẩm nƣớc 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Trần Tử An (2017), Kiểm nghiệm dược phẩm, Nhà xuất y học Bộ Y tế (2018), Dược điển Việt Nam V, Hà Nội: Nhà xuất Y học Bộ Y tế (2018), Dược thư quốc gia Việt Nam, Hà Nội: Nhà xuất Y học Vũ Đặng Hồng (2014), "Ứng dụng tốn hóa để định lƣợng hỗn hợp cloramphenicol, dexamethason naphazolin quang phổ tử ngoại", Nghiên cứu dược Thông tin thuốc, số 3, tr 93-98 Vũ Đặng Hoàng (2014), "Ứng dụng tốn hóa định lƣợng hỗn hợp cefoperazol sulbactam quang phổ tử ngoại", Nghiên cứu dược Thông tin thuốc,số 2, tr 50-55 Nguyễn Tƣờng Vy, Đỗ Thanh Ngọc (2003), "Định lƣợng đồng thời Sulphamethoxazol Trimethoprim viên nén Trasepton phƣơng pháp quang phổ đạo hàm tỷ đối", Tạp chí dược học, tập 12, tr 2829 Tiếng Anh Abdul Rohman, Diana Silawati, Sudjadi and Sugeng Riyanto (2015), "Simultaneous Determination of Sulfamethoxazole and Trimethoprim Using UV Spectroscopy in Combination with Multivariate Calibration", Journal of Medical Sciences, 15(4), pp 178-184 British Pharmacopoeia Commission (2016), British Pharmacopoeia (2016) CD-ROM, Co-trimoxazole tablets monograph Dewi Wulansari, Fikri Alatas (2008), "Simultaneous determination of trimetoprim and sulfamethoxazole in tablets by simple simultant equation and inverse least square spectrophotometric methods", in Proceeding of thhe International Seminar on Chemistry, Jatinangor, pp 393-397 10.E Dinc, Y Kadioglu, F Demirkaya, D Baleanu (2011), "Continous wavelet transforms for simultaneous spectral determiation of trimethoprim and sulphamethoxazole in tablets", Journal of the Iranian Chemical Society, 8(1), pp 90-99 11.F Alatas, D Wulansari (2008), "The development and validation spectrophotometric method for simultaneous determination sulfamethoxazole and trimetoprim in tablet by continuous wavelet transform", in Proceeding of The international Seminar on Chemistry 2008, Jatinangor, pp 389-392 12.G Granero, C Garnero, M Longhi (2002), "Second derivative spectrophotometric determination of trimethoprime and sulfamethoxazole in the presence of hydroxypropyl-β-cyclodextrin (HP-β-CD)", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 29, pp 51-59 13.Harmita, Mansur U, Sartika J (2012), "Optimation and Validation of Analytical Method of Cotrimoxazole in Tablet and Plasma In vitro by High Performance Liquid Chromatography", Journal of Bioanalysis and Biomedicine, 4(2), pp 026-029 14."https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5329", [Online] 15."https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/5578", [Online] 16.J H Medina, M Maximiliano, H Marcela, Adriana M Domínguez-R, R S Juan Carlos (2013), "Simultaneous determination of trimethoprim and sulfamethoxazole in immediate-release oral dosage forms by first-order derivative spectroscopy: application to dissolution studies", International Journal Pharmacy and Pharmaceutical Science, 5(4), pp 505-510 17.Khaleda H Al-Saidi and Marwa S Yonis (2015), "Simultaneous Determination of Sulphamethoxazole and Trimethoprim in Binary Mixtures and in Tablet Using Derivative Spectrophotometry", Journal of Al-Nahrain University, 18(1), pp 46-54 18.R Hajian, R Haghighi And N Shams (2010), "Combination of ratio derivative spectrophotometry with simultaneous standard additions method for determination of sulfamethoxazole and trimethoprim", Asian Journal of Chemistry, 22(8), pp 6569-6579 19.Rao J S et al (2014), "Rapid UPLC Method for Simultaneous Estimation of Sulfamethoxazole and Trimethoprim in Pharmaceutical Dosage Forms", Indo American Journal of Pharm Research, 4(1), pp 896-904 20.S Hismiogullari, E Yarsan (2009), "Spectrophotometric determination and stability studies of sulfamethoxazole and trimethoprim in oral suspension by classical least square calibration method", Hacettepe University Journal of the Faculty of Pharmacy, 29(2), pp 95-104 21.The United States Pharmacopeia (2018), USP41-NF36, 2(2018), pp 3877-3878 PHỤ LỤC PHỔ HẤP THỤ Phổ hấp thụ dãy dụng dịch chuẩn sulfamethoxazol (20 - 48 mg/L) Sulfamethoxazol 2.5 1.5 0.5 340 335 330 325 320 315 310 305 300 295 290 285 280 275 270 265 260 255 250 245 240 235 230 225 220 215 210 205 200 Phổ hấp thụ dãy dụng dịch chuẩn trimethoprim (4 - 9,6 mg/L) Trimethoprim 1.8 1.6 1.4 1.2 0.8 0.6 0.4 0.2 340 335 330 325 320 315 310 305 300 295 290 285 280 275 270 265 260 255 250 245 240 235 230 225 220 215 210 205 200 Phổ hấp thụ ma trận nồng độ X 4.5 3.5 2.5 1.5 0.5 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 sul 32 + tri 6,4 sul 32 + tri sul 32 + tri 9,6 sul 40 + tri 6,4 sul 40 + tri sul 40 + tri sul 40 + tri sul 40 + tri 9,6 sul 48 + tri 6,4 sul 48 + tri sul 48 + tri 9,6 340 Phổ hấp thụ chế phẩm Trimeseptol 3.5 2.5 1.5 0.5 340 335 330 325 320 315 310 305 300 295 290 285 280 275 270 265 260 255 250 245 240 235 230 225 220 215 210 205 200 340 335 330 325 320 315 310 305 300 295 290 285 280 275 270 265 260 255 250 245 240 235 230 225 220 215 210 205 200 340 335 330 325 320 315 310 305 300 295 290 285 280 275 270 265 260 255 250 245 240 235 230 225 220 215 210 205 200 340 335 330 325 320 315 310 305 300 295 290 285 280 275 270 265 260 255 250 245 240 235 230 225 220 215 210 205 200 Biseptol 3.5 2.5 1.5 0.5 Cotrimstada 3.5 2.5 1.5 0.5 Bột Supertrim 3.5 2.5 1.5 0.5 340 335 330 325 320 315 310 305 300 295 290 285 280 275 270 265 260 255 250 245 240 235 230 225 220 215 210 205 200 Nang Sulfareptol 3.5 2.5 1.5 0.5 ... dựng phương pháp định lượng đồng thời SUL TRI quang phổ tử ngoại kết hợp với tốn hóa 18 2.2.2 Ứng dụng phương pháp quang phổ nêu để định lượng đồng thời thử độ hoà tan số chế phẩm chứa SUL... TRI chế phẩm phƣơng pháp quang phổ tử ngoại kết hợp với tốn hóa - So sánh kết phƣơng pháp quang phổ tử ngoại với phƣơng pháp HPLC theo quy định DĐVN V - Xây dựng đƣờng cong hoà tan SUL TRI chế phẩm. .. sulfamethoxazol trimethoprim chế phẩm quang phổ tử ngoại kết hợp với tốn hóa? ?? đƣợc tiến hành với hai mục tiêu sau: - Xây dựng phép định lƣợng đồng thời sulfamethoxazol trimethoprim hỗn hợp hai thành