Đang tải... (xem toàn văn)
Đông trùng hạ thảo được biết đến là một loại nấm có giá trị dược liệu quý, loài nấm này có tên khoa học là Ophiocordyceps sinensis, thuộc nhóm nấm Ascomycetes trên cơ thể ấu trùng của các loài bướm trong Chi Thitarodes.
Kết nhân giống sản xuất Đông trùng hạ thảo (cordyceps militaris) tỉnh Gia Lai ThS TRƯƠNG XUÂN PHÚ Trung tâm Ứng dụng tiến KH&CN tỉnh Gia Lai Đặt vấn đề Đông trùng hạ thảo biết đến loại nấm có giá trị dược liệu q, lồi nấm có tên khoa học Ophiocordyceps sinensis, thuộc nhóm nấm Ascomycetes thể ấu trùng lồi bướm Chi Thitarodes Nấm Đơng trùng hạ thảo sử dụng từ lâu y học cổ truyền Trung Hoa y học cổ truyền Tây Tạng (Sung cộng tác viên, 2007) Trong tự nhiên, Đơng trùng hạ thảo biết đến nhiều có xuất xứ từ Tây Tạng, Trung Quốc Đông trùng hạ thảo Cordyceps có nhiều lồi, đặc biệt lồi Cordyceps sinensis dạng sinh sản hữu tính trọng cả, sử dụng làm thuốc bổ chữa bệnh hàng trăm năm (Đái Duy Ban, 2018) Kết phân tích hợp chất sinh khối Đơng trùng hạ thảo cho thấy, Đơng trùng hạ thảo có chứa nhiều hoạt chất có giá trị dược tính như: Cordycepin, Adenosine, Axit amin, Vitamin khoáng chất Các nghiên cứu y học dược học chứng minh rằng, Đơng trùng hạ thảo có tác dụng tốt bồi bổ sức khỏe phòng số bệnh Hình 1: Ống nghiệm giống gốc nấm Đơng trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) 31 SỐ 06 NĂM 2018 KHOA HỌC KỸ THUẬT TẠP CHÍ KHOA HỌC CƠNG NGHỆ VÀ MƠI TRƯỜNG 32 KHOA HỌC KỸ THUẬT Hình 2: Nuôi trồng nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) bình thuỷ tinh, thể tích 750 ml như: hạ đường huyết, chống viêm, điều hòa hệ miễn dịch, chống oxi hóa, tăng cường sinh lực (Halpern Miller, 2002; Đái Duy Ban, 2018) Tên gọi “Đông trùng hạ thảo” thể chu kỳ sống đặc trưng loài nấm dược liệu này, quan sát thực tế chu kỳ sinh trưởng lồi nấm cho thấy, vào mùa đơng nhìn cá thể giống sâu (cơn trùng), vào mùa hạ lồi nấm phát triển thành chồi và nhơ lên khỏi mặt đất trơng giống lồi thực vật Với đặc tính sinh học chu kỳ sinh trưởng, phát triển đặc trưng nên số lượng Đông trùng hạ thảo tự nhiên thường không nhiều Bên cạnh đó, với giá trị dược liệu giá trị kinh tế cao nên việc săn lùng, khai thác mức làm cho số lượng Đông trùng hạ thảo tự nhiên ngày khan có nguy tuyệt diệt Chi nấm Cordyceps có 200 lồi khác nhau, có khoảng 78 lồi chọn lọc định danh theo loại ký chủ hình dạng thể Tuy nhiên, hai lồi đưa vào ni trồng nhân tạo phổ biến có phổ thích nghi rộng là: Cordyceps sinensis (Berk) Sacc Cordyceps militaris (L ex Fr) Link (Sung, 1996) Hiện nay, việc nuôi trồng Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) mơi trường nhân tạo hồn tồn khả thi nhờ phát triển cơng nghệ sinh học tiến kỹ thuật chăm sóc Nhằm góp phần phát triển sản phẩm Đơng trùng hạ thảo địa bàn tỉnh Gia Lai đáp ứng nhu cầu sử dụng người dân, Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa học Công nghệ, Sở Khoa học Công nghệ tỉnh Gia Lai triển khai nhiệm vụ: “Ứng dụng tiến kỹ thuật sản xuất nhân giống, ni trồng hồn thiện quy trình kỹ thuật cho sản phẩm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) điều kiện phịng thí nghiệm tỉnh Gia Lai” Kết thực 2.1 Nhân giống cấp I giống sản xuất nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) - Nhân giống cấp I: Mục đích việc nhân giống cấp I để tăng nhanh sinh khối hệ sợi nấm đáp ứng yêu cầu cho giai đoạn nhân giống sản xuất Sử dụng môi trường thạch nghiêng PDA (Potato Dextrose Agar) để nhân giống cấp I từ giống gốc, tiến hành cấy chuyền tủ cấy vô trùng (hệ số nhân giai đoạn 25) ni sợi điều kiện tối hồn tồn nhiệt độ 210C, độ ẩm 60%; Sau ba ngày kiểm tra để loại bỏ ống nghiệm bị nhiễm; Sau khoảng 10 ngày, hệ sợi ăn kín ống nghiệm chuyển sang bảo quản tủ bảo ơn nhiệt độ 50C để sử dụng dần - Nhân giống sản xuất: Giống sản xuất nhân lên sau cấy chuyền từ giống cấp I tuyển chọn Giống sản xuất đuợc sử dụng hai dạng, dạng dịch thể dạng ống nghiệm thạch nghiêng Đối với dạng môi trường thạch nghiêng, sử dụng môi trường PDA cải tiến, thành phần môi trường bao gồm: 20g Agar, 20g Glucose, 200g Khoai tây, 100ml nước dừa bổ sung thêm nước cất vừa đủ lít Đối với dạng dịch thể, sử dụng môi trường SDAY (Sabouraud Dextrose Agar Yeast), thành phần môi trường bao gồm: 20g Agar, 40g Glucose, 10g Pepton, 2g Yeast extract, 1g KH2PO4, 0,5g MgSO4.7H2O bổ sung thêm nước cất vừa đủ lít Hoặc sử dụng mơi trường YMK (Yeast Magnesium Potassium), thành phần môi trường bao gồm: 20g Agar, 20g Glucose, 5g Yeast extract, 2g KH2PO4, 1g MgSO4.7H2O thêm nước cất vừa đủ lít Nhân giống sản xuất dạng dịch thể yêu cầu độ pH = 6,0; nhiệt độ 210C; tốc độ lắc 150 vòng/phút; thời gian nhân giống 120 Hệ số nhân nhân giống sản xuất môi trường dịch thể khoảng lần 2.2 Sản xuất nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Q trình sản xuất nấm Đơng trùng hạ thảo (Cordyceps militaris), ngồi yếu tố giống thành phần mơi trường chất đóng vai trị quan trọng, mơi trường chất nguồn dinh dưỡng chủ yếu để nấm hấp thu phát triển Tùy lồi nấm khác có nhu cầu bổ sung nguồn C/N môi trường khác để giúp trình hình thành hệ sợi nấm phát triển, hệ sợi nấm phát triển tốt giúp khả cho thể tốt; đồng thời môi trường chất ni cấy có tác động đến sinh tổng hợp hình thành hoạt chất sinh học đặc trưng nấm Đông trùng hạ thảo như: Cordycepin, Adenosine, Để sản xuất nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) sử dụng môi trường chất nuôi trồng, gồm: 40% gạo lứt, 40% bắp, 10% nhộng tằm tươi, 9,9% nước dừa, 1g/l pepton, 1g/l cao nấm men, 2g/l KH2PO4, 1g/l MgSO4.7H2O Môi trường chất sau phối trộn theo tỷ lệ xác định cho vào bình thủy tinh Hình 3: Sản phẩm Đơng trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) sấy khô phương pháp sấy thăng hoa 33 SỐ 06 NĂM 2018 KHOA HỌC KỸ THUẬT KHOA HỌC KỸ THUẬT TẠP CHÍ KHOA HỌC CƠNG NGHỆ VÀ MƠI TRƯỜNG 34 Hình 4: Sản phẩm Đơng trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) sấy khơ bảo quản bình thủy tinh tích 750 ml, độ dày mơi trường chất khoảng - 3cm, sau tiến hành hấp khử trùng nhiệt độ 1210C, áp suất 1,2 atm thời gian 01 đồng hồ Sau hấp khử trùng xong để nguội tự nhiên, bắt đầu cấy giống tủ cấy vô trùng tiến hành chăm sóc qua ba giai đoạn: giai đoạn ươm tơ; giai đoạn hình thành phát triển thể; giai đoạn thu hoạch, sơ chế, bảo quản - Giai đoạn ươm tơ nấm: Đây giai đoạn đóng vai trị quan trọng q trình ni trồng nấm Đơng trùng hạ thảo Trong giai đoạn hệ sợi tơ phát triển lan kín mơi trường, phân hủy chất để hấp thụ, tích lũy chất dinh dưỡng để tạo thể sau Yêu cầu điều kiện môi trường giai đoạn bình phơi đặt mơi trường tối hồn tồn, nhiệt độ 21oC, độ ẩm 70% Trong giai đoạn này, ba ngày cần tiến hành kiểm tra theo dõi trình phát triển hệ sợi tiến hành loại bỏ bình phơi bị nhiễm để tránh lây lan mầm bệnh Sau khoảng - 14 ngày hệ sợ nấm phát triển bao phủ bề mặt chất, quan sát thấy hệ sợi nấm có màu trắng, đồng nhất, khơng bị nhiễm tạp đảm bảo để chuyển sang giai đoạn hình thành phát triển thể - Giai đoạn hình thành phát triển thể: Sau giai đoạn ươm tơ, tiến hành loại bỏ bình phơi bị nhiễm chuyển sang giai đoạn hình thành phát triển thể nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Giai đoạn yêu cầu phải đảm bảo đủ ánh sáng, cường độ ánh sáng khoảng từ 700 - 1.000 lux, thời gian chiếu sáng 12h/ngày, nhiệt độ giữ ổn định khoảng 21 - 220C, độ ẩm 80% Sau khoảng tuần bắt đầu xuất mầm thể, số lượng mầm thể trung bình đạt 28 mầm/bình thủy tinh 750ml, số lượng mầm thể tuỳ thuộc vào độ đồng chất lượng giống cấy Sau khoảng 50 ngày chăm sóc, chiều dài thể đạt trung bình 4,2 cm, chiều dài thể phụ thuộc lớn vào đặc tính giống điều kiện chăm sóc, yếu tố nhiệt độ độ ẩm có tác động lớn đến khả phát triển chiều dài thể Trong giai đoạn hình thành phát triển thể, điều kiện nhiệt độ >230C, độ ẩm 24h đồng hồ làm cho thể nấm ngừng phát triển xuất hiện tượng cong thể lại Điều làm giảm đáng kể suất chất lượng thể nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) - Giai đoạn thu hoạch, sơ chế, bảo quản: Thời gian hình thành phát triển thể nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) khoảng - tuần, thể nấm Đơng trùng hạ thảo chuyển từ hình nhọn sang dạng hình chùy thể đạt đến độ già thu hoạch, khơng nên thu hoạch sớm muộn làm ảnh hưởng đến suất chất lượng sản phẩm thể Kết theo dõi khối lượng thể, suất sinh học nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) cho thấy, khối lượng thể nấm Đông trùng hạ thảo trung bình đạt 20g/bình 750ml suất sinh học trung bình đạt 33% Nhằm đánh giá chất lượng thể nấm Đông trùng hạ thảo thông qua việc phân tích hoạt chất sinh học đặc trưng nấm Đơng trùng hạ thảo Cordycepin Adenosine cho thấy, hàm lượng Cordycepin đạt 2,60 mg/g hàm lượng Adenosine đạt 7,64 mg/100g (Kết phân tích Viện Kiểm nghiệm An toàn Vệ sinh Thực phẩm Quốc gia, Bộ Y tế) Trong nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) có chứa nhiều hoạt chất có giá trị dược liệu quý, số hoạt chất dễ bị phân hủy điều kiện môi trường tự nhiên, nên sau thu hoạch cần phải bảo quản tốt để giữ hoạt chất có giá trị Vì vậy, sau thu hoạch sử dụng Đông trùng hạ thảo dạng tươi dạng sấy khô để bảo quản lâu dài Nếu sấy khô, tốt nên sấy phương pháp sấy thăng hoa nhiệt độ -370C, áp suất 0,37 mmHg thời gian 24h đồng hồ để đảm bảo màu sắc chất lượng thể, sau bảo quản túi nilon hút chân không đựng bình thủy tinh kín khí./ TÀI LIỆU THAM KHẢO Đái Duy Ban Lưu Tham Mưu (2018) “Đông trùng hạ thảo: Một dược liệu quý hỗ trợ điều trị bệnh virus, ung thư, HIV/AIDS, đái tháo đường, suy giảm tình dục nghiên cứu phát lồi Đông trùng hạ thảo Việt Nam” NXB Y học Hà Nội, năm 2018; Halpern, Miller (2002). “Medicinal Mushrooms” New York, New York: M Evans and Company, Inc tr. 6465. ISBN 0-87131-981-0 Sung GH, Hywel-Jones NL, Sung JM, Luangsa-Ard JJ, Shrestha B, Spatafora JW (2007). “Phylogenetic classification of Cordyceps and the clavicipitaceous fungi”. Studies in Mycology 57: 5-59 PMC 2104736.PMID 18490993. doi:10.3114/ sim.2007.57.01 Sung, J.M 1996 “The Insects-born fungus of Korea in color” Seoul: Kysohak Publishing Co Ltd.; p 62-72 35 SỐ 06 NĂM 2018 KHOA HỌC KỸ THUẬT ... điều kiện phịng thí nghiệm tỉnh Gia Lai? ?? Kết thực 2.1 Nhân giống cấp I giống sản xuất nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) - Nhân giống cấp I: Mục đích việc nhân giống cấp I để tăng nhanh... học Công nghệ tỉnh Gia Lai triển khai nhiệm vụ: “Ứng dụng tiến kỹ thuật sản xuất nhân giống, nuôi trồng hồn thiện quy trình kỹ thuật cho sản phẩm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) điều... trường dịch thể khoảng lần 2.2 Sản xuất nấm Đơng trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Q trình sản xuất nấm Đơng trùng hạ thảo (Cordyceps militaris), ngồi yếu tố giống thành phần mơi trường chất
