Cây thuốc lào (Nicotiana rustica) là một loài thực vật thuộc chi thuốc lá (Nicotiana). Loài này có hàm lượng nicotin rất cao. Lá của thuốc lào ngoài việc dùng để hút còn sử dụng rộng rãi trong sản xuất các thuốc trừ dịch hại hữu cơ. Thuốc lào có hàm lượng nicotine khoảng 9% , cao hơn nhiều so với thuốc lá thông thường (khoảng 13%) (Đào Duy Anh, 2002). Thuốc lào phát triển tốt nhất ở nhiệt độ 2528℃, tùy thuộc đất ở từng vùng mà cho chất lượng sản phẩm riêng. Ở Việt Nam những vùng trồng nhiều như: Hải Phòng, Thanh Hóa, Thái Bình. Các giống thuốc lào hiện đang được trồng là những giống đã có trước, tên gọi các giống được trồng cũng được nông dân tự đặt tên theo từng địa phương. Trong thời kì 2001 2004, Viện Kinh tế Kỹ thuật Thuốc lá đã thu nhập gần 100 dòng và đã chọn lọc được 20 dòng từ 3 nhóm giống phổ biến ngoài sản xuất. Các dòng này đều có khả năng sinh trưởng, phát triển tốt; năng suất và chất lượng bằng hoặc cao hơn các giống đang trồng trong sản xuất. Thuốc lào là cây trồng cạn, từ thời xưa được trồng trên các chân vàn, vàn cao. Ở Hải Phòng đã từ nhiều năm trồng thuốc lào mang lại hiệu quả kinh tế cao nhất, hơn nữa hệ thống tưới tiêu nước tốt nên diện tích trồng thuốc lào tăng, những năm gần đây diện tích thuốc lào đạt khoảng 20002200 hanăm. Trong quá trình trồng cũng có nhiều khó khăn về kỹ thuật canh tác cũng như chăm sóc và giống.Vì vậy trong quá trình sản xuất, các vùng trồng thuốc lào thường xuyên xuất hiện các bệnh do nấm và virus gây ra. Chúng gây bệnh trên các bộ phận của cây như lá, rễ, thân… không chỉ gây thiệt hại nghiêm trọng về sản lượng và năng suất mà còn gây ảnh hưởng đến chất lượng thuốc. Một số bệnh gây hại trên thuốc lào như: bệnh đốm mắt ếch do nấm Cercospora nicotiana, bệnh lở cổ rễ do Rhizoctonia solani, bệnh thối đen thân do nấm Phytophthora parasitica Tucker, bệnh khảm lá do Tobacco mosaic virus, bệnh virus y khoai tây do Potato Y virus, bệnh khảm dưa chuột do Cucumber mosaic virus... Trong đó bệnh do virus gây hại là vô cùng nghiêm trọng. Bệnh khảm lá thuốc lào Potato virus Y gây hại thuốc lào nghiêm trọng và phổ biến. PVY được lan truyền chủ yếu qua rệp theo kiểu không bền vững. Triệu chứng do PVY gây ra cho cây trồng phong phú và đa dạng tùy thuộc vào loại virus và giống canh tác. Triệu chứng phổ biến nhất là vàng nâu gân lá. Thối hoại có thể xuất hiện dưới nhiều dạng kể cả việc hóa nâu gân chính và gân phụ. Khi nhiễm bệnh nặng, các mạch mộc, thân cây và cả ruột cây đều có màu nâu hoặc đen. Triệu chứng khác cũng thấy xuất hiện trên thuốc lá: nhiều màu sắc bất thường xảy ra trên lá cây bệnh với phần giữa các gân phụ nổi lên những vân màu cẩm thạch đậm hay nhạt. Virus Y gây bệnh cho khoảng 60 loài cây, chủ yếu các cây họ Cà (Solanaceae), họ Rau muối ( Chenopodiaceae), họ Dền (Amaranthaceae) và họ Đậu (Fabaceae). Mặc dù vậy, nhận thức của nông dân cũng như những nghiên cứu về bệnh virus và thiệt hại do bệnh gây ra còn rất hạn chế. Các nghiên cứu chủ yếu tập trung vào phân lập, giám định bệnh. Do đó chúng tôi tiến hành nghiên cứu diễn biến bệnh khảm lá thuốc lào (PVY) trên đồng ruộng. Từ đó có thể chẩn đoán nhanh, chính xác nhằm đưa ra những biện pháp phòng trừ hiệu quả để hạn chế tối đa những thiệt hại do virus PVY gây ra. Được sự đồng ý của bộ môn bệnh cây – Khoa Nông Học – Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam và được sự hướng dẫn của TS.Nguyễn Đức Huy, tôi thực hiện đề tài “Nghiên cứu bệnh khảm lá thuốc lào (Potato virus Y) tại Nam Định và Hải Phòng”.
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA NÔNG HỌC - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU BỆNH KHẢM LÁ THUỐC LÀO (POTATO VIRUS Y) TẠI NAM ĐỊNH VÀ HẢI PHÒNG” Người hướng dẫn : TS NGUYỄN ĐỨC HUY Bộ môn : BỆNH CÂY Người thực : PHẠM THỊ TRÀ MY Lớp : BVTVB Khóa : 59 HÀ NỘI – 2018 LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận, tơi nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy cô giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè gia đình Để có kết hôm cho phép gửi lời cảm ơn sâu sắc đến TS.Nguyễn Đức Huy – Bộ môn Bệnh – Khoa Nông học – Học viện Nông nghiệp Việt Nam Người tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian tạo điều kiện cho suốt trình học tập thực đề tài Tôi xin vô cảm ơn thầy cô giáo môn Bệnh – Khoa Nông học – Học viện Nông nghiệp Việt Nam, cán công nhân viên khoa Nông học giúp đỡ suốt thời gian học tập, đặc biệt người bạn thân thiết nhiệt tình tạo giúp đỡ thực đề tài Cuối vơ biết ơn gia đình ủng hộ, chăm sóc, động viên tơi tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu hồn thiện khóa luận Hà Nội, ngày 23 tháng 07 năm 2018 Sinh viên PHẠM THỊ TRÀ MY MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN .ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vii PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu PHẦN TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 2.1 Giới thiệu chung thuốc lào .4 2.1.2 Giá trị kinh tế thuốc lào 2.1.3 Tác dụng thuốc lào 2.1.4 Tình hình sản xuất tiêu thụ thuốc lào Việt Nam 2.2 Giới thiệu Potato virus Y 2.2.1 Lịch sử nghiên cứu Potato virus Y (PVY) 2.2.2 Phân loại Potato virus Y (PVY) .9 2.2.3 Phạm vi phân bố .9 2.2.4 Ký chủ .9 2.2.5 Triệu chứng gây hại PVY 2.2.6 Đặc điểm cấu tạo PVY 10 2.2.7 Biện pháp phòng trừ PVY .11 2.3 Những nghiên cứu PVY thuốc lào .11 2.3.1 Nghiên cứu nước 12 2.3.2 Nghiên cứu nước 18 2.4 Đặc điểm chung Potyvirus .19 PHẦN NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 Vật liệu, nội dung phương pháp nghiên cứu PVY 26 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 26 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu 26 3.1.3 Dụng cụ nghiên cứu .26 3.1.4 Địa điểm thời gian nghiên cứu 29 3.1.5 Nội dung nghiên cứu .29 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 31 4.1 Kết điều tra, thu mẫu đánh giá tình hình bệnh virus thuốc lào 31 4.1.1 Điều tra thành phần bệnh hại thuốc lào số tỉnh đồng sông Hồng .31 4.1.2 Điều tra mức độ bệnh PVY gây hại thuốc lào số tỉnh đồng sông Hồng 32 4.2 Đánh giá khả lây nhiễm PVY lây nhiễm nhân tạo .42 4.2.1 Đánh giá khả lây nhiễm PVY thuốc 42 4.3.3 Đánh giá khả lây nhiễm PVY ký chủ 49 PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .56 5.1 Kết luận 56 5.2 Kiến nghị 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO .58 DANH MỤC BẢ Bảng Diện tích thuốc lào Việt Nam .14 Bảng 2 Sản lượng thuốc lào Việt Nam 15Y Bảng Thành phần bệnh hại thuốc lào 31 Bảng Kết điều tra mức độ nhiễm PVY thuốc lào Hải Phòng Nam Định 33 Bảng Kết điều tra diễn biến PVY hại thuốc lào Vĩnh Bảo – Hải Phòng 36 Bảng 4 Kết điều tra diễn biến PVY hại thuốc lào Tiên Lãng – Hải Phòng 37 Bảng Kết điều tra diễn biến PVY hại thuốc lào Thủy Nguyên– Hải Phòng 37 Bảng Kết điều tra diễn biến PVY hại thuốc lào Nam Trực – Nam Định 38 Bảng Kết thu mẫu thuốc lào thu bị nhiễm virus Hải Phòng Nam Định 40 Bảng Đánh giá tỉ lệ bệnh truyền qua hạt giống số khu vực 41 Bảng Kết lây nhiễm mẫu nhân tạo PVY lên loại thuốc nhà lưới .43 Bảng 10 Kết lây nhiễm mẫu nhân tạo PVY lên rau muối diêm mạch nhà lưới 45 Bảng 11 Kết lây nhiễm mẫu nhân tạo PVY lên cúc bách nhật nhà lưới 46 Bảng 12 Kết lây bệnh nhân tạo mẫu virus Tiên Lãng – Hải Phịng số kí chủ khác 50 Bảng 13 Kết lây nhiễm nhân tạo mẫu virus Nam Trực – Nam Định số họ cà 52 Bảng 14 Kết lây nhiễm mẫu nhân tạo PVY lên thuốc lào 54 DANH MỤC HÌ Hình Hình thái virus PVY .18Y Hình Ruộng thuốc lào huyện Vĩnh Bảo – Hải Phòng 34 Hình Ruộng thuốc lào huyện Tiên Lãng – Hải Phịng 34 Hình Ruộng thuốc lào huyện Thủy Nguyên – Hải Phòng .35 Hình 4 Ruộng thuốc lào huyện Nam Trực – Nam Định 35 Hình Triệu chứng thuốc lào nhiễm PVY Vĩnh Bảo – Hải Phòng (A) , Tiên Lãng- Hải Phòng (B), Thủy Nguyên- Hải Phòng (C) Nam TrựcNam Định (D) 39 Hình Triệu chứng thuốc lào nhiễm PVY trồng nhà lưới 41 Hình Thí nghiệm lây nhiễm nhân tạo nhà lưới 42 Hình Triệu chứng thuốc Nicotiana tabacum var Xanthi (trên) Nicotiana benthamiana (dưới) 44 Hình Triệu chứng loại rau muối C Amaranticolor (trái) C.quinoa (phải) .47 Hình 10 Triệu chứng cúc bách nhật (Gomphrena globosa) 48 Hình 11 Triệu chứng ớt khoai tây lây nhiễm PVY Tiên Lãng – Hải Phòng 51 Hình 12 Triệu chứng khoai tây bị bệnh Nam Trực – Nam Định (trên) khoai tây khỏe (dưới) 53 Hình 13 Triệu chứng nhiễm PVY thuốc lào lây nhiễm nhà lưới .55 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ST Chữ viết tắt Từ viết tắt T CP CS ORF Coat protein Cộng Open reading frame PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Cây thuốc lào (Nicotiana rustica) loài thực vật thuộc chi thuốc (Nicotiana) Lồi có hàm lượng nicotin cao Lá thuốc lào ngồi việc dùng để hút cịn sử dụng rộng rãi sản xuất thuốc trừ dịch hại hữu Thuốc lào có hàm lượng nicotine khoảng 9% , cao nhiều so với thuốc thông thường (khoảng 1-3%) (Đào Duy Anh, 2002) Thuốc lào phát triển tốt nhiệt độ 25-28, tùy thuộc đất vùng mà cho chất lượng sản phẩm riêng Ở Việt Nam vùng trồng nhiều như: Hải Phòng, Thanh Hóa, Thái Bình Các giống thuốc lào trồng giống có trước, tên gọi giống trồng nông dân tự đặt tên theo địa phương Trong thời kì 2001- 2004, Viện Kinh tế Kỹ thuật Thuốc thu nhập gần 100 dòng chọn lọc 20 dòng từ nhóm giống phổ biến ngồi sản xuất Các dịng có khả sinh trưởng, phát triển tốt; suất chất lượng cao giống trồng sản xuất Thuốc lào trồng cạn, từ thời xưa trồng chân vàn, vàn cao Ở Hải Phòng từ nhiều năm trồng thuốc lào mang lại hiệu kinh tế cao nhất, hệ thống tưới tiêu nước tốt nên diện tích trồng thuốc lào tăng, năm gần diện tích thuốc lào đạt khoảng 2000-2200 ha/năm Trong q trình trồng có nhiều khó khăn kỹ thuật canh tác chăm sóc giống.Vì trình sản xuất, vùng trồng thuốc lào thường xuyên xuất bệnh nấm virus gây Chúng gây bệnh phận lá, rễ, thân… không gây thiệt hại nghiêm trọng sản lượng suất mà gây ảnh hưởng đến chất lượng thuốc Một số bệnh gây hại thuốc lào như: bệnh đốm mắt ếch nấm Cercospora nicotiana, bệnh lở cổ rễ Rhizoctonia solani, bệnh thối đen thân nấm Phytophthora parasitica Tucker, bệnh khảm Tobacco mosaic virus, bệnh virus y khoai tây Potato Y virus, bệnh khảm dưa chuột Cucumber mosaic virus Trong bệnh virus gây hại vô nghiêm trọng Bệnh khảm thuốc lào Potato virus Y gây hại thuốc lào nghiêm trọng phổ biến PVY lan truyền chủ yếu qua rệp theo kiểu không bền vững Triệu chứng PVY gây cho trồng phong phú đa dạng tùy thuộc vào loại virus giống canh tác Triệu chứng phổ biến vàng nâu gân Thối hoại xuất nhiều dạng kể việc hóa nâu gân gân phụ Khi nhiễm bệnh nặng, mạch mộc, thân ruột có màu nâu đen Triệu chứng khác thấy xuất thuốc lá: nhiều màu sắc bất thường xảy bệnh với phần gân phụ lên vân màu cẩm thạch đậm hay nhạt Virus Y gây bệnh cho khoảng 60 loài cây, chủ yếu họ Cà ( Solanaceae), họ Rau muối ( Chenopodiaceae), họ Dền (Amaranthaceae) họ Đậu (Fabaceae) Mặc dù vậy, nhận thức nông dân nghiên cứu bệnh virus thiệt hại bệnh gây hạn chế Các nghiên cứu chủ yếu tập trung vào phân lập, giám định bệnh Do chúng tơi tiến hành nghiên cứu diễn biến bệnh khảm thuốc lào (PVY) đồng ruộng Từ chẩn đốn nhanh, xác nhằm đưa biện pháp phòng trừ hiệu để hạn chế tối đa thiệt hại virus PVY gây Được đồng ý môn bệnh – Khoa Nông Học – Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam hướng dẫn TS.Nguyễn Đức Huy, thực đề tài “Nghiên cứu bệnh khảm thuốc lào (Potato virus Y) Nam Định Hải Phòng” 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích Điều tra thành phần bệnh hại; mức độ phổ biến, diễn biến bệnh khảm hại thuốc lào số vùng trồng thuốc lào đồng sông Hồng 1.2.2 Yêu cầu Điều tra thành phần bệnh hại thuốc lào Hải Phòng Nam Định Điều tra mức độ, diễn biến PVY hại thuốc lào Hải Phòng Nam Định Đánh giá phổ ký chủ PVY nhà lưới lây bệnh nhân tạo thuốc lào số thuộc họ cà khác như: cà chua, khoai tây, ớt, thuốc cảnh 47 Hình Triệu chứng loại rau muối C Amaranticolor (trái) C.quinoa (phải) 48 Hình 10 Triệu chứng cúc bách nhật (Gomphrena globosa) Trên giống rau muối đỏ (Chenopodium amaranticolor) tiến hành lây nhiễm mẫu bệnh từ Tiên Lãng- Hải Phòng, Vĩnh Bảo- Hải Phòng, Thủy Nguyên- Hải Phòng Nam Trực- Nam Định Kết cho thấy tất rau muối lây bệnh biểu triệu chứng bệnh Tỷ lệ xuất triệu chứng bệnh cao, tất mẫu lây lên triệu chứng Chỉ sau ngày lây nhiễm rau muối lây xuất đốm chết hoại tròn màu vàng sau tuần lây viền đốm xuất màu hồng kích thước to dần lan rộng bề mặt Triệu chứng biểu cục lây, bị bệnh thường vàng úa rụng sớm Đối với diêm mạch (Chenopodium quinoa) tiến hành lây mẫu Tiên Lãng – Hải Phòng Nam Trực – Nam Định Tỷ lệ xuất triệu chứng đạt 100% Trên mẫu lây Tiên Lãng – Hải Phòng sau ngày lây lên triệu chứng phiến xuất đốm chết hoại tròn nhỏ màu 49 vàng sau tuần bề mặt non xuất khảm xanh đậm nhạt rõ, đốm kích thước to dần lan rộng bề mặt Còn triệu chứng mẫu Nam Trực – Nam Định xuất triệu chứng chết hoại tròn nhỏ màu vàng sau ngày sau tuần đốm kích thước to dần lan rộng bề mặt khơng có triệu chứng khảm bề mặt non mẫu Tiên Lãng – Hải Phòng Đối với cúc bách nhật (Gomphrena globosa) loài thực vật có hoa thuộc họ Dền Khả bị bệnh trình lây nhiễm nhân tạo đạt 100% rau muối đỏ diêm mạch Cây lây sau – 10 ngày lên triệu chứng Có đốm hoại tử màu đỏ, xung quanh viền đốm loang lổ màu vàng bề mặt 4.3.3 Đánh giá khả lây nhiễm PVY ký chủ Virus thuốc loài xác định trồng thuộc họ Cà Để thực thí nghiệm lây nhiễm nhân tạo chuẩn bị trồng họ với thuốc lào cà chua, ớt, khoai tây sử dụng hạt giống thuốc lào bệnh để thực q trình lây nhiễm nhân tạo Mục đích nghiên cứu đánh giá tính gây bệnh, đặc biệt triệu chứng biểu virus thuốc lào trồng từ hạt giống bệnh để từ làm sở cho nghiên cứu thực tế đồng ruộng Cây thuốc lào trồng từ hạt giống bệnh họ Cà khác trồng chậu điều kiện nhà lưới, sau nảy mầm chiều cao khoảng 6-8 cm chúng tơi tiến hành lây nhiễm nhân tạo Kết lây nhiễm trình bày bảng sau: Bảng 12 Kết lây bệnh nhân tạo mẫu virus Tiên Lãng – Hải Phòng số kí chủ khác Mẫu lây Số Số bị lây bệnh Triệu chứng 50 Cà chua Ớt Khoai tây 3 Không xuất triệu chứng Phiến dày lên, non khảm rõ xanh bề mặt Trên xuất đốm chết hoại màu đen nằm dọc phần gân lá, héo vàng, gân chuyển màu đen Từ kết lây nhiễm mẫu virus Tiên Lãng – Hải Phòng bảng 4.11 loại cà chua, ớt, khoai tây thấy có khoai tây biểu triệu chứng xuất đốm chết hoại màu đen nằm dọc phần gân lá, héo vàng, gân chuyển màu đen với tỷ lệ cao đạt 100% Trên ớt lên với tỷ lệ cao 50% với triệu chứng phiến dày lên, non khảm rõ xanh bề mặt Khi lây nhiễm cà chua không xuất triệu chứng Để giải thích cho kết q trình lây nhiễm để mẫu nghiền nhà lưới (nhiệt độ cao) nên khả tái sinh PVY thấp dẫn đến cà chua không biểu triệu chứng 51 (A) (B) (C) Hình 11 Triệu chứng ớt khoai tây lây nhiễm PVY Tiên Lãng – Hải Phòng (A) Triệu chứng khảm ớt (B) (C) Các đốm chết hoại gân chuyển đen khoai tây Bảng 13 Kết lây nhiễm nhân tạo mẫu virus Nam Trực – Nam Định số họ cà Số Số bị Cà chua Ớt lây 6 bệnh 0 Khoai tây 3 Mẫu lây Triệu chứng Không xuất triệu chứng Không xuất triệu chứng Phiến xoăn co lại, thân cong xuống, gốc đen dần lan lên thân cây, chết Từ kết bảng 4.13 nhận thấy cà chua ớt họ cà lại không biểu triệu chứng lây nhiễm nhân tạo Qua đó, chúng tơi biết khả tái sinh PVY 52 khác chúng họ Khoai tây xuất triệu chứng phiến xoăn co lại, thân cong xuống, gốc đen dần lan lên thân cây, chết rũ đạt tỷ lệ nhiễm 100 % 53 Hình 12 Triệu chứng khoai tây bị bệnh Nam Trực – Nam Định (trên) khoai tây khỏe (dưới) Bảng 14 Kết lây nhiễm mẫu nhân tạo PVY lên thuốc lào Mẫu lây Đối chứng Tiên Lãng (Hải Phòng) Nam Trực (Nam Định) Số Số bị lây bệnh 3 3 Triệu chứng Không xuất triệu chứng Phiến dày lên, mép xoăn lại, khảm xanh đậm nhạt dọc theo gân Các vết khảm xanh đậm nhạt loang lổ bề mặt Qua bảng 4.14 ta nhận thấy khác lây thuốc lào mẫu địa điểm khác Thuốc lào lây mẫu Tiên Lãng – Hải Phòng sau ngày lên triệu chứng: phiến dày lên, mép xoăn lại, khảm xanh đậm nhạt dọc theo gân lên triệu chứng non Ở Nam Trực – Nam Định triệu chứng xuất chậm mẫu Tiên Lãng – Hải 54 Phòng, 10 ngày sau lây nhiễm Các vết khảm xanh đậm nhạt loang lổ khắp bề mặt 55 (A) (B) (C) Hình 13 Triệu chứng nhiễm PVY thuốc lào lây nhiễm nhà lưới (A) Triệu chứng thuốc lào bị bệnh Tiên Lãng – Hải Phòng (B) Triệu chứng thuốc lào bị bệnh Nam Trực – Nam Định (C) Cây thuốc lào đối chứng 56 PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Thành phần bệnh hại thuốc lào gồm bệnh khảm PVY, thối đen thân Phytophthora parasitica Tucker, đốm mắt ếch Cercospora nicotiana gây nên Điều tra diễn biến bệnh PVY địa phương (Tiên Lãng – Hải Phòng, Vĩnh Bỏa – Hải Phòng, Thủy Nguyên – Hải Phòng, Nam Trực – Nam Định) giai đoạn sinh trưởng khác thuốc lào Qua điều tra cho thấy bệnh PVY xuất đồng ruộng muộn (90 ngày sau trồng) Tỷ lệ nhiệm bệnh cao (Nam Trực- Nam Định; Thủy Nguyên – Hải Phòng 50%) Triệu chứng bệnh ban đầu khảm nhẹ, mép non xoăn, sau khảm nặng, phiến gồ ghề Thực thí nghiệm đánh giá tỷ lệ truyền bệnh virus qua hạt giống Kết thu có giống có tỷ lệ nhiễm bệnh mức trung bình (40%) Triệu chứng quan sát chủ yếu khảm, mép non xoăn, còi cọc, phát triển tương tự triệu chứng đồng ruộng Thực lây nhiễm nhân tạo mẫu PVY lên thuốc ( N Benthamiana, N Xanthi), rau muối, diêm mạch, cúc bách nhật Kết loại thuốc xuất triệu chứng điển hình bệnh virus: N benthamiana có triệu chứng chuyển vàng, xuất vòng tròn tâm đen bề mặt lá, héo dần chết khơ, N Xanthi xoăn lại, có vết hoại màu trắng, chết khô Chứng tỏ loại thuốc ký chủ mẫn cảm với PVY Thực lấy nhiễm nhân tạo mẫu PVY lên khoai tây, cà chua, ớt Kết khoai tây kí chủ mà PVY gây hại nặng 100% đem lây xuất triệu chứng phiến xoăn co lại, thân cong 57 xuống, gốc đen dần lan lên thân cây, chết rũ đốm chết hoại màu đen nằm dọc phần gân lá, héo vàng, gân chuyển màu đen Tiếp ớt biểu triệu chứng phiến dày lên, non khảm rõ xanh bề mặt Cịn lại cà chua khơng biểu triệu chứng Từ nên khuyến cáo bà nông dân thu dọn cỏ dại từ vụ trước khoai tây không nên trồng họ cà liên tiếp để làm giảm thiệt hại PVY gây 5.2 Kiến nghị Do điều kiện thời gian nghiên cứu nhiều hạn chế nên chúng tơi chưa có điều kiện sâu nghiên cứu đề nghị tiếp tục nghiên cứu số vấn đề sau: 1.Tiếp tục lấy nhiễm mẫu bệnh thu thập khác lên họ cà, họ đậu, thị khác 2.Kiểm tra RT - PCR mẫu bệnh thu thập đồng ruộng mẫu bệnh lây lên triệu chứng nhà lưới 3.Xác định xác virus xuất họ cà họ đậu TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu nước Áp dụng QCVN 01-38: 2010/BNNPTNT Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia phương pháp điều tra phát dịch hại trồng Cao Duy Phúc (2013) “Luận văn Nghiên cứu giải mã trình tự hệ genomo chủng virus xoăn thuốc (TLCV) phân lập Việt Nam” Hà Viết Cường (2009) Bài giảng công nghệ sinh học bệnh Hà Viết Cường (2010) Bài giảng virus thực vật phytoplasma virion Lê Thị Thủy cs., 2014 “Tạo thuốc mang gen đa đoạn kháng virus TMV, CMV, TYLCV TSWV kỹ thuật RNAi, Tạp chí khoa học tự nhiên công nghệ, Trường đại học quốc gia Hà Nội, trang 58 58 Nguyễn Thị Hạnh (2016) “Luận văn Đánh giá ảnh hưởng sản xuất thuốc lào đến môi trường địa bàn xã Quảng Thạch – huyện Quảng Xương – tỉnh Thanh Hóa”, trang 5-9 Tuệ Linh “Thuốc lào tác dụng đời sống” http://tuelinh.vn/thuoclao-va-tac-dung-cua-no-trong-doi-song-6889 , ngày truy cập 11/07/2018 Tài liệu nước 1.Basky, Z., and Almasi, A (2005) Differences in aphid transmissibility and translocation between PVYN and PVYO isolates J Pestic Sci Crosslin, J M., Hamm, P B., Hane, D C., Jaeger, J., Brown, C R., Shiel, P J., Berger, P H., and Thornton, R E 2006 The occurrence of PVYO, PVYN, and PVYN:O strains of Potato virus Y in certified potato seed lot trials in Washington and Oregon Plant Dis Canadian Tobacco Research Foundation ( 2017) Potato Virus Y (PVY) in Tobacco Fields, July 20, 2017 http://ctrf1.com/2017/07/potato-virus-y-pvy-in-tobacco-fields/ , ngày truy cập 04/07/2018 Chikara Masuta and cs., 1999 A Single Amino Acid Change in Viral GenomeAssociated Protein of Potato Virus Y Correlates with Resistance Breaking in ‘Virgin A Mutant’ Tobacco, Phytopathology, number 2, Pages 118-123 5.Cervantes, F A., and Alvarez, J M (2008) Role of hairy nightshade Solanum sarrachoides (Sendtner) in the transmission of Potato virus Y (PVY) strains by aphids and study of different PVY strains reaction on Solanum tuberosum (Linnaeus) (Abstr.)Phytopathology D.Blancard (2013) Potato virus Y Ephytia 7.E.K Chatzivassiliou and N.I Katis(1999).A Closterovirus (Family: Closteroviridae) Isolated from Tobacco Crops in Northern Greece (Macedonia), Plant disease, number 2, page 198 H Xu (2008) Occurrence of Potato Tuber Necrotic Isolates of Potato virus Y in a Commercial Tobacco Field in Southern Ontario, Canada, Plant disease, number 11, page 1586 9.L Robles-Hernández (2010) First Identification of an Unusual Recombinant Potato virus Y Strain in Potato in Mexico Plant disease, number 10, page 1262 59 10 Nazneen Shakir and cs., 2018 Occurrence of Potato virus Y (PVY) recombinants, strain PVYNTN, infecting tobacco in Pakistan, Plant disease 11 Novenytermeles Weilguny, H., and Singh, R P (1998) Separation of Slovenian isolates of PVYNTN from the North American isolates of PVYN by a 3-primer PCR J Virol Methods 12 Singh, M., and Singh, R P 1996 Nucleotide sequence and genome organization of a Canadian isolate of the common strain of potato virus Y (PVYO) Can J Plant Pathol 13.SIGOBODHLA T.E.; DIMBI S (2014) Potato virus Y (PVY) incidence on tobacco in Zimbabwe – trends in the last decade, Tobacco Research Board, Harare, Zimbabwe https://www.coresta.org/abstracts/potato-virus-y-pvy-incidence-tobacco-zimbabwetrends-last-decade-27894.html , ngày truy cập 04/07/2018 14 Xu, H., Nie, J., and De Boer, S H (2005) Differentiation and molecular detection of Canadian necrotic strains of Potato virus Y Can J Plant Pathol 15 J M Crosslin ( 2002) First Report of the Necrotic Strain of Potato virus Y (PVY N) on Potatoes in the Northwestern United States Plant disease , number 10, page 1177.16 Whitworth, J L., Novy, R G., Hall, D G., Crosslin, J M., and Brown, C R 2009 Characterization of broad spectrum Potato virus Y resistance in a Solanum tuberosum ssp andigena-derived population and select breeding clones using molecular markers, grafting, and field inoculations 60 ... nông dân nghiên cứu bệnh virus thiệt hại bệnh gây hạn chế Các nghiên cứu chủ yếu tập trung vào phân lập, giám định bệnh Do chúng tơi tiến hành nghiên cứu diễn biến bệnh khảm thuốc lào (PVY) đồng... Hình 4 Ruộng thuốc lào huyện Nam Trực – Nam Định 35 Hình Triệu chứng thuốc lào nhiễm PVY Vĩnh Bảo – Hải Phòng (A) , Tiên Lãng- Hải Phòng (B), Thủy Nguyên- Hải Phòng (C) Nam TrựcNam Định (D) ... tra thành phần bệnh hại thuốc lào Hải Phòng Nam Định Điều tra mức độ, diễn biến PVY hại thuốc lào Hải Phòng Nam Định Đánh giá phổ ký chủ PVY nhà lưới lây bệnh nhân tạo thuốc lào số thuộc họ