Tài liệu ôn thi Thực hành môn Sinh lý của trường Đại học Y dược Huế: gồm các bài: đếm hồng cầu, định công thức bạch cầu, định nhóm máu hệ ABO, RH, ghi đồ thị hoạt động tim ếch, kích thích dây thần kinh X, gây ngoại tâm thu, phân tích các nút tự động của tim, đo điện tim
Bài ĐẾM HỒNG CẦU Câu 1: A/c cho biết nguyên tắc đếm HC - Pha loãng máu vs tỷ lệ xđ - Cho máu pha loãng vào phịng đếm biết rõ kích thước - Đếm kính hiển vi, từ tính số lượng HC có mm3 máu Câu 2: A/c cho biết phương tiện dụng cụ đếm HC Kính hiển vi, vật kính 10, thị kính 10 Kim chích máu, cồn sát trùng, bơng, kính Dd Marcano: để hồ lỗng máu Ống trộn HC Phòng đếm Câu 3: A/c cho biết dd Marcano có t/c t/d Dd Marcano dd đẳng trương có t/d bảo vệ HC khỏi vỡ, khỏi biến dạng ni dưỡng HC dùng để hồ lỗng máu Câu 4: A/c mơ tả ống trộn HC Ống trộn HC mao quản thủy tinh có chia vạch, phần phình hình bầu dục, có chữa hạt trộn màu đỏ Trên ống trộn có vạch ghi số theo tỷ lệ V: 0,5; 101 Câu 5: A/c mô tả phòng đếm (buồng đếm) - Phòng đếm hay buồng đếm dụng cụ cho máu hịa lỗng vào để đếm - Là thủy tinh dày hình chữ nhật , bề mặt có rãnh ngang chia mặt phòng đếm thành bờ: bờ bên bờ giữa, bờ có cấu tạo thấp bờ bên khoảng 1/10 mm - Trên bờ có khắc lưới đếm Câu 6: A/c mơ tả lưới đếm Lưới đếm kẽ ngang dọc chia bờ làm thành ơ, có loai sd để đếm HC BC: - Ơ vng lớn: Đây vùng để đếm BC, gồm nhóm nằm góc lưới đếm, nhóm có 16 vng lớn, vng lớn có cạnh 1/4 mm - Ơ vng caro: Đây vùng để đếm HC, gồm 25 ô vuông caro nằm lưới đếm, ô vuông caro chia thành 16 ô vuông con, ô vuông có cạnh 1/20 mm Câu 7: Tổng số ô vuông lớn lưới đếm bao nhiêu: 16x4=64 ô Câu 8: Tổng số ô vuông lưới đếm bao nhiêu: 25x16=400 ô Câu 9: Thể tích hình khối tạo bờ kính (Khi ta dán kính lên buồng đếm) có diện tích đáy vng bao nhiêu? Chú thích rõ giá trị cạnh chiều cao? V= 1/20 x 1/20 x 1/10 = 1/4000 mm3 Cạnh: 1/20 mm Chiều cao: 1/10 mm Câu 10: Nêu bước tiến hành đếm HC Chuẩn bị phịng đếm Sát trùng, chích máu Pha loãng máu ống trộn HC Rỏ máu ống trộn vào phòng đếm Đếm Câu 11: Nêu bước chuẩn bị phòng đếm Lau phòng đếm, bảo đảm phịng đếm phải khơ Dán kính lên phịng đếm (phải làm nhẹ nhàng, cẩn thận kính mỏng, dễ vỡ) Đặt phịng đếm dán kính lên kính hiển vi Dùng mắt thường để điều chỉnh lưới đếm nằm vị trí vật kính, sau điều chỉnh ốc vi cấp để thấy lưới đếm tồn cảnh phịng đếm Tìm vùng đếm HC nằm lưới đếm, xđ ô vuông caro: Ô trái trên, ô phải trên, ô trái dưới, ô phải dưới, Đây dung để đếm HC Câu 12: A/c nêu bước sát trùng chích máu Lấy máu ngón tay số số bên trái: sát trùng thật chỗ lấy máu Nếu trời lạnh trước nên cử động bàn tay nhẹ nhàng, vuốt nhẹ cho máu dồn đầu ngón Sát trùng kim chích máu, bóp căng da đầu ngón tay chích Bỏ giọt máu đầu (vì dễ lẫn tạp chất tế bào da) Lấy giọt máu chảy thật trịn (đường kính khoảng 3mm được) Tránh bóp mạnh đầu ngón tay để nặn máu dịch kẽ chảy hòa lẫn vs máu làm kết sai Có thể nặn máu phiến kính để hút Câu 13: Nên lấy máu vào thời gian nào? Khi lấy máu có cần lấy thời điểm khơng? Vì sao? - Nên lấy máu xa bữa ăn, thường lấy vào sáng sớm lúc người xét nghiệm máu chưa ăn uống - Khi lấy máu cần lấy máu vào định để tiện so sánh với lần thử trước cho xác - Vì chưa xảy hoạt động chuyển hóa làm máu bị pha lỗng Câu 14: A/c cho biết sát trùng chích máu, thiết phải bỏ giọt máu đầu? Vì giọt máu đầu dễ lẫn tạp chất tế bào da Câu 15: A/c cho biết sát trùng chích máu, khơng nên bóp mạnh đầu ngón tay để lấy máu? Để tránh dịch kẽ chảy hịa lẫn với máu làm pha lỗng máu Câu 16: A/c nêu bước pha loãng máu ống trộn HC Hút máu vào ống trộn đến vạch 0,5 Lưu ý: + Hút lần liên tục, không để cột máu bị ngắt quãng bọt khí + Khi gần đến vạch 0,5 hút máu nhẹ nhàng để máu khỏi vạch + Phải làm nhanh để máu ống trộn không bị đông Hút tiếp tục dung dịch pha loãng HC đến vạch 101 Dúng hai đầu ngón tay bịt chặt hai đầu ống trộn lắc phút, dung máy lắc Câu 17: Trong q trình pha lỗng máu ống trộn HC, máu vạch 0,5 a/c có biện pháp xử trí - Nếu máu q vạch dung bơng khơ chấm đầu ống trộn để hút máu dần cho vạch - Nếu cột máu lên vạch nhiều phải rửa ống trộn, hút lại từ đầu hút bông, số HC bám thành ống mao quản nhiều làm xác Câu 18: A/c cho biết tỷ lệ Máu/Máu pha loãng bao nhiêu? Giải thích Tỷ lệ Máu/Máu pha lỗng = 0,5/101 = 0,5/100 = 1/200 phần dung dịch ống trộn từ vạch trở xuống khơng có máu nên tỷ lệ pha loãng thực 0,5/100 = 1/200 tức máu pha loãng 200 lần Câu 19: A/c nêu bước rỏ máu ống trộn vào phòng đếm Bỏ 3-4 giọt máu đầu giọt nằm phần mao quản ống trộn khơng có máu Lấy giọt máu đường kính khoảng 3mm, rỏ vào vị trí cạnh kính tiếp xúc với bờ phịng đếm Máu tràn vào ô đếm lực mao dẫn Rỏ máu xong đặt phịng đếm vào kính hiển vi vị trí ban đầu đếm Câu 20: A/c nêu ý rỏ máu ống trộn vào phịng đếm - Khơng để máu loang mặt kính - Giọt máu rỏ phải vừa đủ tràn khắp + Nếu q, máu tràn vào không khắp tạo nên khoảng trống, ta không đếm + Nếu giọt máu lớn quá, kính bị nâng lên, đếm khơng xác Câu 21: A/c nêu quy tắc đếm HC lưới đếm - Đếm ô vuông caro tức 80 ô vuông - Trong ô vuông caro, ta đếm HC ô vuông theo thứ tự từ trái sang phải, từ xuống theo đường zic-zac - Trong ô vuông con, ta đếm HC long ơ, cạnh trên, góc phải cạnh phải + Lưu ý: đường cạnh đường + Khi đếm tránh bỏ sót Câu 22: A/c nêu cách tính kết đếm HC - Giả sử, sau đếm ô vuông caro ta số lượng A HC - vng caro có 80 vng con, vng có V=1/4000 mm3 - Độ pha lỗng máu: 1/200 Như cơng thức tính số lượng HC (n) mm3 máu là: n = A.4000.200 / 80 = 10000A - Khi đếm số HC ô caro A, ta cần thêm sau số số lượng HC mm3 máu Câu 23: Nêu rõ số lượng HC người VN khỏe mạnh Nam: 5.400.000 ± 300.000 / mm3 Nữ: 700.000 ± 300.000 / mm3 BÀI 5: ĐỊNH CÔNG THỨC BẠCH CẦU Câu 1: Nêu nguyên tắc định CT BC Dàn mỏng máu phiến kính, nhuộm Giêm-sa soi kính hiển vi Dựa vào hình dạng, kích thước BC, hình dạng nhân, cách bắt màu phẩm nhuộm nhân bào tương để nhận dạng loại BC Đếm 100 BC định tỷ lệ % loại BC Câu 2: Nêu bước tiến hành định CT BC Làm tiêu kính phết Nhuộm Giêm-sa Nhận dạng đếm loại BC Câu 3: Tác dụng Cồn tuyệt đối: - Cố định tiêu sau kéo máu xong - Lau chùi tiêu vật kính 100 sau dùng dầu soi vật kính Câu 4: Tác dụng Thuốc nhuộm Giêm-sa: nhuộm tiêu (Đỏ eosin: acid, Xanh metylen: base) Câu 5: Tác dụng Dầu Cedre - Để soi vật kính 100 - Tăng độ hội tụ ánh sáng - Tăng tính chiết quang - Tạo mơi trường đồng để ánh sáng qua Câu 6: Tác dụng dd Xylen: lau chùi vật kính dầu (kính mắt) Câu 7: Nêu rõ cách làm tiêu kính phết Chọn phiến kính sạch, khơng có dầu mỡ, cạnh trơn láng Sát trùng, chích máu, bỏ giọt máu đầu nặn giọt máu nhỏ (đường kính khoảng 3mm), đặt giọt máu vào khoảng 1/4 phiến kính t1 Dùng phiến kính sach t2, cạnh trơn, thẳng, không sứt mẻ, để nghiêng 30 độ, tiếp xúc vs phiến kính t1 vị trí có giọt máu cho máu dàn cạnh phiến kính t2 Đẩy phiến kính t2 phía 3/4 cịn lại phiến kính t1 cho máu dàn mỏng, đều, khơng gợn sóng có (Tiêu chuẩn tiêu kính phết) Cố định tiêu cồn tuyệt đối phút Để khô Câu 8: Nêu rõ cách nhuộm Giêm-sa - Dùng dd Giêm-sa để nhuộm theo tỷ lệ pha loãng: Giêm-sa mẹ/ nước cất trung tính = 1/6 1/7 - Nhỏ dd Giêm-sa lên tiêu cố định, để 15 đến 20 phút Rửa tiêu dòng nước chảy Để khô Câu 9: Nêu rõ cách nhận dạng tỷ lệ loại BC BC hạt trung tính (60-70%) + Nhân: chưa chia múi chia thành nhiều múi + Bào tương: có hạt nhỏ, mịn, bắt màu hồng tím + Kích thước: gấp đôi HC BC hạt ưa acid (2-4%) + Nhân: thường chia múi nối vs hình gọng kính + Bào tương: có hạt to, trịn, bắt màu da cam + Kích thước: gấp đôi HC BC hạt ưa base (0,5-1%) + Nhân: chia thành nhiều múi hình hoa thị + Bào tương: có hạt to, nhỏ, khơng nhau, nằm đè lên nhân, bắt màu xanh đen + Kích thước: gấp đôi HC BC lympho (20-25%) + Nhân: to, tròn, bắt màu kiềm chiếm gần hết tế bào + Bào tương: dải màu xanh lơ bao quanh nhân, khơng có hạt + Có loại: BC Lympho lớn: size gấp đôi HC BC Lympho bé: size HC BC mono (3-8%) + Nhân: thường có hình hạt đậu nằm lệch phía, bắt màu acid yếu + Bào tương: bắt màu base yếu + Kích thước: lớn (*Nhân khơng đồng nhất: có khoảng trắng nhân) Câu 10: Nguyên tắc đếm để định tỷ lệ BC - Đếm đuôi tiêu - Đếm theo đường zic-zac - Đếm đủ 100 BC Câu 11: Tại tiêu kính phết phải có Vì BC có kích thước lớn, nên dàn mỏng thường tập trung phần đuôi tiêu phần mỏng nên dễ nhận dạng BC Câu 12: Dựa vào đâu để phân biệt BC có hạt Dựa vào cách bắt màu thuốc nhuộm Giêm-sa để phân loại BC có hạt Câu 13: Định CT BC thường gì? Định CT BC thường định tỷ lệ % loại BC Sự thay đổi loại BC giúp ta có hướng chẩn đốn số bệnh Câu 14: Có cách đếm BC? Có cách: đếm máy đếm BC đếm hình vẽ 100 vng 10 BÀI ĐỊNH NHÓM MÁU HỆ ABO Câu Nêu nguyên tắc định nhóm máu hệ ABO - Trộn máu người thử với giọt huyết mẫu biết trước kháng thể - Quan sát tượng ngưng kết hay không ngưng kết xảy HC người thử, từ suy KN màng HC biết nhóm máu Câu Nếu phương tiện định nhóm máu ABO Phiến sứ phiến kính 2 đũa thủy tinh Dụng cụ sát trùng chích máu Ba lọ huyết mẫu: kháng A (anti A), kháng B (anti B), kháng AB (anti AB) *Lưu ý: + Huyết kháng A có KT làm ngưng kết HC chứa KN A + Huyết kháng B có KT β làm ngưng kết HC chứa KN B + Huyết kháng AB có KT α β Câu Nêu bước tiến hành định nhóm máu ABO Đánh dấu phiến kính phiến sứ bút màu: đầu vạch, đầu vạch Nên dúng phiến sứ có lõm tốt Rỏ giọt huyết lên mặt phiến kính theo vị trí quy định: + Đầu phía vạch rỏ huyết mẫu anti A + Đầu phía vạch rỏ huyết mẫu anti AB + Ở rỏ huyết mẫu anti AB Đường kính giọt khoảng 5mm Sát trùng chích máu, khơng cần bỏ giọt máu đầu Dùng đầu đũa thủy tinh gạt máu đầu ngón tay đặt vào cạnh giọt huyết thanh, đường kính giọt 1/3 đường kính giọt huyết 11 vừa Trộn máu với huyết mẫu Đợi phút đọc kết Chú ý: Dúng đầu đũa thủy tinh khác cho giọt huyết mẫu khác Câu Nêu ý đọc kết - Nếu có ngưng kết: HC tụ lại đám - Nếu khơng có tượng ngưng kết: HC hịa lẫn với huyết mẫu tượng pha loãng máu Câu Sau định nhóm máu hệ ABO, a/c có nhóm máu gì? Giải thích sao? Khi ta cho máu vào huyết mẫu khác có tượng: A(B) Anti A có (khơng có) ngưng kết KN KT suy có (khơng có) KN A màng HC Anti B khơng có (có) ngưng kết KN KT suy khơng có (có) KN B màng HC Anti AB có ngưng kết KN KT có KN A (B) màng HC Kết luận: Chỉ có KN A (B) màng HC mà khơng có KN B (A) SUY RA NHÓM MÁU A (B) 12 O Anti A khơng có ngưng kết KN KT suy khơng có KN A màng HC Anti B khơng có ngưng kết KN KT suy khơng có KN B màng HC Anti AB khơng có ngưng kết KN KT khơng có KN A KN B màng HC Kết luận: khơng có KN A KN B màng HC SUY RA NHÓM MÁU O Câu Sau định nhóm máu hệ ABO, kết cịn nghi ngờ, nên làm gì? Nếu kết cịn nghi ngờ nên cho thêm giọt nước muối sinh lý đẳng trương 9% quấy xem lại rõ BÀI ĐỊNH NHÓM MÁU HỆ RH Câu Nguyên tắc định nhóm máu hệ Rh - Trộn máu người thử với giọt huyết mẫu chứa KT kháng Rh (anti D) - Quan sát tượng ngưng kết hay không ngưng kết xảy HC người thử, từ suy có KN D màng HC hay khơng biết nhóm máu Câu Trong nhóm máu hệ Rh, có loại KN nào? C, c, D, d, E, e (D thường gặp nhất) Câu Phương pháp định nhóm máu Rh Định nhóm máu Rh người phát có KN D màng HC 13 người hay khơng (Rh (+) có KN D Rh (-) khơng có KN D) Để định nhóm máu Rh, ta dùng phương pháp huyết mẫu Câu Nêu cách tiến hành định nhóm máu hệ Rh Rỏ giọt huyết mẫu lên mặt phiến kính phiến sứ, đường kính giọt huyết mẫu khoảng 5mm Sát trùng, chích máu, khơng cần bỏ giọt máu đầu Dùng đũa thủy tinh gạt máu đầu ngón tay đặt vào cạnh giọt huyết mẫu, đường kính giọt máu khoảng 1/3 đường kính giọt huyết mẫu Trộn máu với huyết mẫu Đợi phút đọc kết 14 BÀI 10 GHI ĐỒ THỊ HOẠT ĐỘNG TIM ẾCH KÍCH THÍCH DÂY THẦN KINH X – GÂY NGOẠI TÂM THU Câu Một chu chuyển tim gồm có giai đoạn - Tâm nhĩ thu (0,1s) - Tâm thất thu (0,3s) - Tâm trương toàn (0,4s) Câu Phá tủy ếch Dùng khăn lau ếch Tay trái cầm ếch, ngón gập đầu ếch xuống Vị trí chọc dùi điểm nằm lưng ếch tạo với mắt thành tam giác Tay phải cầm dùi đâm thẳng qua da ngã mũi dùi phía lưng chọc vào tủy sống đến chân sau ếch duỗi thẳng Câu Bộc lộ tim ếch Dùng cặp to nhấc da ngực lên cắt nhát hình chữ V Cắt bỏ mảnh hình tam giác (đỉnh mỏm xương ức, đáy đường nối hai khớp vai) Dùng kẹp nhấc màng tim lên cắt bỏ Câu Kích thích dây X Dùng kéo cắt để bộc lộ tam giác sáng Đáy tam giác sáng có sợi thần kinh màu trắng phía kèm với mạch máu màu đỏ, dây X Tách riêng dây X, luồn sợi dây X nhấc lên Dùng dịng điện cảm ứng kích thích dây X Khi kích thích dây X, dây X tiết Acetyl cholin làm ức chế tần số 15 phát xung nút Remark (nút xoang) nên làm tim đập chậm yếu, ngừng đập tâm trương Câu Gây ngoại tâm thu - Trong giai đoạn tâm thu: tim khơng đáp ứng với kích thích - Trong giai đoạn tâm trương: tim đáp ứng với kích thích tạo nên nhát bóp phụ, ngoại tâm thu Câu Các đặc điểm để phân biệt ngoại tâm thu đồ thị - Hình dạng bất thường - Có giai đoạn nghỉ bù - Gần với chu kỳ trước, xa với chu kỳ sau Câu Đồ thị tim ếch (Xem giáo trình thực hành) Chú ý: - Giai đoạn nhĩ thu, thất thu, tâm trương toàn đoạn điểm - Ngoại tâm thu xuất đoạn tâm trương toàn (vì tâm thu, tim khơng đáp ứng kích thích) - Có khoảng nghỉ bù sau ngoại tâm thu 16 BÀI 11 PHÂN TÍCH CÁC NÚT TỰ ĐỘNG CỦA TIM Câu Theo lý thuyết, chu kì tim có giai đoạn nào? Theo thực hành? * Theo lý thuyết: Có giai đoạn * Theo thực hành: Có giai đoạn + Đổ đầy thất + Tâm nhĩ thu + Tâm thất thu + Tâm thất thu + Tâm thất giãn + Tâm trương toàn Câu Tại kích thích dây X tim ếch làm tim đập chậm ngừng đập Bởi dây X chi phối nút Remark xoang tĩnh mạch (nút chủ nhịp), acetylcholin giải phóng tác động vào làm giảm tần số nút Remark, kích thích đủ mạnh làm tim ngừng đập Câu Thế trơ tuyệt đối? Trơ tương đối? Siêu bình thường? - Trơ tuyệt đối tim hồn tồn khơng đáp ứng với kích thích - Trơ tương đối tim đáp ứng với kích thích - Siêu bình thường tim đáp ứng dễ dàng với kích thích dù nhỏ Câu Buộc nút thứ để c/m điều gì? C/m nút Remark tim ếch nút chủ nhịp liên hệ chứng minh nút xoang tim người nút chủ nhịp Câu Buộc nút thứ hai để c/m điều gì? C/m phận hệ thống dẫn truyền có khả tự động phát xung tần số phát xung giảm dần từ xuống Câu Tại buộc nút thứ xoang TM ngừng đập, tâm nhĩ tâm thất ngừng đập Xoang TM đập nút Remark xoang TM nút chủ nhịp không chịu 17 chi phối nút nên đập bình thường Tâm nhĩ tâm thất ngừng đập có nút Ludwig tâm nhĩ ức chế hoạt động nút Bidder tâm thất Câu Ghi đồ thị để c/m chu kì tim gồm có giai đoạn: nhĩ thu, thất thu, tâm trương toàn 18 CÂU HỎI PHỤ Câu Dd Marcano dùng để làm gì? Tại phải hịa lỗng? Để hịa lỗng máu Vì số lượng HC, BC, TC nhiều Hịa lỗng để dễ đếm Câu Vì lấy máu vạch 0.5 vạch 0.6 lấy bơng thấm đầu ống để hút bớt cho vạch cịn vượt q vạch 0.6 nên súc rửa để lấy lại từ đầu? Vì vượt vạch 0.6 có lượng HC bám vào thành ống đáng kể dẫn đến tăng số lượng HC ống trộn làm cho kết thiếu xác (sl tăng lên), cịn vạch 0.6 sai lệch khơng đáng kể nên hút bớt Câu Tại phải lấy máu xa bữa ăn? Vì lấy máu sau bữa ăn có nhiều chất dinh dưỡng vào máu đếm HC hơn, chất che khuất HC, khó khăn cho việc đếm Câu Như phương pháp HC mẫu? Phương pháp Huyết mẫu? - PP Huyết mẫu pp cho biết trước KT, từ suy KN màng HC người thử biết nhóm máu, gọi pp định nhóm máu xi - PP HC mẫu pp cho biết trước KN màng HC, từ suy KT có huyết tương người thử biết nhóm máu, gọi pp định nhóm máu ngược Câu Nhược điểm dùng pp HC mẫu - Thời gian bảo quản ngắn ngày - Phải quay li tâm huyết tương - Không dùng cho trẻ sơ sinh (vì tháng sau sinh xuất KT) 19 Câu Dùng huyết mẫu Anti A Anti B biết nhóm máu, phải dùng thêm huyết mẫu Anti AB? Dùng thêm huyết mẫu Anti AB để so sánh kết với mẫu đồng thời khẳng định lại cho chắn, xảy sai sót thao tác chất lượng huyết mẫu có vấn đề 20