Đối với phụ nữ mang thai, ngoài cfDNA của chính bản thân người mẹ thì trong huyết tương còn có một lượng cfDNA có nguồn gốc từ thai nhi, hay còn gọi là cffDNA (cell free fetal DNA). Nhiều nghiên cứu cho rằng cffDNA có nguồn gốc từ quá trình tự chết của các tế bào nhau thai xảy ra trong cơ thể người mẹ.
THỜI SỰ Y HỌC, Chuyên đề SỨC KHỎE SINH SẢN, Tập 17, Số 1, Tháng – 2017 Ứng dụng cffDNA sàng lọc trước sinh không xâm lấn Vũ Thị Nhung* Đào Mai Anh** Sự tồn cffDNA máu thai phụ Ta biết, cfDNA (cell-free DNA) có mặt huyết tương nguồn gốc từ trình tự chết (apoptosis) hoại tử tế bào có kích thước khoảng từ 180 200bp Đối với phụ nữ mang thai, ngồi cfDNA thân người mẹ huyết tương cịn có lượng cfDNA có nguồn gốc từ thai nhi, hay cịn gọi cffDNA (cell free fetal DNA) Nhiều nghiên cứu cho cffDNA có nguồn gốc từ q trình tự chết tế bào thai xảy thể người mẹ So với cfDNA mẹ, cffDNA có kích thước nhỏ thường có nồng độ khoảng 3% - 13% tổng số cfDNA có mặt huyết tương người mẹ phát từ tuần thứ thai kì.3,5 Năm 1997, báo cáo Dennis Lo đồng nghiệp có mặt cffDNA có nguồn gốc từ nhiễm sắc thể (NST) Y thai nhi có giới tính nam huyết tương sản phụ, hàng loạt báo cáo nghiên cứu khác cffDNA thực công bố, cffDNA sử dụng cơng cụ tiềm cho q trình sàng lọc chẩn đoán bất thường di truyền thai nhi thời kỳ mang thai Ngoài ra, cffDNA có đặc tính biến máu người mẹ vịng khoảng vài sau sinh, vậy, sử dụng cffDNA cho sàng lọc trước sinh phù hợp, hồn tồn khơng có nguy sai lệch kết ảnh hưởng lần mang thai trước Bắt đầu từ xét *BV Hùng Vương, Email: bsvtnhung@yahoo.com.vn DĐ: 0903383005 ** Email: maianh@gentis.com.vn DĐ: 0974 526 025 50 nghiệm thực vào năm 2011 Mỹ sử dụng cffDNA để phát hội chứng Down, cffDNA tiếp tục nghiên cứu nhằm mở rộng thêm ứng dụng lĩnh vực sàng lọc bất thường di truyền cho thai nhi thời kỳ mang thai Ứng dụng cffDNA sàng lọc trước sinh không xâm lấn Theo thống kê, giới 150 trẻ sinh lại có trẻ mang bất thường NST2, tỷ lệ phụ nữ mang thai lớn nhiều thai nhi mang bất thường di truyền thường có khả cao bị sảy lưu thai thời kỳ mang thai Trong đó, tỷ lệ trẻ mắc hội chứng Down (thể tam bội NST 21) phổ biến nhất, với tỷ lệ 800 trẻ sinh lại có trẻ mắc hội chứng Down, tỷ lệ trẻ sinh mang hội chứng Patau (thế tam bội NST 13) 1/10000 hội chứng Edwards (thể tam bội NST18) 1/6000.2 Đối với NST giới tính, hội chứng liên quan đến bất thường số lượng NST giới tính phổ biến hội chứng Klinefelter (47, XXY), với tỷ lệ 500 nam giới lại có nam giới mắc hội chứng Đối với thể đơn bội, thể đơn bội NST giới tính X(45, X), nguyên nhân gây nên hội chứng Turner trường hợp có khả sống sinh Theo nghiên cứu, nguy thai nhi mang bất thường di truyền thường tăng theo tuổi mang thai người mẹ, xảy độ tuổi không phụ thuộc vào địa lý hay dân tộc.1 Siêu âm sàng lọc huyết hai phương pháp sàng lọc trước sinh phổ biến nay, có khả phát số nguy thai nhi mang bất thường di truyền định Tuy nhiên, hai phương THÔNG TIN CẬP NHẬT pháp lại có khả cho kết dương tính giả cao (khoảng 5%).8 Theo sau kết dương tính từ xét nghiệm này, thai phụ cần thực xét nghiệm chẩn đốn khác có độ nhạy độ đặc hiệu cao nhằm xác nhận lại kết bất thường thai nhi trước đưa định Các xét nghiệm chẩn đoán thường định sử dụng là: sinh thiết gai (chorionic villus sampling – CVS), chọc ối (amniocentesis – AC) thu mẫu máu dây rốn (percutaneous umbilical blood sampling – PUBS), nhiên phương pháp thường tồn số nguy liên quan đến thai nhi, sẩy thai, thai lưu nhiễm trùng trình thực Đối với sinh thiết gai nhau, tổng tỷ lệ sẩy thai, thai lưu đơn thai sau sinh thiết gai 2%, thai đơi 3.84% Trong đó, chọc ối, nguy thai đơn 1.9% thai đôi 3.07% Đối với thu máu dây rốn, phương pháp thường sử dụng cho đơn thai nguy ảnh hưởng đến thai nhi phương pháp 2%, phương pháp có nguy cao nhiễm trùng chảy máu lâu dài, dẫn đến nguy sức khỏe khác sản phụ thai nhi Từ nhược điểm phương pháp chẩn đoán trước sinh, sàng lọc trước sinh không xâm lấn (non-invasive prenatal testing – NIPT) sử dụng lựa chọn an toàn sức khỏe thai phụ thai nhi Xét nghiệm sử dụng cffDNA nên mẫu xét nghiệm sử dụng mẫu máu từ thai phụ, loại bỏ nguy ảnh hướng đến sức khỏe thai nhi so với xét nghiệm chẩn đoán thông thường Hiện sử dụng cffDNA cho sàng lọc bất thường thai nhi có nhiều phương pháp tiếp cận khác nhau, chủ yếu phương pháp sử dụng cơng nghệ giải trình tự hệ (next generation sequencing – NGS) thuật tốn phân tích sinh học phân tử nâng cao xây dựng tùy theo phương pháp tiếp cận sử dụng.7 Các xét nghiệm đưa vào dịch vụ thường có đặc điểm chung có độ nhạy độ đặc hiệu cao thể lệch bội NST 18 21 (>99.5%) Độ nhạy lệch bội NST 13 bất thường số lượng NST giới tính thấp (90%) độ đặc hiệu trì mức cao hội chứng (> 99%) Cho tới nay, ứng dụng cffDNA ngày mở rộng, sử dụng cho sàng lọc đột biến đoạn lớn thực từ tuần thứ 10 thai kỳ, nghiên cứu để mở rộng thêm ứng dụng khác việc chẩn đoán bất thường di truyền khác, chuyển đoạn không cân rối loạn đơn gen.3, Tuy nhiên, xét nghiệm có số nhược điểm định Xét nghiệm sử dụng cffDNA làm cơng cụ tiếp cận, nên địi hỏi nồng độ cffDNA máu mẹ cần phải đạt đến mức độ định để xét nghiệm thực Đối với hầu hết tất phương pháp sử dụng cho NIPT sử dụng nay, ngưỡng nồng độ cffDNA cần thiết cho xét nghiệm ≥ 4% tổng số cfDNA có mặt huyết tương người mẹ Ngoài ra, xét nghiệm sàng lọc, nên có mang tỷ lệ âm tính giả dương tính giả định, vậy, tỷ lệ nhỏ nhiều lần so với siêu âm sàng lọc huyết Vì thế, trường hợp kết thai nhi dương tính bất thường di truyền sàng lọc, thai phụ cần xác nhận lại kết xét nghiệm chẩn đoán Các trường hợp cần thực xét nghiệm NIPT Trước định thực xét nghiệm NIPT, thai phụ cần phải tư vấn thảo luận với bác sĩ chuyên môn trường hợp thân nguy có thai nhi Những trường hợp nên thực xét nghiệm bao gồm: - Thai phụ lớn tuổi (> 35 tuổi) Theo nghiên cứu, thai phụ lớn tuổi nguy 51 THỜI SỰ Y HỌC, Chuyên đề SỨC KHỎE SINH SẢN, Tập 17, Số 1, Tháng – 2017 thai nhi mang bất thường di truyền cao - Phụ nữ có kết dương tính bất thường di truyền qua xét nghiệm siêu âm sàng lọc huyết thanh, xét nghiệm xem xét nghiệm xác nhận kết xét nghiệm trước Điều giúp giảm khả cần phải trải qua xét nghiệm chẩn đốn khác, từ giảm nguy thai nhi - Phụ nữ có tiền sử sẩy thai, thai lưu nhiều lần trước sinh mang bất thường di truyền Tóm lại, NIPT xét nghiệm sàng lọc Vì vậy, trường hợp kết dương tính, thai phụ cần thực xét nghiệm chẩn đoán để xác nhận kết lần trước đưa định nào.8 52 Tài liệu tham khảo Gary J.W Liao, Ann M Gronowski, Zhen Zhao, 2013, Noninvasive prenatal testing using cell-free fetal DNA in maternal circulation, Elsevier GoldsteinM.L., MorewitzS., 2011, Chronic Disorders in Children and Adolescents, Springer, Ioanna K., Panagiota T., Konstantinos M and Christos K., 2015, Non-invasive prenatal testing (NIPT): limitations on the way to become diagnosis, Diagnosis 3, 141-158 Kypros H Nicolaides, Argyro Syngelaki, Maria del Mar Gil, Maria Soledad Quezada, Yana Zinevich, 2013, Prenatal Detection of Fetal Triploidy from Cell-Free DNA Testing in Maternal Blood, Fetal Diagnosis and Therapy The American college of Obstetricians and Gynecologist and Society for martenal –fetal Medicine, 2015, Committee Opinion 640 The American college of Obstetricians and Gynecologist and Society for martenal – fetal Medicine, 2016, clinical management guidelines for obstetrician-gynecologists , Practice Bulletin 163 Peter Bean, 2014, Non-Invasive Prenatal Testing Using Cell Free DNA in Maternal Plasma: Recent Developments and Future Prospects, J Clin Med 3, 537-565 Wilson R D , Alain G., Franỗois A., Carla C., June C.,2015, Prenatal Diagnosis Procedures and Techniques to Obtain a Diagnostic Fetal Specimen or Tissue: Maternal and Fetal Risks and Benefits, SOGC Clinical Practice Guideline 236 ... đoán trước sinh, sàng lọc trước sinh không xâm lấn (non-invasive prenatal testing – NIPT) sử dụng lựa chọn an toàn sức khỏe thai phụ thai nhi Xét nghiệm sử dụng cffDNA nên mẫu xét nghiệm sử dụng. .. trì mức cao hội chứng (> 99%) Cho tới nay, ứng dụng cffDNA ngày mở rộng, sử dụng cho sàng lọc đột biến đoạn lớn thực từ tuần thứ 10 thai kỳ, nghiên cứu để mở rộng thêm ứng dụng khác việc chẩn... xét nghiệm chẩn đốn thơng thường Hiện sử dụng cffDNA cho sàng lọc bất thường thai nhi có nhiều phương pháp tiếp cận khác nhau, chủ yếu phương pháp sử dụng cơng nghệ giải trình tự hệ (next generation