Tiểu luận nhằm nuôi Spirulina trong môi trường mà hàm lượng NaHCO3 được thay thế bằng NaCl nhằm hướng đến việc sử dụng nước biển để thay thế môi trường truyền thống. Đánh giá sự tăng trưởng và thành phần lipid của Spirulina platensis trong môi trường có thành phần NaHCO3 được thay thế dần bằng NaCl trong 2 điều kiện nuôi khác nhau.
i ii MỤC LỤC MỤC LỤC ii CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC SƠ ĐỒ viii DANH MỤC HÌNH .viii CHƯƠNG 1.MỞ ĐẦU 1.1.ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2.MỤC TIÊU .2 1.3.NỘI DUNG CHƯƠNG 2.TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1.GIỚI THIỆU VỀ TẢO SPIRULINA PLATENSIS 2.1.1.Phân loại 2.1.2.Đặc điểm sinh học Spirulina platensis 2.1.2.1.Hình thái [8] 2.1.2.2.Kích thước 2.1.2.3.Cấu tạo sợi 2.1.2.4.Đặc điểm vận động trú quán 2.1.2.5.Phân bố .8 2.1.2.6.Nguồn dinh dưỡng Spirulina platensis 2.1.2.7.Đặc điểm sinh sản 14 2.1.3.Thành phần hóa học Spirulina platensis 15 2.1.3.1.Protein acid amin [12] [35] 16 2.1.3.2.Glucid 18 2.1.3.3.Lipid [35] 18 2.1.3.4.Sắc tố 19 2.1.3.5.Vitamin 21 2.1.3.6.Khoáng chất 22 2.1.3.7.Enzyme Spirulina 24 2.2.ỨNG DỤNG SPIRULINA VÀO ĐỜI SỐNG .24 2.2.1.Ứng dụng công nghệ thực phẩm [10] 24 2.2.2.Chiết xuất chất có giá trị dinh dưỡng chất có hoạt tính sinh học [20] 25 2.2.3.Chế biến thức ăn cho gia súc, gia cầm thủy hải sản 27 iii 2.2.4.Sản xuất phân bón sinh học 28 2.2.5.Xử lý môi trường 28 2.3.CÔNG NGHỆ NUÔI TRỒNG HIỆN NAY [12] [11] [35] 29 2.3.1.Công nghệ sản xuất Spirulina .29 2.3.1.1.Cơ sở công nghệ nuôi trồng 29 2.3.1.2.Công nghệ nuôi trồng theo hệ thống hở (O.E.S) .29 2.3.1.3.Cơng nghệ ni trồng theo hệ thống kín (C.E.S) .31 2.3.2.Công nghệ nuôi trồng thu hoạch Spirulina Việt Nam [12] 32 CHƯƠNG 3.VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 3.1.Nguyên liệu hóa chất .35 3.1.1.Nguyên liệu 35 3.1.2.Hóa chất dùng thí nghiệm 35 Hóa chất pha mơi trường Zarrouk dùng nuôi Spirulina platensis, xuất xứ từ Trung Quốc 35 3.2.Dụng cụ thiết bị 35 3.2.1.Dụng cụ 35 3.2.2.Thiết bị sử dụng 35 3.3.Phương pháp nghiên cứu .36 3.3.1.Sơ đồ khối trình nghiên cứu 36 3.3.2.Tạo giống Spirulina chịu mặn 37 Để tạo chủng Spirulina chịu mặn cần môi trường chuẩn Zarrouk 37 3.3.3.Khảo sát ảnh hưởng muối NaHCO3, NaCl đến sinh trưởng Spirulina platensis 39 3.3.3.1.Bố trí thí nghiệm 39 3.3.3.2.Phương pháp phân tích 40 3.3.4.Thu xử lý sinh khối 41 3.3.5.Khảo sát hàm lượng protein lipid tổng .41 CHƯƠNG 4.KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 44 4.1.Nuôi trồng Spirulina platensis chịu mặn 44 4.2.Khảo sát ảnh hưởng hàm lượng NaHCO3 NaCl đến sinh trưởng Spirulina platensis 46 4.2.1.Khảo sát thay đởi hình thái tế bào Spirulina platensis môi trường có hàm lượng NaHCO3 NaCl khác 46 iv 4.2.2.Khảo sát ảnh hưởng hàm lượng NaHCO3 NaCl khác đến tăng trưởng Spirulina platensis 48 4.2.2.1.Kết phân tích mật độ quang 49 4.2.2.2.Tốc độ tăng trưởng Spirulina platensis: .51 4.2.2.3.Kết phân tích sinh khối khô 52 4.2.3.Khảo sát ảnh hưởng hàm lượng NaHCO3, NaCl khác đến hàm lượng dinh dưỡng Spirulina platensis .55 CHƯƠNG 5.KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 58 5.1.KẾT LUẬN 58 5.2.KIẾN NGHỊ 59 CHƯƠNG PHỤ LỤC 63 v CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT MGDG: monogalactosyldiacylglycerol DGDG: digalactosyldiacylglycerol SQDG: sulphoquinovosyldiacylglycerol PG: phosphatidylglycerol PUFA: polyunsatured fatty acid (acid béo không no đa nối đơi) MeOH: methanol SFE: Supercritical fluid extraction (trích ly dùng lưu chất siêu tới hạn) C9:0: acid perlagonic C10:0: acid capric C12:0: acid lauric C14:0: acid myristic C16:0: acid palmitic acid C16:1: hexadecenoic acid C18:0: stearic acid C18:1: oleic acid C18:2: linoleic acid C18:3: γ - linolenic acid vi DANH MỤC BẢNG Bảng 2-1: Thành phần hóa học Spirulina (theo chất khô) 15 Bảng 2-2: Thành phần acid amin Spirulina .17 Bảng 2-3: Nhu cầu acid amin thiết yếu người trưởng thành (EAA) khả cung cấp 10g Spirulina 18 Bảng 2-4: Thành phần số acid béo đặc biệt Spirulina 19 Bảng 2-5: Thành phầncác sắc tố tự nhiên Spirulina .19 Bảng 2-6: Hàm lượng vitamin 10g sinh khối khô Spirulina platensis so sánh với nhu cầu hàng ngày người trưởng thành (theo US Daily Value) 21 Bảng 2-7: Hàm lượng B12 số thức ăn so sánh với Spirulina 22 Bảng 2-8: Hàm lượng khoáng 10g sinh khối khô Spirulina so sánh với tiêu chuẩn hàng ngày người (theo US DV) .23 Bảng 3-11: Thành phần môi trường NaHCO3 thay dần NaCl 38 Bảng 3-12: Bố trí thí nghiệm 40 Bảng 4-13: Các điều kiện khí hậu q trình khảo sát 49 Bảng 4-14: Sự tăng trưởng Spirulina mơi trường có hàm lượng NaHCO3 NaCl khác 49 Bảng 4-15: Tốc độ tăng trưởng thời gian hệ Spirulina platensis nuôi hũ nhựa 51 Qua số liệu bảng 4-15 xử lý số liệu theo ANOVA cho thấy: tốc độ tăng trưởng môi trường có hàm lượng NaHCO3 NaCl điều kiện ni hũ có khác biệt có ý nghĩa (p < 0.05) Trong đó, tốc độ tăng trưởng mơi trường Z R1 giống nhau, mơi trường lại R1, R2, R3 lại có tốc độ tăng trưởng tương đương 52 vii Bảng 4-16: Sinh khối Spirulina platensis khô môi trường có hàm lượng dinh dưỡng khác (g/l) 52 Bảng 4-17: Ảnh hưởng môi trường đến hàm lượng sinh khối khô Spirulina platensis 53 Môi trường 53 Hàm lượng sinh khối khô (g/l) 53 Z 53 1.343a 53 R1 53 1.303a 53 R2 53 1.230b 53 R3 53 1.150b 53 R4 53 1.143c 53 Tỉ số F = 11.47 ; Giá trị P = 0.0000 .53 Nhận xét: .54 Bảng 4-20: Kết khảo sát tỉ lệ acid béo bão hòa : acid béo khơng bão hòa sinh khối Spirulina platensis thu nhận từ mơi trường có chứa hàm lượng NaHCO3, NaCl khác 56 Bảng 4-21: Kết phân tích thành phần acid béo sinh khối Spirulina 57 viii DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2-1: Mơ hình công nghệ nuôi trồng sản xuất Spirulina Vĩnh Hảo 34 Sơ đồ 3-2: Sơ đồ khối trình nghiên cứu 37 Sơ đồ 3-3: Sơ đồ cầy chuyền từ môi trường Zarrouk sang môi trường thay 38 Sơ đồ 3-4: Quy trình trích ly lipid 42 DANH MỤC HÌNH Hình 2.1: Một số hình dạng sợi Spirulina platensis nhìn kính hiển vi .6 Hình 2.2: Hồng hạc hồ Châu Phi ăn Spirulina .9 Hình 2.3: Cơ chế quang hợp Spirulina .12 ix Hình 2.4: Khuấy trộn cánh khuấy 13 Hình 2.5: Vòng đời Spirulina [26] 14 Hình 2.6: Sản phẩm nước giải khát đóng hộp cơng ty Vĩnh Hảo 25 Hình 2.7: Một số dược phẩm từ Spirulina .25 Hình 2.8: Nước chiết xuất từ Spirulina platensis Spirulina 26 26 Hình 2.9: Mỹ phẩm kem dưỡng da từ Spirulina 26 Hình 2.10: Một số dạng sản phẩm cho chăn nuôi gia súc nuôi trồng thủy hải sản 27 Hình 2.11: Xử lý nước thải hồ nuôi Spirulina .29 30 Hình 2.12: Earthrise Farms – Nhà ni Spirulina lớn [35] 30 Hình 2.13: Bể nuôi trồng Spirulina Sosa Texcoco – Mexico [10] 30 Hình 2.14: Bể ni trồng Spirulina Earthrise Farms [35] 30 Hình 2.75: Ni Spirulina nhà kính miền Nam nước Pháp [10] 32 Hình 2.16: Bể ni trồng Spirulina Cơng Ty Cổ phần Nước Khống Vĩnh Hảo [38] 33 Hình 4.17: Quá trình ni trồng Spirulina platensis 46 A: Giống Spirulina platensis 46 Hình 4.18: Hình dạng sợi Spirulina platensis môi trường khác .47 Hình 4.19: Đồ thị ảnh hưởng mơi trường đến hàm lượng sinh khối khô Spirulina platensis 54 51 cực đại giống Quy luật thời gian tăng trưởng phụ thuộc vào điều kiện nuôi môi trường nuôi - Spirulina phát triển đạt mức độ cao vào ngày thứ môi trường Z môi trường R1 suốt thời gian nuôi cấy Trong đó, mơi trường R2, R3, R4 lại có thời gian tăng trưởng đạt mức độ cao chậm ngày Sau ngày thứ thứ 10 mật độ quang đo mơi trường tương ứng giảm nên so sánh số OD đến ngày Spirulina platensis đạt mức độ cực đại ngưng Số liệu bảng 4-14 cho thấy, Spirulina tăng trưởng tốt tất môi trường, đạt số OD cao môi trường Z tiếp đến giảm dần môi trường R1, R2, R3, R4 Cường độ quang hợp tế bào Spirulina platensis nuôi trồng môi trường mặn ngày đầu thời gian nuôi trồng tăng chậm mà tăng ngày Nguyên nhân làm ức chế quang hợp hô hấp tảo giai đoạn Na+ tế bào tăng nhanh, tăng nhanh tăng tạm thời tính thấm màng phycobilisom bị tách khỏi thylacoid 4.2.2.2 Tốc độ tăng trưởng Spirulina platensis: Để khẳng định tăng trưởng tối ưu Spirulina platensis điều kiện môi trường khác Tốc độ tăng trưởng yếu tố quan trọng việc xác định đường cong tăng trưởng Dựa vào số OD đo bước sóng 560 nm, ta có bảng tốc độ tăng trưởng Spirulina platensis mơi trường có hàm lượng NaHCO3 NaCl khác sau: Bảng 4-15: Tốc độ tăng trưởng thời gian hệ Spirulina platensis nuôi hũ nhựa Môi trường Tốc độ tăng trưởng Z R1 R2 R3 µ (ngày-1) 0.1602a 0.1526a 0.1379b 0.1361b 52 0.1353b R4 Tỉ số F = 13.11 Giá trị P = 0.0005 (*) Các giá trị thể theo giá trị trung bình kết thống kê lần lặp lại Các giá trị cột có chữ đứng sau khơng ký tự có khác biệt mức ý nghĩa P = 0.05 Qua số liệu bảng 4-15 xử lý số liệu theo ANOVA cho thấy: tốc độ tăng trưởng mơi trường có hàm lượng NaHCO NaCl điều kiện ni hũ có khác biệt có ý nghĩa (p < 0.05) Trong đó, tốc độ tăng trưởng môi trường Z R1 giống nhau, mơi trường lại R1, R2, R3 lại có tốc độ tăng trưởng tương đương Tốc độ tăng trưởng Spirulina platensis thể thông qua bảng số liệu 4-16 Spirulina platensis phát triển mơi trường Z R1 có tốc độ tăng trưởng giống đạt giá trị cao Tốc độ tăng trưởng thấp Spirulina platensis nuôi mơi trường R4 Nhìn chung, tốc độ tăng trưởng Spirulina platensis mơi trường có hàm lượng NaHCO3 thay dần NaCl có giống khác môi trường Tốc độ tăng trưởng Spirulina platensis môi trường Z cao nhất, thấp Spirulina platensis nuôi môi trưởng R4 điều kiện tự nhiên 4.2.2.3 Kết phân tích sinh khối khô Bảng 4-16: Sinh khối Spirulina platensis khô mơi trường có hàm lượng dinh dưỡng khác (g/l) NGÀY Z 0.223 0.267 0.330 0.500 R1 0.243 0.287 0.337 0.473 R2 0.243 0.307 0.387 0.610 R3 0.247 0.310 0.393 0.543 R4 0.267 0.343 0.427 0.523 53 10 11 0.680 0.803 0.953 1.140 1.233 1.343 1.193 1.043 0.643 0.777 0.910 1.073 1.207 1.303 1.153 1.027 0.733 0.790 0.843 0.927 1.003 1.090 1.230 1.050 0.663 0.790 0.877 0.940 1.007 1.037 1.150 0.980 0.623 0.703 0.780 0.840 0.907 0.990 1.143 0.987 Bảng 4-17: Ảnh hưởng môi trường đến hàm lượng sinh khối khô Spirulina platensis Môi trường Z R1 R2 R3 R4 Hàm lượng sinh khối khô (g/l) 1.343a 1.303a 1.230b 1.150b 1.143c Tỉ số F = 11.47 ; Giá trị P = 0.0000 (*) Các giá trị thể theo giá trị trung bình kết thống kê lần lặp lại Các giá trị cột có chữ đứng sau khơng ký tự có khác biệt mức ý nghĩa P = 0.05 54 Hình 4.19: Đồ thị ảnh hưởng môi trường đến hàm lượng sinh khối khô Spirulina platensis Nhận xét: Thời gian môi trường nuôi yếu tố ảnh hưởng đến trình tổng hợp sinh khối Spirulina platensis Spirulina platensis Từ bảng 4-16 nhận thấy hàm lượng sinh khối khô Spirulina platensis tăng thời gian ni tăng đến ngày thứ 10 sinh khối khô Spirulina platensis nuôi môi trường Z mơi trường R1 sẻ giảm, đến ngày thứ 11 sinh khối khơ tất mơi trường nuôi giảm Tuy nhiên, thông qua bảng 4-18 đồ thị 4.20 ta thấy, hàm lượng sinh khối khô Spirulina platensis môi trường Z cao hàm lượng giảm dần môi trường Nhưng hàm lượng sinh khối khô Spirulina platensis môi trường Z R1 lại khơng có ý nghĩa khác biệt Tóm lại: Dựa việc khảo sát ảnh hưởng muối NaHCO 3, NaCl đến tăng trưởng Spirulina platensis điều kiện tự nhiên, ta có nhận xét sau: - Trong điều kiện trời, tế bào Spirulina platensis thích nghi phát triển môi trường mà hàm lượng NaHCO thay phần hoàn toàn NaCl Tuy nhiên, cần nhận thấy khả sống sót Spriulina mơi trường R4 phụ thuộc nhiều vào yếu tố ngoại cảnh khác Nhiều tác giả khác nhận thấy cường độ ánh sáng, thời gian chiếu sáng, nhiệt độ sinh trưởng tuổi Spirulina platensis có ảnh hưởng lớn đến khả chịu muối thể [22] - Trong điều kiện nuôi, tốc độ tăng trưởng Spirulina platensis mơi trường có khác có ý nghĩa khơng có ý nghĩa mức α = 0.05 Spirulina platensis môi trường Z cho tốc độ tăng trưởng nhanh 55 4.2.3 Khảo sát ảnh hưởng hàm lượng NaHCO3, NaCl khác đến hàm lượng dinh dưỡng Spirulina platensis Thí nghiệm nhằm xác định sơ tổng protein, tổng lipid, thành phần acid béo mà đặc biệt acid béo không no điều kiện khảo sát Kết thu làm sở cho việc so sánh, đánh giá định hướng khả sử dụng sinh khối Spirulina Để tiến hành khảo sát thành phần lipid, phải xử lý sinh khối cách: Mẫu Spirulina platensis đem tiến hành phá vỡ tế bào sóng siêu âm thời gian phút, nhiệt độ 4oC với công suất 15w Sau xử lý sinh khối, tiến hành tách chiết lipid dung môi hữu cơ, dùng phương pháp Folch – Lees – Stanley xác định hàm lượng protein tổng số phương pháp Kjeldal theo cách trình bày phần III Kết xác định tổng protein tổng lipid liệt kê bảng Bảng 4.18: Hàm lượng protein tổng số sinh khối Spirulina platensis Môi trường Z R1 R2 R3 R4 Hàm lượng protein tổng số (%TLK) 71.32 70.64 70.28 68.52 67.74 Các số liệu cho thấy hàm lượng protein tổng số tế bào Spirulina platensis môi trường chịu mặn bị giảm Điều chứng tỏ, thay phần hay hoàn toàn hàm lượng NaHCO3 NaCl có ảnh hưởng đến trao đổi protein Spirulina platensis 56 Kết nghiên cứu tổng lipid thành phần acid béo Spirulina platensis mơi trường có hàm lượng NaHCO3 NaCl khác trình bày bảng 4-19, 4-20 4-21 Bảng 4-19: Hàm lượng lipid sinh khối Spirulina platensis môi trường khác Môi trường Z R1 R2 R3 R4 Hàm lượng lipid* (%) 5.07 5.17 5.02 5.15 5.11 Tỉ số F = 0.35;Giá trị P = 0.8396 (*) Hàm lượng lipid tính theo phần trăm khối lượng khô (g/100g mẫu) Các giá trị thể theo giá trị trung bình kết thống kê lần lặp lại Các giá trị cột có chữ đứng sau khơng ký tự có khác biệt mức ý nghĩa P = 0,05 Nhận xét: Hàm lượng lipid sinh khối Spirulina platensis thu nhận từ dịch nuôi cấy mơi trường khác kết hợp với phân tích số liệu ANOVA môi trường Z, R1, R2, R3, R4 khác cho thấy: giá trị trung bình nghiệm thức khác biệt khơng có ý nghĩa (p > 0,05) Như vậy, thay hàm lượng NaHCO3 NaCl không làm ảnh hưởng hàm lượng lipid tổng sinh khối Spirulina platensis thu nhận từ dịch ni cấy khác q trình ni trồng Đem mẫu phân tích sắc ký khí, cho ta biết tỉ lệ thành phần acid béo no, acid béo khơng no có thành phần lipid Spirulina platensis Bảng 4-20: Kết khảo sát tỉ lệ acid béo bão hòa : acid béo khơng bão hòa sinh khối Spirulina platensis thu nhận từ mơi trường có chứa hàm lượng NaHCO3, NaCl khác Mơi trường Acid béo bão hòa (%) Acid béo khơng bão hòa (%) 57 Z R1 R2 R3 R4 51.18 51.20 49.36 50.30 48.88 48.82 48.79 50.65 49.70 51.12 Từ bảng kết 4-20, sinh khối Spirulina platensis nuôi môi trường R4 cho tỉ lệ acid béo không bão hòa cao - Hàm lượng acid béo khơng bão hòa đạt tỉ lệ cao (51,12%) mơi trường R4, thấp môi trường Zarrouk (48,82%) - Từ số liệu trên, cho thấy: thay hoàn toàn hàm lượng NaHCO NaCl hàm lượng acid béo không bão môi trường R4 cho tỉ lệ cao so với việc sử dụng môi trường Z Spirulina platensis Môi trường R4 cho tốc độ tăng trưởng hàm lượng sinh khối khô thấp môi trường nuôi tỉ lệ acid béo khơng bão hòa lại chiếm % cao Bảng 4-21: Kết phân tích thành phần acid béo sinh khối Spirulina C9:0 C10:0 C11:0 C12:0 C14:0 C16:0 C16:1 C18:0 C18:1 C18:2 C18:3 Z 0.12 0.65 3.92 0.14 5.41 39.75 4.64 1.19 4.48 22.54 17.16 R1 0.14 0.16 5.59 0.00 1.34 43 1.6 0.97 3.82 26.29 17.08 R2 0.23 0.14 6.85 0.00 0.62 40.58 4.61 0.94 3.15 24.76 18.13 R3 0.21 0.14 6.83 0.00 0.95 41.29 3.35 0.88 3.37 25.3 17.68 R4 0.18 0.11 6.28 0.00 0.27 40.93 5.37 1.11 3.22 24.21 18.32 Bảng 4-21 cho thấy, acid béo Spirulina platensis có mặt C9:0; C10:0; C11:0; C12:0; C14:0; C16:0; C16:1; C18:0; C18:1; C18:2; C18:3 C16:0 chiếm tỷ lệ cao Trong môi trường nuôi, hàm lượng acid γ -linolenic tập trung cao môi trường R4 Điều chứng tỏ, nuôi Spirulina platensis môi trường 58 mà hàm lượng NaHCO3 thay NaCl không ảnh hưởng đến tỉ lệ acid γ -linolenic thành phần acid béo không no Spirulina platensis CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Sau trình nghiên cứu, đạt kết sau: Spirulina platensis sống tăng trưởng tốt môi trường thay phần hoàn toàn hàm lượng NaHCO3 NaCl Hình dạng Spirulina platensis khơng bị ảnh hưởng hàm lượng NaHCO3 NaCl khác Hình dạng Spirulina platensis hai điều kiện ni khơng có khác biệt Sợi Spirulina platensis có dạng sợi thẳng Mức độ tăng trưởng Spriulina platensis chịu ảnh hưởng điều kiện nuôi, thời gian, mơi trường có chứa hàm lượng NaHCO3, NaCl khác - Chu kỳ thời gian tăng trưởng điều kiện nuôi hàm lượng dinh dưỡng khác khác - Chu kỳ thời gian tăng trưởng đạt cao Spirulina platensis môi trường khác nhau: môi trường Z, R1 mật độ Spirulina platensis đạt cao vào ngày thứ 9, mơi trường lại R2, R3, R4 chu kỳ tăng trưởng đạt cao vào ngày thứ 10 - Tốc độ tăng trưởng Spirulina platensis môi trường chuẩn Zarrouk nhanh 59 - Giữa môi trường khác nhau, Spirulina platensis phát triển không giống Spirulina cho sinh khối cao mơi trường Zarrouk sau giảm dần môi trường khác 4.Hàm lượng lipid tổng khác khơng có ý nghĩa mức 0.05 môi trường - Môi trường R4 cho hàm lượng acid béo khơng bão hòa cao - Spirulina platensis chứa acid béo C9:0; C10:0; C11:0; C12:0; C14:0; C16:0; C16:1; C18:0; C18:1; C18:2; C18:3, C16:0 chiếm tỷ lệ cao mơi trường thí nghiệm Acid γ -linolenic, ưu lớn Spirulina platensis, có hàm lượng cao (chiếm 16 – 18% tổng số acid béo) tập trung nhiều sinh khối Spirulina platensis nuôi môi trường R4 5.2 KIẾN NGHỊ Do thời gian làm luận văn có hạn với hàm lượng sinh khối thu không nhiều nên chúng tơi có số đề nghị sau: - Tiếp tục khảo sát thành phần dinh dưỡng khác Spirulina platensis chịu mặn - Tiếp tục khảo sát thời gian phá vỡ tế bào nhiều mốc khác để so sánh hàm lượng lipid điều kiện môi trường dinh dưỡng chế độ nuôi khác - Nghiên cứu nuôi Spirulina platensis chịu mặn môi trường nước biển tự nhiên 60 CHƯƠNG TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Hoàng Kim Anh, 2006 Hóa học thực phẩm Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Phạm Thị Trân Châu (chủ biên), Trần Thị Áng, 1998 Hóa sinh học Nhà xuất giáo dục Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty, 2000 Vi sinh vật học Nhà xuất hóa học Dương Trọng Hiền, Đặng Hoàng Phước Hiền, Đặng Đình Kim, 1997 Một số đặc điểm sinh lý, sinh hóa Spirulina platensis điều kiện chịu mặn NaCl Tạp chí sinh học, 19(3): 44 – 48 Nguyễn Thị Tuyết Hoa Báo cáo tổng kết đề tài nghiên cứu khoa học – nghiên cứu nuôi trồng Spirulina platensis phương pháp sục khí CO2 thừa lên men cồn Trung tâm kỹ thuật, sở khoa học công nghệ & môi trường tỉnh Đồng Nai Phạm Thị Ánh Hồng, 2003 Kỹ thuật sinh hóa, Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên Nhà xuất Đại Học Quốc Gia Tp.HCM Đặng Đình Kim (chủ biên), Đặng Hồng Phước Hiền, 1999 Công nghệ sinh học vi Spirulina platensis Nhà xuất nông nghiệp Hà Nội, trang 41 Đặng Đình Kim, 1993 Một số hoạt chất có hoạt tính sinh học Spirulina platensis Spirulina ứng dụng chúng, tạp chí sinh học, 15(4):20 -21 Vũ Thành Lâm, 2006 Nuôi trồng Spirulina platensis, 2006 Trung tâm công nghệ sinh học, Đại học Quốc Gia Hà Nội 10 Vũ Thành Lâm, 2006 Nuôi Spirulina platensis quy mô lớn – thiết kế quản lý, trường ĐH quốc gia Hà Nội 11 Lê Văn Lăng, 1999 Spirulina – nuôi trồng – sử dụng y dược & dinh dưỡng Nhà xuất y học, 20 12 Nguyễn Đức Lượng (chủ biên), Cao Cường, 2003 Thí nghiệm hóa sinh học, thí nghiệm cơng nghệ sinh học – tập 1, NXB ĐHQG TpCM 13 Ngô Kế Sương, 1995 Triển vọng sản xuất sử dụng sinh khối Spirulina platensis lam (vi khuẩn lam) Spirulina dinh dưỡng y tế Báo cáo khoa học Spirulina platensis Spirulina dinh dưỡng điều trị 61 14 Nguyễn Hữu Thước, 1986 Nghiên cứu dinh dưỡng cacbon Spirulina platensis Spirulina platensis, tạp chí sinh học, 8(1):8 – 10 15 Nguyễn Hữu Thước, 1997 Phát triển nuôi trồng Spirulina platensis Spirulina nước ta, báo cáo khoa học nghiên cứu sản xuất sử dụng thức ăn có Spirulina platensis Spirulina dinh dưỡng điều trị, trang 21 16 Dương Đức Tiến, Trần Văn Nhân, Đinh Văn Sâm, 1992: Công nghệ nuôi trồng vi Spirulina platensis sử dụng chúng xử lý nước thải Báo cáo khoa học hội thảo quốc gia nuôi trồng sử dụng tế bào tự dưỡng, Viện Công nghệ quốc gia Tiếng Anh 16 A.S Badadzhanov, N.Abdusamatova, F.M Yusupova, N Faizullaeva, L.G Mezhlumyan, and M.Kh.Malikova, 2004 Chemical composition of Spirulina platensis cultivated in Uzbekistan Chemistry of natural compounds, Vol 40, No.3 17 Attilio Converti ∗, Alessandra Lodi, Adriana Del Borghi, Carlo Solisio Cultivation of Spirulina platensis in a combined airlift-tubular reactor system, Biochemical Engineering Journal 32 (2006) 13–18 18 Avigad Vonshak, Aharon Abeliovich, Samy Boussiba, Shoshana Arad and Amos Richmond, 1982 Production of Spirulina biomass: effects of enviromental factors and population density Biomass 2, 175 – 185 19 Bigh, E.G and Dyer, W.J.1959, Arapid method for total lipid extraction and purification, Can.J.Biochem.Physiol, 37:911 – 917 20 G Torzillo, B Pushparaj, F.Bocci, W.Balloni, R Materassi and G.Florenzano, 1986 Production of Spirulina platensis biomass in closed photobioreactors Biomass 11, 61 – 74 21 Flowers T J et al., 1977: Ann Rev Plant physiol., 28:89-121 22 L Chanawongse, Y K Lee,*$ B Bunnag & M Tanticharoen Productivity of the cyanobacterium Spirulina platensis in cultures using sunlight Bioresource Technology 48 (1994) 143-148 23 Luciane Maria Colla, Christian Oliveira Reinehn, Carolina Reichert, Jorge Alberto Vieira Costa, 2006 Production of biomass and nutraceutical 62 compounds by Spiurlina platensis under different temperature and nitrogen regimes Bioresoure technology 24 Lúcia Helena Pelizer, J.C.M, Sunao Sato, Iracema de Oliveira Moraes, 2002 Spirulina platensis growth estimation by pH determination at different cultivation conditions Electronic jouranl of Biotechnology ISSN 25 Margret Piorreck, Klaus – Hinnerk Baasch and Peter Pohl, 1984 Biomass production, total protein, chlorophylls, lipids and fatty acids of fresh water green and blue – green algae under different nitrogen regimes Phytochemistry, vol.23, No.2, pp 207 – 216 26 Michael A Borowitzka *, Commercial production of microalgae: ponds, tanks, tubes and fermenters Journal of Biotechnology 70 (1999) 313–321 27 N Jeeji Bai, a taxonomic appraisal of the genera Spirulina and Arthospira, Shri A.M.M Murugappa Charriar Research Centre, Taramani, Chennai – 600 113 28 Nichols B W., 1973: Lipid composition and metabolism, in “The Biology of blue-green algae”, 7:144 29 Tolga G.KSAN, Ayßeg.l ZEKERÜYAOÚLU, Ülknur AK, 2006 The Growth of Spirulina platensis in Different Culture Systems Under Greenhouse Condition, Turk J Biol 31 (2007) 47-52 30 T.G Tornaben, T.F.Bourne, S.Raziuddin & A.Ben – Amotz, 1985 Lipid and lipopolysaccharide constituents of cyanobacterium Spirulina platensis, marine ecologr – progress series, vol 22:121 – 125 31 Watanabe A., Yamamoto Y., 1979: Proccedings of the Symposium on Taxonomy and Biology of Blue-Green Algae: 556-565 Một số trang Web: 29 http://www.cyanotech.com/Spirulina.html 30 http://en.wikipedia.org/wiki/Spirulina 31 http://www.Spirulina.com/SPLNews96.html 32 http://www.taoherbfarm.com 33 www.spiriulina.com 34 www.SpirulinaSource.com 35 www.vinhhao.com 63 CHƯƠNG PHỤ LỤC A THÀNH PHẦN MÔI TRƯỜNG NUÔI TRỒNG Thành phần NaHCO3 NaCl NaNO3 K2HPO4 MgSO4 CaCl2 K2SO4 FeSO4 EDTA ddA5 ddA6 Z (g/l) 16.8 1.0 2.5 0.5 0.2 0.04 1.0 0.01 0.08 ml ml R1 (g/l) 12.6 3.925 2.5 0.5 0.2 0.04 1.0 0.01 0.08 ml ml R2 (g/l) 8.4 6.85 2.5 0.5 0.2 0.04 1.0 0.01 0.08 ml ml R3 (g/l) 4.2 9.775 2.5 0.5 0.2 0.04 1.0 0.01 0.08 ml ml Thành phần vi lượng A5: Thành phần H3BO3 Khối lượng (g/l) 2.86 MnCl2.4H2O 1.8 ZnSO4.7H2O 0.222 CuSO4.5H2O 0.079 Thành phần vi lượng A6: Thành phần KCr(SO4)2.12H2O Khối lượng (mg/l) 192.0 R4 (g/l) 12.7 2.5 0.5 0.2 0.04 1.0 0.01 0.08 ml ml 64 NiSO4.6H2O 44.8 Co(NO3).2H2O 43.98 B KẾT QUẢ PHÂN TÍCH THÍ NGHIỆM Thí nghiệm: Kết xử lý ANOVA yếu tố hàm lượng sinh khối khô Spirulina platensis điều kiện ni mơi trường có hàm lượng dinh dưỡng khác Analysis of Variance for Sinh khoi - Type III Sums of Squares -Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value -MAIN EFFECTS A:Thoi gian 18.8543 11 1.71402 433.44 0.0000 B:Moi truong 0.210324 0.0525811 13.30 0.0000 INTERACTIONS AB 0.618049 44 0.0140466 3.55 0.0000 RESIDUAL 0.474533 120 0.00395444 -TOTAL (CORRECTED) 20.1572 179 Multiple Range Tests for Sinh khoi by Moi truong -Method: 95.0 percent LSD Moi truong Count LS Mean Homogeneous Groups -12.7 36 0.707222 X 9.775 36 0.745556 X 6.85 36 0.7475 X 3.925 36 0.786111 X 36 0.805 X 65 Multiple Range Tests for Sinh khoi by Thoi gian -Method: 95.0 percent LSD Thoi gian Count LS Mean Homogeneous Groups -0 15 0.244667 X 15 0.293333 X 15 0.370667 X 15 0.514 X 15 0.65 X 15 0.762667 X 15 0.87 X 15 0.976667 X 11 15 1.01733 X 15 1.07133 X 15 1.15267 X 10 15 1.176 X Thí nghiệm: Kết xử lý ANOVA yếu tố hàm lượng lipid sinh khối Spirulina platensis mơi trường có hàm lượng dinh dưỡng khác ANOVA Table for Lipid by Moi truong Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.0463823 0.0115956 0.35 0.8396 Within groups 0.333234 10 0.0333234 Total (Corr.) 0.379617 14 ... đổi môi trường này, tiến hành thực đề tài nghiên cứu: “KHẢO SÁT VIỆC THAY THẾ HÀM LƯỢNG NaHCO BẰNG NaCl TRONG MÔI TRƯỜNG NUÔI TRỒNG TẢO SPIRULINA PLATENSIS 1.2 MỤC TIÊU - Nuôi Spirulina môi trường. .. trưởng Spirulina platensis 46 4.2.1 .Khảo sát thay đởi hình thái tế bào Spirulina platensis mơi trường có hàm lượng NaHCO3 NaCl khác 46 iv 4.2.2 .Khảo sát ảnh hưởng hàm lượng NaHCO3 NaCl. .. - Khảo sát sinh trưởng Spirulina platensis mơi trường có thành phần NaHCO3 thay dần NaCl hai điều kiện nuôi khác (nuôi hũ nhựa nuôi ống nhựa) - Khảo sát hàm lượng protein tổng lipid tổng mơi trường