Nghiên Cứu Xây Dựng Qui Trình PCR Đa Mồi Và Chế Tạo Kít Qui Mô Phòng Thí Nghiệm Chẩn Đoán Neisseria

B GIÁO D C VÀ ĐÀO T O VI N HÀN LÂM KHOA H C VÀ CÔNG NGH VI T NAM VI N SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH V T PH M TH KIM NHUNG NGHIÊN C U XÂY D NG QUY TRÌNH PCR ĐA M I VÀ CH T O KÍT QUY MƠ PHỊNG THÍ NGHI M CH N ĐOÁN NEISSERIA MENINGITIDIS, HAEMOPHILUS INFLUENZAE TÝP B STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE C Đ ng v t h c (Vi sinh v t h c) M : 60420103 LU N VĂN TH C SĨ H C SINH H C S hóa b i Trung tâm H c li u ĐHTN http www lrc tnu edu H N i, 2015 B GIÁO D C VẨ ẨO T O VI N HẨN LÂM KHOA H C VẨ CỌNG NGH VI T NAM VI N SINH THÁI VẨ TẨI NGUYÊN SINH V T PH M TH KIM NHUNG NGHIÊN C U XÂY D NG QUY TRỊNH PCR A M I VẨ CH T O KệT QUY MỌ PHọNG THệ NGHI M CH N OÁN NEISSERIA MENINGITIDIS, HAEMOPHILUS INFLUENZAE TụP B, STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE Chuyên ngƠnh: ng v t h c (Vi sinh v t h c) Mƣ s : 60420103 LU N V N TH C S SINH H C Ng ih ng d n khoa h c: TS oƠn Tr ng Tuyên HƠ N i, 2015 S hóa b i Trung tâm H c li u ĐHTN http www lrc tnu edu TV N Viêm màng não m t b nh lỦ nhi m trùng nghiêm tr ng, t l t vong cao n u không đ c ngh đ n, ch n đoán u tr k p th i Viêm màng não vi khu n b nh nhi m trùng h th n kinh trung ng c p tính v i bi u hi n lâm sàng r t đa d ng nh : h i ch ng màng não r m r , s t cao, d ch não t y đ c m , nhi m khu n huy t B nh di n bi n n ng, n u không đ c ch n đoán, u tr k p th i có th t vong ho c đ l i di ch ng n ng n nh : h i ch ng màng não, c, câm, mù, r i lo n tâm th n, đ ng kinh [7] B nh hay gây thành d ch, nh t nh ng n i t p trung đông ng nguy c lây nhi m r t cao S hi u bi t v tác nhân gây b nh th tr cho công tác u tr xây d ng ch i ng g p s h ng trình phòng ch ng b nh t t t i t ng Qu c gia H u h t nh ng d li u v d ch t c a viêm màng não ng i l n đ u xu t phát t nh ng qu c gia phát tri n, tác nhân c ng nguyên nhân quan tr ng gây b nh t vong th gi i: Streptococcus pneumoniae (ph c u) 30 - 60%, Neisseria meningitidis (não mô c u) 13 - 37%, Listeria monocytogiens Haemophilus influenzae [34,18 ] Nh ng n m g n nhi u lo i kháng sinh t t đ nhiên t l t vong trung bình nhi u n c đ a vào s d ng Tuy c vùng d ch t màng não c u – 10%, ph c u 30%, Haemophilus influenzae 10 – 14% [7] T i Vi t Nam, nh ng nghiên c u v S pneumoniae N meningitidis đ i v i ng trung đ it viêm màng não H influenza, i tr ng thành ch a nhi u, ch y u t p ng tr em Th i gian g n nh ng nghiên c u d ch t h c đ r ng đ i t vi n Trung cm ng, nhiên ch a có th ng kê c th Theo Lê Thanh Bình (B nh ng Hu ) t 1999 – 2001 có 65 tr ng h p t l t vong (9%), t l di ch ng 11%, nguyên nhân hàng đ u H influenza (35,3%), th đ n não mô c u (18,4%), ph c u (9,2%) Nghiên c u c a Ph m Nh t An c ng s n m 2001 t i Vi n Nhi Trung não v i t l ng v i b nh nhân t đ n 15 tu i đ c ch n đoán viêm màng H influenzae (50%), S pneumoniae (22,06%), N meningitidis (11,76%), Streptococcus (5,88%) m t s lo i vi khu n khác S hóa b i Trung tâm H c li u ĐHTN http www lrc tnu edu ch n đoán ca b nh tr c ch y u d a vào tri u ch ng lâm sàng, y u t d ch t , xét nghi m b ng k thu t nhu m soi nuôi c y phân l p t nh ng m u b nh ph m lâm sàng Các k thu t có đ nh y th p, th i gian phân l p c n 4872 gi Các k thu t không đáp ng u ki n ch n đốn nhanh, u tr k p th i, di n bi n c a ca b nh x y r t nhanh (đ c bi t não mô c u t xu t hi n tri u ch ng đ u tiên đ n t vong trung bình 18 gi ) [11 ] Th nghi m ng ng k t h t latex phát hi n kháng nguyên polysaccaride b nh ph m máu, d ch não t y c a H influenza 78 – 100%, đ i v i S pneumoniae 67- 100% N meningitidis 50 – 93% K thu t đ n gi n, ch n đốn nhanh h n k thu t ni c y (