Nấm là những sinh vật có nhân và thành tế bào thực sự, dị dưỡng, sinh sản bằng bào tử. Nấm phân bố rộng rãi trong tự nhiên, phần lớn sống hoại sinh trong đất, số ít có khả năng ký sinh gây bệnh cho người và động vật. Ước tính trên thế giới có trên 1 triệu loài nấm. Có loại nấm có lợi, có loại có hại cho sức khỏe con người. Với sự đa dạng và phong phú của nấm người ta còn xếp nấm thành 1 giới riêng là “giới nấm”. Hiện nay, khoa học đã phát hiện khoảng trên 400 loài nấm gây bệnh cho người Các vị thuốc đông dược thường được chế biến theo phương pháp cổ truyền như phơi, sấy, tẩm đường, mật... Trong điều kiện khí hậu nhiệt đới nóng ẩm của nước ta và quá trình bảo quản không tốt do thiếu thốn phương tiện và kỹ thuật bảo, các vị thuốc đông dược rất dễ bị ẩm mốc. Nhiều công trình nghiên cứu đã cho thấy các vị thuốc đông dược, các sản phẩm nông nghiệp sau thu hoạch thường nhiễm các loài nấm Aspergillus spp như: Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus, Aspergillus niger... trong đó có vai trò y học quan trọng nhất là Aspergillus flavus (A. flavus)
O Ụ V OT O T V ỆN SỐT RÉT - KÝ SINH TRÙNG - ÔN TRÙN TRUN ƢƠN ẬU HU HO N THỰ TR N NH ỄM V NẤM, AFLATOX N TRONG M T SỐ VỊ THUỐ ÔN ƢỢ V K N THỨ , TH , THỰ H NH ẢO QUẢN THUỐ ỦA N T T TỈNH N HỆ AN, H ỆU QUẢ AN TH ỆP (2016 - 2017) hu n ng nh: ị h tễ họ M số: LUẬN N T n hƣ ng 972 01 17 N SỸ HỌ n ho họ : PGS.TS Ngu ễn Văn PGS.TS Phạm Văn Thân H N - 2018 LỜ ẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Phạm Văn Thân PGS.TS Nguyễn Văn Ba tận tình dẫn giúp đỡ tơi hồn thành luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn! PGS.TS Trần Thanh Dương Viện trưởng Ban Giám đốc Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ương PGS.TS Cao Bá Lợi, toàn thể cán Phòng Khoa học - Đào tạo Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ương; TS Đỗ Ngọc Ánh tồn thể cán Bộ mơn Ký sinh trùng Học việ Quân y; Toàn thể cán Bệnh viện Sản Nhi tỉnh Nghệ An; Các Sở Y tế, Sở Khoa học Công nghệ, Trường Đại học Y khoa Vinh tỉnh Nghệ An tận tình giúp đỡ suốt thời gian học tập thực đề tài nghiên cứu GS.TS Lê Bách Quang, PGS.TS Nguyễn Mạnh Hùng, PGS.TS Lê Xuân Hùng, PGS.TS Đoàn Huy Hậu có ý kiến q báu giúp tơi hồn thiện luận án Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Bố, Mẹ, Vợ, Con, gia đình bạn bè đồng nghiệp động viên khích lệ tơi vượt qua khó khăn gian khổ hồn thành luận án Luận án bước đầu nghiệp khoa học Những lời cảm ơn không đủ kể hết tình cảm thật cao q, tình cảm theo tơi suốt đời không thay đổi! ậu Hu Ho n LỜ AM OAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, số liệu, kết nghiên cứu luận án trung thực, xác chưa cơng bố cơng trình khác Các bước tiến hành đề tài luận án đề cương nghiên cứu sở đào tạo phê duyệt Chấp hành nghiêm chỉnh quy định y đức nghiên cứu y sinh học Nếu sai tơi xin hồn toàn chịu trách nhiệm T giả luận n ANH MỤ AIDS TỪ V T TẮT Acquired Immunodeficiency Syndrome – Hội chứng suy giảm miễn dịch mắc phải BV Bệnh viện BYT Bộ Y tế CS Cộng FAO Foods of Agriculture Organization -Tổ chức Nông Lương Thế giơi FB1 Fumonisin B HIV Human Immunodeficiency Virus (Vi rút gây suy giảm miễn dịch người) PCR Polymerase Chain Reaction - Phản ứng chuỗi Polymerase PV Preventive value (hiệu can thiệp) QCVN Quy chuẩn Việt Nam RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism (Kỹ thuật đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn) TB Trung bình TL Tỷ lệ TT Tình trạng WHO World Health Organization - Tổ chức Y tế giới VPQ Viêm phế quản XN Xét nghiệm YTNC Yếu tố nguy MỤ LỤ ẶT VẤN Ề hƣơng 1: TỔN QUAN T L ỆU 1.1 Lịch sử nghiên cứu nấm 1.1.1 Một số khái niệm nấm, nấm y học 1.1.2 Lịch sử nghiên cứu nấm giới 1.1.3 Lịch sử nghiên cứu nấm Việt Nam 1.2 Dịch tễ học vi nấm 1.2.1 Tác nhân vi nấm 1.2.2 Đường truyền bệnh 11 1.2.3 Khối cảm thụ 11 1.3 Các yếu tố liên quan đến nhiễm nấm kiến thức, thái độ thực hành phòng chống nhiễm nấm cho vị thuốc đông dược .12 1.3.1 Các yếu tố khí hậu vi khí hậu 12 1.3.2 Các yếu tố điều kiện bảo quản 14 1.3.3 Các yếu tố kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc đông dược cán y tế 14 1.4 Tình hình nhiễm vi nấm độc tố nấm thực phẩm sản phẩm nông nghiệp sau thu hoạch 16 1.4.1 Tại Châu Âu 16 1.4.2 Tại Châu Á 17 1.4.3 Tại Châu Phi 18 1.4.4 Tại Việt Nam 19 1.5 Cấu trúc phân tử, chế sinh aflatoxin gây độc aflatoxin 20 1.5.1 Cấu trúc phân tử, chế gây độc aflatoxin 20 1.5.2 Cơ chế sinh độc tố alflatoxin nấm 22 1.6 Các kỹ thuật phát nhiễm nấm aflatoxin 24 1.6.1 Kỹ thuật soi tươi 24 1.6.2 Kỹ thuật nuôi cấy nấm môi trường Saboraud 25 1.6.3 Các kỹ thuật khác .25 1.6.4 Kỹ thuật sinh học phân tử PCR 28 1.7 Một số bệnh nấm độc tố nấm gây 30 1.7.1 Nhiễm độc gan cấp tính 30 1.7.2 Nhiễm độc mãn aflatoxin ochratoxin 30 1.7.3 Các bệnh nấm phổi Aspergillus spp 31 1.8 Chẩn đốn xác định sản phẩm nơng nghiệp, thực phẩm, thuốc đông dược nhiễm nấm 31 1.9 Điều trị phòng bệnh nấm cho người, phòng nhiễm nấm cho sản phẩm nông nghiệp vị thuốc đông dược 32 1.9.1 Điều trị bệnh nấm gây với người 32 1.9.2 Phòng bệnh nấm 33 1.9.3 Phòng chống nhiễm nấm cho sản phẩm nông nghiệp vị thuốc đông dược 34 hƣơng 2: Ố TƢỢN V PHƢƠN PH P N H ÊN ỨU 36 2.1 Đối tượng, địa điểm, thời gian nghiên cứu 36 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 36 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 36 2.1.3 Thời gian nghiên cứu 37 2.2 Phương pháp nghiên cứu 37 2.2.1 Phương pháp nghiên cứu mơ tả có phân tích thực trạng nhiễm nấm aflatoxin 37 2.2.2 Nghiên cứu mô tả thực trạng nhà kho, môi trường bảo quản thuốc kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc thuốc đông dược cán y tế 49 2.2.3 Nghiên cứu can thiệp 53 2.3 Mơ hình thiết kế nghiên cứu 54 2.4 Vật liệu nghiên cứu 56 2.5 Phương pháp xử lý phân tích số liệu 56 2.6 Đạo đức nghiên cứu 56 hƣơng 3: K T QUẢ N H ÊN ỨU 58 3.1 Thực trạng nhiễm nấm aflatoxin dược liệu đông dược bệnh viện thuộc tỉnh Nghệ An năm 2016 58 3.1.1 Thực trạng nhiễm nấm vị thuốc đông dược 58 3.1.2 Kết định danh lồi nấm mẫu thuốc đơng dược kỹ thuật PCR 67 3.1.3 Hàm lượng aflatoxin vị thuốc đông dược bệnh viện thuộc tỉnh Nghệ An năm 2016 72 3.2 Thực trạng môi trường, trang thiết bị kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc đông dược cán y tế 74 3.2.1 Thực trạng môi trường, trang thiết bị bảo quản thuốc 74 3.2.2 Kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc đông dược y tế hành nghề đông dược bệnh viện tỉnh Nghệ An 76 3.3 Hiệu can thiệp phòng chống nấm cho thuốc đơng dược 82 3.3.1 Thay đổi kiến thức thực hành cán y tế phòng chống nhiễm nấm cho thuốc sau 12 tháng can thiệp 82 3.3.2 Tình trạng nhà kho, thiết bị bảo quản thuốc trước sau can thiệp 12 tháng 83 3.3.3 Hiệu giảm tình trạng nhiễm nấm vị thuốc đông dược sau can thiệp 12 tháng 85 hƣơng 4: N LUẬN 88 4.1 Thực trạng nhiễm nấm, aflatoxin mẫu thuốc đông dược bệnh viện tỉnh Nghệ An năm 2016 88 4.1.1 Thực trạng nhiễm nấm 88 4.1.2 Hàm lượng aflatoxin vị thuốc đông dược sở y tế tỉnh Nghệ An năm 2016 95 4.2 Thực trạng môi trường, trang thiết bị bảo quản thuốc kiến thức thái độ, thực hành bảo quản vị thuốc đông dược cán y tế bệnh viện tỉnh Nghệ An 99 4.2.1 Thực trạng môi trường, trang thiết bị bảo quản thuốc đông dược 99 4.2.2 Kiến thức thái độ, thực hành bảo quản vị thuốc đông dược y tế bệnh viện tỉnh Nghệ An 103 4.3 Hiệu can thiệp phòng chống nấm cho thuốc đông dược 108 4.3.1 Hiệu can thiệp truyền thơng kiến thức thực hành phòng chống nấm cho cán y tế 108 4.3.2 Hiệu can thiệp thay đổi trang thiết bị bảo quản thuốc 109 K T LUẬN 116 K N N HỊ TÍNH KHOA HỌ , TÍNH MỚ ỦA Ề T Ý N HĨA THỰ T ỄN ỦA Ề T ANH MỤ UN T O L ÊN QUAN TRỰ T LUẬN N Ã ƢỢ L ỆU THAM KHẢO ÔN Ố P NN ANH MỤ ẢN Bảng 1.1 Một số tính chất hóa lý aflatoxin 21 Bảng 2.1 Giới hạn ô nhiễm aflatoxin số thực phẩm theo tiêu chuẩn QCVN 8-1:2011/BYT 48 Bảng 3.1 Danh mục, tên khoa học vị thuốc nam sử dụng nghiên cứu 58 Bảng 3.2 Danh mục, tên khoa học vị thuốc bắc sử dụng nghiên cứu 60 Bảng 3.3 Tỷ lệ nhiễm nấm chung mẫu thuốc đông dược kỹ thuật soi tươi (n = 505) 62 Bảng 3.4 Tỷ lệ nhiễm nấm vị thuốc đông dược thân - rễ, lá, củ kỹ thuật soi tươi (n = 505) 62 Bảng 3.5 Tỷ lệ nhiễm nấm chung vị thuốc bắc nam dược kỹ thuật nuôi cấy nấm môi trường Saboraud (n = 505) 63 Bảng 3.6 Tỷ lệ nhiễm nấm vị thuốc đông dược thân - rễ, lá, củ nuôi cấy nấm môi trường Sauboraud 64 Bảng 3.7 Tỷ lệ nhiễm nấm mẫu thuốc đông dược nuôi cấy nấm môi trường Saboraud bệnh viện 65 Bảng 3.8 Tổng hợp kết xác định tỷ lệ nhiễm nấm kỹ thuật soi tươi nuôi cấy môi trường Saboraud (n = 505) 66 Bảng 3.9 Tỷ lệ tương đồng số mẫu nấm so với ngân hàng genbank 70 Bảng 3.10 Thành phần loài nấm phân lập từ mẫu thuốc đông dược 71 Bảng 3.11 Tỷ lệ nhiễm aflatoxin chung (n = 505) 72 Bảng 3.12 Tỷ lệ mẫu dược liệu nhiễm aflatoxin vượt tiêu chuẩn QCVN 8-1:2011/BYT (n = 24) 73 Bảng 3.13 Thực trạng nhà kho bảo quản thuốc đông dược (n =10) 74 Bảng 3.14 Trang thiết bị bảo quản thuốc đông dược (n = 10) 75 Bảng 3.15 Nhóm tuổi, giới, trình độ chun mơn đối tượng nghiên cứu (n = 60) 76 Bảng 3.16 Kiến thức cán y tế nguyên nhân thuốc đông dược bị nấm tác hại nấm với sức khỏe người (n = 60) 77 Bảng 3.17 Kiến thức cán y tế tác nhân gây nấm điều kiện bảo quản thuốc đông dược không bị nấm (n = 60) 78 Bảng 3.18 Thực hành cán y tế phòng chống nhiễm nấm cho thuốc đông dược (n = 60) 80 Bảng 3.19 Thực hành cán y tế phòng chống tác hại nấm cho cá nhân (n = 60) 81 Bảng 3.20 Kiến thức cán y tế vi nấm điều kiện vi khí hậu bảo quản thuốc đông dược không bị nhiễm nấm (n = 60) 82 Bảng 3.21 Hiệu bổ sung trang thiết bị làm thay đổi vi khí hậu (n = 10) 83 Bảng 3.22 Hiệu làm thay đổi yếu tố vi khí hậu kho sau can thiệp 12 tháng (n =10) 84 Bảng 3.23 Hiệu giảm tỷ lệ nhiễm vi nấm chung mẫu thuốc đông dược 85 Bảng 3.24 Hiệu giảm tỷ lệ nhiễm nấm thuốc đông dược bệnh viện sau can thiệp 12 tháng 86 Tiếng Anh: 55 A.J.M Van deventer and et al (1995), Improved Detection of Candida albicans by PCR in Blood of Neutropenic Mice with Systemic Candidiasis, Journal of clinical Microbiology, Vol.33, pp.625-628 56 Amada Anater, Lara Manyes, Giuseppe Meca and et al (2016), Mycotoxins And their consequeces in aquaculture: A review, Juonal of Homepape, Aquaculture, Vol 451, pp.1-10 57 Anina J Sirma, Elizabeth O Ouko, Gatwiri Murithi et al (2015), Prevalence Of alflatoxin contamination in cereals from Nandi County Kenya, Int Jounal Agric Sciences and Vetery Medicine, Vol.3(3) 58 Andre El Khoury, Ali Atoui, Toufic Rizk and et al (2011), Defferentiation Between Aspergillus flavus and A Aspergillus parasiticus from pure culture and alflatoxin-Contaminated grapes using PCR-RFLP analysis of aflr-aflj intergennic specer, Jounal of food science, Vol.76(4), pp.247-253 59 Ajfand (2016), Africa Scholarly Science Communications Trust, African Jounal of Food Agricuture, Nutrition and Development, Vol.16(3), pp.10992-11003 60 Atsushi Murai (2013), Maternal Transfer of Immunoglobulins into Egg Yolks of Birds, Japan Poultry Science Assocciation, 61 Argunov DA, Krylov VB, Nifantiev NE (2015), Con vergent synthesis of Isomeric heterosacharides related to the fragmernt of galactomannan from Aspergillus fumigatus, Research Article, Biomol ChemPMID:25643073 62 Barrs VR, Ujvari B, Dhand NK and et al (2014), Detection of Aspergillus Specific antibidies by agar gel double immunodiffusion and IgG ELISA in feline upper respiratory tract Aspergillosis Supplementary Informatin, Vet Jounal, pii: S1090-0233(14)00516-4.doi10.1016 63 Bretagne S., Costa J.M., Mamorat – Khuong A and et al (2006), Detection of Aspergillus DNA by PCR in Bronchoalveola Lavage Fluid, PubMed – MEDLINE, Parasitologie – Mycologie, Hopital Henri Mondor, Cretell, Prace 64 Cornell University, USA (2013), Aflatoxins : Ocucurrence and Health Risks, Tekbooke 65 C.DallAsta and P.Battialani (2016), Fumonisins and their modified Forms a matter of concern in future scenario, World Mycotoxin Jounal, Vol.9(5), pp.727-739 66 C El aaraj, M Bakkali, A Infantino and et al (2015), Mycotoxigenic fugi In cereals grains and coffee from the North of Moroco, Amarica Journal of Research Communication, Vol.3(2) 67 David G Schmele III and et al (2013), Mycotoxins in Crops: A threat to Human and Domestic Animal Health,Virgnia Polytechnic Institute and State University Blachsburg VA 68 Dr Raj Murugesan (2015), Mycotoxin survey in the 2015 Ú corn, Mycotoxin Report, Biomin 69 Dubey LK, Moeller JB, Schlosser A, Sorensen GL and Holmskov U (2015), Chitin enhances serum IgE in Aspergillus fumigatus induced allergy in mice, Author information, Jounal of Immunobiology Japan, PMID: 25634077 70 Elif Burcu Bahadir., Mustafa Kemal Sezginturk (2016), Lateral Flow Assays: Principles, Designs and Lables, Techbook Accepted Manuscript, pp.1-44 71 Elisabeth Streit, Karin Naehrer et al (2012), Ines Rodrigues and Gerd Schatzmaryr Mycotoxin occurrence in feed and raw materials worlde: Long –term analisis with special focus on Europe and Asia, Review Accepted article published, Doi.10.1002/Jsfa.625 72 F Bertiller, C Brera, M.H Iha, R Krska et al (2017), Developments In mycotoxin analysis: an update for 2015 -2016, World Mycotoxin Jounal, Vol.10(1), pp.5-29 73 Fabiana Aparecida Couto, Sara Chalfoun de Souza, Monica Cristina Pereira Monteiro et al (2014), Diversity and association of filamentous fungi in coffee beans under organic and conventional cultivation, African Jounal of Microbiology Research, Vol.8(6), pp.2505-2512, Doi: 10.5897/AJMR2013.6571 74 Gabriel Kigen, Naftali Busakhala, Zipporah (2017), Factors associated With the high prevalence of oesophageal cancer in Western Kenya: a review, BioMed Central, Open Access, Doi.10.1186/s13027-0169-y 75 Golsun Demirel, Buket Alpertunga and Sibel Ozden (2014), Role of Fumonisin B1 on DNA methylation changes in rat kidney and liver cells, Original Article, Pharmaceutical Biology, Infoma healthcare, Inc, Doi:10.3109/13880209.2014.976714 76 Hossein Mirhendi and et al (2006), A One-Enzyme PCR-RFLP Assay for identification of Six Medical Important Candida Species, Jpn J., Med, Myol, Vol 47, pp.225-229 77 Huong Bui Thi Mai, Le Danh Tuyen, Do Huu Tuan and Leon Brimer (2016), Dietary exposure to alflatoxin B1, ochratoxin A and fumisisins of adults in Lao Cai provice, Viet Nam : A total dietary study approach, Food and Chemical Toxicology, Jounal hompage, Vol.98, pp.127-133 78 Hyang Sook Chun, Hyun Ee Ok, Hyun Jung Kim and et al (2006), Risk Assessment of aflatoxin in food products consumed in South Kerea, Techbook, Doi:10.1051/IUFoST:2006045.pp.1796-1809 79 Yuan-Kai Wang, Yi-Bo Shi, Qi Zou and et al (2013), Development of a Rapid and simultaneous immunochromatographic assay for the determination of zearalenone and fumonisin B1 corn, wheat and feedstuff samples, Jounal home Food Control, Vol.31, pp.180188 80 Kaaya N.A.L, H.L Warren et al (2005), A review of past and present Research on aflatoxin in Uganda, African Journal of Food Agriculture and Nutritional Development, Volume.5, No.1 81 Jean-Paul Latge, Richad Calderone (2002), Host microbe interactions: fungi invasive hunman fungi opportunistic infactions, Curent Opinion in Microbiology, Vol (5), pp.355-358 82 J.W Bennett, M.Klich et al (2003), Mycotoxins, Lin Microbiol Rev, Vol16(3), pp.497-516 83 L Klingspor and S.Jalal (2006), Molecular detection and identification of Candida and Aspergillus spp from clinical samples using real time PCR, Clinical Microbiology and Infection Diseases, Volume 12 Number 8, August, pp.745-753 84 Magrit Hulmel., Corina Baust et al (2004), Detection of Aspergillus DNA by a nested PCR assay is superior to blood culture in an experimental murine model of invasive aspergillosis, Medizinische Klinik, Universitäts Klinikum Mannheim, Margit Hummel: margit.hummel @med3.ma.uni-heidelberg.de 85 Matthew Atongbilk Achaglinkame., Nelson Opoku., Francis Kweku Amagloh (2017), Alflatoxin conmination in cereals and legumes to reconsider usage as complementary food ingredients for Ghanaian infants: A review, Jounal of Nutrition & Intermediary Metabolism, Vol.10, pp.1-7 86 Manish Adhikari, Bhawana Negi, Neha Kaushik and et al (2017), T-2 Mycotoxin: toxicological effects and decontamination strategies, Jounal of Oncotarget, Vol.8(no20), pp.33933-33952 87 Murta E.F at al (2000), Insidence of Gardnerella vaginalis, candida spp and human papilloma virus in cytologycal smears, Sao Paulo Med J, Jul 6, Vol.118 (4), pp: 105-8 88 Muhammad Sajid, Abdl-Nasser Kawde and Muhammad Dau (2014), Designs formats and application of lateral flow assay: A literature review, Original Article, Jounal of Saudi Chemical Society 89 Ni Made A., Tarini et al (2010), Development of multiplex -PCR assay for rapid detection of Candida sp, Med J Indones, Vol.19, No.2 90 P Lewis White et al (2003), Detection of seven Candida species using the Light - Cycler system, Journal of Medical Microbiology, Vol.52, pp.229–238 91 P.V.C Yong and et al (2008), Molecular Identification of Candida orthopsilosis Isolated from Blood Culture, Mycopathologia, Vol 165:81-87, DOI10.1007/s11046-007-9086-8 92 Pauline Jolly et al (2014), Mushrooms in rice corn make HIV multiply more, Agency for Food and Drug Administration (FDA) 93 Peter J, Delves I, Seamus J, Martin Dennis, R Burton I van M.Roitt (2017), Roits Essential Immunology, Wiley Blakwell, 541 pp 94 Rosa de Llanos Frutos et al (2004), Identification of species of the genus Candida by analysis of the 5.8S rRNA gene and the two ribosomal internal transcribed spacers, Antonie van Leeuwenhoek, Vol.85, pp 175–185 95 Samina Ashiq (2014), Natural occurrence of mycotoxin in food and feed Pakistan perspective, Comprehensive Reviews, Vol.0, pp.111 Doi.10.1111/1541-4337.12122 96 S.H Mirhendi et al (2001), A PCR-RFLP Method to Identification of the important Opportunistic Fungi: Candida Species, Cryptococcus neoformans, Aspergillus famigatus and Fusarium solani, Iranian J Publ Health, Vol 30, Nos 3-4, pp.103-106 97 Sumei Ling, Rongzhi Wang, Xiaosong et al (2015), Rapid detection Of fumonisin B1 using a colloidal gold immunoassay strip test in corn samples, Jounal hompage, Elsevier – Toxicon, Vol.108, pp.210-215 98 Xi-Chun Wang, Hai-Xin Fan, Meng-Xue Fan et al (2016), A sensitive Immunochromatographic assay using colloidal gol - antibody probe for rapid detection of fumonisin B1 on corn, Jounal of Food Additives & Contaminants: Part A, Doi10.1080/19440049.1213429 99 T.D Cardoma, S.G Hangantileke and et al (2013), Aflatoxin Research on grain in Asia – Its problems and possible solutions, FAO 100 White P.L., Bretagne S., Klingspor L (2006), Aspergillus PCR: one step closer to standardization, PubMed –indexed for Medlin, niversity Hospital of Wales, Health Park, Cardiff CF 144XN, London, Kingdom 101 White P.L., Carlo Mengoli et al (2011), Evaluation of Aspergillus spp PCR Rrotocal for Testing Serum Speccimens, Juonal of Clinical Microbiology, American Society for Microbiology, 102 Wei X, Zhang Y, Lu L (2015), The moleccular mecchanism of azole Resistance in Aspergillus fumigatus: from bedside to bench and back, Jounal of Microbiol, Vol53(2), pp.91-9 103 World Health Organization (2013), Jont FAO/WHO Food Standards Programe Condex Committee On Contannamnts In Foods, Food and Agriculture Organization of the United Nations, pp.118 104 World Health Organization (2018), Jont Fao/WHO Food Standards Programe Condex Committee On Contannamnts In Foods, Food and Agriculture Organization of the United Nations, 178 pp PHỤ LỤC NGÂN HÀNG GEN MẪU CỦA Aspergillus spp M157-ITS(501bp) (Aspergillus spp + Eurotium spp) Sequences producing significant alignments: Aspergillus niveoglaucus 18S rRNA gene (partial), ITS1, 5.8S rRNA gene, ITS2 and 926 926 100% 0.0 100% HE801344.2 28S rRNA gene (partial), strain CCF 4191 Eurotium parviverruculosum genomic DNA containing 18S rRNA gene, ITS1, 5.8S rRNA gene, ITS2 and 28S rRNA gene, 926 926 100% 0.0 100% HE615135.1 strain CBS 101750 Aspergillus proliferans genomic DNA containing 18S rRNA gene, ITS1, 5.8S rRNA gene, ITS2 and 28S rRNA gene, 926 926 100% 0.0 100% HE615128.1 strain CCF 4192 Aspergillus proliferans genomic DNA containing 18S rRNA gene, ITS1, 5.8S rRNA gene, ITS2 and 28S rRNA gene, strain CCF 4232 926 926 100% 0.0 100% HE615129.1 ÂU HỎ PHỎN VẤN K N THỨ , TH ẢO QUẢN THUỐ ÔN ƢỢ ỦA T N HỆ AN 2016 , THỰ H NH N T PHẦN H NH HÍNH Thơng tin người vấn: 2.Tuổi:… Nam/nữ:… Địa : Trung tâm y tế/Bệnh viện …… …… ……… | | (1= mù chữ, 2= Tiểu học, 3= Trung học sở, 4= Trung học phổ thông, 5= Đại học trở lên) Chuyên môn: (ghi số vào ô trống) | | (1= Sơ cấp; = Trung cấp; = Cao đẳng; 4= Bác sỹ; 5= Thạc sỹ, Bác sỹ CKI; 6= Tiến sỹ, Bác sỹ CKII; 7= Khác (Ghi rõ ) PHẦN PHỎN VẤN NHÂN V ÊN T L M N HỀ ÔN ƢỢ Anh/Chị có biết nguyên nhân gây nấm mốc vị thuốc? | | (1= có, 2= khơng, 3= không biết) Theo Anh/chị, người sử dụng thuốc mốc có mắc bệnh khơng? | | (1= có, = không, 3= không biết) Nếu không/không biết hỏi đến câu Theo Anh/chị, người mắc bệnh nấm mốc (đánh dấu x vào ô bên cạnh) : Uống thuốc đông dược bị mốc | | Dụng cụ nhà bếp bị nhiễm bẩn | | Do tiếp xúc với môi trường | | Do ăn uống thực phẩm nhiễm nấm mốc | | Khác (ghi rõ)………………………………………………………………… Anh/chị kể tên bệnh nấm mốc gây người mà biết Xơ gan | | Suy gan | | Ngứa/dị ứng | | Ung thư | | Các bệnh ống tiêu hóa (nơn, buồn nôn, Thiếu máu | | Suy tủy | | táo bón, chảy, chậm tiêu…) | | Khơng biết | | Khác (ghi rõ) | | Anh/chị nêu vài triệu chứng bệnh nấm mốc gây người mà biết: Sốt Đau bụng | | Ngứa/dị ứng | | Vàng da | | Sụt cân Rối loạn tiêu hóa (nơn, buồn nơn, táo bón, chảy, chậm tiêu…) | | Không biết | | Khác (ghi rõ) | | | | | | Chóng mặt, hoa mắt | | Theo Anh/chị bệnh nấm mốc gây có hại không ? (ghi số vào ô trống) | | (1= có, 2= khơng, 3= khơng biết) Nếu khơng/khơng biết đến câu Anh/chị nêu tác hại bệnh nấm mốc gây với sức khỏe người mà biết: Suy nhược thể | | Gây chết người | | Khác(ghi rõ)… U gan, áp xe/viêm gan | | Theo Anh/chị phòng bệnh nấm mốc gây cho người khơng? (ghi số vào trống) | | (1= có, 2= không, 3= không biết) Nếu không/không biết, đến câu 11 Nếu được, phòng bệnh cách nào? (đánh dấu x vào ô bên cạnh) Không dùng □ Vệ sinh dụng cụ nhà bếp □ Có dùng, đun kỹ trước dùng □ Khác (ghi rõ): 10 Theo Anh/chị bệnh nấm mốc người, điều trị khỏi khơng? (ghi số vào ô trống) | | (1= được, 2= không, 3= không biết) Nếu không/không biết, đến câu 13 11 Nếu được, cách nào? (ghi số vào ô trống) | | (1= điều trị tây y bệnh viện, 2= sử dụng thuốc đông y, 3= khác (ghi rõ) 12 Nếu bị mắc bệnh nấm mốc gây ra, Anh/chị làm gì? (ghi số vào trống) | | (1= mua thuốc,tự điều trị, 2= đến TYT xã, 3= đến BV huyện, 4= đến BV tỉnh, 5= khác (ghi rõ)……………………………………………………………… 13 Anh/chị có dùng thuốc đơng dược ngâm rượu khơng? | | (1= có, 0= khơng) 14 Nếu có sử dụng thuốc đơng dược thuốc gì? (đánh dấu x vào ô bên cạnh) Sâm □ Kỳ □ Sen □ Kỳ tử Quy □ Đỗ trọng Kê huyết đằng □ □ Hoài sơn □ □ Bạch truật □ Đại táo □ Thục địa □ Long nhãn □ Ích mẫu Hà thủ ô □ □ Bạch thược □ Dâm dương hoắc □ Khác (gi rõ tên thuốc)………………………………………………………………………… 15 Kể tên lồi nấm mốc có thuốc đơng dược bị mốc mà Anh/Chị biết (đánh dấu x vào ô bên cạnh) Aspergilus plavus □ Aspergilus niger □ Candida sp □ Penicillium spp□ Aspergilus fumigatus □ Khác □ (ghi rõ tên lồi gì………………………………… 16 Nếu biết thuốc đơng dược có nấm chất độc nấm mốc sinh Anh/chị sẽ: Khơng dùng □ Nấu chín trước sử dụng □ Khác □ (ghi rõ)…………… 17 Nếu biết vị thuốc trồng canh tác có sử dụng phân hóa học, phân chuồng, chất kích thích tăng trưởng…thì Anh/chị sẽ: Khơng sử dụng □ Nấu chín trước sử dụng □ Sử dụng bình thường □ 18 Nếu có, số lần Anh/chị sử dụng thuốc đông dược (ghi số vào ô trống) | | (1= Hàng ngày, 2= tuần 2-3 lần, 3= tuần/lần, 4= 2tuần/lần, 5=tháng/lần, 6= vài lần/năm) 19 Anh/chị kể vài vị thuốc mà biết thường xuyên sử dụng - ……………………… - ………………………… - ………………………… - …………………… - ………………………… 20 Anh/chị có sử dụng loại thuốc đơng dược - ……………………… - ………………………… - Không sử dụng | | - ………………………… - ……………………… Nếu không, đến câu 24 21 Nếu có, số lần Anh/chị sử dụng vị thuốc (ghi số vào trống) | _| (1= thường xuyên, 2= thỉnh thoảng) 22 Anh/chị có sử dụng vị thuốc đông dược chưa qua chế biến khơng? (ghi số vào trống) | | (1= có, 0= khơng) 23 Tại sở y tế anh, chị có thực kiểm tra định kỳ chất lượng vị thuốc đông dược không? (ghi số vào ô trống) | | (1= có, = không) 24 Để giảm số người mắc bệnh nấm mốc gây cộng đồng, theo Anh/Chị cần phải (đánh dấu x vào ô bên cạnh): - Canh tác, nuôi trồng vị thuốc theo quy trình an tồn sinh học □ - Không tưới rau/rửa rau nước sông/ao/hồ/mương thủy lợi □ - Sử lý hết mầm bệnh trước sử dụng □ - Khơng dùng phân trâu/bò tươi bón □ - Tất biện pháp □ 25 Hằng năm anh, chị có tập huấn nâng cao nghiệp vụ công tác chế biến bảo quản vị thuốc đông dược không? (ghi số vào trống) | | (1= Có, 2= Khơng) 26 Nếu có tháng/mấy năm tập huấn lần ? Ghi rõ………………………… 27 Anh chị có biết điều kiện để bảo thuốc đơng dược khơng? | | (1= có, = khơng) (Nếu có, đến câu 30) 28 Nhiệt độ tối đa cho phép để bảo quản kho thuốc là: 35°C | | 30°C | | 25°C | | 20°C | | 29 Độ ẩm tương đối kho không vượt 70% phải không? Đúng | | Sai | | 30 Tốc độ gió(độ lưu thơng khơng khí) m/s? lựa chọn kết điền vào ô (1) < 0,5m/s; (2) từ 0,5m/s – 1m/s; (3) > 1m/s | | Cảm ơn Anh/chị tham gia vào vấn Nghệ An, ngày Ngƣời đƣợ vấn tháng năm 2016 iều tr vi n PH U NH V Ơ SỞ H T SỬ ỤN , ẢO QUẢN N THUỐ ÔN ƢỢ I PHẦN H NH HÍNH Tên sở y tế điều tra: Khoa:…………Bệnh viện/Trung tâm……………… Địa :…………………………….………………………………………………… Nhân lực hoạt động YHCT (ghi số lượng): | _| Bác sĩ; | _| Y sĩ; | _| Dược sĩ; | _| Điều dưỡng; Khác………… Chỉ tiêu giường bệnh khoa (ghi số lượng ): Số giường bệnh kế hoạch | _|, giường thực kê | _| Cơ cấu tổ chức khám chữa bệnh YHCT CSYT:…………………………… Số lượng, chủng loại thuốc đông y sử dụng theo đơn vị tháng, năm theo loại theo tác dụng chữa bệnh YHCT gồm:…………………………………………… Họ tên cán điều tra ………………….… Địa …….………….…………… K T QUẢ ỀU TRA A Kết quan sát thực tế người điều tra nơi bảo quản, chế biến thuốc đơng dược: Có kho chứa bảo quản riêng khơng, diện tích m²? Có □ Khơng □ Khác □ (ghi rõ) ………Diện tích kho (m²)……… Chất lượng nhà kho nào? Tốt □ Đạt yêu cầu □ Không đạt yêu cầu □ Chú ý…………….……… Mái nhà kho nào? Nhà kiên cố □ Lợp ngói □ Khác □ (ghi rõ) ………… …………… Nhà kho có bị mưa dột khơng? Có □ Khơng □ Nếu có (ghi rõ) ………………………………… Nhà kho có lát khơng? Có □ Không □ Mô tả thực trạng …………….…………… Đọ cao nên nhà có bị ngập nước bão lụt khơng? Có □ Khơng □ Mơ tả thực trạng …… ………….………… Nhà kho có giá tủ đựng thuốc khơng? Có □ Khơng □ Nếu có trả lời tiếp đến câu Giá , tủ có ngăn để riêng biệt loại thuốc khơng? Có □ Không □ Mô tả thực trạng ………………… …………… Tủ, giá có cánh khép kín hay khơng? Có □ Khơng Mô tả thực trạng …………………………… □ Trong ngăn đựng vị thuốc đơng dược có hộp nhựa thùng kín đựng vị thuốc đơng dược khơng? Có □ Không Mô tả thực trạng …………………………… □ 10 Các loại thuốc bảo quản phải không? Có □ Khơng □ 11 Trong ngăn có ghi dán nhãn tên vị thuốc không, chất lượng nhãn? Có 12 Mơ tả thực trạng …………………………… □ □ Khơng □ Nếu có, Máy có hoạt động khơng?.………… □ Khơng □ Nếu có, Máy có hoạt động khơng………… □ Khơng □ Nếu có, điều hòa có hoạt động khơng.…… Nhà kho có trang bị chất hút ẩm khơng? Có 17 Khơng Nhà kho có máy điều hòa nhiệt độ khơng? Có 16 □ Nhà kho có máy hút ẩm khơng? Có 15 Mơ tả thực trạng …………………………… □ Nhà kho có quạt thơng gió khơng? Có 14 Không Trong hộp đựng thuốc ngăn có ghi nhãn tên thuốc khơng? Có 13 □ □ Khơng □ Nếu có, loại chất hút ẩm gì? Xung quanh nhà kho có dọn vệ sinh khơng? Có rãnh nước, phát quang bụi rậm… Có 18 □ Khơng □ Có rãnh nước, phát quang bụi rậm khơng? Có □ Khơng □ Nếu có, mơ tả thực trạng 19 Nhà kho có ngăn vật phá hoại thuốc khơng? Có 20 □ -Khơng □ Nhà kho vệ sinh định kỳ khơng? - Có □ - Khơng □ K T QUẢ O MƠ TRƢỜN THỰ T T NH KHO 21 Nhiệt độ trung tâm nhà kho (°C) :………… ………………………… 22 Nhiệt độ bốn góc nhà kho (°C): 1…………… 2…………… 3………… 4…………… 23 Tốc độ gió khu vực trung tâm nhà kho (m/s)…………………………… 24 Tốc độ gió góc nhà kho (m/s): 1………… 2………… 3………… 4………… 25 Cường độ tia xạ (cường độ ánh sáng Lux) trung tâm nhà kho:…………… 26 Cường độ tia xạ (cường độ ánh sáng Lux) góc nhà kho: 1…………… 27 2……… 3………… 4…………… Độ ẩm tương đối (%): …………………………………………………… …… Cảm ơn Anh/chị tham gia vào vấn Nghệ An, ngày Ngƣời đƣợ vấn tháng năm 2016 iều tr vi n ẢN K ỂM QUAN S T KHO ẢO QUẢN THUỐ MÔ TRƢỜN ÔN ƢỢ Địa điểm giám sát: Kho thuốc Người quan sát:…………………………………………………………………………… Ngày quan sát:…………………………………………………………………………… TT N UN QUAN S T Diện tích kho (m²) Mái nhà Trần nhà Nền nhà Tường nhà Hệ thống cửa Giá để dụng cụ để thuốc Dụng cụ để thuốc Quạt thơng gió 10 Dụng cụ hút ẩm 11 Mơi trường khơng khí kho T HƢA T - Nhiệt độ (°C) - Độ ẩm (%) - Tốc độ gió (m/s) 12 Môi trường kho 13 Môi trường xung quanh kho Nhận xét chung: Đạt: □ Không đạt: □ Ngƣời qu n s t (Ký ghi rõ họ tên) GHI CHÚ ... thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc đông dược cán y tế 74 3.2.1 Thực trạng môi trường, trang thiết bị bảo quản thuốc 74 3.2.2 Kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc đông dược y tế. .. thuốc đông dược kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc cán y tế tỉnh Nghệ An, hiệu can thiệp (2016 - 2017) , với mục tiêu nghiên cứu sau: Xác định tỷ lệ nhiễm vi nấm, aflatoxin số vị thuốc đông. .. đông dược số bệnh vi n tỉnh Nghệ An năm 2016 Mô tả thực trạng môi trường, trang thiết bị bảo quản thuốc kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc đông dược cán y tế bệnh vi n tỉnh Nghệ An Đánh