thuốc bảo vệ thực vật từ baculovirus

Trường Đại Học Nông Lâm TP HCM Bộ Môn Công Nghệ Hóa Học  THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT TỪ BACULOVIRUS MỤC LỤC MỞ ĐẦU Virus diệt côn trùng nghiên cứu nhiều năm mối quan tâm đặc biệt đến dịch bệnh động vật không xương sống Điều đặc biệt khả sử dụng virus tác nhân chống dịch hại tốt lại không làm ô nhiễm mơi trường Virut nhóm vi sinh vật có kích thước nhỏ bé phải quan sát kính hiển vi điện tử Kích thước lớn virus 400 nm, nhỏ 13-20 nm Virus học ngành khoa học nghiên cứu cấu trúc, khả gây bệnh, xuất nhân lên tế bào vật chủ Vật chủ virus tế bào người, động vật, thực vật, vi khuẩn trùng Virus có khả sinh sản từ phần thành 10-100 phần Quá trình sinh sản virus xảy tế bào Virus khơng có cấu tạo tế bào, thành phần hóa học đơn giản Virus gây nhiễm tế bào có khả lan truyền Virus mang loại vật chất di truyền - acid nucleic, ADN hay ARN LỊCH SỬ PHÁT HIỆN VIRUS DIỆT CÔN TRÙNG Lịch sử cổ đại ghi nhận phát bệnh tằm dâu ong người bắt đầu nhân ni, dưỡng hai lồi trùng có ích Năm 384-322 Trước công nguyên Aristotle miêu tả bệnh ong, người Trung quốc có quan sát bệnh tằm dâu từ 2700 năm trước công nguyên Năm 1856 Cornalia Maestri mô tả bệnh tằm nghệ - bệnh virus Các tác giả phát thấy thể đa diện thể tằm Bolle (1898) mơ tả hồ tan thể đa diện ruột tằm giải phóng hạt Năm 1919 Akkva, Komarek Breidl (1923) phát dịch qua lọc có chất virus gây bệnh, tạo nên thể đa diện côn trùng Người nhìn thấy virus gây bệnh trùng Bergold cơng trình cơng bố 1943-1947 sau có kính hiển vi điện tử CƠ SỞ KHOA HỌC SỬ DỤNG VIRUS DIỆT CÔN TRÙNG TRONG ĐẤU TRANH SINH HỌC Khi xâm nhập vào thể côn trùng, virus nhân lên nhân chất nguyên sinh tế bào, phá huỷ mô làm cho vật chủ chết Những trùng sống sót tiếp tục bị ảnh hưởng giai đoạn nhộng (nhộng bị thối, ngài vũ hoá bị biến dạng), giai đoạn ngài (khả đẻ trứng giảm) ảnh hưởng tới hệ sau Nguồn virus tồn đọng tự nhiên lại gây lây nhiễm cho hệ Trên sở khoa học này, virus gây bệnh côn trùng ngày ý nghiên cứu coi nhân tố có triển vọng phương pháp đấu tranh sinh học phòng chống sâu hại trồng tương lai Năm 1923, Tanaka Kaya miêu tả 20 nhóm (họ) virus gây bệnh cho trùng Trong họ nghiên cứu nhiều Baculoviridae Reoviridae Đại diện họ Baculoviridae virus đa diện nhân (NPV- Nuclear polyhedrosis viruses) đại diện họ Reoviridae virus đa diện tế bào chất (CPV - Cytoplasmic polyhedrosis viruses) Theo Hukuhara Bonami (1991) CPVs ký sinh côn trùng hay gặp cánh vảy - Lepidoptera có 201 vật chủ, hai cánh - Diptera - 39 vật chủ Tuy nhiên có CPV sâu thơng Dendrolimus spectabilis sản xuất đăng ký thuốc trừ sâu sinh học virus Mặc dù thuốc CPV có hiệu diệt sâu, người ta quan tâm để phát triển Baculovirus, lí chủ yếu CPVs công tế bào biểu mô ruột sâu có xu hướng gây nhiễm trùng mãn tính Hơn điều kiện tự nhiên, chúng gây bệnh dịch với tỷ lệ thấp ảnh hưởng tới quần thể vật chủ Baculovirus Tuy nhiên chúng nhân ni theo qui mơ lớn công nghiệp Theo tác giả Granados Federici (1986); Possee (1993), Tanada Kaya (1993), có 600 lồi sâu thuộc Lepidoptera, Hymenoptera, Coleoptera, Diptera vật chủ Baculovirus Do có nhiều nghiên cứu sản xuất thuốc trừ sâu virus tập trung vào nhóm virus Hầu hết Baculovirus thuộc tính chun hố cao, ký sinh lồi sâu, chí ký sinh số mơ định sâu (Groner, 1986) Baculovirut Autographa californica (AcMNPV) Baculovirus Autographa falcifera có vật chủ 30 lồi trùng thuộc cánh vảy - Lepidoptera Những tác động có hại Baculovirus thiên địch ong kí sinh trưởng thành chưa phát tự nhiên (Groner, 1990) HÌNH THÁI VÀ CẤU TRÚC CỦA VIRUS  Vỏ nhân - Virus có cấu tạo vỏ gọi Capsid có chất protein - Trong vỏ capsid nhân (Nucleoid) chứa ADN ARN ADN virrut Sợi đơn - ARN virut Sợi đôi Sợi đơn Sợi đơi Hình thái: Virus có cấu trúc hình học, - đến 20 cạnh với nhiều nhóm virus khác Các acid nucleic (ADN, ARN) gồm dạng sợi đơn sợi đơi: Khi có gen vỏ capsid gọi virion hạt virus Vậy virion hạt virus đầy đủ hình thái, nucleocapsid có vỏ bọc gọi virus có vỏ, nucleocapsid trần gọi virus khơng vỏ (Hình 3.1): Axit Nucleic Capsid Nucleocapsid Capsomer Virut khơng vỏ Hình 3.1 Cấu tạo virus Virion Axit Nucleic Capsid Capsomer Nucleocapsid - Nucleocapsid cấu trúc bao gồm capsid axit nucleic - Capsid vỏ protein hạt virus bao gồm nhiều capsomer 3.1 Thành phần cấu tạo Baculovirus (Baculoviridae) Nhóm Baculovirus nghiên cứu kỹ khả diệt sâu chúng có vỏcứu vai trò vectơ biểu số gen Hơn nữa, gần nhữngVirut nghiên có hoạt tính sinh học Đặc điểm Baculovirus thuộc họ có mặt sợi đôi ADN hệ gen (genome) chúng Cho tới người ta xác định bệnh nhóm virus gây trùng thuộc sau: - Lepidoptera- Bộ cánh vẩy - Diptera - Bộ hai cánh - Coledoptera - Bộ cánh cứng - Hymenoptera -.Bộ cánh màng - Orthoptera - Bộ cánh thẳng - Neuroptera - Bộ cánh mạch Baculovirus thuộc họ Baculoviridae có chi Chi chia thành nhóm phụ virus đa diện nhân (nuclear polyhedrosis virus - NPV), virus hạt (granulosis virus - GV) Oryctes giống virus (Oryctes like virus - OV) (Fenner, 1976) NPV có dạng hình gậy, chứa ADN, nucleocapsis, có kích thước 35- 50 x 200 - 320 nm Các hạt virut có lớp bọc bên ngồi gọi nhân capsit (Harap, 1972) Hơn NPV có đặc tính hình thành protein tinh thể nhân tế bào trùng với kích thước 0,5 - 15 nm (Smith, 1976) NPV có hai dạng: - NPV hình thành thể vùi đa diện (Polyhedrosis Inclusion Body- PIB) chứa nhân capsid vỏ bọc virus Do NPV loại gọi SNPVs (hoặc SEVs) Virion - NPV hình thành thể vùi đa diện chứa nhiều nhân capsid vỏ virus gọi MNPVs (hoặc MEVs) (Rammosca & Hink, 1974) Phân tích kính hiển vi điện tử thấy thể vùi đa diện nhân tinh thể lớn, nhiều cạnh, có dạng hình cầu (Hình 3.2), hình vng, kích thước từ 1- 4µm Các thể vùi có cấu tạo thể protein Các lát cắt cực mỏng (microtom) phóng đại 60.000 lần cho thấy khối đa diện (polyhedra) chứa nhiều virion hình que (Hình 3.3) Các virion (hay hạt viruts) NPV sâu xanh có nucleocapsid lớp vỏ bao nucleopsid có dạng hình que Các khối đa diện có đặc điểm dễ bị kiềm hố, dùng 1/10N NaOH phá vỡ vỏ đa diện giải phóng virion, ruột trùng, dịch ruột mang tính kiềm nên polyhedra dễ bị phân huỷ để lây nhiễm tiếp vào nhân tế bào khác Mỗi nucleocapsid chứa sợi đôi ADN dạng vòng Trọng lượng phân tử 75 - 100 10 Da A B C Hình 3.2 Ảnh kính hiển vi điện tử quét thể vùi dạng hình cầu NPV (A) thể vùi, (B) dạng hạt, (C) virion Choristoneura fumiferana Hình 3.3 Ảnh kính hiển vi điện tử đại diện nhóm virus trùng Hình 3.3 Ảnh kính hiển vi điện tử đại diện nhóm virus trùng MNPV Lymantra dispar x 2940 lần MNPV Autographa californica x 2940 lần SNPV Helicoverpa zea x 5000 lần 10 nhân Helicoverpa armigera, viết tắt HaNPV Virus đa nhân diện sâu đo cỏ linh lăng (Alfafa looper), Autographa californica, viết tắt AcNPV 4.1 Nhóm cytoplasmic polyhedrosis virus - CPV (Reoviridae) Nhóm virus đa diện tế bào chất (CPV) gây bệnh cho 200 lồi trùng, chủ yếu Lepidoptera Diptera Viruts họ Reoviridae có đặc điểm hình thái giống virus NPV, chúng khác chỗ chúng chứa sợi đôi RNA gen CPV tạo thành thể protein chứa virion hình cầu có đường kính 50-65nm (hoặc 68-69nm) Các virion có số gai đỉnh với chiều dài 20nm Trong thể vùi bao gồm hay nhiều virion Mạng lưới protein thể vùi phần lớn có polypeptid, trọng lượng phân tử 25.000 - 31.000 kDa Trong gen virus CPV có sợi đơi ARN gồm 10 đoạn có trọng lượng phân tử 0,34 - 2,59 x 10 Người ta cho đoạn có gen Dựa sở phân đoạn gen, có 12 loại (tip) CPV phân loại Triệu chứng sâu chết CPV: biểu ăn, còi cọc, đơi phần đầu to so với thể, giai đoạn cuối bệnh, màu sắc thể sâu bị biến đổi, thường trở nên trắng vàng Những triệu chứng khác bao gồm phát triển kéo dài giảm ăn dẫn đến chết 4.2 Nhóm Entomopox virus (Entomopoxviridae - EV) Họ virus lớn thứ gây bệnh cho côn trùng thuộc Coleoptera, Lepidoptera, Orthoptera Diptera Về mặt hình thái đặc điểm hố sinh tương tự với poxvirus kí sinh động vật có xương sống Các virion bao gồm sợi đôi ADN, có hình bầu dục, có kích thước 350 x 250 nm đến 450 x 250nm Kích thước thể vùi hình bầu dục 1,0 đến 24 µm Triệu chúng gây bệnh: virus gây bệnh quan đặc biệt tế bào thể mỡ hầu hết quan thể Màu sâu bị nhiễm bệnh: trắng xanh nhạt 4.3 Nhóm Iridovirus (Iridoviridae) 14 Đặc điểm chủ yếu nhóm phát ngũ sắc từ màu xanh, xanh lam, đến màu tím cá thể bị nhiễm Các virion, bao gồm lõi sợi đơi ADN, kích thước từ 130 - 180 nm xếp dãy tinh thể biểu phát màu ngũ sắc đặc trưng nhóm Có 32 typ nhóm iridoviridae phát dựa kích thước mối quan hệ huyết 4.4 Nhóm Densovirus (Parvoviridae) Người ta phát densovirus có lồi côn trùng: Galleria mellonella,Junoria coenia Agraulis vanillae Virion chứa sợi đơn ADN có trọng lượng phân tử 1,6 - 2,2.106 Densovirrus virus nhỏ có đường kính khoảng 18-26 nm Dựa sở hình thái virion triệu chứng nhiễm bệnh, nhóm chia thành typ ( nhiễm bệnh chết nhanh) typ (chỉ nhiễm ruột chết tương đối chậm) NHẬN DẠNG VIRUS CÔN TRÙNG Trước ngày người ta sử dụng phương pháp triệu chứng bệnh để nhận dạng virus côn trùng 5.1 Phương pháp vào triệu chứng bệnh Đa số trường hợp, sở để nhận dạng virus côn trùng triệu chứng bị bệnh côn trùng Gọi triệu chứng học Căn vào triệu chứng bên để xác định có mặt virut trùng Thông thường người ta so sánh côn trùng khoẻ côn trùng bị bệnh dựa vào tiêu chuẩn áp dụng sau: Bảng 3.1 Các tiêu chuẩn so sánh nhận dạng virus diệt côn trùng TT Tiêu chuẩn Cách đánh giá, so sánh với sâu khoẻ Tuổi sâu Các giai đoạn phát triển sâu, sâu bị nhiễm thường xẩy giai đoạn ấu trùng Các giai đoạn nhộng, sâu trưởng thành bị nhiễm Kích thước Chiều rộng, dài, đầu: dấu hiệu kích thước 15 khơng bình thường so với sâu khoẻ Thời gian kéo dài tuổi sâu Khi biết thời gian kéo dài tuổi sâu so sánh phát triển giai đoạn sâu Thường thường số virus CPV NPV làm kéo dài giai đoạn phát triển ấu trùng Tập tính Hoạt động sâu, khả ăn sâu Các biểu Màu thể sâu, biến đổi bất thường bên sâu Các triệu chứng biểu màu sắc vùng bụng, mỡ, hạ bì 16 Bằng phương pháp đánh giá triệu chứng bên ngồi sâu phân biệt nhóm virut gây bệnh cho côn trùng Trên sở quan sát thực nghiệm, với số mẫu vật quan sát lớn, xây dựng khoá phân loại đơn giản để xác định nhóm virus trùng (Hình 3.6) 17 Triệu chứng bệnh Cơ thể trắng Cơ thể xanh tía Các quan bị nhiễm Iridescent virus Chỉ ruột Xanh nhạt đến trắng Phát triển kéo dài, ngừng ăn, nhộng sâu nhỏ Ruột vàng trắng, chết nhanh Entomopox viruses NPV Hạ bì dễ nứt, chuyển động chậm, chết tương đối nhanh CPV NPV, GV Mẫn cảm với CO2 Ruột vàng xanh, mềm,Bịbịliệt, liệtruột bị phá huỷ, giảm trọng lượng Densonucleosis virus (DNV ) Parvoviridae Picornavirus Sigma virus Drosophila Rhapdoviridae Hình 3.6 Khóa xác định số nhóm virus phương pháp nhận dạng triệu chứng 18 5.2 Phương pháp kính hiển vi điện tử Nhuộm mẫu soi kính hiển vi quang học phát thể vùi, không phân biệt virus vùi khơng vùi (của GV) cần phải dùng kính hiển vi điện tử quét (Scaning Electron Microscopy - SEM) kính hiển vi truyền qua (Transmission Electron Microscopy -TEM) để xác định Kính hiển vi điện tử cơng cụ hữu hiệu để phân biệt nét đặc trưng nhóm virus Có thể dùng mẫu để soi thẳng SEM, cắt lát mỏng (microtom) để quan sát (Hình 3.2, Hình 3.3) Các thơng số hình thái quan sát đo kính hiển vi điện tử biểu thị Bảng 3.2 Bảng 3.2 Đặc điểm hình thái số họ virus diệt trùng Họ virut Baculoviridae Hình thái Kích thước hạt virut hạt (nm) Trực khuẩn NPV 40-60 x 200-400 Kích Vi thước thể rion có vùi (µm) vỏ 0,3 - - 15,0 GV 30-60 x 260-360 Reoviridae(CPV) Đa diện đối 55 - 59 (ĐK*) 0,3-0,5 - 0,2- + xứng Entomopoxviridae Hình trứng 165-300 x (EPV) lập 150-470 10,0 phương Iridoviridae (IV) Đối xứng 125-300 1,024,0 19 - Ascoviridae Xúc xích, 130 x 400 - Trực khuẩn + (2 3) Birnaviridae Đối xứng 60 (ĐK) - - Caliciviridae Hình cốc 38 (ĐK) - - Nodaviridae Đối xứng 29 (ĐK) - - Parviviridae Cân đối 18-26 - - Picornaviridae Cầu 22-39 (ĐK) - - Polydnaviridae Tròn 150 x 350 - + (2) Rhapdoviridae Tetraviridae Đạn 50-59 x 130- trực khuẩn 380 Đối xứng 35-39 (ĐK) - + - - Chú thích: ĐK*: Đường kính QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT CHẾ PHẨM VIRUS NPV BẰNG PHƯƠNG PHÁP IN VIVO Giới thiệu Trên giới công nghệ sản xuất chế phẩm virus trừ sâu nhiều nước thưc Mỹ, Nga, Pháp, Ấn độ, Trung quốc Ở nước ta có số sở nghiên cứu Viện Bảo vệ thực vật, Viện công nghệ Sinh học sản xuất ứng dụng có hiệu số sâu, đặc biệt sâu xanh, loại sâu gây hại lớn cho trồng kháng với thuốc hoá học bảo vệ thực vật Cơ chế diệt sâu virus thực virut xâm nhập vào thể côn trùng nhân lên phát triển nhân nguyên sinh chất tế bào 20 Khi virut nhân lên với số lượng lớn chúng phá vỡ tế bào xâm nhập vào tế bào khác dẫn tới phá huỷ mô làm cho côn trùng chết 6.1 Phương pháp sản xuất chế phẩm virus Có hai phương pháp: phương pháp sản xuất in vivo phương pháp sản xuất in vitro: - Phương pháp sản xuất in vitro: phương pháp nuôi cấy virus mô tế bào Phương pháp nghiên cứu từ năm 1962 Grace thực hiện, sau Goodwin cs phát triển thành kỹ thuật ni cấy tế bào (1970) Những dòng tế bào thường gặp tiêu biểu cho loại sâu quan trọng bao gồm Autographa californica, Spodoptera frugiperda Các dòng tế bào tách từ sâu tuổi nhỏ nuôi nồi phản ứng sinh học, có lượng nhỏ mơi trường có thành phần gồm huyết thanh, bào thai bò, muối khống kháng sinh Các chế độ khác pH, độ thơng khí ảnh hưởng tới sinh trưởng suất tế bào - Phương pháp sản xuất in vivo: phương pháp sản xuất thể ký chủ trùng sống Có hai phương pháp để thu nhận ký chủ: a/ Tìm kí chủ (sâu) ngồi đồng để sản xuất Tìm vùng có nhiều quần thể sâu nhiễm virut vào quần thể thu cá thể bị nhiễm virus để sản xuất b/ Nuôi ký chủ (sâu) phòng thí nghiệm Nhân ni hàng loạt sâu phòng thí nhiệm sau cho nhiễm virus vào Đây phương pháp thường dùng 6.2 Quy trình cơng nghệ sản xuất chế phẩm virus NPV (Nuclear polyhedrosis virus) phương pháp in vivo Không Bt nấm (nuôi môi trường nhân tạo), NPV phải nhân nhiễm mô tế bào sống thể vật chủ, phải ni sâu để cung cấp cho sản xuất chế phẩm 21 Quy trình gồm bước sau (sơ đồ quy trình sản xuất hình 3.8): Thức ăn nhân tạo Sâu giống Nuôi sâu hàng loạt Virus Sâu nhiễm virus Thu hồi sản phẩm pppppphẩm Tiêu chuẩn hoá sản phẩm Dạng dịch thể Dạng bột thấm ướt Hình 3.8 Sơ đồ quy trình sản xuất chế phẩm virus 6.2.1 Sản xuất giống sâu nhân nuôi hàng loạt Muốn sản xuất virut diệt sâu xanh phải ni sâu xanh làm ký chủ để sản xuất virus ký sinh đặc hiệu, tức ký sinh sâu xanh, muốn diệt sâu khoang phải dùng sâu khoang để sản xuất virut sâu khoang Mỗi loài sâu cần nhu cầu dinh dưỡng khác nên môi trường khác a/ Môi trường thức ăn nhân tạo cho sâu xanh: Bột đậu xanh 52 gam Benzoat natri Axit Benzoit 0,2 gam 0,6 gam 22 Axit Axetic 0,8 ml Mật ong 0,7 gam Agar 4,0 gam Polyvitamin ml Nước nóng 200 ml b/ Phương pháp ni sâu giống: Thu sâu ngồi đồng ni thức ăn nhân tạo, chọn sâu to, chọn cá thể đực, đồng nuôi tiếp lọ thuỷ tinh lọ nhựa để phát triển thành ngài Ngài đẻ, thu trứng Sau 3-4 ngày trứng nở ấu trùng Cho vào thức ăn nhân tạo nuôi Ở tuổi 1, tuổi sâu ni chung, lớn phải ni riêng sâu ăn thịt lẫn (ví dụ sâu xanh bơng) Sâu tuổi 4, tuổi dùng để nhiễm virus Đối với sâu xanh tuổi tốt nhất, cho số lượng thể vùi cao Cần ý số yếu tố ảnh hưởng đến chất lượng sâu: thức ăn nhân tạo, kích thước dụng cụ, nhiệt độ, độ ẩm phòng ni, mật độ quần thể, tỷ lệ đực cái, ánh sáng, tạp nhiễm vi khuẩn Vấn đề nhân ni hàng loạt tự động hố, USDA (Hoa Kỳ), năm 1993 nhân nuôi 130.000 khay, khay 32 lỗ, lỗ triệu sâu đủ cung cấp cho 20.000 6.2.2 Nhiễm virus - Sau nhân nuôi sâu 10 ngày (tuổi 4-5 sâu xanh) chuyển sang phòng nhiễm virus - Cách tốt để lây nhiễm virus cho sâu trộn virut vào thức ăn, cho sâu ăn, phun dịch virus vào thức ăn 23 - Thường dùng dịch có nồng độ 107 PIB/ml để nhiễm để đạt tỷ lệ chết 90-95% (LC 90-95) Khơng nên nhiễm nồng độ cao gây chết sớm cho sâu làm giảm sản lượng virus Nhiễm nồng độ thấp sâu bị nhiễm làm giảm suất 6.2.3 Nuôi sâu nhiễm virus Sâu nhiễm virus nuôi nhiệt độ 26-29 oC (25-30oC) Nếu nhiệt thấp thời gian nuôi sâu sinh trưởng kéo dài dẫn đến thời gian thu hoạch dài Nếu nhiệt độ cao sâu chết nhanh lúc nhỏ ảnh hưởng tới suất Thời gian chọn cho thu hoạch LT 75-100 tức thời gian có tỷ lệ chết 75-100% 6.2.4 Thu hồi sản phẩm - Thu sâu chết cho vào dụng cụ chứa, - Nghiền sâu, cho thêm nước để lấy dịch, lọc qua vải để bỏ bã, - Ly tâm 10.000-20.000 vòng/phút 15-20 phút, lấy cặn, bỏ dịch (có thể tận dụng dịch ly tâm để pha thuốc bột), - Cặn bổ sung bột, chất phụ gia sau sấy khơ Thu hoạch công việc tốn nhiều thời gian tốn tiền sản xuất chế phẩm virus (sâu nuôi riêng con/lọ tốn thời gian cơng sức) 6.2.5 Tiêu chuẩn hoá sản phẩm (kiểm tra chất lượng) - Kiểm tra nồng độ thể vùi - Hoạt tính sinh học 6.2.6 Đóng gói - Đóng chai (thuốc nước), đóng gói (Thuốc bột) - Nhãn mác: Ghi hoạt lực, Ngày sản xuất, Hạn sử dụng, Hướng dẫn sử dụng chế phẩm Bước “Thu hồi chế phẩm” qui trình sản xuất chế phẩm quan trọng Nếu dịch virut sản xuất để dùng cơng nghệ đơn giản, việc thêm 24 chất phụ gia để phun Còn phải bảo quản lâu dài phải có hệ thống kho lạnh để bảo quản phải chế tạo chế phẩm dạng bột Lúc cần lượng để làm khô chế phẩm Liều dùng cho chế phẩm virus (NPV): - Thế giới dùng: 2,4.1012 PIB/ha, - Việt Nam: 1-2.1012 PIB/ ha) CÁC CHẾ PHẨM VIRUS TRỪ SÂU Bảng 3.3 liệt kê số chế phẩm đăng kí sử dụng số nước giới Bảng 3.3 Các chế phẩm virus trừ sâu 25 Tên chế Nguồn gốc Tác dụng phẩm Ứng dụng cho Công ty, Nước trồng sản xuất Sâu bắp cải, Rau, bắp cải, NPP, Pháp Mamestrin Sâu xanh, Sâu bông, khoai dạng nhũ tơ, Sâu khoai tây, nho hoá đậm tây, Sâu nho Baculovirus đặc Baculovirus cơng Các lồi khác Các hoa màu nghệ di truyền thuộc khác Cyanamid, USA Cánh vẩy Lepidoptera Baculovirut cải Ngài đêm, bao biến di truyền bao gồm sâu xanh gồm biến thể sâu khoang Bông rau Dupont, AcMNPV, HzSNPV SeMNPV CAPEX Adoxophyes Cây ăn AG orana Granulosis vườn Thuỵ Sĩ, Đức virus Anagrapha Sâu xanh, sâu Rau, bơng, Tập đồn falcifera khoang, ăn quả, (AfMNPV) loài khác thuộc hoa Lepidoptera 26 Thermo Trilogy, USA MỘT SỐ HẠN CHẾ VÀ HƯỚNG PHÁT TRIỂN CỦA THUỐC BVTV TỪ BACULOVIRUS 8.1 Hạn chế - Tác dụng chậm phải qua thời gian ủ bệnh sâu - Hiệu thuốc ban đầu chưa cao - Bị ảnh hưởng điều kiện thời tiết - Phổ tác dụng hẹp - Giá thành cao 8.2 Hướng phát triển - Mở rộng quy mô sản xuất, hạ giá thành sản phẩm - Tìm gene quy định nên protein gây độc cho côn trùng, thực nghiệm chuyển gene vào thực vật tạo giống kháng côn trùng gây bệnh - Chuyển gene kháng sâu có số loài vi khuẩn khác vào Baculovirus tạo loại chế phẩm kháng nhiều loại sâu bệnh lúc - Nghiên cứu tạo giá thể phù hợp cho phát triển Baculovirus môi trường để tạo số lượng vi khuẩn lớn phục vụ phân lập protein độc tố tạo chế phẩm sinh học 27 TÀI LIỆU THAM THẢO • PROSPECTS OF BACULOVIRUSES IN INTEGRATED PEST MANAGEMENT ,G.S.Battu, Ramesh Arora and G.S.Dhaliwal Department of Entomology, Punjab Agricultural University, Ludhiana 141 004 • George Rohrmann PhD, Baculovirus Molecular Biology, Bethesda (MD): National Center for Biotechnology Information (US); 2008 28 ... Viện Bảo vệ thực vật, Viện công nghệ Sinh học sản xuất ứng dụng có hiệu số sâu, đặc biệt sâu xanh, loại sâu gây hại lớn cho trồng kháng với thuốc hoá học bảo vệ thực vật Cơ chế diệt sâu virus thực. .. cứu cấu trúc, khả gây bệnh, xuất nhân lên tế bào vật chủ Vật chủ virus tế bào người, động vật, thực vật, vi khuẩn trùng Virus có khả sinh sản từ phần thành 10-100 phần Quá trình sinh sản virus... Lepidoptera, Hymenoptera, Coleoptera, Diptera vật chủ Baculovirus Do có nhiều nghiên cứu sản xuất thuốc trừ sâu virus tập trung vào nhóm virus Hầu hết Baculovirus thuộc tính chun hố cao, ký sinh