LƯỜNG THỊ TRANG NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP MỚI TỔNG HỢP BERBERIN CLORID KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI - - LƯỜNG THỊ TRANG NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP MỚI TỔNG HỢP BERBERIN CLORID KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2019 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI - - LƯỜNG THỊ TRANG MÃ SINH VIÊN: 1401624 NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP MỚI TỔNG HỢP BERBERIN CLORID KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Nguyễn Đình Luyện ThS Nguyễn Minh Ngọc Nơi thực hiện: Bộ môn Công nghiệp Dược HÀ NỘI – 2019 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến PGS TS Nguyễn Đình Luyện, TS Nguyễn Văn Hải, TS Nguyễn Văn Giang, người thầy trực tiếp hướng dẫn, bảo, cho niềm cảm hứng bất tận suốt thời gian làm khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn ThS Nguyễn Minh Ngọc tận tâm hỗ trợ tới mức tối đa q trình tơi làm thực nghiệm mơn Bên cạnh đó, tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tất thành viên tổ Tổng hợp hóa dược – mơn Cơng nghiệp Dược, người sát cánh bên tôi, giúp đỡ trải qua khó khăn để hồn thành khóa luận Cuối cùng, tơi muốn bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình tơi anh Bùi Anh Thế ln động viên tinh thần, tạo chỗ dựa vững nguồn động lực to lớn để vượt qua khó khăn suốt đời tơi Mặc dù cố gắng tạo điều kiện, nhiên thời gian nghiên cứu ngắn, kiến thức thân hạn chế nên chắn khóa luận cịn nhiều thiếu sót Rất mong nhận đóng góp tận tình q thầy bạn để khóa luận hồn thiện Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 07 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Lường Thị Trang MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG : TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ BERBERIN .3 1.1.1 Cấu trúc phân tử .3 1.1.2 Tính chất hóa lý .3 1.1.3 Tác dụng dược lý 1.1.4 Các phương pháp tổng hợp berberin .6 1.2 LỰA CHỌN HƯỚNG TỔNG HỢP BERBERIN CLORID 19 CHƯƠNG : NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .20 2.1 NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ 20 2.1.1 Nguyên liệu 20 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ 21 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 22 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.3.1 Tổng hợp hóa học 22 2.3.2 Kiểm tra độ tinh khiết 23 2.3.3 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học .23 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 24 3.1 TỔNG HỢP BERBERIN CLORID 24 3.1.1 Tổng hợp 2,3-dimethoxybenzaldoxim (61) từ 2,3-dimethoxybenzaldehyd (60)24 3.1.2 Tổng hợp (2,3-dimethoxyphenyl)methanamin (62) từ 2,3dimethoxybenzaldoxim (61) 24 3.1.3 Tổng hợp 2-(1,3-benzodioxol -5-yl)-N-(2,3-dimethoxybenzyl)ethan-1-amin hydrochlorid (32) từ (2,3-dimethoxyphenyl)methanamin (62) 27 3.1.4 Tổng hợp berberin (1) từ 2-(1,3-benzodioxol -5-yl)-N-(2,3dimethoxybenzyl)ethan-1-amin hydrochlorid (32) 28 3.2 KIỂM TRA ĐỘ TINH KHIẾT 28 3.3 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HÓA HỌC 29 3.3.1 Phổ hồng ngoại (IR) .29 3.3.2 Phổ khối lượng (MS) 30 3.3.3 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) 31 3.4 BÀN LUẬN 34 3.4.1 Bàn luận phản ứng tổng hợp hóa học 34 3.4.1.1 Tổng hợp 2,3-dimethoxybenzaldoxim (61) từ 2,3-dimethoxybenzaldehyd (60) 34 3.4.1.2 Tổng hợp (2,3-dimethoxyphenyl)methanamin (62) từ 2,3dimethoxybenzaldoxim (61) 35 3.4.1.3 Tổng hợp 2-(1,3-benzodioxol -5-yl)-N-(2,3-dimethoxybenzyl)ethan-1-amin hydrochlorid (32) từ (2,3-dimethoxyphenyl)methanamin (62) 36 3.4.1.4 Tổng hợp berberin (1) từ 2-(1,3-benzodioxol -5-yl)-N-(2,3dimethoxybenzyl)ethan-1-amin hydrochlorid (32) 37 3.4.2 Bàn luận cấu trúc hóa học sản phẩm 39 3.4.2.1 Về cấu trúc 2,3-dimethoxybenzaldoxim (61) .39 3.4.2.2 Về cấu trúc 2,3-dimethoxyphenyl)methanamin (62) 40 3.4.2.3 Về cấu trúc 2-(1,3-benzodioxol -5-yl)-N-(2,3-dimethoxybenzyl) ethan-1amin hydrochlorid (32) 41 3.4.2.4 Về cấu trúc berberin clorid (1) 41 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .45 KẾT LUẬN .45 KIẾN NGHỊ 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ac Acetyl ADN Acid Deoxyribonucleic Amphos Di-tert-butyl-(4-dimethylaminophenyl)phosphin AMPK Protein kinase hoạt hóa adenosin monophosphat (Adenosine Monophosphate – Activated Protein Kinase) AP-1 Protein hoạt hóa (Activator protein 1) Bcl-2 Tế bào lympho β2 (β- cell lymphoma 2) Bcl-xl Tế bào lympho β cực lớn- phân tử xuyên màng ty thể ( β- cell lymphoma extra large) Bu n - Butyl (Boc)2O Di-tert-butyl dicarbonat COX-2 Enzym Cyclo-oxygenase Cyclin- D1 Chất ức chế cyclin phụ thuốc kinase D1 (cyclin-dependent kinase inhibitor) CINC-1 Hóa ứng động bạch cầu trung tính gây cytokin (Cytokine-induced neutrophil chemoattractant) CAN Ammonium cerium nitrat DCM Dicloromethan DMF Dimethylformamid DMSO Dimethylsulfoxid đvC Đơn vị Cacbon Et Ethyl EGFR Thụ thể yếu tố tăng trưởng nội mô (Epidermal growth factor receptor) ELAM-1 Phân tử kết dính tế bào bạch cầu nội mô -1 (Endothelial cell leukocyte adhesion molecule-1) g Gam h Giờ HbA1c Hemoglobin A1c HER2 Thụ thể yếu tố tăng trưởng nội mô người (Human Epidermal growth factor receptor 2) HIF-1 Các yếu tố gây thiếu oxy ( Hypoxia-inducible factors) LDL Lipoprotein tỉ trọng thấp (Low Density Lipoprotein) LDL-c Cholesterol lipoprotein tỷ trọng thấp (Low density lipoprotein cholesterol) m/z Tỉ số khối lượng điện tích mARN Acid Ribonucleic thông tin (Messenger Ribonucleic Acid) Me Methyl MHz Megahertz MS Phổ khối (Mass Spectrometry) MMP-9 Matrix metalloproteinase mARN Acid Ribonucleic thơng tin (Messenger acid ribonucleic) MCF-7 Dịng tế bào ung thư vú (Michigan cancer foundation-7) MCP-1 Một loại chemokin gây viêm (Monocyte chemoattractant protein-1) MCL-1 Protein biệt hóa tế bào ung thư bạch cầu dịng tủy (Myeloid cell leukemia-1) MDR Đa kháng thuốc (Multidrug resistance) NF- B Yếu tố nhân kappa B (Nuclear factor for kappa B) NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy) NEGPF Nhà máy tổng hợp dược phẩm Đông Bắc (Northeast general pharmaceutical factory) iNOS Enzym thúc đẩy trình tổng hợp nitric oxid NO từ acid amin Iarginin (Inducible nitric oxide synthase) IL-6 Interleucin IL-12 Interleucin 12 INF-β Interferon Beta IkBα kinase Men ức chế NF-kB (IkappaBalpha kinase) PCSK9 Ezym mã hóa gen PCSK9 người nhiễm sắc thể (Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9) Piv Pivaloyl PPARα Thụ thể kích hoạt peroxisom proliferator - alpha (Peroxisome proliferator-activated receptor - alpha) PTSA Acid P-toluenesulfonic Pyr Pyridin Rf Hệ số lưu giữ (Retention factor) STT Số thứ tự SKLM Sắc ký lớp mỏng TEBA Benzyltriethylamoni clorid Ts p - Toluensulfonyl TNF-α Yếu tố hoại tử khối u alpha THF Tetrahydrofuran THZ 2,4-thiazolidinedion TFA Acid trifluoroacetic FLIP Protein ức chế FLICE giúp điều hòa appotosis (FLICE-like inhibitory protein) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Danh mục dung mơi, hóa chất 20 Bảng 2.2 Danh mục thiết bị, dụng cụ 21 Bảng 3.1 Kết khảo sát ảnh hưởng tác nhân khử hóa đến hiệu suất phản ứng tổng hợp 62 25 Bảng 3.2 Giá trị Rf khoảng nhiệt độ nóng chảy chất tổng hợp 28 Bảng 3.3 Kết phổ hồng ngoại (IR) chất tổng hợp 29 Bảng 3.4 Kết phổ khối (MS) hợp chất tổng hợp 30 Bảng 3.5 Kết phổ 1H-NMR hợp chất tổng hợp 31 Bảng 3.6 Kết phổ 13C-NMR hợp chất tổng hợp 33 Bảng 3.7 Kết so sánh phổ 1H-NMR berberin tổng hợp phổ chuẩn berberin clorid 42 Bảng 3.8 Kết so sánh phổ 1H-NMR berberin tổng hợp phổ chuẩn berberin clorid (tiếp) 43 Bảng 3.9 Kết so sánh phổ 13C-NMR berberin tổng hợp phổ chuẩn berberin clorid 43 Bảng 3.10 Kết so sánh phổ 13C-NMR berberin tổng hợp phổ chuẩn berberin clorid (tiếp) 44 Phụ lục 15 Phổ 1H – NMR giãn rộng hợp chất 32 (Vùng 2,7 – 4,3 ppm) Phụ lục 16 Phổ 13C –NMR hợp chất 32 Phụ lục 17 Phổ 13C –NMR giãn rộng hợp chất 32 (Vùng 30 - 160 ppm) Phụ lục 18 Phổ 13C – NMR giãn rộng hợp chất 32 (Vùng 100 - 155 ppm) Phụ lục 19 Phổ 13C – NMR giãn rộng hợp chất 32 (Vùng 30 – 65 ppm) Phụ lục 20 Phổ IR hợp chất 32 Phụ lục 21 Phổ MS hợp chất Phụ lục 22 Phổ 1H –NMR hợp chất Phụ lục 23 Phổ 1H –NMR giãn rộng hợp chất (Vùng 7,0 – 10,0 ppm) Phụ lục 24 Phổ 1H – NMR giãn rộng hợp chất (Vùng 3,0 – 6,5 ppm) Phụ lục 25 Phổ 13C –NMR hợp chất Phụ lục 26 Phổ 13C – NMR giãn rộng hợp chất (Vùng 20 - 160 ppm) Phụ lục 27 Phổ 13C – NMR giãn rộng hợp chất (Vùng 100 – 155 ppm) Phụ lục 28 Phổ IR hợp chất ...BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI - - LƯỜNG THỊ TRANG MÃ SINH VIÊN: 1401624 NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP MỚI TỔNG HỢP BERBERIN CLORID KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS... hiệu suất tổng hợp berberin, tiến hành đề tài: ? ?Nghiên cứu phương pháp tổng hợp berberin clorid? ?? Với mục tiêu sau: Tổng hợp berberin clorid phương pháp từ 2,3-dimethoxybenzaldehyd CHƯƠNG : TỔNG QUAN... Sơ đồ tổng hợp berberin Z X Chen 12 Hình 1.9 Sơ đồ tổng hợp berberin clorid C Chen cộng 14 Hình 1.10 Sơ đồ cải tiến tổng hợp berberin clorid C Chen 15 Hình 1.11 Sơ đồ tổng hợp berberin