Phân Lập Định Danh, Chọn Lọc Chủng Nấm Và Ứng Dụng Sản Xuất Chao Nhằm Thay Thế Giai Đoạn Lên Men

tên đề tài.txt Phân lập định danh chọn lọc chủng nấm ứng dụng sản xuất chao nhằm thay giai đoạn lên men chao truyền thống Giảng viên hướng dẫn: TS Hoàng Quốc Khánh Lớp: 13DSH06 MSSV: 1311100548 Page LỜI CAM ĐOAN Người thực đề tài xin cam đoan nội dung đồ án tốt nghiệp người thực đề tài làm Viện Sinh Học Nhiệt Đới TP.HCM, hướng dẫn TS.Hồng Quốc Khánh, HVCH.Ngơ Đức Duy Các số liệu kết nghiên cứu đồ án trung thực, không chép từ báo cáo công bố trước Mọi tham khảo sử dụng đồ án trích dẫn nguồn tài liệu báo cáo tài liệu tham khảo Mọi chép không hợp lệ, không trung thực vi phạm quy chế nhà trường, người thực đề tài xin hoàn toàn chịu trách nhiệm trước khoa Công Nghệ Sinh Học – Thực Phẩm – Môi Trường, trước ban giám hiệu trường Đại Học Cơng Nghệ TP.HCM Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 16 tháng năm 2017 Sinh viên thực Như Trương Bích Như LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận này, em nhận nhiều quan tâm giúp đỡ, đóng góp ý kiến bảo nhiệt tình thầy cơ, gia đình bạn bè Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến: Các thầy mơn khoa Công Nghệ Sinh Học – Thực Phẩm – Môi Trường thầy cô trường Đại Học Công Nghệ TP.HCM, trực tiếp giảng dạy truyền đạt kiến thức cho em học trường, giúp em có sở lý thuyết vững vàng tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình học tập Thầy Ngơ Đức Duy, phòng Vi Sinh, Viện Sinh Học Nhiệt Đới TP.HCM, người thầy ln tận tình hướng dẫn, bảo động viên em suốt q trình thực đồ án Thầy Hồng Quốc Khánh thầy Nguyễn Hồng Dũng, phòng Vi Sinh, Viện Sinh Học Nhiệt Đới TP.HCM giúp đỡ tạo điều kiện để em hoàn thành tốt đồ án tốt nghiệp Chị Lê Quỳnh Loan bên cạnh giúp đỡ, chia kiến thức, kinh nghiệm tất anh chị, bạn nghiên cứu phòng Vi Sinh, Viện Sinh Học Nhiệt Đới TP.HCM nhiệt tình giúp đỡ dạy cho em nhiều điều suốt trình nghiên cứu Các bạn lớp 13DSH06, trường Đại Học Công Nghệ TP.HCM sát cánh bên em suốt năm tháng giảng đường đại học Cuối cùng, xin cám ơn Ba Mẹ, ni nấng chăm sóc tạo điều kiện cho ăn học thành người có ích cho xã hội Trương Bích Như Đồ Án Tốt Nghiệp MỤC LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC HÌNH ẢNH .vi MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Tình hình nghiên cứu Mục đích nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu Các kết đạt đề tài Kết cấu đồ án tốt nghiệp CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cây đậu nành 1.1.1 Nguồn gốc 1.1.2 Gía trị kinh tế đậu nành 1.1.3 Thành phần hóa học hạt đậu nành [8] 1.2 Tổng quan đậu phụ 11 1.3 Tổng quan chao [8] 11 1.4 Nấm mốc thường gặp chao 12 1.5 Định danh phương pháp sinh học phân tử 13 1.5.1 Các phương pháp ly trích DNA 13 1.5.2 PCR định danh vi sinh vật 14 1.5.3 Xây dựng phát sinh loài 16 CHƯƠNG II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 i Đồ Án Tốt Nghiệp 2.1 Thời gian địa điểm 18 2.2 Vật liệu, thiết bị hóa chất 18 2.2.1 Dụng cụ thiết bị 18 2.2.2 Nguồn mẫu 18 2.2.3 Hóa chất 19 2.3 Phương pháp nghiên cứu 20 2.3.1 Phân lập chủng nấm 20 2.3.2 Phương pháp phòng ẩm 21 2.3.3 Định danh sinh học phân tử 21 2.3.4 Khảo sát khả sinh enzym protease 26 2.3.5 Khảo sát khả sinh enzyme lipase 26 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 28 3.1 Kết đặc điểm hình thái khuẩn lạc, khuẩn ty bào tử 28 3.2 Định danh chủng nấm vùng gen ITS 35 3.2.1 Kết ly trích thu nhận gen DNA 36 3.2.2 Kết nhân đoạn gen bảo tồn ITS nấm mốc 36 3.3 Kết so sánh vùng gen ITS chủng CM1, CDN CSG thiết lập phát sinh loài dựa ngân hàng liệu gen NCBI 37 3.3.1 Trình tự vùng gen ITS chủng CM1, CDN VÀ CSG 37 3.3.2 Thiết lập phát sinh loài 38 3.3.3 Kết khảo sát protease 40 3.3.4 Kết khảo sát lipase 41 3.3.5 Khả lên men chao chủng nấm CM1,CDN CSG 42 CHƯƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 44 4.1 Kết luận 44 4.2 Kiến nghị 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 ii Đồ Án Tốt Nghiệp PHỤ LỤC PHỤ LỤC A: Thành phần môi trường PHỤ LỤC B: Kết cấy phân lập nấm ban đầu PHỤ LỤC C: Kết vùng gen bảo tồn ITS PHỤ LỤC D: Kết trình tự vùng gen chủng so sánh NCBI iii Đồ Án Tốt Nghiệp DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT CTAB Cetyl Trimethyl Ammonium Bromide DNA Deoxyribonucleotide Acid EDTA Ethylene- diamine-Tetraacetic-Acid ITS Internal transcribed spacer PCR Polymerase Chain Reation PDA Potato Dextrose Agar PDB Potato Dextrose Broth TAE Tris-Acetic acid- Ethylenediamine- Tetraacetae LB Luria – Bertani dNTP Deoxy Nucleotide Triphosphate iv Đồ Án Tốt Nghiệp DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần hóa học hạt đậu nành Bảng 1.2 Thành phần acid amin protein đậu nành Bảng 1.3 Thành phần hydratcacbon đậu nành Bảng 1.4 Thành phần khoáng đậu nành 10 Bảng 1.5 Thành phần vitamin đậu nành 10 Bảng 1.6 Thành phần hóa học chao 11 Bảng 2.1 Danh sách mẫu chao thu TP.HCM, Long An Đồng Nai 18 Bảng 2.2 Thành phần phản ứng PCR 25 v Đồ Án Tốt Nghiệp DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Sơ đồ gen ribosome nằm vùng gen ITS 16 Hình 3.1 Khuẩn lạc, tế bào chủng CTP môi trường PDA 72 28 Hình 3.2 Chủng CM2 mơi trường PDA nhiệt độ phòng 72 29 Hình 3.3 Chủng CVP2 mơi trường PDA nhiệt độ phòng 72 30 Hình 3.4 Chủng CVP1 mơi trường PDA nhiệt độ phòng 72 31 Hình 3.5 Mẫu CM1 mơi trường PDA nhiệt độ phòng 72 32 Hình 3.6 Mẫu CDN mơi trường PDA nhiệt độ phòng 72 33 Hình 3.7 Mẫu CSG mơi trường PDA nhiệt độ phòng 48 34 Hình 3.8 Kết ly trích gen DNA chủng CM1,CDN CSG gel agarose 1,5% 36 Hình 3.9 Kết điện di sản phẩm PCR chủng CM1, CDN CSG gel agarose 1,5% 37 Hình 3.10 Cây phát sinh lồi dựa phân tích trình tự vùng gen ITS chủng CM1, CDN SGN với chủng nấm ngân hàng gen NCBI 40 Hình 3.11 Khả sinh caseinase chủng nấm CM1, CDN CSG 41 Hình 3.12 Kết sinh enzyme lipase chủng nấm CM1, CDN CSG 42 Hình 3.13 Khảo sát khả lên mốc chao chủng nấm CM1, CDN CSG 42 vi Đồ Án Tốt Nghiệp MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Ngày nhu cầu thực phẩm người ngày tăng cao, không dừng lại việc ăn ngon mà thực phẩm phải an tồn có giá trị dinh dưỡng Do tìm phương pháp sản xuất thực phẩm an tồn có giá trị dinh dưỡng cao vấn đề thiết yếu Chao truyền thống có vai trò quan trọng đời sống tâm linh người dân Việt Nam Sản phẩm chao sản xuất theo lối thủ công chất lượng sản phẩm phụ thuộc vào nhiều yếu tố khách quan chủ quan q trình sản xuất đáng kể chủng nấm mốc Chao sản phẩm dùng phổ biến gia vị bữa ăn Chao bổ sung thêm phần protein acid amine quan trọng, cung cấp đáng kể nguồn lượng, khoáng vitamin,…trong bữa ăn người dân Châu Á nói chung người dân Việt Nam nói riêng Tuy nhiên Việt Nam sở sản xuất chao chủ yếu sử dụng mốc chao tự nhiên, thời gian bảo quản chất lượng sản phẩm khó kiểm sốt khơng ổn định, làm khả nhiễm vi sinh vật nguy hư hỏng cao làm thay đổi giá trị dinh dưỡng hương vị sản phẩm, chí nhiễm nấm mốc gây độc Aspergillus Flavus Aspergillus Parasiticus sinh độc tố aflatoxin gây ung thư cho người dùng[4] Để chọn chủng nấm thích hợp hạn chế hư hỏng nhanh chao tăng hương vị chao Chính việc: “ phân lập định danh, chọn lọc chủng nấm ứng dụng sản xuất chao nhằm thay giai đoạn lên men chao truyền thống ” góp phần đưa chao đến gần với người tiêu dùng nâng cao chất lượng hương vị sản phẩm Tình hình nghiên cứu Một số cơng trình nghiên cứu chủng nấm mốc ứng dụng sản xuất chao công bố Năm 1929, Wai người phân lập loại mốc thuộc dòng Đồ Án Tốt Nghiệp Khảo sát đặc tính sinh hóa chủng nấm Cải tiến quy trình sản xuất chao truyền thống Tối ưu hóa điều kiện sinh trưởng nấm Nâng cao chất lượng mốc giống để đạt độ ổn định cao 45 Đồ Án Tốt Nghiệp TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt [1] Ngô Thế Dân cộng (1999) Cây đậu tương Nhà xuất Nông Nghiệp,TP.HCM [2] Nguyễn Lân Dũng (1983), Thực tập vi sinh vật học, NXB Đại Học Trung Học Chuyên Nghiệp, Hà Nội [3] Nguyễn Danh Đông (1982) Trồng đậu tương Nhà xuất Nông Nghiệp, TP.HCM [4] Võ Thị Hạnh, Lê Thị Bích Phượng, Đỗ Thị Luyn, Lê Tấn Hưng, Trần Thị Thanh (2001) Nghiên cứu sản xuất bào tử nấm mốc Aspergillus oryzae.Tuyển tập cơng trình nghiên cứu khoa học công nghệ (1999 – 2000) [5] Nguyễn Thị Hiền Vũ Thy Thư (2004) Hóa sinh học, nhà xuất đại học sư pham, Hà Nội [6] Nguyễn Thị Hiền ( 2006) Cơng nghệ sản xuất mì sản phẩm lên men cổ truyền Nhà xuất Đại Học Quốc Gia, TPHCM [7]Nguyễn Thị Thanh Hồng (2008) Khảo sát đặc điểm lên men giống sử dụng sản xuất bánh men thuốc bắc Phong Điền, Cần Thơ Luận văn tốt nghiệp, Trường Đại Học Cần Thơ, Cần Thơ [8] Nguyễn Đức Lượng (2006) Thực phẩm lên men truyền thống tập 3.Đại học Quốc Gia, TPHCM [9] Nguyễn Hữu Phúc (1998) Các phương pháp lên men thực phẩm truyền thống Việt Nam nước vùng Nhà xuất Nông Nghiệp, TP.HCM [10] Lê Minh Nguyệt Phan Thị Phương Thảo (2012) Xây dựng quy trình sản xuất giống khởi động cho sản xuất chao từ nấm mốc Mucor elegans Tạp chí khoa học phát triển 2012, tập 10 (số 5), 771 - 778 46 Đồ Án Tốt Nghiệp [11] Nguyễn Văn Thành Trần Nguyễn Ngọc Quỳnh (2011) Nghiên cứu sản xuất starter Actinomucor elegans có mật số sức sống cao dùng cải tiến chất lượng chao truyền thống Tạp chí khoa học trường đại học Cần Thơ, số 19(a), 194-203 Tài liệu nước [12] A.Botha and A.Botes (2014) Encyclopedia Of Food Microbiology, Stellenbosch Matieland, South Africa [13] Cocolin, L., Urso, R., Rantsiou, K., Cantoni, C., Comi, G., (2006) Dynamics and characterization of yeasts during natural fermentation of Italian sausages FEMS Yeast Res 6, 692 - 701 [14] Daniel K.Manter, Jorge M.Vivanco, 2007.Use of the ITS primer, ITS1F and ITS4, to characterize fungal abundance and diversity in mixed – template samples by qPCR and length heterogeneity analysis Journal of Microbiological Methods, Vol 7.,No.1.,pp:7 – 14 [15]Fox, P.F., McSweeney, P.,(2004).Cheese: an overview In: Fox, P.F., McSweeney, P.L.H., Cogan, T.M., Guinee, T.P (Eds.), Cheese: Chemistry, Physics and Microbiology Academic Press, New York, pp1-18 [16] Guarro Josep, Gené Josepa and Stchigel Alberto M.,(1999) Developments in fungal taxonomy Clinical Microbiology Reviews, Vol.12, No.3.,pp:454 – 500 [17]Han, B-Z., Beumer, R.R , Rombouts, F.M and Nout, M.J.R (2001a) Microbiologial safely and quality of commercical sufu – a Chinese fermented soybean food Food control, 12, 541 – 547 [18] Han B-Z, Rombouts, F.M., Nout, M.J.R (2001) A chinese fermented soybean food International Journal of Food Microbiology 65, p 1-10 [19] Han B-Z (2003) Charecterization and product Innovation Of Sufu – A Chinese Fermented Soybean Food, University Wageningen, Nertherland 47 Đồ Án Tốt Nghiệp [20] Han, B.-Z., Kuijpers, A.F.A., Thanh, N.V., Nout, M.J.R., (2004) Mucoraceous moulds involved in the commercial fermentation of Sufu Pehtze Antonie Van Leeuwenhoek 85, 253 – 257 [21] Hayaloglu, A.A., Kirbag, S., (2007) Microbial quality and presence of moulds in Kuflu cheese Int J Food Microbiol 115, 376 – 380 [22] Hermet, A., Meheust, D., Mounier, J., Barbier, G., jany, J.-L., (2012) Molecular systematics in the genus Mucor with special regards to species encountered in cheese Fungal Biol 116, 692 - 705 [23] Hesseltine, C.W., 1992 Food fermentations: mucorales in ragi and related products In: Leatham, G.F (Ed.), Frontiers in Industrial Mycology Chapman and Hall, New York, pp 24 - 39 [24] Huang, H.T., Dooley, J.G., 1976 Enhancement of cheese flavors with microbial esterases Biotechnol Bioeng 18, 909 - 919 [25] Kang, M.G., 2001 Handbook of Technology for Chinese and Foreign Fermented Foods Chemical Industrial Press, Beijing, China, pp 99 - 111 [26] Karimi, K., Zamani, A., 2013 Mucor indicus: biology and industrial application perspectives: a review Biotechnol Adv 31, 466 - 481 [27] Lv, X.-C., Chen, Z.-C., Jia, R.-B., Liu, Z.-B., Zhang, W., Chen, S.-J., Rao, P.-F., Ni, L., 2015 Microbial community structure and dynamics during the traditional brewing of Fuzhou Hong Qu glutinous rice wine as determined by culture-dependent and culture-independent techniques Food Control 57, 216 - 224 [28] Nout, M., Aidoo, K.E., 2002 Asian fungal fermented food In: Hoffrichter, M (Ed.), Industrial Applications Springer Berlin, pp 23 - 47 The Mycota X [29] Oranusi, S.U., Braide, W., Eze, U.C., Chinakwe, E., 2013 Quality aspects of African salad J Emerg Trends Eng Appl Sci 4, 287 - 292 48 Đồ Án Tốt Nghiệp [30] Papagianni, M., Ambrosiadis, I., Filiousis, G., (2007) Mould growth on traditional greek sausages and penicillin production by Penicillium isolates Meat Sci 76, 653 – 657 [31] T R Prabha, K Revathi1, M S Vinod, S P Shanthakumar and Paul Bernard (2013) A simple method for total genomic DNA extraction from water moulds Current science 104(3): 345-346 [32]Pontecorvo, A.J and Bourne, M.C (1978) Simple methods for extending the shelf life of soy curd (tofu) in tropical areas, Journal of Food Science, 43, 969 – 972 [33]Granum, P.E (1994).Bacillus cereus and its toxins, Journal of Applied Bacteriology Supplement, 76, S61 – S66 [34] Préstamo, G and Fontecha, J (2007) High pressure treatment on the tofu fatty acids and acylgycerols content, Innovative Food Science And Emerging Technologies, 8, 188 – 191 [35]Shambuyi,M.,.Beuchat,L.R,Hung, Y.C., and Nakayama,T (1992) Evaluation of subtrates and strorage conditions for preparing and maintaining stater cultures for tempeh fermentation International Journal of Food Microbiology 15, 77-85 [36]Thanh, N.V., and Nout, M.J.R., 2004.Dormancy, activacation and viability of Rhizopus oligosporus sporangiospores International Journal of Food Microbiology 92, 171-179 [37] Thanh, N.V., and Nout, M.J.R (2002) Rhizopus oligosporus biomass, sporangiospores yield and viability as influenced by harvesting age and processing conditions International Journal of Food Microbiology 19, 91-96 [38] Wang, H-L., and Hesseltine, C.W (1970) Sufu and Lao-Chao, Journal of Agricultural and Food chemistry, 18(4), 572 – 575 [39] Wang, H.L, Swain, E.W and Hesseltine, C.W(1975) Mass production of Rhizopus oligosporus spores and their application in tempeh fermentation, Journal of food science 40, 168-170 49 Đồ Án Tốt Nghiệp Tài liệu từ Internet [40] http://www.clarku.edu/faculty/dhibbett/protocols_folder/primers/primers.htm [42] https://en.wikipedia.org/wiki/Mucor_racemosus [43] http://jcm.asm.org/content/47/12/4176/F1.large.jpg [44] https://en.wikipedia.org/wiki/Mucor_indicus 50 Đồ Án Tốt Nghiệp PHỤ LỤC PHỤ LỤC A: Thành phần môi trường Môi trường nuôi cấy : PDA (Potato Dextrose Agar) Dịch chiết khoai tây 20% Dextrose 2% Agar 2% Chloramphenycol 100 mg Sodium propionate 2g pH 5.6 H2 O 1000 ml Mơi trường thử hoạt tính protease: LB (Luria Bertani) – bổ sung 1% sữa gầy Peptone 10g Agar 2% Cao nấm men 5g NaCl 5g H2 O 1000ml Mơi trường thử hoạt tính Lipase: với Tween 80 Peptone 10g NaCl 5g CaCl2.2H2O 0,1g Agar 9g pH 7,4 H2 O 1000ml Đồ Án Tốt Nghiệp PHỤ LỤC B: Kết cấy phân lập nấm ban đầu Đồ Án Tốt Nghiệp PHỤ LỤC C: Kết vùng gen bảo tồn ITS Chủng CM1 CM1 Đồ Án Tốt Nghiệp Chủng CDN Đồ Án Tốt Nghiệp Chủng CSG Đồ Án Tốt Nghiệp PHỤ LỤC D: Kết trình tự vùng gen chủng so sánh NCBI Mucor circinelloides KU899095.1 GATGGAGATGCTAACCGAGTCATAATCAAGCTTAGGCTTGGTATCCTATTATTATTTACCAAAAGAA TTCAGAATTAATATTGTAACATAGACCTAAAAAATCTATAAAACAACTTTTAACAACGGATCTCTTG GTTCTCGCATCGATGAAGAACGTAGCAAAGTGCGATAACTAGTGTGAATTGCATATTCAGTGAATC ATCGAGTCTTTGAACGCAACTTGCGCTCATTGGTATTCCAATGAGCACGCCTGTTTCAGTATCAAAA CAAACCCTCTATCCAACATTTTGTTGAATAGGAATACTGAGAGTCTCTTGATCTATTCTGATCTCGA ACCTCTTGAAATGTACAAAGGCCTGATCTTGTTTGAATGCCTGAACTTTTTTTTAATATAAAGAGAA GCTCTTGCGGTAAACTGTGCTGGGGCCTCCCAAATAATACTTTTTTTAAATTTGATCTGAAATCAGG CGGGATTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAA Rhizomucor variabilis KM205636.1 GATGGAGATGCTAACCGAGTCATAGTCAAGCTTAGGCTTGGTATCCTATTATTATTTACCAAAAGAA TTCAGAATTAATATTGTAACATAGACCTAAAAAATCTATAAAACAACTTTTAACAACGGATCTCTTG GTTCTCGCATCGATGAAGAACGTAGCAAAGTGCGATAACTAGTGTGAATTGCATATTCAGTGAATC ATCGAGTCTTTGAACGCAACTTGCGCTCATTGGTATTCCAATGAGCACGCCTGTTTCAGTATCAAAA CAAACCCTCTATCCAACATTTTGTTGAATAGGAATACTGAGAGTCTCTTGATCTATTCTGATCTCGA ACCTCTTGAAATGTACAAAGGCCTGATCTTGTTTGAATGCCTGAACTTTTTTTTAATATAAAGAGAA GCTCTTGCGGTAAACTGTGCTGGGGCCTCCCAAATAATACTTTTTTTAAATTTGATCTGAAATCAGG CGGGATTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATA Penicillium crustosum JN226961.1 GATGGAGATGCTAACCGAGTCATAATCAAGCTTAGGCTTGGTATCCTATTATTATTTACCAAAAGAA TTCAGAATTAATATTGTAACATAGACCTAAAAAATCTATAAAACAACTTTTAACAACGGATCTCTTG GTTCTCGCATCGATGAAGAACGTAGCAAAGTGCGATAACTAGTGTGAATTGCATATTCAGTGAATC ATCGAGTCTTTGAACGCAACTTGCGCTCATTGGTATTCCAATGAGCACGCCTGTTTCAGTATCAAAA CAAACCCTCTATCCAACATTTTGTTGAATAGGAATACTGAGAGTCTCTTGATCTATTCTGATCTCGA ACCTCTTGAAATGTACAAAGGCCTGATCTTGTTTGAATGCCTGAACTTTTTTTTAATATAAAGAGAA GCTCTTGCGGTAAACTGTGCTGGGGCCTCCCAAATAATACTTTTTTTAAATTTGATCTGAAATCAGG CGGGATTACCCGCTGAACTTAAGCATATC Mucor racemosus JQ683250.1 GATGGAGATGCTAACCGAGTCATAGTCAAGCTTAGGCTTGGTATCCTATTATTATTTACCAAAAGAA TTCAGAATTAATATTGTAACATAGACCTAAAAAATCTATAAAACAACTTTTAACAACGGATCTCTTG GTTCTCGCATCGATGAAGAACGTAGCAAAGTGCGATAACTAGTGTGAATTGCATATTCAGTGAATC ATCGAGTCTTTGAACGCAACTTGCGCTCATTGGTATTCCAATGAGCACGCCTGTTTCAGTATCAAAA CAAACCCTCTATCCAACATTTTGTTGAATAGGAATACTGAGAGTCTCTTGATCTATTCTGATCTCGA ACCTCTTGAAATGTACAAAGGCCTGATCTTGTTTGAATGCCTGAACTTTTTTTTAATATAAAGAGAA GCTCTTGCGGTAAACTGTGCTGGGGCCTCCCAAATAATACTTTTTTTAAATTTGATCTGAAATCAGG CGGGATTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAA Đồ Án Tốt Nghiệp Rhizomucor variabilis HQ908494.1 CCCCAAGACAGTCTTAATAACTAGAGCATTCCTTTATATTAAAAAAATGTTCAGGCTAAAAGAACA ATAGTTCAGGCCTAATAATTTTAAAGAATTCAGCGCAAGTCCGAAATTCTCACTTCCATTCACAACA AAATTGTGGATGTGGGTTGTTGTTGATACTGAAACAGGCGTGCTCAATGGAATACCATTGAGCGCA AGATGCGTTCAAAGACTCGATGATTCACTGAATATGCAATTCACACTAGTTATCGCACTTTGCTACG TTCTTCATCGATGCGAGAACCAAGAGATCCGTTGTTAAAAGTTGTTTTATAAGTTTTTTACGCTTATG TTACAATATTAATTCTGAATTCTTTTGGTAAATAATGAATTAGGATACCAGGCCTAAGCCTGACTTT AGCTAGGTTAACATCCTAAAGACCTATCCCTATAGTCTCCAGGCATCCCTCAAAACGCTAAACAGT AAAACAGTTCACAGTAAATTAGAAATATGCATAA Mucor irregularis KY425732.1 CCCCAAGACAGTCTTAATAACTAGAGCATTCCTTTATATTAAAAAAATGTTCAGGCTAAAAGAACA ATAGTTCAGGCCTAATAGTTTTAAAGAATTCAGCGCAAGTCCGAAATTCTCATTTCCATTCACAACA AAATTGTGGATGTGGGTTGTTGTTGATACTGAAACAGGCGTGCTCAATGGAATACCATTGAGCGCA AGATGCGTTCAAAGACTCGATGATTCACTGAATATGCAATTCACACTAGTTATCGCACTTTGCTACG TTCTTCATCGATGCGAGAACCAAGAGATCCGTTGTTAAAAGTTGTTTTATAAGTTTTTTACGCTTATG TTACAATATTAATTCTGAATTCTTTTGGTAAATAATGAATTAGGATACCAGGCCTAAGCCTGACTTT AGCTAGGTTAACATCCTAAAGACCTATCCCTATAGTCTTTAAGCATCCCTCAAAACGCTAAACAGTA AAACAGTTCACAGTAAATTAGAAATATGC Leaf litter ascomycete AF502720.1 AGTCTTAATAACTNGNNCATTCCTTTATATTAAAAAAATGTTCAGGCTAAAAGAACAATAGTTCAG GCCTAATANTTTTAAAGAATTCAGCGCAAGTCCGAAATTCTCATTTCCATTCACAACAAAATTGTGG ATGTGGGTTGTTGTTGATACTGAAACAGGCGTGCTCAATGGAATACCATTGAGCGCAAGATGCGTT CAAAGACTCGATGATTCACTGAATATGCAATTCACACTAGTTATCGCACTTTGCTACGTTCTTCATC GATGCGAGAACCAAGAGATCCGTTGTTAAAAGTTGTTTTATAAGTTTTTTACGCTTATGTTACAATA TTAATTCTGAATTCTTTTGGTAAATAATGAATTAGGATACCAGGCCTAAGCCTGACTTTANNTAGGT TAACATCCTAAAGACCTATCCCTATAATCTTTAGGCAATCCCTCAAAACGCTAAACAGTAAAACAG TTCACAGTAAATTAGAAAT Mucor indicus KT359356.1 TATTTAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTTTCCGTAGGTGAACCTGCGGAAGGATCATTAAATA ATCTGATAATTCAAAAATTATCTTATTTACTGTGAACTGTTTTTATTTATGACGTATAAGGGGATGTC TTTAGGCTATAAGGGTAGGCCTATGGAATGCTAACCTAGTCATAGTCAAGCTTGATGCTTGGTACCC GATTATTACTTACCAAAAGAATTCAGTTTAAAATATTGTAACATAGACCTAAAAAATCTATAAAAC AACTTTTAACAATGGATCTCTTGGTTCTCGCATCGATGAAGAACGTAGCAAAGTGCGATAACTAGT GTGAATTGCATATTCAGTGAATCATCGAGTCTTTGAACGCATCTTGCACTCAATGGTATTCCATTGA GTACGCCTGTTTCAGTATCAAAAACAACCCTTATTCAAAAATTTTTTTTGAGTAGATATGAGTGTAG CAACCTTACAAGTTGAGACATTTTAAATAAAGTCAGGCCATATCGTGGATTGAGTGCCGATACTTTT TTAATTTTGAAAAGGTAAAGCATGTTGATGTCCGCTTTTTGGGCCTCCCAAATAACTTTTTAAACTT GATCTGAAATCAGGTGGGATTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGAAAAT AACAATGATTTCCCCAGTAACGGCGAGTGAAGAGGAAAGAGCTCAAAGTTGGAACCTGTTTGGCTT Đồ Án Tốt Nghiệp AGCTAAACCGGATTGTAAACTGTAGAAACGTTTTCCTGGCACGCCAGATAAATAAGTCCTTTGGAA CAGGGCATCAT Mucor lilianae KT736106.1 TATTTAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTTTCCGTAGGTGAACCTGCGGAAGGATCATTAAATA ATTTGATATTTTCCTTTGGGATAAATATTCTTATTTACTGTGAACTGTATTATTACTTGATGTTTGAG GGATGTTCAGTAGCCATAATGGGTAGGCAATTGAAATGTTAACCGAATCAAGGTCAAGCTTAGGCT TGGTACCCTATTATTATTTACCAAAAGAATTCAGTATAAATATTGTAACATAGACCTAAAAAATCTA TAAAACAACTTTTAACAACGGATCTCTTGGTTCTCGCATCGATGAAGAACGTAGCAAAGTGCGATA ACTAGTGTGAATTGCATATTCAGTGAATCATCGAGTCTTTGAACGCATCTTGCACTCATTGGTATTC CAATGAGTACGCCTGTTTCAGTATCAAAAACACCCCACATTTAAAACTTTGTTTTGAATGGAATTGA GGGCAAACGGCATTACTGCTGTTCCCTTTAAAACTATTAGGCCTGAATTTGTTTTTCTGCCTGAACTT TTTTTTAATATAAAGGAAAGTACTTGCTAAAGACTCTCTTGGGGCCTCCCAAATAAATCTTTCTTAA ACTTGATCTGAAATCAGGTGGGATTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGAA AATAACAATGATTTCCCCAGTAACGGCGAGTGAAGAGGAAAGAGCTCAAAGTTGGAACCTGTTTGG CTTAGCTAAACCGGATTGTAAACTGTAGAAGTGTTTTCCAGGCACGCCAGGTAAAAAAGTCCTTTG GAACAGGGCATCAT Mucor rudolphii KT736105.1 TATTTAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTTTCCGTAGGTGAACCTGCGGAAGGATCATTAAATA ATTTGATATTTTCCTTTGGGATAAATATTCTTATTTACTGTGAACTGTATTATTACTTGATGTTTGAG GGATGTTCAGTAGCCATAATGGGTAGGCAATTGAAATGTTAACCGAATCAAGGTCAAGCTTAGGCT TGGTACCCTATTATTATTTACCAAAAGAATTCAGTATAAATATTGTAACATAGACCTAAAAAATCTA TAAAAACAACTTTTAACAACGGATCTCTTGGTTCTCGCATCGATGAAGAACGTAGCAAAGTGCGAT AACTAGTGTGAATTGCATATTCAGTGAATCATCGAGTCTTTGAACGCATCTTGCACTCATTGGTATT CCAATGAGTACGCCTGTTTCAGTATCAAAAACACCCCACATTTAAAACTTTGTTTTGAATGGAATTG AGGGCAAACGGCATTACTGCTGTTCCCTTTAAAACTATTAGGCCTGAATTTGTTTTTCTGCCTGAAC TTTTTTTTAATATAAAGGAAAGTACTTGCTAAAGACTCTCTTGGGGCCTCCCAAATGAATCTTTCTTA AACTTGATCTGAAATCAGGTGGGATTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGA AAATAACAATGATTTCCCCAGTAACGGCGAGTGAAGAGGAAAGAGCTCAAAGTTGGAACCTGTTTG GCTTAGCTAAACCGGATTGTAAACTGTAGAAGTGTTTTCCAGGCACGCCAGGTAAAAAAGTCCTTT GGAACAGGGCATCAT Ambomucor seriatoinflatus AY743664.1 TATTTAGAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTTTCCGTAGGTGAACCTGCGGAAGGATCATTAAATA ATTTGATATTCTAGCTTCGGCTTAGCAATATTTTATTTACTGTGAACTGTATTATTATTTGACGCTTG AGGAATGTTTGCTGGCTATATGGGTAGGCCAGCAGAATGTTAACCGAGTCATAATCAAGCTTAGGC TTGGTATCCTATTATTATTTACCAAAAGAATTCAGTATTAATATTGTAACATAGACCTAAAAAATCT ATAAAAACAACTTTTAACAACGGATCTCTTGGTTCTCGCATCGATGAAGAACGTAGCAAAGTGCGA TAACTAGTGTGAATTGCATATTCAGTGAATCATCGAGTCTTTGAACGCATCTTGCACTCATTGGTAT TCCAATGAGTACGCCTGTTTCAGTATCAAAAACACCCCACACCCAAAACTTGCTTTTGAGTGGAACT GGGGGCAACAGTCTTTACGGCTGTTCCCCTTAAAAATATTAGGCCTGAACTTGTTTTGTCTGCCTGA ACTTTTTTTTAATATAAAGGAAAGCTCTTGCCAACTAAAACTTTATTGGGGCCTCCCAAATAAATCT Đồ Án Tốt Nghiệp ATCTTAAATTTGATCTGAAATCAGGTGGGATTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGG AAAAGAAAATAACAATGATTTCCCTAGTAACGGCGAGTGAAGAGGAAAGAGCTCAAAGTTGGAAC CTGTTTGGCTTAGCTAAACCGGATTGTAAACTGTAGAAGTGTTTTCCAGGCACGCCAGGTAAAAAA GTCCTTTGGAACAGGGCATCAT ... nhanh chao tăng hương vị chao Chính việc: “ phân lập định danh, chọn lọc chủng nấm ứng dụng sản xuất chao nhằm thay giai đoạn lên men chao truyền thống ” góp phần đưa chao đến gần với người tiêu... dụng sản xuất thay lên men tự nhiên tránh tránh tạp nhiễm gây hư hỏng chao Mục đích đề tài xác định chủng nấm sản phẩm chao, sau xác định chủng nấm mốc, dựa vào đặc điểm nghiên cứu nấm mốc chao. .. quan chao [8] Chao sản phẩm lên men sản xuất từ đậu nành Vì qua q trình lên men chao có hệ số tiêu hóa cao nhiều so với đậu phụ Chao có nhiều sản phẩm khác chao nước, chao bánh, chao đặc chao