Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8110:2009 - ISO 14377:2002. Tiêu chuẩn về Sữa cô đặc đóng hộp – xác định hàm lượng thiếc – phương pháp đo phổ hấp thụ nguyên tử dùng lò graphit. Tiêu chuẩn do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F12 Sữa và sản phẩm sữa biên soạn. Mời các bạn tham khảo.
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 8110 : 2009 ISO 14377 : 2002 SỮA CƠ ĐẶC ĐĨNG HỘP – XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG THIẾC – PHƯƠNG PHÁP ĐO PHỔ HẤP THỤ NGUYÊN TỬ DÙNG LÒ GRAPHIT Canned evaporated milk – Determination of tin content - Method using graphite furnace atomic absorption spectrometry Lời nói đầu TCVN 8110 : 2009 hồn tồn tương đương với ISO 14377 : 2002; TCVN 8110 : 2009 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F12 Sữa sản phẩm sữa biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học Cơng nghệ cơng bố SỮA CƠ ĐẶC ĐĨNG HỘP – XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG THIẾC – PHƯƠNG PHÁP ĐO PHỔ HẤP THỤ NGUYÊN TỬ DÙNG LÒ GRAPHIT Canned evaporated milk – Determination of tin content - Method using graphite furnace atomic absorption spectrometry Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp đo phổ hấp thụ nguyên tử dùng lò graphit để xác định hàm lượng thiếc sữa đặc đóng hộp (đã tiệt trùng) Phương pháp áp dụng mẫu chứa hàm lượng thiếc lớn mg/kg Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn khơng ghi năm cơng bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 4851 (ISO 3696), Nước dùng để phân tích phòng thí nghiệm – u cầu kỹ thuật phương pháp thử Thuật ngữ định nghĩa Trong tiêu chuẩn sử dụng thuật ngữ định nghĩa sau đây: 3.1 Hàm lượng thiếc sữa đặc đóng hộp (tin content of canned evaporated milk) Phần khối lượng chất xác định quy trình quy định tiêu chuẩn CHÚ THÍCH Hàm lượng thiếc biểu thị miligam kilogam Nguyên tắc Phần mẫu thử pha loãng 100 lần nước, sau pha lỗng tiếp với dung dịch axit ascorbic 15 % (chất bổ nền) (với tỷ lệ : 1) Đo độ hấp thụ nguyên tử bước sóng 286,3 nm máy đo phổ hấp thụ nguyên tử nhiệt điện (lò graphit, nguyên tử hóa từ thành ống) Sử dụng đường chuẩn thu đo dung dịch chuẩn chuẩn bị từ sữa (đã cô đặc) chứa hàm lượng thiếc thấp [sữa (cơ đặc) đóng chai] pha lỗng 100 lần, pha loãng tỉ lệ : với dung dịch axit ascorbic 15 % để xác định hàm lượng thiếc Cách khác, dùng nguyên tử hóa platform với chất bổ NH 4H2PO4/Mg(NO3)2 Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích, chứa lượng thiếc dạng vết 5.1 Nước, phù hợp với loại TCVN 4851 (ISO 3696) 5.2 Axit clohydric, đậm đặc, 20 (HCl) = 1,15 g/ml (Merck “Suprapur”1) loại tương đương) 5.3 Dung dịch chuẩn thiếc 5.3.1 Dung dịch gốc thiếc, có hàm lượng thiếc (Sn) 000 mg/l Dùng chế phẩm có bán sẵn (Baker No 69431) loại tương đương) 5.3.2 Dung dịch làm việc chuẩn thiếc, có hàm lượng thiếc (Sn) 100 mg/l Dùng pipet lấy 10 ml dung dịch gốc thiếc (5.3.1) cho vào bình định mức dung tích 100 ml (6.3) Thêm 30 ml axit clohydric (5.2) Thêm nước (5.1) đến vạch trộn 5.3.3 Dung dịch làm việc chuẩn thiếc sữa (cô đặc) pha lỗng Dùng sữa đặc đóng chai gần giống với mẫu sữa đóng hộp để phân tích hàm lượng chất béo hàm lượng chất khơ Đồng hóa mẫu sữa (đã đặc) đóng chai trước sử dụng Dùng pipet lấy sữa đặc đóng chai cho vào năm bình định mức dung tích 100 ml (6.3) bình ml Thêm khoảng 80 ml nước (5.1) Sau dùng pipet lấy l, 100 l, 200 l, 500 l 000 l dung dịch làm việc chuẩn thiếc (5.3.2) vào năm bình định mức tương ứng Pha loãng nước đến vạch trộn cách xoay nhẹ bình Chuẩn bị dung dịch làm việc chuẩn thiếc sữa (cô đặc) pha lỗng ngày sử dụng Nếu khơng có sẵn sữa đặc đóng chai, lấy lượng sữa thơng thường cho nồng độ chất khô sữa dung dịch làm việc chuẩn thiếc dung dịch thử gần CHÚ THÍCH Giả sử lượng sữa đặc bình số năm bình định mức vạch 1,00 g lượng thiếc dung dịch làm việc chuẩn tương ứng với hàm lượng thiếc sản phẩm ban đầu chưa pha loãng mg/kg, 10 mg/kg, 20 mg/kg, 50 mg/kg 100 mg/kg CHÚ THÍCH Xem thêm 6.5 sử dụng nguyên tử hóa platform 5.4 Dung dịch chất bổ I, có hàm lượng axit ascorbic (C6H8O6) 150 g/l Hòa tan 15 g axit ascorbic (Merck No 1271) loại tương đương) nước (5.1) đựng bình định mức (6.3) Thêm nước đến vạch trộn 5.5 Dung dịch chất bổ II, có hàm lượng amoni dihydrophosphat (NH4H2PO4) 0,2 mg hàm lượng magiê nitrat [Mg(NO3)2] 0,01 mg/10 l dung dịch CHÚ THÍCH Dung dịch thay cho dung dịch chất bổ I trường hợp nguyên tử hóa platfrom Hòa tan 2,0 g NH4H2PO4 (Aldrich No 20400-5 1) loại tương đương) 0,173 g Mg(NO3)2 6H2O (Merck No 5855 1) loại tương đương) bình định mức dung tích 100 ml (6.3) Thêm nước (5.1) đến vạch trộn Thiết bị, dụng cụ Ngâm dụng cụ thủy tinh dung dịch axit nitric (HNO 3) 10 % (khối lượng) Trước sử dụng, tráng dụng cụ thủy tinh ba lần nước cất hai lần để khô Bảo quản dụng cụ thủy tinh môi trường không bụi Sử dụng thiết bị, dụng cụ phòng thử nghiệm thơng thường cụ thể sau: Merck Suprapur, No 127 No 5855, Baker No.6943 Aldrich No 20400-5 ví dụ sản phẩm thích hợp có bán sẵn Thông tin đưa tạo thuận tiện cho người sử dụng tiêu chuẩn này, ISO không ấn định phải sử dụng sản phẩm 6.1 Cân, cân xác đến mg 6.2 Nồi cách thủy, trì nhiệt độ từ 40 0C đến 60 0C 6.3 Bình định mức vạch, dung tích 100 ml 6.4 Pipet tự động, điều chỉnh thể tích từ 50 l đến 200 l từ 200 l đến 000 l, có đầu tip chất dẻo 6.5 Máy đo phổ hấp thụ nguyên tử, trang bị: - phận nguyên tử hóa nhiệt điện (lò graphit) - lấy mẫu tự động có cốc đựng mẫu (dung tích khoảng ml) - đèn catot rộng thiếc đèn phóng điện khơng điện cực - hệ thống hiệu chỉnh nền, - ống graphit tráng pyrolytic, - khí argon, - phận đo diện tích pic, - máy ghi máy in Việc sử dụng ống graphit tráng pyrolytic làm cho tín hiệu cao so với sử dụng ống graphit khơng tráng pyrolytic Thay ngun tử hóa từ thành ống, thực nguyên tử hóa plaform Trong trường hợp này, sử dụng axit ascorbic làm chất bổ tạo nên dư lượng cacbon platform Thay vào đó, sử dụng 10 l dung dịch NH4H2PO4 Mg(NO3)2 (5.5) làm chất bổ Nếu chọn kỹ thuật platform, dung dịch thử dung dịch chuẩn khơng cần pha lỗng 1:1 với dung dịch axit ascorbic 15 % (xem 9.3) Do đó, dung dịch làm việc chuẩn thiếc 5.3.3 chứa khoảng 0,5 g sữa cô đặc 100 ml, tức cần lấy pipet 0,5 ml sữa cô đặc thay lấy ml Ngồi ra, để chuẩn bị dung dịch làm việc chuẩn thiếc sữa cô đặc pha lỗng theo 5.3.3 cần thêm lượng l, 50 l, 100 l, 250 l 500 l dung dịch làm việc chuẩn thiếc (5.3.2) vào năm bình định mức dung tích 100 ml (6.3) Lấy mẫu Việc lấy mẫu không quy định tiêu chuẩn Nên lấy mẫu theo TCVN 6400 (ISO 707) Mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải mẫu đại diện không bị hư hỏng không bị biến đổi chất lượng trình vận chuyển bảo quản Mẫu thử bảo quản cho tránh hư hỏng biến đổi thành phần Tránh ô nhiễm thiếc Chuẩn bị mẫu thử 8.1 Lắc kỹ hộp chứa mẫu cách đảo chiều hộp chứa liên tục Mở hộp rót mẫu vào hộp khác (làm thủy tinh chất dẻo có nắp đậy kín) làm trước dùng Cẩn thận lấy hết tất phần chất béo thành phần khác bám dính thành hộp đựng mẫu ban đầu vào mẫu thử Trộn kỹ cách dùng thìa dao trộn để khấy đậy nắp hộp 8.2 Làm nóng hộp chứa mẫu đậy nắp kín nồi cách thủy (6.2) nhiệt độ từ 40 0C đến 60 C Cứ 15 lại lấy hộp chứa mẫu lắc hộp Sau h, lấy hộp chứa mẫu khỏi nồi cách thủy để nguội đến nhiệt độ môi trường Mở nắp hộp dùng thìa dao trộn để khuấy mẫu Khơng dùng thìa dao trộn có chứa thiếc để trộn Khơng đựng mẫu vào hộp chứa ban đầu sau mở nắp làm tăng hàm lượng thiếc CHÚ THÍCH Nếu chất béo phân tách, kết mong đợi Cách tiến hành 9.1 Phần mẫu thử Cân 1,0 g 0,1 g mẫu thử, xác đến mg, vào bình định mức dung tích 100 ml (6.3) Pha lỗng đến vạch nước (5.1) xoay nhẹ bình để trộn mẫu Nếu sử dụng nguyên tử hóa platform, cân 0,5 g 0,05 g mẫu thử, xác đến mg, vào bình định mức dung tích 100 ml (6.3) Thêm nước đồng hóa 9.2 Khởi động cài đặt thiết bị đo Bật nguồn máy đo phổ hấp thụ nguyên tử 30 trước bắt đầu đo Điều chỉnh thông số thiết bị theo hướng dẫn nhà sản xuất Theo hướng dẫn, cài đặt máy đo phổ hấp thụ nguyên tử Perkin Elmer Zeeman/3030 2), trang bị phận nguyên tử hóa lò graphit HGA-600, đèn phóng điện khơng điện cực thiếc phận lấy mẫu tự động AS-60 sau: công suất đèn: W bước sóng: 286,3 nm độ rộng khe hở: 0,7 nm khí bao: argon Thể tích bơm 20 l Đo tất dung dịch chuẩn dung dịch thử ba lần Trong q trình ngun tử hóa (bước Bảng 1), đo diện tích pic tín hiệu hấp thụ (được hiệu chỉnh theo độ hấp thụ nền) CHÚ THÍCH Dòng khí giảm xuống 50 ml/min bước giao điểm độ nhạy dải tuyến tính CHÚ THÍCH Chương trình ngun tử hóa lò graphit cần hiệu chỉnh sử dụng kiểu thiết bị khác Nếu sử dụng nguyên tử hóa platform sử dụng chương trình Bảng 1, trừ sau lần bơm dung dịch thử dung dịch chuẩn thêm 10 l dung dịch bổ II (5.5) (xem 6.5) Bảng – Chương trình ngun tử hóa lò graphit Thứ tự bước Nhiệt độ lò C Thời gian Lưu lượng dòng khí nội s Phóng Giữ Đọc kết ml/min 90 20 10 300 - 120 20 10 300 - 800 15 15 300 - 200 50 + 650 300 - 9.3 Chuẩn bị dung dịch hiệu chuẩn dung dịch thử Dùng pipet lấy 0,75 ml dung dịch chất bổ (5.4) cho vào cốc lấy mẫu tự động Dùng pipet với đầu tip chất dẻo để thêm 0,75 ml dung dịch làm việc chuẩn thiếc (5.3.3) chứa l kẽm chuẩn Trộn cách dùng pipet với đầu tip chất dẻo để lấy 0,75 ml dung dịch khỏi chén bơm trở lại Lặp lại việc hai lần Đây dung dịch zero dung dịch hiệu chuẩn 2) Đây ví dụ thiết bị thích hợp có bán sẵn Thơng tin đưa tạo thuận tiện cho người sử dụng tiêu chuẩn này, ISO không ấn định phải sử dụng thiết bị Chuẩn bị tương tự dung dịch hiệu chuẩn từ dung dịch làm việc chuẩn thiếc lại (5.3.3) sữa đặc pha loãng dung dịch thử từ phần mẫu thử (9.1) Nếu sử dụng cốc lấy mẫu tự động có dung tích nhỏ ml điều chỉnh lại thể tích dung dịch chuẩn, dung dịch thử dung dịch axit ascorbic để cuối thu hỗn hợp 1:1 dung dịch chuẩn dung dịch thử với dung dịch axit ascorbic Trộn kỹ hỗn hợp thu Nếu thực nguyên tử hóa platform khơng cần thêm dung dịch axit ascorbic Lấy 1,5 ml dung dịch chuẩn dung dịch thử cho vào cốc lấy mẫu tự động Cho vào cốc dung dịch bổ II (5.5) Nếu máy đo phổ hấp thụ nguyên tử trang bị lấy mẫu tự động có phận bổ sung tự động dung dịch bổ thêm chuẩn, dùng phận để pha loãng dung dịch thử theo tỷ lệ : với dung dịch axit ascorbic ống graphit để hiệu chuẩn phương pháp thêm chuẩn (Thay chuẩn bị đường chuẩn phương pháp đo dung dịch chuẩn sữa cô đặc không chứa thiếc pha loãng) Trong trường hợp dùng phương pháp thêm chuẩn, nên kiểm tra lại dải tuyến tính đường chuẩn 9.4 Quy trình đo 9.4.1 Đặt cốc chứa dung dịch chuẩn bị (9.3) vào phận lấy mẫu tự động cho dung dịch zero đo đầu tiên, sau bồn dung dịch hiệu chuẩn cuối dung dịch thử Đo dung dịch ba lần ghi lại diện tích oic tín hiệu hấp thụ, có hiệu chỉnh độ hấp thụ Sau đo bốn dung dịch hiệu chuẩn thêm lần Đường chuẩn tuyến tính hàm lượng thiếc đến 100 mg/kg mẫu ban đầu chưa pha loãng Các mẫu cho tín hiệu độ hấp thụ cao 10 % tín hiệu độ hấp thụ chuẩn cao phải pha loãng hai lần đo lại Phải chắn dung dịch thử pha loãng chứa 75 g/l axit ascorbic Trong trường hợp cần hiệu chỉnh lượng sữa cô đặc dung dịch thử pha lỗng cách thêm thể tích thích hợp sữa đặc đóng chai dùng để chuẩn bị dung dịch chuẩn Sự có mặt axit ascorbic dung dịch tạo nên dư lượng cacbon ống graphit Sau dãy 50 đến 100 lần nung, cần làm thật kỹ bên ống thìa nhỏ 9.4.2 Các mẫu chứa ≤ 20 mg thiếc/kg cho tín hiệu độ hấp thụ thấp, độ chụm kết khơng tốt Để thu kết xác mẫu trên, dùng quy trình có khác chút, tóm tắt sau: Cân g 0,2 g mẫu thử, xác đến mg, thay g 9.1 Nếu sử dụng nguyên tử hóa platform cân g 0,1 g thay cân 0,5 g Thực ngắt khí (khơng dòng khí bên ) q trình ngun tử hóa Dựng đường chuẩn riêng mẫu có hàm lượng thiếc thấp cách sử dụng dung dịch khơng pha lỗng sữa đặc đóng chai bổ sung thiếc tương ứng với mg/kg, mg/kg, 10 mg/kg 20 mg/kg mẫu sữa chưa pha loãng 9.5 Dựng đường chuẩn Lấy giá trị trung bình diện tích pic đo dung dịch hiệu chuẩn đo trước sau dung dịch thử trừ giá trị trung bình diện tích pic dung dịch hiệu chuẩn zero (9.3) CHÚ THÍCH Diện tích pic dung dịch hiệu chuẩn zero vạch zero ảo Tính giá trị trung bình diện tích pic, hiệu chỉnh giá trị dung dịch hiệu chuẩn zero, đo dung dịch hiệu chuẩn trước sau dung dịch thử Dựng đồ thị từ giá trị trung bình tương ứng với hàm lượng thiếc mẫu chưa pha loãng (10 mg/kg, 20 mg/kg, 50 mg/kg 100 mg/kg), tính đường hồi quy phương pháp phân tích đường bình phương nhỏ 10 Tính tốn biểu thị kết 10.1 Tính tốn Chuyển đổi giá trị diện tích pic trung bình dung dịch thử phần mẫu thử 1,000 g (đối với nguyên tử hóa platform) 0,500 g) theo cơng thức sau: Ac As Abl m Ac diện tích pic trung bình chuyển đổi dung dịch thử, biểu thị độ hấp thụ x giây; As diện tích pic trung bình ba lần đo dung dịch thử, biểu thị độ hấp thụ x giây; Abl diện tích pic trung bình ba lần đo dung dịch hiệu chuẩn zero, biểu thị độ hấp thụ x giây; m khối lượng phần mẫu thử (9.1), tính gam Nhân m với sử dụng quy trình ngun tử hóa platform Tính hàm lượng thiếc mẫu thử, số miligam kilogam, cách đọc trực tiếp từ đường chuẩn sử dụng Ac, tính trực tiếp từ phương trình hồi quy tuyến tính 10.2 Biểu thị kết Làm tròn kết đến chữ số thập phân thứ 11 Độ chụm 11.1 Phép thử liên phòng thử nghiệm Các giá trị giới hạn độ lặp lại độ tái lập thu từ kết phép thử liên phòng thử nghiệm tiến hành theo TCVN 6910-1 (ISO 5725-1) TCVN 6910-2 (ISO 5725-2) Chi tiết độ chụm độ xác phương pháp sử dụng phép thử liên phòng thử nghiệm nêu [5] Các giá trị nhận từ phép thử liên phòng thử nghiệm khơng áp dụng cho dải nồng độ chất khác với dải nồng độ chất nêu CHÚ THÍCH IDF 135 đưa hướng dẫn cụ thể phép thử liên phòng thử nghiệm phương pháp phân tích sản phẩm sữa Hướng dẫn dựa TCVN 6910 (ISO 5725) 11.2 Độ lặp lại Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử độc lập, riêng rẽ, thu sử dụng phương pháp, loại vật liệu thử, phòng thử nghiệm, người thao tác sử dụng thiết bị khoảng thời gian ngắn nhau, không 5% trường hợp lớn 7% trung bình hai kết 11.3 Độ tái lập Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử riêng rẽ, thu sử dụng phương pháp, loại vật liệu thử, phòng thử nghiệm khác nhau, người thao tác khác thực sử dụng thiết bị khác nhau, không 5% trường hợp lớn 19 % trung bình hai kết 12 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ: - thông tin cần thiết việc nhận biết đầy đủ mẫu thử; - phương pháp lấy mẫu sử dụng, biết; - phương pháp thử sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này; - chi tiết thao tác không quy định tiêu chuẩn cho tùy chọn, với chi tiết bất thường khác ảnh hưởng tới kết quả; - kết thử nghiệm thu được; - kết cuối thu được, đáp ứng yêu cầu độ lặp lại THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 6400 (ISO 707), Sữa sản phẩm sữa – Hướng dẫn lấy mẫu [2] TCVN 6910-1 (ISO 5725-1), Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo – Phần 1: Nguyên tắc định nghĩa chung [3] TCVN 6910-2 (ISO 5725-2), Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo – Phần 2: Phương pháp xác định độ lặp lại độ tái lập phương pháp đo tiêu chuẩn [4] IDF 135, Milk and milk products – Precision characteristics of analytical methods – Outline of collaborative study procedure [5] International Dairy Federation Bull Int Dairy Fed., 306, 1995, pp 20-22 [6] ELLEN G De Ware(n)-Chemicus, 8, 1978, pp 220-226 [7] ITAMI T., EMA M., AMANO H and KAWASAKI H J Anal Tox., 15, 1991, pp 119-122 ... lại độ tái lập thu từ kết phép thử liên phòng thử nghiệm tiến hành theo TCVN 691 0-1 (ISO 572 5-1 ) TCVN 691 0-2 (ISO 572 5-2 ) Chi tiết độ chụm độ xác phương pháp sử dụng phép thử liên phòng thử nghiệm... rõ: - thông tin cần thiết việc nhận biết đầy đủ mẫu thử; - phương pháp lấy mẫu sử dụng, biết; - phương pháp thử sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này; - chi tiết thao tác không quy định tiêu chuẩn. .. quả; - kết thử nghiệm thu được; - kết cuối thu được, đáp ứng yêu cầu độ lặp lại THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 6400 (ISO 707), Sữa sản phẩm sữa – Hướng dẫn lấy mẫu [2] TCVN 691 0-1 (ISO 572 5-1 ),