Nghiên cứu thực trạng, một số yếu tố liên quan đến nhiễm giun lươn strongyloides spp và kết quả điều trị bằng ivermectin tại huyện đức hoà, tỉnh long an (2017 – 2018)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN SỐT RÉT – KÝ SINH TRÙNG – CÔN TRÙNG TRUNG ƯƠNG LÊ ĐỨC VINH NGHIÊN CỨU THỰC TRẠNG, MỘT SỐ YẾU TỐ LIÊN QUAN ĐẾN NHIỄM GIUN LƯƠN Strongyloides spp KẾT QUẢ ĐIỀU TRỊ BẰNG IVERMECTIN TẠI HUYỆN ĐỨC HOÀ, TỈNH LONG AN (2017 – 2018) Chuyên ngành: Ký Sinh Trùng Y Học Mã số: 62.72.01.16 Cán hướng dẫn khoa học PGS TS TRẦN THỊ HỒNG PGS TS VŨ VĂN DU Hà Nội, 2019 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan Kết luận án công trình nghiên cứu riêng tơi, tất kết số liệu luận án thân thực suốt thời gian nghiên cứu Các số liệu trình bày luận án trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu khác Tác giả luận án Lê Đức Vinh LỜI CẢM ƠN Lời xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tri ân tới PGS TS Trần Thị Hồng, PGS.TS Vũ Văn Du người Thầy hướng dẫn khoa học, tận tình giúp đỡ, động viên truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu nghiên cứu khoa học để tơi hồn thành luận án Tôi xin chân thành cảm ơn đến Lãnh đạo Viện Sốt rét – KST – CT Trung ương, PGS.TS Cao Bá Lợi, phòng khoa học đào tạo, thầy giáo khoa, phịng liên quan Viện tạo điều kiện tốt giúp đỡ tơi q trình học tập nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn Ban giám đốc, Anh chị em đồng nghiệp Trung tâm y tế huyện Đức Hịa, tỉnh Long An Bộ mơn Ký sinh y học Trường đại học y khoa Phạm Ngọc Thạch tạo điều kiện, giúp đỡ cho trình thu thập liệu, mẫu phân, máu, xét nghiệm điều trị cho người dân huyện Đức Hịa Tơi xin chân thành cảm ơn Q Thầy Cơ GS, PGS, TS hội đồng khoa học chấm luận án đóng góp nhiều ý kiến quý báu để tơi có thêm kiến thức hồn thiện luận án đạt chất lượng tốt Xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới người thân gia đình, anh chị em, đồng nghiệp, người ln ủng hộ động viên tơi suốt q trình học tập giúp tơi vượt qua khó khăn để hoàn thành luận án tốt nghiệp Hà nội tháng, … năm … Tác giả luận án Lê Đức Vinh DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt AIDS ALB AT ATGL BCAT Bp BYT CDC cox1 Tên tiếng Anh đầy đủ Acquired immunodeficiency syndrome albendazol Base pair Centers for Disease Control and Prevention Cytochrome c oxydase subunit CS CT CT – scan DNA dNTP ELISA Computed Tomography scan Deoxyribonucleic acid Deoxynucleoside triphosphates HIV HTLV – HVS ITS IVM Thuốc albendazol Ấu trùng ấu trùng giun lươn Bạch cầu toan Cặp base chuỗi ADN Bộ Y tế Trung tâm kiểm sốt phịng ngừa bệnh tật Một gen thuộc hệ gen ty thể Chụp cắt lớp điện tốn Axít deoxyribonucleic Đơn vị cấu tạo nên ADN Đại học y khoa Ethylene diamin tetraacetic acid Enzyme linked immunosorbent assay Genbank GPIA Hội chứng suy giảm miễn dịch mắc phải Cộng Côn trùng ĐHYK EDTA Nghĩa/Tên tiếng Việt Một loại chất chống đông máu Phản ứng miễn dịch gắn men Ngân hàng gen Gelatin particle indirect agglutination Human Immunodeficiency Virus Human T-cell lymphotropic virus type Internal Transcribed Spacer ivermectin Ngưng kết hạt gelatin gián tiếp Virus gây suy giảm miễn dịch người Virus hướng ung thư tế bào lym T típ Hợp vệ sinh Đoạn giao gen Thuốc ivermectin Chữ viết tắt KAP Tên tiếng Anh đầy đủ Knowledge, Attitude and Practice KHV KST KTC 95% LAMP Loop Mediated Isothermal Amplification LĐTBXH LIPA LIPS Multiplex PCR NCBI nested – PCR NTU PCR Realtime PCR (RTPCR) RFLP RNA SHPT TBZ THPT Tp.HCM WHO Luciferase immunoprecipitation assay Luciferase immunoprecipitation system Multiplex Polymerase Chain Reaction National Center for Biotechnology Information Nested Polymerase Chain Reaction Novatech unit Polymerase Chain Reaction Nghĩa/Tên tiếng Việt Kiến thức – thái độ – hành vi Kính hiển vi Ký sinh trùng Khoảng tin cậy 95% Kỹ thuật khuếch đại đẳng nhiệt ADN Lao động thương binh xã hội Phản ứng ngưng kết miễn dịch Hệ thống ngưng kết miễn dịch Phản ứng chuỗi polymerase đa mồi Trung tâm tin -sinh học Quốc gia Phản ứng chuỗi polymerase lồng Đơn vị tính Novatech Phản ứng chuỗi polymerase Realtime Polymerase Chain Phản ứng chuỗi polymerase Reaction thời gian thực Restriction fragment length polymorphism Ribonucleic acid thiabendazol World Health organization Kỹ thuật xác định đa hình độ dài đoạn giới hạn Axít ribonucleic Sinh học phân tử Thuốc thiabendazol Trung học phổ thơng Thành phố Hồ Chí Minh Tổ chức Y tế Thế giới (TCYTTG) MỤC LỤC Danh mục bảng Danh mục hình ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN 1.1 Lịch sử phát giun lươn 1.2 Tác nhân gây bệnh 1.2.1 Hình thái học 1.2.2 Khả sống sót ấu trùng giun lươn ngồi mơi trường 1.3 Chu kỳ phát triển sinh học giun lươn 1.3.1 Chu trình sinh học 1.3.2 Chu trình tự nhiễm (mạn tính) 1.4 Đặc điểm dịch tễ học 10 1.4.1 Tình hình nhiễm giun lươn giới 11 1.4.2 Tình hình nhiễm giun lươn Việt Nam 13 1.4.3 Các yếu tố liên quan đến nhiễm giun lươn 15 1.5 Bệnh học giun lươn 16 1.5.1 Bệnh giun lươn mạn tính, không biến chứng 17 1.5.2 Bệnh nặng, có biến chứng 19 1.5.3 Bệnh đa quan địa suy giảm miễn dịch 19 1.5.4 Hội chứng tăng nhiễm (hyperinfection syndrom) 20 1.5.5 Bệnh giun lươn lan tỏa 21 1.5.6 Biến chứng tử vong bệnh nhiễm giun lươn S stercoralis 22 1.6 Chẩn đoán bệnh nhiễm giun lươn 23 1.6.1 Định nghĩa ca bệnh nhiễm giun lươn S stercoralis 23 1.6.2 Chẩn đoán lâm sàng 24 1.6.3 Xét nghiệm chẩn đoán trực tiếp tìm KST 24 1.6.4 Phương pháp chẩn đoán miễn dịch học 27 1.6.5 Chẩn đoán sinh học phân tử 28 1.7 Điều trị dự phòng 30 1.7.1 Các thuốc điều trị giun lươn 30 1.7.2 Điều trị ca bệnh 32 1.7.3 Phòng bệnh giáo dục sức khỏe 33 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 Mục tiêu 1: Xác định tình trạng số yếu tố liên quan đến nhiễm giun lươn Strongyloides spp người dân huyện Đức Hoà, tỉnh Long An năm 2017 2018 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 34 2.1.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 34 2.1.3 Thiết kế nghiên cứu 36 2.1.4 Nội dung nghiên cứu 38 2.1.5 Các kỹ thuật sử dụng nghiên cứu 38 2.1.6 Các số đánh giá 41 2.1.7 Xử lý số liệu 43 2.2 Mục tiêu 2: Xác định loài giun lươn gây bệnh người hình thái học SHPT 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 43 2.2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 44 2.2.3 Thiết kế nghiên cứu 44 2.2.4 Nội dung nghiên cứu 45 2.2.5 Các kỹ thuật sử dụng nghiên cứu 45 2.2.6 Các số đánh giá 51 2.2.7 Xử lý số liệu 52 2.3 Mục tiêu 3: Mô tả triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng đánh giá kết điều trị ca bệnh Strongyloides spp Ivermectin liều 2.3.1 Đối tượng nghiên cứu 52 2.3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 53 2.3.3 Thiết kế nghiên cứu 53 2.3.4 Nội dung nghiên cứu 54 2.3.5 Các kỹ thuật sử dụng nghiên cứu 54 2.3.6 Các số đánh giá 56 2.3.7 Xử lý số liệu 60 2.4 Sai số biện pháp hạn chế sai số 60 2.5 Đạo đức nghiên cứu 60 Chương KẾTQUẢ NGHIÊN CỨU 63 3.1 Xác định tỉ lệ nhiễm số yếu tố liên quan đến nhiễm giun lươn Strongyloides spp người dân huyện Đức Hoà, tỉnh Long An 3.1.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu 63 3.1.2 Thực trạng nhiễm giun lươn tồn huyện Đức Hịa 67 3.1.3 Một số yếu tố liên quan đến nhiễm giun lươn 74 3.2 Xác định loài giun lươn Strongyloides gây bệnh 78 3.2.1 Khảo sát giun lươn Strongyloides gây bệnh hình thái học 78 3.2.2 Kết realtime PCR định loài Strongyloides spp 83 3.2.3 Kết PCR lồng giải trình tự gen 86 3.2.4 Cây phân hệ loài giun lươn xác định nghiên cứu 90 3.3 Mô tả triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng đánh giá kết điều trị ca bệnh Strongyloides spp với Ivermectin liều 3.3.1 Các triệu chứng lâm sàng 92 3.3.2 Các kết cận lâm sàng 93 3.3.3 Hiệu điều trị ivermectin liều 94 Chương BÀN LUẬN 97 4.1 Xác định tỉ lệ nhiễm số yếu tố liên quan đến nhiễm giun lươn Strongyloides spp người dân huyện Đức Hoà, tỉnh Long An năm 2017 - 2018 4.1.1 Đặc điểm mẫu nghiên cứu 97 4.1.2 Thực trạng nhiễm giun lươn toàn huyện Đức Hòa 99 4.1.3 Một số yếu tố liên quan đến nhiễm giun lươn 103 4.2 Xác định loài giun lươn Strongyloides gây bệnh 109 4.2.1 Khảo sát giun lươn Strongyloides gây bệnh hình thái học 109 4.2.2 Kết realtime PCR định loài Strongyloides spp 114 4.2.3 Kết PCR lồng giải trình tự gen 116 4.3 Mô tả triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng đánh giá kết điều trị ca bệnh Strongyloides spp với Ivermectin liều 4.3.1 Các triệu chứng lâm sàng 119 4.3.2 Các kết cận lâm sàng 124 4.3.3 Hiệu điều trị ivermectin liều 128 4.3.4 Tác dụng không mong muốn thuốc ivermectin 131 KẾT LUẬN 133 KIẾN NGHỊ 135 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN 136 TÀI LIỆU THAM KHẢO Phụ lục 1: Kỹ thuật cấy phân sinh học phân tử realtime PCR i Phụ lục 2: Bảng câu hỏi vấn xiii Phụ lục 3: Một số kết xét nghiệm SHPT .xix Phụ lục 4: Danh sách bệnh nhân nhiễm giun xxi Phụ lục 5: Một số hình ảnh thực nghiên cứu xxiii Phụ lục 6: Bảng cam kết đồng thuận tham gia nghiên cứu xxv Bảng số DANH MỤC CÁC BẢNG Tên Bảng Trang Bảng 2.1 Các biến số sử dụng nghiên cứu cho mục tiêu 41 Bảng 2.2 Công thức phản ứng realtime PCR 48 Bảng 2.3 Công thức phản ứng PCR lồng bước 50 Bảng 2.4 Các biến số đánh giá hình thái SHPT 51 Bảng 2.5 Các biến số lâm sàng, cận lâm sàng điều trị 56 Bảng 2.6 Định nghĩa số, biến số phương pháp thu thập 57 Bảng 3.1 Phân bố giới tính độ tuổi điểm nghiên cứu 64 Bảng 3.2 Phân bố trình độ học vấn tình trạng kinh tế 65 Bảng 3.3 Phân bố nghề nghiệp tình trạng sử dụng hố xí 66 Bảng 3.4 Tỷ lệ nhiễm giun lươn xã/thị trấn (n = 1.190) 67 Bảng 3.5 Phân bố giới tính bệnh nhân nhiễm giun lươn 68 Bảng 3.6 Phân bố nhóm tuổi bệnh nhân nhiễm giun lươn 69 Bảng 3.7 Phân bố trình độ học vấn bệnh nhân nhiễm giun lươn 70 Bảng 3.8 Phân bố tình trạng kinh tế bệnh nhân nhiễm giun lươn 71 Bảng 3.9 Phân bố nghề nghiệp bệnh nhân nhiễm giun lươn 72 Bảng 3.10 Phân bố tình trạng sử dụng hố xí bệnh nhân nhiễm giun lươn 73 Bảng 3.11 Liên quan nhiễm giun lươn với giới tính 74 Bảng 3.12 liên quan nhiễm giun lươn với nhóm tuổi 74 Bảng 3.13 Liên quan nhiễm giun lươn với trình độ học vấn 75 Bảng 3.14 Liên quan nhiễm giun lươn với tình trạng kinh tế 75 Bảng 3.15 Liên quan nhiễm giun lươn với nghề nông 76 Bảng 3.16 Liên quan nhiễm giun lươn với tình trạng sử dụng hố xí 76 Bảng 3.17 Liên quan nhiễm giun lươn với thói quen TXĐ trực tiếp 77 Bảng 3.18 Phân tích đa biến xác định yếu tố liên quan 78 Bảng 3.19 Kết xét nghiệm phân lần chẩn đoán giun lươn (n = 79) 78 Bảng 3.20 Chỉ số hình thể ấu trùng giun lươn giai đoạn (n = 79) 80 Bảng 3.21 Chỉ số hình thể ấu trùng giun lươn giai đoạn (n = 79) 81 Bảng 3.22 Chỉ số hình thể giun lươn đực sống tự (n = 5) 82 Bảng 3.23 Chỉ số hình thể giun lươn sống tự (n = 3) 83 Bảng 3.24 Thành phần loài giun lươn xác định realtime PCR 84 Bảng 3.25 Chu kỳ ngưỡng xác định RT – PCR 84 Bảng 3.26 Kết so sánh trình tự 14 mẫu nghiên cứu với NCBI 87 Bảng 3.27 Hệ số tương đồng trình tự gen 10 mẫu AT S stercoralis 90 Bảng 3.28 Hệ số tương đồng trình tự gen mẫu AT S ratti 91 Bảng 3.29 Triệu chứng lâm sàng bệnh nhân nhiễm giun lươn (n = 79) 92 Bảng 3.30 Các triệu chứng lâm sàng nhiễm giun lươn (n = 79) 92 Bảng 3.31 Tỷ lệ bệnh nhân có tăng bạch cầu toan 93 Bảng 3.32 Kết ELISA bệnh nhân nhiễm giun lươn (n = 79) 94 Bảng 3.33 Mức độ thay đổi triệu chứng lâm sàng sau điều trị tuần 95 Bảng 3.34 Tỷ lệ ấu trùng sau điều trị (n = 79) 95 Bảng 3.35 Hiệu điều trị ivermectin (n = 57) 96 Bảng 3.36 Tỷ lệ tác dụng không mong muốn uống thuốc (n = 79) 96 ... liên quan đến nhiễm giun lươn Strongyloides spp kết điều trị ivermectin huyện Đức Hoà, tỉnh Long An, năm 2017 – 2018” Với mục tiêu Xác định tình trạng số yếu tố liên quan đến nhiễm giun lươn Strongyloides. .. Liên quan nhiễm giun lươn với tình trạng kinh tế 75 Bảng 3.15 Liên quan nhiễm giun lươn với nghề nông 76 Bảng 3.16 Liên quan nhiễm giun lươn với tình trạng sử dụng hố xí 76 Bảng 3.17 Liên quan. .. xí bệnh nhân nhiễm giun lươn 73 Bảng 3.11 Liên quan nhiễm giun lươn với giới tính 74 Bảng 3.12 liên quan nhiễm giun lươn với nhóm tuổi 74 Bảng 3.13 Liên quan nhiễm giun lươn với trình