Bài viết Khảo sát hoạt tính của hỗn hợp tinh dầu kháng nấm mốc độc có trong không khí có mục tiêu dò tìm hoạt tính kháng nấm mốc độc của hỗn hợp tinh dầu làm cơ sở cho việc tạo chế phẩm phun xịt phòng. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 Nghiên cứu Y học KHẢO SÁT HOẠT TÍNH CỦA HỖN HỢP TINH DẦU KHÁNG NẤM MỐC ĐỘC CĨ TRONG KHƠNG KHÍ Đỗ Thị Phương Xuân*, Phan Thị Thanh Thủy*, Lê Thị Ngọc Huệ* TĨM TẮT Mục tiêu: dò tìm hoạt tính kháng nấm mốc độc hỗn hợp tinh dầu làm sở cho việc tạo chế phẩm phun xịt phòng Phương pháp: thử hoạt tính kháng nấm phần bay tinh dầu theo mơ hình Kazuhiko Nakahara cộng sự(3, 4) Dùng phương pháp bàn cờ số FIC (Fractional Inhibitory Concentration) dò tìm hiệu lực phối hợp tinh dầu ức chế phát triển nấm Năm tinh dầu thử nghiệm (tinh dầu Quế, Màng tang, Sả chanh, Tràm, Tràm 97% cineol) chủng nấm mốc độc (A flavus, A fumigatus, A niger, Penicillium sp., Paeciolmyces sp., Rhizopus sp., Fusarium sp.) Kết quả: loại tinh dầu, phối hợp thành cặp hỗn hợp tinh dầu, cặp tinh dầu Màng tang (8 µl) – Quế (8 µl) cho kết phối hợp tích hỗn hợp tinh dầu giảm lần so với thể tích tinh dầu dùng riêng lẻ; hỗn hợp tinh dầu có tính kháng nấm tốt Cặp tinh dầu Sả (16 µl) - Quế (2 µl) tích hỗn hợp tinh dầu giảm 3,5 lần so với thể tích tinh dầu dùng riêng lẻ tính kháng nấm hỗn hợp tinh dầu tốt Kết luận: cặp hỗn hợp tinh dầu, cặp tinh dầu Màng tang (8 µl) – Quế (8 µl) cho kết phối hợp tốt Thể tích hỗn hợp tinh dầu giảm lần so với thể tích tinh dầu dùng riêng lẻ Từ khoá: tinh dầu, hỗn hợp tinh dầu, phần bay hơi, nấm mốc, hoạt tính kháng nấm mốc, phương pháp bàn cờ ABSTRACT RESEARCH ON THE ACTIVITIES OF ESSENTIAL OILS MIXTURES IN KILLING FUNGI IN THE AIR Do Thi Phuong Xuan, Phan Thi Thanh Thuy, Le Thi Ngoc Hue * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 16 - Supplement of No - 2012: 103 - 106 Objectives: To identify the anti fungi of essential oils mixtures, in order to make the house hold spraying product and fumigant Methods: the method of identifying the antifungal activities of volatile compounds from essential oils following the model of Kazuhiko Nakahara and fellow workers(3, 4) Using the chessboard method and FIC (Fractional Inhibitory Concentration) index to detect the effect of mixtures from mixing two essential oils inhibiting fungal growth Five essential oils (cinnamon, lemon grass, litsea cubeba, lemon eucalyptus 97% cineol, lemon eucalyptus) were tested on the seven fungal genera (A flavus, A fumigatus, A niger, Penicillium sp., Paeciolmyces sp., Rhizopus sp., Fusarium sp.) Results: From essential oils, eight pairs of essential oils were made Among them, the antifungi of the Litsea cubeba (8 µl) – Cinnamon (8 µl) mixtures were the best The volume of this mixture decreased times in comparison with using alone The Lemon grass (16 µl) - Cinamon (21 µl) mixture had the volume decreased 3.5 times in comparison with using alone The anti fungi of this mixture was good, too Conclusions: Among eight pairs of essential oils, the Litsea cubeba (8 µl) – Cinnamon (8 µl) mixture was Bộ mơn Vi Sinh-Ký Sinh, Khoa Dược, ĐHYD Tp Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: Ths Lê Thị Ngọc Huệ ĐT: 0906394895 Email: ngochue_l@yahoo.com Chuyên Đề Ký Sinh Trùng 103 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 the best Keywords: essential oil, essential oils mixture, volatile compounds, anti fungi, chessboard method ĐẶT VẤN ĐỀ Ngồi yếu tố khí thải từ nhà máy, khói xe, bụi…nấm mốc nguyên nhân gây ô nhiễm môi trường Tác hại chúng gây ảnh hưởng sức khoẻ mà kinh tế Khí hậu nóng ẩm nước ta điều kiện thuận lợi cho phát triển nấm mốc Thật vậy, qua cơng trình nghiên cứu báo cáo: mức độ nhiễm nấm mốc khơng khí ngồi trời (Pháp Vân- Hà Nội) bên nhà (Tp Hồ Chí Minh) cao(2 5) Do đó, để bảo vệ sức khỏe cộng đồng, việc loại bỏ nấm mốc bên nhà vấn đề cần thiết Hiện có nhiều loại tinh dầu (TD) diệt nấm, phối hợp tinh dầu để đạt hiệu cao ? Đó nội dung nghiên cứu đề tài ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nấm mốc thử nghiệm chủng nấm: Aspergillus flavus (A flavus), A fumigatus, A niger, Fusarium sp., Rhizopus sp., Paecilomyces sp., Penicillium sp ly trích từ mơi trường Phương pháp nghiên cứu(3, 4,6, 7): 2.1 Phương pháp thử hoạt tính kháng nấm mốc phần bay tinh dầu thực hộp nhựa tích 0,56 L (12,5 x x cm): - Gây nhiễm nấm: cho 10 µl huyền dịch nấm 10 CFU / ml vào đĩa thạch - Thời gian đọc kết quả: ủ 250C/ ngày, riêng Rhizopus sp ủ ngày - Cách đọc kết quả: xác định thể tích tinh dầu tối thiểu ức chế nấm, không thấy nấm mọc đĩa thạch - Cách tính kết quả: MID = vd (mg/L), MID V Đối tượng thử nghiệm (minimum inhibited Dose) Tinh dầu thử nghiệm tinh dầu thử nghiệm mua công ty thành phố kiểm định thành phần có tinh dầu (%) Trung Tâm Thuốc có nguồn gốc tự nhiên-Khoa Dược - ĐHYD Tp HCM, đặc điểm tóm tắt bảng sau: MID: lượng tinh dầu tối thiểu ức chế nấm mốc lít khơng khí (mg/ L) Bảng Hàm lượng thành phần chính, tỷ trọng tinh dầu thử nghiệm Thành phần hoạt chất Tỷ (%) trọng Quế (Q) Cinnamaldehyde 98,64% 1,0533 -citral 27,72%; -citral Sả chanh (S) 0,8937 29,74% TT d: tỉ trọng tinh dầu (g/ ml) V: thể tích hộp nhựa 0,56 L Phương pháp phối hợp tinh dầu(1) Dựa theo tỉ lệ phối hợp phương pháp bàn cờ: Tỉ lệ phối hợp TD Màng tang -citral 19.85%; -citral 17,9%; 0,8811 (MT) -citronellal 9,99% Tràm gió (T) Tràm 97% cineol (T97%) 104 v: thể tích tinh dầu tối thiểu ức chế nấm (ml) 1,8-cineol 63,16% 0,9099 1,8-cineol 96,94% 0,9177 Chất B (MID) 1/8 1/4 1/2 số Concentration): FIC ≤ 0,5 Hiệp lực 1/8 Hiệp lực Hiệp lực Cộng lực FIC Chất A (MID) 1/4 1/2 Hiệp lực Cộng lực Hiệp lực Cộng lực Cộng lực Cộng lực (Fractional 0,5 < FIC ≤ Cộng lực Inhibitory 1< FIC Đối kháng Dò tìm tỉ lệ phối hợp cho tác dụng cộng lực hiệp lực tinh dầu chủng nấm Chuyên Đề Ký Sinh Trùng Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 Nghiên cứu Y học KẾT QUẢ Hoạt tính kháng nấm mốc tinh dầu Bảng Nồng độ tối thiểu ức chế nấm mốc tinh dầu thử nghiệm (MID mg/L) TT Tinh dầu Sả chanh Quế Màng tang Tràm 97 % Tràm gió A niger 26 30 25 104 208 A flavus 104 60 100 104 208 A fumi 13 60 50 104 208 Hoạt tính kháng nấm mốc tinh dầu xếp theo thứ tự giảm dần từ 1-5 Trong đó, TD Sả chanh TD Quế có MID thấp hay có hoạt tính kháng nấm mốc mạnh, kết phù hợp với cơng trình báo cáo(7) Hoạt tính kháng nấm mốc hỗn hợp tinh dầu Qua thực nghiệm cặp TD phối hợp, cặp thực tỉ lệ phối hợp Ngoài tỉ lệ phối hợp đó, tiếp tục dò tìm tỉ lệ phối hợp khác nhằm mục đích chọn cặp TD có hoạt tính kháng nấm cộng lực hay hiệp lực chủng nấm với thể tích TD nhỏ Bảng Vhỗn hợp tinh dầu ức chế chủng nấm TD phối hợp MT-T MT-Q MT-T97% S-T S-Q S-T97% Vhỗn hợpTD (VTD1 - VTD2) (l/0,56L kk) 48 l (32 l MT - 16l T) 16 l (8 l MT – l Q) 20 l (16 l MT – l Q) 34 l (32 l MT – l Q) V giảm 40 l (32 l MT – l T97%) lần lần 3,5 lần 64 l (32 l S – 32 l T) 18 l (16 l S – l Q) 68 l (4 l S – 64 l T97%) lần lần lần lần Q-T 40 l (8 l Q – 32 l T) 66 l (2 l Q – 64 l T) lần 6,4 lần 3,8 lần T 97% - Q Tổng 34 l (32 l T97% – l Q) 3,7 lần Thể tích TD giảm tính cách Vhỗn hợpTD so với VTD lớn (của TD phối hợp) để ức chế toàn chủng nấm mốc thử nghiệm dùng riêng lẻ TD Quế cho phối hợp tốt với TD Màng tang, Tràm Chuyên Đề Ký Sinh Trùng MID (mg/L) Peni Paecilo 13 26 60 120 25 100 104 104 104 416 Rhizopus 13 120 50 104 208 Fusarium 26 30 50 208 208 Kết phối hợp rút 11 cặp TD có hoạt tính kháng nấm tốt với Vhỗn hợpTD thấp so với VTD dùng riêng lẻ Trong có cặp TD cho Vhỗn hợpTD thấp cặp tinh dầu MT-Q [16 l (8 l MT – l Q)], cặp tinh dầu S-Q [18 l (16 l S – l Q)] Tinh dầu Quế cho hoạt tính kháng nấm tốt mùi hăng Do đó, nhờ vào phối hợp TD giúp giảm thiểu lượng TD sử dụng KẾT LUẬN Trong cặp tinh dầu phối hợp, cặp tinh dầu Màng tang (8 µl) – Quế (8 µl) hỗn hợp tinh dầu tốt Thể tích phối hợp thấp mà hiệu kháng nấm cao ĐỀ NGHỊ Tiếp tục nghiên cứu đặc tính kháng khuẩn, độc tính hỗn hợp tinh dầu nhằm tạo chế phẩm xông, phun xịt phòng TÀI LIỆU THAM KHẢO Bruton LL, Lazo JS, Parker KL(2006) Goodman and Gilman’s The pharmacological Basic of Therapeutics, 11th edition, pp 11021104 http://vietbao.vn/Khoa-hoc/Ha-Noi-Khu-Phap-Van-o-nhiemcao-nhat/20683171/197/ Lê Thị Ngọc Huệ, Phan Thị Thanh Thuỷ (2008) Ổn định phương pháp phát hoạt tính kháng nấm mốc phần bay tinh dầu Khoá luận văn tốt nghiệp Dược sĩ Đại học Y Dược- Tp Hồ Chí Minh Nakahara K, Alzoreky NS (2004) Growth-inhibitory activity against maize weevil and the antifungal activities of volatile compounds from citronella grass JARQ (Japan International research center for Agricultural Sciences), 14 Nguyễn Văn Thanh, Lê Thị Ngọc Huệ (2010) Khảo sát mức độ nhiễm nấm mốc phòng làm việc tính kháng nấm mốc độc số tinh dầu Đề tài sở Khoa học Công nghệ Thành Phố Hồ Chí Minh Rodriguez-Tudela JL (2003) Interlaboratory Evaluation of Hematocytometer Method of Inoculum Preparation for Testing 105 Nghiên cứu Y học 106 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 for Testing Antifungal Susceptibilities of Filametous Fungi Journal Clinical Microbiology, 41(11): 5236-5237 Shigeharu Inouye (2001) In-vitro and in-vivo anti-Trichophyton activity of essential oils by vapuor contact Mycoces, 44 (3-4): 99107 Chuyên Đề Ký Sinh Trùng ... 208 Hoạt tính kháng nấm mốc tinh dầu xếp theo thứ tự giảm dần từ 1-5 Trong đó, TD Sả chanh TD Quế có MID thấp hay có hoạt tính kháng nấm mốc mạnh, kết phù hợp với cơng trình báo cáo(7) Hoạt tính. .. Kết phối hợp rút 11 cặp TD có hoạt tính kháng nấm tốt với Vhỗn hợpTD thấp so với VTD dùng riêng lẻ Trong có cặp TD cho Vhỗn hợpTD thấp cặp tinh dầu MT-Q [16 l (8 l MT – l Q)], cặp tinh dầu S-Q... tính kháng nấm mốc hỗn hợp tinh dầu Qua thực nghiệm cặp TD phối hợp, cặp thực tỉ lệ phối hợp Ngoài tỉ lệ phối hợp đó, tiếp tục dò tìm tỉ lệ phối hợp khác nhằm mục đích chọn cặp TD có hoạt tính kháng