Bài viết Khảo sát hoạt tính của hỗn hợp tinh dầu kháng nấm mốc độc có trong không khí có mục tiêu dò tìm hoạt tính kháng nấm mốc độc của hỗn hợp tinh dầu làm cơ sở cho việc tạo chế phẩm phun xịt phòng. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết.
Trang 1Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ bản của Số 1 * 2012 Nghiên cứu Y học
KHẢO SÁT HOẠT TÍNH CỦA HỖN HỢP TINH DẦU KHÁNG NẤM MỐC ĐỘC CÓ TRONG KHÔNG KHÍ
Đỗ Thị Phương Xuân*, Phan Thị Thanh Thủy * , Lê Thị Ngọc Huệ *
TÓM TẮT
Mục tiêu: dò tìm hoạt tính kháng nấm mốc độc của hỗn hợp tinh dầu làm cơ sở cho việc tạo chế phẩm phun xịt phòng
Phương pháp: thử hoạt tính kháng nấm của phần bay hơi tinh dầu theo mô hình của Kazuhiko Nakahara và
cộng sự ( 3 , 4 ) Dùng phương pháp bàn cờ và chỉ số FIC (Fractional Inhibitory Concentration) dò tìm hiệu lực của
sự phối hợp 2 tinh dầu ức chế sự phát triển của nấm Năm tinh dầu được thử nghiệm (tinh dầu Quế, Màng tang, Sả chanh, Tràm, Tràm 97% cineol) trên 7 chủng nấm mốc độc (A flavus, A fumigatus, A niger, Penicillium sp., Paeciolmyces sp., Rhizopus sp., Fusarium sp.)
Kết quả: trong 5 loại tinh dầu, phối hợp thành 8 cặp hỗn hợp tinh dầu, cặp tinh dầu Màng tang (8 µl) –
Quế (8 µl) cho kết quả phối hợp có thể tích hỗn hợp tinh dầu giảm 4 lần so với thể tích tinh dầu khi dùng riêng lẻ; hỗn hợp tinh dầu này có tính kháng nấm tốt nhất Cặp tinh dầu Sả (16 µl ) - Quế (2 µl) có thể tích hỗn hợp tinh
dầu giảm 3,5 lần so với thể tích tinh dầu khi dùng riêng lẻ và tính kháng nấm của hỗn hợp tinh dầu này cũng tốt Kết luận: trong 8 cặp hỗn hợp tinh dầu, cặp tinh dầu Màng tang (8 µl) – Quế (8 µl) cho kết quả phối hợp tốt nhất Thể tích hỗn hợp tinh dầu giảm 4 lần so với thể tích tinh dầu khi dùng riêng lẻ
Từ khoá: tinh dầu, hỗn hợp tinh dầu, phần bay hơi, nấm mốc, hoạt tính kháng nấm mốc, phương pháp bàn
cờ
ABSTRACT
RESEARCH ON THE ACTIVITIES OF ESSENTIAL OILS MIXTURES IN KILLING FUNGI IN THE AIR
Do Thi Phuong Xuan, Phan Thi Thanh Thuy, Le Thi Ngoc Hue
* Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 16 - Supplement of No 1 - 2012: 103 - 106
Objectives: To identify the anti fungi of essential oils mixtures, in order to make the house hold spraying product and fumigant
Methods: the method of identifying the antifungal activities of volatile compounds from essential oils
following the model of Kazuhiko Nakahara and fellow workers ( 3 , 4 ) Using the chessboard method and FIC (Fractional Inhibitory Concentration) index to detect the effect of mixtures from mixing two essential oils inhibiting fungal growth Five essential oils (cinnamon, lemon grass, litsea cubeba, lemon eucalyptus 97% cineol, lemon eucalyptus) were tested on the seven fungal genera (A flavus, A fumigatus, A niger, Penicillium sp., Paeciolmyces sp., Rhizopus sp., Fusarium sp.)
Results: From 5 essential oils, eight pairs of essential oils were made Among them, the antifungi of the
Litsea cubeba (8 µl) – Cinnamon (8 µl) mixtures were the best The volume of this mixture decreased 4 times in comparison with using alone The Lemon grass (16 µl) - Cinamon (21 µl) mixture had the volume decreased 3.5
times in comparison with using alone The anti fungi of this mixture was good, too
Conclusions: Among eight pairs of 5 essential oils, the Litsea cubeba (8 µl) – Cinnamon (8 µl) mixture was
Trang 2Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ bản của Số 1 * 2012
the best
Keywords: essential oil, essential oils mixture, volatile compounds, anti fungi, chessboard method
ĐẶT VẤN ĐỀ
Ngoài các yếu tố khí thải từ các nhà máy,
khói xe, bụi…nấm mốc cũng là một trong
những nguyên nhân gây ô nhiễm môi trường
Tác hại của chúng không những gây ảnh hưởng
về sức khoẻ mà còn về kinh tế Khí hậu nóng ẩm
của nước ta là điều kiện thuận lợi cho sự phát
triển của nấm mốc Thật vậy, qua các công trình
nghiên cứu báo cáo: mức độ nhiễm nấm mốc
trong không khí ngoài trời (Pháp Vân- Hà Nội)
và bên trong nhà (Tp Hồ Chí Minh) rất cao(25)
Do đó, để bảo vệ sức khỏe cộng đồng, việc loại
bỏ nấm mốc bên trong nhà ở là vấn đề cần thiết
Hiện nay có nhiều loại tinh dầu (TD) diệt
nấm, vậy phối hợp các tinh dầu này như thế nào
để đạt hiệu quả cao nhất ? Đó là nội dung
nghiên cứu của đề tài này
ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Đối tượng thử nghiệm
Tinh dầu thử nghiệm
5 tinh dầu thử nghiệm mua tại các công ty ở
thành phố và được kiểm định thành phần có
trong tinh dầu (%) bởi Trung Tâm Thuốc có
nguồn gốc tự nhiên-Khoa Dược - ĐHYD Tp
HCM, các đặc điểm được tóm tắt trong bảng
sau:
Bảng 1 Hàm lượng thành phần chính, tỷ trọng của
5 tinh dầu thử nghiệm
(%)
Tỷ trọng
1 Quế (Q) Cinnamaldehyde 98,64% 1,0533
2 Sả chanh (S) -citral 27,72%; -citral
3 Màng tang
(MT)
-citral 19.85%; -citral 17,9%;
-citronellal 9,99% 0,8811
4 Tràm gió (T) 1,8-cineol 63,16% 0,9099
5
Tràm 97%
cineol
(T97%)
Nấm mốc thử nghiệm
7 chủng nấm: Aspergillus flavus (A flavus), A fumigatus, A niger, Fusarium sp., Rhizopus sp., Paecilomyces sp., Penicillium sp ly trích từ môi
trường
Phương pháp nghiên cứu( 3 , 4 , 6 , 7):
2.1 Phương pháp thử hoạt tính kháng nấm mốc của phần bay hơi tinh dầu thực hiện trong
hộp nhựa có thể tích 0,56 L (12,5 x 9 x 5 cm):
- Gây nhiễm nấm: cho 10 µl huyền dịch nấm
106 CFU / ml vào đĩa thạch
- Thời gian đọc kết quả: ủ 250C/ 2 ngày, riêng
Rhizopus sp ủ 1 ngày
- Cách đọc kết quả: xác định thể tích tinh dầu tối thiểu ức chế nấm, không thấy nấm mọc trên đĩa thạch
- Cách tính kết quả: MID =
V
vd (mg/L), MID (minimum inhibited Dose)
MID: lượng tinh dầu tối thiểu ức chế nấm mốc trong 1 lít không khí (mg/ L)
v: thể tích tinh dầu tối thiểu ức chế nấm (ml) d: tỉ trọng của tinh dầu (g/ ml)
V: thể tích hộp nhựa 0,56 L
Phương pháp phối hợp tinh dầu ( 1 )
Dựa theo tỉ lệ phối hợp của phương pháp bàn cờ:
Chất B (MID)
1/8 Hiệp lực Hiệp lực Cộng lực 1/4 Hiệp lực Hiệp lực Cộng lực 1/2 Cộng lực Cộng lực Cộng lực
và chỉ số FIC (Fractional Inhibitory Concentration):
FIC ≤ 0,5 0,5 < FIC ≤ 1 1< FIC
Dò tìm tỉ lệ phối hợp cho tác dụng cộng lực
và hiệp lực của 2 tinh dầu trên 7 chủng nấm
Trang 3Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ bản của Số 1 * 2012 Nghiên cứu Y học
KẾT QUẢ
Hoạt tính kháng nấm mốc của tinh dầu
Bảng 2 Nồng độ tối thiểu ức chế nấm mốc của 5 tinh dầu thử nghiệm (MID mg/L)
Hoạt tính kháng nấm mốc của tinh dầu được
xếp theo thứ tự giảm dần từ 1-5 Trong đó, TD
Sả chanh và TD Quế có MID thấp hay có hoạt
tính kháng nấm mốc mạnh, kết quả này cũng
phù hợp với công trình đã báo cáo(7)
Hoạt tính kháng nấm mốc của hỗn hợp tinh
dầu
Qua thực nghiệm của 8 cặp TD phối hợp,
mỗi cặp thực hiện trên 9 tỉ lệ phối hợp Ngoài 9
tỉ lệ phối hợp đó, tiếp tục dò tìm các tỉ lệ phối
hợp khác nhằm mục đích chọn cặp TD có hoạt
tính kháng nấm cộng lực hay hiệp lực trên 7
chủng nấm với thể tích TD nhỏ nhất
Bảng 3 V hỗn hợp tinh dầu ức chế 7 chủng nấm
(l/0,56L kk)
V giảm
MT-T 48 l (32 l MT - 16l T) 5 lần
20 l (16 l MT – 4 l Q)
34 l (32 l MT – 2 l Q)
4 lần
3 lần
2 lần MT-T97% 40 l (32 l MT – 8 l T97%) 3 lần
S-T 64 l (32 l S – 32 l T) 4 lần
S-T97% 68 l (4 l S – 64 l T97%) 2 lần
66 l (2 l Q – 64 l T)
6,4 lần 3,8 lần
Tổng
Thể tích TD giảm được tính bằng cách Vhỗn
hợpTD so với VTD lớn nhất (của một trong 2 TD
trong phối hợp) để ức chế toàn bộ 7 chủng nấm
mốc thử nghiệm khi dùng riêng lẻ
Kết quả phối hợp rút ra 11 cặp TD có hoạt tính kháng nấm tốt với Vhỗn hợpTD thấp hơn so với VTD khi dùng riêng lẻ Trong đó có các cặp
TD cho Vhỗn hợpTD rất thấp như cặp tinh dầu MT-Q [16 l (8 l MT – 8 l Q)], cặp tinh dầu S-Q [18 l (16 l S – 2 l Q)] Tinh dầu Quế cho hoạt tính kháng nấm tốt nhưng mùi hăng Do
đó, nhờ vào sự phối hợp TD đã giúp giảm thiểu lượng TD sử dụng
KẾT LUẬN
Trong 8 cặp tinh dầu phối hợp, cặp tinh dầu Màng tang (8 µl) – Quế (8 µl) là hỗn hợp tinh dầu tốt nhất Thể tích phối hợp thấp mà hiệu quả kháng nấm cao
ĐỀ NGHỊ
Tiếp tục nghiên cứu các đặc tính kháng khuẩn, độc tính của hỗn hợp tinh dầu này nhằm tạo chế phẩm xông, phun xịt phòng
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1 Bruton LL, Lazo JS, Parker KL(2006) Goodman and Gilman’s The pharmacological Basic of Therapeutics, 11 th edition, pp
1102-1104
2 http://vietbao.vn/Khoa-hoc/Ha-Noi-Khu-Phap-Van-o-nhiem-cao-nhat/20683171/197/
3 Lê Thị Ngọc Huệ, Phan Thị Thanh Thuỷ (2008) Ổn định phương pháp và phát hiện hoạt tính kháng nấm mốc của phần bay hơi tinh dầu Khoá luận văn tốt nghiệp Dược sĩ Đại học Y Dược- Tp Hồ Chí Minh
4 Nakahara K, Alzoreky NS (2004) Growth-inhibitory activity against maize weevil and the antifungal activities of volatile compounds from citronella grass JARQ (Japan International research center for Agricultural Sciences), 14
5 Nguyễn Văn Thanh, Lê Thị Ngọc Huệ (2010) Khảo sát mức độ nhiễm nấm mốc trong phòng làm việc và tính kháng nấm mốc
Trang 4Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ bản của Số 1 * 2012
for Testing Antifungal Susceptibilities of Filametous Fungi
Journal Clinical Microbiology, 41(11): 5236-5237
7 Shigeharu Inouye (2001) In-vitro and in-vivo anti-Trichophyton
activity of essential oils by vapuor contact Mycoces, 44 (3-4):
99-107