Trị số điện di lipoprotein huyết tương ở người bình thường Việt Nam

Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu nhằm xây dựng trị số bình thường của các thành phần phần trăm lipoprotein huyết tương bằng điện di trên cellulose acetate nhằm làm cơ sở cho việc phân loại rối loạn lipid, lipoprotein một cách đầy đủ theo Frederickson.

TRỊ SỐ ĐIỆN DI LIPOPROTEIN HUYẾT TƯƠNG Ở NGƯỜI BÌNH THƯỜNG VIỆT NAM Phan Thị Danh* TÓM TẮT Mục tiêu: Xây dựng trị số bình thường thành phần phần trăm lipoprotein huyết tương điện di cellulose acetate nhằm làm sở cho việc phân loại rối loạn lipid, lipoprotein cách đầy đủ theo Frederickson Phương pháp nghiên cứu: Tiền cứu, mô tả cắt ngang 77 người bình thường Việt Nam khơng có rối loạn lipid, 43 nam 24 nữ, tuổi từ 23 đến 68 Khảo sát từ tháng 08/20005 – 10/2006 bệnh viện Chợ Rẫy, TpHCM Kết quả: Các thành phần phần trăm lipoprotein tuân theo quy luật phân phối chuẩn Thành phần Alpha-LP 32,8 ± 7,7%; prebeta-LP: 22,6 ± 8,1% beta-LP: 44,2 ± 7,0% Khơng có khác biệt thành phần phần trăm lipoprotein theo tuổi giới Kết luận: Alpha-LP 32,8 ± 7,7%; prebeta-LP: 22,6 ± 8,1% beta-LP: 44,2 ± 7,0% Thành phần alpha-LP không khác biệt so với người Châu Âu, thành phần prebeta-LP cao beta-LP thấp so với người Châu Âu Summary NORMAL VALUES OF PLASMA LIPOPROTEINS BY ELECTROPHORESIS ON CELLULOSE ACETATE IN HEALTHY VIETNAMESES Phan Thi Danh * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 13 - Supplement of No - 2009: 227 - 231 Object: We conducted a study to establish normal lipoprotein values in healthy VietNamese to generate a reference standard set for identifying and fully classifying dyslipidemia and dyslipoprotein by Fredrickson Method: Descriptive - cross sectional – prospective study was conducted on 77 Vietnamese healthy volunteers (34 males and 43 females), aged from 23 to 68 Results: Percentages of lipoproteins by Electrophoresis have a normal distribution, alpha-LP 32.8 ± 7.7%; prebeta-LP: 22.6 ± 8.1% and beta-LP: 44.2 ± 7.0% There was insignificant difference about percentages of lipopriteins between groups of age and gender Conclusion: Alpha-LP 32.8 ± 7.7%; prebeta-LP: 22.6 ± 8.1 % and beta-LP: 44.2 ± 7.0% Where, percentage of alpha-LP was insignificant difference between VietNamese and the European, while percentages of prebetaLP was higher and beta-LP was lower than the European chống xơ vữa (anti-atherogen) làm gia tăng nguy ĐẶT VẤN ĐỀ xơ vữa động mạch (16,15) Để việc điều trị có Ảnh hưởng rối loạn lipid, lipoprotein hiệu rối loạn lipid, lipoprotein phải (LP) lên bệnh lý tim mạch chứng minh xác định phân loại, điều đòi hỏi qua nhiều nghiên cứu ngồi nước, việc phải có trị số bình thường lipid, lipoprotein tăng lipid, lipoprotein gây xơ vữa Trị số lipid người Việt Nam bình thường (atherogen) và/ giảm lipid, lipoprotein nghiên cứu(4,3,2,14), điều chưa đủ * Khoa Sinh Hóa, Bệnh viện Chợ Rẫy Chuyên Đề Nội Khoa để xác định phân loại rối loạn lipid, lipoprotein cách đầy đủ Hệ thống phân loại rối loạn lipid, lipoprotein Tổ Chức Y Tế Thế Giới (World Health Organization: WHO) công nhận từ năm 1972 bảng phân loại rối loạn lipid, lipoprotein Frederickson(14,15,10,7) dựa kết điện di lipoprotein siêu li tâm Ngoài trị số lipid, lipoprotein thay đổi theo tuổi, giới, dân tộc… Do cần thiết có trị số lipoprotein người Việt Nam bình thường Điện di lipoprotein huyết tương kỹ thuật đơn giản, kết nhanh, giá thành rẻ, phương tiện có sẵn, trị số điện di lipoprotein Miền Nam Việt Nam chưa công bố chúng tơi tiến hành xác định trị số thành phần lipoprotein huyết tương người Việt Nam bình thường ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Là người bình thường tham gia khám sức khỏe định kỳ bệnh viện Đại Học Y Dược (cơ sở 4) bệnh viện Chợ Rẫy từ tháng 8/ 2005 đến tháng 10/ 2006 BMI = (cân nặng (Kg))/ (chiều cao(m))2 BMI phân loại theo tiêu chuẩn WHO (1995) - Tỷ số vòng eo/ vòng hơng WHR (waist hip ratio) Béo bụng : nam có WHR > 0,9; nữ có WHR > 0,8 - Mẫu máu tiến hành thử xét nghiệm Các xét nghiệm thường quy chức gan, chức thận, thành phần lipid máu triglycerid (TG), cholesterol toàn phần (CT) HDL-C Điện di lipoprotein máy Genio (seri: SRE 187) sản xuất năm 2004 với thuốc thử hãng InterLab (Ý) Nơi thực hiện: Khoa Sinh Hóa Bệnh Viện Chợ Rẫy Phương pháp nghiên cứu Tiền cứu, quan sát - mơ tả, cắt ngang Phân tích kết Phần mềm thống kê SPSS for Window 13.0 Tiêu chuẩn chọn bệnh Tất người bình thường, khám lâm sàng kết cận lâm sàng không phát bệnh lý ảnh hưởng đến chuyển hóa lipid, lipoprotein đái tháo đường, bệnh lý tuyến giáp (cường giáp nhược giáp), bệnh lý gan (xơ gan, suy chức gan …), bệnh lý thận (hội chứng thận hư, suy thận mãn,…) Các đối tượng phải rối loạn lipid huyết KẾT QUẢ Tiêu chuẩn loại trừ Đang sử dụng thuốc ngừa thai, corticoid Lấy mẫu: Người tham gia nghiên cứu hướng dẫn nhịn đói qua đêm (> 12 không ăn), đến bệnh viện sau nghỉ ngơi hướng dẫn điền thông tin vào khai thác bệnh sử, đo huyết áp, chiều cao, cân nặng, vòng eo, vòng hơng, lấy mẫu máu khám lâm sàng, làm xét nghiệm cận lâm sàng khác (X-quang tim phổi, siêu âm,…) Từ tính - Chỉ số khối thể BMI (body mass index) HDL-c Chuyên Đề Nội Khoa Đặc điểm đối tượng nghiên cứu Nam (n = 34) Nữ (n = 43) n = 77 20 – 39 tuổi ≥ 40 tuổi 20 – 39 tuổi ≥ 40 tuổi (n = 19) (n = 15) (n = 21) (n = 22) BMI 21,47 (1,9) 21,61(1,4) 22,83 (2,4) 22,83 (2,9) WHR 0.82 (0,05) 0,87 (0,03) 0,81 (0,04) 0,81 (0,04) TG 113,8 (29,8) 89,6 (30,1) 98,5 (34,9) 103,3 (31,1) CT 184,2 (16) 184,4 (19,3) 173,7 (18,1) 185,3 (14,9) 49,9 (10) 53,1 (7,6) 51,3 (9,2) 52,3 (7,4) Số liệu trình bày x ( SD), kết so sánh trung bình thơng số nhóm theo tuổi giới cho thấy khác biệt khơng có ý nghĩa (P > 0,05) Sự phân bố đối tượng theo tuổi giới n = 21 n = 19 25 Phân bố tần xuất thành phần lipoprotein n = 22 n = 15 20 15 10 Nam Nữ < 40 tuổ i >= 40 tuoåi 20 25 15 20 12 15 10 Tần suất Tần suất Tần suất 15 10 5 Mean = 44.222 Std Dev = 7.0304 N = 77 20.0 30.0 40.0 50.0 60.0 70.0 80.0 Mean = 22.648 Std Dev = 8.07 N = 77 0.0 10.0 20.0 Beta-LP Các thành phần lipoprotein tuân theo quy luật phân phối chuẩn Thành phần alpha-lipoprotein Alpha-LP (%) 20 – 39 tuổi Nam 31,2 ± 8,2 (n = 19) ≥ 40 tuổi 32,2 ± ( n = 15) 34 ± (n = 21) 0,271 33,4 ± 7,7 (n = 22) 0,651 P 40.0 P 0,689 0,783 trung bình thành phần nhóm theo tuổi giới cho thấy khác biệt khơng có ý nghĩa (P > 0,05) Thành phần prebeta-lipoprotein 30.0 50.0 60.0 giới cho thấy khác biệt khơng có ý nghĩa (P > 0,05) Thành phần beta-lipoprotein Beta-LP (%) 20 – 39 tuổi ≥ 40 tuổi P Nam 43,3 ± 7,5 (n = 19) 46,4 ± 7,9 ( n = 15) 0,250 43,3 ± 7,3 (n = 21) 0,976 44,4 ± 5,7 (n = 22) 0,392 Nữ P 0,581 trung bình thành phần nhóm theo tuổi giới cho thấy khác biệt khơng có ý nghĩa (P > 0,05) Tương quan giửa thành phần lipoprotein với lipid 20 – 39 tuổi ≥ 40 tuổi P Tương quan Nam 25,4 ± 8,3 (n = 19) 20,5 ± 8,5 ( n = 15) 0,095 22,4 ± 7,4 (n = 21) 0,228 22 ± 8,1 (n = 22) 0,580 Alpha HDLC Prebeta TG Beta LDL-C 0,872 Số liệu trình bày x ( SD), kết so sánh trung bình thành phần nhóm theo tuổi Chun Đề Nội Khoa 40.0 Alpha-LP Prebeta-LP (%) P 20.0 Số liệu trình bày x (SD), kết so sánh Số liệu trình bày x (SD), kết so sánh Nữ 10.0 50.0 Prebeta-LP Nhận xét: Nữ 30.0 Mean = 32.781 Std Dev = 7.6863 N = 77 Pearson R P Spearman R P 0,338 0,003 0,352 0,002 0,537 0,285 0,000 0,012 0,553 0,264 0,000 0,020 Nhận xét: Alpha-LP tươmg quan thuận mức độ trung bình với HDL-C Prebeta-LP tương quan thuận mức độ với TG, nhiên R2 = 0,29 cho thấy dùng đường hồi quy để ước tính giới hạn (chỉ 29%) Các LP lipid khác khơng có tương quan tương quan mức độ yếu BÀN LUẬN Điện di lipoprotein cellulose acetate phân tách LP thành thành phần theo thứ tự từ cực dương sang cực âm prealpha-LP, alpha-LP, prebeta-LP, beta-LP chylomicron, máu nhịn đói qua đêm (> 12 khơng ăn) thường có ba thành phần alpha-LP, prebeta-LP beta-LP, tương ứng theo kỹ thuật phân tách siêu li tâm HDL (high density lipoprotein), VLDL (very low density lipoprotein) LDL (low density lipoprotein) Hình ảnh kết điện di (+) (-) -> Hình ảnh điện di cellulose acetate Hình ảnh sau phân tích với phần mềm chuyên dụng Interlab (Ý) Các thành phần LP điện di không tách biệt (như thành phần protein) mà giửa chúng có dãy nối chủ yếu giửa thành phần prebeta-LP với beta-LP, điều cho thấy giống mức độ định thành phần cấu tạo chuyển hóa LP (lipoprotein gồm thành phần lipid giống nhau, khác tỷ lệ phần trăm LDL (tương ứng beta lipoprotein) IDL hình thành từ VLDL (tương ứng prebeta lipoprotein) sau bị thủy phân bớt TG dần số apoprotein HDL giúp vận chuyển ngược cholesterol từ mơ ngoại biên gan xem lipoprotein chống xơ vữa (anti-atherogenic Chuyên Đề Nội Khoa particle) Nghiên cứu Framingham (1988) theo dõi năm nhận thấy người có nồng độ HDL-C (high density lipoprotein cholesterol) thấp có nguy tim mạch cao Trong VLDL LDL lipoprotein vận chuyển lipid từ ruột gan đến mơ xem lipoprotein gây xơ vữa, LDL có kích thước nhỏ nên dễ dàng xâm nhập thành mạch khả gây xơ vữa cao VLDL Không giống thành phần lipid, thành phần lipoprotein phân tác h điện di không khác biệt theo tuổi giới(2,3), điều thể qua mối tương quan mức độ yếu trung bình giửa thành phần lipoprotein với thành phần lipid (trừ tương quan giửa prebeta lipoprotein với TG mức độ khá) Tuy nhiên cở mẫu nhóm nên cần thiết phải có nghiên cứu với quy mơ lớn để khảo sát vấn đề TÀI LIỆU THAM KHẢO Khảo sát hồi quy đa biến việc ước tính thành phần lipoprotein dựa TG CT cho thấy thành phần prebeta-LP có tương quan thuận với hai thành phần với R2 = 34,4% cao nhiều so với TG (R2 = 29%) Mặt khác TG đóng góp nhiều CT việc ước tính prebeta-LP, điều phù hợp với thành phần cấu tạo prebeta-LP (hạt VLDL có thành phần TG chiếm 50%) So sánh với trị số người Châu Âu (theo Ulukaya E, Turkey) Người Châu Âu Nghiên cứu P alpha (%) 34 32,8 0,168 prebeta (%) 16,5 22,6 0,000 beta (%) 50,5 44,2 0,000 Thành phần alpha – Lp người Vi ệt Nam không khác biệt so với người Châu Âu, thành phần prebeta-LP cao beta-LP thấp có ý nghĩa thống kê (P < 0,001) so với người Châu Âu Sự khác biệt thành phần lipid, lipoprotein (lipid chủ yếu khác biệt thành phần TG) người Việt Nam so với người Châu Âu cho chế độ ăn nhiều glucid người Việt Nam(2) 10 11 KẾT LUẬN - Các thành phần LP tuân theo qui luật phân phối chuẩn - Trung bình thành phần LP phân tách điện di cellulose acetate 77 người Việt Nam bình thường khơng có rối loạn lipid tuổi từ 23 đến 68 là: Alpha-LP: 32,8 ± 7,7%; prebeta-LP: 22,6 ± 8,1% beta-LP: 44,2 ± 7,0% - Các thành phần LP không khác biệt theo tuổi giới - Prebeta-LP tương quan thuận mức độ với TG - Người Việt Nam có trị số prebeta-LP cao beta-Lp thấp so với trị số đối chiếu người Châu Âu Chuyên Đề Nội Khoa 12 13 14 15 16 17 Châu Ngọc Hoa (2005), “Chuyển hoá lipid lipoprotein bệnh nhân tăng huyết áp người bình thường”, Y Học Thành Phố Hồ Chí Minh, tập 9, (1)2005, tr 43-48 Châu Ngọc Hoa (2005), “Lipid lipoprotein người bình thường”, Y Học Thành Phố Hồ Chí Minh, tập 9, (1)2005, tr 40-42 Đỗ Đình Hồ cộng (1992), “Một số dạng lipid máu người Việt Nam khỏe mạnh”, Tạp Chí Y Học, chun đề Hóa Sinh, tr.45-65 Đỗ Đình Hồ, Phạm Thị Mai, Phan Thị Danh cộng (1994), “ Những thông số lipid lipoprotein huyết người khỏe mạnh, bệnh nhân tiểu đường bệnh nhân nhiễm mỡ”, Tạp Chí Y Học Trường Đại Học Y Dược Thành Phố Hố Chí Minh, phụ chuyên đề Kỹ Thuật Y Học, tr.6-19 Đỗ Như Hiền (2000), Góp phần nghiên cứu thay đổi nồng độ lipoprotein (a) bệnh nhân đái tháo đường type 2, Luận văn Thạc Sỹ Y Học, 2000 Fauber J (2004), “Lipoprotein particles may better predict heart attack risk”, Health and science, Nov.14, 2004 pp 1-3 Fredrickson DS and Lees RS (1965), “A system for phenotyping hyperlipoproteinemia”, The American Heart Association, Circulation 1965; 31; 321-327 Grundy SM (2004), “Richard Havel, Howard Eder, and the evolution of lipoprotein analysis”, Clinical investigation, vol 114, number 8, pp 1034 – 1037 Hulley SB., Cook SG., Hatch FT., and Lindgren FT.et al (1971), “Quantitation of serum lipoproteins by electrophoresis on agarose gel: sdandardization in lipoprotein concentration units (mg/100 ml) by comparition with analytical ultracentrifugation”, Lipid research, vol 12, pp 420 – 433 Lewis B (1973),“Classification of lipoproteins and lipoprotein disorders”, J Clin Pathol Suppl (Assoc Clin Pathol) 1973; 5: 26–31 Magnani H.N and Howard A.N (1971), “A quantitative method for blood lipoproteins using cellulose acetate electrophoresis”, J Clin Pathol Suppl (Assoc Clin Pathol) 1971; 24: 837–845 Nguyễn Trung Chính, Nguyễn Thị Kim Thanh (1990), “Rối loạn lipoprotein người tăng huyết áp 60 tuổi”, Tạp chí Y Học Thực Hành, (289), tr 26-28 Noble RP (1968), “Electrophoretic separation of plasma lipoproteins in agarose gel”, Lipid research, vol 9, pp 693 – 700 Phạm Thị Mai (1991), “Sự thay đổi nồng độ lipid lipoprotein huyết theo tuổi giới”, Tạp chí Y học Việt Nam, số 4, tập 159, tr 45-49 Phạm Thị Mai (1997), “Rối loạn lipoprotein máu người có yếu tố nguy cơ”, Tạp chí Y học Thực Hành, (6), 1997, tr 35-40 Trương Quang Bình (2001), Nghiên cứu rối loạn lipid, lipoprotein bệnh nhân bệnh động mạch vành, luận án tiến sĩ y học, tr.146-147 Võ Hoàng Minh Hiền (2002), Nhận xét rối loạn lipid pipoprotein huyết bệnh nhân đái tháo đường típ 2, Luận án Bác Sĩ chuyên khoa II, tr 8-11 Chuyên Đề Nội Khoa Chuyên Đề Nội Khoa ... kết điện di lipoprotein siêu li tâm Ngoài trị số lipid, lipoprotein thay đổi theo tuổi, giới, dân tộc… Do cần thiết có trị số lipoprotein người Việt Nam bình thường Điện di lipoprotein huyết tương. .. rẻ, phương tiện có sẵn, trị số điện di lipoprotein Miền Nam Việt Nam chưa cơng bố chúng tơi tiến hành xác định trị số thành phần lipoprotein huyết tương người Việt Nam bình thường ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG... người Việt Nam so với người Châu Âu cho chế độ ăn nhiều glucid người Việt Nam( 2) 10 11 KẾT LUẬN - Các thành phần LP tuân theo qui luật phân phối chuẩn - Trung bình thành phần LP phân tách điện di