Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm xác định tỷ lệ đột biến gen BRAF V600E trên bệnh nhân (BN) ung thư tuyến giáp (UTTG) thể biệt hóa tại Bệnh viện Bạch Mai. Đối tượng và phương pháp: 30 BN gồm 3 nam và 27 nữ, tuổi trung bình 43,9 ± 13,8 được chẩn đoán xác định bằng mô bệnh học UTTG thể biệt hóa.
tạp chí y - dợc học quân số 9-2016 ĐỘT BIẾN GEN V600E BRAF Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ TUYẾN GIÁP THỂ BIỆT HÓA TẠI BỆNH VIỆN BẠCH MAI Mai Tr ng Khoa*; Ph m C m Ph ơng*; Nguy n Huy Bình* TĨM TẮT Mục tiêu: xác định tỷ lệ đột biến gen BRAF V600E bệnh nhân (BN) ung thư tuyến giáp (UTTG) thể biệt hóa Bệnh viện Bạch Mai Đối tượng phương pháp: 30 BN gồm nam 27 nữ, tuổi trung bình 43,9 ± 13,8 chẩn đốn xác định mơ bệnh học UTTG thể biệt hóa BN xét nghiệm đột biến gen BRAF V600E phương pháp Strip Assay Viennalab từ mẫu bệnh phẩm mổ, xét nghiệm thực Trung tâm Y học Hạt nhân Ung bướu, Bệnh viện Bạch Mai Kết quả: 20/30 BN (66,7%) có đột biến BRAF V600E dương tính, tỷ lệ đột biến BN có di xa 5/5 (100%), BN có di hạch 10/15 (66,7%) BN khơng có di 5/10 (50,0%) Kết luận: tỷ lệ đột biến gen BRAF V600 nhóm BN UTTG thể biệt hóa 66,7%; đột biến BRAF V600E yếu tố dự báo khả kháng điều trị 131I * Từ khóa: Ung thư tuyến giáp thể biệt hóa; Đột biến gen BRAF V600E; Kháng 131I V600E BRAF Mutation in Differentiated Thyroid Cancer Patients in Bachmai Hospital Summary Objectives: To determine the percentage of BRAF V600E mutation in differentiated thyroid cancer patients in Bachmai Hospital Subject and method: 30 differentiated thyroid cancer patients including males and 27 females, with average ages 43.9 ± 13.8, who diagnosed by pathology BRAF V600E mutation was analyzed by Strip Assay of Viennalab from surgical biopsy in Bachmai Hospital Results: 20/30 patients (66.7%) carry BRAF V600 mutation: patients have distant metastasis 5/5 (100.0%), patients have lymph node metastasis 10/15 (66.7%) and patients with no metastasis 5/10 (50.0%) Conclusion: Percentage of BRAF V600Emutation in differentiated thyroid cancer is 66.7% BRAF V600E mutation could suggest the risk of resistant to radioactive iodine * Key words: Differentiated thyroid cancer; BRAF V600E mutation; Resistant to radioactive iodine ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư tuyến giáp có tỷ lệ mắc 0,5 10/100000 dân, chiếm khoảng 1% loại ung thư Nữ mắc UTTG cao nam từ - lần Tại Mỹ, theo số liệu Viện Ung thư Quốc gia, năm 2013 có 60.220 ca UTTG chẩn đốn 1.850 trường hợp tử vong bệnh Ở Việt Nam, theo số liệu thống kê vùng bệnh UTTG cho thấy Hà Nội có tỷ lệ mắc UTTG 1,9/100000 dân, tỷ lệ mắc nữ cao nam 2,6 lần; TP Hồ Chí Minh, tỷ lệ mắc nữ 2,8/100000 nam 1,5/100000 dân [1] * Bệnh viện B¹ch Mai Ng i ph n h i (Corresponding): Phạm Cẩm Phơng (camphuongmd@yahoo.com) Ngy nh n bài: 04/07/2016; Ngày ph n bi n đánh giá báo: 18/11/2016 Ngày báo đ c đăng: 30/11/2016 153 Tạp chí y - dợc học quân sụ sè 9-2016 Điều trị ung thư biểu mô tuyến giáp thể biệt hoá phối hợp nhiều phương pháp phẫu thuật, 131I, hormon đem lại kết tốt nên áp dụng phổ biến Tuy nhiên, có tỷ lệ nhỏ BN UTTG thể biệt hóa tái phát di không đáp ứng (kháng) với 131I Do vậy, việc điều trị trở nên khó khăn Các nghiên cứu dấu ấn phân tử UTTG thể biệt hóa kháng với phương pháp điều trị 131I nhiều, nhiên phát chế chủ yếu đột biến gen BRAF V600E [2] Hiện Việt Nam chưa có nhiều nghiên cứu đột biến BRAF V600E tiên lượng nguy kháng 131I BN UTTG thể biệt hóa Vì vậy, nghiên cứu tiến hành với mục tiêu: Xác định tỷ lệ đột biến gen BRAF V600E BN UTTG thể biệt hóa Bệnh viện Bạch Mai ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu - 30 BN chẩn đốn xác định mơ bệnh học UTTG thể biệt hóa, điều trị Trung tâm Y học Hạt nhân Ung bướu (YHHN UB), Bệnh viện Bạch Mai - Những BN phân tích đột biến gen BRAF V600E Đơn vị Gen Trị liệu, Trung tâm YHHN UB - Bệnh viện Bạch Mai - Tiêu chuẩn loại trừ: BN UTTG khơng phải thể biệt hóa Phương pháp nghiên cứu * Thu thập đặc điểm lâm sàng: - Tuổi, giới, thời gian mắc bệnh - Tình trạng di căn: không di căn, di hạch di xa * Phân tích đột biến gen BRAF V600E phương pháp Strip Assay Viennalab (Áo): 154 - Tách DNA từ mô xử lý formalin - vùi paraffin (FFPE) kít đặc hiệu QIAamp DNA FFPETissue (Qiagen) - Khuếch đại đoạn gen quan tâm phản ứng PCR theo kít BRAF V600E Strip Assay (ViennaLab) - Lai sản phẩm khuếch đại với đầu dò đặc hiệu phân bố Test strip (ViennaLab) - Phân tích kết quả: âm tính (khơng có đột biến); dương tính (có đột biến) KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN * Đặc điểm tuổi, giới nhóm BN nghiên cứu: Nam: BN (10,0%); nữ: 27 BN (90,0%); tuổi trung bình 43,9 ± 13,8 Thống kê cho thấy UTTG có tỷ lệ mắc 0,5 - 10/100000 dân, chiếm khoảng 1% loại ung thư Ở Việt Nam, theo số liệu thống kê vùng bệnh UTTG cho thấy Hà Nội có tỷ lệ mắc UTTG 1,9/100000 dân, tỷ lệ mắc nữ cao nam 2,6 lần; TP Hồ Chí Minh, tỷ lệ mắc nữ 2,8/100000 nam 1,5/100000 dân [1] Các nghiên cứu thấy tỷ lệ mắc bệnh UTTG nữ cao nam từ - lần Kết chúng tôi, nữ mắc nhiều nam, phù hợp với nghiên cứu trước * Tỷ lệ đột biến gen BRAF V600E: Có đột biến: 20 BN (%): khơng có đột biến: 10 BN (33,3%) Các nghiên cứu dấu ấn phân tử UTTG thể biệt hóa kháng với phương pháp điều trị 131I nhiều, chế chủ yếu đột biến gen BRAF T1799A (V600E) [4, 5] Đột biến xuất với tần suất 78 - 95% trường hợp UTTG tái phát Trong nghiên cứu chúng tôi, tỷ lệ phát t bin tạp chí y - dợc học quân sè 9-2016 gen BRAF V600E 66,7%, tương đồng với nhiều nghiên cứu tác giả giới [2, 3, 4] điều trị 131I [3, 6] Đây liệu pháp điều trị mới, giúp cho bác sỹ có thêm lựa chọn cho BN UTTG thể biệt hóa kháng 131I Bảng 1: Liên quan đột biến gen BRAF V600E với tình trạng di KẾT LUẬN Tình trạng di n/N Tỷ lệ % Không di 5/10 50,0 Di hạch 10/15 66,7 5/5 100,0 Di xa p < 0,05 - Có mối liên quan đột biến gen BRAF V600E với tình trạng di căn, p < 0,05 - Tỷ lệ đột biến gen nhóm BN khơng có di 50,0%, tăng dần lên 66,7% nhóm di hạch Đặc biệt, nhóm di xa, tất BN có mang đột biến gen BRAF V600E Điều giải thích, BN UTTG có đột biến gen BRAF V600E thường liên quan chặt chẽ đến mức độ giảm chức biểu gen mã hóa protein chịu trách nhiệm dung nạp iodure (I−) vào bên tế bào NIS (sodium/iodide symporter), TSHR (thyroid stimulating hormone receptor), TPO (antithyroid peroxidase), TG (thyroglobulin) SLC26A4 (mã hóa cho protein pendrin), dẫn đến iodure (I−) dung nạp phần tế bào tuyến giáp có mang đột biến BRAF-V600E tích lũy thưa thớt lòng nang với biểu đáp ứng với 131I [2, 3, 5] Năm 2013, Cục Quản lý Dược phẩm Thực phẩm (Food and Drug AdministrationFDA) Hoa Kỳ phê chuẩn sorafenib (một thuốc ức chế BRAF) phép định điều trị cho nhóm BN UTTG thể biệt hóa, tái phát, di thất bại với Tỷ lệ đột biến gen BRAF V600 nhóm BN UTTG thể biệt hóa 66,7% Kết nghiên cứu cho thấy đột biến BRAF V600E yếu tố dự báo khả kháng điều trị 131I TÀI LIỆU THAM KHẢO Mai Trọng Khoa Điều trị bệnh Basedow UTTG thể biệt hóa 131I Nhà xuất Y học 2013 Mai Trọng Khoa Kháng thể đơn dòng phân tử nhỏ điều trị ung thư Nhà xuất Y học 2016 Brose MS Nutting CM, Sherman et al Rationale and design of DICISION: a doubleblind, randomized, placebo-controlled phase III trial evaluating the efficacy and safety of sorafenib in patients with locally advanced or metastatic radioactive iodine (RAI)-refractory, differentiated thyroid cancer BMC Cancer 2011, 11, 349 doi: 10.1186/1474-2407-11-349 Cabanillas ME, Dadu R, Hu MI, Lu C, Gunn GB, Grubbs EG, Lai SY, Williams MD Thyroid gland malignancies Hematol Oncol Clin North Am 2015, 29 (6), pp 1123-114343 Fraser S, Go C, Aniss A, Sidhu S, Delbridge L, Learoyd D, Clifton-Bligh R, Tacon L, Tsang V, Robinson B, Gill AJ, Sywak M.BRAF(V600E) Mutation is associated with decreased disease-free survival in papillary thyroid cancer World J Surg 2016, 40 (7), pp.1618-1624 Ye X, Zhu Y, Cai J Relationship between toxicities and clinical benefits of newly approved tyrosine kinase inhibitors in thyroid cancer: A meta-analysis of literature J Cancer Res Ther 2015, 11, Suppl 2, pp.185-190 155 ... cứu đột biến BRAF V600E tiên lượng nguy kháng 131I BN UTTG thể biệt hóa Vì vậy, nghiên cứu tiến hành với mục tiêu: Xác định tỷ lệ đột biến gen BRAF V600E BN UTTG thể biệt hóa Bệnh viện Bạch Mai. .. mơ bệnh học UTTG thể biệt hóa, điều trị Trung tâm Y học Hạt nhân Ung bướu (YHHN UB), Bệnh viện Bạch Mai - Những BN phân tích đột biến gen BRAF V600E Đơn vị Gen Trị liệu, Trung tâm YHHN UB - Bệnh. .. ức chế BRAF) phép định điều trị cho nhóm BN UTTG thể biệt hóa, tái phát, di thất bại với Tỷ lệ đột biến gen BRAF V600 nhóm BN UTTG thể biệt hóa 66,7% Kết nghiên cứu cho thấy đột biến BRAF V600E