Luận án được nghiên cứu với mục tiêu nhằm xác định được các đặc điểm dịch tễ, sự phân bố của các chủng IBV để làm cơ sở đề xuất các biện pháp phòng chống IB (tiêm phòng vacxin) nhằm tạo điều kiện cho chăn nuôi phát triển bền vững. Chẩn đoán, phân lập và khảo sát được đặc tính sinh học của IBV gây bệnh tại một số tỉnh miền Bắc Việt Nam, giai đoạn 2014–2017.
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ LOAN NGHIÊN CỨU DỊCH TỄ HỌC BỆNH VIÊM PHẾ QUẢN TRUYỀN NHIỄM (INFECTIOUS BRONCHITIS - IB) Ở GÀ NUÔI TẠI MỘT SỐ TỈNH PHÍA BẮC VIỆT NAM Chuyên ngành: Dịch tễ học thú y Mã số: 9.64.01.08 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2018 Cơng trình hồn thành tại: HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Lê Văn Phan TS Huỳnh Thanh Phương Phản biện 1: PGS.TS Nguyễn Viết Không Viện Thú y Phản biện 2: PGS.TS Tơ Long Thành Trung tâm Chẩn đốn thú y trung ương Phản biện 3: TS Phan Quang Minh Cục Thú y Luận án bảo vệ trước Hội đồng Đánh giá luận án cấp Học viện họp tại: Học viện Nông nghiệp Việt Nam Vào hồi phút, ngày tháng năm 2018 Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc gia Việt Nam Thư viện Lương Định Của - Học viện Nông nghiệp Việt Nam PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Tuy ngành công nghiệp chăn nuôi gà ngày phát triển gặp khơng khó khăn vấn đề dịch bệnh phải kể đến bệnh viêm phế quản truyền nhiễm gà Là bệnh truyền nhiễm nguy hiểm, lây lan nhanh gây thiệt hại kinh tế nặng nề, tính chất phức tạp mầm bệnh, virus gây bệnh có nhiều serotype, dễ biến đổi nên bệnh khó kiểm sốt Những vụ dịch xảy thường kết lây nhiễm với chủng khác serotype so với chủng vacxin Vacxin sống phát triển để chống lại số serotype IBV Tuy nhiên, ngày có nhiều biến chủng IBV xuất khiến cho việc khống chế bệnh vấn đề nan giải Vì việc điều tra dịch tễ học IB, nghiên cứu tìm serotype IBV phổ biến lưu hành khu vực quan trọng cơng tác kiểm sốt bệnh Tuy nhiên từ trước tới nay, câu hỏi đặc điểm dịch tễ học IB, serotype IBV lưu hành Việt Nam chưa có câu trả lời cụ thể thỏa đáng Để có thêm thơng tin chủng IBV lưu hành, phân bố IB Việt Nam, đặc biệt tỉnh miền Bắc nơi đàn gà tập trung chủ yếu (chiếm tới 75% đàn gà nước), nghiên cứu đặc tính sinh học sinh học phân tử mầm bệnh, tìm yếu tố nguy liên quan đến dịch IB nhằm kiểm soát bệnh, nâng cao hiệu chăn nuôi, tiến hành nghiên cứu đề tài 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU - Xác định đặc điểm dịch tễ, phân bố chủng IBV để làm sở đề xuất biện pháp phòng chống IB (tiêm phòng vacxin) nhằm tạo điều kiện cho chăn nuôi phát triển bền vững - Chẩn đoán, phân lập khảo sát đặc tính sinh học IBV gây bệnh số tỉnh miền Bắc Việt Nam, giai đoạn 2014–2017 1.3 PHẠM VI NGHIÊN CỨU - Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ IB gà tỉnh miền Bắc Việt Nam gồm: Bắc Ninh, Hà Nội, Hải Phòng, Hưng Yên, Thái Nguyên giai đoạn 2014-2017 - Nghiên cứu số yếu tố nguy lây lan dịch địa bàn nghiên cứu thời gian từ 2014–2017 - Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý IB gà địa bàn nghiên cứu; đặc tính sinh học sinh học phân tử chủng IBV lưu hành địa bàn nghiên cứu khoảng thời gian từ 2014–2015 1.4 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA ĐỀ TÀI - Khảo sát dịch bệnh IB tỉnh phía Bắc Việt Nam sở xác định lâm sàng, giám định bệnh lý phân tử, khẳng định IBV thường xuyên lưu hành có tỷ lệ mắc chết đáng quan tâm đàn gà nuôi hướng trứng - Đã phân lập 10 chủng IBV, xác định đầy đủ đặc tính sinh học, virus học chủng cường độc VNUA-HN01, VNUA-TN08 VNUA-HP11 Xác định chủng thuộc nhóm di truyền Q1-like, QX-like TC07-2-like, có quan hệ gần gũi nguồn gốc dịch tễ học với Trung Quốc - Khẳng định dịch bệnh IB xảy đàn có vacxin khơng có kháng nguyên tương đồng chủng vacxin chủng cường độc lưu hành 1.5 Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI 1.5.1 Ý nghĩa khoa học đề tài - Luận án phân tích, đánh giá số đặc điểm dịch tễ học mô tả bệnh IB số tỉnh phía Bắc Việt Nam: tỷ lệ lưu hành bệnh, đặc điểm lưu hành bệnh theo độ tuổi gà theo mùa vụ Xác định số yếu tố có liên quan đến lưu hành bệnh IB gà - Xác định 10 chủng IBV lưu hành địa bàn nghiên cứu; phân tích, đánh giá chuyên sâu mặt di truyền cho thấy chủng IBV phân lập thuộc kiểu di truyền khác nhau, chủng có mức tương đồng thấp với chủng vacxin IB lưu hành thị trường - Luận án tài liệu tham khảo tốt phục vụ cho nghiên cứu khoa học IB, IBV tư liệu tham khảo cho giảng dạy chuyên ngành thú y 1.5.2 Ý nghĩa thực tiễn đề tài - Khẳng định dịch bệnh IB xảy đàn có vacxin khơng có kháng nguyên tương đồng chủng vacxin chủng cường độc lưu hành - Phân lập thành công 10 chủng IBV khảo sát đặc tính virus học qua ni cấy phơi gà 10 ngày tuổi, có chủng phát triển thành chủng vacxin ứng dụng thực tế - Kết luận án sở khoa học cần thiết sát với thực tế để người chăn nuôi, nhà quản lý hiểu rõ đề giải pháp phòng, chống IB hiệu PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA IBV Bệnh viêm phế quản truyền nhiễm (Infectious bronchitis - IB) bệnh truyền nhiễm cấp tính gà, virus viêm phế quản truyền nhiễm (Infectious bronchitis virus - IBV), thuộc giống Coronavirus, họ Coronaviridae, Nidovirales gây Hầu hết chủng IBV bị vô hoạt sau 15 phút 56oC sau 90 phút 45oC, cho thấy chất dễ vỡ virus IBV mẫn cảm với chất sát trùng thông thường bị bất hoạt chloroform dung môi lipid, dùng dung dịch β – propiolactone 0,05% 0,1% (BPL), formalin 0,1% để tiêu diệt bệnh IBV dễ lây lan, thời kỳ ủ bệnh tương đối ngắn (18-36 giờ) IBV lan truyền theo đường ngang qua khơng khí, dụng cụ chăn ni, thức ăn, nước uống Bệnh lây chủ yếu qua đường hô hấp Dù xâm nhập vào thể đường IBV đến ký sinh sinh sản tế bào biểu mô hô hấp làm tế bào bị thối hóa chết Trong thể bệnh kéo dài, IBV xâm nhập tác động vào quan sinh dịch, ống dẫn trứng, mô đường tiêu hố thận IBV gây nên trì trệ hoạt động mao khí quản, gây giảm sản lượng chất lượng trứng, ảnh hưởng đến ống dẫn trứng Ngoài ra, IBV gây nên tổn thương thận, mức độ nghiêm trọng phụ thuộc vào chủng, gây bệnh ruột đường tiêu hố gà Tính gây bệnh IBV phụ thuộc chủng virus, ngồi có ảnh hưởng mầm bệnh thứ sinh, lứa tuổi, chế độ ăn gà, thời tiết… IBV thích nghi với hầu hết biểu mô gà Và thích ứng ni cấy phơi gà 9-11 ngày tuổi; môi trường tế bào tế bào thận phôi gà, tế bào thận gà, tế bào gan phôi gà, ngồi số chủng nhân lên tế bào VERO động vật có vú, tế bào BHK-21; môi trường nuôi cấy tổ chức khí quản 2.2 ĐẶC ĐIỂM PHÂN TỬ CỦA IBV IBV RNA virus, sợi đơn dương với gen dài khoảng 27 kb Tổ chức gen điển hình virus theo thứ tự 5’-Pol-S-3a-3b-E-M-5a-5b-N-UTR-3’ Sự tái tổ hợp di truyền biết đến đặc điểm IBV Nhưng phạm vi kiện tái tổ hợp dòng phân lập thực địa IBV chưa hiểu rõ IBV có nhiều biến chủng với serotype khác Sự khác biệt serotype chủ yếu gen protein S1 Khi so sánh tồn trình tự protein S, hầu hết serotype IBV có 80 đến 90% tương đồng serotype khác Trong S2, độ tương đồng amino acid thường ≥90% Hầu hết serotype IBV khác từ 20-25% trình tự amino acid S1, với số chủng khác biệt lên đến 50% chủng khác khác biệt nhỏ 2-3% Những nghiên cứu đột biến kháng thể đơn dòng cho thấy nhiều amino acid liên quan đến hình thành epitope VN đặt khu vực thứ thứ ba chiều dài polipeptide S1 Phân tích trình tự biến thể có di truyền giống (>95% axit amin tương đồng S1) cho thấy phần lớn khác biệt nằm hai vùng Việc tạo biến thể di truyền cho kết từ thay đổi vài amino acid glycoprotein spike (S) IBV Hầu hết nghiên cứu IBV tập trung gen glycoprotein S PHẦN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 NỘI DUNG 3.1.1 Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR để chẩn đoán phát IBV nghiên cứu biến đổi bệnh lý IB - Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR chẩn đoán phát IBV, khảo sát cặp mồi sử dụng - Nghiên cứu số đặc điểm bệnh lý IB gà 3.1.2 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ IB gà số tỉnh miền Bắc Việt Nam - Tình hình mắc IB gà số tỉnh miền Bắc Việt Nam: + Tỉ lệ gà mắc IB lứa tuổi; + Tỉ lệ gà mắc IB theo mùa năm - Xác định số yếu tố nguy chủ yếu 3.1.3 Phân lập xác định số đặc tính sinh học chủng IBV phân lập - Phân lập IBV trứng gà có phơi; - Xác định tính thích ứng IBV phơi gà; - Xác định liều gây nhiễm phôi 50% (EID50/ml) liều gây chết phôi 50% (ELD50/ml) số chủng IBV phân lập 3.1.4 Phân tích trình tự gen xây dựng phả hệ + Giải trình tự gen, xác định type IBV phân lập được; + Xây dựng phả hệ 3.2 ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU - Nghiên cứu thực trang trại hộ chăn nuôi số tỉnh thành miền Bắc Việt Nam (Bắc Ninh, Hà Nội, Hải Phòng, Hưng Yên, Thái Ngun); - Phòng thí nghiệm Bộ mơn Bệnh lý thú y - Học viện Nông nghiệp Việt Nam; - Phòng thí nghiệm Trung tâm Chẩn đốn Thú y DABACO; - Phòng thí nghiệm Cơng ty TNHH MTV AVAC Việt Nam (AVAC); - Công ty Marcrogen, Hàn Quốc COSMO (Genetech Co., Ltd, Seoul, Hàn Quốc) 3.3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.3.1 Vật liệu nghiên cứu: 3.3.1.1 Vật liệu nghiên cứu cho nội dung - Các cặp mồi sử dụng: + Mồi đặc hiệu antisense : 5’-AGT GGT CTG GTT CAC-3’ + Cặp mồi khuếch đại đoạn gen S1: Mồi xuôi IBF : 5’-TTTTGGTGATGACAAGATGAA-3’; Mồi ngược IBR : 5’-CGCATTGTTCCTCTCCTC-3’ - Các chủng virus truyền nhiễm bao gồm: chủng virus vacxin Nobilis IB 4-91, chủng virus Lasota, chủng Nobilis Gumboro 228E, chủng virus NIBRG-14, chủng Nobilis ILT Các cặp mồi đặc hiệu dùng chẩn đoán virus kể - Gà chết địa bàn nghiên cứu chọn; - Dụng cụ mổ khám, dụng cụ lấy mẫu xét nghiệm, trang bị bảo hộ; - Bộ dụng cụ làm tiêu bản; - Bộ hóa chất tẩm đúc paraffin nhuộm Haematoxylin – Eosin (HE); - Bộ kit tách chiết RNA: Trizol® Reagent (Life technologies, USA); - Bộ kit phiên mã ngược SuperScript®III First-Strand kit (Invitrogen, MA, US); - Bộ kit PCR AccuPower® PCR PreMix (BIONEER); - Máy móc thí nghiệm cần thiết: máy RT-PCR, máy đọc gel, máy điện di, máy ly tâm, tủ lạnh, buồng an toàn sinh học cấp 3.3.1.2 Vật liệu nghiên cứu cho nội dung * Số liệu phần mềm - Số liệu ổ dịch IB, đàn gà, số gà mắc IB số gà chết IB trang trại hộ chăn nuôi địa bàn nghiên cứu; - Số liệu điều tra nghiên cứu xác định yếu tố liên quan; - Phần mềm sử dụng xử lý số liệu Excel 2007 Minitab 16.0 3.3.1.3 Vật liệu nghiên cứu cho nội dung - Trứng gà từ gà bệnh, đặc biệt khơng có kháng thể IB, có phơi 10 ngày tuổi Cơng ty TNHH MTV AVAC Việt Nam (AVAC) cung cấp; - Tủ lạnh, tủ lạnh âm, tủ ấm, máy ấp trứng ; - Trang bị bảo hộ: găng tay trang, áo blouse 3.3.1.4 Vật liệu nghiên cứu cho nội dung * Các cặp mồi sử dụng: - Cặp mồi khuếch đại gen S1:Mồi xuôi: 5’- AAGACTGAACAAAARACCGACT -3’; Mồi ngược: 5’- CAAAACCTRCCATAACTWACATA -3’; - Cặp mồi khuyếch đại gen S dài đầy đủ: Mồi xuôi 5'-CGG AAC AAA AGA CMG ACT TAG T-3'; Mồi ngược 5'-CCA TTA AAC AGA CTT TTT AGG TCT G-3'; - Cặp mồi đặc hiệu vector M13F M13R; - Các kit sử dụng như: QIAquick PCR Purification (QIAgen), Plasmid Miniprep (QIAgen); - pGEM®-T Easy vector sử dụng enzyme T4 DNA ligase (Promega); - Trang bị bảo hộ; - Máy móc thí nghiệm cần thiết; - Phần mềm sử dụng phân tích trình tự gen xây dựng phả hệ: phần mềm DNASTAR Lasergene BioEdit 6.0; chương trình PHYLIP suite phần mềm MEGA 7.0… 3.3.2 Phương pháp nghiên cứu 3.3.2.1 Phương pháp nghiên cứu cho nội dung - Kiểm tra tính bắt cặp mồi BLAST, chọn mẫu theo sác xuất; - Chiết tách RNA virus, tổng hợp cDNA, PCR sử dụng kit thích hợp Kiểm tra sản phẩm điện di gel agarose 1-1,5%; - Mẫu bệnh phẩm gà nghi mắc IB lấy dựa TCVN 01-83:2011/BNNPTNT Mẫu bệnh phẩm khí quản, phổi, buồng trứng, thận gà; - Mổ khám theo phương pháp Thomas Carlyle Jones gia cầm; - Phương pháp làm tiêu vi thể tẩm đúc paraffin nhuộm Haematoxylin – Eosin (HE) theo quy trình Bộ mơn Bệnh lý, Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam 3.3.2.2 Phương pháp nghiên cứu cho nội dung Điều tra dịch tễ sử dụng phương pháp dịch tễ học mô tả, thống kê sinh học, phương pháp hồi cứu, nghiên cứu Bệnh-Chứng 3.3.2.3 Phương pháp nghiên cứu cho nội dung - Phân lập IBV trứng gà có phơi 10 ngày tuổi theo quy trình OIE (2018) - Xác định khả thích ứng ổn định IBV phôi gà: chủng IBV phân lập cấy truyền đợt phôi trứng gà 10 ngày tuổi, đợt 30 phơi trứng Theo dõi thí nghiệm ngày, đánh giá bệnh tích tổng hợp số liệu phôi sống, chết thời điểm, đánh giá kết - Xác định EID50/ml ELD50/ml: pha loãng nối tiếp IBV phân lập theo thứ tự -1 10 , 10-2 đến 10-8 Gây nhiễm liều 0,1ml nồng độ với phơi trứng gà Theo dõi thí nghiệm thời điểm 24, 48, 72, 96 120 giờ, tổng hợp số liệu phôi chết, phôi sống, phơi nhiễm phơi khơng nhiễm Tính EID50/ml ELD50/ml theo công thức Spearman-Karber 3.3.2.4 Phương pháp nghiên cứu cho nội dung - Sản phẩm PCR xử lý gửi nước ngồi để giải trình tự Phân tích phần mềm DNASTAR Lasergene (DNASTAR®), BioEdit 6.0 - Cây phả hệ xây dựng dựa vào thuật tốn Neighbor-joining algorithms chương trình PHYLIP suite phần mềm MEGA 7.0 Cấu trúc hình học phả hệ đánh giá dựa vào phương pháp Bootstrap re-sampling 1.000 lần liệu Neighbor-joining từ SEQBOOT and CONSENSE chương trình PHYLIP suite PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 ỨNG DỤNG KỸ THUẬT RT-PCR ĐỂ CHẨN ĐOÁN PHÁT HIỆN IBV VÀ NGHIÊN CỨU BIẾN ĐỔI BỆNH LÝ IB 4.1.1 Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR chẩn đoán phát IBV Kiểm tra tính bắt cặp nucleotide cặp mồi IBF/IBR (Feng et al., 2012) cho kết bắt cặp tốt với 100 liệu gen S hệ gen đầy đủ IBV GenBank Thử nghiệm RT-PCR cho kết nhạy đặc hiệu Kết chẩn đốn có 126/260 (48,46%) mẫu bệnh phẩm cho kết dương tính với IBV (Bảng 4.1) Bảng 4.1 Kết chẩn đoán IB phương pháp RT-PCR Nơi Số mẫu xét nghiệm Số mẫu dương tính lấy mẫu (n) (n) Bắc Ninh 68 36 52,94 Hà Nội 32 15 46,88 Hải Phòng 54 24 44,44 Hưng Yên 56 26 46,43 Thái Nguyên 50 25 50,00 Tính chung 260 126 48,46 Tỷ lệ (%) dương tính 4.1.2 Kết nghiên cứu số biến đổi bệnh lý IB gà 4.1.2.1 Triệu chứng lâm sàng gà mắc IB Nghiên cứu biểu lâm sàng gà nhiễm IB có ý nghĩa quan trọng chẩn đốn lâm sàng có dịch bệnh xảy Kết quan sát trực tiếp đàn, trại có mẫu bệnh phẩm cho kết RT-PCR dương tính với IBV cho thấy 100% gà bệnh có tượng hơ hấp khó khăn hắt hơi, thở khó, dịch mũi tiết nhiều kèm theo biểu sưng đầu, viêm kết mạc, biểu đặc trưng bệnh (Bảng 4.2) Ngoài ra, gà mắc IB có thêm triệu chứng tích dịch tử cung, đặc biệt có gà mắc IB Thêm nữa, gà bị tiêu chảy phân lỗng, nhiều nước có mùi thối (Bảng 4.2) Bảng 4.2 Kết nghiên cứu triệu chứng lâm sàng chủ yếu gà mắc IB Triệu chứng lâm sàng Sốt, ủ rũ, ăn Hơ hấp khó khăn* Sưng đầu Viêm kết mạc Tích dịch tử cung Phân tiêu chảy nhiều nước Trại A (Bắc Ninh) ++ +++ ++ + + + Trại B (Hà Nội) Trại C (Hải Phòng) Trại D (Hưng Yên) Trại E (Thái Nguyên) +++ ++ +++ ++ +++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ + + + + + + + ++ + + + Nơi lấy mẫu Chú thích: +++: Nặng; ++: Trung bình; +: Nhẹ; * Hơ hấp khó khăn, bao gồm: Hắt hơi, thở khó, dịch mũi tiết nhiều 4.1.2.2 Một số biến đổi bệnh lý đại thể gà mắc IB Bệnh tích gà mắc IB đa dạng, chiếm tỷ lệ cao gồm thận sưng (90,48%), viêm kết mạc mắt (76,98%), tích dịch tử cung (66,67%); chủ yếu bệnh tích đường hơ hấp xuất huyết khí quản (76,98%), phổi tụ huyết, xuất huyết (63,49%), viêm túi khí (60,32%) viêm xoang mũi (57,94%) (Bảng 4.3) Bảng 4.3 Kết nghiên cứu biến đổi bệnh lý đại thể gà mắc IB Số gà nghiên cứu (n) 126 126 126 126 126 126 126 126 126 126 126 Bệnh tích Viêm kết mạc Viêm xoang mũi Xuất huyết khí quản Phổi tụ huyết, xuất huyết Viêm túi khí Báng nước xoang bụng Buồng trứng viêm, teo Ống dẫn trứng teo Ống dẫn trứng tích nước Thận sưng Thận sưng tích urat Số gà có bệnh tích (n) 50 73 97 80 76 84 34 20 10 114 Tỷ lệ (%) 39,68 57,94 76,98 63,49 60,32 66,67 26,98 15,87 7,94 90,48 1,59 Ngoài tế bào niêm mạc đường hơ hấp thận bị tác động, IBV tác động vào quan sinh dục làm biến đổi tổ chức quan hậu sản lượng trứng thương phẩm gà đẻ giảm nghiêm trọng coi thiệt hại kinh tế nghiêm trọng ngành chăn nuôi gà đẻ Kết đánh giá tỷ lệ đẻ trứng gà đẻ thể hiên Bảng 4.4 Bảng 4.4 Sản lượng trứng gà đẻ mắc IB Địa điểm Trại F (Bắc Ninh) Trại G (Hà Nội) Trại H (Hải Phòng) Trại I (Hưng Yên) Trại J (Thái Nguyên) Tuổi Số gà Số Tỷ lệ đẻ thực gà quan sát trứng tế (%) (tuần tuổi) (con) (quả) (95% CI) 32 4500 23124 23 5000 12950 25 3000 11260 27 29 4000 3500 16268 15325 73,41 (72,12-74,70) 37,00 (35,66-38,34) 53,62 (51,84-55,40) 58,10 (56,57-59,63) 62,55 (60,95-64,15) Tỷ lệ đẻ tiêu chuẩn (%) 94,20 80,00 92,50 94,00 94,50 Tỷ lệ trứng tụt giảm (%) (95% CI) 20,79a (19,60-21,98) 43,00a (41,63-44,37) 38,88a (37,14-40,63) 35,90a (34,41-37,39) 31,95a (30,41-33,49) Chú thích: Ký tự a thể số liệu sai khác có ý nghĩa thống kê P < 0,05 Tỷ lệ tụt giảm sản lượng trứng khác lứa tuổi gà đẻ khác (Bảng 4.4) Cụ thể gà đẻ 23 tuần tuổi mắc IB có tỷ lệ (%) tụt giảm sản lượng trứng cao 43,00% (95% CI 41,63 - 44,37) gà đẻ 32 tuần tuổi mắc IB có tỷ lệ (%) tụt giảm sản lượng trứng thấp 20,79% (95% CI 19,60-21,98) Sự chênh lệch 1,28% Sự chênh lệch tỷ lệ chết gà IB giai đoạn tương đối lớn với 6,24% (p < 0,001) Sự chênh lệch tỷ lệ chết giai đoạn gà non ≤ 17 tuần tuổi với giai đoạn lại tương đối cao, điều chứng tỏ sức đề kháng chống chịu với IB gà giai đoạn thấp 4.2.1.3 Tình hình gà mắc IB theo mùa Dưới ảnh hưởng khác thời tiết, nhiệt độ độ ẩm mùa tỷ lệ gà mắc IB tỷ lệ gà chết IB có khác biệt Kết điều tra tỷ lệ mắc IB tỷ lệ chết IB gà theo mùa năm tổng hợp (Bảng 4.8) Mùa đơng có tỷ lệ (%) gà mắc IB cao 20,50% (p < 0,001), thấp mùa thu với 10,48% (p < 0,005) Mùa hè mùa thu có tỷ lệ mắc bệnh chênh lệch khơng đáng kể Trong đó, chênh lệch tỷ lệ mắc cao vào mùa đông thấp vào mùa thu tương đối lớn 10,02% (p < 0,001) Tỷ lệ chết tập trung từ mùa đông năm trước mùa xuân năm sau, tỷ lệ chết 4,23% 3,06% cao mùa lại Tỷ lệ chết thấp vào mùa thu với 1,21% thấp so với mùa đông 3,02% (p < 0,001) (Bảng 4.8) Bảng 4.8 Tỷ lệ gà mắc IB theo mùa địa bàn nghiên cứu Mùa Số gà theo dõi Số mắc Tỷ lệ (%) mắc Số chết năm (con) (con) (95% CI) (con) 53.043 9.109 49.845 5.644 Mùa xuân (Tháng 2-4) Mùa hè (Tháng 5-7) Mùa thu (Tháng 8-10) Mùa đông (Tháng 11-1) Tổng hợp 50.844 5.327 43.497 8.919 197.229 28.999 17,17a (16,85-17,49) 11,32a (11,04-11,60) 10,48a (10,21-10,75) 20,50a (20,12-20,88) 14,70 (14,54-14,86) 1.624 746 616 1.842 4.828 Tỉ lệ (%) chết (95% CI) 3,06a (2,91-3,21) 1,50a (1,39-1,61) 1,21a (1,11-1,31) 4,23a (4,04-4,42) 2,45 (2,38-2,52) Ký tự a thể số liệu khác có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Từ kết nghiên cứu dịch tễ, bệnh IB thường xuyên xảy tỉnh/thành miền Bắc Ngoài yếu tố nguyên nhân gây bệnh, yếu tố ngoại cảnh (mùa vụ chăn nuôi ) yếu tố vật chủ (lứa tuổi gà ) ảnh hưởng lớn đến lây lan IB mức độ nghiêm trọng bệnh Vì vậy, để có biện pháp kiểm sốt dịch bệnh, sử dụng vacxin thích hợp, cần phải tính đến yếu tố ảnh hưởng đó, khắc phục phương pháp quản lý phòng chống dịch bệnh tốt 4.2.2 Xác định số yếu tố liên quan đến bệnh IB 11 4.2.2.1 Yếu tố phương thức chăn nuôi Nhiều nghiên cứu cho thấy phương thức chăn nuôi yếu tố quan trọng lây lan dịch bệnh truyền nhiễm Phương thức chăn nuôi yếu tố có ảnh hưởng lớn đến phát triển lưu hành IB gà Bảng 4.9 Yếu tố nguy phương thức chăn nuôi Yếu tố khảo sát Kết Tổng Chăn nuôi công nghiệp Chăn nuôi chăn thả Bệnh 43 32 75 Không bệnh 227 283 510 Tổng 270 315 585 OR (95% CI) 1,68 (1,03 – 2,73) Chitest (P-value) 3,027 x 10 -228(