Tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu của cao lá Sen – Hà thủ ô đỏ (Folium nelumbinis – Radix polygoni multiflori) trên thực nghiệm

Bài viết trình bày việc khảo sát độc tính cấp của cao chiết nước lá Sen, cao chiết nước Hà thủ ô. Xác định tỷ lệ kết hợp cao lá Sen, cao Hà thủ ô đỏ có tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu. Đánh giá tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu của cao lá Sen – Hà thủ ô đỏ trên thực nghiệm.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học TÁC DỤNG DỰ PHÒNG RỐI LOẠN LIPID MÁU CỦA CAO LÁ SEN – HÀ THỦ Ô ĐỎ (FOLIUM NELUMBINIS – RADIX POLYGONI MULTIFLORI) TRÊN THỰC NGHIỆM Huỳnh Thị Mỹ Hiền*, Lê Thị Lan Phương*, Nguyễn Thị Sơn*, Nguyễn Phương Dung* TÓM TẮT Mở đầu: Rối loạn lipid máu nguyên nhân gây xơ vữa động mạch (XVĐM) gây tăng tỷ lệ tử vong bệnh lý tim mạch Phòng ngừa điều trị rối loạn lipid máu trở thành mối quan tâm hàng đầu Lá Sen (LS) Hà thủ ô đỏ (HTO) dược liệu có sẵn nước kết hợp sử dụng lâm sàng điều trị rối loạn lipid máu Tuy nhiên chưa có nghiên cứu chứng minh hiệu điều hòa lipid máu việc kết hợp Sen Hà thủ ô đỏ Đề tài thực nhằm mục đích cung cấp chứng khoa học cho việc ứng dụng kết hợp Sen Hà thủ ô đỏ phòng ngừa rối loạn lipid máu mơ hình thực nghiệm Mục tiêu: Khảo sát độc tính cấp cao chiết nước Sen, cao chiết nước Hà thủ ô Xác định tỷ lệ kết hợp cao Sen, cao Hà thủ đỏ có tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu Đánh giá tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu cao Sen – Hà thủ ô đỏ thực nghiệm Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Chuột nhắt trắng đực cái, chủng Swiss albino, trọng lượng 20 ± g, mua Viện Pasteur TP HCM Nghiên cứu thực nghiệm có nhóm chứng hai mơ hình: rối loạn lipid máu nội sinh (bằng tiêm phúc mô tyloxapol 500 mg/kg, 5%) rối loạn lipid máu ngoại sinh (bằng uống cholesterol 25 mg/kg) Kết quả: Dmax cao Sen 11,818 g cao/kg chuột Liều Dmax cao Hà thủ ô 6,09 g cao/kg chuột Trên mô hình rối loạn lipid máu nội sinh, kết hợp LS-HTO tỷ lệ 2-1 liều LS 0,8 g – HTO 0,4 g giảm cholesterol toàn phần 23,21%, giảm 25,49% triglycerid, giảm LDL-C 43,43% chưa thể tác dụng lên HDL-C Trên mô hình rối loạn lipid máu ngoại sinh, kết hợp LS-HTO tỷ lệ 2-1 liều LS 0,8 g – HTO 0,4 giảm cholesterol toàn phần 49,20%, giảm LDL-C 46,47%, nhiên chưa thể tác dụng TG HDL-C Kết luận: Kết hợp cao Sen – Hà thủ ô với tỷ lệ 2-1 có hiệu phòng ngừa rối loạn lipid máu tốt tỷ lệ 1-1 1-2 Cao Sen – Hà thủ đỏ có tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu thực nghiệm Từ khóa: Lá sen, Hà thủ đỏ, dự phòng rối loạn lipid máu ABSTRACT PREVENTING EFFECT OF THE EXTRACT COMBINED FROM FOLIUM NELUMBINIS AND RADIX POLYGONI MULTIFLORI ON EXPERIMENTAL DYSLIPIDEMIA MICE MODELS Huynh Thi My Hien, Le Thi Lan Phuong, Nguyen Thi Son, Nguyen Phuong Dung * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 20 - No - 2016: 11 - 18 Background: Dyslipidemia is a major cause of atherosclerosis and increasing mortality due to cardiovascular disease Prevention and treatment of dyslipidemia has become an essential concern Folium Nelumbinis (lotus leaf) and Radix Polygoni multiflora (Fo-ti root) are available domestic herb and have been combined in dyslipidemia treatment However, no study has demonstrated preventing effect of Folium Nelumbinis and Radix Polygoni multiflori combination on experimental dyslipidemia models This research is conducted to provide scientific evidences of Folium nelumbinis and Polygonum multiflorum combination in dyslipidemia treatment * Khoa Y Học Cổ Truyền Tác giả liên lạc: ThS.BS Huỳnh Thị Mỹ Hiền ĐT: 01682089687 Email: hienhuynh1008@gmail.com 11 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số * 2016 Aims of study: Survey the acute toxicity of aqueous Folium Nelumbinis extract and aqueous Radix Polygoni multiflori extract Identify the combination doses (combined ratio) of Folium Nelumbinis and Radix Polygoni multiflori which regulates experimental dyslipidemia Evaluate prevention effectiveness of Folium Nelumbinis and Radix Polygoni multiflori combined extract in hyperlipidemic mice Methods: Male and female mice, Swiss albino strain, weight 20 ± g, purchased at the Pasteur Institute, HCM city Experimental study was conducted with control group on two models: Endogenous dyslipidemia (by tyloxapol, i.p., 500 mg/kg, 5%) and exogenous dyslipidemia (by cholesterol 25 mg/kg, p.o.) Results: Dmax of Folium Nelumbinis extract is 11.818 g/kg Dmax of Polygonum multiflorum is 6.09 g/kg On the model of endogenous dyslipidemia, Folium Nelumbinis and Radix Polygoni multiflori combination (2-1 ratio) with dose 0.8 g Folium nelumbinis - 0.4 g Polygonum multiflorum decreased 23.21% total cholesterol, 25.49% triglyceride and 43.43% LDL-C On the model of exogenous dyslipidemia, Folium Nelumbinis and Radix Polygoni multiflori combination (2-1 ratio) with dose 0.8 g Folium nelumbinis - 0.4 g Radix Polygoni multiflori reduced 49.20% total cholesterol and 46.67% LDL-C Conclusion: Combining Folium Nelumbinis and Radix Polygoni multiflori with 2-1 ratio is optimal for the prevention of dyslipidemia Folium Nelumbinis and Radix Polygoni multiflori extract has the preventive effect on experimental dyslipidemia models Key words: Folium Nelumbinis, Radix Polygoni multiflori, the preventive effect on experimental dyslipidemia models ĐẶT VẤN ĐỀ Rối loạn lipid máu yếu tố thuận lợi gây nhiều bệnh lý tim mạch xơ vữa động mạch (XVĐM) Theo thống kê, tỷ lệ tử vong bệnh nhân XVĐM 45%, bệnh mạch vành chiếm 32% tai biến mạch máu não chiếm 18%(6) Do phòng ngừa, chẩn đoán điều trị rối loạn lipid máu trở thành mối quan tâm hàng đầu nước Đến nay, nhiều thuốc điều trị rối loạn lipid máu sử dụng, việc tìm kiếm thuốc điều trị rối loạn lipid máu hiệu quả, an tồn tác dụng phụ trở thành u cầu thiết Nhiều thuốc vị thuốc từ thiên nhiên chứng minh có tác dụng điều hòa lipid máu Ngưu tất, Qua lâu, Hà thủ ô đỏ, Bán hạ, Sen, Trong Sen (LS) có tác dụng chống oxy hóa, cải thiện chức thận, kháng viêm, kháng sinh, giúp giảm cân, điều trị béo phì đặc biệt điều trị rối loạn lipid máu, nhờ vào chế giảm tổng hợp cholesterol, ức chế hoạt động men tổng hợp acid béo (FAS), acetylCoA carboxylase HMG-CoA reductase làm giảm cholesterol toàn phần (TC), triglycerid 12 (TG), lipoprotein tỉ trọng thấp (LDL-C) tăng lipoprotein tỉ trọng cao (HDL-C) máu(8) Bên cạnh đó, Hà thủ (HTO) thuốc sử dụng thông dụng YHCT, thông qua chế ức chế tổng hợp cholesterol, tăng hoạt động lipoprotein lipase (LPL) tăng bắt giữ lipoprotein tỉ trọng thấp, tăng biểu gen thụ thể lipoprotein mật độ thấp (LDLR) từ làm giảm nồng độ TC rõ làm giảm LDL-C máu Trong thực tế lâm sàng, nhiều thầy thuốc kết hợp Sen Hà thủ ô điều trị rối loạn lipid máu, nhiên chưa có nghiên cứu chứng minh hiệu điều hòa lipid máu việc kết hợp dược liệu Đề tài thực nhằm tìm hiểu tác dụng điều hòa lipid máu phối hợp Sen Hà thủ ô đỏ mơ hình thực nghiệm ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Ngun liệu nghiên cứu Các dược liệu Sen (Folium Nelumbinis) Hà thủ ô đỏ (Radix Polygoni multiflori) cung cấp cửa hàng dược liệu Dũ Hưng, quận 5, TP.HCM Dược liệu đạt tiêu chuẩn sở Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số * 2016 Cao Sen (LS), cao Hà thủ ô đỏ (HTO) bào chế cách sắc lần với nước, lọc dịch chiết đem để cao Cao Sen có hiệu suất chiết 16,34%, độ ẩm 12,94%, độ tro 5,31% Cao Hà thủ có hiệu suất chiết 16,99%, độ ẩm 15,54%, độ tro 4,15% Định tính sắc ký lớp mỏng cao Sen, cao Hà thủ ô cho vết có màu sắc Rf tương tự với mẫu đối chiếu Sen, Hà thủ ô Nghiên cứu Y học Xác định tỷ lệ kết hợp cao Sen, cao Hà thủ đỏ có tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu mơ hình rối loạn lipid máu nội sinh tyloxapol (Triton WR – 1339) Chuột thử nghiệm sau nuôi ổn định tuần chia ngẫu nhiên thành lô (mỗi lô chuột) Lô chứng, lô bệnh: uống nước cất Phương tiện Lơ atorvastatin (lơ atorvastatin 10 mg/kg Hóa chất Cholesterol – Sigma, tyloxapol (triton WR1339) – Sigma, cholic acid – Sigma Lô Sen (LS): Uống Sen với liều 1,2 g dược liệu/kg Thuốc đối chiếu Atorvastatin 10 mg lô F922– Công ty Flamingo Ltd đối chiếu): Uống Lô Hà thủ ô đỏ (HTO): Uống Hà thủ ô đỏ với liều 1,2 g dược liệu/kg Lô LS-HTO (1-1): Uống Sen 0,6 g dược liệu/kg Hà thủ ô đỏ 0,6 g dược liệu/kg Thiết bị dụng cụ Cân phân tích (độ nhạy 0,0001 mg), lò nung, bếp cách thủy, máy chụp hình, số dụng cụ thường quy phòng thí nghiệm Lơ LS-HTO (1-2): Uống Sen liều 0,4 g dược liệu/kg Hà thủ ô đỏ liều 0,8 g dược liệu/kg Động vật nghiên cứu Chuột nhắt trắng Swiss albino, khỏe mạnh, đồng giới tính, 6-8 tuần tuổi, trọng lượng 20 ± g, cung cấp Viện Pasteur TP Hồ Chí Minh Trong suốt q trình thử nghiệm, chuột ni mơi trường ổn định dinh dưỡng Chuột lô cho uống thuốc thử nghiệm ngày 14 ngày Vào ngày 14, sau uống thuốc, chuột gây rối loạn lipid máu tiêm phúc mô tyloxapol liều 500 mg/kg, 5% Vào ngày 15, sau uống thuốc 24 sau tiêm tyloxapol, tiến hành lấy máu tim chuột định lượng nồng độ số triglycerid, cholesterol toàn phần, LDL-C, HDL-C phương pháp đo quang Phương pháp nghiên cứu Khảo sát độc tính cấp cao Sen, cao Hà thủ đỏ Giai đoạn thăm dò (4 chuột/lơ): Khởi đầu từ liều cao bơm qua kim đầu tù cho uống Xác định liều LD0 (liều tối đa không gây chết) liều LD100 (liều tối thiểu gây chết 100%) Giai đoạn xác định (20 chuột /lô): Chuột chia lô cho sử dụng thuốc liều khoảng LD0 LD100 chia theo cấp số nhân Đánh giá kết Xác định Dmax LD50 theo phương pháp Karber-Behrens (nếu có) Lơ LS-HTO (2-1): Uống Sen liều 0,8 g dược liệu/kg Hà thủ ô đỏ liều 0,4 g dược liệu/kg Đánh giá tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu cao kết hợp Sen – Hà thủ ô mơ hình gây rối loạn lipid máu tyloxapol (triton WR-1339) Chuột chia thành lô (mỗi lô chuột) Lô chứng, lô bệnh: Uống nước cất Lô atorvastatin (lô atorvastatin 10 mg/kg đối chiếu): Uống Lô LS-HTO (1): Uống Sen liều 0,8 g dược liệu/kg Hà thủ ô đỏ liều 0,4 g dược liệu/kg Lô LS-HTO (2): Uống Sen liều 0,4 g dược liệu /kg Hà thủ ô đỏ liều 0,2 g dược liệu/kg 13 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số * 2016 nghiệm ngày 14 ngày Vào ngày 14, Phương pháp xử lý thống kê số liệu thực nghiệm sau uống thuốc, chuột gây rối Các liệu trình bày dạng Mean loạn lipid máu tiêm phúc mô tyloxapol liều ± SEM Việc xử lý thống kê đề tài dùng 500 mg/kg, 5% Vào ngày 15, sau phần mềm SPSS phiên 16.0 Phương pháp uống thuốc 24 sau tiêm tyloxapol, tiến thống kê sử dụng phép kiểm Student hành lấy máu tim chuột định lượng nồng độ cho dãy số liệu độc lập So sánh khác số triglycerid, cholesterol tồn phần, LDL-C, nhóm có tác dụng điều trị rối loạn lipid HDL-C phương pháp đo quang máu phép kiểm ANOVA chiều, Chuột lô cho uống thuốc thử Đánh giá tác dụng dự phòng rối loạn lipid yếu tố Sự khác xem có ý nghĩa máu cao kết hợp Sen – Hà thủ ô mơ giá trị p < 0,05 hình gây rối loạn lipid máu cholesterol KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Chuột chia ngẫu nhiên thành lô (mỗi lô chuột): Độc tính cấp Liều Dmax cao Sen 11,818 g cao/kg Lô chứng: Uống nước cất chuột, tương đương 361,62 g dược liệu Lô bệnh: Uống cholesterol 25 mg/kg khô/người 60 kg Liều Dmax cao Hà thủ ô đỏ dầu thực vật nước cất Lô atorvastatin (đối chiếu): Uống cholesterol 25 mg/kg dầu thực vật atorvastatin 10 mg/kg Lô LS-HTO (1): Uống cholesterol 25 mg/kg dầu thực vật cao Lá sen – Hà thủ ô với liều tương đương 0,8 g dược liệu Sen 0,4 g dược liệu Hà thủ ô/kg Lô LS-HTO (2): Uống cholesterol 25 mg/kg 6,09 g cao/kg chuột tương đương 179,22 g dược liệu khô/người 60 kg Dmax cao Sen gấp 40 lần so với liều sử dụng người Dmax cao Hà thủ ô đỏ gấp 30 lần so với liều sử dụng người Điều cho phép nhận định cao Sen cao Hà thủ đỏ sử dụng an tồn súc vật thử nghiệm Trong thực tế sử dụng kết hợp Sen Hà thủ ô đỏ chưa ghi nhận tác dụng bất lợi dầu thực vật cao Lá sen – Hà thủ ô với bệnh nhân liều tương đương 0,4 g dược liệu Sen 0,2 g nghiệm, gây mê lấy máu tim chuột để định Đề tài chưa có điều kiện khảo sát tác dụng phụ cao Sen – Hà thủ ô đỏ sử dụng dài ngày Với chế phẩm phòng ngừa điều trị rối loạn lipid máu thời gian dùng thuốc thường kéo dài Vì thế, cần phải tiếp tục tiến hành nghiên cứu độc tính bán trường diễn cao Sen – Hà thủ ô đỏ để làm sở cho bước triển khai lâm sàng sau lượng cholesterol toàn phần, triglycerid, HDL-C, Xác định tỷ lệ kết hợp cao Sen, cao Hà dược liệu Hà thủ ô/kg Nước cất dung dịch cholesterol pha dầu thực vật cho uống vào 8-9 sáng ngày Atorvastatin cao thuốc cho uống vào lúc - chiều Sau tuần thử LDL-C phương pháp đo quang thủ đỏ có tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu mơ hình rối loạn lipid máu nội sinh tyloxapol (Triton WR – 1339) 14 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học Bảng Nồng độ cholesterol toàn phần, triglycerid máu chuột nhắt sau tiêm tyloxapol (TYL) liều 500 mg/kg, 5% Lô (n = 6) Chứng Bệnh Atorvastatin Lá Sen (LS) Hà thủ ô (HTO) LS-HTO (1-1) LS-HTO (1-2) LS-HTO (2-1) Liều thử nghiệm Nước cất + Nước muối sinh lý Nước cất + TYL (500 mg) Atorvastatin (10 mg/kg) + TYL (500 mg) LS (1,2 g) + TYL (500 mg) HTO (1,2 g) + TYL (500 mg) LS (0,6 g) – HTO (0,6 g) + TYL (500 mg) LS (0,4g) – HTO (0,8 g) + TYL (500 mg) LS (0,8 g) – HTO (0,4 g) + TYL (500 mg) Cholesterol TP (mg/dl) 121,32 ± 17,14 534,84 ± 34,85*** 415,81 ± 38,07 ***### 369,93 ± 62,25 ***### 465,97 ± 91,82 *** 412,35 ± 55,56 ***## 346,11 ± 101,46 ***## 410,71 ± 103,61 ***# Triglycerid (mg/dl) 198,34 ± 38,57 1255,32 ± 48,33 *** 1176,31 ± 66,57 ***# 1160,42 ± 57,60 ***## 1152,09 ± 107,35 *** 1259,06 ± 91,12 *** 1083,87 ± 183,18 *** 935,40 ± 222,93 ***## Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng (*: p < 0,05, **: p < 0,01, ***: p < 0,001) Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh (#: p < 0,05, ##: p< 0,01, ###: p < 0,001) Nhận xét: Lơ LS-HTO (1-1) giảm (2,29%) cholesterol tồn phần có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh Lơ LS-HTO (1-2) làm giảm (35,29%) nồng độ cholesterol, có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh Lơ LS-HTO (1-1) LS-HTO (1-2) không ảnh hưởng trị số triglycerid Lô LS-HTO (2-1) làm giảm (23,21%) nồng độ cholesterol giảm (25,49%) nồng độ triglycerid, có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh Như với tỷ lệ kết hợp LS-HTO (1-1), LS-HTO (1-2), LS-HTO (2-1) làm giảm nồng độ cholesterol tồn phần có lơ LS-HTO (21) làm giảm triglycerid có ý nghĩa thống kê Bảng Nồng độ HDL-C, LDL-C máu chuột nhắt sau tiêm tyloxapol (TYL) liều 500 mg/kg, 5% Lô (n = 6) Chứng Bệnh Atorvastatin Lá Sen (LS) Hà thủ ô (HTO) LS-HTO (1-1) LS-HTO (1-2) LS-HTO (2-1) Liều thử nghiệm Nước cất + Nước muối sinh lý Nước cất + TYL (500 mg) Atorvastatin (10 mg/kg) + TYL (500 mg) LS (1,2 g) + TYL (500 mg) HTO (1,2 g) + TYL (500 mg) LS (0,6 g) – HTO (0,6 g) + TYL (500 mg) LS (0,4 g) – HTO (0,8 g) + TYL (500 mg) LS (0,8 g) – HTO (0,4 g) + TYL (500 mg) HDL-C (mg/dl) 66,17 ± 18,92 92,55 ± 19,74 * 117,73 ± 35,34 # 67,56 ± 27,74 109,58 ± 53,64 89,62 ± 33,70 98,02 ± 50,27 115,46 ± 48,76 * LDL-C (mg/dl) 15,48 ± 4,51 191,22 ± 25,47 *** 62,82 ± 29,40 **### 70,29 ± 34,35 **### 125,97 ± 71,78 ** 70,91 ± 66,23 ## 31,31 ± 38,34 ### 108,17 ± 63,52 **## Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng (*: p < 0,05, **: p < 0,01, ***: p < 0,001) Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh (#: p < 0,05, ##: p< 0,01, ###: p < 0,001) Nhận xét: Lô LS-HTO (2-1) làm giảm (43,43%) nồng độ Lơ bệnh có nồng độ HDL-C tăng 39,87%, LDL-C tăng 11,35 lần so với lô chứng Điều phù hợp với chế gây rối loạn lipid máu tyloxapol, ức chế men lipoprotein lipase làm ức chế oxy hóa VLDL từ làm tăng nồng độ số HDL-C LDL-C LDL-C có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh Lơ LS-HTO (1-1) có nồng độ LDL-C giảm LDL-C so với nhóm bệnh Tuy nhiên có lơ (62,91%) lô LS-HTO (1-2) làm giảm (83,63%) tăng HDL-C (24,75%) khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng Kết Bàng cho thấy lô kết hợp LSHTO (1-1), (1-2), (2-1) làm giảm hàm lượng LS-HTO (2-1) tác động làm tăng HDL-C nồng độ LDL-C có ý nghĩa thống kê so với nhóm Như vậy, số liệu trình bày Bảng bệnh Hai lô (1-1), (1-2) không ảnh hưởng trị số Bảng cho thấy tỷ lệ kết hợp LS-HTO (2-1) với HDL-C liều LS 0,8 g/kg HTO 0,4 g/kg tối ưu thể 15 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số * 2016 tác dụng làm giảm trị số cholesterol, triglycerid, LDL-C tăng HDL-C mơ hình gây rối loạn lipid nội sinh Đánh giá tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu cao kết hợp Sen – Hà thủ mơ hình gây rối loạn lipid máu tyloxapol (triton WR-1339) Bảng Nồng độ cholesterol toàn phần, triglycerid máu chuột nhắt sau tiêm tyloxapol (TYL) liều 500 mg/kg, 5% Lô (n = 6) Chứng Bệnh Atorvastatin LS-HTO (1) LS-HTO (2) Liều thử nghiệm Nước cất + Nước muối sinh lý Nước cất + TYL (500 mg) Atorvastatin (10 mg/kg) + TYL (500 mg) LS (0,8g) – HTO (0,4 g) + TYL (500 mg) LS (0,4 g) – HTO (0,2 g) + TYL (500 mg) Cholesterol TP (mg/dl) 115,55 ± 17,71 422,28 ± 38,83 *** 382,34 ± 35,56 *** 399,68 ± 43,22 *** 422,72 ± 39,77 *** Triglycerid (mg/dl) 188,26 ± 59,66 1212,17 ± 34,05 *** 1222,03 ± 48,39 *** 1164,09 ± 13,39 ***## 1172,27 ± 16,07 ***# Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng (*: p < 0,05, **: p < 0,01, ***: p < 0,001) Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh (#: p < 0,05, ##: p< 0,01) Nhận xét Cả lô uống thuốc atorvastatin, LS-HTO (1), LS-HTO (2) làm giảm cholesterol tồn phần khơng có ý nghĩa thống kê Lơ LS-HTO (1) có nồng độ triglycerid thấp nhóm điều trị, giảm (3,97%) so với nhóm bệnh Lô LS-HTO (2) làm giảm (3,29%) nồng độ triglycerid so với nhóm bệnh Bảng Nồng độ HDL-C, LDL-C máu chuột nhắt sau tiêm tyloxapol (TYL) liều 500 mg/kg, 5% Lô (n = 6) Chứng Bệnh Atorvastatin LS-HTO (1) LS-HTO (2) Liều thử nghiệm Nước cất + Nước muối sinh lý Nước cất + TYL (500 mg) Atorvastatin (10 mg/kg) + TYL (500 mg) LS (0,8g) – HTO (0,4 g) + TYL (500 mg) LS (0,4 g) – HTO (0,2 g) + TYL (500 mg) HDL-C (mg/dl) 62,02 ± 22,03 96,94 ± 14,64 ** 94,56 ± 5,85 ** 107,75 ± 11,54 ** 108,86 ± 18,59 ** LDL-C (mg/dl) 15,88 ± 9,41 82,91 ± 29,66 *** 43,38 ± 29,45 # 59,11 ± 44,85 * 79,41 ± 37,41 ** Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng (*: p < 0,05, **: p < 0,01, ***: p < 0,001); Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh (#: p < 0,05) Nhận xét: Lơ LS-HTO (1) LS-HTO (2) làm tăng HDL-C có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng Lơ LS-HTO (1) LS-HTO (2) làm giảm nồng độ LDL-C (3,97%, 3,29%) so với lơ bệnh khơng có ý nghĩa thống kê Số liệu trình bày Bảng Bảng cho thấy liều kết hợp LS 0,8 g/kg – HTO 0,4 g/kg LS 0,4 g/kg – HTO 0,2 g/kg làm giảm triglycerid, tăng HDL-C, giảm LDL-C không tác dụng cholesterol toàn phần Như cao kết hợp LS-HTO thể tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu tùy mơ hình gây rối loạn lipid máu tyloxapol Tuy nhiên hiệu lực thông số lipid máu phù hợp vào liều sử dụng Bảng Nồng độ cholesterol toàn phần, triglycerid máu chuột nhắt mơ hình gây rối loạn lipid máu ngoại sinh cholesterol Lô (n = 6) Chứng Bệnh Atorvastatin LS-HTO (1) LS-HTO (2) Liều thử nghiệm Nước cất Nước cất + Cholesterol (25 mg/kg) Atorvastatin (10 mg/kg) + Cholesterol (25 mg/kg) LS (0,8 g) – HTO (0,4 g) + Cholesterol (25 mg/kg) LS (0,4 g) – HTO (0,2 g) + Cholesterol (25 mg/kg) Cholesterol TP (mg/dl) 122,14 ± 23,74 265,58 ± 62,93 *** 161,78 ± 111,35 # 134,92 ± 21,76 ### 190,13 ± 33,30 **# Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng (*: p < 0,05, **: p < 0,01, ***: p < 0,001) Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh (#: p < 0,05, ##: p< 0,01, ###: p < 0,001) 16 Triglycerid (mg/dl) 132,98 ± 19,70 133,99 ± 22,61 103,24 ± 55,36 114,39 ± 6,50 140,01 ± 21,85 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số * 2016 Đánh giá tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu cao kết hợp Sen – Hà thủ mơ hình gây rối loạn lipid máu cholesterol Nhận xét: Nồng độ cholesterol toàn phần nhóm LS-HTO (1) thấp nhóm điều trị giảm (49,20%) so với nhóm bệnh có ý nghĩa thống kê (p < 0,001) Nhóm atorvastatin nhóm LS-HTO (2) làm giảm nồng độ cholesterol tồn phần (39,09%, 28,41%) so với Nghiên cứu Y học nhóm bệnh có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh (p < 0,05) Nồng độ triglycerid nhóm atorvastatin nhóm LS-HTO (1) giảm (22,95%, 14,63%) so với nhóm bệnh khơng có ý nghĩa thống kê Nhóm LS-HTO (2) khơng ảnh hưởng lên nồng độ triglycerid so với nhóm bệnh Bảng Nồng độ HDL-C LDL-C máu chuột nhắt mơ hình gây rối loạn lipid máu ngoại sinh cholesterol Lô (n = 6) Chứng Bệnh Atorvastatin LS-HTO (1) LS-HTO (2) Liều thử nghiệm Nước cất Nước cất + Cholesterol (25 mg/kg) Atorvastatin (10 mg/kg) + Cholesterol (25 mg/kg) LS (0,8 g) – HTO (0,4 g) + Cholesterol (25 mg/kg) LS (0,4 g) – HTO (0,2 g) + Cholesterol (25 mg/kg) HDL-C (mg/dl) 75,15 ± 20,48 75,90 ± 17,14 54,82 ± 30,80 54,84 ± 18,53 100,98 ± 32,52 LDL-C (mg/dl) 17,71 ± 14,24 165,56 ± 62,42 *** 88,29 ± 84,99 # 57,20 ± 11,24 ***## 61,15 ± 23,78 **## Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng (*: p < 0,05, **: p < 0,01, ***: p < 0,001) Khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh (#: p < 0,05, ##: p< 0,01) Nhận xét: Mơ hình khơng gây tác động lên chuyển hóa HDL-C máu chuột nhắt trắng thử nghiệm nên không ghi nhận tác dụng thuốc Nồng độ LDL-C nhóm LS-HTO (1) LSHTO (2) giảm (65,45%, 63,07%) so với nhóm bệnh có ý nghĩa thống kê (p < 0,01) Số liệu trình bày bảng bảng cho thấy kết hợp LS-HTO (1) (LS 0,8 g – HTO 0,4 g) LS-HTO (2) (LS 0,4 g – HTO 0,2 g) làm giảm nồng độ cholesterol toàn phần LDL-C, không tác động lên nồng độ triglycerid HDLC mơ hình gây rối loạn lipid máu ngoại sinh cholesterol Tuy nhiên, hiệu lực ưu tiên thơng số lipid phụ thuộc vào liều kết hợp sử dụng Từ kết thực nghiệm mơ hình gây rối loạn lipid máu nội sinh tyloxapol mơ hình gây rối loạn lipid máu ngoại sinh cholesterol, nhận thấy kết hợp Sen Hà thủ với tỷ lệ 2-1 có tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu thực nghiệm Các liều Sen kết hợp Hà thủ ô với tỷ lệ 2-1 tác động khác lên thông số lipid máu Với kết nghiên cứu này, hy vọng chế phẩm từ Sen kết hợp Hà thủ đỏ có tiềm ứng dụng lâm sàng dự phòng rối loạn lipid máu Cần có nghiên cứu liều tác dụng tối ưu, đánh giá tác dụng thuốc sử dụng dài ngày, lựa chọn dạng bào chế thích hợp để tiện lợi cho người dùng KẾT LUẬN Xác định liều Dmax cao Sen 11,818 g cao/kg chuột, gấp 40 lần so với liều sử dụng người Liều Dmax cao Hà thủ ô đỏ 6,09 g cao/kg chuột, gấp 30 lần so với liều sử dụng người Điều cho phép nhận định cao Sen cao Hà thủ sử dụng tương đối an tồn động vật thử nghiệm Trên mơ hình rối loạn lipid máu nội sinh tyloxapol (500 mg/kg, 5%), kết hợp cao Sen – Hà thủ ô đỏ tỷ lệ 2-1 với liều LS 0,8 g/kg – HTO 0,4 g/kg LS 0,4 g/kg – HTO 0,2 g/kg làm giảm triglycerid, tăng HDL-C, giảm LDL-C không tác dụng cholesterol tồn phần Trên mơ hình rối loạn lipid máu ngoại sinh cholesterol (25 mg/kg), kết hợp cao Sen – 17 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 20 * Số * 2016 Hà thủ ô đỏ tỷ lệ 2-1 với liều LS 0,8 g/kg – HTO 0,4 g/kg LS 0,4 g/kg – HTO 0,2 g/kg làm giảm nồng độ cholesterol tồn phần LDL-C, khơng tác động lên nồng độ triglycerid HDL-C Như vậy, cao Sen – Hà thủ đỏ tỷ lệ 2-1 sử dụng với mục đích dự phòng rối loạn lipid máu TÀI LIỆU THAM KHẢO 18 Bộ Y Tế Viện dược liệu (2006) Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ dược thảo NXB Khoa học kỹ thuật, tr 131-138, 355-386 Đỗ Tất Lợi (1999) Những thuốc vị thuốc Việt Nam Nhà xuất Y Học, tr 48, 55, 59, 818, 833, 836 Đỗ Trung Đàm (1996) Phương pháp xác định độc tính cấp thuốc Nhà xuất Y Học Hà Nội Korolenko TA et al (2011) Influence of atorvastatin on fractional and subfractional composition of serum lipoproteins and MMP activity in mice with Triton WR 1339-induced lipaemia J Pharm Pharmacol 63(6), p 833-839 Lê Thị Lan Phương, Nguyễn Phương Dung (2013) Đánh giá tác dụng điều hòa lipid máu bột sấy phun từ đài hoa Bụt giấm (Hibiscus sabdariffa L Malvaceae) chuột nhắt Y Học TP Hồ Chí Minh phụ san số (tập 17), tr 369-372 Phạm Khuê (2000) Xơ vữa động mạch, bệnh học tuổi già NXB Y Học tr 8-87, 178-202 Vương Ngọc Châu, Nguyễn Phương Dung (2013) Nghiên cứu tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu cao Sơn Tra (Fructus Mali Doumeri) - Cốc nha (Fructus Oryzae Sativae) chuột nhắt trắng Luận văn thạc sĩ Y Học Cổ Truyền, Đại học Y Dược TP HCM, tr 4-40 Wu CH cộng (2010) Improvement in high-fat dietinduced obesity and body fat accumulation by a Nelumbo nucifera leaf flavonoid-rich extract in mice J Agric Food Chem 58(11), p 7075 - 7081 Ngày nhận báo: 30/07/2016 Ngày phản biện nhận xét báo: 31/08/2016 Ngày báo đăng: 25/11/2016 ... có) Lô LS-HTO (2-1): Uống Sen liều 0,8 g dược liệu/kg Hà thủ ô đỏ liều 0,4 g dược liệu/kg Đánh giá tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu cao kết hợp Sen – Hà thủ ô mô hình gây rối loạn lipid máu. .. đối chiếu Sen, Hà thủ ô Nghiên cứu Y học Xác định tỷ lệ kết hợp cao Sen, cao Hà thủ đỏ có tác dụng dự phòng rối loạn lipid máu mơ hình rối loạn lipid máu nội sinh tyloxapol (Triton WR – 1339) Chuột... hiểu tác dụng điều hòa lipid máu phối hợp Sen Hà thủ ô đỏ mơ hình thực nghiệm ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Ngun liệu nghiên cứu Các dược liệu Sen (Folium Nelumbinis) Hà thủ ô đỏ (Radix Polygoni multiflori)