Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết trình bày một số đặc điểm hóa lý của các mẫu phân tích; sự phân bố của một số nhóm vi sinh vật trong nước biển Cát Bà; đặc điểm hình thái một số chủng vi sinh vật phân lập tại Cát Bà; phân loại các chủng vi sinh vật phân lập từ Cát Bà.
29(4): 70-79 12-2007 Tạp chí Sinh học ĐA DạNG VI SINH VậT TạI BIểN ĐảO CáT Bà PHầN I: Số LƯợNG Và Sự PHÂN Bố Lại Thúy Hiền, Vơng Thị Nga Nguyễn Thị Yên, Nguyễn Bá Tú Viện Công nghệ sinh học Cát Bà quần đảo nằm phía Đông Nam thành phố Hải Phòng, đơn vị hành huyện Cát Hải, nơi tiếp nối với vịnh Hạ Long Bái Tử Long tiếng Quần đảo bao gồm 367 đảo vịnh Lan Hạ có diện tích khoảng 300 km2, lớn quần thể vịnh Hạ Long Năm 2004, Cát Bà đợc UNESCO công nhận khu dự trữ sinh giới, nơi hội tụ đầy đủ giá trị bảo tồn đa dạng sinh học Đồng thời, ng trờng lớn vịnh Bắc Bộ với nhiều loại tôm, cá, hải sản có giá trị kinh tế cao Ngoài ra, Cát Bà đợc biết đến nh trung tâm du lịch sinh thái tiếng với bãi biển dài vờn quốc gia Cát Bà [8] Bên cạnh lợi ích kinh tế to lớn từ nuôi trồng, khai thác thuỷ sản du lịch, môi trờng khu vực biển Cát Bà bị đe dọa nghiêm trọng Trên địa bàn thị trấn nay, sở chế biến thủy sản hầu nh cha có hệ thống xử lý chất thải qui cách Chất thải sở chủ yếu phế phẩm thừa khâu chế biến đợc thải thẳng biển, làm ảnh hởng trực tiếp đến hệ sinh thái môi trờng khu vực [8] Hơn nữa, mời năm trở lại tốc độ đô thị hóa nhanh, quy hoạch xây dựng thiếu đồng làm cho khu vực tình trạng ứ đọng chất thải Nhiều sở kinh doanh cha có hệ thống xử lý nớc thải mà xả thẳng biển qua hƯ thèng cèng r·nh [8] Do ®ã, mËt ®é vi khuẩn gây hại hàm lợng khí độc ngày cao mẫu nớc ven biển Sự ô nhiễm ảnh hởng lớn đến cảnh quan, môi trờng sinh thái đảo ngành du lịch Vừa qua, có nhiều công trình nghiên cứu đa dạng hệ động thực vật Cát Bà, nhng nghiên cứu khu hệ vi sinh vật biển cha đợc quan tâm Trong 70 vi sinh vật đóng vai trò quan trọng trình chun hãa vËt chÊt (N, P, S ) víi nhiỊu tiềm ứng dụng tơng lai Để bảo tồn nguồn lợi phát triển du lịch sinh thái bền vững nh đẩy mạnh khai thác, nuôi trồng chế biến thủy sản cần phải có nghiên cứu toàn diện môi trờng sinh thái nơi Trong đó, nghiên cứu cách sâu rộng hệ vi sinh vật hữu ích gây hại vấn đề cấp thiết nhằm sử dụng hợp lý vi sinh vật xử lý ô nhiễm bảo vệ môi trờng sinh thái I PHƯƠNG PHáP NGHIÊN CứU Nguyên liệu - Mẫu nớc đợc lấy Batometer vịnh Lan Hạ - Cát Bà - Hải Phòng 10 địa điểm với độ sâu: m (tầng mặt) m (tầng giữa) - Mẫu bùn đợc lấy độ sâu 12 m gầu Peterson (M 1200-C15 Wildco Mỹ) Phơng pháp - Đếm số lợng vi sinh vật phân lập vi khuẩn hữu ích, gây hại môi trờng chọn lọc: vi khuẩn hiếu khí (HK) môi trờng hiếu khí tổng số; vi khuẩn lên men (LM) môi trờng lên men; vi khuẩn khử sunphát (KSF) môi trờng Postgate B c¶i tiÕn; vi khuÈn nitrit hãa (NTiH), nitrat hãa (NTaH) môi trờng Basruda; vi khuẩn khử nitrat (KN) môi trờng Giltai; vi khuẩn sử dụng hydrocacbon (SDHC) môi trờng khoáng Gost; nấm men (NMn) môi trờng Hansen; nấm mốc (NM) môi trờng Czapek; xạ khuẩn (XK) môi trờng xạ khuẩn biển [4, 5, 9] - Nghiên cứu hình thái vi sinh vật dới kính hiển vi điện tử JEM 1010 (Nhật Bản) 107.250 E 107.125 E 21.0000 N 107.250 E 20.875 N 107.125 E 20.875 N - Phân tích trình tự gen 16S rARN để xác định đa dạng khu hệ vi sinh định tên số chủng vi sinh vật điển hình 107.000 E 20.875 N 20.875 N - Phân loại nấm mốc theo B Raper (1968) W Gams, K H Domsch (1980) 107.000 E 20.875 N 106.875 E 21.0000 N 106.875 E - Phân loại vi sinh vật dựa vào đặc điểm hình thái sử dụng kÝt chuÈn sinh ho¸ API 20 E, API 20 NE, API 20 CAUX, API 50 CHB, API 50 CHL cña Biomereux - Phân loại xạ khuẩn theo Nonomura H J., (1974) 20.875 N 20.875 N Đảo Cát Bà 20.750 N CB06 CB07 VÞ NH La n 20.750 N CB08 20.750 N CB02 CB10 CB09 CB01 H¹ ! N S Tû lệ: 1:200.000 Sơ đồ vị trí lấy mẫu vịnh Lan Hạ Editor: PDLinh - June,2006 Hình Sơ đồ lấy mẫu Vịnh Lan Hạ - Cát Bµ ( 107.250 E 20.750 N 107.125 E 20.750 N 107.000 E 106.875 E 106.750 E CB05 CB04 CB03 điểm lấy mẫu) II KếT QUả Và THảO LUậN trung bình từ 30 đến 36, độ mặn nớc biển Cát Bà có độ mặn mức độ trung bình Một số đặc điểm hóa lý mẫu phân tích Trong trình thu mẫu tiến hành đánh giá số đặc điểm quan trọng mẫu nớc biển trầm tích ®Þa ®iĨm lÊy mÉu bao gåm: nhiƯt ®é, pH, ®é dẫn, độ mặn, độ đục số ôxy hòa tan (DO) (bảng 1) Độ đục vị trí CB 01, 03, 04, 05, 06, 07 vµ 08 thÊp dao động từ 0,5 - mg/l, vị trí CB 02, 09 10 có độ đục cao, mg/l Đặc biệt vị trí CB 09 10 khu vực nuôi trồng thủy hải sản, lợng thức ăn d thừa động vật nuôi hoạt động đánh bắt cá nên làm ảnh hởng tới môi trờng nớc khu vực Các mẫu đợc lấy độ sâu từ - 12 m, có pH trung tính kiềm dao động từ 7,5 đến 8,2 (bảng 1) Độ mặn nớc biển vịnh Lan Hạ - Cát Bà dao ®éng tõ 32,7 - 33,6‰ So víi ®é mỈn cđa nớc biển Việt Nam dao động Hàm lợng ôxy hòa tan vịnh Lan Hạ dao động từ 5,69 - 7,1 mg/l Sự chênh lệch hàm lợng ôxy hòa tan độ mặn vị trí lấy mẫu thấp vịnh khu vực tránh bão tàu thuyền nên nớc bị xáo trộn 71 Bảng Một số đặc điểm mẫu nớc biển Cát Bà Mẫu CB 01 CB 02 CB 03 CB 04 CB 05 CB 06 CB 07 CB 08 CB 09 CB 10 Täa ®é 20o43’820” 107o04’480” 20o45’263” 107o04’02” 20o45’915” 107o03’519” 20o46’175” 107o04’906” 20o46’886” 107o06’001” 20o47’563” 107o06’584” 20o45’702” 107o07625 20o45356 107o07758 20o44161 107o03853 20o44496 107o03513 Độ sâu (m) Nhiệt độ (oC) pH Độ dẫn (S/m) Độ muối () §é ®ơc (mg/l) DO (mg/l) 12 26,1 8,2 5,35 33,6 7,1 26,7 7,99 5,18 32,7 6,49 26,8 7,65 5,19 32,7 0,5 6,8 26,9 8,05 5,30 33,3 6,48 26,6 7,5 5,26 33,1 6,79 26,3 7,6 5,31 33,4 6,74 26,4 8,0 5,35 33,6 6,6 26,3 7,85 5,32 33,6 6,72 26,8 7,25 5,31 33,5 5,69 27,6 7,95 5,24 33 6,9 Sù ph©n bè cđa mét sè nhãm vi sinh vËt n−íc biĨn C¸t Bà a Vai trò số nhóm vi sinh vËt chÝnh n−íc biĨn Nhãm vi khn HK vµ LM vi khuẩn dị dỡng, có khả phát triển nguồn chất sẵn có nh hiđrocacbon, lipit, protein điều kiện có ôxy hay ôxy Nhóm vi khuẩn chuyển hóa hợp chất chứa nitơ: bao gåm vi khuÈn NTiH, NTaH vµ vi khuÈn KN Trong nhóm NTiH ôxy hóa ammonium thành nitrit để nhóm NTaH ôxy hóa tiếp thành nitrat Còn nhóm vi khuẩn KN khử nitrat thành nitơ phân tử, khép kín chu trình chuyển hóa hợp chất chứa nitơ Nhóm vi sinh vật SDHC tạo chất hoạt hóa bề mặt (CHHBM): vi sinh vật có khả tạo CHHBM sử dụng hyđrocacbon dầu mỏ làm chất cho phát triển Số lợng vi khuẩn SDHC thị cho ô nhiễm dầu 72 Nhóm vi khuẩn KSF vi khuẩn sử dụng chất lactat axetat để phát triển có khả tạo H2S Do vậy, chúng thờng có mặt nhiều nơi có ô nhiễm hữu hàm lợng SO42- cao Sự phát triển chúng gây ô nhiễm độc cho động thực vật hệ sinh thái Tuy nhiên, số vi khuẩn KSF lại có khả sử dụng hyđrocacbon thơm, ứng dụng xử lý ô nhiễm dầu Các nhóm vi sinh vật đóng vai trò quan trọng chu trình chuyển hóa vật chất nh sinh thái biển b Số lợng thành phần số nhóm vi sinh vật Vì vai trò quan trọng nhóm vi sinh vật này, tiến hành xác định phân bố số lợng chúng nớc biển Cát Bà KÕt qu¶ cho thÊy khu hƯ vi sinh vËt ë vịnh Lan Hạ - Cát Bà đa dạng phong phó bao gåm c¶ vi khn HK, NM, NMn, XK, vi khuẩn LM, vi khuẩn chuyển hóa hợp chất chứa nitơ, vi khuẩn SDHC vi khuẩn KSF (bảng 2) Bảng Số lợng số nhóm vi sinh vật mẫu nớc biên trầm tích Cát Bà Tọa độ Mẫu VK HK Nấm mốc Nấm men X¹ khuÈn VK LM VK SDHC VK NTiH VK NTaH VK KN VK KSF 20o43’820” 107o4’480” CB1a 105 × 101 0 104 104 102 101 × 101 × 101 CB1b × 107 × 104 0 105 105 105 102 102 105 CB2a 105 0 105 104 101 103 103 101 CB2b 1,7 × 107 0 106 × 105 103 103 104 104 CB3a 106 × 102 0 104 × 104 102 104 104 101 CB3b 1,8 × 107 104 0 × 105 105 104 104 104 105 CB4a 106 × 102 101 105 × 104 102 102 × 102 101 CB4b 1,6 × 107 × 104 0 106 × 105 104 106 106 105 CB5a 106 0 105 × 104 102 103 103 102 CB5b 1,7 × 107 × 102 0 107 × 105 104 106 106 × 105 CB6a 106 × 101 101 105 × 104 102 102 102 101 CB6b 3,4 × 107 × 102 0 106 105 104 106 × 105 × 105 CB7a 106 × 101 × 101 104 × 104 102 102 × 102 102 CB7b 1,7 × 107 0 105 105 104 104 104 × 105 CB8a 105 × 101 0 105 × 104 102 102 102 101 CB8b 1,8 × 107 0 106 105 103 103 103 × 105 CB9a 106 × 101 × 104 × 104 102 104 104 102 CB9b 1,7 × 107 × 102 0 107 × 105 103 106 106 × 105 CB10a 106 0 101 104 × 104 104 102 103 101 0 × 105 × 105 104 106 106 104 20o45’263” 107o04’02” 20o45’915” 107o03’519” 20o46’175” 107o04’906” 20o46’886” 107o06’001” 20o47’563” 107o06’584” 20o45’702” 107o07’625” 20o45’356” 107o07’758” 20o44’161” 107o03’853” 20o44’496” 107o03’513 73 CB10b 1,9 × 107 Ghi chó: a mÉu n−íc bỊ mặt; b: mẫu trầm tích; VK Vi khuẩn 73 Số lợng vi khuẩn HK xuất mẫu nớc bề mặt từ 105-106 CFU/ml; mẫu bùn số lợng vi khuẩn HK đạt xấp xỉ 107 CFU/g Vi khuẩn LM phân bố mẫu nớc bề mặt với số lợng từ 104-105 CFU/ml; mẫu bùn nhóm vi khuẩn xuất cao gấp 10-100 lần so với mẫu nớc Nhóm vi khuẩn NTiH NTaH xuất với số lợng lớn từ 101-104 CFU/ml mẫu nớc biển mẫu bùn cao hơn, từ 102-106 CFU/g Nh trình phân giải chất hợp chất nitơ khu vực tơng đối mạnh Số lợng vi khuẩn KN mẫu nớc bề mặt 5.101 - 104 CFU/ml; mẫu bùn vi khuẩn KN xt hiƯn víi sè l−ỵng rÊt cao tõ 102 - 106 CFU/g Sè l−ỵng vi khn SDHC xt hiƯn mẫu nớc bề mặt 104-5.104 CFU/ml; mẫu bùn số lợng nhóm vi khuẩn cao gấp 10 lần Vì vậy, khu vực có biểu ô nhiễm dầu Bên cạnh nhóm vi khn h÷u Ých, vi khn KSF xt hiƯn víi biến động số lợng đáng đợc ý Số lợng vi khuẩn KSF mẫu nớc mặt 5.101-102 CFU/ml; mẫu bùn vi khn KSF xt hiƯn víi sè l−ỵng rÊt cao, tõ 104-5.105 CFU/g Theo số tài liệu công bố [5], số lợng vi khuẩn KSF mẫu n−íc tõ 102-103 CFU/ml vµ mÉu bïn tõ 104-106 CFU/g trở lên dấu hiệu ô nhiễm nguồn nớc Có thể kết luận mẫu phân tích đợt có dấu hiệu ô nhiễm Số lợng nấm mốc phân bố mẫu nớc bề mặt từ 0-2.102 CFU/ml; mẫu bùn số lợng nấm mốc cao hơn, có mẫu lên tới 8.104 CFU/g Kh«ng thÊy sù xt hiƯn cđa nÊm men mẫu bùn, vài mẫu nớc bề mặt có số lợng nấm men thấp, dao động tõ - 2.101 CFU/ml Trong c¸c mÉu CB 4a, 6a 10a xuất xạ khuẩn, nhiên số lợng thấp, khoảng 101 CFU/ml Các kết phân tích nêu cho thấy: độ sâu khác số lợng nhóm vi sinh vật khác nhau, vi sinh vật mẫu bùn cao mẫu nớc từ 10 đến 1000 lần Nhóm vi khuẩn hữu ích nh vi khuẩn HK, LM, SDHC, chuyển hóa hợp chất nitơ có mặt tất mẫu phân tích với số lợng lớn Điều chứng tỏ chất hữu đợc phân giải mạnh, dấu hiệu tốt cho trình tự làm nớc biển nớc nuôi trồng thủy sản Vịnh Lan Hạ khu vực đợc bao bọc dãy núi nên nguồn nớc bị xáo trộn mà lại có số lợng vi sinh vật hữu ích cao đa dạng, sử dụng chủng vi sinh vật hữu ích phân lập từ góp phần vào trình làm môi trờng nớc Theo số liệu công bố năm 2004 hai tác giả Nhật Bản Akihiko Maruyama Michinari Sunamura đa dạng vi sinh vật Suiyo Seamount số lợng vi khuẩn chiếm u mẫu phân tích khu vực này, chiếm tới 98% Các chủng vi khuẩn chiếm u thể khả khử lu huỳnh mạnh [7] B A Acinetobacter johnsonii CB 6a4 NM Streptomyces sclerotialus CB 6a (21 ngày) Hình Hình thái tế bào bµo tư mét sè chđng vi sinh vËt 74 KÕt cho thấy giống với kết đa dạng vi sinh vật thu đợc nớc biển Cát Bà, nhiên chủng vi sinh vật Cát Bà có khả chuyển hóa không hợp chất chứa lu huỳnh mà tham gia tích cực vào chu trình chuyển hóa nitơ, cácbon Nh vậy, chúng đóng vai trò quan trọng trình phân hủy hợp chất ô nhiễm Đặc điểm hình thái số chủng vi sinh vật phân lập Cát Bà Từ môi trờng chọn lọc, tiến hành phân lập chủng vi khuÈn, nÊm men, nÊm mèc, x¹ khuÈn chiÕm −u thÕ Kết thu đợc 26 chủng vi khuẩn, 12 chđng nÊm mèc, chđng nÊm men vµ chđng xạ khuẩn Hình thái khuẩn lạc chủng vi khuẩn đa dạng (bảng 3) Hầu hết chủng vi khuẩn có màu trắng vàng, bề mặt nhẵn, mép gän chiÕm −u thÕ Tuy nhiªn, còng cã chđng bỊ mặt nhăn, mép ca Đờng kính khuẩn lạc dao động từ - mm Tất chủng phân lập đợc có tế bào hình ôvan, dài ngắn khác Bảng Đặc điểm hình thái số chủng vi khuẩn điển hình STT Mẫu Chủng Nớc bề mặt VK-CB 1a1 Trầm tích VK-CB 1c1 Trầm tích VK-CB 1c2 Nớc bề mặt VK-CB 2a1 N−íc bỊ mỈt VK-CB 5a1 N−íc bỊ mặt VK-CB 5a2 Nớc bề mặt VK-CB 6a1 Đặc điểm khuẩn lạc Trắng đục, tròn, lồi, bóng ớt, mép gọn, d = - mm Trắng ngà, tròn, låi, bãng −ít, mÐp gän, d = mm Tr¾ng tinh, dẹt, bề mặt nhăn, mép không gọn, d = 2,5 mm Trắng ngà, tròn, lồi, bóng, mép gọn, d = mm Trắng ngà, tròn, có vòng đồng tâm mờ, tâm lõm, bóng ớt, mép gọn, d = mm Vàng nhạt, tròn, tâm vàng đậm, lồi, bề mặt dạng hạt, mép không gọn, d = mm Vàng nghệ, tròn hai vòng đồng tâm, lồi, bóng ớt, mÐp gän, d = mm N−íc bỊ mỈt VK-CB 6a4 Da cam, tròn, tâm lồi, xung quanh lan, bãng −ít, mÐp kh«ng gän, d = mm Nớc bề mặt VK-CB 8a1 Vàng nghệ, tròn, dẹt, bãng −ít, mÐp gän, d = - mm Phân loại chủng vi sinh vật phân lập từ Cát Bà Từ chủng vi sinh vật phân lập đợc sử dụng kít chuẩn sinh hóa API để phân loại số chủng vi khuÈn chiÕm −u thÕ vµ nÊm men Ngoµi kết hợp phân tích trình tự gen 16S rARN để phân loại số chủng vi khuẩn không định tên đợc kit chuẩn sinh hóa API Đặc điểm tế bào Hình thái Gram Ovan dài - Cầu ovan ngắn Ovan nhỏ, xếp chuỗi Cầu ovan nhỏ + Ovan cầu nhỏ - Ovan nhỏ, cầu - Ovan, kết đôi - Que ovan ngắn kết đôi (hình 2A) - Ovan dài - + - Kết phân loại 10 chủng vi khuẩn lựa chọn (bảng 5) cho thấy chủng vi khuẩn Gram âm chiếm u chủng Gram dơng Các chủng Gram âm phân loại đợc thuộc chi: Acinobacter, Pseudomonas, Flavobacterium, Sphingomonas, Ochrobactrum, vi khuẩn Gram dơng có Bacillus, Janibacter Các loài vi khuẩn phân lập có tỷ lệ tơng đồng cao 93 - 100% so với 75 chủng ngân hàng liệu khoá phân loại, ngoại trừ chủng VK-CB 2a1 VK-CB 6a4 xác định đợc đến chi có độ tơng đồng thấp Thế nhng, đặc điểm chủng VK-CB 2a1 nh hình thái khuẩn lạc màu vàng khả di động, đối chiếu với khóa phân loại Bergey chủng thuộc loài Flavobacterium indologenes, chủng VK-CB6a4 thuộc Acinetobacter johsonni Bảng Đặc điểm hình thái số chủng nấm mốc, nấm men xạ khuẩn điển hình STT Mẫu Nớc bỊ mỈt N−íc bỊ mỈt Chđng NMn CB 5a NMn CB 7a N−íc bỊ mỈt XK CB 6a Nớc tầng NM CB 2b1 Trầm tích NM CB 5c2 N−íc bỊ mỈt NM CB 6a1 Hình thái khuẩn lạc Trắng, tròn, bề mặt nhẵn, có tâm trồi lên, mép gọn, d = - mm Hồng, tròn đều, bề mặt nhẵn bóng, mép gọn, d = - mm Ban đầu trơn nhẵn nh vi khuẩn, sau ngày xuất khuẩn ty khí sinh màu trắng khuẩn ty chất hồng nhạt, sau 21 ngày chủng màu xám môi trờng ISP4 Hình thái tế bào, bào tử Hình elíp, nảy chồi nhiều, đứng thành nhóm lớn Hình chanh, nảy chồi nhiều, đứng riêng biệt Cuống sinh bào tử có hình xoắn, bề mặt bào tử dạng nhẵn, chuỗi dài 10-50 bào tử (hình 2B) Chổi tầng, đối xứng gồm Khuẩn lạc màu hồng đến đỏ, mặt vòng metulae, thể bình nhọn đầu trái màu đỏ cam đến đỏ sẫm 3-6 vòng, kích thớc 8-12 Chổi tầng không đối xứng, gồm Bằng phẳng, dạng nhung, màu 2-3 metulae Bào tử trần hình elip lục đỏ, mặt trái không màu, d = 5,5 àm tạo chuỗi dài Gồm d = 3,5 - cm - 10 thể bình Màu lục vàng, dạng nhung, mặt trái Cuống sinh bào tử trần dài Bào màu đen vàng, d = 1,5 - 2,0 cm tử trần hình cầu, d = - àm Bảng Kết phân loại số chủng vi khuẩn Phơng pháp phân loại Độ tơng đồng vesicularis API 20 NE 93,3% CB 2a1 Flavobacterium indologenes API 20 NE 79,1% N−íc bỊ mỈt CB 5a1 Pseudomonas vesicularis API 20 NE 93,3% N−íc bỊ mỈt CB 5a2 Pseudomonas aeruginosa API 20 NE 99,9% N−íc bỊ mỈt CB 6a1 Sphingomonas paucimobilis API 20 NE 99,7% N−íc bỊ mỈt CB 6a4 Acinetobacter johnsonii API 20 NE 89% N−íc bỊ mỈt CB 8a1 Pseudomonas cepacia API 20 NE 99% TrÇm tÝch CB 1c1 Ochrobactrum cytisis 16S r ARN 100% TrÇm tÝch CB 1c2 Bacillus megatherium 16S r ARN 100% 10 N−íc bỊ mỈt CB 2a Janibacter marinus 16S r ARN 100% STT MÉu Chđng N−íc bỊ mỈt CB 1a1 Nớc bề mặt 76 Tên Nấm men, nấm mốc xạ khuẩn chủ yếu Cát Bà bao gồm: Candida, Rhodotorula, Cladosporium, Penicillium Streptomyces (bảng 6) Bảng Kết phân loại số chủng nấm mốc, nấm men, xạ khuẩn STT Mẫu Chủng Tên Nớc tầng Trầm tích Nớc bề mặt Nớc bề mặt Nớc bề mỈt N−íc bỊ mỈt N−íc bỊ mỈt N−íc bỊ mỈt CB 2b1 CB 5c2 CB 6a1 CB 9a2 CB 5a CB 7a CB 4a CB 6a Penicillium duclauxe Penicillium oxalicum Cladosporium sphaerospermum Penicillium oxalicum Candida parasilosis Rhodotorula mucilaginosa Streptomyces celluloflavus Streptomyces sclerotialus Phơng pháp phân loại Theo B Raper Theo B Raper Theo W Gams Theo B Raper API 20 C AUX (93%) API 20 C AUX (99,9%) 16S rARN (100%) ISP A B C D Hình Cây phát sinh chủng loại chủng vi sinh vật A VK CB 1c1; B VK CB 1c2; C VK CB 2a; D XK CB 4a 77 Kết phân loại b»ng 16S rARN cña mét sè chñng vi khuÈn lùa chọn đợc thể phát sinh chủng loại (hình 3) Từ kết phân loại nªu ë trªn cã thĨ thÊy vi sinh vËt th−êng gặp biển đảo Cát Bà là: Acinetobacter, Pseudomonas, Flavobacterium, Bacillus, Janibacter, Sphingomonas, Ochrobactrum, Candida, Rhodotorula, Cladosporium, Penicillium vµ Streptomyces So sánh với tài liệu nghiên cứu vùng biển giới vi sinh vật Cát Bà có số điểm khác biệt nh: u thuộc vi khuẩn Gram âm phân nhóm gama proteobacteria (Acinetobacter, Pseudomonas ) mẫu nớc biển Cát Bà cha thấy xuất vi khuẩn Cytophaga, loài vi khuẩn thờng xuyên có mặt nớc biển Nhật Bản Theo Akihiko Maruyama Michinari Sunamura (năm 2006), kết phân tích khu hệ vi sinh vËt n−íc biĨn ®· thĨ hiƯn −u thÕ thc vỊ nhãm alpha vµ gama proteobacteria (Cytophaga Flavobacterium vµ Actinobacteria) [6] Một số kết nghiên cứu đa dạng vi sinh vật vùng vịnh Great South đợc nhà khoa học Mỹ công bố cho thấy, vào tháng mùa hè vi khuẩn Cytophaga tăng tới 28 %, vào mùa đông vi khuẩn Alteromonas Pseudoalteromonas lại chiếm tỷ lệ vợt trội, tới 61% quần thể [3] sinh hóa khóa phân loại, kết hợp với kết phân tích 16S rARN, xác định đợc vị trí phân loại đa dạng số loài vi sinh vật đảo Cát Bà nh sau: Acinetobacter johnsonii, Pseudomonas vesicularis, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas cepacia, Flavobacterium indologenes, Sphingomonas paucimobilis, Ochrobactrum cytisis, Janibacter marinus, Bacillus megatherium, Cladosporium spherospermum, Penicillium oxalicum, Candida parasilosis, Rhodotorula musilaginosa, Streptomyces celluloflavus vµ Streptomyces sclerotialus III KÕT LUËN Sunamura M., Maruyama A., 2006: FEMS Microbiology Ecology, 50(1): 159166 Kết phân tích vi sinh vật mẫu nớc trầm tích lấy từ độ sâu - 12 m khu vực đảo Cát Bà cho thấy số lợng nhóm vi sinh vật mẫu trầm tích cao so với mẫu nớc bề mặt từ 101-103 lần Thành phần nhóm vi sinh vật đa dạng, bao gåm: Vi khuÈn HK, LM, SDHC, NTiH, NTaH, KN, vi khuẩn KSF, NM, NMn XK với số lợng nh sau: HK 105-107; LM 104-107; SDHC 104-105, NTiH 101-105, NTaH 101-106, KN 5.101-106; KSF 101-105 CFU/ml, NM 4.101-105, NMn 2.101 CFU/ml XK 101 CFU/ml Dựa vào đặc điểm hình thái, sinh lý 78 TàI LIệU THAM KHảO Carlos Pedrãs-Aliã, 2006: Trends in Microbiology, 14(6): 257-263 Head I M., Jones D M., Roling W F M., 2006: Nature reviews Microbiology, 4(3): 173-182 Karen K M., Chistoserdov A Y., 2001: FEMS Microbiology Ecology, 35(1): 85-95 Lại Thúy Hiền cs., 2005: Hội nghị môi trờng toµn quèc: 1573-1581 Lai Thuy Hien et al., 2004: The 2nd seminar on Environmental Science and technology issues related to urban and coastal zones development: 239-247 Sunamura M et al., 2004: Appl Environ Microbiol, 70(2): 1190 - 1198 Nguyễn Thị Cẩm, Nguyễn Thị Khánh, 2005: Báo cáo đánh giá tác động môi trờng Đại học dân lập Hải Phòng: 9-22 Nguyễn Văn Long, Lại Thúy Hiền, Hoàng Hải, Nguyễn Thu Huyền, 2004: Hội nghị toàn quốc nghiên cứu khoa học sống: 93-96 10 Fell J W., 2001: Methods in Microbiology, 30: 347-355 MICROBIAL DIVERSITY IN CATBA ISLAND PART 1: THE NUMBER AND DISTRIBUTION Lai Thuy Hien, Vuong Thi Nga Nguyen Thi Yen, Nguyen Ba Tu SUMMARY Catba one of the world biosphere reserves admitted by UNESCO in 2004 consists 367 islands located in Lanha bay and contains all biodiversity-reserved values Despite the number of scientific reports focus on the diversity of Catba marine animals and plants, valuable researches on microbial communities, which play an essential role in nature element cycles and have many potential uses, is still lacking Recently, we have carried out a survey to assess the microbial potential in Catba marine water The analyzed data on microorganisms in Catba marine water and sediment showed that the distribution and the quantity of each individual microorganism were different according to the depth: the quantities of microorganisms in the sediment samples were higher than those in the marine water samples from 10-103 fold The number of each microorganism was various: 105 - 3.4 × 107 aerobic, 104 - 107 fermentative, 104 - × 105 hydrocarbon utilizing, 101 - × 105 sulfate-reducing and 101 - 106 nitrogen conversion bacteria Fungi and yeast are present in only few collected samples with low number Classification of the dominant microorganisms based on their morphology, chemo taxonomy or 16S r RNA sequence analysis exhibited that they are belonging to the species: Acinetobacter johnsonii, Pseudomonas vesicularis, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas cepacia, Flavobacterium indologenes, Sphingomonas paucimobilis, Ochrobactrum cytisis, Janibacter marinus, Bacillus megatherium, Cladosporium spherospermum, Penicillium oxalicum, Candida parasilosis and Rhodotorula musilaginosa, Streptomyces celluloflavus, Streptomyces sclerotialus This preliminary result is important step towards applying the useful microorganisms for environmental pollution control and limiting the effect of harmful microorganisms Ngµy nhËn bµi: 17-5-2007 79 ... nh− sinh th¸i biĨn b Sè lợng thành phần số nhóm vi sinh vật Vì vai trò quan trọng nhóm vi sinh vật này, tiến hành xác định phân bố số lợng chúng nớc biển Cát Bà Kết cho thấy khu hệ vi sinh vật. .. ngày) Hình Hình thái tế bào vµ bµo tư mét sè chđng vi sinh vËt 74 Kết cho thấy giống với kết đa dạng vi sinh vật thu đợc nớc biển Cát Bà, nhiên chủng vi sinh vật Cát Bà có khả chuyển hóa không... 8a1 Vàng nghệ, tròn, dĐt, bãng −ít, mÐp gän, d = - mm Phân loại chủng vi sinh vật phân lập từ Cát Bà Từ chủng vi sinh vật phân lập đợc sử dụng kít chuẩn sinh hóa API để phân loại số chđng vi khn