Luận án với mục tiêu đánh giá được tương đương sinh học của chế phẩm Metformin sản xuất trong nước (Glucofine) với chế phẩm đối chiếu là Glucophage của nhà phát minh Merck Santé s.a.s. Đánh giá được tương đương điều trị giữa hai chế phẩm này trên bệnh nhân đái tháo đường typ 2. Mời các bạn cùng tham khảo luận án để nắm chi tiết nội dung nghiên cứu.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI - PHAN QUỲNH LAN NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC VÀ TƯƠNG ĐƯƠNG ĐIỀU TRỊ CỦA VIÊN METFORMIN (GLUCOFINE®) SẢN XUẤT TRONG NƯỚC Chuyên ngành: Dược lâm sàng Mã số: 62.73.05.05 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI – 2010 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HOÀN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Hoàng Thị Kim Huyền PGS TS Đỗ Trung Qn Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc gia Việt Nam Thư viện Trường Đại học Dược Hà Nội DANH MỤC NHỮNG CÔNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ ĐÃ CƠNG BỐ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Phan Quỳnh Lan, Hoàng Kim Huyền, Vũ Đình Hòa, Nguyễn Tứ Sơn (2008), Xác định nồng độ metforrmin huyết tương người HPLC, Tạp chí Dược học, số 385, trang 27-31, 44 Phan Quỳnh Lan, Hoàng Kim Huyền, Đỗ Trung Quân, Đỗ Thị Nguyệt Ánh, Trịnh Trung Hiếu (2009), Đánh giá hiệu Glucofine điều trị đái tháo đường typ 2, Tạp chí Dược học, số 396, trang 14-18 Phan Quỳnh Lan, Hoàng Kim Huyền, Nguyễn Tứ Sơn, Trịnh Trung Hiếu (2010), Đánh giá tương đương in vitro tương đương sinh học in vivo chế phẩm metformin, Tạp chí Dược học, số 408, trang 710 1 MỞ ĐẦU Tính cấp thiết luận án Metformin, thuốc uống chống đái tháo đường thuộc nhóm biguanid, thuốc khuyến cáo lựa chọn hàng đầu điều trị cho bệnh nhân đái tháo đường (ĐTĐ) typ 2, đặc biệt bệnh nhân thừa cân, béo phì Tuy nhiên, tỉ lệ bệnh nhân gặp tác dụng không mong muốn (TDKMM) dùng thuốc cao từ 5-50% khoảng 6% bệnh nhân phải ngừng điều trị TDKMM thuốc Tính đến tháng năm 2010, có tới 147 chế phẩm metformin cấp phép lưu hành Việt Nam (85 chế phẩm ngoại nhập 62 chế phẩm sản xuất nước) Giá chế phẩm sản xuất nước 1/3 đến 1/4 so với biệt dược gốc nhà phát minh Vào thời điểm nghiên cứu bắt đầu triển khai, quy định thức đánh giá tương đương sinh học (TĐSH) xin cấp phép lưu hành sản phẩm chưa áp dụng Việt Nam (Quy định nộp hồ sơ đánh giá TĐSH đăng ký lưu hành thuốc Việt Nam vừa ban hành ngày 26/4/2010) Vì vậy, khó khẳng định chất lượng chế phẩm metformin sản xuất nước, làm sở để bác sĩ, bệnh nhân lựa chọn thuốc điều trị, đảm bảo tính hiệu quả, an toàn, kinh tế Các nghiên cứu đánh giá TĐSH, chất so sánh mức độ tốc độ hấp thu hoạt chất vào vòng tuần hồn chung chế phẩm liệu có phản ánh tương đương điều trị (TĐĐT) lâm sàng thuốc có nhiều TDKMM metformin hay khơng câu hỏi chưa có lời giải đáp Chính vậy, cơng trình nghiên cứu đánh giá tồn diện TĐSH TĐĐT chế phẩm metformin sản xuất nước so với chế phẩm gốc cần thiết để góp phần xây dựng tiêu chuẩn đánh giá chất lượng chế phẩm metformin Mục tiêu luận án Đánh giá tương đương sinh học chế phẩm metformin sản xuất nước (Glucofine) với chế phẩm đối chiếu Glucophage nhà phát minh Merck Santé s.a.s Đánh giá tương đương điều trị hai chế phẩm bệnh nhân đái tháo đường typ Những đóng góp luận án Đã lựa chọn, thẩm định phương pháp định lượng metformin huyết tương xây dựng mơ hình thử TĐSH phù hợp, áp dụng để đánh giá TĐSH cho chế phẩm metformin Việt Nam Lần công bố thông số dược động học metformin người tình nguyện Việt Nam khỏe mạnh sau uống chế phẩm viên nén 850mg, làm sở khoa học cho nghiên cứu lĩnh vực dược động học sau 2 Lần nghiên cứu TĐSH TĐĐT Glucofine (chế phẩm metformin sản xuất nước) so với chế phẩm gốc Số liệu thu cho phép đánh giá chất lượng chế phẩm, giúp nhà sản xuất nhìn nhận lại sản phẩm qui trình sản xuất Trên sở phân tích bàn luận kết thu được, nghiên cứu đóng góp ý kiến góp phần xây dựng quy chế thử TĐSH TĐĐT nói chung đánh giá metformin nói riêng Cấu trúc luận án Gồm 132 trang, 43 bảng, 15 hình, 127 tài liệu tham khảo (bằng tiếng Việt tiếng Anh) Bố cục sau: đặt vấn đề trang; tổng quan 33 trang; đối tượng, vật liệu phương pháp nghiên cứu 21 trang; kết nghiên cứu 41 trang; bàn luận 32 trang; kết luận đề xuất trang; danh mục báo công bố liên quan đến luận án trang; tài liệu tham khảo 12 trang; luận án có phụ lục NỘI DUNG CỦA LUẬN ÁN CHƯƠNG TỔNG QUAN Tổng quan chia làm phần chính: Tổng quan điều trị đái tháo đường typ 2, tổng quan metformin, đánh giá tương đương sinh học tương đương điều trị chế phẩm metformin Phần tổng quan điều trị đái tháo đường typ trình bày mục tiêu điều trị, liệu trình điều trị (bằng thuốc) biện pháp không dùng thuốc điều trị đái tháo đường typ Phần tổng quan metformin bao gồm nội dung: cấu tạo hố học, tính chất lý hố đặc tính sinh dược học, chế tác dụng, dược động học, định, tác dụng metformin điều trị ĐTĐ typ điểm lưu ý sử dụng metformin lâm sàng Phần đánh giá TĐSH TĐĐT chế phẩm metformin gồm tổng quan khái niệm có liên quan đến đánh giá TĐSH TĐĐT; tổng quan nghiên cứu đánh giá TĐSH TĐĐT chế phẩm metformin CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.1 Thuốc nghiên cứu o Chế phẩm thử: Glucofine viên nén 850 mg công ty cổ phần xuất nhập y tế Đồng Tháp (Việt Nam) sản xuất o Chế phẩm đối chiếu: Glucophage viên nén 850 mg công ty Merck Santé s.a.s (Pháp) sản xuất 2.1.2 Người tình nguyện cho nghiên cứu TĐSH: 18 người tình nguyện khỏe mạnh, nam giới, đạt tiêu chuẩn lựa chọn tiêu chuẩn loại trừ theo hướng dẫn đánh giá TĐSH 3 2.1.3 Bệnh nhân cho nghiên cứu TĐĐT: 100 bệnh nhân ĐTĐ typ 2, đạt tiêu chuẩn lựa chọn loại trừ nghiên cứu, hoàn thành 12 tuần điều trị metformin (chế phẩm thử đối chiếu) Để đánh giá TDKMM, ghi nhận tất bệnh nhân tham gia nghiên cứu, có dùng thuốc nghiên cứu (64 bệnh nhân dùng Glucofine 58 bệnh nhân dùng Glucophage) 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Đánh giá tương đương hòa tan in vitro Glucofine Glucophage Tiến hành theo hướng dẫn chung Dược điển Mỹ USP 30, phương pháp thử độ hòa tan ghi tiêu chuẩn sở thuốc nghiên cứu hướng dẫn FDA Mỹ Xác định hệ số tương đồng f2 hai chế phẩm mơi trường hòa tan Hai chế phẩm tương đương hòa tan f2 đạt 50 2.2.2 Lựa chọn thẩm định phương pháp định lượng metformin huyết tương người - Lựa chọn phương pháp: tổng quan tài liệu, từ tiến hành khảo sát lựa chọn phương pháp phù hợp với điều kiện thí nghiệm - Thẩm định phương pháp:tiến hành thẩm định đầy đủ phương pháp định lượng vừa lựa chọn theo hướng dẫn FDA Mỹ bao gồm tiêu chuẩn: tính chọn lọc, đường chuẩn khoảng tuyến tính, giới hạn định lượng dưới, độ - độ xác, độ tìm lại, độ ổn định 2.2.3 Phương pháp nghiên cứu đánh giá TĐSH 2.2.3.1 Thiết kế nghiên cứu: nghiên cứu ngẫu nhiên, chéo, hai giai đoạn, hai trình tự thử thuốc, đơn liều người tình nguyện (hình 2.1) Người tình nguyện NHĨM NHĨM GIAI ĐOẠN I Uống Glucophage Lấy máu Uống Glucofine Lấy máu GIAI ĐOẠN II (cách giai đoạn tuần) Uống Glucophage Lấy máu Uống Glucofine Lấy máu Hình 2.1 Sơ đồ thiết kế nghiên cứu TĐSH metformin 2.2.3.2 Phương pháp lấy xử lý mẫu máu Phương pháp lấy mẫu máu: Người tình nguyện phải nhịn ăn từ 20h tối hôm trước ngày lấy mẫu Thuốc uống vào khoảng 6-7h sáng tư đứng với 200 ml nước tinh khiết đóng chai Lịch lấy mẫu máu: người tình nguyện lấy máu 13 điểm vòng 12 tại: trước uống (0 giờ) 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 5,0; 6,0; 8,0; 12,0 sau uống metformin Số lượng máu mẫu: ml máu tĩnh mạch Xử lý mẫu máu: ly tâm, tách huyết tương, nút kín, dán nhãn có mã hoá, bảo quản -350C định lượng 4 Việc khám lâm sàng, xét nghiệm, cho uống thuốc, lấy mẫu máu thực khoa Nội, bệnh viện Việt Nam - Cuba 2.2.3.3 Phân tích dược động học đánh giá kết TĐSH Từ kết định lượng nồng độ thuốc máu theo thời gian, sử dụng phần mềm Winnolin 5.1 để tính tốn thông số dược động So sánh thông số dược động học Cmax, AUC0-12, AUC0-inf thuốc thử với thuốc đối chứng Các thông số chuyển logarith tự nhiên Phân tích phương sai (ANOVA), xác định khoảng tin cậy (CI) 90% sai khác hai giá trị trung bình hai chế phẩm nghiên cứu Kết luận chế phẩm đạt tương đương sinh học CI 90% tỷ lệ giá trị trung bình Cmax, AUC0-12, AUC0-inf chế phẩm nằm giới hạn 80% - 125% 2.2.4 Phương pháp nghiên cứu đánh giá TĐĐT 2.2.4.1 Thiết kế nghiên cứu: thử nghiệm ngẫu nhiên, có đối chứng, tiến hành song song 2.2.4.2 Quy trình nghiên cứu: hình 2.2 2.2.4.3 Chỉ tiêu nghiên cứu Đánh giá hiệu thuốc sau q trình điều trị hai nhóm bệnh nhân (BN) thông qua so sánh tiêu sau: - Tác dụng kiểm soát glucose huyết (HbA1C nồng độ glucose huyết lúc đói) - Tác dụng tính kháng insulin (nồng độ insulin huyết lúc đói số HOMA-IR) - Tác dụng số: số khối thể, cân nặng, lipid huyết Ngoài ra, ghi nhận TDKMM thuốc gặp hai nhóm So sánh biểu tỉ lệ gặp TDKMM, tỉ lệ BN ngừng nghiên cứu TDKMM thuốc 2.2.4.4 Xử lý số liệu Số liệu sau thu thập xử lý phần mềm SPSS 13.0 Để so sánh tỷ lệ nhóm: sử dụng kiểm định χ2; để so sánh số trung bình: sử dụng kiểm định T không ghép cặp Mann-Whitney U (so sánh nhóm) sử dụng kiểm định dấu xếp hạng Wilcoxon X (so sánh trước – sau) Sự khác biệt coi có ý nghĩa thống kê P0,05# : kiểm định χ2 Nhận xét: TDKMM đường tiêu hóa gặp hai nhóm tương tự với biểu gồm: tiêu chảy, chán ăn, nơn/buồn nơn, đau bụng, khó tiêu Tiêu chảy TDKMM gặp nhiều nhất: 31,3% nhóm Glucofine 15,5% nhóm Glucophage Sự khác biệt tỉ lệ gặp tiêu chảy hai nhóm khác có ý nghĩa thống kê (P0,05# : kiểm định χ # Nhận xét: Tỉ lệ bệnh nhân phải ngừng nghiên cứu TDKMM nhóm Glucofine Glucophage 7,8% 6,9%, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê Các 13 trường hợp ngừng nghiên cứu TDKMM xảy 10 ngày dùng thuốc CHƯƠNG BÀN LUẬN 4.1 Về thuốc nghiên cứu Metformin lưu hành thị trường gồm có loại hàm lượng: viên 500mg, 850mg 1000mg; viên 1000mg sử dụng lâm sàng Các chế phẩm metformin sản xuất nước dạng bào chế qui ước, viên nén giải phóng hoạt chất Căn theo hướng dẫn TCYTTG, tiến hành nghiên cứu TĐSH cần chọn loại hàm lượng chế phẩm cao có thị trường, để phù hợp cho nghiên cứu TĐSH TĐĐT, lựa chọn viên nén Glucofine, hàm lượng 850mg làm chế phẩm thử chế phẩm đối chiếu viên nén Glucophage 850mg lưu hành Việt Nam Merck Santé s.a.s Pháp sản xuất Hai lô thuốc dùng nghiên cứu kiểm nghiệm lại viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương, theo tiêu chuẩn USP 30, cho kết đạt tiêu chuẩn 4.2 Đánh giá tương đương hòa tan in vitro Nghiên cứu đánh giá độ hòa tan thực nhằm hai mục đích: đảm bảo chất lượng đánh giá thay cho thử TĐSH in vivo Chính vậy, bước để đánh giá so sánh chất lượng Glucofine Glucophage, thử nghiệm so sánh độ hòa tan hai chế phẩm thực Kết cho thấy, ba mơi trường có pH khác nhau, hai chế phẩm hòa tan nhanh (trên 85% hoạt chất hòa tan vòng 30 phút), hệ số tương đồng f2 đạt giá trị lớn 50, độ lệch chuẩn tương đối (RSD) tỉ lệ hòa tan thời điểm 50) Trong nghiên cứu này, chế phẩm thử đối chiếu khơng có độ hòa tan nhanh ba môi trường tiến hành thử nghiệm (phải có 85% hoạt chất hòa tan vòng 15 phút) Như vào yếu tố độ hòa tan, Glucofine khơng xem xét miễn thử in vivo theo hướng dẫn TCYTTG Do đó, để đánh giá khả thay thuốc thử, thiết phải tiến hành đánh giá TĐSH in vivo 4.3 Phương pháp định lượng metformin huyết tương Phương pháp xử lý mẫu điều kiện sắc ký lỏng hiệu cao lựa chọn phù hợp với điều kiện phòng thí nghiệm sẵn có mơn Dược lâm sàng, trường đại học Dược Hà Nội, phù hợp để áp dụng nghiên cứu đánh giá TĐSH chế phẩm metformin Phương pháp thẩm định đầy đủ, cho thấy đáp ứng yêu cầu 14 theo hướng dẫn FDA Mỹ thẩm định phương pháp định lượng thuốc dịch sinh học 4.4 Đánh giá TĐSH người tình nguyện khỏe mạnh 4.4.1 Người tình nguyện 18 người tình nguyện (NTN) nam giới khỏe mạnh tham gia hoàn thành nghiên cứu theo đề cương phê duyệt Theo hướng dẫn thử TĐSH, số lượng NTN phải tính tốn để đảm bảo hiệu lực thống kê nghiên cứu TĐSH, với cỡ mẫu tối thiểu 12 cho nghiên cứu thiết kế chéo Do chưa có nghiên cứu TĐSH metformin tiến hành Việt Nam công bố, nên số liệu độ biến thiên nồng độ thuốc máu để làm sở tính cỡ mẫu cho nghiên cứu Với cỡ mẫu 18, tiến hành tính độ mạnh thống kê phần mềm Winnolin 5.1, kết cho thấy độ mạnh thống kê tương ứng với thông số AUC0-t, AUC0-inf Cmax đạt 94% (thông thường yêu cầu độ mạnh thống kê cho nghiên cứu TĐSH 80%) Như với nghiên cứu TĐSH metformin, thiết kế đơn liều, chéo, hai giai đoạn, hai trình tự thử, cỡ mẫu 18 người đủ đạt yêu cầu 4.4.2 Thiết kế nghiên cứu Nghiên cứu thiết kế ngẫu nhiên, đơn liều, theo mơ hình chéo, hai giai đoạn, hai trình tự thử thuốc Đây mơ hình ưu tiên lựa chọn hàng đầu nghiên cứu đánh giá TĐSH Thời gian bán thải metformin khoảng 1,5 - 4,5h nên thời gian nghỉ hai giai đoạn tuần đảm bảo thải trừ hết thuốc giai đoạn trước, tránh hiệu ứng tồn lưu hai giai đoạn Chương trình lấy mẫu máu thiết kế đạt yêu cầu: có điểm trước liều, điểm trước Cmax, điểm xung quanh Cmax đến điểm pha thải trừ Thời điểm lấy mẫu máu cuối 12 phù hợp, đảm bảo AUC0-t đạt 80% so với AUC0-inf 4.4.3 Các thông số dược động học: mức độ tốc độ hấp thu metformin Từ kết thu nhận thấy giá trị Cmax AUC thu nghiên cứu tương đồng so với kết có từ nghiên cứu đánh giá SKD/TĐSH viên nén metformin 850mg công bố Sự biến thiên nồng độ cá thể metformin tương đối lớn, thể uống chế phẩm thử chế phẩm đối chiếu (RSD>20%) Nhưng điều không ngoại lệ tham khảo nghiên cứu TĐSH khác metformin nhiều chế phẩm thuốc khác Chính có biến thiên lớn vậy, nghiên cứu phải có số mẫu đủ lớn thiết kế chặt chẽ để đảm bảo độ mạnh thống kê 4.4.4 Kết luận TĐSH hai chế phẩm: vào hướng dẫn FDA Mỹ, hai chế phẩm đạt TĐSH CI 90% thông số Cmax, AUC0-12 AUC0-inf nằm giới hạn 80- 125% 15 4.5 Đánh giá TĐĐT bệnh nhân đái tháo đường typ 4.5.1 Hiệu điều trị - Hiệu kiểm soát glucose huyết: Hai tiêu để đánh giá hiệu kiểm soát glucose huyết metformin nồng độ glucose huyết lúc đói tỉ lệ HbA1C Kết thu nghiên cứu mức độ giảm glucose huyết lúc đói HbA1C sau 12 tuần điều trị thuốc thử đối chiếu tương tự kết số thử nghiệm lâm sàng có điều kiện nghiên cứu tương đồng công bố So sánh hiệu giảm glucose huyết lúc đói HbA1C sau trình nghiên cứu nhận thấy khơng có khác biệt hai nhóm bệnh nhân dùng Glucofine Glucophage (P>0,05) - Hiệu tính kháng insulin: Tác dụng metformin tính kháng insulin đánh giá nồng độ insulin máu lúc đói số kháng insulin HOMAIR So sánh mức độ giảm nồng độ insulin máu lúc đói hai nhóm nghiên cứu sau thời gian dùng thuốc nhận thấy, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (P>0,05) Kết tương tự với thay đổi số HOMA-IR: mức độ giảm HOMA-IR hai nhóm khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (P>0,05) - Các tác dụng khơng mong muốn gặp hai nhóm nghiên cứu Các TDKMM gặp hai nhóm chủ yếu đường tiêu hóa, TDKMM metformin ghi nhận y văn Tỉ lệ gặp TDKMM nói chung nhóm Glucofine (50,0%) cao so với nhóm Glucophage (31,0%) (P0,05) - Ngồi ra, thay đổi số khối thể, cân nặng số lipid máu hai nhóm khác khơng có ý nghĩa thống kê (P>0,05) - Tỉ lệ bệnh nhân gặp TDKMM nói chung bị tiêu chảy nhóm Glucofine cao nhóm Glucophage có ý nghĩa thống kê (P