Đang tải... (xem toàn văn)
Mục tiêu của luận án là xác định được thành phần, tính đa dạng các loài thuộc nhóm nấm ĐTHT tại VQG Hoàng Liên và cơ sở khoa học trong việc nuôi trồng loài nấm Đông trùng hạ thảo bông tuyết (Isaria tenuipes).
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NƠNG NGHIỆP VÀ PTNT VIỆN KHOA HỌC LÂM NGHIỆP VIỆT NAM HỒNG QUỐC BẢO ĐIỀU TRA THÀNH PHẦN LỒI NẤM ĐƠNG TRÙNG HẠ THẢO TẠI VƯỜN QUỐC GIA HỒNG LIÊN VÀ NGHIÊN CỨU NI TRỒNG LỒI ĐƠNG TRÙNG HẠ THẢO BƠNG TUYẾT (ISARIA TENUIPES) LN AN TIÊN SY LÂM NGHIÊP ̣ ́ ́ ̃ ̣ CHUYÊN NGHÀNH ĐÀO TẠO : MÃ SỐ RỪNG : 9620211 : GS.TS. PHẠM QUANG THU NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC QUẢN LÝ TÀI NGUN i LỜI CAM ĐOAN Luận án được hồn thành trong chương trình đào tạo tiến sĩ khóa 27 (2015 2018) tại Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam. Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu này là của bản thân tơi. Các kết quả trình bày trong luận án là trung thực. Nếu có gì sai sót, tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm Hà Nội, ngày tháng 01 năm 2019 Nghiên cứu sinh Hồng Quốc Bảo ii LỜI CẢM ƠN Luận án này được hồn thành trong chương trình đào tạo nghiên cứu sinh khóa 27, giai đoạn 2015 2019 tại Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam. Trong q trình thực hiện và hồn thành luận án, tác giả nhận được rất nhiều sự giúp đỡ, tạo điều kiện của tập thể lãnh đạo, các nhà khoa học, cán bộ nghiên cứu thuộc: Trung tâm Nghiên cứu Bảo vệ rừng, Ban Đào tạo và Hợp tác quốc tế, Lãnh đạo Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam ; Lãnh đạo UBND tỉnh Lào Cai, Văn phòng UBND tỉnh Lào Cai, Tỉnh đồn Lào Cai, VQG Hồng Liên Tơi xin bày tỏ lòng cảm ơn chân thành về sự giúp đỡ q báu đó Xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới GS.TS. Phạm Quang Thu thầy giáo trực tiếp hướng dẫn đã dành nhiều thời gian và cơng sức chỉ bảo cho Tơi hồn thành luận án này Trân trọng cảm ơn các đồng chí lãnh đạo, nghiên cứu viên, kỹ thuật thuật viên Trung tâm Nghiên cứu Bảo vệ rừng đã ln tạo điều kiện tốt nhất, hỗ trợ Tơi trong suốt q trình nghiên cứu và hồn thành luận án này Xin chân thành cảm ơn bạn bè, đồng nghiệp và gia đình đã động viên, khích lệ, tạo điều kiện và giúp đỡ Tơi trong suốt q trình thực hiện và hồn thành luận án Luận án được hồn thiện trên cơ sở tham khảo nhiều tài liệu có liên quan, ý kiến đóng góp của nhiều nhà chun mơn và nỗ lực của tác giả. Tuy nhiên do điều kiện và thời gian còn hạn chế, khó tiếp cận các kết quả nghiên cứu nên luận án khơng tránh khỏi những thiếu sót. Tác giả rất mong iii nhận được ý kiến đóng góp, xây dựng của các nhà khoa học cũng như của bạn bè đồng nghiệp để luận án được hồn thiện Xin chân thành cảm ơn! iv MỤC LỤC Trang DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, BIỂU ĐỒ xi Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 67 Trong số 18 lồi thu có hai loài thuộc chi Beauveria với số lần bắt gặp cao (23 mẫu) xuất tất đợt điều tra, điều cho thấy tác dụng lồi diệt trừ lồi trùng, hiệu ứng dụng phòng trừ sinh học lồi thuộc chi Cordycep, lồi Cordyceps militaris có giá trị dược liệu cao, nuôi trồng rộng rãi sử dụng nhiều y học nước phát triển Trung Quốc, Hàn Quốc… bắt gặp nhiều độ cao từ 1.900 đến 2.200 m so với mực nước biển Loài Isaria tenuipes loại dược liệu truyền thống Trung Quốc, Nhật Bản nuôi trồng quy mô công nghiệp Hàn Quốc thu số lượng mẫu lớn, đối tượng nghiên cứu nội dung đề tài Các lồi lại có tần suất xuất phổ biến 70 Tính đa dạng thành phần lồi tần suất xuất lồi nấm Đơng trùng hạ thảo VQG Hồng Liên trình bày bảng 3.2: 100 KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ 138 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT VÀ CÁC KÝ HIỆU Chữ viết tắt Chữ viết đầy đủ ĐTHT Đông trùng hạ thảo rAND Ribosom Acid Deoxyribo Nucleic EPF Nấm ký sinh côn trùng Entomology phathogenic fungi PDA Potato Dextrose Agar PYEG Peptone Yeast Extract Glucose CSA Carrot extract Sucrose Agar MEA Malt Extract Agar VQG Lsd Fpr Vườn Quốc gia Khoảng sai dị Xác suất kiểm tra của F vi DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, BIỂU ĐỒ xi Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 1.2. Hình thái và cấu trúc sợi nấm 14 1.2. Hình thái và cấu trúc sợi nấm 14 1.2.3. Quả thể đệm 16 1.2.3. Quả thể đệm 16 Thể quả đệm (Stroma/stromata): Là các thể đệm giống như sợi nấm, các khối sợi nhỏ tạo thành thể quả đệm, chúng được hình thành bởi nhiều sợi nấm. Các thể mang bảo tử (thể quả) được hình thành trên thể quả đệm (Kirk at al., 2001) [75]. 16 Thể quả đệm (Stroma/stromata): Là các thể đệm giống như sợi nấm, các khối sợi nhỏ tạo thành thể quả đệm, chúng được hình thành bởi nhiều sợi nấm. Các thể mang bảo tử (thể quả) được hình thành trên thể quả đệm (Kirk at al., 2001) [75]. 16 1.2.4. Nang nấm 16 1.2.4. Nang nấm 16 Nang là một khoang kín mà bào tử hình thành bên trong nó. Nang có thể được tạo thành từ một tế bào duy nhất hoặc có thể là đa bào. Nang bào tử có thể sản sinh ra bào tử thơng qua ngun phân, nhưng đối với nhiều loại nấm, nang bào tử là địa điểm diễn ra giảm phân và sản sinh ra các bào tử đơn bội khác biệt về mặt di truyền. 16 Nang là một khoang kín mà bào tử hình thành bên trong nó. Nang có thể được tạo thành từ một tế bào duy nhất hoặc có thể là đa bào. Nang bào tử có thể sản sinh ra bào tử thơng qua ngun phân, nhưng đối với nhiều vii loại nấm, nang bào tử là địa điểm diễn ra giảm phân và sản sinh ra các bào tử đơn bội khác biệt về mặt di truyền. 16 Ở nấm lớp sinh sản thường nằm ở đáy nang hay trên bề mặt các nang quả. Chúng thường sắp xếp thành dạng bờ rào, được tạo thành từ nang, sợi nang hoặc sợi bên. Sợi nang có nguồn gốc từ sợi đơn bội 1n, thường nằm xen kẽ giữa các nang, thường có kích thước nhỏ hơn nang. Sợi bên thường thấy phần cổ của một số nang quả hình chai, thường ngắn hơn nhiều so với sợi nang và chỉ làm nhiệm vụ bảo vệ (Trịnh Tam Kiệt., 2014) [15]. 16 Ở nấm lớp sinh sản thường nằm ở đáy nang hay trên bề mặt các nang quả. Chúng thường sắp xếp thành dạng bờ rào, được tạo thành từ nang, sợi nang hoặc sợi bên. Sợi nang có nguồn gốc từ sợi đơn bội 1n, thường nằm xen kẽ giữa các nang, thường có kích thước nhỏ hơn nang. Sợi bên thường thấy phần cổ của một số nang quả hình chai, thường ngắn hơn nhiều so với sợi nang và chỉ làm nhiệm vụ bảo vệ (Trịnh Tam Kiệt., 2014) [15]. 16 1.2.5. Bào tử nấm 16 1.2.5. Bào tử nấm 16 Giới Nấm (Fungi) bao gồm sinh vật nhân chuẩn dị dưỡng có thành tế bào bằng kitin. Phần lớn nấm phát triển dưới dạng các sợi đa bào được gọi là sợi nấm (hyphae) tạo nên hệ sợi (mycelium), một số nấm khác lại phát triển dưới dạng đơn bào. Q trình sinh sản (hữu tính hoặc vơ tính) của nấm thường là qua bào tử, được tạo ra trên những cấu trúc đặc biệt hay quả thể. Một số lồi mất khả năng tạo nên những cấu trúc sinh sản đặc biệt và nhân lên qua hình thức sinh sản sinh dưỡng. 17 viii Giới Nấm (Fungi) bao gồm sinh vật nhân chuẩn dị dưỡng có thành tế bào bằng kitin. Phần lớn nấm phát triển dưới dạng các sợi đa bào được gọi là sợi nấm (hyphae) tạo nên hệ sợi (mycelium), một số nấm khác lại phát triển dưới dạng đơn bào. Q trình sinh sản (hữu tính hoặc vơ tính) của nấm thường là qua bào tử, được tạo ra trên những cấu trúc đặc biệt hay quả thể. Một số lồi mất khả năng tạo nên những cấu trúc sinh sản đặc biệt và nhân lên qua hình thức sinh sản sinh dưỡng. 17 Bào từ hữu tính: Bao gồm bào tử nang được hình thành trong nang và bào tử đảm được hình thành trên đảm với những phần đế trên đó đảm bào tử đính, còn được gọi là tiểu bính. Bào tử hữu tính rất khác nhau về kích thước, hình dạng, màu sắc, lỗ nảy mầm. Ở phần lớn nấm bào tử hay đảm bào tử của chúng đơn bào nhưng ở một số nấm khác nang hay đảm bào tử hình thành vách ngăn và trở nên đa bào. Bào tử nang hay bào tử đảm của phần lớn nấm chỉ có một lớp màng, tuy nhiên có loại có cấu trúc bào tử hai lớp màng. Ở một số nấm bào tử hữu tính có thể nảy mầm cho bào tử thứ sinh giống như bào tử ban đầu về hình dạng, kích thước, cũng có khi trở thành các bào tử bụi sau khi nảy mầm. 17 Bào từ hữu tính: Bao gồm bào tử nang được hình thành trong nang và bào tử đảm được hình thành trên đảm với những phần đế trên đó đảm bào tử đính, còn được gọi là tiểu bính. Bào tử hữu tính rất khác nhau về kích thước, hình dạng, màu sắc, lỗ nảy mầm. Ở phần lớn nấm bào tử hay đảm bào tử của chúng đơn bào nhưng ở một số nấm khác nang hay đảm bào tử hình thành vách ngăn và trở nên đa bào. Bào tử nang hay bào tử đảm của phần lớn nấm chỉ có một lớp màng, tuy nhiên có loại có cấu trúc bào tử hai lớp màng. Ở một số nấm bào tử hữu tính có thể nảy ix mầm cho bào tử thứ sinh giống như bào tử ban đầu về hình dạng, kích thước, cũng có khi trở thành các bào tử bụi sau khi nảy mầm. 17 Bào tử vơ tính: Một số lượng lớn nấm hình thành các dạng bào tử vơ tính trên nang quả hay thể quả. Thường gặp chúng dạng bào tử bụi, chúng có thể hình thành trên mặt mũ hay trên lớp sinh sản của thể sinh sản. Một số lồi hình thành bào tử áo, có màng dày, kích thước lớn (Trịnh Tam Kiệt., 2014) [15]. 17 Bào tử vơ tính: Một số lượng lớn nấm hình thành các dạng bào tử vơ tính trên nang quả hay thể quả. Thường gặp chúng dạng bào tử bụi, chúng có thể hình thành trên mặt mũ hay trên lớp sinh sản của thể sinh sản. Một số lồi hình thành bào tử áo, có màng dày, kích thước lớn (Trịnh Tam Kiệt., 2014) [15]. 17 1.3. Nấm ký sinh côn trùng 17 1.3. Nấm ký sinh côn trùng 17 1.3.1. Khái niệm 17 1.3.1. Khái niệm 17 Nấm ký sinh cơn trùng có thể xâm nhiễm vào cơ thể cơn trùng qua con đường hơ hấp, tiêu hóa hoặc qua cơ quan sinh dục, nhưng phần lớn là qua lớp vỏ cuticun của chúng. Tức là phải có sự tiếp xúc của bào tử nấm vào bề mặt cơ thể vật chủ. Bào tử nấm bám vào bề mặt cơ thể vật chủ, khi đủ điều kiện ẩm độ bào tử mọc mầm và xâm nhiễm vào bên trong cơ thể cơn trùng qua lớp vỏ cuticun. Khi nấm xâm nhiễm vào bên trong, nấm mọc khắp cơ thể của cơn trùng và sản xuất các độc tố trong đó để tăng tốc độ giết chết cơn trùng hoặc ngăn chặn sự cạnh tranh của các lồi vi sinh vật khác. Chu trình sống và lây nhiễm của nấm ký sinh cơn trùng được minh họa tại hình 1.1. 18 28.00 33.00 32.00 45.00 50.00 38.00 31.00 Standard errors of means Table rep d.f e.s.e pH 30 203 0.661 Standard errors of differences of means Table rep d.f s.e.d pH 30 203 0.935 Least significant differences of means (5% level) Table rep d.f l.s.d pH 30 203 1.844 100 DELETE [REDEFINE=yes] _mean, _rep, _var, _resid, _rdf, _scode 101 AKEEP [FACTORIAL=9] pH; MEAN=_mean; REP=_rep; VARIANCE=_var; RTERM=_resid; STATUS=_scode 102 IF _scode.IN.!(1,2) 103 AKEEP [FACTORIAL=9] #_resid; DF=_rdf 104 AMCOMPARISON [METHOD=duncan; DIRECTION=ascending; PROB=0.05] pH Duncan's multiple range test pH CT1 CT7 CT3 CT2 CT6 CT4 CT5 Mean 28.00 31.00 32.00 33.00 38.00 45.00 50.00 a b bc c d e f 105 ELSE 106 PRINT !t('Multiple comparisons available only if all components of the term',\ 107 'are estimated with equal efficiency and in the same stratum.');\ 108 JUST=left 109 ENDIF 110 "General Analysis of Variance." 111 BLOCK "No Blocking" 112 TREATMENTS pH 113 COVARIATE "No Covariate" 114 ANOVA [PRINT=aovtable,information,means; FACT=32; CONTRASTS=7; PCONTRASTS=7; FPROB=yes;\ 115 PSE=diff,lsd,means; LSDLEVEL=5] Chieudai Analysis of variance Variate: Chieudai Source of variation pH Residual Total d.f 203 209 s.s 5272.11 2801.60 8073.71 m.s 878.69 13.80 v.r 63.67 F pr