Tóm tắt luận án Tiến sĩ Hóa học: Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của hai loài ngọc cẩu (Balanophora Laxiflora Hemsl.) và loài vú bò (Ficus Hirta Vahl)

Mục tiêu luận án nghiên cứu thành phần hóa học và khảo sát hoạt tính sinh học của hai loài: loài ngọc cẩu (B. laxiflora) và loài vú bò (F. hirta). - Phân lập và xác định cấu trúc hóa học hai loài toàn cây ngọc cẩu (B. laxiflora) và rễ loài vú bò (F. hirta). Đánh giá một số hoạt tính độc tế bào, hoạt tính kháng viêm, hoạt tính chống tăng sinh trên dòng tế bào tủy xương cấp tính (OCI-AML) của các cao chiết và của một số hợp chất phân lập được nhằm định hướng cho các nghiên cứu ứng dụng tiếp theo.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TRẦN ĐỨC ĐẠI NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA HAI LỒI NGỌC CẨU (BALANOPHORA LAXIFLORA HEMSL.) VÀ LỒI VÚ BỊ (FICUS HIRTA VAHL) Chuyên ngành: H Mã số: 62.44.01.14 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Hà Nội - 2018 Cơng trình hồn thành tại: Học viện Khoa học Công nghệ Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Người hướng dẫn khoa học 1: PGS.TS Trịnh Thị Thủy Người hướng dẫn khoa học 2: TS Nguyễn Quyết Tiến Phản biện 1: PGS.TS Phan Minh Giang Phản biện 2: PGS.TS Ngô Quốc Anh Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ cấp Học viện, họp Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam vào hồi … ’, ngày … tháng … năm 2018 Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Học viện Khoa học Công nghệ - Thư viện Quốc gia Việt Nam MỞ ĐẦU Tín ấp t iết ủ l ận án Việt Nam có 54 dân tộc sinh sống như: dân tộc Kinh, Tầy, Dao, Sán Chay, Mông, Nùng, Sán Dìu, Ê đe Một số dân tộc có thuốc quý, thuốc gia truyền có giá trị chữa bệnh, trị bệnh có hiệu người dân tin dùng hội Việt Nam công nhận nhiên thuốc người dân chưa chứng minh khoa học Hơn Việt Nam thuộc quốc gia có khí hệu nhiệt đới, Việt Nam có hệ động thực vật phong phú đa dạng, Việt Nam có nhiều Khu bảo tồn thiên nơi lưu giữ hàng ngàn loài động thực vật quý hiếm, nơi có nguồn tài nguyên thuốc đa dạng phong phú Cây ngọc cẩu (Balanophora laxiflora Hemsl), vú bò (Ficus hirta Vahl) thuốc quý kho tàng thuốc, vị thuốc Việt Nam, ngọc cẩu vú bò người dân địa phương dùng trị bệnh, chữa bệnh thông thường trị nhiều chứng bệnh nan y có hiệu cao, giới công bố chất tách từ hai lồi có hoạt tính sinh học tốt tính kháng viêm, kháng ung thư, chống oxi hóa Việc nghiên cứu thành phần hóa học khảo sát hoạt tính sinh học ngọc cẩu vú bò có vị trí quan trọng nguồn tài nguyên sinh vật rừng đặc dụng Việt Nam bổ sung tư liệu góp phần làm sở khoa học cho việc xây dựng chiến lược quản lý, bảo tồn phát triển bền vững tính đa dạng sinh học rừng đặc dụng Việt Nam, làm sáng tỏ cơng dụng vú bò ngọc cẩu mà dân gian sử dụng Do tơi chọn đối tượng đề tài “Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt sính sinh học hai lồi ngọc cẩu (Balanophora laxiflora Hemsl.) lồi vú bò (Ficus hirta Vahl.)” Mụ tiê ủ l ận án - Nghiên cứu thành phần hóa học khảo sát hoạt tính sinh học hai lồi: lồi ngọc cẩu (B laxiflora) lồi vú bò (F hirta) N ng ng iên ứ ín - Phân lập xác định cấu trúc hóa học hai lồi tồn ngọc cẩu (B laxiflora) rễ lồi vú bò (F hirta) - Đánh giá số hoạt tính độc tế bào, hoạt tính kháng viêm, hoạt tính chống tăng sinh dòng tế bào tủy xương cấp tính (OCI-AML) cao chiết số hợp chất phân lập nhằm định hướng cho nghiên cứu ứng dụng C ng TỔNG QUAN 1.1 Giới t iệ loài ng ẩ (B laxiflora) 1.2 Giới t iệ i Ficus 1.2.1 Chi Ficus 1.2.2 Loài vú bò (F hirta) CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM Trình bày nội dung: thu hái mẫu xác định tên khoa học; phương pháp xử lý chiết mẫu; phương pháp khảo sát, tách tinh chế chất; phương pháp xác định cấu trúc phương pháp thử số hoạt tính sinh học, hóa chất thiết bị thí nghiệm; quy trình chiết thu chiết xuất; quy trình phân lập chất từ chiết xuất; kiện phổ chất tách 2.1 Mẫ ng iên ứ 2.1.1 Mẫu ngọc cẩu Mẫu thực vật dùng nghiên cứu toàn ngọc cẩu (cây cái) Mẫu tươi thu hái vào tháng 10/2014 Huyện Na Hang – Tỉnh Tuyên Quang Mẫu TS Đỗ Hữu Thư, Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật - Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam xác định tên khoa học (Balanophora laxiflora Hemsl.) thuộc họ Balanophoraceae Mẫu ngọc cẩu lưu phòng Hoạt chất Sinh học, Viện Hóa học – Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam 2.1.2 Mẫu vú bò Mẫu thực vật dùng nghiên cứu rễ vú bò Mẫu tươi rễ vú bò thu hái vào tháng 10/2014 Huyện Yên Sơn Tuyên Quang Mẫu TS Đỗ Hữu Thư, Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật - Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam xác định tên khoa học (Ficus hirta Vahl.) thuộc họ Dâu tằm (Moraceae) Mẫu vú bò lưu phòng Nghiên cứu hợp chất Tự nhiên, Viện Hóa học – Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam 2.2 P ng p áp ng iên ứ 2.2.1 Phương pháp chiết mẫu thực vật Các mẫu thực vật xay nhỏ chiết ba lần với hỗn hợp dung môi MeOH:H2O (9:1) nhiệt độ phòng Lọc dịch chiết, đặc áp suất giảm thu chiết xuất MeOH-H2O Chiết xuất hòa vào nước chiết phân bố với dung môi n-hexane, EtOAc n-butanol Quay cất dung môi áp suất giảm thu chiết xuất tương ứng 2.2.2 Phương pháp phân lập hợp chất Các cặn chiết thu tiếp tục phân tách thành phân đoạn sử dụng phương pháp sắc ký khác tùy thuộc vào cặn chiết cụ thể như: sắc ký hấp phụ silica gel pha thường, sắc ký hấp phụ silica gel pha đảo, sắc ký trao đổi ion sử dụng Diaion HP-20, sắc ký rây phân tử sử dụng Sephadex LH-20 2.2.3 Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất tách từ mẫu nghiên cứu Phương pháp xác định cấu trúc hóa học xác định dựa thông số vật lý kết hợp với phương pháp phổ gồm: Độ quay cực [α]D, phổ hồng ngoại (IR), phổ tử ngoại (UV-Vis), phổ khối phun mù điện tử (ESI-MS), phổ khối phân giải cao (HR-ESI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều (1DNMR): 1H-, 13C-NMR hai chiều (2D-NMR): HSQC, HMBC, COSY, NOESY 2.2.4 Phương pháp thử hoạt tính sinh học 2.2.4.1 Phương pháp nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào Phép thử tiến hành xác định hàm lượng protein tế bào tổng số dựa vào mật độ quang học (OD – Optical Density) đo thành phần protein tế bào nhuộm màu Sulforhodamine B (SRB) 2.2.4.2 Phương pháp apoptosis thự Đại học Y Perugia Đại học tổng hợp Perugia nước Cộng hòa Italy Phương pháp dùng để xác định số tế bào sống có mặt tế bào chết 2.2.4.3 Phương pháp thử nghiệm hoạt tính ức chế nitric oxide (NOs inhibition) thực viện Hóa học – Viện Hàn lâm Khoa học Việt Nam Phép thử xác định khả ức chế sản sinh NO tế bào macrophage RAW 264,7 2.3 C iết tá tin ế ợp ất từ i loài ng iên ứ 2.3.1 Loài ngọc cẩu (B laxiflora) 2.3.1.1.Chiết tách, tạo cao chiết 2.3.1.2 Từ cặn chiết dichloromethane Bằng phương pháp sắc ký cột silica gel phương pháp kết tinh lại dung mơi thích hợp phân lập hợp chất ký hiệu từ BL-1 đến BL-8, theo sơ đồ (Hình 2.1) Hình 2.1 Sơ đồ phân lập hợp chất từ cặn chiết dichloromethane Các hợp chất phân lập từ cặn chiết dichloromethane * Hợp chất BL-1 (4-hydroxy-3-methoxycinnamandehid) * Hợp chất BL-2 (methyl 4-hydroxycinnamate) * Hợp chất BL-3 (pinoresinol) * Hợp chất BL-4 (methyl 3,4-dihydroxycinnamate) * Hợp chất BL-5, scopoletin (7-hydroxy-6-methoxycoumarin) * Hợp chất BL-6 (+)-lariciresinol Hợp chất BL-6 (30 mg), dạng bột trắng  25 (c 0,1; D  32 MeOH) Phổ khối ion dương ESI-MS cho pic ion giả phân tử m/z 383,1 [M+Na]+ * Hợp chất BL-7 (+)-isolariciresinol Hợp chất BL-7 (2,1 g), bột trắng  25 (c 0,1, MeOH) Phổ D  41 khối (-)-ESI-MS, xuất pic ion giả phân tử m/z 359 [M-H]* Hợp chất BL-8 (quercetin) Hợp chất BL-8 (10 mg), dạng bột, màu vàng 2.3.1.3.Từ cặn chiết ethyl acetate Bằng phương pháp sắc ký cột silica gel, Sephadex (LH20) phương pháp kết tinh lại dung mơi thích hợp phân lập hợp chất ký hiệu từ BL-9 đến BL-15, theo sơ đồ Hình 2.2 Hình 2.2 Sơ đồ phân lập hợp chất từ cặn chiết ethyl acetate Các hợp chất phân lập từ cặn chiết ethyl acetate * Hợp chất BL-9 (methyl gallate) Hợp chất BL-9 (63 mg), dạng bột màu trắng * Hợp chất BL-10 ( ất mới)- balanochalcone Hợp chất BL-10 (7 mg), dạng dầu Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS, pic ion giả phân tử m/z 289,0696 [M+H-H2O]+ Phổ FT-IR/KBr xuất tín hiệu dao động hóa trị liên kết ʋmax (cm-1): 3200 (tù, rộng: -OH liên kết hdro), 1633 (mạnh: >C=O), 1601-1530 (C=C nhân thơm) 1H-NMR (500 MHz, CD3OD), δH (ppm): 6,94 (1H; s; H-4), 6,81 (2H; s; H-2 H-6), 5,92 (1H; d; J = 2,0 Hz; H-5′), 5,90 (1H; d; J = 2,0 Hz; H-3′), 5,34 (1H; dd; J = 3,0 Hz; 7,5 Hz; H-β), 3,90 (1H; dd; J = 7,5; 17,0 Hz; H-α), 3,72 (1H; dd; J = 3,0 Hz; 17,0 Hz; H-α); 13C- NMR (125 MHz, CD3OD), δC (ppm): 197,8 (>C = O), 168,4 (C4′), 165,5 (C-6′), 164,8 (C-2′), 146,9 (C-3), 146,5 (C-5), 131,8 (C-1), 119,3 (C-6), 116,3 (C-2), 114,7 (C-4), 103,4 (C-1′), 97,0 (C-3′), 96,2 (C-5′), 80,5 (C-β), 44,1 (C-α) * Hợp chất BL-11 (β-hydroxydihydrochalcone) Hợp chất BL-11 (20 mg), dạng chất rắn màu trắng đục Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS, pic ion giả phân tử m/z 291,2671 [M+H]+ Phổ 1H-NMR (500 MHz, CD3OD), δH (ppm): 2,72 (1H, dd, J = 17,0 Hz; 3,0 Hz), 3,13 (1H; dd; J = 17,0 Hz; 13,0 Hz), 5,36 (1H; dd; J = 13,0 Hz; 2,5 Hz), 5,90 (1H; d; J = 2.5 Hz), 5,92 (1H; d; J = 2.0 Hz), 6,84 (2H; d; J = 8,5 Hz), 7,33 (2H; d; J = 8,5 Hz) 13C-NMR (125 MHz, CD3OD), δC (ppm): 44,0 (C-α) , 80,5 (C-β), 96,2 (C-5′), 97,1 (C-3′), 103,3 (C-1′), 116,3 (C-2, C-6), 129,0 (C-3, C-5), 131,1 (C-1), 159,0 (C-4), 164,9 (C-2′), 165,5 (C-6′), 168,5 (C-4′), 197,8 (> C=O) * Hợp chất BL-12 (dimethyl-6,9,10trihydroxybenzo[kl]xanthene-1,2-dicarboxylat) Hợp chất BL-12 (7 mg), dạng chất rắn, màu vàng đậm Phổ ESI-MS, píc ion giả phân tử m/z 381,0684 [M-H]- tính tốn cho công thức C20H14O8 1H-NMR (500 MHz, CD3OD), δH (ppm): 3,94 (3H; s), 4,04 (3H; s), 6,73 (1H; s), 7,08 (1H; s), 7,25 (1H; d; J = 8,5 Hz), 7,40 (1H; d; J = 8,5 Hz), 8,11 (1H; s) 13C-NMR (125 MHz, CD3OD), δC (ppm): 173,5 (>C=O), 168,2 (>C=O), 105,0 (C-8), 110,9 (C-11a), 112,3 (C-11), 120,9 (C-5), 121,2 (C2), 122,4 (C-4), 124,7 (C-3a1), 125,7, 125,9 (C-11b), 128,1 (C3a), 130,1 (C-3), 138,3, 143,2 (C-6), 143,1 (C-10), 148,4 (C-9), 149,8 (C-7a), 53,5 (-OCH3), 52,9 (-OCH3) * Hợp chất BL-13 (p-cumaric acid) Hợp chất BL-13 (20 mg), dạng chất rắn, trắng 1H-NMR (500 MHz, CD3OD), δH (ppm): 6,30 (1H; d; J = 16,0 Hz), 6,83 (2H; d; J = 8,5 Hz), 7,47 (2H; d; J = 8,5 Hz), 7,62 (1H; d; J = 16,0 Hz) 13C-NMR (125 MHz, CD3OD), δC (ppm): 161,1 (C-9), 146,6 (C-4, C-7), 131,1 (C-2, C-6), 127,3 (C-1), 116,8 (C-8), 115,7(C-3, C-5) * Hợp chất BL-14 (isolariciresinol 4-O-β-D-glucopyranoside) Dạng bột vô định hình màu trắng (250 mg), 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6 ), δH (ppm): 6,68 (1H, d, J = 1,5 HZ, H-2) 6,69 (1H, d, J = 9,0 Hz, H-5), 6,50 (1H, dd, J = 8,1; 1,7 Hz, H-6), 3,79 (2H, d, J = 10, Hz, H-7), 1,78 (1H, m, H-8), 3,43 (2H, m, H-9), 6,67 (1H, s, H-2′), 6,31 (1H, s, H-5′), 2,7 (1H, dd, J = 5,0; 4,5 Hz, H-7′), 1,70 (1H, m, H-8′), 3,56 (2H, m, H-9′), 3,71 (3H, s, 3′-OCH3), 3,69 (3H, s, 5-OCH3), 5,0 (1H, d, J = 4,5 Hz), 3,1 -1,8 m 13C NMR (125 Hz, DMSO-d6,), δC (ppm): 13,6 (C-1), 113,3 (C-2), 147,3 (C3), 144,1 (C-4), 115,2 (C-5), 121,4 (C-6), 45,9 (C-7), 38,0 (C-8), 59,4 (C-9), 130,2 (C-1′), 112,2 (C-2′), 144,7 (C-3′), 146,8 (C-4′), 116,6 (C-5′), 132,6 (C-6′), 32,2 (C-7′), 45,3 (C-8′), 63,5 (C-9′), 55,71 (3′-OCH3), 55,67 (5-OCH3), 100,2 (C-1′′), 73,0 (C-2′′), 76,5 (C-3′′), 68,6 (C-4′′), 76,8 (C-5′′), 60,0 (C-6′′) * Hợp chất BL-15 (daucosterol) 2.3.1.3 Từ cặn chiết methanol Bằng phương pháp sắc ký cột silica gel, Sephadex (LH20) phương pháp kết tinh lại dung mơi thích hợp phân lập hợp chất từ cặn methanol ký hiệu từ BL-16 đến BL-20 (Hình 2.3) Hình 2.3 Sơ đồ phân lập hợp chất từ cặn chiết methanol Các hợp chất phân lập từ cặn chiết methanol * Hợp chất BL-16 (5-hydroxymethylfurfural) * Hợp chất BL-17 (methyl β-D-glucopyranoside) Compound BL-17 (60 mg), crystalline * Hợp chất BL-18 (methyl 4-O-β-D-glucopyranosylconiferyl ether) * Hợp chất BL-19 4-hydroxy-3,5-dimethoxybenzoyl glucopyranoside (1-O-syringoyl-β-D-glucopyranose, erigeside C) * Hợp chất BL-20 (lariciresinol 4-O-β-D-glucopyranoside) Compound BL-20 (23 mg), white amorphous powder 2.3.2 Phân lập hợp chất từ rễ vú bò (F hirta) 2.3.2.1 Chiết mẫu, tạo cặn chiết Hình 2.4 Sơ đồ tổng quan phân lập cao chiết từ rễ vú bò * Hợp chất F-2 (umbelliferone) Hợp chất F-2 (15 mg), dạng tinh thể, điểm chảy 224-227 oC H-NMR (500 MHz, CD3OD), δH (ppm): 7,86 (1H; J = 9,5 Hz; H4), 7,47 (1H; d; J = 8,5 Hz; H-5), 6,81 (1H; d; J = 8,5 Hz; 2,5 Hz; H6), 6,73 (1H; d; J = 2,5 Hz; H-8), 6,20 (1H; d; J = 9,5 Hz; H-3) 13CNMR (125 MHz, CD3OD), δC ppm: 163,71 (C-7), 163,15 (C-2), 157,26 (C-9), 146,05 (C-4), 130,66 (C-5), 114,53 (C-6), 113,17 (C3), 112,36 (C-10), 103,43 (C-8) * Hợp chất F-3 (bergapten) Hợp chất F-3 (3 g), dạng tinh thể, màu vàng nhạt 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δH (ppm): 8,16 (1H, d, J = 10 Hz, H-4), 7,59 (1H, d, J = 2,5 Hz, H-9), 7,14 (1H, s, H-8), 7,02 (1H, d, J = 2,5 Hz, H-10), 6,27 (1H, d, J = 10,0 Hz, H-3), 4,27 (3H, s, 5-OCH3) 13CNMR (125 MHz, CDCl3), δC (ppm): 161,34 (C-2), 158,53 (C-7), 152,87 (C-5), 149,72 (C-8a), 144,92 (C-9), 139,36 (C-4), 112,86 (C6), 112,73 (C-3), 106,59 (C-4a), 105,15 (C-10), 94,02 (C-8), 60,24 (-OCH3) 2.3.2.2 Cặn n-butanol Hình 2.6 Sơ đồ phân lập hợp chất từ cặn n-BuOH Bằng phương pháp sắc ký cột silica gel, Sephadex (LH20) phương pháp kết tinh lại dung mơi thích hợp phân lập hợp chất từ cao n-butanol ký hiệu từ F-4 đến F-11 theo sơ đồ (Hình 2.6) Các hợp chất phân lập từ cặn chiết n-butanol * Hợp chất F-4 (ethyl-β-D-fructofuranoside) Hợp chất F-4 (8 mg), dạng dầu Phổ khối phân giải cao HRESI-MS pic ion giả phân tử m/z 231,0836 [M+Na]+ (tính tốn lý thuyết cho công thức C8H16O6Na, 231,0947), công thức phân tử F-4 xác định C8H16O6 1H-NMR (500 MHz, CD3OD), δH ppm: 4,12 (1H; d; J = 8,0 Hz, H-4’), 3,98-3,95 (m, 1H, H-3’), 3,793,53 (m), 1,17 (3H, t, J = 7,0 Hz, H-2) 13C-NMR (125 MHz, CD3OD), δC ppm: 105,29 (C-2’), 83,41 (C-5’), 78,50 (C-3’), 77,33 (C-4’), 64,92 (C-6’), 62,01 (C-1’), 57,88 (C-1), 16,02 (C-2) * Hợp chất F-5 (ethyl-β-D-glucopyranoside) Hợp chất F-5 (7 mg), dạng dầu Phổ khối phân giải cao HRESI-MS, pic ion giả phân tử m/z 231,0835 [M+Na]+ (tính tốn lý thuyết cho cơng thức C8H16O6Na, 231,0947), công thức phân tử F-5 xác định C8H16O6 * Hợp chất F-6 (5-O-[β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-Dglucopyranosyl]bergaptol) ( ất mới) Hợp chất F-6 (10 mg), tồn dạng chất rắn, màu trắng Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS, có pic ion giả phân tử m/z 497,1295 [M+H]+ (tính tốn lý thuyết cho công thức C22H25O13, 497,1217), công thức phân tử F-6 xác định C22H24O13 Phổ FT-IR/KBr xuất tín hiệu dao động hóa trị liên kết ʋmax (cm-1): 3438 (mạnh, tù: OH liên kết hydro), 1687 (>C=O), 1613-1534 (C=C vòng benzen) Phổ 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6), δH (ppm): 6,45 (1H; d; J = 9,5 Hz, H-3), 8,31 (1H; d; J = 10,0 Hz, H-4), 7,37 (1H, s, H-8), 8,04 (1H, d, J = 2,5 Hz, H-2′), 7,18 (1H, d, J = 1,5 Hz, H-3′), 5,19 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-1′′), 3,58-3,55 (1H, m, H-2′′), 3,50-3,46 (3H, m, H-3′′), 3,253,22 (3H, m, H-4′′), 3,50-3,46 (3H, m, H-5′′), 3,74 (1H, m, 6′a), 3,50-3,46 (1H, m, 6′′b), 5,34 (1H, d, J = 2,5 Hz, H-1′′′), 3,80 (1H, br s, H-2′′′), 3,82 (1H, d, J = 9,0 Hz, H-4a), 3,61 (1H, d, J = 9,0 Hz, H-4b), 3,25-3,22 (3H, m, H-5′′′) 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6), δC (ppm): 159,70 (C-2), 112,55 (C-3), 140,03 (C-4), 151,26 (C-5), 110,30 (C-6), 156,95 (C-7), 94,85 (C-8), 147,67 (C-9), 105,89 (C-10), 146,24 (C-2′), 103,47 (C-3′), 99,03 (C-1′′), 78,48 (C-2′′), 76,67 (C-3′′), 69,79 (C-4′′), 76,97 (C-5′′), 60,59 (C6′′), 109,68 (C-1′′′), 76,0 (C-2′′′), 78,73 (C-3′′′), 73,29 (C-4′′′), 63,0 (C-5′′′) * Hợp chất F-7 (adenosine) Hợp chất F-7 (15 mg), dạng bột rắn, trắng Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS, pic ion giả phân tử m/z 268,1046 [M+H]+ (tính tốn lý thuyết cho công thức C10H14N5O4, 268,0968), công thức phân tử F-7 xác định C10H13N5O4 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6), δH (ppm): 8,34 (1H, s, H-8), 8,13 (1H, s, H-2), 5,88 (1H, d, J = 6,0 Hz, H-1′), 4,61 (1H, dd, J = 6,0; 5,5 Hz, H-2′), 4,14 (1H, dd, J = 4,5; 3,0 Hz, H-3′), 3,96 (1H, dd, J = 3,5; 3,0 Hz, H-4′), 3,68-3,66 (1H, m, H-5a′), 3,57-3,54 (1H, m, H-5b′) 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6), δC (ppm): 156,11 (C-6), 152,32 (C-2), 149,04 (C4), 139,86 (C-8), 119,33 (C-5), 87,88 (C-1′), 85,84 (C-4′), 73,41 (C2′), 70,61 (C-3′), 61,64 (C-5′) * Hợp chất F-8 (6-carboxy-umbelliferone) Hợp chất F-8 (10 mg), dạng rắn, màu trắng Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS cho pic ion giả phân tử m/z 229,0104 [M+H]+ (tính tốn lý thuyết cho cơng thức C10H7O5 229,0215), cơng thức phân tử F-8 xác định C10H6O5 1H-NMR (500 MHz, CD3OD): δH (ppm): 8,11 (1H; s; H-5), 7,89 (1H; d; J = 9,5 Hz, H-4), 6,70 (1H; s; H-8), 6,19 (1H; d; J = 9,5 Hz, H-3) 13C-NMR (125 MHz, CD3OD), δC (ppm): 174,31 (-COOH), 167,22 (C-7), 163,46 (C-2), 158,76 (C-9), 146,46 (C-4), 132,34 (C-5), 118,47 (C6), 112,23 (C-3), 112,01 (C-10), 103,90 (C-8) * Hợp chất F-9 (picraquassioside A) Hợp chất F-9 (10 mg), dạng rắn, màu trắng Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS pic ion giả phân tử m/z 421,1108 [M+Na]+ (tính tốn lý thuyết cho công thức C18H22O10Na, 421,1213), công thức phân tử F-9 C18H22O10 Phổ FT-IR/KBr xuất tín hiệu dao động hóa trị liên kết ʋmax (cm-1): 3381 (mạnh, tù: -OH liên kết hydro), 2937 (yếu, -OCH3), 1708 (>C=O), 1619-1509 (C=C vòng benzen) 1H-NMR (500 MHz, CD3OD), δH (ppm): 7,61 (1H; d; J = 2,0 Hz; H-2′), 7,12 (1H; s; H-8), 6,98 (1H; dd; J = 2,0 Hz; 1,0 Hz; H3′), 4,95 (1H; d; J = 7,5 Hz; H-1′′), 4,07 (3H; -OCH3), 3,95 – 3,44 (CH-OH&CH2-OH đường), 3,10-3,07 (2H; m; H-4), 2,55 (2H; br s; H-3) 13C-NMR (125 MHz, CD3OD), δC (ppm): 174,0 (C-2), 156,97 (C-7), 155,62 (C-9), 152,36 (C-5), 144,64 (C-2’), 117,07 (C-10), 114,10 (C-6), 105,53 (C-3′), 103,24 (C-1′′), 94,75 (C-8), 78,20 (C3′′), 78,10 (C-5′′), 75,01 (C-2′′), 71,40 (C-4′′), 62,57 (C-6′′), 60,67 (OCH3), 35,22 (C-3), 20,51 (C-4) * Hợp chất F-10 (rutin) * Hợp chất F-11 (aspantic acid) CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 P ân lập ợp ất từ ây ng ẩ (B Laxiflora) Từ loài B laxiflora 20 hợp chất phân lập Bằng phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân NMR phổ khối lượng xác định cấu trúc hóa học 20 hợp chất ký hiệu từ BL-1 đến BL20, có hợp chất Balanochalcone (BL-10), hợp chất (BL-11; BL-12; BL-16) lần đầu phân lập từ lồi B laxiflora Hình 3.1 Cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ loài B laxiflora T ảo l ận ợp ất BL-10 (C ất mới)- Balanochalcone Hình 3.2 Cấu trúc hóa học hợp chất BL-10 tương tác (H -> C) HMBC Phổ HR-ESI-MS hợp chất BL-10 xuất pic ion giả phân tử m/z 289,0698 [M+H-H2O]+ (tính tốn lý thuyết cho cơng thức C15H13O6 289,0740), công thức phân tử BL-10 xác định C15H14O7 Phổ FT-IR/KBr có đỉnh hấp thụ đặc trưng nhóm hydroxyl (3200 cm-1), carbonyl (1633 cm-1) vòng thơm (1601 1530 cm-1) từ lập luận kết hợp so sánh với tài liệu cho thấy hợp chất BL-10 có khung βhydroxydihydrochalcone [119, 120] Dựa vào phổ chiều hai chiều suy luận chất BL-10 có cẩu tạo kiểu ABX Có tín hiệu proton thuộc nhân thơm, có nhóm (-CH2-) Phổ 13C- NMR BL-10 cho tín hiệu 15 nguyên tử carbon gồm nhóm xeton (197,8 ppm), nhóm methylene, nhóm oxymethine tín hiệu hai vòng benzene Phổ 1H-NMR có singlet δH 6,81 (2H) 6,94 (1H) tương ứng với H-2, H-6 H4 Hình 3.3 Phổ HMBC hợp chất BL-10 ( ất mới) Phổ HMBC có tương tác H-2 H-6 với C-1, C-3, C-4, C-5; H-4 tương tác với C-1, C-2, C-3, C-5 C-β tương tác với H-2 H-6 Hai proton doublet δH 5,92 5,90 có số (J = 2,0 Hz) đặc trưng cho hai vị trí ita (H-3′ H-5′) vòng thứ hai Tín hiệu C-β cộng hưởng phía trường thấp δ 80,5 phổ 13C-NMR phổ HMBC có tương tác H-β với carbon >C=O H-α với C-β, >C=O, C-1 Từ lập luận so sánh với chất có khung cấu trúc [119, 120], hợp chất BL-10 xác định dạng βhydroxydihydrochalcone đặt tên balanochalcone Không xác định cấu hình tuyệt đối C-β góc quay cực  25D (c 0,1; MeOH), cấu hình hợp chất BL-10 dạng hỗn hợp rasemic (D, L) 3.2 P ân lập ợp ất p ân lập từ rễ vú bò (F hirta) Từ rễ vú bò (F hirta) phân lập 11 hợp chất Bằng phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân NMR, phổ khối lượng xác định cấu trúc hóa học 11 hợp chất ký hiệu từ F-1 -> F-11, có hợp chất F-6, hợp chất phân lập từ tự nhiên F-1, hợp chất F-3 -> F-11 lần phân lập từ loài F hirta 3.2.1 Hợp chất F-1 (6,7-furano-hydrocoumarate methyl ester) chất phân lập từ tự nhiên Hình 3.4 Cấu trúc hóa học chất F-1 tương tác (H -> C) HMBC Hợp chất F-1 dạng vơ định hình, màu trắng Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS xuất pic ion giả phân tử m/z 243,0631[M+Na]+ (tính tốn cho cơng thức C12H12O4Na, 243,0736), cơng thức phân tử F-1 xác định C12H12O4 Phổ FT-IR/KBr xuất tín hiệu dao động hóa trị liên kết ʋmax (cm-1): 3250 (rộng, tù vân hấp thụ nhóm –OH liên kết hydro), 1710 (>C=O), 2853 (2-OCH3), 1623-1539 (C=C vòng benzene) Hình 3.5 Phổ HMBC hợp chất F-1 Phổ 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δH (ppm): xuất tín hiệu đặc trưng khung bezofuran Các tín hiệu khung bezofuran δH 7,48 (1H, d, J = 2,5 Hz; H-2’), 6,63 (1H, d, J = 2,5 Hz; H-3’), hai tín hiệu proton nhân thơm 7,28 (1H; s; H-5), 7,04 (1H; s; H-8) Ở 3,68 (3H; s; -OCH3) proton khơng vòng 2,99 (2H; t; J = 7,0 Hz; H-4), 2,75 (2H; t; J = 7,0 Hz; H-3) Phổ 13C-NMR phổ HSQC xuất tín hiệu 12 nguyên tử carbon δC 176,05 (C-2), 154,83 (C-7), 152,24 (C-9), 144,13 (C-2′), 123,91 (C-10), 121,67 (C-5), 121,09 (C-6), 106,03 (C-3′), 99,90 (C-8), 52,24 (-OCH3), 35,56 (C-3), 24,83 (C-4), có nguyên tử carbon carbonyl (>C=O) 176,05 (C-2), ngun tử carbon khơng vòng 35,56 (C-3), 24,83 (C-4), carbon methine (CH) 121,67 (C-5), 99,90 (C-8), 144,13 (C-2’), 106,03 (C-3’) 52,24 (2-OCH3) Phổ HMBC xuất tương tác proron δH 2,99 (H4) với nguyên tử carbon (C-5, C-9, C-10, C-2, C-3), 2,75 (H-3) tương tác với (C-10, C-4, C-2), proton nhóm (-OCH3) tương tác với C-2 gốc este khung bezofuran liên kết với vị trí C-10 C-4 Ngoài proton 7,28 (1H, s, H-5) tương tác với nguyên tử carbon (C-7, C-9, C-4, C-3’), proton 7,04 (1H, s, H-8) tương tác với nguyên tử carbon (C-6, C-10, C-7, C-9), H-5 không tương tác với C-8 ngược lại điều khẳng định C-5 C-8 vị trí đối diện vòng benzene, vị trí ngun tử hydro vòng benzene lại bị Vì 2,99 H-4 tương tác với nguyên tử carbon (C-5, C-9, C-10, C-2, C-3) C-10 (123,91) C-9 (152,24) C-5 (121,67) vòng benzene (C-9 bị nhóm -OH, C-10 gốc este) hai vị trí lại vòng benzene Tại vị trí liên kết 121,09 (C-6) 154,83 (C-7) liên kết với khung furan Tại 7,48 (H-2’) tương tác với nguyên tử carbon (C-7, C-6, C-3’), 6,63 (H-3’) tương tác với nguyên tử carbon (C-7, C-5, C-2’, C-6) H-2’ H-3’ tương ứng với C-2’, C-3’ liên kết trực tiếp với khung furan, 7,28 (H-5) tương tác với nguyên tử carbon (C-3’, C-7, C-9, C-4) C-6 C-5 C-3’ vị trí lại C-7 Dựa vào lập luận kết hợp so sánh liệu phổ NMR hợp chất F-1 với liệu phổ NMR hợp chất 6,7-furano-hydrocoumarate methyl ester tạo đường sinh tổng hợp [129], trùng khớp, hợp chất F1 xác định 6,7-furano-hydrocoumarate methyl ester.Hợp chất 6,7-furano-hydrocoumarate methyl ester hợp chất phân lập từ tự nhiên 3.2.1 Hợp chất F-6 (5-O-[β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-Dglucopyranosyl]bergaptol) (hợp chất mới) Hình 3.6 Cấu trúc hóa học hợp chất F-6 tương tác (H -> C) HMBC Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS, pic ion giả phân tử m/z 497,1295 [M+H]+ (tính tốn lý thuyết cho công thức C22H25O13, 497,1217), công thức phân tử F-6 xác định C22H24O13 Phổ 1H-NMR có tín hiệu đặc trưng cho khung furanocoumarine δH 8,30 (1H; d; J = 9,5 Hz; H-4), 8,05 (1H; d; J = 2,5 Hz; H-2'), 7,37 (1H; s; H-8), 7,17 (1H; d; J = 1,5 Hz; H3'), 6,45 (1H; d; J = 9,5 Hz; H-3) Hơn nữa, tín hiệu hai đơn vị đường có hai proton đặc trưng δH 5,34 (1H; d; J = 2,5 Hz), 5,20 (1H; d; J = 8,0 Hz) proton khác δH 3,83-3,22 quan sát thấy phổ 1H-NMR Phổ 13C-NMR HSQC F-6 hiển thị 22 tín hiệu nguyên tử cacbon, bao gồm ba metylen (-CH2-), mười hai methine (>CH-) bảy nguyên tử cacbon bậc bốn Trong đó, 11 carbon gán cho furanocoumarin 11 carbon gán cho hai đơn vị đường Dữ liệu 13 C-NMR cho thấy diện phân tử glucopyranose δC 99,03, 78,48, 76,97, 76,67, 69,79, 20,59 phần apiofuranose δC 109,68 (C-1'''), 78,73, 76,00, 73,29, 63,00 Hai đơn vị đường xác định cấu hình β-D sở giá trị giá trị J1,2 hai hạt proton H-1' H-1'' 2,5 Hz 8,0 Hz , tương ứng [137-138] Cấu hình β-anomeric khung apiofuranosyl khẳng định thêm tín hiệu anomeric δC 109,9 với 3JH-H = 1,2 Hz Các tương tác HMBC quan sát proton H-1'' (δH 5,34) carbon C-2'' (δC 78,48), proton H-2'' (δH 3,57) carbon C-1''' (δC 109,68), C-2'(δC 78,48) đơn vị đường O-β-D-apiofuranosyl(1 → 2)-Oβ-D-glucopyranoside Hình 3.7 Phổ HMBC hợp chất hợp chất F-6 Các tương tác HMBC proton H-1'' (δH 5,20) carbon C-5 (δC 166,70) xác nhận vị trí đơn vị đường C-5 furanocoumarin Các tương tác (H→C) HMBC biểu diển (Hình 3.3) Các số liệu phổ NMR hai đơn vị đường hợp chất F-6 trùng khớp với số liệu NMR phân tử đường công bố trước [139] Dựa vào lập luận trên, cấu trúc F-6 xác định 5-O-[β-D-apiofuranosyl- (1 → 2)-β-D-glucopyranosyl] bergaptol F-1 F-2 F-4 F-5 F-7 F-6 F-3 F-10 F-9 F-11 Hình 3.8 Cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ loài F hirta Hợp chất 6,7-furano-hydrocoumarate methyl ester lần đầu phân lập từ tự nhiên (F-1), umbelliferone (F-2), bergapten (F-3), Ethyl β-D-fructofuranoside (F-4), ethyl β-D-glucopyranoside (F5), 5-O-[β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyl]bergaptol ất (F-6), adenosine (F-7), 6-carboxyumbelliferone (F-8), picraquassioside A (F-9), rutin (F-10), acid aspartic (F-11) 3.3 Kết q ả t oạt tín sin 3.3.1 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào lồi ngọc cẩu 3.3.1.1 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào thực Phòng Hóa Sinh ứng dụng Viện Hóa học – Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư: ung thư biểu mơ KB, ung thư gan Hep-G2, ung thư phổi Lu1, ung thư vú MCF-7 chất (BL-4, BL- 10, BL-11, BL-12) kết quả: hợp chất methyl 3,4-dihydroxycinnamate (BL-4) hợp chất dimethyl 6, 9, 10trihydroxybenzo[kl]xanthene-1,2-dicarboxylate (BL-12) có hoạt tính gây độc tế bào dòng ung thư biểu mơ (KB) với giá trị IC50 107,06 µM 80,37 µM, dòng tế bào ung thư lại có hoạt tính yếu khơng có hoạt tính Các hợp chất lại có hoạt tính yếu khơng có hoạt tính 3.3.1.2 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào thực thử nghiệm Đại học Y Perugia - Đại học tổng hợp Perugia nước Cộng hòa Italy Thử nghiệm hoạt tính chống tăng sinh dòng tế bào bạch cầu tủy xương cấp tính (OCI-AML) hợp chất BL-1, BL-2, BL-4, BL-6, BL-7, BL-9: Kết hợp chất BL-2 có tác dụng nồng độ cao 1685 μM (300 μg/ml) BL-9 có tác dụng 815 μM (150 μg/ml), làm giảm số tế bào OCI, chủ yếu kích thích apoptosis (gây chết tế bào theo chương trình) Hợp chất BL-1 nồng độ 421,6 μM (75 μg/ml) 210,7 μM (37,5 μg/ml) gây chết tế bào không đủ để làm thay đổi số tế bào OCI chu kỳ tế bào Hợp chất methyl 3,4dihydroxycinnamate (BL-4) hợp chất có hoạt tính mạnh làm giảm số tế bào OCI chí với nồng độ thấp đến 80,5 μM (15,62 μg/ml) kết gia tăng apoptosis giảm tăng sinh Hợp chất BL-6, BL-7 xem hoạt tính KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ >❖ Kết l ận Loài F hirta Việt Nam lần đầu nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Lần Việt Nam chất phân lập từ loài B laxiflora nghiên cứu hoạt tính sinh học T àn p ần ây ng ẩ (B laxiflora) Bằng phương pháp sắc ký cột, phương pháp phổ MS, NMR xác định cấu trúc hóa học 20 hợp chất ký hiệu từ BL-1 đến BL-20, có hợp chất BL-10; hợp chất (BL-11; BL-12; BL-16) lần đầu phân lập từ loài B laxiflora T àn p ần ây vú bò Ficus hirta Bằng phương pháp sắc ký cột, phân lập 11 hợp chất Bằng phương pháp phổ MS, phổ cộng hưởng từ hạt nhân NMR chiều, hai chiều xác định cấu trúc hóa học 11 hợp chất: hợp chất F-6 (5-O-[β-Dapiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyl]bergaptol), hợp chất lần phân lập từ tự nhiên F-1 (6,7-furano-hydrocoumaric acid methyl ester), hợp chất F-3 ->F-11 lần phân lập từ loài Về oạt tín sin Lần thử nghiệm hoạt tính chống tăng sinh dòng tế bào bạch cầu tủy xương cấp tính (OCI-AML) hợp chất BL-1, BL-2, BL-4, BL-6, BL-7, BL-9, từ loài ngọc cẩu (B laxiflora) Lần cơng bố hoạt tính hợp chất BL-4 tách từ lồi B Laxiflora có hoạt tính mạnh chống tăng sinh dòng tế bào bạch cầu tủy xương cấp tính (OCI-AML) với nồng độ 80,5 μM Lần Việt Nam tiến hành thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư: ung thư biểu mô KB, ung thư gan Hep-G2, ung thư phổi Lu-1, ung thư vú MCF-7 chất (BL-4, BL- 10, BL-11, BL-12) tách từ lồi B Laxiflora Hợp chất BL-4, BL-12 có hoạt tính gây độc tế bào dòng ung thư biểu mô KB với giá trị IC50 107,06 80,37 µM Các hợp chất lại có hoạt tính yếu khơng có hoạt tính ❖ Kết l ận ng Các kết luận án thực mục tiêu đề nghiên cứu thành phần hóa học lồi F hirta B laxiflora Việt Nam thử nghiệm số hoạt tính sinh học chất có hàm lượng lớn Trong tổng số 31 hợp chất tách có: hai hợp chất mới, hợp chất phân lập từ tự nhiên, hợp chất lần phân lập từ loài F hirta, chất hỗn hợp có hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư thử nghiệm ❖ Kiến ng ị Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học số lồi Ngọc cẩu Việt Nam, tiếp tục nghiên cứu phận loài vú bò: lá, quả, thân Việt Nam Nghiên cứu sâu hoạt tính chế tác dụng hợp chất có hoạt tính để làm rõ chất làm sở cho nghiên cứu NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN Ng iên ứ t àn p ần oạt tín sin ây ng ẩ (B laxiflora) - Lồi ngọc cẩu (B laxiflora) Việt Nam lần đầu nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học 20 Hợp chất phân lập xác định cấu trúc hóa học, có hợp chất balanochalcone (BL-10), hợp chất [βhydroxydihydrochalcone (BL-11), dimethyl 6,9,10trihydroxybenzo[kl]xanthene-1,2-dicarboxylat (BL-12), 5hydroxymethylfurfural (BL-16)] lần đầu phân lập từ loài B laxiflora - Lần cơng bố hoạt tính hợp chất methyl 3,4dihydroxycin (BL-4) tách từ loài B Laxiflora có hoạt tính mạnh chống tăng sinh dòng tế bào bạch cầu tủy xương cấp tính (OCIAML) nồng độ 80,5 μM - Lần Việt Nam tiến hành thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư: ung thư biểu mô KB, ung thư gan Hep-G2, ung thư phổi Lu-1, ung thư vú MCF-7 chất (methyl 3,4-dihydroxycinnamate (BL-4), balanochalcone (BL- 10), β-hydroxydihydrochalcone dimethyl (BL-11), 6,9,10-trihydroxybenzo[kl]xanthene-1,2-dicarboxylat (BL-12) tách từ lồi B Laxiflora, hợp chất methyl 3,4-dihydroxycin (BL-4) hợp chất 6,9,10trihydroxybenzo[kl]xanthene-1,2-dicarboxylat (BL-12) có hoạt tính gây độc tế bào dòng ung thư biểu mô KB với giá trị IC50 107,06 80,37 µM Ng iên ứ t àn p ần oạt tín sin ây vú bò (F hirta) Loài F hirta Việt Nam lần đầu nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học, 11 hợp chất phân lập xác định cấu trúc hóa học, hợp chất 5-O-[βD-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyl]bergaptol (F-6), hợp chất lần phân lập từ tự nhiên 6,7-furano-hydrocoumarate methyl ester (F-1), hợp chất [bergapten (F-3), ethyl β-Dfructofuranoside (F-4), ethyl β-D-glucopyranoside (F-5), adenosine (F-7), 6-carboxyumbelliferone (F-8), picraquassioside A (F-9), rutin (F-10), acid aspartic (F-11)] lần phân lập từ loài F hirta DANH MỤC CÁC CƠNG BỐ CỦA TÁC GIẢ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI LUẬN ÁN Trần Đứ Đại, Nguyễn Quyết Tiến, Nguyễn Ngọc Tuấn, Nguyễn Quảng An, Trương Thị Thanh Nga, Trịnh Thị Thủy, Đặng Ngọc Quang Thành phần hóa học ngọc cẩu (Balanophora laxiflora Hemsl) thu Tuyên Quang Phần hợp chất glucoside Tạp chí hóa học Việt Nam, 2016, vol 54 (6e2), 48-52 Trần Đứ Đại, Nguyễn Quyết Tiến, Nguyễn Ngọc Tuấn, Nguyễn Quảng An, Trương Thị Thanh Nga, Trịnh Thị Thủy, Nguyễn Thị Tuyết, Đặng Ngọc Quang Thành phần hóa học ngọc cẩu (Balanophora laxiflora Hemsl) thu Tuyên Quang Phần Thành phần hóa học dịch chiết phân cực Tạp chí hóa học Việt Nam, 2017, 55 (1), 48-51 Dang Ngoc Quang, Tran Cong So, Nguyen Thi Phuong Thanh, Le Thi Phuong Hoa, Pham Huu Dien, Truong Minh Luong, Nguyen Quang Tung, Le Duc Long, Tran Duc Dai & Nguyen Quyet Tien Balanochalcone, a new chalcone from Balanophora laxiflora Hemsl Natural Product Research (2018), 32 (7), 767-772 Tran Duc Dai, Trinh Thi Thuy, Nguyen Ngoc Tuan, Nguyen Quang An, Truong Thi Thanh Nga, Hoang Duy Cuong, Nguyen Quyet Tien Chemical constituents of (Balanophora laxiflora) collected in Tuyen Quang Par Polyphenol compounds Vietnam Journal of chemistry accepted 6/2/2018 Tran Duc Dai, Nguyen Thanh Tam, Dao Duc Thien, Nguyen Hoang Sa, Trinh Thi Thuy, Nguyen Thi Hoang Anh, Tran Duc Quan A new furanocoumarin glycoside from the roots of Ficus hirta Letters in organic chemistry Under review 11/2017 ... tài Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt sính sinh học hai lồi ngọc cẩu (Balanophora laxiflora Hemsl.) lồi vú bò (Ficus hirta Vahl.)” Mụ tiê ủ l ận án - Nghiên cứu thành phần hóa học khảo sát hoạt. .. Kết l ận Loài F hirta Việt Nam lần đầu nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Lần Việt Nam chất phân lập từ loài B laxiflora nghiên cứu hoạt tính sinh học T àn p ần ây ng ẩ (B laxiflora) ... hoạt tính sinh học hai lồi: lồi ngọc cẩu (B laxiflora) lồi vú bò (F hirta) N ng ng iên ứ ín - Phân lập xác định cấu trúc hóa học hai lồi tồn ngọc cẩu (B laxiflora) rễ lồi vú bò (F hirta) - Đánh