Bài viết đề cập đến xây dựng quy trình sản xuất sản phẩm chứa hàm lượng cao đồng thời các axit béo không no đa nối đôi omega-3 (hay n-3) mạch siêu dài (Highly Unsaturated Fatty Acids - HUFA) như EPA, DPA, DHA, ứng dụng enzym và các kí thuật phối hợp khác bao gồm các bước xử lý nguyên liệu, phân ly, làm sạch, làm giàu, tinh chế để thu được sản phẩm, từ nguyên liệu là phụ phẩm chế biến các loại cá ngừ đại dương (đầu và nội quan).
Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Biển; Tập 17, Số 1; 2017: 95-102 DOI: 10.15625/1859-3097/17/1/9054 http://www.vjs.ac.vn/index.php/jmst XÂY DỰNG QUY TRÌNH ỨNG DỤNG ENZYM VÀ CÁC KĨ THUẬT PHỐI HỢP ĐỂ THU NHẬN DẦU CÁ GIÀU CÁC AXIT BÉO KHÔNG NO ĐA NỐI ĐÔI EPA, DPA, DHA TỪ PHỤ PHẨM CHẾ BIẾN CÁ NGỪ VÂY VÀNG THUNNUS ALBACARES Hoàng Thị Bích1,2, Nguyễn Văn Tuyến Anh1, Phạm Minh Quân3, Phạm Thu Huế4, Nguyễn Quang Tùng5, Trần Quốc Toàn1,6, Nguyễn Thị Thủy6, Hứa Thị Tồn6, Lê Tất Thành1* Viện Hố học Các hợp chất thiên nhiên, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Học viện Khoa học Công nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Trường Đại học Khoa học Công nghệ Hà Nội, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Học viện Hải Quân, Bộ Quốc phòng Trường Đại học Cơng nghiệp Hà Nội Trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên * Email: thanh.biotech@gmail.com Ngày nhận bài: 1-12-2016 TÓM TẮT: Sản phẩm chứa axit béo không no đa nối đôi mạch siêu dài nhóm omega-3 có vai trò quan trọng lĩnh vực y, dược công nghiệp thực phẩm Trong tự nhiên, axit béo omega-3 có mặt chủ yếu sinh vật biển tảo biển, san hô, cá biển… Trong công bố này, đề cập đến xây dựng quy trình sản xuất sản phẩm chứa hàm lượng cao đồng thời axit béo không no đa nối đôi omega-3 (hay n-3) mạch siêu dài (Highly Unsaturated Fatty Acids HUFA) EPA, DPA, DHA, ứng dụng enzym kí thuật phối hợp khác bao gồm bước xử lý nguyên liệu, phân ly, làm sạch, làm giàu, tinh chế để thu sản phẩm, từ nguyên liệu phụ phẩm chế biến loại cá ngừ đại dương (đầu nội quan) Ngồi ra, quy trình thu sản phẩm phụ bột cá, oligopeptide hòa tan Từ khố: Cá ngừ, axit béo omega-3, HUFA, EPA, DPA, DHA MỞ ĐẦU Các axit béo đa nối đơi mạch siêu dài nhóm omega-3 tiêu biểu đưa làm đại diện gồm có eicosapentaenoic acid (EPA), docosahexaenoic acid (DHA) Ngồi ra, thành phần trung gian hai axit béo docosapentaenoic acid (n-3 DPA) với hoạt tính sinh học vượt trội cao hẳn Các axit có đặc thù riêng, sản phẩm chứa đồng thời ba loại axit béo với hàm lượng lớn thường gặp, chủ yếu chúng có nguồn gốc từ vi tảo số lồi sinh vật biển đầu chuỗi thức ăn EPA DHA tìm thấy nhiều nguồn nguyên liệu khác nhau, đặc biệt hầu hết loài sinh vật biển [1-4] Vì vậy, tính EPA, DHA nghiên cứu từ lâu sản phẩm chứa EPA, DHA sử dụng rộng rãi cho nhiều mục đích khác Trong nghiên cứu này, muốn đề cập đến axit béo, coi trung gian EPA DHA, n-3 DPA Do khó khăn nguồn nguyên liệu lượng chất tinh khiết mà nghiên cứu tác dụng sinh lý DPA tập trung thời gian gần [5] Các nghiên cứu phòng 95 Hồng Thị Bích, Nguyễn Văn Tuyết Anh,… thí nghiệm tiến hành sử dụng tế bào gan n-3 DPA EPA có khả chuyển đổi qua lại tế bào gan Tuy nhiên, có chứng chuyển đổi EPA n-3 DPA thành DHA Điều có nghĩa n-3 DPA hoạt động nguồn dự trữ EPA Tương tự vậy, động vật, n-3 DPA hình thành EPA Tuy nhiên khơng xuất để dễ dàng chuyển hóa thành DHA, ngoại trừ mơ gan Ngồi ra, n-3 DPA tìm thấy số mơ khác nhau, tích lũy đặc biệt cao tim, xương thận so với EPA Điều cho thấy n-3 DPA có tác dụng có lợi nội quan tim, xương thận [5] Hoạt tính ức chế huyết khối/kết tập tiểu cầu: Tiểu cầu tập hợp giai đoạn khơi mào cho phát triển huyết khối, khởi xướng thromboxan A2 (TXA2) Kết nghiên cứu tiểu cầu thỏ cho thấy n-3 DPA chất ức chế mạnh COX-1 (enzym tham gia tổng hợp TXA2), chất tiềm ức chế kết tập tiểu cầu hiệu [5-9] Một số nghiên cứu chứng minh n-3 DPA có khả kích thích di cư tế bào nội mô gấp 10 lần EPA, điều quan trọng trình tự lành vết thương Mặt khác, nghiên cứu động vật thử nghiệm n-3 DPA có khả ức chế enzym tổng hợp axit béo [5] Như vậy, n-3 DPA axit béo có tiềm việc chăm sóc sức khỏe, coi nguồn dự trữ EPA phòng chống rối loạn chuyển hóa thể [5, 6] Với hoạt tính sinh học đáng quý nêu trên, sản phẩm chứa hàm lượng cao axit béo không no đa nối đôi mạch siêu dài EPA, n-3 DPA, DHA có giá trị lớn việc chăm sóc sức khỏe cộng đồng dân cư tiềm sản xuất thương mại Từ đó, q trình tìm kiếm nguồn ngun liệu xây dựng công nghệ chế biến để tạo sản phẩm chứa đồng thời EPA, n-3 DPA, DHA mang ý nghĩa quan trọng 96 Các axit béo EPA, n-3 DPA, DHA giới nghiên cứu trình sinh tổng hợp loài sinh vật tự dưỡng vi tảo tạo [5] Qua chuỗi thức ăn, axit béo tập trung với hàm lượng cao sinh vật chuỗi thức ăn Các loài cá ngừ đại dương cá ngừ vây vàng, cá ngừ mắt to, cá ngừ bò… lồi chuỗi thức ăn hệ sinh thái biển Các nghiên cứu ra, đầu loài cá ngừ đại dương này, hàm lượng lipit lên tới 10 - 14% trọng lượng đầu, tổng hàm lượng axit béo không no đa nối đôi mạch siêu dài EPA, n-3 DPA, DHA lên tới 30 - 35% tổng số axit béo [10] Tuy nhiên, có nhiều nối đơi cách nhóm metylen nên axit béo nhạy cảm với yếu tố vật lý, hóa học sinh học q trình chế biến Do đó, để phân lập dầu chứa hàm lượng cao đồng thời ba axit béo không no đa nối đôi mạch siêu dài EPA, n-3 DPA, DHA cần phải có kỹ thuật xử lý riêng biệt phối hợp trình xử lý từ nguyên liệu ban đầu Các công nghệ chế biến dầu cá Song song với trình sử dụng sản phẩm chế biến từ dầu cá, công nghệ chế biến dầu ngày đa dạng phát triển: Từ khâu tách chiết thu dầu đến kỹ thuật tinh luyện giúp dầu có chất lượng cao Tuy nhiên bước ngoặt lớn giúp công nghiệp chế biến dầu mỡ phát triển gắn liền với việc ứng dụng máy nghiền ép dầu dạng lăn Smeaton vào năm 1752 Tiếp theo cơng nghệ tách chiết dầu có kết hợp chưng sấy bước đầu nghiên cứu năm 1795 (bởi Brahma), năm 1800 (bởi Neubauer) năm 1891 (bởi Montgolfier) Năm 1855, Deiss thử nghiệm trích ly thành cơng dầu từ dung mơi CS2, sau Irvine, Richardson Lundy vào năm 1864 đưa phát minh cho việc sử dụng dung mơi trích ly dầu hiđrocacbon áp dụng Cùng với cơng nghệ tách chiết dầu đơi với công nghệ tinh luyện dầu phát triển Trong đó, số phương pháp điển hình như: Phương pháp dùng nhiệt: Sử dụng nhiệt độ cao để phá vỡ màng tế bào nguyên liệu, dầu từ mô dự trữ chảy [11, 12] Xây dựng quy trình ứng dụng enzym… Phương pháp dùng lực học: Bằng cách xay, nghiền, ép, ly tâm Đây phương pháp dùng lực học để phá vỡ tổ chức tế bào nguyên liệu từ mà phân ly lấy dầu [11, 12] Phương pháp đông đá tan đông: Nguyên lý phương pháp hạ nhiệt độ khối nguyên liệu xuống nhiệt độ đơng đặc nước Khi hình thành tinh thể nước đá Do thể tích khối nước thể rắn lớn nước thể lỏng phá vỡ cấu trúc tế bào mô chứa dầu từ bên trong, nâng nhiệt độ làm chảy dầu bên [11, 12] Phương pháp chiết dầu dung môi hữu cơ: Nguyên lý phương pháp dùng dung môi hữu không phân cực dễ bay benzen, xăng nhẹ, n-hexan… để chiết dầu khỏi nguyên liệu sau làm bay hết dung môi thu dầu thô [11, 12] Phương pháp sinh học: Sử dụng enzym vi sinh vật để phá hủy protein có mơ tế bào, từ phá hủy tế bào giải phóng dầu [11, 12] Nhìn chung, hầu hết phương pháp sử dụng sử dụng tác nhân vật lý hay sinh học để phá hủy màng tế bào, từ giải phóng dầu Riêng phương pháp sử dụng dung môi hữu dựa vào đặc tính khơng phân cực, dễ dàng hòa tan vào dung môi phân cực lipit Các phương pháp có ưu nhược điểm định Tuy nhiên, axit béo không no đa nối đôi mạch siêu dài EPA, n-3 DPA DHA nhạy cảm với tác nhân vật lý hóa học, để đạt mục đích thu nhận sản phẩm giàu EPA, n-3 DPA, DHA đạt hiệu cao phương pháp sử dụng enzym lựa chọn giải pháp tối ưu ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu phụ phẩm chế biến loài cá ngừ vây vàng Thunnus albacares thu vùng biển miền Trung Việt Nam Thời gian thu mẫu tháng năm 2015 Phụ phẩm cấp đông -18oC trước chuyển đến sở nghiên cứu Bảo quản nguyên liệu tủ đơng -4oC Viện Hóa học Các hợp chất thiên nhiên Phương pháp nghiên cứu Xác định hàm lượng lipit tổng Theo phương pháp E G Bligh W J Dyer, (1959) [13] Phương pháp xây dựng phù hợp điều kiện Việt Nam Phòng Hố Sinh hữu - Viện Hố học Các hợp chất thiên nhiên Thực nghiệm: Cân 100 gam mẫu, nghiền nhỏ máy xay, chiết hệ dung môi CHCl3:CH3OH tỉ lệ 1:2 (100 ml CHCl3: 200 ml CH3OH), siêu âm Bổ sung 100 ml CHCl3, thêm 100 ml nước cất, lắc đều, phân lớp lấy phần dung dịch phía dưới, rửa lại nước cất lần sau làm khan Na2SO4 Dịch chiết cô cất loại dung môi máy quay cất chân không 40oC, áp suất 25 Torr thu lipit tổng Lượng lipit tổng cân cân phân tích Sartorius analytic (10-4) tính theo phần trăm so với khối lượng mẫu ban đầu Việc phân tích thực lần, lấy giá trị trung bình Xác định thành phần, hàm lượng axit béo, axit béo EPA, n-3DPA, DHA: Theo tiêu chuẩn ISO/DIS 659:1998, LB Đức [14] Thực nghiệm: 10 mg lipit tổng hòa tan với ml n-hexan lọ nhỏ nút kín, bổ sung 25 ml dung dịch CH3ONa 30% lắc kỹ phút Thêm vào 20 mg Na2SO4 loại sạch, lắc kỹ đem li tâm chế độ 5.000 vòng/phút phút Dịch trong, pha tách riêng, kiểm tra sắc ký mỏng (TLC) đem phân tích máy sắc ký khí GC (HP-6890), cột mao quản: HP-Innowax (30 m × 0,25 mm, df 0,25 μm), khí mang He, chạy theo chương trình nhiệt độ: 200oC 10 phút, tăng nhiệt độ từ 200-230oC thời gian phút, giữ nhiệt độ 230oC 10 phút Nhận dạng axit béo phần mềm chun dụng tính tốn chuyển đổi qua giá trị thời gian lưu tương đương ELC (Equivalent Chain- lengths of methyl ester derivatives of fatty acids) sử dụng hệ chất chuẩn C16:0, C18:0 Sau phân tích thành phần hàm lượng axit béo, thực xử lý số liệu đánh giá 97 Hồng Thị Bích, Nguyễn Văn Tuyết Anh,… axit béo như: SFA- Axit béo no; UFA- Axit béo không no; HUFA- Axit béo có nối đơi; PUFA- Axit béo có nối đơi; n-3: Axit béo omega-3; n-6: Axit béo omega-6; n-9: Axit béo omega-9; sử dụng số đánh giá chất lượng dầu béo sức khoẻ người theo khuyến cáo tổ chức y tế giới (WHO) tỷ lệ PUFA/SFA n-3/n-6 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Kết phân tích hàm lượng lipit tổng nguyên liệu 13,6±0,2% so với khối lượng tươi Nguyên liệu Phụ phẩm cá ngừ vây vàng 1: Xử lý vi sóng 2: Nghiền nhỏ Nguyên liệu xử lý Bổ sung nước, enzym protease Điều chỉnh nhiệt độ pH, thích hợp Hỗn hợp dịch thủy phân Lọc ly tâm 1.500 vòng/phút Dịch lọc thô Bã rắn Sấy khô Nghiền nhỏ Lọc màng Bột cá (Thức ăn chăn ni) Oligopeptide Hòa tan Dịch lọc tinh 1: Bổ sung NaCl 1% 2: Hạ nhiệt độ 5oC Dầu thô Phân lớp Sấy lạnh Nước 1: Na2SO4 2: Than hoạt tính Kiểm tra chất lượng Dầu Bảo quản 1: Tránh ánh sáng 2: Dưới 10oC GC-MS Thực phẩm chức chống suy nhược thể EPA ? DHA ? n-3 DPA ? Dầu cá ngừ chứa EPA, n-3 DPA, DHA Hình Quy trình phân lập dầu cá chứa đồng thời EPA, DPA DHA từ phụ phẩm chế biến cá ngừ vây vàng Thunnus albacares 98 Xây dựng quy trình ứng dụng enzym… Chúng tơi xây dựng quy trình cơng nghệ phân lập dầu cá chất lượng cao từ phụ phẩm chế biến cá ngừ (đầu, nội quan) loài cá ngừ vây vàng Thunnus albacares chứa đồng thời EPA, n-3 DPA DHA (hình 1) Quy trình gồm bước: Sử dụng sóng vi ba (vi sóng) để ức chế hoạt động vi sinh vật enzym nội sinh nguyên liệu phụ phẩm cá ngừ vằn; sử dụng enzym protease điều kiện thích hợp để phân hủy cấu trúc protein cá, từ phá vỡ cấu trúc tế bào, giải phóng lipit; sử dụng kỹ thuật ly tâm để lọc phần bã rắn không tan kỹ thuật lọc màng cao áp để lọc oligopeptide hòa tan; sử dụng dung dịch NaCl lỗng nhiệt độ thấp để phân lớp tách dầu; sử dụng Na2SO4 than hoạt tính để làm khan, tẩy màu, tẩy mùi; sản phẩm dầu cá bảo quản tối nhiệt độ thấp Mơ tả Quy trình (i) Bước 1: Xử lý nguyên liệu Mẫu phụ phẩm cá ngừ (20 kg) rửa nước sau chiếu vi sóng thiết bị chuyên dụng (2.450 MHz, 600 W) thời gian phút Nghiền nhỏ máy nghiền trục vít Bước xử lý mẫu phương pháp có nhiều ưu điểm: Thời gian xử lý nhanh, ức chế triệt để vi sinh vật enzym nội sinh Quy trình thực điều kiện nhẹ nhàng, tránh phân hủy, oxi hóa hoạt chất (ii) Bước 2: Sử dụng enzym protease phá hủy tế bào để giải phóng lipit Cho phụ phẩm cá ngừ xử lý vào thiết bị lên men 200 lít, thêm vào 120 lít nước, sau bổ sung 100 g enzym bromelain (hoạt lực > 2.000 UI/g) Nâng nhiệt độ lên 40oC, khuấy nhẹ (20 vòng/phút) Tiến hành thuỷ phân thời gian h (iii) Bước 3: Lọc thô Dịch sau thuỷ phân lọc thô loại phần bã rắn máy vắt ly tâm tốc độ 1.500 vòng/phút Bã rắn thu đem sấy khơ, đóng gói sử dụng làm thức ăn gia súc Phần dịch lọc thu lại cho bước xử lý (iv) Bước 4: Lọc tinh Phần dịch lọc sau lọc thô tiến hành lọc tinh để phân lập oligopeptide hòa tan khỏi hỗn hợp dầu - nước thiết bị lọc chuyên dụng có khả nâng áp suất lên tới 16 atm màng lọc siêu cấp: Dịch lọc thô đưa vào thùng chứa kín chịu áp suất sau sử dụng bơm nén đưa áp suất lên tới - atm Sau áp suất đạt đến atm, tiến hành mở van đưa dịch lọc qua hệ thống màng xenlulo acetate bố trí liên hồn có kích thước lỗ 100 kDa, 30 kDa, 10 kDa, kDa kDa Các oligopeptide hòa tan bị giữ lại màng thu hồi, sấy khô nhiệt độ thấp, sử dụng làm thực phẩm bổ sung dinh dưỡng có tác dụng tăng cường sinh lực, bồi bổ thể cho người suy nhược Dịch lọc tinh thu lại cho bước phân ly (v) Bước 5: Phân ly dầu - nước Dịch lọc tinh bổ sung muối NaCl với tỉ lệ 100:1 (dịch lọc: muối; v/m) đưa vào thiết bị phân ly có khả điều chỉnh nhiệt độ Hạ thấp nhiệt độ hỗn hợp xuống 5oC, khuấy nhẹ 30 phút sau để yên 12 h cho hỗn hợp phân ly hoàn toàn Hỗn hợp sau phân ly hoàn toàn loại bỏ phần nước, thu lấy phần dầu bên 2,2 lít (vi) Bước 6: Tinh chế bảo quản Phần dầu (2,2 lít) làm khan cách cho qua cột chứa kg Na2SO4 áp suất giảm (0,1 atm) Dầu khan bổ sung 0,5 kg bột than hoạt tính (2.000 m2/g) với tỉ lệ 4:1 (m/m), khuấy nhẹ h lọc loại bỏ than hoạt tính ta thu lít sản phẩm dầu cá ngừ chất lượng cao 99 Hoàng Thị Bích, Nguyễn Văn Tuyết Anh,… Sản phẩm dầu cá đóng lọ kín, tối màu, bảo quản nhiệt độ < 10oC Sản phẩm dầu cá thực theo quy trình có đặc tính: Thành phần: Axit béo không no > 60%; tổng axit béo ω-3 > 30%; EPA - 8%; n-3 DPA 1,0 - 3%; DHA 13 - 27% (Hàm lượng axit béo phụ thuộc chất lượng nguyên liệu đầu vào) Trạng thái: Chất lỏng sánh, màu vàng sáng Biến đổi dần sang nâu đến đen để khơng khí nhiệt độ thường Mùi vị: Mùi đặc trưng thơm nhẹ đạm thủy phân Thực quy trình với nguyên liệu phụ phẩm cá ngừ vây vàng Khả hòa tan: Khơng tan nước, tan cồn, tan tốt n-henxan, cloroform Tiến hành thực nghiệm sản xuất dầu cá ngừ theo quy trình xây dựng trên, kết trình bày bảng Bảng Kết thực nghiệm sản xuất mẻ dầu cá ngừ Mẻ Nguyên liệu (kg) Mẻ Mẻ Mẻ Mẻ Mẻ 20 22 23 21 25 24 Lượng dầu thu (lít) 2,0 2,2 2,1 2,0 2,3 2,3 Hiệu suất (%) 73,5 73,5 67,1 70,0 67,6 70,5 Trung bình hiệu suất 70,4% Qua kết sản xuất thực nghiệm mẻ với lượng nguyên liệu ban đầu từ 20 - 25 kg/1 mẻ thu lượng dầu từ 2,0 - 2,3 lít dầu cá ngừ chất lượng cao, hiệu suất đạt từ 67,1 73,5%, trung bình 70,4% so với lượng dầu cá tính theo lí thuyết Xác định thành phần hàm lượng axit béo sản phẩm thu Các số so sánh chất lượng nguyên liệu sản phẩm dầu cá ngừ sản xuất theo quy trình qua axit béo thể bảng Bảng Các số axit béo nguyên liệu sản phẩm STT Các axit béo EPA DHA n-3DPA SFA UFA HUFA Nguyên liệu Sản phẩm STT 8,78 14,82 3,97 29,81 70,19 34,52 6,82 14,1 1,33 36,56 63,44 26,66 10 11 12 Nhận xét: Bảng trình chiết xuất dầu béo từ nguyên liệu phụ phẩm cá ngừ axit béo không no giảm không tuân theo tỉ lệ cố định với axit béo khác có hoạt chất EPA, n-3 DPA, DHA Đặc biệt, axit béo omega-9 (n-9) lại có tăng hàm lượng từ 16,89 - 26,18 tổng axit béo Việc giảm hàm lượng axit béo không no trình chiết suất axit béo tiếp xúc với khơng khí bị khử hóa tạo thành axit béo no 100 Các axit béo PUFA n-3 n-6 n-9 PUFA/SFA n-3/n-6 Nguyên liệu Sản phẩm 39,63 31,76 7,87 16,89 1,3 4,0 31,13 25,22 5,91 26,18 0,9 4,3 Hàm lượng chất sản phẩm là: EPA 6,82%; n-3 DPA 1,33%; DHA 14,1% Các số chất lượng dầu béo PUFA/SFA giảm từ 1,3 nguyên liệu xuống 0,9 sản phẩm, ngược lại số n-3/n-6 lại tăng từ 4,0 lên 4,3 Hai số cho thấy dầu cá ngừ sản xuất có chất lượng axit béo tốt lành với sức khoẻ người (khuyến cáo WHO, số PUFA/SFA > 0,4 sản phẩm lành số n-3/n-6 > 0,1 sản phẩm tốt cho sức khoẻ người) Xây dựng quy trình ứng dụng enzym… KẾT LUẬN Đã xây dựng quy trình cơng nghệ sử dụng kỹ thuật phối hợp để phân lập dầu cá chất lượng cao từ phụ phẩm chế biến cá ngừ vây vàng Thunnus albacares gồm bước: Sử dụng sóng vi ba (vi sóng); sử dụng enzym protease (bromelain) để phân hủy cấu trúc protein cá; kỹ thuật ly tâm để lọc phần bã rắn không tan kỹ thuật lọc màng cao áp để lọc oligopeptide hòa tan; phân lớp tách dầu NaCl loãng nhiệt độ thấp; làm khan Na2SO4 tẩy màu, tẩy mùi sản phẩm than hoạt tính Hiệu suất thu hồi dầu cá đạt trung bình 70,4% Sản phẩm dầu cá chứa đồng thời EPA, DPA, DHA hàm lượng đến 22,25% so với tổng axit béo Hàm lượng lipit tổng nguyên liệu đầu cá ngừ vây vàng 13,6 ± 0,2% so với khối lượng tươi Việc sản xuất dầu cá ngừ từ phụ phẩm chế biến loại cá ngừ vây vàng thu sản phẩm dầu cá chất lượng cao HUFA tốt cho thể người thể qua số PUFA/SFA n-3/n-6 cao nhiều so với khuyến cáo WHO Lời cảm ơn: Cơng trình hồn thành với tài trợ Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn, Đề tài: “Nghiên cứu ứng dụng công nghệ sinh học tạo chế phẩm axit béo đa nối đôi (n3- PUFA) từ nguyên liệu tự nhiên bổ sung vào thức ăn ương nuôi số đối tượng cá biển chủ lực” thuộc Đề án phát triển ứng dụng công nghệ sinh học lĩnh vực thuỷ sản đến năm 2020 TÀI LIỆU THAM KHẢO Phang, M., Sinclair, A J., Lincz, L F., and Garg, M L., 2012 Gender-specific inhibition of platelet aggregation following omega-3 fatty acid supplementation Nutrition, Metabolism and Cardiovascular Diseases, 22(2), 109114 Khaw, K T., Friesen, M D., Riboli, E., Luben, R., and Wareham, N., 2011 Plasma phospholipid fatty acid concentration and incident coronary heart disease in men and women: the EPIC-Norfolk prospective study PLoS medicine, 9(7), e1001255e1001255 Schuchardt, J P., Huss, M., Stauss-Grabo, M., and Hahn, A (2010) Significance of long-chain polyunsaturated fatty acids (PUFAs) for the development and behaviour of children European journal of pediatrics, 169(2), 149-164 Djoussé, L., Gaziano, J M., Buring, J E., and Lee, I M., 2011 Dietary omega-3 fatty acids and fish consumption and risk of type diabetes The American Journal of Clinical Nutrition, 93(1), 143-150 Kaur, G., Cameron-Smith, D., Garg, M., and Sinclair, A J., 2011 Docosapentaenoic acid (22: 5n-3): a review of its biological effects Progress in lipid research, 50(1), 28-34 Linderborg, K M., Kaur, G., Miller, E., Meikle, P J., Larsen, A E., Weir, J M., Nuora, A., Barlow, C K., Kallio, H P., Cameron-Smith, D., and Sinclair, A J., 2013 Postprandial metabolism of docosapentaenoic acid (DPA, 22: 5n-3) and eicosapentaenoic acid (EPA, 20: 5n-3) in humans Prostaglandins, Leukotrienes and Essential Fatty Acids (PLEFA), 88(4), 313-319 Lin, W., Wu, F W., Yue, L., Du, Q G., Tian, L., and Wang, Z X., 2014 Combination of urea complexation and molecular distillation to purify DHA and EPA from sardine oil ethyl esters Journal of the American Oil Chemists' Society, 91(4), 687-695 Shahidi, F., 2005 Bailey’s industrial oil and fat products, 6th edn WileyInterscience, London, 273-274 Ho, C., 2003 Omega 3: The Seal connection Flanker Press, 139 p 10 Le Tat Thanh et al., 2016 Survey on total lipid content and composition of fatty acids from head and viscera of tuna Journal of Science and Technology, 54 11 Luthria, D L (2004) Oil extraction and analysis: Critical issues and competitive studies The American Oil Chemists Society 12 Hayes, M., 2012 Marine Bioactive Compounds: Sources, Characterization and 101 Hồng Thị Bích, Nguyễn Văn Tuyết Anh,… Applications Chapter Extraction and Characterization of Bioactive Compounds with Health Benefits from Marine Resources: Macro and Micro Algae, Cyanobacteria, and Invertebrates DOI 10.1007/978-1-4614-1247-2-2 Pp 1-45 13 Bligh, E G., and Dyer, W J., 1959 A rapid method of total lipid extraction and purification Canadian Journal of Biochemistry and Physiology, 37(8), 911-917 14 ISO/DIS 659 (1998), Germany ESTABLISHMENT OF PROCESS OF APPLYING ENZYME AND COMBINATION TECHNICS TO OBTAIN FISH OIL RICH IN POLYUNSATURATED FATTY ACIDS CONTAINING EPA, DPA, DHA FROM RENDERED PRODUCTS OF TUNA THUNNUS ALBACARES Hoang Thi Bich1,2, Nguyen Van Tuyen Anh1, Pham Minh Quan3, Pham Thu Hue4, Nguyen Quang Tung5, Tran Quoc Toan1,6, Nguyen Thi Thuy6, Hua Thi Toan6, Le Tat Thanh1 Institute of Natural Products Chemistry, VAST Graduate University of Science and Technology, VAST Hanoi University of Science and Technology, VAST Vietnam Academy of Navy Hanoi University of Industry Thai Nguyen University of Agriculture and Forestry ABSTRACT: Products containing super long-chain polyunsaturated fatty acids of omega-3 group play an important role in the fields of medical, pharmaceutical and food industries In nature, omega-3 fatty acids (n-3) are mainly present in marine organisms such as seaweed, corals, sea fish, In this publication, we refer to the process of manufacturing the product with high levels of the super long-chain polyunsaturated fatty acids (Highly unsaturated fatty acids - HUFA) such as EPA, DHA and DPA (n-3) which includes steps such as raw materials treatment, segregation, cleansing, enrichment, refining to collect the product, from the rendered products (head and internal organs) of the types of tuna In addition, the process also obtains by-products which are fish powder and soluble oligopeptides Keywords: Tuna, omega-3 fatty acids, HUFA, EPA, DPA, DHA 102 ... albacares 98 Xây dựng quy trình ứng dụng enzym Chúng tơi xây dựng quy trình cơng nghệ phân lập dầu cá chất lượng cao từ phụ phẩm chế biến cá ngừ (đầu, nội quan) loài cá ngừ vây vàng Thunnus albacares. .. phẩm chức chống suy nhược thể EPA ? DHA ? n-3 DPA ? Dầu cá ngừ chứa EPA, n-3 DPA, DHA Hình Quy trình phân lập dầu cá chứa đồng thời EPA, DPA DHA từ phụ phẩm chế biến cá ngừ vây vàng Thunnus albacares. .. ứng dụng enzym KẾT LUẬN Đã xây dựng quy trình cơng nghệ sử dụng kỹ thu t phối hợp để phân lập dầu cá chất lượng cao từ phụ phẩm chế biến cá ngừ vây vàng Thunnus albacares gồm bước: Sử dụng sóng