Nghiên cứu ảnh hưởng của nguồn dinh dưỡng đến quá trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn spirulina (2017)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH-KTNN  LÊ THU TRANG NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA NGUỒN DINH DƯỠNG ĐẾN QUÁ TRÌNH LÊN MEN LACTIC TẠO NƯỚC GIẢI KHÁT TỪ TẢO XOẮN SPIRULINA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Vi sinh học Hà Nội, 2017 LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới cô giáo, PGS TS Đinh Thị Kim Nhung, người tận tình bảo giúp đỡ em thời gian học tập nghiên cứu đề tài Em xin bày tỏ lòng biết ơn tới thầy giáo, giáo tổ môn Thực vật - Vi sinh, Khoa Sinh - KTNN, Trường Đại học Sư phạm Hà Nội nhiệt tình giảng dạy truyền đạt kinh nghiệm suốt thời gian em thực đề tài Em xin chân thành cảm ơnBan Giám hiệu nhà trường, Ban Chủ nhiệm khoa Sinh - KTNN, Trung tâm thông tin thư viện, Phòng thí nghiệm Vi sinh vật Trường Đại học Sư phạm Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi cho em hồn thành khóa luận Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè người thân, người quan tâm, động viên, khích lệ, giúp đỡ em suốt trình học tập, tiến hành hồn thiện đề tài Hà Nội, Ngày 03 Tháng 05 Năm 2017 Sinh viên thực Lê Thu Trang LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan kết nghiên cứu riêng cá nhân em, tất số liệu thu thập từ thực nghiệm qua xử lý thống kê, hồn tồn khơng có số liệu chép, bịa đặt Đề tài nghiên cứu không trùng với công trình nghiên cứu tác giả khác Trong đề tài, em có sử dụng số liệu số tác giả khác, em xin phép tác giả trích dẫn để bổ sung cho khóa luận Nếu sai em xin chịu hồn tồn trách nhiệm Hà Nội, Ngày 03 Tháng 05 Năm 2017 Sinh viên thực Lê Thu Trang MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tế Đóng góp đề tài NỘI DUNG CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu tảo xoắn Spirulina 1.1.1 Lịch sử phát sử dụng tảo xoắn Spirulina 1.1.2 Phân loại tảo xoắn Spirulina 1.1.3 Đặc điểm sinh học tảo xoắn Spirulina 1.1.3.1 Hình dạng cấu tạo tảo xoắn Spirulina 1.1.3.2 Chu kỳ sinh sản tảo xoắn Spirulina 1.1.3.3 Chu kỳ sinh trưởng tảo xoắn Spirulina 1.1.3.4 Thành phần hóa học tảo xoắn Spirulina 1.1.4 Giá trị dinh dưỡng công dụng tảo xoắn Spirulina 10 1.1.4.1 Giá trị dinh dưỡng tảo xoắn Spirulina 10 1.1.4.2 Công dụng tảo xoắn Spirulina 11 1.2 Hệ vi sinh vật tham gia vào trình lên men 13 1.2.1 Vi khuẩn lactic 13 1.2.1.1 Phân loại khoa học 13 1.2.1.2 Nhu cầu dinh dưỡng vi khuẩn lactic 14 1.2.1.3 Quá trình trao đổi chất vi khuẩn lactic 16 1.2.1.4 Cơ chế trình lên men lactic 18 1.2.2 Vi khuẩn Giấm 19 1.2.3 Nấm men 20 1.3 Tổng quan tình hình nghiên cứu ngồi nước 21 1.3.1 Tình hình nghiên cứu giới 21 1.3.2 Tình hình nghiên cứu nước 21 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1.Đối tượng thiết bị nghiên cứu 24 2.1.1 Mẫu vi sinh vật 24 2.1.2 Hóa chất,dụng cụ thí nghiệm 24 2.1.2.1 Hóa chất 24 2.1.2.2 Dụng cụ thí nghiệm 24 2.2 Các loại môi trường 25 2.3 Phương pháp nghiên cứu 26 2.3.1 Phương pháp vi sinh 26 2.3.1.1 Phương pháp phân lập vi khuẩn lactic trình quan sát hình thái tiêu nhuộm gram 26 2.3.1.2 Phương pháp xác định số lượng tế bào vi sinh vật 27 2.3.1.3 Phương pháp bảo quản chủng giống 28 2.3.1.4 Phương pháp hoạt hóa giống 28 2.3.1.5 Phương pháp xác định hoạt lực lên men 28 2.3.1.6 Xác định khả kết lắng 28 2.3.1.7 Phương pháp lên men 29 2.3.2 Phương pháp hóa sinh 29 2.3.2.1 Phát hoạt tính catalase 29 2.3.2.2 Thử nghiệm khả sinh acid lactic b ng thuốc thử Uffelmann 29 2.3.2.3 Phát khả tổng hợp cellulose 29 2.3.2.4 Phương pháp xác định khả tổng hợp acid b ng chuẩn độ với NaOH 0,1N có phenolphtalain 0.1 % làm thị 30 2.3.3 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng đến trình lên men 30 2.3.3.1 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng nguồn đường 30 2.3.3.2 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng nguồn nitơ 31 2.3.3.3 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng khoáng 31 2.3.4 Phương pháp cảm quan 31 2.4 Phạm vi nghiên cứu 32 2.5 Địa điểm thực đề tài 32 2.6 Thời gian thực đề tài 32 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 Phân lập tuyển chọn số chủng lactic có khả lên men tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina 33 3.1.1 Phân lập số chủng vi khuẩn lactic có khả lên men tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina 33 3.1.2.Tuyến chọn số chủng vi khuẩn lactic có khả lên men tạo nước giải khát từ dịch tảo xoắn Spirulina 35 3.1.2.1 Kiểm tra hoạt tính catalase 35 3.1.2.2 Thử nghiệm tính sinh acid lactic b ng thuốc thử Ufelmann 36 3.1.2.3 Chuẩn độ axit 37 3.1.2.4 Kiểm tra độ kết lắng 38 3.1.2.5 Kết nhuộm Gram 39 3.1.2.6 Kết nhuộm bào tử 39 3.1.2.7 Nhuộm kháng acid 40 3.1.2.8 Khả hình thành màng Biocellulose chủng vi khuẩn lactic cộng sinh với chủng vi khuẩn Acetobacter X4 chủng nấm men Saccharomyces M1 41 3.2 Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng đến trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina 44 3.2.1 Ảnh hưởng hàm lượng đường đến trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina 44 3.2.2 Ảnh hưởng hàm lượng nitơ hữu đến trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina 47 3.2.3 Ảnh hưởng hàm lượng KH2PO4 đến trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina 49 3.2.4 Ảnh hưởng hàm lượng MgSO4.7H2O đến trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina 51 KẾT LUẬN 53 Kết luận 53 Kiến nghị 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO 54 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ATP : Adenozin triphôtphat NXB : Nhà xuất KHTN : Khoa học tự nhiên MT : Môi trường TCVN : Tiêu chuẩn Việt Nam CLCQ : Chất lượng cảm quan DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1 Ảnh chụp vi khuẩn lactic mơi trường thạch nghiêng 35 Hình 3.2 Chủng vi khuẩn có catalase âm tính 36 Hình 3.3 Chủng vi khuẩn có catalase dương tính 36 Hình 3.4 Vòng phân giải CaCO3 chủng lactic H5 37 Hình 3.5 Vi khuẩn khơng sinh bào tử 40 Hình 3.6 Vi khuẩn sinh bào tử 40 Hình 3.7 Chủng vi khuẩn không kháng acid 41 Hình 3.8 Khả tạo màng chủng vi khuẩn lactic H5 cộng sinh với chủng vi khuẩn Acetobacter X4 chủng nấm men Saccharomyces M1 42 Hình 3.9 Ảnh chụp khuẩn lạc chủng Lactobacillus H5 44 Hình 3.10 Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng hàm lượng nitơ hữu đến tốc độ phát triển chủng Lactobacillus H5 48 Hình 3.11 Đồ thị biểu diễn biến thiên độ axit hàm lượng nitơ hữu khác 48 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần hóa học Spirulina Bảng 1.2 Thành phần vitamin Spirulina Bảng 1.3 Thành phần khoáng Spirulina Bảng 1.4 Thành phần acid amin Spirulina Bảng 1.5 Các chất màu Spirulina 10 Bảng 3.1 Đặc điểm hình thái kích thước vi khuẩn lactic mẫu phân lập 34 Bảng 3.2 Khả sinh acid lactic chủng vi khuẩn lactic 36 Bảng 3.3 Kích thước vòng phân giải chủng vi khuẩn lactic 38 Bảng 3.4 Chiều cao cặn men chủng vi khuẩn lactic 38 Bảng 3.5 Kết nhuộm gram chủng vi khuẩn lactic 39 Bảng 3.6 Đánh giá khả tạo màng chủng vi khuẩn lactic cộng sinh với chủng vi khuẩn Acetobacter X4 chủng nấm men Saccharomyces M1 41 Bảng 3.7 Kết thí nghiệm dùng để phân lập vi khuẩn lactic 43 Bảng 3.8 Khả lên men loại đường vi khuẩn lactic 45 Bảng 3.9 Ảnh hưởng hàm lượng saccharose đến thành phần lên men 46 Bảng 3.10 Ảnh hưởng hàm lượng KH2PO4 đến trình lên men chủng vi khuẩn Lactobacillus H5 50 Bảng 3.11 Ảnh hưởng hàm lượng MgSO4.7H2O đến trình lên men chủng vi khuẩn Lactobacillus H5 51 Bảng 3.8 Khả lên men loại đường vi khuẩn lactic Loại đường Khả lên Loại đường Khả lên men men D- glucose + Saccharose ++ D- galactose + Maltose - Ghi :+ + : Lên men mạnh + : Lên men không mạnh -: Không lên men Kết cho thấy: chủng vi khuẩn lactic lên men mơi trường có chứa loại đường nghiên cứu, ngoại trừ loại đường Maltose Và đường saccharose có khả lên men mạnh nhất, chọn đường saccharose làm chất cho trình lên men Sau ta chọn tỉ lệ đường sacarose thích hợp cho q trình lên men Lần lượt chọn tỉ lệ đường sacarose: từ 60,80,100, 120, (g) vào 1lít dịch tảo xoắn Spirulina để tến hành lên men - ngày [2] Chuẩn bị dịch lên men Bột tảo xoắn Spirulina từ c ng ty Dược - Hậu Giang: 16 g bột Tảo 1000 ml nước sơi vòng - phút Bổ sung đường saccharose: theo tỉ lệ khác nhau: 60 (g/l); 80 (g/l); 100 (g/l); 120 (g/l) o Thanh trùng : 100 C vòng 30 phút để loại bỏ vi sinh vật, bào tử nấm mốc, nấm men vi khuẩn có hại khác Bổ sung giống: Sử dụng chủng Lactobacillus H5, chủng vi khuẩn Acetobacter X4 o chủng Saccharomyces M1 [16] với tỉ lệ 10 %, lên men 30 C, pH 6.1 (pH tự nhiên) Đánh giá: Sau ngày lên men tiến hành đánh giá dựa vào tiêu khác, kết thể bảng 3.9 Bảng 3.9 Ảnh hưởng hàm lượng saccharose đến thành phần lên men Hàm lượng Độ axit (%/V) đường (g/l) Đường sót Số lượng (g/l) tế bào (x10 /ml) 60 1,45 ± 0,2 16.65 100 ± 0,29 80 1,65 ± 0,2 27.76 119 ± 0,25 100 1,93 ± 0,2 37.69 131 ± 0,32 120 1,76 ± 0,2 43.86 120 ± 0,27 Kết thí nghiệm cho thấy: Khi hàm lượng đường dịch lên men tăng từ 60 - 120 (g/l) lượng đường sót tăng, độ pH hiệu suất lên men giảm Theo chúng tôi: hàm lượng đường dịch lên men tăng làm cho áp suất thẩm thấu dịch lên men tăng dần ức chế trình trao đổi chất hoạt động sống vi khuẩn lactic ức chế hoạt động nhiều loại enzym làm cho hiệu suất lên men giảm, kéo theo hàm lượng đường sót tăng lên Hàm lượng axit tăng chuyển hóa hình thành số axit hữu số vi khuẩn sinh trình lên men làm cho độ pH giảm Từ kết bảng cho thấy: Nồng độ đường 60 (g/l), 80 (g/l) đường trình lên men yếu, sản phẩm lên men không đạt thiếu chất dinh dưỡng cho vi khuẩn sinh trưởng lên men sinh khối vi khuẩn khơng cao, chất lượng cảm quan (CLCQ) mức trung bình, ảnh hưởng đến sản phẩm, chưa đạt vị chua hài hòa sản phẩm Với nồng độ đường 120 (g/l) đường trình lên men chậm áp suất thẩm thấu lớn gây ức chế trình lên men Hàm lượng đường cao lấn át vị chua sản phẩm Hơn nữa, hàm lượng đường cao gây tốn ảnh hưởng đến hiệu kinh tế Ở nồng độ đường 100 (g/l), trình lên men diễn mạnh mẽ,độ axit 1,93 ± 0,2 (% / V), lượng đường sót 37,69 (g/l), sản phẩm cảm quan tốt Kết phù hợp với nghiên cứu tác giả Lim HJ cs [24] vi khuẩn Lactobacillus Từ kết (bảng 3.9) cho thấy hàm lượng đường từ 100 (g/l) trở lên thích hợp đểsản xuất thử nghiệm trình lên men Tuy nhiên sản xuấtngười ta trọng đến chất lượng sản phẩm mà trọng đến hiệu suất kinh tế khả têu thụ phải phù hợp với thị hiếu têu dùng chung Mặt khác vào tỉ lệ đường có mặt sản phẩm đồ uống giải khát thị trường, giao động từ 30 - 39 (g/l), cho sản phẩm nước giải khát hài hòa, phù hợp với dòng đồ uống giải khát có độ cồn thấp Vì vậy, lựa chọn hàm lượng đường saccharose 100 (g/l) (10%)cho trình lên men lactc tạonước giải khát từ tảo xoắn Spirulina 3.2.2 Ảnh hưởng hàm lượng nitơ hữu đến trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina Quá trình lên men chủng vi sinh vật cần thiết đến tham gia thành phần nitơ Ở tảo xoắn có hàm lượng protein cao so với lồi khác nên q trình lên men không cần bổ sung nitơ vô mà tận dụng nguồn nitơ hữu tảo xoắn cung cấp Nhưng bổ sung nguồn nitơ hữu nhiều lại ức chế q trình lên men Do tơi tiến hành thử tỉ lệ bổ sung tảo xoắn vào dịch lên men tìm hàm lượng tảo phù hợp với trình lên men Để xác định chủng Lactobacilus H5 thích hợp với hàm lượng nitơ nào, chúng tơi tếp tục tiến hành thí nghiệm mơi trường nhân giống (có hàm lượng đường thích hợp 100 (g/l)) với nguồn nitơ hữu với hàm lượng (g/l) ; (g/l) ; (g/l); 11 (g/l) nhiệt độ 28 C nuôi cấy máy lắc Số lƣợng tế bào (x106/ml) thời gian - ngày Kết thể hình 3.10 3.11 140 120 100 80 60 40 20 Số lượng tế bào 11 Hàm lượng nitơ hữu (g/l) Hình 3.10 Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng hàm lượng nitơ hữu đến tốc độ phát triển chủng Lactobacillus H5 Độ axit (%V) 2.5 1.5 Độ axit (%/V) 0.5 11 Hàm lượng nitơ hữu (g/l) Hình 3.11 Đồ thị biểu diễn biến thiên độ axit hàm lượngnitơ hữu khác Từ hình 3.10 3.11 ta thấy: hàm lượng nitơ hữu tảo xoắn mức (g/l) (g/l) không đủ cung cấp nhu cầu nitơ vi khuẩn Vì số sinh thấp, chất lượng sản phẩm chưa tốt Hàm lượng nitơ hữu mức 11 (g/l)lại cao khiến cho vi khuẩn không hấp thu hết, lượng nitơ hữu tồn dư môi trường ức chế phát triển vi khuẩn q trình lên men diễn chậm Sản phẩm lên men có số thấp, chất lượng cảm quan mức trung bình khá.Kết phù hợp với nghiên cứu tác giả Lim HJ cs [24] vi khuẩn Lactobacillus cho thấy nguồnnitơ hữu mức (g) cho độ axit 1,92 ± 0,2(% / V), số lượng tế bào 129 ± 0,37 (x10 /ml) Như vậy, ta thấy chủng vi khuẩn Lactobacillus H5 phát triển tốt m i trường dinh dưỡng chứa nitơ hữu tảo xoắn nồng độ (g/l) 3.2.3 Ảnh hưởng hàm lượng KH2PO4 đến trình lên men lactc tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina KH2PO4 nguồn dinh dưỡng quan trọng cung cấp photpho cho tế bào vi khuẩn Để xác định nồng độ KH2PO4 thích hợp cho q trình lên men chủng Lactocbacillus H5 tơi tiến hành nghiên cứu thí nghiệm lên men môi trường nhân giống với hàm lượng đường 100 (g/l), hàm lượng giống 10%, KH2PO4ở nồng độtừ 0.5 - (g/l) môi trường riêng nguồn cacbon nitơ sử dụng nguồn cacbon nitơ với thành phần hàm lượng theo kết thí nghiệm nghiên cứu thu Sau ngày nuôi cấy, ta thu kết bảng 3.10 sau Bảng 3.10 Ảnh hưởng hàm lượng KH2PO4 đến trình lên men chủng vi khuẩn Lactobacillus H5 Hàm lượng KH2PO4 (g/l) Số lượng tế bào (x10 /ml) Độ axit (%/V) 0.25 0.5 1.5 115 ± 0,29 120 ± 0,28 130 ± 0,28 125 ± 0,39 99 ± 0,39 1,20 ± 0,2 1,60 ± 0,2 1,90 ± 0,2 1,70 ± 0,2 1,62 ± 0,2 Từ bảng 3.10ta thấy bổ sung KH2PO4 với hàm lượng 0,25; 0,5 1,5 (g/l) sản phẩm lên men thấp, bổ sung hàm lượng 1,0 (g/l) KH2PO4 cho tốc độ lên men cao, lượng axit sinh nhiều, số lượng tế bào vi khuẩn lớn, sản phẩm lên men vị êm dịu, Ở nồng độ 2,0 (g/l) tốc độ lên men hàm lượng axit, mật độ tế bào vi khuẩn giảm Sở dĩ bổ sung KH2PO4 ta cung cấp cho môi trường lên men nguyên tố khoáng P, K thiếu nguyên tố môi trường phá hỏng trao đổi chất trình tổng hợp protein Nhưng bổ sung hàm lượng KH2PO4 cao có tác dụng ngược lại, tốc độ lên men giảm, sản phẩm lên men bị vẩn đục, gây mùi khó chịu Photpho kali thành phần cấu tạo quan trọng tế bào như: acid nucleic, protein, phospholipid nhiều coenzyme quan trọng ADP, ATP, NADP, tham gia vào trình oxy hóa rượu thành axit axetic đến CO2 H2O Khi hàm lượng KH2PO4 lớn 1,5 (g/l) dẫn tới dư thừa phospho kali làm thay đổi đặc tính lý hóa mơi trường, ức chế q trình sinh trưởng phát triển vi khuẩn dẫn tới ảnh hưởng đến trình lên men Ngược lại, lượng photpho kali thấp (dưới 0,5 (g/l)) không đủ để cấu thành coezim xúc tác cho phản ứng q trình sinh trưởng Do bổ sung KH2PO4 với hàm lượng 1,0 (g/l) hiệu suất lên men cao, độ axit 1,90 ± 0,2 (% / V), số lượng tế bào 130 ± 0,28 (x10 /ml), sản phẩm cảm quan tốt Kết phù hợp với nghiên cứu tác giả trước nghiên cứu vi khuẩn Lactobacillus [24] Như vậy, hàm lượng KH2PO4 thích hợp cho q trình lên men lactic tạo nước giải khát chủng vi khuẩn Lactobacillus H5 1,0 (g/l) 3.2.4 Ảnh hưởng hàm lượng MgSO4.7H2O đến trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina Nguồn MgSO4.7H2O có vai trò quan trọng q trình lên men Magie nhân tố tham gia vào việc tạo thành enzyme, enzyme xúc tác cho số phản ứng chuyển hóa chất lên men Chúng tơi chọn sử dụng MgSO4.7H2O mức 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0 (g/l) Kết thí nghiệm dẫn bảng 3.11 Bảng 3.11 Ảnh hưởng hàm lượng MgSO4.7H2O đến trình lên mencủa chủng vi khuẩn Lactobacillus H5 Hàm lượng 0,2 0,4 0,6 0,8 101 ± 0,29 118 ± 0,25 130 ± 0,32 120 ± 0,27 116 ± 0,38 1,46 ± 0,2 1,66 ± 0,2 1,92 ± 0,2 1,78 ± 0,2 1,64 ± 0,2 MgSO4.7H2O(g/l) Số lượng tế bào (x10 /ml) Độ axit (%/V) Kết nghiên cứu cho thấy bổ sung MgSO4.7H2O với hàm lượng 0,2 (g/l) 0,4 (g/l) số sinh thấp, bổ sung hàm lượng 0,6 (g/l) MgSO4.7H2O cho tốc độ lên men cao, lượng axit sinh nhiều, số lượng tế bào vi khuẩn lớn, sản phẩm lên men vị êm dịu, Ở nồng độ 0,8 (g/l) 1,0 (g/l) tốc độ lên men hàm lượng axit giảm, mật độ tế bào giảm Sở dĩ bổ sung MgSO4.7H2O ta cung cấp cho môi trường lên men nguyên tố khoáng Mg S, thiếu nguyên tố môi trường sẽphá hỏng trao đổi chất trình tổng hợp protein Đặc biệt hợp chất chứa S đóng vai trò quan trọng hoạt động sống vi khuẩn Nhưng bổ sung hàm lượng MgSO4.7H2O cao có tác dụng ngược lại, tốc độ lên men giảm, sản phẩm lên men bị vẩn đục, gây mùi khó chịu [22], [24] Chủng vi khuẩn Lactobacillus H5 lên men mạnh với độ axit 1,92 ± 0,2 (% / V), số lượng tế bào 130 ± 0,32 (x10 /ml), sản phẩm cảm quan tốt Hàm lượng MgSO4.7H2O thích hợp cho trình lên men lactic tạo nước giải khát chủng Lactobacillus H5 0,6 (g/l ) Như vậy, hàm lượng đường sacarose 100 (g/l), hàm lượng nitơ hữu tảo xoắn (g/l), hàm lượngKH2PO4 1,0 (g/l), hàm lượng MgSO4.7H2O 0,6 (g/l) thích hợp để lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina KẾT LUẬN 1.Kết luận 1.1.Phân lập 15 mẫu vi khuẩn lactic dựa vào đặc điểm hình thái, kích thước tuyển chọnđược chủng vi khuẩn Lactobacillus H1, H2, H4, H5, H6, H7, H8, H11, H14, chủng Lactobacillus H5thích hợp để lên men lactc tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina 1.2 Lựa chọn nguồn dinh dưỡng thích hợp cho lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina đường saccharose: 100 (g/l); nitơ hữu tảo xoắn: (g/l); KH2PO4: (g/l); MgSO4.7H2O: 0,6 (g/l) 2.Kiến nghị Nghiên cứu ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng điều kiện môi trường khác với nguồn dinh dưỡng mà đề tài nghiên cứu tới trình lên men lactc tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Phạm Thị Trân Châu, Trần Thị Áng (2004), “Hóa sinh học”, Nxb Giáo dục [2] Ngô Thị Thùy Dung, Huỳnh Thị Yến Ly, Huỳnh Xuân Phong (2011), “Phân lập tuyển chọn vi khuẩn lactic có khả sinh chất kháng khuẩn”, Tạp chí khoa học 2011:19a 176-184 Trường Đại học Cần Thơ [3] Nguyễn Lân Dũng, Phạm Thị Trân Châu, Nguyễn Thanh Hiền, Lê Đình Lương, Đồn Xn Mượu, Nguyễn Đình Quyết, Phạm Văn Ty (1978), “ ột số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học”, Nxb khoa học kĩ thuật [4] Nguyễn Thành Đạt, Mai Thị H ng (2000), “Sinh học vi sinh vật”, Nxb Giáo Dục [5] Nguyễn Thành Đạt, Nguyễn Duy Thảo (1986), “Vi sinh vật học”, Nxb Giáo dục [6] Mai Thị H ng, Đinh Thị Kim Nhung, Vương Trọng Hào (2011), “ hực hành vi sinh vật học”, Nxb Đại Học Sư Phạm Hà Nội [7] Thanh Gia Ngọc Hân (2007), “Nghiên cứu phương pháp chiết xuất dịch từ sinh khối vi khuẩn lam Spirulina platensis ổ sung vào nước giải khát”, Luận văn thạc sĩ, Trường Đại học Nông lâm thành phố Hồ Chí Minh [8] Đặng Đình Kim, Đặng Hồng Phước Hiền (1994), “Vi tảo ứng dụng chúng”, Tạp chí sinh học, 16 (3) [9] Lâm Thị Hồng Liên (2013), “Nghiên cứu số chủng nấm men lên men kom ucha từ trà Shan tuyết Hà Giang”, Luận văn thạc sỹ, Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội [10] Đào Thị Lương, Nguyễn Thị Anh Đào, Nguyễn Thị Kim Quy, Trần Thị Lệ Quyên, Dương Văn Hợp2014), “Phân lập tuyển chọn vi khuẩn lactic dùng chế iến ảo quản thức ăn th xanh phụ ph m n ng nghiệp cho gia súc nhai lại” Tạp chí sinh học, 36(1): 126 – 129 [11] Nguyễn Đức Lượng (2000), C ng nghệ vi sinh vật tập 1-2-3, Nxb Đại học Quốc Gia thành phố Hồ Chí Minh [12] Đinh Thị Kim Nhung (1996), “ Nghiên cứu số đặc điểm sinh học vi khuẩn Acetobacter ứng dụng chúng lên men acid acetic theo phương pháp chìm”, Luận án Tiến sỹ Sinh học, Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội [13] Hoàng Nghĩa Sơn (2000), “Nghiên cứu sản xuất sử dụng tảo Spirulina platensis làm thức ăn ổ sung chăn nu i gà qui m gia đình”, Luận án tến sĩ nông nghiệp, Viện khoa học kỹ thuật nông nghiệp miền Nam, TP HCM [14] Lê Văn Thăng (1999), “Spirulina - Nu i trồng, sử dụng y dược dinh dưỡng”, Nxb Y học [15] Nguyễn Hữu Thước (1988), “ ảo xoắn Spirulina - Giá trị dinh dưỡng lợi ích với sức khỏe”, Nxb KHKT Hà Nội [16] Bùi Thị Thủy (2015), ”Ảnh hưởng m i trường dinh dưỡng tới trình tạo sản phẩm kom ucha từ chè (Camellia sinensis) P 10”, Luận văn thạc sỹ sinh học, Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội [17] Vũ Văn Vụ, Nguyễn Văn Anh1994), “Quang hợp sinh trưởng tảo Spirulina platensis điềukiệnthiếunitơ, photpho kali”, Tạp chí sinh học,16 (3), 55-57 [18] Ahsan M and Habib Mashuda Parvin B (2008), “ review on culture, production and use of Spirulina as food for humans and feeds for domestic animals and fish”, Rome, Italy [19] Belay, A (1997), “ ass culture of Spirulina outdoors”, The Earthrise farms experience, pp 131–158 [20] Bergey H, John G Holt (1992) Bergey’s manual of dererminativabacteriology Wolters kluwer health,p.71- 84 [21] Boesch, C., Trcek, J., Sievers, M & Teuber, M, (1998), “ ceto acter intermedius sp”nov Syst Appl Microbiol 21, 220–229 [22] Goh, W.N., Rosma A., Kaur, B., Fazilah, A., Karim A.A and Rajeev Bhat (2012), “Fermentaton of lack tea roth (Kom ucha): I Efects of sucrose concentration and fermentation time on the yield of micro ial cellulose”, Internatonal Food Research Journal 19(1), P 109-117 [23] Markov S.L., Malbasa R.V., Hauk M.J., Cvetkovic D.D, (2001), “Investigation of tea fungus associations” I he yeasts, Acta Periodica Technologica, Vol 32 pp 133–138 [24] Lim HJ., Kim SY., Lee WK2004),“Isolation of Cholesterol-Lowering Lactc AcidBacteria from Human Intestne for Probiotic Use Journal of Veterinarycience”, (4),pp 391-395 [25] Van Eykelenburg, C (1980),“Ecophysiological studies on Spirulina platensisEffect of temperature, ligh intensity and nitrate concentraton on growth and ultrastructure”, Antonie van Leeuwenhoek, 46, pp 113127 [26] http://www.vi.wikipedia.org/wiki/Tảo_xoắn - 35k [27] https://taospirulina.wordpress.com/2013/03/27/tao-spirulina-tongquan- ve-tao-xoan-spirulina/ [28] https://taospirulina.wordpress.com/2013/04/03/thanh-phan-gia-tridinh- duong-cua-tao-spirulina ... Nghiên cứu ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng đến trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố dinh dưỡng đến trình lên men lactic tạo. .. số chủng lactic có khả lên men tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina 3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng đến trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina Ý nghĩa khoa... 3.2.1 Ảnh hưởng hàm lượng đường đến trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn Spirulina 44 3.2.2 Ảnh hưởng hàm lượng nitơ hữu đến trình lên men lactic tạo nước giải khát từ tảo xoắn