Nghiên cứu ảnh hưởng của nguồn dinh dưỡng đến quá trình tạo màng biocellulose trên môi trường dịch dưa chuột

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH – KTNN ==  == NGUYỄN THỊ MỸ LINH NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA NGUỒN DINH DƯỠNG ĐẾN QUÁ TRÌNH TẠO MÀNG BIOCELLULOSE TRÊN MÔI TRƯỜNG DỊCH DƯA CHUỘT (CUCUMIS SATIVUS L.1753) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Vi sinh vật HÀ NỘI – 2018 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH – KTNN ==  == NGUYỄN THỊ MỸ LINH NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA NGUỒN DINH DƯỠNG ĐẾN QUÁ TRÌNH TẠO MÀNG BIOCELLULOSE TRÊN MƠI TRƯỜNG DỊCH DƯA CHUỘT (CUCUMIS SATIVUS L.1753) KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Vi sinh vật Người hướng dẫn khoa học ThS NGUYỄN THỊ KIM NGOAN HÀ NỘI – 2018 LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới cô giáo, ThS Nguyễn Thị Kim Ngoan, người tận tình bảo giúp đỡ em thời gian học tập nghiên cứu đề tài Em xin bày tỏ lòng biết ơn tới thầy giáo, cô giáo tổ môn Thực vật - Vi sinh, Khoa Sinh - KTNN, Trường Đại học Sư phạm Hà Nội nhiệt tình giảng dạy truyền đạt kinh nghiệm suốt thời gian em thực đề tài Em xin chân thành cảm ơnBan Giám hiệu nhà trường, Ban Chủ nhiệm khoa Sinh -KTNN, Trung tâm thơng tin thư viện, Phòng thí nghiệm Vi sinh vật Trường Đại học Sư phạm Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi cho em hồn thành khóa luận Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè người thân, người ln quan tâm, động viên, khích lệ, giúp đỡ em suốt q trình học tập, tiến hành hồn thiện đề tài Hà Nội, Ngày Tháng Năm 2018 Sinh viên thực Nguyễn Thị Mỹ Linh LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan kết nghiên cứu riêng cá nhân em, tất số liệu thu thập từ thực nghiệm qua xử lý thống kê, hồn tồn khơng có số liệu chép, bịa đặt Đề tài nghiên cứu không trùng với cơng trình nghiên cứu tác giả khác Trong đề tài, em có sử dụng số liệu số tác giả khác, em xin phép tác giả trích dẫn để bổ sung cho khóa luận Nếu sai em xin chịu hồn tồn trách nhiệm Hà Nội, Ngày Tháng Năm 2018 Sinh viên thực Nguyễn Thị Mỹ Linh MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn Đóng góp đề tài NỘI DUNG Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Vị trí đặc điểm phân loại Gluconacetobacter sinh giới 1.1.1 Vị trí phân loại Gluconacetobacter sinh giới 1.1.2 Đặc điểm phân loại Gluconacetobacter 1.2 Nhu cầu dinh dưỡng vi khuẩn Gluconacetobacter 1.2.1 Ảnh hưởng nguồn cacbon 1.2.2 Nhu cầu nitơ vi sinh vật 1.3 Điều kiện nuôi cấy 1.3.1 Độ pH 1.3.2 Nhiệt độ 1.3.3 Độ thơng khí 1.4 Bacterial cellulose (BC) 1.4.1 Cấu trúc 1.4.2 Một số tính chất 1.4.3 Cơ chế tổng hợp 1.5 Tình hình nghiên cứu sản xuất BC 10 1.5.1 Trên giới 10 1.5.2 Tại Việt Nam 11 1.6 Dưa chuột Cucumis sativus 11 1.6.1 Lịch sử phân loại 11 1.6.2 Thành phần dinh dưỡng 12 1.6.3 Ứng dụng 12 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Đối tượng nghiên cứu hóa chất 14 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 14 2.1.2 Hóa chất thiết bị nghiên cứu 14 2.1.3 Các loại môi trường 15 2.2 Phương pháp nghiên cứu 15 2.2.1 Phương pháp vi sinh 15 2.2.2 Phương pháp hóa sinh 18 2.2.3 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng đến trình lên men 18 2.2.4 Phương pháp cảm quan 19 2.2.5 Thử nghiệm khả tạo màng Biocellulose môi trường chọn (MT4) 20 2.2.6 Phương pháp xác định trọng lượng tươi màng Biocellulose 20 2.2.7 Phương pháp thống kê xử lý kết 20 2.3 Địa điểm tiến hành thí nghiệm 21 2.4 Thời gian thực đề tài 21 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 22 3.1 Phân lập, tuyển chọn chủng vi khuẩn có khả sinh màng Biocellulose mơi trường dịch dưa chuột Cucumis sativus 22 3.1.1 Phân lập Gluconacetobacter có khả sinh màng Biocellulose 22 3.1.2 Tuyển chọn chủng vi khuẩn có khả tạo màng Biocellulose dai, mỏng 25 3.2 Nghiên cứu số đặc tính sinh học chủng G xylinus 29 3.2.1 Hình thái tế bào học chủng vi khuẩn G xylinus 29 3.2.2 Sinh trưởng môi trường thạch đĩa 30 3.2.3 Sinh trưởng môi trường lỏng 31 3.2.4 Đặc tính sinh hóa vi khuẩn G xylinus 31 3.3 Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng tới khả tạo màng Biocellulose môi trường có bổ sung dịch dưa chuột Cucumis sativus 32 3.3.1 Ảnh hưởng hàm lượng cacbon tới khả lên men tạo màng Biocellulose 32 3.3.2 Ảnh hưởng hàm lượng nitơ tới khả lên men tạo màng Biocellulose 35 3.3.3 Thử nghiệm khả tạo màng Biocellulose môi trường chọn (MT4) 37 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 Kết luận 39 Kiến nghị 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 A TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT 40 B TÀI LIỆU TIẾNG ANH 42 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC HÌNH Bảng 1.1 Đặc điểm sinh hóa chủng vi khuẩn Gluconacetobacter theo Frateur Hình 1.1 Sợi cellulose màng Biocellulose Hình 1.2 Con đường sinh tổng hợp cellulose Gluconacetobacter 10 Hình 1.3 Dưa chuột Cucumis sativus 11 Hình 3.1 Quy trình phân lập vi khuẩn Gluconacetobacter 22 Hình 3.2 Khuẩn lạc vi khuẩn Gluconacetobacter 25 Hình 3.3 Hình thái tế bào vi khuẩn Gluconacetobacter nhuộm Gram độ phóng đại 1000 kính hiển vi quang học 26 Bảng 3.1 Một số đặc tính màng Biocellulose 27 Hình 3.4 Màng Biocellulose sinh từ vi khuẩn Gluconacetobacter 27 Hình 3.5 Màng Biocellulose chủng vi khuẩn D1 D2 tạo 28 Hình 3.6 Chủng giống vi khuẩn G xylinus 29 Hình 3.7 Kết nhuộm Gram G xylinus độ phóng đại 1000 30 kính hiển vi quang học 30 Hình 3.8 G xylinus môi trường thạch đĩa 30 Hình 3.9 G xylinus môi trường lỏng 31 Bảng 3.2 Ảnh hưởng hàm lượng glucose đến khả tạo màng Biocellulose 33 Hình 3.10 Ảnh hưởng hàm lượng glucose tới độ dày màng Biocellulose 34 Bảng 3.3 Ảnh hưởng hàm lượng (NH4)2SO4 đến khả tạo màng Biocellulose 35 Hình 3.11 Ảnh hưởng (NH4)2SO4 tới độ dày màng Biocellulose 36 Hình 3.12 Màng Biocellulosethu môi trường MT3 môi trường chọn lọc MT4 38 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Đặc điểm sinh hóa chủng vi khuẩn Gluconacetobacter theo Frateur Bảng 3.1 Một số đặc tính màng Biocellulose 27 Bảng 3.2 Ảnh hưởng hàm lượng glucose đến khả tạo màng Biocellulose 33 Bảng 3.3 Ảnh hưởng hàm lượng (NH4)2SO4 đến khả tạo màng Biocellulose 35 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Biểu đồ biểu diễn ảnh hưởng hàm lượng glucose đến khả tạo màng Biocellulose 33 Biểu đồ 3.2.Biểu đồ biểu diễn ảnh hưởng hàm lượng (NH4)2SO4 đến khả tạo màng Biocellulose 36 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Như biết kỉ XX kỉ ngành cơng nghệ thơng tin kỉ XXI kỉ ngành công nghệ sinh học Ngày công nghệ sinh học dần trở thành ngành kĩ thuật chủ đạo chiếm giữ vị trí cao nhiều quốc gia giới Là phận ngành công nghệ sinh học, công nghệ vi sinh phát triển mạnh mẽ với thành tựu lớn có ý nghĩa đời sống, ngành như: công nghiệp, nông nghiệp, y học, Cho đến ngày nguồn nguyên liệu quan tâm gần cellulose vi khuẩn hay Biocellulose Hiện màng Biocellulose xem nguồn nguyên liệu có tiềm ứng dụng nhiều lĩnh vực khác công nghiệp thực phẩm, công nghệ giấy, công nghệ sản xuất pin đặc biệt lĩnh vực y học, màng Biocellulose số nước giới nghiên cứu ứng dụng làm màng trị bỏng, mặt nạ dưỡng da, mạch máu nhân tạo Trên giới việc nghiên cứu Gluconacetobacter trình sinh tổng hợp Biocellulose ứng dụng Biocellulose sớm Những nghiên cứu Brown A.J cộng năm (1886) Trải qua kỷ Gluconacetobacter màng Biocellulose thu hút ý nhiều nhà khoa học giới Ở Việt Nam, nghiên cứu Gluconacetobacter, màng Biocellulose ứng dụng vấn đề mẻ, quan tâm gần Các nghiên cứu cơng bố vấn đề khiêm tốn Các nghiên cứu dừng nghiên cứu trình tạo màng Biocellulose ứng dụng sản xuất thạch dừa, làm giá thể gắn kết tế bào vi khuẩn làm màng trị bỏng Trong năm gần phòng thí nghiệm Vi sinh khoa Sinh Khi quan sát hình 3.12 ta đo kích thước khuẩn lạc xác định đường kính trung bình 3mm Các khuẩn lạc phẳng lồi lên, tách khuẩn lạc khỏi môi trường thấy dai, dễ tách 3.2.3 Sinh trưởng môi trường lỏng Vi khuẩn G xylinus ni cấy mơi trường lỏng hình thành lớp màng có màu trắng, bề mặt màng nhẵn, dai bề mặt ni cấy (hình 3.9): Hình 3.9 G xylinus mơi trường lỏng Vi khuẩn G xylinus lồi vi khuẩn hiếu khí, sống mơi trường lỏng có nguồn dinh dưỡng đầy đủ thực trình trao đổi chất cách hấp thụ đường glucose kết hợp với số acid béo để tạo thành tiền chất nằm màng Tiền chất tiết nhờ hệ thống lỗ nằm màng tế bào với enzyme polymer hóa glucose thành cellulose, mơi trường lỏng chúng phát triển thành màng Biocellulose 3.2.4 Đặc tính sinh hóa vi khuẩn G xylinus 3.2.4.1 Hoạt tính catalase Khi nhỏ H2O2 3% lên bề mặt khuẩn lạc thấy có tượng sủi bọt khí Chứng tỏ oxy giải phóng ra, hay nói cách khác tác dụng enzyme catalase phân giải H2O2 theo phương trình: H2O2  H2O + ½ O2 3.2.4.2 Khả chuyển hóa glucose thành acid gluconic Vòng sáng xuất xung quanh khuẩn lạc mơi trường có chứa CaCO3 điều cho thấy acid gluconic tạo thành (hình 3.15) Chúng tham gia phản ứng với CaCO3 để chuyển môi trường từ màu trắng sang không màu + H + CaCO3 2+ Ca + H2O + CO2 3.2.4.3 Kiểm tra khả tổng hợp cellulose Nhỏ dung dịch Lugol H2SO4 60% lên mặt lớp màng Biocellulose thấy xuất màu lam Như chứng tỏ G xylinus có khả hình thành màng cellulose Nghiên cứu đặc tính sinh học chủng vi khuẩn G xylinus dựa hình thái tế bào học chủng vi khuẩn, sinh trưởng môi trường thạch đĩa, môi trường lỏng số đặc tính sinh hóa chứng tỏ chủng vi khuẩn G xylinus có khả tạo màng Biocellulose 3.3 Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng tới khả tạo màng Biocellulose mơi trường có bổ sung dịch dưa chuột Cucumis sativus 3.3.1 Ảnh hưởng hàm lượng cacbon tới khả lên men tạo màng Biocellulose Để nghiên cứu ảnh hưởng nguồn cacbon đến trình tạo màng Biocellulose tiến hành theo phương pháp 2.2.3.1 Kết cho thấy với nguồn cacbon glucose màng Biocellulose đạt yêu cầu đặt (mỏng, nhẵn, dai, thời gian tạo màng ngắn nhất) Do chúng tơi định chọn glucose làm nguồn cacbon cho môi trường lên màng phục vụ cho nghiên cứu Để thấy rõ ảnh hưởng hàm lượng glucose tới q trình tạo màng Biocellulose, chúng tơi sử dụng môi trường tạo màng thay đổi hàm lượng nguồn glucose từ –25 (g/l) Sau ngày nuôi cấy, tiến hành thu 32 nhận màng Biocellulose Kết trình bày bảng 3.2: Bảng 3.2 Ảnh hưởng hàm lượng glucose đến khả tạo màng Biocellulose Hàm lượng ̅± m Đặc điểm màng Biocellulose Glucose (g/l) 1.33 ± 0,01 Màng mỏng, dễ bị rách 0,5 1,0 1.84 ± 0,02 2.44 ± 0,05 Màng mỏng, độ dai 5,0 10 2.65 ± 0,04 2.76 ± 0,03 Màng mỏng, dai nhẵn (1-2mm) 15 3.35 ± 0,03 20 Màng dày, dai (3-4mm) 3.74 ± 0,03 25 Màng dày, dai, không nhẵn (5mm) 3.86 ± 0,02 M: khối lượng tươi màng Biocellulose (g) 4,5 3,5 2,5 1,5 0,5 0 0,5 1,0 5,0 10 15 20 25 Hàm lượng Glucose (g/l) Biểu đồ 3.1 Biểu đồ biểu diễn ảnh hưởng hàm lượng glucose đến khả tạo màng Biocellulose 33 Glucose 15 (g/l) Hình 3.10 Ảnh hưởng hàm lượng glucose tới độ dày màng Biocellulose Từ kết bảng 3.2, biểu đồ 3.1 hình 3.10 cho thấy tỷ lệ màng Biocellulose hình thành phụ thuộc nhiều vào hàm lượng đường glucose Nếu hàm lượng glucose nhỏ 10 (g/l) khối lượng Biocellulose thấp Bởi q trình lên men có khoảng 50% hàm lượng glucose tham gia vào hình thành màng Biocellulose, phần lại cung cấp cho hoạt động sống tế bào Do đó, nguồn cacbon nhỏ 10 (g/l) dịch nuôi cấy không đủ cung cấp cho nhu cầu sống tế bào vi khuẩn, nên lượng cellulose sản sinh Ngược lại, hàm lượng glucose lớn 15 (g/l) vi khuẩn không sử dụng hết, lượng glucose chuyển hóa thành acid gluconic làm cho pH mơi trường giảm, ức chế trình tổng hợp cellulose, tốc độ tạo màng Biocellulose giảm chất lượng màng không đảm bảo Dựa theo kết nghiên cứu đưa Thạc sĩ Đặng Thị Hồng xác định glucose tốt cho trình lên men tạo màng mỏng 18 (g/l) [7], tác giả Schramm Hestrin (1954) xác định 20 (g/l) [27] Để tạo màng mỏng phục vụ mục đích nghiên cứu mơi trường MT3, tơi định sử dụng hàm lượng glucose 15 (g/l) cho nghiên cứu Hàm lượng glucose 15 (g/l) thích hợp cho q trình lên men tạo màng Biocellulose chủng vi khuẩn G xylinus 3.3.2 Ảnh hưởng hàm lượng nitơ tới khả lên men tạo màng Biocellulose Nguồn nitơ cung cấp cho thể vi sinh vật ngun liệu để hình thành nhóm amin phân tử aminoacid, nucleotit, bazơ dị vòng hợp chất hóa học nguyên sinh chất giúp cho vi sinh vật sinh trưởng Do tơi định chọn nguồn nitơ (NH4)2SO4 thay đổi nồng độ từ 0-5,0 (g/l) Kết thu thể qua bảng 3.3: Bảng 3.3 Ảnh hưởng hàm lượng (NH4)2SO4 đến khả tạo màng Biocellulose Hàm lượng (NH4)2SO4(g/l) Đặc điểm màng Biocellulose 0,1 0,43 ± 0,02 Màng mỏng, dễ rách 0,5 1,0 1,5 1,25 ± 0,03 1,63 ± 0,03 Màng mỏng, dai, nhẵn (1-2 mm) 2,0 2,5 ̅± m 2,73 ± 0,03 2,95 ± 0,03 3,24 ± 0,02 Màng dày, dai nhẵn (3-4 mm) 3,48 ± 0,03 3,0 2,87 ± 0,01 4,0 2,24 ± 0,04 5,0 Màng mỏng 1,63 ± 0,01 M: khối lượng tươi màng Biocellulose (g) 3,5 2,5 1,5 0,5 0 0,1 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 4,0 5,0 Hàm lượng (NH4)2SO4 (g/l) Biểu đồ 3.2.Biểu đồ biểu diễn ảnh hưởng hàm lượng (NH4)2SO4 đến khả tạo màng Biocellulose (NH4)2SO4 1,5 g/l Hình 3.11 Ảnh hưởng (NH4)2SO4 tới độ dày màng Biocellulose Từ bảng 3.3, biểu đồ 3.2 hình 3.11 ta thấy (NH4)2SO4 hàm lượng 1,0-1,5 (g/l) vi khuẩn tạo màng Biocellulose có độ dày phù hợp Có thể giải thích kết thu sau: Kết kiểm tra cho thấy, hàm lượng 1,0-1,5 (g/l) môi trường cho hiệu suất màng Biocellulose cao Hàm lượng (NH4)2SO4 1,5 (g/l) cao yêu cầu G xylinus môi trường MT3, khơng hấp thụ hết lượng sulphate amone, lượng lại mơi trường ức chế phát triển vi khuẩn Vì vậy, lượng Biocellulose tạo thấp so với mơi trường có hàm lượng (NH4)2SO4 1,0-1,5 (g/l) Còn hàm lượng (NH4)2SO4 1,0 (g/l) thấp so với yêu cầu cho phát triển vi khuẩn, nên lượng Biocellulose tạo thấp Do chúng tơi định sử dụng nguồn (NH4)2SO4 với hàm lượng 1,5 (g/l) để tiến hành thí nghiệm Hàm lượng (NH4)2SO4 1,5 (g/l) thích hợp cho q trình lên men tạo màng Biocellulose chủng vi khuẩn G xylinus 3.3.3 Thử nghiệm khả tạo màng Biocellulose môi trường chọn (MT4) Sau xác định ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng tới khả tạo màng Biocellulose vi khuẩn G xylinus môi trường MT3, định tiến hành thí nghiệm đánh giá khả tạo màng mơi trường chọn (MT4) có thành phần sau: Nguồn cacbon: Glucose 15 (g/l); Nguồn nitơ (NH4)2SO4 1,5 (g/l) Kết thu sau: Sau ngày nuôi cấy tiến hành thu màng kiểm tra chất lượng màng Biocellulose thu so sánh với màng thu mơi trường MT3 thấy : chất lượng màng tốt, phù hợp với việc làm mặt nạ dưỡng da MT3 MT4 Hình 3.12 Màng Biocellulosethu môi trường MT3 môi trường chọn lọc MT4 Thử nghiệm lên men tạo màng môi trường chọn MT4 cho thấy màng Biocellulose lên men đạt tiêu chuẩn mỏng, dai nhẵn so với môi trường ban đầu MT3 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận 1.1 Phân lập, tuyển chọn chủng G xylinus có khả sinh màng Biocellulose có khả hình thành màng mỏng dai, mơi trường có bổ sung dịch dưa chuột Cucumis sativus 1.2 Nghiên cứu đặc tính sinh học chủng vi khuẩn G xylinus dựa hình thái tế bào học chủng vi khuẩn, sinh trưởng môi trường thạch đĩa, môi trường lỏng số đặc tính sinh hóa chứng tỏ chủng vi khuẩn G xylinus có khả tạo màng Biocellulose 1.3 Tìm nguồn dinh dưỡng thích hợp cho q trình lên men tạo màng Biocellulose mơi trường có bổ sung dịch dưa chuột Cucumis sativus gồm: Nguồn cacbon phù hợp glucose với hàm lượng 15 (g/l) Nguồn nitơ: (NH4)2SO4 1,5 (g/l) Sau ngày nuôi cấy thử nghiệm môi trường MT4 tĩnh ta thu màng mỏng, dai, nhẵn đạt tiêu chuẩn Kiến nghị Do thời gian có hạn nên nghiên cứu ảnh hưởng tất yếu tố mơi trường tới q trình hình thành màng Biocellulose chủng vi khuẩn G xylinus mơi trường có bổ sung dịch dưa chuột Cucumis sativus Để màng Biocellulose có chất lượng tốt, mang lại hiệu kinh tế cao, mặt khoa học thẩm mĩ, xin đề nghị số ý kiến sau: Tiến hành thí nghiệm quy mơ lớn hơn, lặp lại thí nghiệm nhiều lần để kiểm chứng kết thu Tiến hành nghiên cứu để tìm kiếm nguồn dinh dưỡng thích hợp quy trình xử lí phù hợp cho việc nghiên cứu làm mặt nạ dưỡng da TÀI LIỆU THAM KHẢO A TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT [1] Nguyễn Lân Dũng (1976), Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học, tập 1- 2- 3, Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội [2] Nguyễn Thành Đạt, Nguyễn Duy Thảo, Vương Trọng Hào (1990), Thực hành vi sinh vật, Nxb giáo dục, tr 17-34, 63-74, 89-92 [3] Đặng Thị Hồng (2007), Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn Acetobacter xylinum chế tạo màng sinh học, Luận văn thạc sĩ sinh học ĐHSP Hà Nội [4] Nguyễn Quỳnh Hương (2005), Đa dạng hóa mơi trường sản xuất bacterial cellulose từ vi khuẩn Acetobacter xylinum, Luận văn Thạc sĩ sinh học Trường Đại Học Nông Lâm TP.HCM [5] Nguyễn Thúy Hương (2008), “Ảnh hưởng nguồn chất kiểu lên men đến suất chất lượng cellulose vi khuẩn”, Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự nhiên Công nghệ, số 24, trang 205-210 [6] Huỳnh Thị Ngọc Lan, Nguyễn Văn Thanh (2006), “Nghiên cứu đặc tính màng cellulose vi khuẩn từ Acetobacter xylinum sử dụng làm màng trị bỏng”, Tạp chí dược học, số 361 [7] Nguyễn Thị Nguyệt (2008), Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinum cho màng Bacterial cellulose làm mặt nạ dưỡng da, Luận văn Thạc sĩ sinh học ĐHSP Hà Nội [8] Đinh Thị Kim Nhung (1996), Nghiên cứu số đặc điểm sinh học vi khuẩn Acetobacter ứng dụng chúng lên men acidacetic theo phương pháp chìm, Luận án PTS Sinh học, Trường Đại học Tổng hợp Hà Nội [9] Đinh Thị Kim Nhung, Dương Minh Lam (2012), “Nghiên cứu định danh chủng vi khuẩn BHN2_21 có khả tạo màng Bacterial cellulose (BC) phân lập từ mẫu bia Hà Nội”, Kỷ yếu toàn văn Hội nghị Khoa học lần 8, ĐHKHTN- ĐHQG Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 10 tháng 11, năm 2012 [10] Đinh Thị Kim Nhung, Nguyễn Thị Thùy Vân, Hoàng Thị Thảo (2011), “Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinum sinh tổng hợp màng Bacterial cellulose ứng dụng điều trị bỏng”, Tạp chí Y học thảm họa bỏng, ISSN 1859-3461 Số 2, tr 122-127 [11] Đinh Thị Kim Nhung (2012), Nghiên cứu thu nhận màng cellulose từ vi khuẩn Acetobacter, ứng dụng trị bỏng, Đề tài trọng điểm cấp Bộ (20102012) [12] Trần Như Quỳnh (2009), Nghiên cứu số đặc tính vật lý màng bacterial cellulose từ Acetobacter xylinum, ứng dụng trị bỏng Luận văn Thạc sĩ sinh học ĐHSP Hà Nội [13] Trần Linh Thước (2006), Phương pháp phân tích vi sinh vật, Nxb giáo dục, 2006, tr 1- 29, 40- 69 [14] Nguyễn Thị Thùy Vân (2009), Nghiên cứu đặc tính sinh học khả tạo màng Bacterial cellulose vi khuẩn Acetobacter xylinum phân lập từ số nguồn nguyên liệu Việt Nam, Luận văn Thạc sĩ khoa học sinh học, trường ĐHSP Hà Nội [15] www.Camnangcaytrong.com/cay-dua-chuot-dua-leo-cd29 [16] www.adiva.com.vn/lam-dep-bang-mat-na-dua-leo-dua-chuot-tri-munlam-trang-da-mat-mat-da-ngua-lao-hoa B TÀI LIỆU TIẾNG ANH [1] Alexander Steinbuchel, Sang Ki Rhee (2005) Polysaccharides and polyamides in the food industry, www.wiley.vch pp 31-85 [2] Barbara Surma - S'lusarska, Sebastion, Presler, Dariusz Danielewicz (2008), "Characteristics of Bacterial Cellulose Obtained from Actobacter xylinum culture for applycation in papermarking", FIBRES TEXTILES in Eastem Europe, vol 16, No 4, pp 108-111 [3] Bergey H, John G Holt( 1992) Bergey’s manual of dererminativa bacteriology, Wolters kluwer health,p.71- 84 [4] Brown A.J (1886), ”An acetic ferment which forms cellulose”, J Chem Soc., 49, 432-439 [5] Yamanaka S, Ishihanra M, Sugiyama J (2000) ”Structural mod-ification of bacterial cellulose”, Cellulose 7: 213-225 PHỤ LỤC Hình 1: Một số mẫu màng thu sau lên men tự nhiên Hình 2: Vòng phân giải CaCO3 Hình 3: Chuyển hóa ethanol thành acid acetic vi khuẩn acetic Hình 4: Khả tạo cellulose chủng G xylinus Hình 5: Hoạt tính catalase Hình 6: Khả oxy hóa acetat vi khuẩn G xylinus Hình 7: Kết nhuộm màng Biocellulose ... cho trình tạo màng Biocellulose vi khuẩn G xylinus môi trường dịch dưa chuột Cucumis sativus, định lựa chọn đề tài: Nghiên cứu ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng đến trình tạo màng biocellulose mơi trường. .. khả tạo màng Biocellulose môi trường chọn (MT4) Sau tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng đến khả tạo màng Biocellulose chọn nguồn dinh dưỡng hàm lượng thích hợp chúng cho trình tạo Biocellulose. ..TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH – KTNN ==  == NGUYỄN THỊ MỸ LINH NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA NGUỒN DINH DƯỠNG ĐẾN QUÁ TRÌNH TẠO MÀNG BIOCELLULOSE TRÊN MÔI TRƯỜNG DỊCH DƯA CHUỘT (CUCUMIS