Bước đầu nghiên cứu nhân nhanh in vitro giống lan thạch hộc thiết bì (dendrobium officinale kimura et migo)

Lời cảm ơn Trong thời gian hồn thành khóa luận này, em nhận nhiều giúp đỡ nhiều mặt từ cấp lãnh đạo, tập thể, cá nhân Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc kính trọng tới GS TS Nguyễn Quang Thạch, ThS Nguyễn Thị Sơn tận tình bảo, quan tâm giúp đỡ em thời gian thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn ban chủ nhiệm khoa, thầy giáo, cô giáo khoa công nghệ sinh học tạo điều kiện giúp đỡ em báo cáo khóa luận tốt nghiệp đợt thời gian làm khóa luận tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn tới ban lãnh đạo tồn thể thầy giáo, giáo, anh, chị viện sinh học nông nghiệp tạo điều kiện giúp đỡ, hỗ trợ em thời gian thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới gia đình, bạn bè người thân em động viên, ủng hộ, giúp đỡ em suốt thời gian làm khóa luận Một lần em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng Sinh viên ĐỖ THỊ HIỀN i năm 2014 MỤC LỤC 2.1.2Đặc điểm hình thái chi lan Hoàng Thảo: .8 2.1.3 Đặc điểm sinh thái học chi Dendrobium-Hoàng Thảo 10 2.4.1 Tình hình ni cấy mơ lan Hồng Thảo giới .15 2.2.2 Tình hình ni cấy mơ lan Hồng Thảo Việt Nam 18 2.5.2 Các tiêu theo dõi vườn ươm .31 2.6 Xử lí số liệu: 31 CTTD 46 CTTN 46 Tỷ lệ chồi tạo rễ (%) 46 Số rễ/cây .46 Chiếu dài rễ (cm) 46 CT1: ĐC .46 100 46 3,37 .46 1,31 .46 ++ .46 CT2: ĐC + 0,3ppm IAA/lít 46 môi trường 46 100 46 3,82 .46 1,94 .46 ++ .46 CT3: ĐC + 0,7ppm IAA/lít 46 môi trường 46 100 46 4,3 .46 2,47 .46 +++ .46 CT4: ĐC + 0,5ppm IAA/lít 46 môi trường 46 100 46 4,39 .46 2,63 .46 ++ .46 CT5: ĐC + 1ppm IAA/lít 46 môi trường 46 100 46 4,11 .46 2,21 .46 ++ .46 LSD0,05 .46 0,30 .46 0,15 .46 CV% 46 4,2 .46 4,0 .46 ii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT CT Công thức CV(%) Hệ số biến động (Correlation of Variants) ĐC Đối chứng HSN Hệ số nhân MS Murashige & Shoog, 1962 LSD Sai khác tối thiểu có ý nghĩa P = 0.5 (Least Significant Difference) ND Nước dừa VW Vacin & Went, 1949 RE Robert Ernst, 1979 iii DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1.1 Ảnh hưởng môi trường đến giai đoạn khởi động mẫu tạo vật liệu ban đầu gieo hạt lan Dendrobium officinale Kimura et Migo Error: Reference source not found Bảng 4.1.2 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến khả nhân nhanh protocorm loài lan Dendrobium officinale Kimura et Migo Error: Reference source not found Bảng 4.1.4Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả nhân nhanh protocorm lồi lan Dendrobium officinale Kimura et Migo(sau tuần ni cấy) Error: Reference source not found Bảng 4.2.1 Ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp αNAA đến phát sinh hình thái hệ số nhân đoạn thân mang mắt ngủ lan Dendrobium officinale Kimura et Migo Error: Reference source not found Bảng 4.2.2Ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp IBA đến phát sinh hình thái hệ số nhân đoạn thân mang mắt ngủ giống lan Dendrobium officinale Kimura et Migo Error: Reference source not found Bảng 4.3.1Ảnh hưởng môi trường đến khả rễ chồi loài Dendrobium officinale Kimura et Migo(sau tuần nuôi cấy) Error: Reference source not found Bảng 4.3.2.Ảnh hưởng IAA đến khả sinh rễ chồi loài lan Dendrobium officinale Kimura et Migo Error: Reference source not found Bảng 4.4Ảnh hưởng giá thể đến sinh trưởng in vitro Dendrobium officinale Kimura et Migo vườn ươm .Error: Reference source not found iv DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình Lan Thạch Hộc .Error: Reference source not found Hình Lan Thạch Hộc .Error: Reference source not found Hình Đoạn thân mang mắt ngủ Error: Reference source not found Hình : ảnh hưởng mơi trường VW, MS, H đến giai đoạn khởi tạo vật liệu ban đầu gieo hạt lan Dendrobium officinale Kimura et Migo Error: Reference source not found Hình 5: ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến khả nhân nhanh prptocorm loài lan Dendrobium officinale Kimura et Migo (sau tuần ni cấy) .Error: Reference source not found Hình 6: Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả nhân nhanh protocorm lồi lan Dendrobium officinale Kimura et Migo(sau tuần ni cấy)Error: Reference source not found Hình 7: Ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp αNAA đến phát sinh hình thái hệ số nhân đoạn thân mang mắt ngủ lan Dendrobium officinale Kimura et MigoError: Reference source not found Hình 8: mơi trường CT7 (Mơi trường MS + 20g sacaroza/lít mơi trường + 6g agar/lít mơi trường + 10% nước dừa (ND) + 0,5ppmBA+0,1 ppm αNAA môi trường tốt để tái sinh chồi cho đoạn thân mang mắt ngủ loài lan nghiên cứu.Error: Reference source not found Hình 9: Ảnh hưởng nồng độ BA kết hợp IBA đến phát sinh hình thái hệ số nhân đoạn thân mang mắt ngủ giống lan Dendrobium officinale Kimura et Migo Error: Reference source not found Hình 10: Ảnh hưởng IAA đến khả sinh rễ chồi loài lan Dendrobium officinale Kimura et Migo Error: Reference source not found Hình 11: loại giá thể trồng lan Error: Reference source not found Hình 12: Giá thể mùn dừa Error: Reference source not found v MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Thạch hộc Thiết bì có tên gọi khác Thạch hộc rỉ sắt, Hắc tiết thảo, Thiết bì lan, Lí thụ thảo thảo lâu năm thuộc Chi Thạch hộc họ Lan, thường sinh trưởng vách đá, khe đá, phụ sinh cổ thụ, vùng cao núi đá, nhiệt đới, Á nhiệt đới, độ cao từ 800 – 1000 m.Theo “Dược điển nước cộng hòa Trung Hoa” xuất năm 2005 ghi nhận Trung Quốc có Chi Thạch hộc là: Thạch hộc hoàng thảo, Thạch hộc bờm ngựa, Thạch hộc vỏ tím, Thạch hộc rỉ sắt, Thạch hộc Kim thoa, Thạch hộc rỉ sắt quý đánh giá tuyệt phẩm Thạch hộc Lan Hoàng Thảo (Dendrobium) chi lớn họ lan (Orchidaceae) Theo A Takhajan (1966) chi Hồng Thảo giới có khoảng 1400 lồi, chủ yếu phân bố lục địa Đơng Nam Á đảo thuộc Philippin, Malaixia, Inđônêxia, Ghinê, Đông Bắc Ôxtrâylia (Dương Đức Huyến, 2007) Dendrobium officinale Kimura et Migo (Thạch hộc Thiết bì) lồi lan đặc hữu, phân bố chủ yếu số vùng nhiệt đới cận nhiệt đới Trung Quốc Đây loài lan đựơc dùng để chế biến loại thuốc bổ có số tác dụng trị bệnh dưỡng âm, trừ nhiệt, lợi tiêu hóa, tăng cường sản xuất dịch tiết thể, ngăn ngừa ung thư kéo dài tuổi thọ…Nhờ hiệu trị bệnh khơng có sánh đưa D officinale vượt lên đứng đầu bảng xếp hạng loại cỏ thuốc siêu nhiên Trung quốc D Officinale loài thực vật biểu sinh thường sống bám vách đá hay lủng lẳng thân to phủ đầy mùn rêu độ cao khoảng từ 800m đến 1500m so với mực nước biển Do sống môi trường đặc biệt nên D officinale trở nên nhạy cảm lãnh địa chúng bị tàn phá Hiện D officinale phân bố phân tán không liên tục hậu tàn phá môi trường sống họat động đốn gỗ khai thác mức người khiến cho D officinale đứng bờ vực tiệt chủng, trở thành loài có nguy liệt vào danh sách lồi cần bảo vệ (S.Gu, 2007) Ở Trung Quốc có nhiều sản phẩm thuốc từ Thạch hộc bán thị trường nước Thạch hộc chế biến thành phong đấu, giá xuất vào năm 80 kỷ trước đạt mức 3.000 USD/kg Ở Đài Loan giá phong đấu từ 1.000-3.000USD/kg Nhu cầu Trung Quốc nước giới Thạch hộc lớn với giá cao, đem lại siêu lợi nhuân cho người trồng chế biến thạch hộc Nhu cầu thị trường Trung Quốc cần khoảng 2000 tấn/năm, sản xuất 200 tấn/năm Dự báo 10 năm tới thị trường nội địa cần tới 15000 tấn/năm tương đương hàng chục tỉ USD Trong năm gần Viện Sinh học Nông nghiệp thành công áp dụng công nghệ nuôi cấy mô nhân giống số loài lan địa làm dược liệu thuộc chi Hồng Thảo có nguy bị tuyệt chủng (Nguyễn Thị Sơn cs, 2012 Nguyễn Thị Sơn cs, 2013) Tuy nhiên, Việt Nam chưa có đơn vị, công ty nhân giống, nuôi trồng sản xuất cung ứng nguồn giống lan Thạch hộc Thiết bì mà hồn tồn phải nhập từ Trung Quốc Để chủ động nguồn giống có chất lượng cao, bệnh phục vụ cho phát triển sản xuất phục vụ nhu cầu nội tiêu xuất nhiệm vụ nhân giống lan phương pháp nuôi cấy mô hướng đắn nhằm bổ sung thêm giống lan thuốc, đẩy mạnh phát triển loại lan dược liệu quý cho Việt Nam vấn đề cấp thiết nên thực đề tài “Bước đầu nghiên cứu nhân nhanh in vitro giống lan Thạch hộc Thiết bì (Dendrobium officinale Kimura et Migo)” I.2 Mục đích, yêu cầu 1.2.1 Mục đích Nghiên cứu xây dựng khâu nhân nhanh in vitro giống lan Thạch hộc thiết bì làm sở để xây dựng quy trình nhân giống phương pháp gieo hạt nhân giống vơ tính hướng tới sản xuất lượng lớn lan nhằm cung cấp dược liệu bổ sung vào thực phẩm, nâng cao chất lượng sản phẩm 1.2.2 u cầu • Các thí nghiệm nhân giống phương pháp gieo hạt _Xác định môi trường thích hợp gieo hạt cho giống lan Thạch hộc thiết bì thu thập _Xác định mơi trường thích hợp nhân nhanh protocom hạt sau gieo • Các thí nghiệm nghiên cứu nhân giống vơ tính _ Xác định ảnh hưởng chất điều tiết sinh trưởng đến phát sinh hình thái hệ số nhân đoạn thân mang mắt ngủ _Xác định môi trường tạo rễ tối ưu cho chồi lan tái sinh từ mắt ngủ _Xác định giá thể thích hợp cho lan hồng thảo Thạch Hộc Thiết Bì cấy mơ đưa vườn ươm Ý nghĩa I.3.1 Ý nghĩa khoa học I.3 Cung cấp dẫn liệu khoa học ảnh hưởng môi trường nền, chất điều tiết sinh trưởng đến trình phát sinh hình thái nhân nhanh giống lan Thạch Hộc Thiết Bì, giống lan làm dược liệu quý chưa nghiên cứu Việt Nam I.3.2 Ý nghĩa thực tiễn Xác định khâu quy trình nhân giống ni cấy mơ giống lan Thạch Hộc Thiết Bì làm sở xây dựng quy trình nhân giống invitro giống lan Thạch Hộc Thiết Bì phục vụ phát triển dược liệu I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung chi lan Hồng Thảo (Dendrobium), 2.1.1 Vị trí phân bố phân loại lan chi Hoàng Thảo (Dendrobium)  Phân bố : Dendrobium chi lớn họ Phong lan với 1.600 loài lai tạo thêm nhiều loại Chi Dendrobium phân bố rộng rãi nhiều Nam Á, Đông Á Đông Nam Á Philippines, Borneo, nước Úc, Tân Gui-nê, Quần đảo Solomon New Zealand Dendrobium mọc nhiều vùng Đông Nam Á (nguồn http://vi.wikipedia.org ) Theo Dương Đức Huyến (2007) xây dựng hệ thống phân loại lan Hoàng Thảo Việt Nam chủ yếu dựa hệ thống Seidenfaden (1985) thành 15 sectio Sectio 1: Grastidium (Blume) J J Smith - Trúc lan Những loài thuộc sectio mang đặc điểm: thân mảnh, mảnh dạng lưng-bụng; bẹ nhẵn; gốc mơi tự khơng có cựa Sectio có khoảng 100 – 120 lồi Phân bố lục địa Đông Nam Á, Inđônexia, Đông bắc Oxtraylia, ưu Niu Ghinê Ở Việt Nam có loài Sectio 2: Conostalix Kraenzl Thuộc sectio gồm lồi có đặc điểm gần với sect Grastidium (thân mảnh, mảnh dạng lưng-bụng) khác bẹ có phủ lơng dài màu đen Gốc cánh mơi có mép dính với mép bên chân cột tạo thành cựa ngắn Có 14 lồi phân bố lục địa Đông Nam Á, Malayxia, Singapo, Inđônêxia, Đông Nam Ơxtrâylia Ở Việt Nam có lồi Sectio 3: Formonsae (Benth & Hook F.) Hook.f Đặc điểm: mỏng dạng lưng-bụng; non bẹ mang lông ngắn màu đen nâu giống với sect Conosatlix Tuy nhiên thân lồi tơng dày mập lên hình trụ hình suốt; hoa to màu trắng vàng nhạt Sect có khoảng 30 – 35 lồi lục địa nhiệt đới châu Á, Inđônêxia, Philippin Việt Nam có 10 lồi Sectio 4: Dendrobium – Hồng thảo Đây sectio lớn có nhiều lồi Chúng mang đặc điểm giống với sect Formosae thân mập, hình trụ hình suốt Cụm hoa ngắn, nhiều hoa, hoa to So với sect Formosaei có số đặc điểm khác biệt chỗ hoa thường có cằm ngắn dạng túi, cánh mơi cuộn lại thành hình phễu, tận có chai dày Sectio có khoảng gần 300 lồi phân bố lục địa nhiệt đới châu Á, Trung Quốc (Hải Nam), đảo Đài Loan, Inđơnêxia Việt Nam có 30 lồi Sectio 5: Breviflores Hook f Đây sectio không lớn, mang đặc điểm phần giống với sect Dendrobium như: thân nhiều dày mập lên, mỏng dạng lưng-bụng, gốc mơi có chai dày Tuy nhiên cánh mơi sectio có hình chén vách có phủ lơng chia mơi thành phần Sectio có khoảng 18 loài lục địa châu Á, Hải Nam, Inđơnêxia Việt Nam có lồi Sectio 6: Distichophyllum Hook F Sectio có số lồi tương đối mang đặc điểm gần với sect Grastidium sect Conostalix chỗ thân cịn mảnh; có dày lên vài đại diện không mập hẳn; hoa không lớn; dẹt dạng lưng-bụng Điều khác xếp dày xít dày lên; cằm dài so với kích thước hoa Trên giới có khoảng 15 lồi phân bố Đơng Nam Á Việt Nam có lồi gồm: Sectio 7: Superbientia Kraenzl Đặc điểm giống với sect Chrysotoxae chỗ thân mập hình suốt; dày dạng da, mọc cụm phần đỉnh; chùm hoa dài Tuy khác biệt chỗ hoa thường xếp thưa không dày sect Chrysotoxae Hơn nữa, gốc cánh môi khơng có u lồi lớn Điều đặc biệt sectio có cằm kép tạo thành khớp dính lại gốc mơi, chân cột mép gốc đài bên BALANCED ANOVA FOR VARIATE SLP FILE 23/ 5/** 8:59 PAGE Ah cua Ki den kha nang nhan nhanh protocorm VARIATE V003 SLP LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 70.5123 10 880.687 88.0687 * RESIDUAL 282.049 0.80 0.553 * TOTAL (CORRECTED) 14 1162.74 83.0526 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNP FILE 23/ 5/** 8:59 PAGE Ah cua Ki den kha nang nhan nhanh protocorm VARIATE V004 HSNP LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ 540373E-01 10 164080 164080E-01 * RESIDUAL 216149 3.29 0.057 * TOTAL (CORRECTED) 14 380229 271592E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 23/ 5/** 8:59 PAGE Ah cua Ki den kha nang nhan nhanh protocorm MEANS FOR EFFECT CT$ SLP HSNP CT1 CT$ NOS 200.670 4.04000 CT2 192.470 3.88333 CT3 205.870 4.18667 CT4 201.000 4.22000 CT5 201.330 4.05050 SE(N= 3) 5.41814 0.739549E-01 5%LSD 10DF 17.0728 0.233035 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 23/ 5/** 8:59 PAGE Ah cua Ki den kha nang nhan nhanh protocorm F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 15) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |CT$ % | | | | | | SLC 15 200.27 9.1133 9.3845 4.7 0.5531 HSNC 15 4.0761 0.16480 0.12809 3.1 0.0574 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SLP FILE 23/ 5/** 9:12 PAGE Ah cua BA den nhan nhanh protocorm VARIATE V003 SLP LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ 365.047 10 927.290 92.7290 * RESIDUAL 1460.19 3.94 0.036 * TOTAL (CORRECTED) 14 2387.48 170.534 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNP FILE 23/ 5/** 9:12 PAGE Ah cua BA den nhan nhanh protocorm VARIATE V004 HSNP LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ 567915 * RESIDUAL 141979 10 102966 13.79 0.001 102966E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 670881 479201E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 23/ 5/** 9:12 PAGE Ah cua BA den nhan nhanh protocorm MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS SLC HSNC CT1 200.930 4.02000 CT2 213.193 4.26333 CT3 221.270 4.44333 CT4 208.800 4.17967 CT5 192.670 3.88000 SE(N= 3) 5.55965 0.585850E-01 5%LSD 10DF 17.5186 0.184603 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 23/ 5/** 9:12 PAGE Ah cua BA den nhan nhanh protocorm F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 15) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |CT$ % | | | | | | SLC 15 207.37 13.059 9.6296 4.6 0.0360 HSNC 15 4.1573 0.21891 0.10147 2.4 0.0005 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE 23/ 5/** 9:34 PAGE Ah cua BA va NAA den den phat sinh hinh thai va HSN cua doan than mang mat ngu VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ 3.33830 * RESIDUAL 417287 18 574334 13.08 0.000 319074E-01 * TOTAL (CORRECTED) 26 3.91263 150486 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE 23/ 5/** 9:34 PAGE Ah cua BA va NAA den den phat sinh hinh thai va HSN cua doan than mang mat ngu VARIATE V004 CC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ 2.46553 * RESIDUAL 308191 58.31 0.000 18 951362E-01 528535E-02 * TOTAL (CORRECTED) 26 2.56067 984872E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE 23/ 5/** 9:34 PAGE Ah cua BA va NAA den den phat sinh hinh thai va HSN cua doan than mang mat ngu VARIATE V005 SL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ * RESIDUAL 4.65847 18 151800 582309 69.05 0.000 843333E-02 * TOTAL (CORRECTED) 26 4.81027 185011 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 23/ 5/** 9:34 PAGE Ah cua BA va NAA den den phat sinh hinh thai va HSN cua doan than mang mat ngu MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS HSNC CC SL CT1 3.31667 1.31667 1.21667 CT2 4.15000 2.11267 2.52000 CT3 4.26000 2.18333 2.54667 CT4 4.28333 1.58000 2.03667 CT5 3.80000 1.43333 2.23667 CT6 4.00000 1.80000 2.27000 CT7 4.68333 2.05667 2.61333 CT8 4.12333 1.49667 1.91333 CT9 4.04667 1.58000 1.86000 SE(N= 3) 0.103130 0.419736E-01 0.530199E-01 5%LSD 18DF 0.306414 0.124710 0.157530 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 23/ 5/** 9:34 PAGE Ah cua BA va NAA den den phat sinh hinh thai va HSN cua doan than mang mat ngu F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 27) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |CT$ % | | | | | | HSNC 27 4.0737 0.38792 0.17863 4.4 0.0000 CC 27 1.7288 0.31383 0.72700E-01 4.2 0.0000 SL 27 2.1348 0.43013 0.91833E-01 4.3 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE 23/ 5/** 9:53 PAGE Ah cua BA + IBA den su phat sinh hinh thai va HSN cua doan than VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ 2.01498 * RESIDUAL 251873 18 599904 7.56 0.000 333280E-01 * TOTAL (CORRECTED) 26 2.61489 100573 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE 23/ 5/** 9:53 PAGE Ah cua BA + IBA den su phat sinh hinh thai va HSN cua doan than VARIATE V004 CC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ 3.91340 * RESIDUAL 489175 88.35 0.000 18 996668E-01 553704E-02 * TOTAL (CORRECTED) 26 4.01307 154349 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE 23/ 5/** 9:53 PAGE Ah cua BA + IBA den su phat sinh hinh thai va HSN cua doan than VARIATE V005 SL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= CT$ * RESIDUAL 4.28576 535720 107.14 0.000 18 900002E-01 500001E-02 * TOTAL (CORRECTED) 26 4.37576 168299 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 23/ 5/** 9:53 PAGE Ah cua BA + IBA den su phat sinh hinh thai va HSN cua doan than MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS HSNC CC SL CT1 3.60000 1.16333 1.12667 CT2 4.15000 2.08333 2.05667 CT3 4.31000 2.07667 2.35333 CT4 3.90667 1.60000 2.04667 CT5 4.00000 1.86000 1.63667 CT6 4.53333 2.16000 1.80000 CT7 4.15250 2.00000 2.57000 CT8 3.92333 1.50667 1.98000 CT9 3.71667 1.10000 1.68333 SE(N= 3) 0.105401 0.429614E-01 0.408249E-01 5%LSD 18DF 0.313161 0.127645 0.121297 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 23/ 5/** 9:53 PAGE Ah cua BA + IBA den su phat sinh hinh thai va HSN cua doan than F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 27) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |CT$ % | | | | | | HSNC 27 4.0325 0.31713 0.18256 4.5 0.0002 CC 27 1.7278 0.39287 0.74411E-01 4.3 0.0000 SL 27 1.9170 0.41024 0.70711E-01 3.7 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR FILE 23/ 5/** 10:22 PAGE Ah cua nen moi truong den sinh truong VARIATE V003 SR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 3.71242 * RESIDUAL 618737 14 197251 43.92 0.000 140893E-01 * TOTAL (CORRECTED) 20 3.90967 195484 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DR FILE 23/ 5/** 10:22 PAGE Ah cua nen moi truong den sinh truong VARIATE V004 DR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 5.92221 * RESIDUAL 987035 149.79 0.000 14 922543E-01 658959E-02 * TOTAL (CORRECTED) 20 6.01447 300723 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 23/ 5/** 10:22 PAGE Ah cua nen moi truong den sinh truong MEANS FOR EFFECT CT$ SR DR CT1 CT$ NOS 2.76200 1.20000 CT2 2.13333 1.62633 CT3 2.87667 1.50667 CT4 3.00000 1.80000 CT5 3.59333 2.80000 CT6 3.20000 2.24667 CT7 2.67667 1.25000 SE(N= 3) 5%LSD 14DF 0.685306E-01 0.468672E-01 0.207869 0.142159 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 23/ 5/** 10:22 PAGE Ah cua nen moi truong den sinh truong F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 21) NO OBS DEVIATION BASED ON BASED ON C OF V |CT$ % | | | | | | TOTAL SS RESID SS SR 21 2.8917 0.44214 0.11870 4.1 0.0000 DR 21 1.7757 0.54838 0.81176E-01 4.6 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR FILE 23/ 5/** 11: PAGE Ah cua IAA den su re cua lan VARIATE V003 SR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 1.97684 * RESIDUAL 494210 10 279000 17.71 0.000 279000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.25584 161131 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DR FILE 23/ 5/** 11: PAGE Ah cua IAA den su re cua lan VARIATE V004 DR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 3.34004 * RESIDUAL 835010 116.73 0.000 10 715332E-01 715332E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.41157 243684 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 23/ 5/** 11: PAGE Ah cua IAA den su re cua lan MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS SR DR CT1 3.38333 1.31000 CT2 3.89333 1.96333 CT3 4.39000 2.66000 CT4 4.32000 2.47333 CT5 4.12333 2.25000 SE(N= 3) 5%LSD 10DF 0.964366E-01 0.488307E-01 0.303875 0.153867 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 23/ 5/** 11: PAGE Ah cua IAA den su re cua lan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 15) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |CT$ % | | | | | | SR 15 4.0220 0.40141 0.16703 4.2 0.0002 DR 15 2.1313 0.49364 0.84577E-01 4.0 0.0000 ... cứu nhân nhanh in vitro giống lan Thạch hộc Thiết bì (Dendrobium officinale Kimura et Migo)? ?? I.2 Mục đích, u cầu 1.2.1 Mục đích Nghiên cứu xây dựng khâu nhân nhanh in vitro giống lan Thạch hộc thiết. .. Dendrobium officinaleKimura et Migo (thạch hộc thiết bì) Thạch hộc Thiết bì có tên gọi khác Thạch hộc rỉ sắt, Hắc tiết thảo, Thiết bì lan, Lí thụ thảo thảo lâu năm thuộc Chi Thạch hộc họ Lan, thường sinh... thái nhân nhanh giống lan Thạch Hộc Thiết Bì, giống lan làm dược liệu quý chưa nghiên cứu Việt Nam I.3.2 Ý nghĩa thực tiễn Xác định khâu quy trình nhân giống nuôi cấy mô giống lan Thạch Hộc Thiết