50 bài THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH

10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH 10 BÀI THÍNGHIỆM THỰC HÀNH SINH Bài Nhận biết số thành phần hóa học tế bào I MỤC TIÊU Pha chế vàsử dụng số thuốc thử, hóa chất thơng dụng hóa sinh học: thuốc thử Lugol, Fehling Nhận biết protein, amino axit số thuốc thử đặc trưng (ninhydrin, Biuret, HNO2), chứng minh số tính chất protein: phản ứng màu với số thuốc thử, kết tủa thuận nghịch vàkhông thuận nghịch Nhận biết tinh bột, saccharide, phân biệt đường no đường khơng no (đường khơng tí nh khử) Nhận biết lipid, chứng số tính chất triglyceride Rèn kỹ thực hành: - Kỹ thực hành thínghiệm, đức tính kiên nhẫn, để đạt mục đích - Kỹ quan sát, ghi chép kết thínghiệm - Kỹ thao tác thí nghiệm, bố tríthínghiệm - Kỹ phân tích kết thínghiệm - Kỹ báo cáo kết thực hành II CƠ SỞ KHOA HỌC A Nhận biết protein Kết tủa protein muối trung tí nh (kết tuả thuận nghịch) + (NH4)2SO4 làmuối trung tính, vừa cótác dụng trung hòa điện (các ion tác dụng tương hỗ với nhóm tích điện trái dấu), vừa loại bỏ lớp vỏ hydrat phần tử keo protein, làm kết tủa protein Phản ứng kết tủa làkết tủa thuận nghịch, protein khác bị kết tủa nồng độ muối khác + So với albumin, globulin có độ tan nên kết tủa trước, hòa tan tan chậm Kết tủa protein axit hữu (Kết tủa không thuận nghịch) + TCA (tricloacetic acid) làmột muối hữu có tác dụng làm biến tính protein (thay đổi tí nh tan, hoạt tính sinh học, cấu trúc, ), protein bị đơng tụ lại thành dạng keo khơng hòa tan (kết tủa không thuận nghịch) Các nhân tố khác gây biến tính protein nhiệt độ cao, axit vô đặc, số axit hữu cơ, kiềm đặc, muối kim loại nặng nồng độ cao, + Phản ứng sử dụng rộng rãi thực tế để phát loại bỏ protein khỏi dung dịch, phát protein nước tiểu (độ nhạy lên tới 0,0015%) B Nhận biết tinh bột, saccharid 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH Phản ứng màu tinh bột với iod : + Amilose tinh bột cókhả tương tác tạo phức với tinh bột, hình thành cấu trúc xoắn giữ phân tử iod (phức có màu xanh đặc trưng) Sự tương tác dễ dàng bị phávỡ đun nóng Phân biệt đường đơn (glucozơ) đường đôi (sacarozơ ) + Phản ứng với thuốc thử Fehling, Benedict hay tráng gương lànhững phản ứng chứng minh glucose cótính khử, phân biệt glucose với sucrose Phản ứng Benedict tráng gương thực dễ dàng, hóa chất dễ chuẩn bị (chú ý tránh để AgNO3 dây tay) Thuốc thử Fehling khó chuẩn bị (muối segnette) Khi thực phản ứng tráng gương thực thêm với sucrose Phản ứng với thuốc thử Fehling + Trong thuốc thử Fehling, muối tactrat có vai trò tạo phức với Cu2+ tạo ion phức [Cu(C4H4O6)2]2– (khiến Fehling có màu xanh lơ) nhằm ngăn cản tạo thành kết tủa Cu(OH)2 thuốc thử + Ống nghiệm I: tác dụng với glucose (HO–CH2–(CHOH)4–CH=O, có chứa gốc andehyte) chất chứa gốc andehyte, thuốc thử tạo kết tủa Cu2O đỏ Phản ứng xảy đun nóng: 2Na2[Cu(C4H4O6)2] + NaOH + R–CHO + H2O → Cu2O + R–COONa + 2H2C4H4O6 + 2Na2C4H4O6 + Ống nghiệm II: không tạo kết tủa sucrose (đường đơi) khơng có tính khử nên khơng có phản ứng với Fehling Sucrose: Phản ứng Benedict + Phản ứng xảy hoàn toàn tương tự với thuốc thử Fehling + Phản ứng nhạy, cần sử dụng glucose 0,1% tạo kết tủa Cu2O đỏ gạch, nhiên kết tủa lẫn với dung dịch màu xanh dương nên dung dịch chuyển sang màu xanh đậm + Nếu sử dụng glucose 1% lượng kết tủa sinh lớn, nhì n thấy rõkết tủa Cu2O (lẫn với màu xanh dung dịch nên không thấy màu đỏ gạch màchuyển sang đỏ nâu, gần đen) Phản ứng tráng gương + Khi cho NH3 xảy phản ứng tạo vàhòa tan kết tủa AgNO3 + NH3 + H2O → AgOH↓ + NH4NO3 AgOH + 2NH3 → [Ag(NH3)2]OH + Khi cho glucose 5% vào đun nóng: 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH HO – CH2 – (CHOH)4 – CH = O + 2[Ag(NH3)2]OH → HO – CH2– (CHOH)4– COONH4 + 2Ag↓ + 3NH3↑ + H2O C Nhận biết lipid Thínghiệm nhũ tương hóa + Bì nh thường mỡ khơng hòa tan nước + Khi cóchất tạo nhũ tương (axit mật, xàphòng, ),mỡ bị phân thành giọt nhỏ, gọi làhiện tượng nhũ tương hóa Thínghiệm chứng minh mỡ chứa gốc glyceryl (trong triglycerid) + Khi đun nóng dầu với chất lấy nước, glyceryl tự giải phóng, chất nước tạo thành acrolein có mùi khét đặc biệt, dễ nhận biết: HO – CH2 – CHOH – CH2 – OH → CH2= CH–CH= O + H2O + Khi cho giấy lọc tẩm AgNO3/NH3 vào miệng ống xảy phản ứng tráng bạc: CH2=CH–CH=O + 2AgNO3 + 3NH3 + H2O → CH2=CH–COONH4 + 2NH4NO3 + 2Ag↓ * Chú ý: Nếu thay dầu lạc lipid khơng chứa glyceryl (như sáp) khơng có phản ứng Phản ứng xàphòng hóa + Dưới tác dụng kiềm NaOH, triglycerid bị xàphòng hóa + Khi thêm CaCl2 vào tạo thành kết tủa canxi muối hữu Sự tạo thành axit béo tự + Thêm H2SO4 vào dung dịch xàphòng, dung dịch trở nên đục axit béo tạo thành 2R – COONa + H2SO4 → 2R – COOH + Na2SO4 Khi đun nóng, axit béo lên bề mặt dung dịch + Khi thêm NaOH vào ống nghiệm chứa axit béo xảy phản ứng trung hòa: R – COOH + NaOH → R – COONa + H2O + Khi dư NaOH, dung dịch có mơi trường bazơ làm phenol phtalein không màu chuyển sang màu hồng + Thêm dung dịch axit béo xảy phản ứng trung hòa NaOH dư làm màu hồng nhạt dần, tiến tới không màu 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH III THIẾT BỊ – HÓA CHẤT- MẪU VẬT Dụng cụ + Ống nghiệm, pipet, cốc đong, ống đong 50ml, bình nón 50ml, đũa thủy tinh + Giá đựng ống nghiệm, kẹp gỗ + Bản sứ giếng, cối chày sứ, chén thủy tinh, bì nh sắc ký + Giấy lọc, giấy quỳ, giấy sắc ký, giấy thấm, + Đèn cồn Thiết bị + Bếp điện, tủ ấm 370C, tủ lạnh, nồi cách thủy + Máy đo pH, đồng hồ, cân hóa chất Ngun liệu, hóa chất + Lòng trắng trứng, tinh bột, dầu lạc, mỡ động vật + Ethanol 96%, ether ethylic + Glucose, sucrose + Tricloacetic acid (CCl3–COOH), H2SO4 đặc + Tinh thể (NH4)2SO4, KI, I2, CuSO4.5H2O, muối Segnette (kali natri tactrat,NaOOC– CHOH–CHOH–COOK.4H2O hay C4H4O6NaK.4H2O), NaOH, KHSO4, CaCl2 + Bột Na2CO3, natri citrat HOOC–CH2–C(OH)(COOH)–CH2–COONa + AgNO3/NH3, xà phòng IV TIẾN HÀNH THÍNGHIỆM Nhận biết protein 1.1.Kết tủa protein muối trung tí nh (kết tuả thuận nghịch) – Chuẩn bị: + Lòng trắng trứng pha lỗng: Lấy lòng trắng 01 trứng cho vào 0,5 lít nước cất, cho thêm 3gram NaOH tinh khiết, khuấy + Chuẩn bị dung dịch (NH4)2SO4 bão hòa: Cân 08 gram tinh thể amoni sun-phát (NH4)2SO4, hòa tan từ từ 10ml nước cất tinh thể không bị hòa tan Lọc giấy lọc + Ống nghiệm, pipet, đũa thủy tinh, giấy lọc – Tiến hành: + Cho vào ống nghiệm: 10ml lòng trắng trứng pha lỗng, 10ml dung dịch (NH4)2SO4 bão hòa, lắc (cóthể dùng đũa thủy tinh khuấy), thấy xuất kết tủa + Để phút, lọc thu riêng kết tủa ống nghiệm, dịch thu đưa sang ống nghiệm khác (chú ý: trước lọc phải thấm ướt giấy lọc dung dịch (NH4)2SO4) + Cho vào dịch lọc 3g tinh thể (NH4)2SO4, thấy tiếp tục xuất kết tủa + Lọc, thu lấy kết tủa vào ống nghiệm khác + Thêm vào ống nghiệm (chứa kết tủa thu được) khoảng 3ml nước cất, lắc đều, so sánh hòa tan kết tủa (Chú ý: để khách quan, nên lấy lượng kết tủa tương đối nhau, kết tủa globulin nhiều albumin) 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH 1.2 Kết tủa protein axit hữu (Kết tủa không thuận nghịch) – Chuẩn bị: + Dung dịch lòng trắng trứng 5%, tricloacetic acid (CCl3–COOH) 10% + Ống nghiệm, pipet – Tiến hành: + Cho 1ml dung dịch lòng trắng trứng 5% vào ống nghiệm + Thêm 5–10 giọt dung dịch tricloacetic acid (TCA) 10%, lắc Quan sát tượng – Kết quả: ? – Giải thí ch: Nhận biết tinh bột, saccharid 2.1 Phản ứng màu tinh bột với iod – Chuẩn bị: + Dung dịch tinh bột 5%: Hòa tan 0,5g tinh bột nước cất, thêm nước cất sôi vào, khuấy đều, tiếp tục đun đến sôi, để nguội, tiếp tục thêm nước cất đến đủ 100ml + Thuốc thử Lugol: Hòa tan 2,5g KI 20ml nước cất, thêm 1g iod, lắc cho tan hết, thêm nước cất đến 100ml + Ống nghiệm, pipet, đèn cồn – Tiến hành: + Lấy 2–3ml dung dịch tinh bột vào ống nghiệm + Thêm vài giọt thuốc thử Lugol, quan sát màu + Đun nóng ống nghiệm tới dung dịch vừa màu + Làm lạnh ống nghiệm, quan sát tượng + Đun nóng ống nghiệm tới dung dịch màu đun tiếp khoảng 30 giây + Làm lạnh ống nghiệm trở lại, quan sát tượng – Kết quả:? – Giải thí ch:? 2.2.Phân biệt đường đơn (glucơse) đường đôi (sucrôse) 2.2.1 Phản ứng với thuốc thử Fehling – Chuẩn bị: + Dung dịch glucose 1%, sucrose 1%, NaOH, tinh thể CuSO4.5H2O, muối segnette (kali natri tactrat, NaOOC–CHOH–CHOH–COOK.4H2O hay C4H4O6NaK.4H2O) + Pha thuốc thử Fehling: Dung dịch Fehling A: hòa tan 0,4g CuSO4.5H2O 10ml nước cất (nếu dung dịch đục thìcần lọc) Dung dịch Fehling B: hòa tan 0,2g C4H4O6NaK.4H2O 1,5g NaOH 10ml nước cất Thuốc thử Fehling (chỉ pha trước sử dụng để hạn chế tạo thành kết tủa Cu(OH)2): trộn thể tí ch Fehling A và1 thể tí ch Fehling B, lắc đều, thu dung dịch trong, xanh biếc 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH + Ống nghiệm, pipet, đèn cồn – Tiến hành: + Cho vào ống nghiệm A: 1ml glucose 1%, ống nghiệm B: 1ml sucrose 1% + Thêm vào ống 1ml thuốc thử Fehling + Lắc ống, đun đến bắt đầu sôi, quan sát tượng – Kết quả:? – Giải thí ch:? 2.2.2 Phản ứng Benedict Phản ứng đặc trưng nhạy với đường khử phản ứng với thuốc thử Fehling – Chuẩn bị: + Dung dịch glucose 0,1%, CuSO4 17,3%, bột Na2CO3, bột natri citrat HOOC–CH2– C(OH)(COOH)–CH2–COONa + Pha thuốc thử Benedict: hòa tan 17,3g natri citrat 70ml nước cất đun sôi, thêm 10g Na2CO3 khan, làm lạnh, thêm từ từ 10ml dung dịch CuSO4 17,3%, thêm nước đến đủ 100ml, dung dịch có màu xanh dương + Ống nghiệm, pipet, nồi cách thủy 1000C – Tiến hành: + Cho 5ml thuốc thử Benedict và8 giọt dung dịch glucose 0,1% vào ống nghiệm + Đặt ống nghiệm vào nồi cách thủy sôi phút, quan sát dung dịch – Kết quả:? – Giải thí ch: ? 2.2.3.Phản ứng tráng gương Chúý: Khi tiến hành thínghiệm cần cẩn thận, tránh để AgNO3 dây tay – Chuẩn bị: + Dung dịch NH3, AgNO3, glucose 5% + Ống nghiệm, pipet, đèn cồn – Tiến hành: + Cho vào ống nghiệm 1ml dung dịch AgNO3 5% + Thêm giọt NH3, tạo thành kết tủa + thêm NH3 đến kết tủa vừa tan + Thêm 3ml glucose 5% đun, quan sát tượng – Kết quả: ? – Giải thí ch:? Nhận biết lipid 3.1.Thínghiệm nhũ tương hóa – Chuẩn bị: 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH + Dầu lạc, dung dịch xàphòng lỗng mật động vật + Ống nghiệm, pipet – Tiến hành: + Lấy ống nghiệm, cho vào ống 4ml nước cất + Thêm 3–5 giọt dầu lạc vào ống + Thêm 0,5ml dung dịch xàphòng lỗng (hoặc vài giọt dịch mật) vào ống B + Lắc ống, quan sát tượng – Kết quả: ? – Giải thí ch:? 3.2.Thínghiệm chứng minh mỡ chứa gốc glyceryl (trong triglycerid) – Chuẩn bị: + Dầu lạc, tinh thể KHSO4, dung dịch AgNO3/NH3 + Ống nghiệm, pipet, giấy lọc, ống nghiệm – Tiến hành: + Cho vào ống nghiệm 2–3 giọt dầu lạc + Thêm ítKHSO4 (khoảng 200mg) + Lắc đều, đun nóng mạnh tới cókhói trắng + Lấy giấy lọc tẩm AgNO3/NH3 hơ vào miệng ống nghiệm khói, quan sát tượng – Kết quả:? – Giải thí ch: ? 3.3.Phản ứng xàphòng hóa – Chuẩn bị: + Dầu lạc, dung dịch NaOH 0,5M ethanol 50%, dung dịch CaCl2 1% + Ống nghiệm, pipet, bình nón 50ml, nồi cách thủy 1000C, bếp điện – Tiến hành: + Cho 0,5ml dầu lạc vào bình nón 50ml + Thêm 10ml dung dịch NaOH/C2H5OH + Khuấy đun cách thủy giờ, chưa cạn thìlấy đun đến cạn khơ + Lấy sản phẩm ra, để nguội, thêm 20–30ml nước cất, lắc đều, quan sát + Lấy 2–3ml dung dịch vào ống nghiệm, thêm 1ml CaCl2 1%, lắc đều, quan sát tượng – Kết quả: ? – Giải thí ch: ? 3.4.Sự tạo thành axit béo tự – Chuẩn bị: 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH + Dịch xàphòng bình nón 50ml thừa thínghiệm trên, H2SO4 đặc, ether ethylic, NaOH 0,01% + Ống nghiệm, pipet, giấy quỳ, đèn cồn – Tiến hành: + Thêm vài giọt H2SO4 đặc vào dung dịch xàphòng bì nh nón mơi trường cópH axit (thử pH giấy quỳ tím), quan sát tượng + Đun hỗn hợp đến sôi, xuất lớp chất lỏng bề mặt + Tách riêng lớp chất lỏng đó, hòa tan 5ml ether ethylic + Lấy 1ml dịch cho vào ống nghiệm, thêm vài giọt phenol phtalein, thêm NaOH 0,01% tới dung dịch cómàu hồng + Thêm từ từ dung dịch hòa tan ether trên, quan sát đổi màu dung dịch – Kết quả: ? – Giải thí ch: ? V PHÂN TÍCH KẾT QUẢ THÍNGHIỆM VÀ VIẾT BÁO CÁO Nhận biết protein 1.1.Kết tủa protein muối trung tí nh (kết tuả thuận nghịch) – Gợi ýphân tích kết quả: + Cả lần thêm dung dịch (NH4)2SO4 bão hòa vàtinh thể (NH4)2SO4 có thu kết tủa hay khơng? Kết tủa lần nhiều hơn? + Khi lắc kết tủa với nước cất thìhiện tượng xảy làgì ? + Kết tủa thu lần tan dễ dàng hơn? – Giải thích kết thu Tại trước lọc phải thấm ướt giấy lọc dung dịch (NH4)2SO4? – Kết luận rút làgì? – Nếu thínghiệm ta thay dung dịch (NH4)2SO4 bão hòa nước cất thu kết nào? Ý nghĩa thínghiệm làgì ? 1.2.Kết tủa protein axit hữu – Gợi ýphân tích kết quả: Xuất kết tủa protein – Giải thí ch kết thu – Kết luận rút làgì? Nhận biết tinh bột, saccharid 2.1.Phản ứng màu tinh bột với iod – Gợi ýphân tích kết quả: + Khi thêm thuốc thử Lugol vào dung dịch hồ tinh bột, xuất màu ? + Sự thay đổi màu đun nóng; làm lạnh ống nghiệm chứa dung dịch? 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH + Nếu đun nhẹ lại làm lạnh thìsự biến đổi màu diễn nào? Thínghiệm lặp lại đến khoảng lần thứ 7–10 thìkết có thay đổi khơng? (Lưu ý: số lần cóthể lặp lại phụ thuộc vào việc đun nhẹ nhàng hay không) + Khi đun nóng kĩ dung dịch, làm lạnh trở lại, dung dịch cócòn màu xanh khơng? – Giải thí ch kết thu – Kết luận rút làgì? 2.2 Phân biệt đường đơn (glucose) đường đôi (sucrose) – Gợi ýphân tích kết quả: + Ống (A hay B) xuất kết tủa? Màu kết tủa làmàu ? + Theo lýthuyết thìmàu kết tủa làmàu ? Tại thực tế màu kết tủa lại khác? – Giải thí ch kết thu – Kết luận rút làgì? 2.3 Phản ứng Benedict – Gợi ý phân tích kết quả: Dung dịch chuyển màu nào? Nếu sử dụng glucose 1% thìcóthể thấy kết tủa màu gì? – Giải thí ch kết thu – Kết luận rút làgì? (Lưu ý: Phản ứng đặc trưng nhạy với đường khử phản ứng với thuốc thử Fehling) Nhận biết lipid 3.1.Thínghiệm tính tan mỡ – Gợi ýphân tích kết quả: Ống nghiệm Ngun liệu, hóa chất Ống A 2ml nước cất + dầu lạc ? ? Ống B 2ml ethanol + dầu lạc ? ? Ống C 2ml benzen + dầu lạc ? ? Tí nh tan Màu dung dịch Tí nh tan Kết thí nghiệm – Giải thí ch kết thu – Kết luận rút làgì? 3.2 Thínghiệm nhũ tương hóa – Gợi ýphân tích kết quả: Ống nghiệm Ngun liệu, hóa chất 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH Ống A 4ml nước cất + – giọt dầu lạc ? ? Ống B 4ml nước cất + – giọt dầu lạc + 0,5ml xàphòng 2% ? ? – Giải thí ch kết thu – Kết luận rút làgì? 3.3 Thínghiệm chứng minh mỡ chứa gốc glyceryl (trong triglycerid) – Gợi ýphân tích kết quả: + Khi đun nóng dầu với chất lấy nước, có mùi đặc biệt ? Tại cókhói trắng ra? + Chúýquan sát màu sắc tờ giấy lọc tẩm AgNO3/NH3 hơ vào miệng ống nghiệm khói + Nếu thay dầu lạc lipid khơng chứa glyceryl (như sáp) có phản ứng hay khơng? Tại sao? – Giải thí ch kết thu – Kết luận rút làgì? 3.4 Phản ứng xàphòng hóa – Gợi ýphân tích kết quả: + Sau đun cạn khơ bình nón, thêm nước cất vào lắc dung dịch có màu nào? Cótạo bọt khơng? Đó dung dịch ? + Thêm CaCl2 vào dung dịch có tạo thành kết tủa hay khơng? – Giải thí ch kết thu – Kết luận rút làgì? Bài Ảnh hưởng nhiệt độ, pH, chất kìm hãm lên hoạt độ enzyme - Xác định hoạt độ số enzyme I MỤC TIÊU Tìm hiểu ảnh hưởng nhiệt độ, pH, chất kìm hãm, chất ức chế, lên hoạt độ enzyme Sử dụng phương pháp chuẩn độ để xác định hoạt độ số enzyme Rèn kỹ thực hành: - Kỹ quan sát 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH 6.1 Chuẩn bị mẫu - Lấy củ ráy cắt hết rễ đoạn thân dâu (hom dâu) ngắt bỏ lá, đem trồng chậu cát đất ẩm Chờ cho ráy mọc rễ dâu cóchồi non vàrễ dài 23 cm Cắt lấy chóp rễ chồi non, rửa cho vào dung dịch cố định pha theo tỉ lệ phần cồn 90o : phần axit axêtic Sau cố định 12 giờ, đem mẫu rửa cồn 70o - Đun cách thuỷ mẫu dung dịch ocxêin axêtic 1% khoảng 15 phút đến mềm mẫu 6.2 Làm tiêu - Lấy hay mẩu chóp rễ chồi non dài khoảng 2mm đưa lên lam Nhỏ vài giọt ocxêin axêtic 4-5% lên mẫu - Đậy lamen - Ấn nhẹ lên mặt lamen cho tế bào dàn vàvỡ để NST tung Trước ấn đặt miếng giấy lọc lên để tránh vỡ lamen vàthấm bớt thuốc nhuộm 6.3 Quan sát - Đưa tiêu lên kính hiển vi để quan sát Lúc đầu sử dụng bội giác bé để xác định vùng có tế bào tách rời có NST tung tốt Cần điều chỉnh vùng tế bào có NST tung tốt vào hiển vi trường chuyển sang quan sát vật kính lớn - Tìm tế bào cóNST tung rõvàcóthể đếm - Đếm số lượng quan sát kĩ hình thái NST Bộ NST lồi ráy (Alocasia odora) vàlồi dâu (Morus alba) có2n = 28 V PHÂN TÍCH KẾT QUẢ VÀ LẬP BÁO CÁO Quan sát cấu trúc NST, NST, xếp phân loại nhóm, kỹ thuật lập kiểu nhân (karyotype) Vẽ NST quan sát rõ đẹp tế bào vào Nên dùng bút chì 2B để vẽ Đếm ghi số lượng NST vào Chú ý : Có thể dùng tiêu cố định làm sẵn NST đối tượng khác nhau, dùng đĩa CD tranh, ảnh NST đối tượng khác để thay Nên cho học sinh làm tập mục VI (thao tác cắt rời NST hình xếp theo nhóm) Quan sát NST, xác định giới tí nh người Có thể chọn tiêu NST kỳ người nam bình thường vàtiêu NST kỳ người nữ bình thường yêu cầu học sinh xác định tên cho tiêu Cũng dùng tranh, ảnh thay cho tiêu Quan sát đột biến số lượng NST: lệch bội, đa bội Cóthể sử dụng bảng sau để viết báo cáo thu hoạch: Stt Đối tượng quan sát Số NST Giải thí ch 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH Khoai mơn, khoai sọ, ráy 2n 28 Bình thường Khoai mơn, khoai sọ 3n ? ? Bệnh nhân Đao ? ? 4… … … … Cũng cho học sinh phân biệt tiêu quan sát xem tiêu 2n NST; làtiêu (2n + 1) NST hay (2n - 1) NST; làtiêu 3n NST; tiêu 4n NST (Gợi ý: Hướng dẫn học sinh cần đếm số lượng NST có kích thước lớn làcó thể suy độ bội thể là3n hay 4n màkhông cần đếm hết số lượng NST tiêu bản; tương tự đếm số lượng NST có kích thước bénhất làcóthể suy trisomi 21 người lànam hay nữ) Nhận dạng đột biến cấu trúc NST: đa tâm, khơng tâm Nội dung khó, nên đánh giá kết phân tích tranh vẽ ảnh chụp tiêu hiển vi Vídụ: chọn hình ảnh NST tách kỳ sau hình ảnh có đột biến cấu trúc NST tạo mảnh không tâm yêu cầu học sinh phân biệt Hoặc cho học sinh quan sát tiêu (hay ảnh chụp) có đột biến cấu trúc NST tạo mảnh không tâm yêu cầu học sinh xác định số lượng mảnh không tâm Xác định NST trisomi 21, nhận dạng NST Down nam, Down nữ Có thể chọn tiêu NST kỳ người (nam nữ) tam nhiễm (trisomi) 21 yêu cầu học sinh xác định tên cho tiêu Nên cho so sánh với dạng bình thường để khắc sâu kiến thức Quan sát tiêu tạm thời Đánh giá dựa vào kết thu thập mẫu, làm tiêu bản, quan sát, đánh giá tiêu vẽ NST thực hành Có thể cho học sinh sử dụng trắc vi vật kính vàtrắc vi thị kính xác định kích thước thực nhiễm sắc thể theo hướng dẫn sau: 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH Vị trítrắc vi thị kính  Lắp trắc vi thị kính vào vật kính A Trắc vi thị kính (5mm  Quan sát thấy chia thành 50 phần kính hiển vi nhau) Trắc vi vật kính (1mm đ chia thành 100 phần nhau) Vị trítrắc vi vật kính  Đặt trắc vi vật kính lên bàn kính Quan sát vạch chia trắc vi vật kính vật kính 40 100 Khi vạch thấy rõ, dùng tay xoay trắc vi thị kính để vạch chia song song dọc theo vạch chia trắc vi vật kính Tìm vạch trùng vàghi lại số vạch trắc vi Phóng đại phần vạch tương ứng với 001mm = 10micromet  Cách tính: vạch trắc vi thị kí nh 10  21  2,3  2,2  Vạch thứ 21 trắc vi thị kí nh B Mỗi vạch trắc vi vật kính tương ứng với 10 trùng với vạch thứ trắc vi vật kính Trắc vi thị kính Xác định kích thước vi Lấy trắc vi vật kính khỏi kính khuẩn vàthay vào vị trí tiêu cần Đường kính vi khuẩn xác định kích thước hiển vi Điều A = 2,41,2 = 2,88  2,9 chỉnh kính để xem rõmẫu, đọc số ( ) (vạch) vạch tương ứng với độ lớn mẫu cần Số vạch đo đo trắc vi thị kính ( 100 Bài 10 Tính độ phong phúcủa lồi quần xã kích thước quần thể I MỤC TIÊU Sau làm thínghiệm học sinh cóthể: So sánh mức độ phong phú(mức độ giàu có) loài so với loài khác quần xã Củng cố kiến thức tính đa dạng sinh học, qua nâng ý thức bảo vệ môi trường So sánh mức độ đa dạng loài quần xãsinh vật với quần xãsinh vật khác Tự thiết kế thínghiệm nghiên cứu tính đa dạng lồi quần xãsinh vật, từ cónhận thức tầm quan trọng đa dạng sinh học vàbảo vệ môi trường Biết cách lựa chọn phương pháp phù hợp tính kích thước quần thể sinh vật Củng cố kiến thức học lýthuyết kích thước quần thể, qua hiểu ý nghĩa sinh thái học bảo vệ loài sinh vật, nâng cao ýthức bảo vệ môi trường Biết cách lựa chọn phương pháp phù hợp tính kích thước quần thể sinh vật 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH Củng cố kiến thức học lýthuyết kích thước quần thể, qua hiểu ý nghĩa sinh thái học bảo vệ loài sinh vật, nâng cao ýthức bảo vệ mơi trường II CƠ SỞ KHOA HỌC Tí nh mức độ phong phúcủa loài quần xã Các nhàsinh thái học sử dụng nhiều phương pháp để tí nh mức độ phong phúcủa loài quần xã, theo thời gian vàở địa điểm khác Độ phong phú(hay mức giàu có) lồi làtỉ lệ (%) số cáthể loài so với tổng số cáthể tất lồi cótrong quần xãsinh vật Độ phong phúcủa lồi quần xãsinh vật tí nh theo công thức: p  ni  100 % N Trong đó, p độ phong phú(%) lồi quần xã; n làsố cáthể loài i quần xã; N làsố cáthể tất loài quần xã Độ phong phú loài làmột số xác định mức độ đa dạng sinh học quần xã, đánh giá theo mức độ khác nhau: í t (kíhiệu +), trung bì nh (+ +), nhiều (+ + +), nhiều (+ + + +) Tính tốn độ đa dạng quần xãtheo chỉ số Shannon Độ đa dạng quần xã tính tốn dựa phong phú tương đối số lượng cáthể tất lồi quần xã Độ đa dạng loài thể phổ biến dạng số Shannon (H) (theo Shannon – Wiener): H = - (pA ln pA) + (pB ln pB) + (pC ln pC) +  Trong đó, A, B, C loài quần xã, p độ phong phú lồi (làtỉ lệ % tính thí nghiệm 1) vàln làlơgarit tự nhiên Quần xãnào cóchỉ số Shannon (H) cao có độ đa dạng lồi cao Vídụ: Để minh họa cho phần lýthuyết ta cóthể tham khảo vídụ sau so sánh tính đa dạng lồi quần xã: Quần xã1 vàQuần xã2 (xem hì nh.1) Quần xãnào có đa dạng lồi cao hơn? Cách tí nh : - Với quần xã1: p = 0,25 cho quần xã, H = - (0,25 ln 0,25) = 1,39 - Với quần xã2: H = - (0,8 ln 0,8) + (0,05 ln 0,05) + (0,05 ln 0,05) + (0,1 ln 0,1) = 0,71 Tí nh tốn cho biết quần xã1 đa dạng quần xã2 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH Hình Đa dạng lồi quần xã1 vàquần xã2 Tính kích thước quần thể thực vật vàcác sinh vật í t di chuyển Kích thước quần thể số lượng cáthể, khối lượng hay lượng tích luỹ cá thể, phân bố khoảng không gian quần thể Với quần thể cá thể khơng có khả di chuyển (vídụ quần thể cây), kích thước quần thể tính cách đếm trực tiếp cáthể không gian định gọi làcác ôtiêu chuẩn Hì nh minh họa phương pháp chia ơtí nh số lượng cáthể ơ, qua tính kích thước quần thể Tùy theo kích thước sinh vật màchia ôto hay nhỏ Với sinh vật có kích thước nhỏ, cỏ, kích thước thường nhỏ : 1m x 1m (hoặc 2m x 2m) Với sinh vật có kích thước lớn gỗ, kích thước ơlớn : 100 m x 100 m, lớn Trong ô to, người ta lại chia ônhỏ đếm số lượng cáthể ơnhỏ Kích thước quần thể tính từ giátrị trung bình nhân với số lượng tất ôtrong không gian quần thể (a) (b) Hì nh Sử dụng ơthínghiệm có kích thước 1m x 1m (a) kích thước 2m x 2m (b) để đếm số lượng cỏ Tính kích thước quần thể sinh vật di chuyển nhanh Các nhànghiên cứu sinh thái học đếm tất cáthể quần thể sinh vật di chuyển quánhanh lẩn trốn Trong trường hợp đó, nhà nghiên cứu tính kích thước quần thể phương pháp gián tiếp, vídụ tính mật độ tương đối chuột người ta bịt tất lỗ hang chuột lại sau tính số lượng hang bị phálỗ - hang thực cóchuột Khi tính mật độ còng (một loài giống loài cua) sống bãi lẫy ven biển người ta dựa vào số lượng hang còng đào mặt đất Tuy nhiên phương pháp phổ biết phương pháp “Bắt, đánh dấu, thả vàbắt lại” hay gọi tắt phương pháp “Đánh dấu – bắt lại” Sử dụng công thức (Theo Campbell, 2009): 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH N  M C R (1) (Trong đó, N số thể kích thước quần thể - kích thước ước lượng quần thể; M làsố cáthể bắt lần đánh dấu, C làsố lượng cáthể bắt lần 2; R làsố lượng cáthể bắt lần có đánh dấu) Trong số trường hợp cơng thức thay đổi cách nhân (hoặc cộng, trừ ) với hệ số biểu thay đổi môi trường theo lồi nghiên cứu (chỉ số Lincoln) Vídụ cơng thức tính : N  M  1  C  1 R 1 1 (2) Vídụ 1: Tính kích thước quần thể chuột Số lượng chuột bẫy lần là10 (M = 10) Tất chuột bẫy được đánh dấu minh họa hì nh sau : Số chuột bẫy lần thứ 12 (C = 12), có đánh dấu từ lần (R = 2), minh họa hình sau : Tính kích thước quần thể theo công thức (1): N = (10 x 12) : = 60 Vậy kích thước ước tính quần thể chuột là60 cáthể Vídụ 2: Các nhàkhoa học New Zealand áp dụng phương pháp “Đánh dấu – Bắt lại” để tính kích thước quần thể loài cáheo Hector quýhiếm (Cephalorhynchu hectori) Đầu tiên nhàkhoa học bắt ngẫu nhiên số cáthể cáheo, cẩn thận đánh dấu cáthể sau thả chúng trở biển Đã xác định cótới 180 cáthể cáheo Sau vài tuần đánh dấu vàthả lại, cáheo hòa nhập trở lại quần thể nhàkhoa học dùng bẫy bắt lại cáthể quần thể Ở lần thứ này, nhàkhoa học đếm 44 cáthể, số ghi nhận đánh dấu lần bắt thứ Kích thước quần thể (N) tí nh theo cơng thức (1): 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH N  M C R Dựa vào số liệu thu được, tính kích thước quần thể cáheo Hector là: (180 x 44) : = 1131 cáthể Điều kiện cần thiết để phương pháp thu kết chí nh xác làcác cáthể đánh dấu không đánh dấu cócùng khả bị bắt lại khơng bị bắt lại, cáthể bị bắt lần có khả hòa nhập trở lại quần thể dường khơng có cá thể sinh ra, chết đi, nhập cư xuất cư thời gian thực phương pháp III THIẾT BỊ – HĨA CHẤT- MẪU VẬT 1.Tí nh mức độ phong phúcủa lồi quần xã - 01 chén nhỏ - 01 chén lớn - Các viên bi màu xanh, màu đen, màu vàng nhiều bi màu trắng (trong trường hợp khơng cóviên bi thìcóthể thay loại hạt đậu với màu khác nhau, bi màu trắng thay hạt gạo) - 05 khay thínghiệm Tính tốn độ đa dạng quần xãtheo chỉ số Shannon - Máy tính cầm tay để tính tốn - Giáo viên cung cấp vẽ minh họa thành phần vàsố lượng loài quần xã(vídụ hình đây) 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH Hì nh 2: Thành phần vàsố lượng loài quần xã: quần xã1, 2, 3, (Mỗi kíhiệu hình tượng trưng cho lồi) Tính kích thước quần thể thực vật vàcác sinh vật í t di chuyển - 40 cọc nhỏ (cọc dài 20 cm) dây để chia ô - Chọn cách đồng để tính kích thước quần thể (Chú ý khơng nên chọn khu vực quálớn không đủ thời gian thực hành khu vực quánhỏ số liệu thu không đại diện cho số lượng cáthể quần thể) Tính kích thước quần thể sinh vật di chuyển nhanh Tương tự thí nghiệm 1, phần I: - 01 chén nhỏ - 01 chén lớn - Các viên bi màu xanh, màu đen, màu vàng nhiều bi màu trắng (trong trường hợp khơng cóviên bi thìcóthể thay loại hạt đậu với màu khác nhau, bi màu trắng thay hạt gạo) - 05 khay thínghiệm 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH IV TIẾN HÀNH THÍNGHIỆM Thínghiệm 1: Tí nh mức độ phong phúcủa loài quần xã Giả sử thực hành tính mức độ phong phú lồi điều kiện thínghiệm mơ : Bước 1: - Dùng chén nhỏ đong chén bi màu xanh, chén bi màu đen chén bi màu vàng Đong thêm chén lớn bi màu trắng, đổ tất bi màu xanh, đen, vàng trắng vào chung khay lớn vàtrộn Trong thínghiệm này, bi màu trắng tượng trưng cho sinh vật môi trường bi màu lại tượng trưng cho lồi cần tí nh mức độ phong phú Bước 2: - Dùng chén lớn đong chén hỗn hợp bi trên, đổ khay Bước 3: - Từ khay đổ đó, nhặt riêng bi màu xanh, đen vàng khay khác Lần lượt đếm số lượng bi màu Bước 4: Giả sử bi màu xanh tượng trưng cho loài cá mè sống ao, bi màu đen tượng trưng cho cá trắm, bi màu vàng tượng trưng cho cá chép Sử dụng cơng thức tính độ phong phú lồi, tính mức độ phong phúcủa lồi cátrên Bài thực hành cóthể thực lại nhiều lần, số lượng chén nhỏ đong cho loại bi lần khác (bước 1) cho kết khác (Để cóthể thực nhiều lần với số lượng đong khác nên chuẩn bị số lượng lớn bi, í t loại cósố lượng đủ cho chén nhỏ nhiều hơn) Thínghiệm 2: Tính tốn độ đa dạng quần xãtheo chỉ số Shannon Giả sử thực hành làso sánh mức độ đa dạng loài quần xã: quần xã1, 2, và4 (hì nh 2) Ta tiến hành thínghiệm theo bước sau: Bước 1: Đến số lượng lồi (ni) quần xãvàtí nh tổng số cáthể tất loài quần xã (N) Điền số liệu thu vào ôtrống bảng Các lồi Lồi Lồi × □ Lồi Δ Lồi Tổng số cá thể ○ quần xã(N) Quần xã1 Quần xã2 Quần xã3 Quần xã4 Bước 2: Tính độ phong phúcủa lồi quần xã(theo cơng thức) Bước 3: Tính số Shannon (H) quần xã Bước So sánh số Shannon quần xãvàchỉ mức độ đa dạng quần xã Thínghiệm Tính kích thước quần thể thực vật vàcác sinh vật í t di chuyển 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH Giả sử thực hành tính kích thước quần thể cỏ mần trầu cánh đồng trồng ngôrộng 1000 m2 Bước Chọn địa điểm để thiết lập ô cánh đồng ngô Số lượng ô là10 ô, ô rộng 1m x 1m (chú ý chọn vị tríơ xếp theo mặt cắt, phân bố khu vực nghiên cứu) Bước Dùng cọc đóng góc vuông, giăng dây theo chu vi ô Bước Đếm tồn số cỏ mần trầu cótrong ô Bước Lập bảng ghi số liệu thu từ thínghiệm vào bảng Tí nh giátrị trung bình số lượng cáthể mần trầu / Bước Ước tính kích thước quần thể cách nhân giátrị trung bì nh / ơvới số lượng tất ơcótrong khơng gian quần thể (Diện tí ch nghiên cứu là1000 m2 thìsố lượng ô trường hợp là1000) Thínghiệm Tính kích thước quần thể sinh vật di chuyển nhanh Giả sử thực hành tính kích thước quần thể cá điều kiện mơ phòng thínghiệm Thínghiệm tiến hành tiếp nối thínghiệm tính độ phong phúcủa cáthể phần I : Bước Sử dụng lại số liệu tính độ phong phúcủa loài (tượng trưng màu bi khác nhau) vàlàm tiếp bước sau Bước Tính số lượng cáthể cá mè (tượng trưng bi màu xanh) cách : đong 01 chén lớn hỗn hợp viên bi (hỗn hợp bi có đủ màu), đổ khay Bước Đếm hết số lượng viên bi cómàu xanh vàbỏ khay Sau dùng bút đánh dấu vào viên bi màu xanh (hoặc thay viên bi màu xanh viên bi cómàu khác với tất màu sử dụng trước đó) (Việc làm tượng trưng có việc đánh dấu cáthể bắt ngồi thực địa) Bước Đổ trở lại viên bi đánh dấu vào hỗn hợp viên bi lúc đầu Bước Dùng chén lớn đong lại lần (tương tự làm lần 1) Đổ khay đếm lại số lượng viên bi có màu xanh, viên bi có màu xanh đánh dấu Bước Lập bảng, ghi số liệu thu vào bảng Bước Sử dụng công thức tính kích thước quần thể (1): N  M C R để ước tính kích thước quần thể điều kiện thínghiệm Bước Bài thực hành cóthể thực lại nhiều lần, số lượng chén nhỏ đong cho loại bi lần khác cho kết khác Học sinh cóthể tính kích thước quần thể loại cákhác quần xã 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH V PHÂN TÍCH KẾT QUẢ THÍNGHIỆM VÀ VIẾT BÁO CÁO Tí nh mức độ phong phúcủa loài quần xã - Học sinh tự lập bảng vàghi kết thínghiệm độ phong phúcủa loại cá (tượng trưng qua mầu bi) qua lần thực vào bảng - Học sinh viết báo cáo thu hoạch gồm phần: + Bảng ghi kết qua lần thực nghiệm + Liên hệ từ phương pháp tiến hành thínghiệm thực hành, học sinh tự thiết lập 01 kế hoạch cho thực hành tính độ phong phúcủa lồi chủ yếu cótrong khu vườn trường, khu vườn nhỏ gia đình Tính tốn độ đa dạng quần xãtheo chỉ số Shannon - Học sinh ghi kết thu từ thínghiệm giấy, theo thứ tự từ quần xã đa dạng tới quần xã đa dạng - Liên hệ từ phương pháp thí nghiệm thực hành, học sinh tự thiết lập 01 kế hoạch cho nội dung thínghiệm so sánh độ đa dạng loài quần xãở gần trường học, khu vườn nhỏ gia đình Tính kích thước quần thể thực vật vàcác sinh vật í t di chuyển - Ghi kết thínghiệm giấy - So sánh kết thínghiệm với nhóm học sinh khác, với số liệu thực hành địa điểm trước (nếu có) - Viết báo cáo vànhận xét kết thínghiệm Tính kích thước quần thể sinh vật di chuyển nhanh - Học sinh tự lập bảng vàghi kết thínghiệm kích thước quần thể tính loại cá (tượng trưng qua mầu bi) qua lần thực vào bảng - Học sinh viết báo cáo thu hoạch gồm phần: + Bảng ghi kết qua lần thực nghiệm + Liên hệ từ phương pháp tiến hành thínghiệm thực hành, học sinh tự thiết lập 01 kế hoạch cho thực hành tính kích thước quần thể lồi động vật cótrong khu vực phùhợp gần trường gia đình PHẦN 3: PHỤ LỤC SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO I MỤC ĐÍCH Quan sát phân bào nguyên nhiễm tế bào sinh dưỡng vàphân bào giảm nhiễm tế bào sinh dục Hình thái vàhoạt động NST qua kìcủa qtrì nh phân bào vàsự sai khác có ý nghĩa qtrình 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH II CHUẨN BỊ Dụng cụ: Kính hiển vi, lam kính, lamen, kim mũi mác, lưỡi dao cạo, đèn cồn, cốc thủy tinh, bình đung ổn nhiệt, đĩa đồng hồ, giấy thấm, panh, kéo Hoá chất: Dung dịch cố định (3 cồn : axetic); thuốc nhuộm Shiff, axêto–carmin 2%, H2O cất, cồn tuyệt đối, axit axêtic, xylen Mẫu vật: Củ hành tây, hành ta, hạt đại mạch (để lấy rễ non); châu chấu đực III TIẾN HÀNH THÍNGHIỆM Thínghiệm 1: Quan sát phân bào nguyên nhiễm tế bào rễ hành Ngâm cho hành rễ trước thínghiệm độ ngày (ngâm củ cốc có nước khoảng ngày trồng hành cát ẩm 2–3 ngày được) Khi có rễ dài khỏang 1cm, dùng dao cạo cắt đoạn 0,2cm (kể từ chóp rễ) Sau cắt rễ hành, cần nhuộm orcein 4–5% axit acetic 45% khoảng 10 phút làcóthể quan sát Chúý: Khi làm tiêu cắt phần chóp rễ dễ phần đỉnh sinh trưởng, khơng thể quan sát kìphân bào Làm tiêu phương pháp nén vàquan sát kí nh hiển vi Lấy rễ đặt lên lam kính, dùng dao lam cắt bỏ chóp rễ, sau cắt lát mỏng phần đỉnh sinh trưởng (phần đỉnh rễ nhuộm màu đậm) Nhỏ thêm giọt 45% axetic 1% axêto– carmin Đậy lamen đặt lam kí nh tờ giấy thấm gấp đơi, dùng đầu que diêm đầu panh gõnhẹ thẳng góc lên mẫu Đưa lam kính hơ nhẹ đèn cồn (tránh để qua nóng làm khơmẫu vàkhơng khílọt vào) khoảng – 10 giây Đặt lam kí nh trở lại tờ giấy thấm dùng đầu ngón tay ép thẳng góc lên lamen mẫu qua lớp giấy thấm Chúý: Phải ép vàthẳng góc tránh vỡ lamen màmẫu trải Đặt lên kí nh hiển vi, điều chỉnh cho rõ Quan sát, vẽ hình, phân biệt pha phân chia, gọi tên pha (Trong thínghiệm này, ta cóthể tìm thấy hình thái tế bào phân chia kìphân bào Nếu làkìgiữa thìtồn thể nhiễm sắc tập trung mặt phẳng xích đạo; làkìsau thìcác nhiễm sắc thể phân li tách xa dần mặt phẳng xích đạo để hai cực Ngồi ra, cóthể thấy hai tế bào xuất hiện, kích thước tế bào béso với tế bào mẹ, thể nhiễm sắc cụm lại nhân hai tế bào Cũng thấy tế bào mẹ chưa phân chia to so với tế bào sinh ra) Đối với tiêu tốt tiến hành chụp ảnh kí nh hiển vi có hệ thống chụp ảnh sau cố định tiêu Thínghiệm 2: Quan sát phân bào giảm nhiễm tinh hoàn châu chấu đực Dùng kim nhọn mổ lấy tuyến sinh dục (ở gần phần bụng) châu chấu Đem ngâm tuyến dung dịch nhược trương natri xitrat 1% để gây nhược trương tế bào Chuyển tinh hoàn sang dung dịch cố định carnoy, dùng kim mũi mác tách tế bào riêng ra, sau nhỏ dịch bào 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH lên lam kí nh Nhuộm tiêu hematoxilin (Cóthể quan sát nhanh cách: sau tách tinh hồn, lấy đặt lên lam kính Dùng kim mũi mác xé rách bào ống sinh tinh để phân tán tế bào Nhỏ lên mẫu dung dịch axêto – orcêin axêto–carmin 2% để nhuộm – 10 phút Đậy lamen lên vàép nhẹ đầu ngón tay cái, thấm thuốc nhuộm thừa vàquan sát kính hiển vi) Tinh hoàn bao gồm hàng ngàn ống dẫn tinh, ống phát triển hàng triệu tinh trùng Những tế bào sinh dục gọi làtinh nguyên bào Trong quátrì nh phát triển, tinh nguyên bào phân chia theo kiểu nguyên phân làm cho số tinh nguyên bào nhiều lên Sự phát sinh tinh trùng lúc tinh nguyên bào lớn trở thành tế bào lớn gọi làtinh bào cấp Các tinh bào cấp bước vào thời kìphân chia Kì trước I giảm phân kéo dài, bao gồm nhiều giai đoạn, nhiều quátrì nh phức tạp xảy tiêu quan sát thấy giai đoạn cuối Nhiễm sắc thể cónhiều hì nh dạng Ở kìgiữa I, ta khơng quan sát thấy màng nhân, thoi phân chia xuất Mỗi tâm động nhiễm sắc thể hướng cực tế bào, nhiễm sắc thể chuẩn bị phân li Kìsau I: Các nhiễm thể cặp tương đồng tách hai cực Kìcuối I: Các nhiễm sắc thể tương đồng nằm gọn tế bào Chúng giữ nguyên hì nh thái Lần phân chia thứ II:Về lần phân chia thứ II giống với phân bào nguyên nhiễm thông thường nhân đơi NST Ở lần phân chia thứ II quátrì nh phân bào giảm nhiễm, NST từ kìcuối I chuyển sang kìgiữa II khoảng thời gian nhanh Kìsau II: Các NST đơn NST kép tách tâm động vàdi chuyển hai cực tế bào Kìći II: Màng nhân nhân hì nh thành, màng tế bào co thắt lại tách tế bào mẹ thành hai tế bào giống hệt nhau./ Xác định áp suất thẩm thấu láhoặc rễ phương pháp so sánh tỉ trọng dung dịch Nguyên tắc phương pháp Như biết, chịu hạn vàcây chịu hạn cóáp suất thẩm thấu khác nhau, nhu cầu nước điều kiện cung cấp nước Những sống điều kiện cung cấp nước tốt khơng cần trìáp suất thẩm thấu cao để lấy nước Ngược lại sống điều kiện khôhạn, để lấy lượng nước ỏi đất, thường phải cóáp suất thẩm thấu cao Để xác định áp suất thẩm thấu theo công thức : P = RTC, ta cần xác định nồng độ C đối tượng nghiên cứu (Vì ta biết R = 0,082, T = 273 + nhiệt độ nơi làm thực hành) Việc xác định nồng độ C dựa sở so sánh tỷ trọng dịch tế bào đối tượng nghiên cứu với tỷ trọng dung dịch biết nồng độ 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH Đối tượng, hốchất vàdụng cụ thínghiệm - Lácây rễ tươi lấy từ môi trường khác - Dụng cụ ép dịch ; Micropipet; Ông đong; Ông nghiệm - Dung dịch xacarozơ với nồng độ khác Các bước tiến hành - Rút dịch tế bào: lácây rễ tươi cắt nhỏ, đưa vào dụng cụ ép, sau ép với lực mạnh để lấy dịch tế bào, đổ dịch tế bào ép vào ống nghiệm - Chuẩn bị thang dung dịch xacarozơ có nồng độ sau: 0,06, 0,08, 0,10, 0,12, 0,16, 0,22, 0,28, 0,35, 0,40 - Thao tác: Dùng micropipet lấy dịch tế bào nhỏ cẩn thận, từ từ giọt dịch vào dung dịch xacarozơ theo thứ tự nồng độ dung dịch từ thấp đến cao Quan sát chuyển động giọt dịch tế bào : giọt dịch xuống có nghĩa tỷ trọng lớn tỷ trọng dung dịch ngược lại Ta tìm dung dịch ống nghiệm, cógiọt dịch đứng yên tan dần hai ống nghiệm: ống trước giọt dịch xuống, ống sau giọt dịch lên Đó làống nghiệm chứa dung dịch xacarozơ có tỷ trọng với tỷ trọng dịch tế bào có nghĩa nồng độ dung dịch nồng độ dịch tế bào Kết luận: Tí nh áp suất thẩm thấu vànhận xét kết thu Xác định cường độ thoát nước phương pháp cân nhanh Nguyên tắc phương pháp Thốt nước làmột qtrình sinh líquan trọng Đó động lực trên- động lực hút nước từ rễ lên Thốt nước làm giảm nhiệt độ bề mặt Vìvậy ưa sáng thường có cường độ nước cao ưa bóng Cường độ nước tí nh lượng nước thoát đơn vị diện tí ch đơn vị thời gian: gam nước/dm2.giờ Đối tượng vàdụng cụ thínghiệm - Cành cónhiều lálấy từ ngồi sáng vàcây bóng - Ơng thuỷ tinh chữ U ; Cân kĩ thuật xác đến 0,01 gam - Bơng khơng thấm nước ; Kéo dao sắc, Khoan lá; Đồng hồ bấm giây Các bước tiến hành Cách cắt cành lá: Uốn cành chậu nước, cắt đoạn cành ngập nước (theo hình), sau đưa cành vào ống thuỷ tinh hì nh chữ U có sẵn nước, dùng bơng bọc xung quanh cành vànút kín hệ thống Xác định trọng lượng cành vàống chữ U, gọi trọng lượng Po Sau để thoát nước điều kiện nhiệt độ, ánh sáng, tốc độ gió 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH Xác định trọng lượng cành vàống chữ U thời gian 30, 60, 90 phút, ta P30, P60, P90 Ta tính lượng nước cành látrung bì nh phút sau: Po - P30 Po - P60 Po - P90 + + -30 60 90 P = Tí nh diện tích lá: Dùng phương pháp cân: Cắt tồn láthínghiệm, bỏ cuống, cân, gọi trọng lượng làg Dùng khoan lákhoan khoảng 10 - 30 lá(tuỳ thuộc vào kích thước khoan) Cân khoan này, gọi trọng lượng làg' Tí nh diện tích khoan ládựa đường kí nh khoan, gọi diện tích làS' (dm2) Diện tí ch láthínghiệm (S) là: S' g S = (dm2) g' Cuối cường độ thoát nước (T) là: P 60 T = (gam nước / dm2 giờ) S Kết luận: So sánh kết thínghiệm vànhận xét ... TIẾN HÀNH THÍNGHIỆM 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH Yêu cầu học sinh pha 200 – 500 ml dung dịch đường 8% - 10% chuẩn bị vào bì nh thủy tinh hì nh trụ Giáo viên cần chuẩn bị th nghiệm gồm ống nghiệm. .. enzyme Rèn kỹ thực hành: - Kỹ quan sát 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH - Kỹ đo đếm thời gian cho phản ứng xúc tác enzyme - Kỹ chuẩn độ - Kỹ phân tích kết th nghiệm - Kỹ báo cáo kết thực hành II CƠ... vàvẽ 10 BÀI THÍ NGHIỆM THỰC HÀNH SINH - Hì nh dạng tế bào vàchúthích thành phần cấu trúc chí nh tế bào - Hì nh dạng tế bào xảy tượng co nguyên sinh vàphản co nguyên sinh So sánh kết thínghiệm