GIÁM SÁT HỘI CHỨNG RỐI LOẠN SINH SẢN Và HÔ HẤP MỘT SỐ TÌNH MIỀN BẮC VIỆT NAM 2017-2018

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM THẠCH VĂN MẠNH GIÁM SÁT HỘI CHỨNG RỐI LOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP Ở LỢN TẠI MỘT SỐ TỈNH MIỀN BẮC VIỆT NAM TỪ 2017 - 2018 LUẬN VĂN THẠC SĨ NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2018 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM Thạch Văn Mạnh GIÁM SÁT HỘI CHỨNG RỐI LOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP Ở LỢN TẠI MỘT SỐ TỈNH MIỀN BẮC VIỆT NAM TỪ 2017 - 2018 Ngành: Thú y Mã số: 64 01 01 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Lê Văn Phan HÀ NỘI – 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cám ơn, thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 15 tháng 10 năm 2018 Tác giả luận văn Thạch Văn Mạnh i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn, tơi nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép tơi bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới giáo viên hướng dẫn PGS.TS Lê Văn Phan - giảng viên Bộ môn Vi Sinh Vật – Truyền Nhiễm tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian tạo điều kiện cho suốt trình học tập thực đề tài Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn Vi Sinh Vật – Truyền Nhiễm, Khoa Thú y - Học viện Nơng nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ tơi q trình học tập, thực đề tài hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn lãnh đạo Phòng xét nghiệm trung tâm chẩn đốn cố vấn Thú y – Cơng ty cổ phần chăn nuôi C.P Việt Nam tạo điều kiện cho tơi suốt q trình thực đề tài Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ mặt, động viên khuyến khích tơi hồn thành luận văn Hà Nội, ngày 15 tháng 10 năm 2018 Học viên Thạch Văn Mạnh ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình ảnh viii Trích yếu luận văn ix Thesis abstract xi Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp mới, ý nghĩa khoa học thực tıễn đề tàı Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Lịch sử tình hình nghiên cứu hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp lợn 2.1.1 Khái quát lịch sử Hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp lợn (Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome - PRRS) 2.1.2 Tình hình nghiên cứu PRRS giới nước 2.2 Căn bệnh 2.2.1 Hình thái cấu trúc PRRSV 10 2.2.2 Đặc tính sinh học virus 11 2.2.3 Sức đề kháng PRRSV 12 2.2.4 Những virus liên quan 12 2.2.5 Những vi khuẩn kế phát 13 2.3 Dịch tễ học bệnh 13 2.3.1 Động vật cảm nhiễm 13 2.3.2 Động vật môi giới mang truyền PRRSV 14 2.3.3 Chất chứa mầm bệnh 14 2.3.4 Đường truyền lây 15 2.3.5 Điều kiện lây lan 17 iii 2.4 Cơ chế sinh bệnh 18 2.5 Triệu chứng, bệnh tích 19 2.5.1 Triệu chứng 19 2.5.2 Bệnh tích 21 2.6 Các phương pháp chẩn đoán PRRS 22 2.6.1 Chẩn đoán lâm sàng 22 2.6.2 Chẩn đoán phương pháp giải phẫu bệnh 23 2.6.3 Chẩn đoán phương pháp huyết học 23 2.6.4 Kỹ thuật RT – PCR (Reverse transcriptase polymerase chain reaction) 23 2.7 Phòng điều trị bệnh 24 2.7.1 Phòng bệnh 24 2.7.2 Điều trị bệnh 26 Phần Vật liệu phương pháp nghiên cứu 28 3.1 Địa điểm nghiên cứu 28 3.2 Thời gian nghiên cứu 28 3.3 Đốı tượng, vật lıệu nghıên cứu 28 3.3.1 Đối tượng nghiên cứu 28 3.3.2 Vật liệu nghiên cứu 28 3.4 Nội dung nghiên cứu 30 3.5 Phương pháp nghıên cứu 30 3.5.1 Phương pháp thu thập xử lý mẫu bệnh phẩm 30 3.5.2 Phương pháp RT – PCR 35 3.5.3 Phương pháp xử lý số liệu 38 Phần Kết thảo luận 39 4.1 So sánh hiệu sử dụng máy Pockit iiPCR so với PCR truyền thống chẩn đoán PRRSV gây bệnh lợn 39 4.1.1 Thí nghiệm so sánh hiệu Pockit iiPCR PCR truyền thống 39 4.1.2 Kết tổng hợp so sánh Pockit iiPCR PCR truyền thống 40 4.2 Tỷ lệ lưu hành PRRSV lợn ni tỉnh hịa bình, Bắc Giang Hà Nội 41 4.2.1 Kết xác định tỷ lệ lưu hành PRRSV lợn nuôi tỉnh Hịa Bình, Bắc Giang, Hà Nội 41 iv 4.2.2 Kết tỷ lệ loại mẫu dương tính PRRSV tỉnh Hịa Bình, Bắc Giang, Hà Nội 43 4.2.4 Kết xác định tỷ lệ lưu hành chủng PRRSV tỉnh Bắc Giang 45 4.2.5 Kết xác định tỷ lệ lưu hành chủng PRRSV Hà Nội 46 4.2.6 Tỷ lệ nhiễm PRRSV theo lứa tuổi khác lợn 47 4.3 Kết tổng hợp triệu chứng lâm sàng bệnh tích lợn mắc bệnh tai xanh địa bàn tỉnh hịa bình, Bắc Giang, Hà Nội 49 4.3.1 Tổng hợp triệu chứng lâm sàng lợn mắc PRRS 49 4.3.2 Tổng hợp bệnh tích lợn mắc PRRS 52 4.4 Đề xuất biện pháp phòng prrsv lợn 55 4.4.1 Biện pháp phòng bệnh 55 Phần Kết luận kiến nghị 62 5.1 Kết luận 62 5.2 Kiến nghị 62 Tài liệu tham khảo 63 Phụ lục 71 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Nghĩa đầy đủ Cs Cộng ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay H.E Hematoxylin & Eosin IPMA Immuno – Peroxidase Monolayer Assay NXB Nhà xuất OD Optical Density (Mật độ quang) OIE Organisation of International Epidemiology (Tổ chức Dịch tễ Thế giới) PBS Phosphate Buffer Saline PCR Polymerase Chain Reaction Pockit iiPCR Pockit Insulated isothermal polymerase chain reaction PRRS Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome PRRS CN Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome China PRRS NA Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome North American PRRSV Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus RNA Ribonucleic Acid RT - PCR Reverse Transcription - PCR vi DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Chức ORF PRRSV 10 Bảng 4.1 Kết xét nghiệm PRRSV CN Pockit iiPCR 39 Bảng 4.2 Kết tổng hợp so sánh Pockit iiPCR PCR truyền thống 40 Bảng 4.3 Kết xác định tỷ lệ mẫu dương tính với PRRSV 41 Bảng 4.4 Tỷ lệ loại mẫu dương tính PRRSV tỉnh Hịa Bình, Bắc Giang, Hà Nội 43 Bảng 4.5 Tỷ lệ lưu hành chủng PRRS CN PRRS NA lợn Hịa Bình 44 Bảng 4.6 Tỷ lệ lưu hành chủng PRRS CN PRRS NA lợn Bắc Giang 45 Bảng 4.7 Tỷ lệ lưu hành chủng PRRS CN PRRS NA lợn Hà Nội 46 Bảng 4.8 Tỷ lệ nhiễm PRRSV theo lứa tuổi khác lợn 47 Bảng 4.9 Một số biểu lâm sàng lợn mắc PRRS địa bàn tỉnh Hịa Bình, Bắc Giang, Hà Nội 49 Bảng 4.10 Kết nghiên cứu số bệnh tích lợn mắc PRRS địa bàn tỉnh Hịa Bình, Bắc Giang Hà Nội 52 Bảng 4.11 Biện pháp kiểm sốt với nhóm lợn 58 Bảng 4.12 Tỷ lệ chết đàn lợn lô theo hướng xử lý khác 60 vii DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 2.1 Bản đồ lịch sử xuất PRRS giới Hình 2.2 Hình thái cấu trúc PRRSV 10 Hình 2.3 Các phương thức truyền lây PRRSV 15 Hình 2.4 PRRSV xâm nhập phá hủy tế bào đại thực bào 18 Hình 2.5 Mơ hình ngun lý phản ứng RT-PCR 24 Hình 3.1 Dịng nhiệt đối lưu iiPCR 33 Hình 3.2 Tách mạch (940C-980C 33 Hình 3.3 Gắn mồi (300C-650C 33 Hình 3.4 Kéo dài mạch (680C -720C) 34 Hình 3.5 Hai mạch hình thành bắt đầu chu kỳ 34 Hình 3.6 Ly tâm khô phút 34 Hình 3.7 Chuẩn bị eppendorf chứa Premix Bufer A 34 Hình 3.8 Ống R-tube 34 Hình 3.9 Máy Pockit iiPCR chạy vòng 34 Hình 3.10 Kết xét nghiệm phương pháp Pockit iiPCR 35 Hình 4.1 Kết xét nghiệm phương pháp Pockit iiPCR 39 Hình 4.2 Kết xét nghiệm PCR truyền thống 40 Hình 4.3 Tỷ lệ nhiễm PRRSV tỉnh Hịa Bình, Bắc Giang, Hà Nội 42 Hình 4.4 Tỷ lệ loại mẫu dương tính PRRSV tỉnh Hịa Bình, Bắc Giang, Hà Nội 43 Hình 4.5 Tỷ lệ lưu hành chủng PRRS CN PRRS NA lợn Hịa Bình 44 Hình 4.6 Tỷ lệ lưu hành chủng PRRS CN PRRS NA lợn tỉnh Bắc Giang 45 Hình 4.7 Tỷ lệ lưu hành chủng PRRS CN PRRS NA lợn Hà Nội 46 Hình 4.8 Tỷ lệ nhiễm PRRSV theo lứa tuổi khác lợn 48 Hình 4.9 Một số hình ảnh triệu chứng lâm sàng lợn mắc PRRS 51 Hình 4.10 Một số hình ảnh bệnh tích lợn nhiễm PRRSV 54 Hình 4.11 Tỷ lệ chết đàn lợn lô theo hướng xử lý khác 61 viii ... VÀ TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU HỘI CHỨNG RỐI LOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP Ở LỢN 2.1.1 Khái quát lịch sử Hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp lợn (Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome - PRRS) Hội chứng. ..HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM Thạch Văn Mạnh GIÁM SÁT HỘI CHỨNG RỐI LOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP Ở LỢN TẠI MỘT SỐ TỈNH MIỀN BẮC VIỆT NAM TỪ 2017 - 2018 Ngành: Thú y Mã số: 64 01 01 Người hướng... tình hình nghiên cứu hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp lợn 2.1.1 Khái quát lịch sử Hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp lợn (Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome - PRRS) 2.1.2 Tình