1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Đa dạng di truyền và thụ phấn chéo loài dầu song nàng (dipterocarpus dyeri pierre) ở khu bảo tồn thiên nhiên văn hóa đồng nai, tỉnh đồng nai

76 73 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 76
Dung lượng 2,13 MB

Nội dung

VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT Nguyễn Văn Nhị “Đa dạng di truyền thụ phấn chéo loài Dầu Song nàng (Dipterocarpus dyeri Pierre) Khu Bảo tồn Thiên nhiên - Văn hóa Đồng Nai, tỉnh Đồng Nai” Luận văn thạc sĩ: Sinh học thực nghiệm Hà Nội, 11/2018 MỤC LỤC MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Mục tiêu, nội dung, ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan họ Dầu loài Dầu Song nàng 1.1.1 Tổng quan họ Dầu (Dipterocarpaceae) 1.1.2 Loài Dầu Song nàng (Dipterocarpus dyeri Pierre) 1.1.3 Đa dạng di truyền thụ phấn chéo quần thể loài 1.1.4 Quản lý bảo tồn 12 1.2 Tổng quan ứng dụng kỹ thuật sinh học phân tử nghiên cứu đa dạng di truyền tiến hóa phân tử 13 1.2.1 Quần thể tính đa dạng di truyền quần thể 13 1.2.2 Một số kỹ thuật sinh học phân tử thường dùng nghiên cứu đa dạng di truyền thực vật 15 1.2.3 Kỹ thuật RAPD 16 1.2.4 Kỹ thuật RFLP 17 1.2.5 Kỹ thuật AFLP 17 1.2.6 Kỹ thuật SSR 17 1.2.7 Kỹ thuật ISSR 19 1.3 Tình hình nghiên cứu giới 19 1.4 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 21 CHƯƠNG II ĐỊA ĐIỂM, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Địa điểm nghiên cứu 23 2.2 Vật liệu nghiên cứu 23 2.2.1 Thu thập bảo quản mẫu DNA 23 2.2.2 Trình tự mồi sử dụng nghiên cứu di truyền loài Dầu Song nàng 24 2.3 Phương pháp nghiên cứu 25 2.3.1 Phương pháp tách chiết DNA tổng số 25 2.3.2 Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) 26 2.3.3 Phương pháp điện di 28 2.3.3.1 Điện di gel agarose 28 2.3.3.2 Điện di gel Polyacrylamide 28 2.4 Phân tích số liệu 29 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 Kết tách chiết DNA tổng số 31 3.2 Đánh giá hiệu thị SSR 31 3.3 Kết phân tích đa dạng di truyền loài Dầu Song nàng 34 3.3.1 Tần số allele quần thể trưởng thành 34 3.3.2 Đa dạng di truyền loài Dầu Song nàng 37 3.3.3 Phân tích AMOVA 43 3.4 Kết phân tích thụ phấn chéo trội quần thể 44 3.5 Một số giải pháp bảo tồn loài Dầu Song nàng 46 CHƯƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 51 4.1 Kết luận 51 4.2 Kiến nghị 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO 53 Tài liệu tiếng Việt 53 Tài liệu tiếng Anh 56 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Ảnh Dầu Song nàng Hình 3.1 Kết điện di DNA tổng số từ vỏ số mẫu Dầu Song nàng 31 Hình 3.2 Kết điện di sản phẩm PCR đa hình với cặp mồi Dipt02 (A) Dipt08 (B) MK: marker 50 bp; SN1, 2, ,14:mẫu 32 DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 2.1 Trình tự nucleotide cặp mồi SSR dùng nghiên cứu 24 Bảng 2.2 Công thức pha đệm rửa (washing buffer) 10 ml 25 Bảng 2.3 Công thức pha đệm tách chiết (CTAB) 10 ml 26 Bảng 2.4 Thành phần phản ứng PCR 27 Bảng 2.5 Chu kỳ phản ứng PCR 27 Bảng 3.1 Số allele giá trị PIC, PD, Rp, MI cho locus đa hình 33 Bảng 3.2 Tần số allele cho locus trưởng thành 35 Bảng 3.3 Đa dạng di truyền loài Dầu Song nàng 39 Bảng 3.4 Đa dạng di truyền số loài thuộc chi Dầu Việt Nam 42 Bảng 3.5 Phân tích AMOVA lồi Dầu Song nàng 43 Bảng 3.6 Thông số sinh sản Dầu Song nàng 44 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT STT Từ viết tắt Nội dung, chi tiết Variance components in the analysis of molecular AMOVA AFLP Amplified Fragment Length Polymorphism ISSR Interal simple sequence repeat MI Marker index PCR Polymerase Chain Reaction PD Discrimination power PIC Polymorphic Information Content RAPD Random Amplified Polymorphism DNA RFLP Restriction fragment length Polymorphism 10 RP Resolving power 11 SSR Simple sequence repeat 12 FAO Tổ chức Lương thực Nông nghiệp Liên Hiệp Quốc variance MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Họ Dầu (Dipterocarpaceae) họ thực vật phổ biến vùng nhiệt đới Hiện gỗ loài họ Dầu chiếm thị phần lớn thị trường gỗ giới Vì chúng đóng vai trò quan trọng nhiều quốc gia, chủ yếu quốc nước Châu Á đặc biệt Đơng Nam Á Ngồi việc cung cấp gỗ, lồi họ Dầu đem lại nhiều loại sản phẩm có giá trị khác phục vụ đời sống người nhựa chai (Shorea guiso), nhựa cứng (Neobalanocarpus sp., Hopea sp.), nhựa mủ (Dipterocarpus costatus), mỡ bơ (Shorea robusta), camphor (Dryobalanops aromatica), tannin (Dipterocarpus tuberculatus, Hopea odorata) Cronquist (1981) [35] phân chia họ Dầu (Dipterocarpaceae) thành phân họ gồm Dipterocarpoideae, Pakaraimoideae Monotoideae Việt Nam có 40 loài họ Dầu thuộc chi (Anisoptera, Hopea, Parashorea, Vatica, Dipterocarpus, Shorea), hầu hết loài địa đặc hữu [12] Do giá trị thương mại nhu cầu người dân địa phương, loài họ Dầu bị khai thác mức Số lượng cho lồi khơng nhiều Nơi sống chúng bị thu hẹp suy giảm Trong năm 1980 1990, khai thác nhanh người dân địa phương doanh nghiệp lâm nghiệp, với nơi sống loài Dầu bị thu hẹp phân cắt Do đó, việc đánh giá mức độ đa dạng di truyền mơi trường sống lồi Dầu xem xét công việc ưu tiên hoạt động bảo tồn Dầu Song nàng (Dipterocarpus dyeri Pierre) phân bố rộng rừng nhiệt đới Đông Nam Bộ Tây Nguyên, bao gồm Khu bảo tồn Thiên nhiên - Văn hóa Đồng Nai, rừng phòng hộ Tân Phú, Vườn Quốc gia Cát Tiên (Đồng Nai), Vườn Quốc gia Bù Gia Mập (Bình Phước), Lò Gò – Xa Mát (Tây Ninh), khu Bảo tồn Thiên nhiên Bình Châu - Phước Bửu (Bà Rịa - Vũng Tàu) số tỉnh khác Tây Nguyên đảo Phú Quốc (Kiên Giang) Loài nằm Sách Đỏ Thế giới [59] Việt Nam [3] cần phải bảo vệ: CR A1 cd, B1 + 2C Phạm vi nghiên cứu đề tài tập trung đánh giá mức độ đa dạng di truyền thụ phấn chéo quần thể Dầu Song nàng rừng nhiệt đới núi thấp Mã Đà (Vĩnh Cửu, Đồng Nai) sở phân tích cặp mồi thị Microsatellite để khám phá chất di truyền hạt giống tốt đáp ứng yêu cầu chất lượng giống phục vụ công tác bảo tồn phát triển bền vững Mục tiêu, nội dung, ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài - Mục tiêu đề tài: + Xác định đa dạng di truyền thụ phấn chéo loài Dầu Song nàng (Dipterocarpus dyeri Pierre) Khu bảo tồn Thiên nhiên - Văn hóa Đồng Nai, tỉnh Đồng Nai + Mục tiêu bảo tồn loài quý sở nghiên cứu sâu chất di truyền quần thể lồi + Có sở khoa học xác giúp nhà quản lý đưa sách, biện pháp bảo tồn phục hồi loài hữu hiệu Việt Nam - Nội dung nghiên cứu + Phân tích đa dạng di truyền lồi Dầu Song nàng sở phân tích cặp mồi Microsatellite + Xác định thông số thụ phấn chéo loài Dầu Song nàng Khu bảo tồn Thiên nhiên - Văn hóa Đồng Nai + Đề xuất số phương án bảo tồn loài họ Dầu loài Dầu Song nàng - Ý nghĩa khoa học thực tiễn: Khoa học: Kết nghiên cứu dẫn liệu khoa học di truyền loài tuyển chọn trội đáp ứng chất lượng giống phục vụ cơng tác bảo tồn phục hồi lồi Kinh tế - xã hội: Các trội tuyển chọn có nhiều đặc tính đáp ứng cho cơng việc phục hồi lồi Các giống từ trội tuyển chọn đáp ứng yêu cầu khỏe, phát triển nhanh, sức đề kháng tốt với dịch bệnh có khả thích nghi với biến đổi mơi trường, giảm chi phí nhân giống Cơ chế sách: Các nhà quản lý có cách nhìn khoa học từ đưa giải pháp phục hồi hữu hiệu loài bị đe dọa phạm vi toàn quốc 18.Trừng Văn Thái, 1999 Những hệ sinh thái rừng nhiệt đới Việt Nam NXBKHKT, HCM, 298 tr 19.Nguyễn Đức Thành, (2003) Đa dạng di truyền số loài thuộc họ Dầu (Dipterocarpaceae) Việt Nam Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, 167-172 20.Nguyễn Đức Thành, Nguyễn Thúy Hạnh, Nguyễn Hoàng Nghĩa (2005) Nghiên cứu quan hệ di truyền số loài thuộc họ Dầu (Dipterocarpaceae) Việt Nam dựa đa hình ADN genome lục lạp Kỷ yếu Hội nghị toàn quốc “Những vấn đề nghiên cứu khoa học sống” Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, 1379-1382 21.Nguyễn Đức Thành, Nguyễn Thúy Hạnh, Trần Quốc Trọng (2007) Kết sử dụng số chuỗi gen lục lạp nghiên cứu đa dạng di truyền xuất xứ lâm nghiệp Công nghệ sinh học, 5(1): 77-83 22.Nguyễn Đức Thành, Nguyễn Văn Phượng, Nguyễn Hoàng Nghĩa, 2009 Đa dạng di truyền loài Sao mạng (Hopea reticulate Tardicu) dựa phân tích số chuỗi DNA lục lạp thị RAPD Công nghệ sinh học,7(2): 203-210 23.Nguyễn Thị Phương Trang, Trần Thu Hương, L Triest, Nguyễn Minh Tâm (2014) Đặc điểm di truyền ba loài (Hopea) bị đe dọa tuyệt chủng Việt Nam Tạp chí Sinh học, 36(3): 316-322 24.Bùi Trung (2010) Tìm hiểu tác động auxin gibberelline đến khả rễ hom giâm Sao đen Tạp chí Khoa học lâm nghiệp 1: 1-7 Tài liệu tiếng Anh 25.Abasolo MA, Fernando ES, Borromeo TH and Hautea DM (2009) Crossspecies amplification of Shorea microsatellite DNA markers in Parashorea malaanonan (Dipterocarpaceae) Philippine Journal of Science 138(1): 2328 26.Aigner PA (2004) Ecological and genetic effects on demographic processes: pollination, clonality and seed production in Dithyrea maritima, Biol Cons., 116(1): 27-34 27.Ashton PS (1982) Dipterocarpaceae In: Van Steenis CGGJ (ed.) Flora Malesiana I (9): 237-552 28.Barrett SCH and Kohn JR (1991) Genetic and evolutionary consequences of small population size in plants: implications for conservation, In: Falk DA and Holsinger KE, Genetics and conservation of rare plants, Oxford University Press, pp 3-30 29.Bawa KS and Ashton PS (1991) Conservation of rare trees in tropical rain forests: a genetic perspective, In: Falk DA and Holsinger KE, Genetics and conservation of rare plants, Oxford University Press, pp 62-71 30.Beardmore JA (1983) Extinction, survival and genetic variation, In: Schonewold-Cox CM, Chambers SM, MacBryde B and Thomas L, Genetics and conservation, Cummings Pub Company INC, pp 125-151 31.Byers DL and Meagher TR (1992) Mate availability in small populations of plant species with homomorphic sprophytic self-incompatibility, Heredity, 68: 353-359 32.Chin Hong Ng, Chai Ting Lee, Soon Leong Lee, Lee Hong Tnah and Kevin Kit Siong Ng (2013), Isolation and characterization of microsatellite markers for Shorea Platyclados (Dipterocarpaceae), Applications in Plant Sciences (7) 33.Changtragoon S (2001) Evaluating genetic diversity of Dipterocarpus alatus genetic resources in Thailand Using isozyme gene markers, In: Thielges BA, Sastrapradja SD, Rimbawanto A, (eds) In-situ and ex-situ conservation of commercial tropical trees, Yogyekarta, Japan, 349-354 34.Cheng-Chiu H (1987) An enumeration of Dipterocarpaceae from China In: Kostermans AJGH (ed.) Proceedings of third round table conference on dipterocarps, Mulawarm Univ Samarinda East Kalimantan, Indonesia, 16-20 April 1985: 528-580 35.Cronquist A (1981) An integrated system of classification of flowering plants Columbia University Press, New York 36.Crow JF and Denniston C (1988) Inbreeding and variance effective population numbers, Evolution, 42: 482-495 37.Doyle JJ and Doyle JL (1987) A rapid DNA isolation procedure for small qualities of fresh leaf tissue Phytochem Bull 19: 11-15 38.Excoffier L, Laval G and Schneider S (2005) Arlequin (version 3.0): an integrated software package for population genetics data analysis Evol Bioinform Online 1: 47-50 39.Fifi Gus Dwiyanti, Lucy Chong, Bibian Diway, Lee Ying Fah, Iskandar Zulkarnaen Siregar, Atok Subiakto, Koichi Kamiya, Ikuo Ninomiya, Ko Harada (2015) Population Genetic Diversity in The Genus Dryobalanops Gaertn f (Dipterocarpaceae) Based on Nuclear Microsatellite Markers International Journal Sustainable Future for Human Security J-SustaiN Vol 3, No 12-20 40.Ghazhoul J, Liston KA and Boyle TJB (1998) Disturbance induced density dependent seed set in Shorea siamensis (Dipterocarpaceae), a tropical forest tree J Ecology 86: 462-473 41.Godt MJW, Johnson BR and Hamrick JL (1996) Genetic diversity and population for multiple size of four southern Appalachian plant species, Cons Biol., 10: 796-805 42.Falk DA and Holsinger KE (eds.) (1991) Genetic and conservation of rare plants, Oxford University Press, New York, 283pp 43.FAO (1985) Final report FAO/UNEP Project on the Conservation of Forest Genetic Resources Rome, Italy 44.Finger A, Kettle CJ, Kaiser-Bunbury CN, Valleletin T, Mougal J, Ghazoul J (2012) Forest fragmentation genetics in a formerly widespread island endemic tree: Vateriopsis seychellarum (Dipterocarpaceae) Mol Ecol 21, 2369-2382 45.Frankham R (1995) Relationship of genetic variation to population size in wildlife, Cons Biol., 10: 309-317 46.Fukue Y, Kado T, Lee SL, Ng KKS, Muhammad N and Tsumura Y (2007) Effects of flowering tree density on the mating system and gene flow in Shorea leprosula (Dipterocarpaceae) in Peninsular Malaysia Journal of Plant Resources 120: 413-420 47.Ismail SA, Ghazoul JG, Ravikanth, Kushalappa CG, Uma Shaanker R and Kettle CJ (2014) Fragmentation Genetics of Vateria indica: implications for management of forest genetic resources of an endemic dipterocarp Conserv Genet Published on line, DOI: 10.1007/s10592-013-0559-7 48.Kathrin S and Malcolm H (eds.) (1991) Economic and ecological sustainability of tropical rain forest management, UNESCO, Paris 49.Kitamura K, Rahman MYBA, Ochiai Y and Yoshimaru H (1994) Estimation of the outcrossing rate on Dryobalanops aromatic Gaertn F in primary and secondary forests in Brunei, Borneo, Southeast Asia Plant Species Biology 9: 37-41 50.Hamilton WD (1982) Pathogens as causes of genetic diversity intheir host population biology of clonal organisms, Proceedings of the Royal Society of London, pp 232: 35-57 51.Maury-Lecon G and Curtet L (1998) Biogeography and evolutionary systematic of Dipterocarpaceae In: Appanah S and Turnbull JM (eds) A review of dipterocarps: Taxonomy, Ecology and Siviculture CIFOR, Bogor 5-44 52.Millar IC and Libby JW (1991) Strategies for conserving clinal, ecotypic and disjunct population diversity in widespread species, In Falk DA and Holsinger, KE (eds.), Genetic and conservation of rare plants Oxford University Press, New York, pp.149-170 53.Murawski DA, Gunatilleke IAUN and Bawa KS (1994) The effect of selective logging on inbreeding in Shorea megistophylla (Dipterocarpaceae) fromSri Lanka Conserv Biol 8:997-1002 54.Lee SL (2000) Mating system parameters of Dryobalanops aromatic Gaertn f (Dipterocarpaceae) in three different forest types and a seed orchard Heredity 85: 338-345 55.Lim LS, R Wickneswari, Lee SL and Latiff A (2001) Genetic structure of natural populations of Dryobalanops aromatic Gaertn F (Dipterocarpaceae) in Peninsular Malaysia using microsatellite DNA markers In: Thielges BA, Sastrapradja SD and Rimbawanto A (eds.), In-situ and ex-situ conservation of commercial tropical trees, Yogyekarta, Japan 309-324 56.Naito Y, Konuma A, Iwata H, Suyama Y, Seiwa K, Okuda T, Lee SL, Norwati M and Tsumura Y (2005) Selfing and inbreeding depression in seeds and seedings of Neobalanocarpus heimii (Dipterocarpaceae) J Plant Research 118: 423-430 57.Peakall R and Smouse PE (2006) Genalex 6: genetic analysis in excel Population genetic software for teaching and research Mol Ecol Notes 6: 288-295 58.Obayashi K, Tsumura Y, Ihara-Ujino T, Niiyama K, Tanouchi H, Suyama Y,Washitani I, Lee CT, Lee SL and Muhammad N (2002) Genetic diversity and outcrossing rate between undisturbed and selectively logged forests of Shorea curtisii (Dipterocarpaceae) using microsatellite DNA analysis Int J Plant Sci, 163: 151-158 59.Oldfield S, Lusty C and Mackinven A (1998) The World list of Threatened Trees World Conservation Press, Cambridge, UK 650pp 60.Prevost A, Wilkinson MJ (1999) A new system of comparing PCR primers applied to ISSR finger of potato cultivars Heor Appl Genet 98: 107-112 61.Rachmat HH, Kamiya H and Harada K (2012) Genetic diversity, population structure and conservation implication of the endemic Sumatran lowland dipterocarp tree species (Shorea javanica) Inter J Biodivers and Conserv, 4(14): 573-583 62.Rojo JP (1994) Species diversity and conservation status of Philippine dipterocarps In Drysdale RM, John SET, Yapa AC (eds) Proceedings: International Symposium on genetic conservation and production of tropical forest tree seed Thailand, 248-256 63.Smitinand T and Santinuk T (1981) Dipterocarpaceae of Thailand with special reference to silvicultural ecology In Ng FSP (eds.) Proceedings of the second international round table conference on Dipterocarps Malaysian Forester 44: 377-385 64.Soulé ME (1983) Thresholds for survival: maintaining fitness and evolutionary potential, In: Soule ME and Wilcox BA (eds.), Conservation Biology: An Evolutionary-Ecological Perspective Sanderland, Masschusets, pp 151-69 65.Nguyen Minh Tam, Vu Dinh Duy, Nguyen Minh Duc, Vu Dinh Giap and Bui T Tuyet Xuan (2014) Genetic variation in and spatial structure of natural populations of Dipterocarpus alatus (Dipterocarpaceae) determined using single sequence repeat markers Genetics and Molecular Research, ISSN 1676-5680, 13(3): 5378-86 66.Nguyen Minh Tam, Phan Ke Loc, Vu Dinh Duy (2015) Genetic diversity in Xuan nha pine (Pinus armandii subsp xuanhaensis L.K Phan) Research J Biotechnology, 10(3): 30-36 67.Tam N M., Hoa N T and Trang N T P., Genetic variation in threatened conifer Cunninghamia lanceolata var konishii using ISSR markers: Implications for conservation, 2009, J Biol 31(2), pp 66-72 68.Tam NM, Duy VD, Duc NM, Giap VD and Xuan BTT (2014) Genetic variation in and spatial structure of natural populations of Dipterocarpus alatus (Dipterocarpaceae) determined using single sequence repeat markers Genetics and Molecular Research 13 (3): 5378-5386 69.Nguyen Thi Phuong Trang, Tran Thu Huong, Nguyen Minh Duc, Sierens Tim and Triest L (2014) Genetic population of threatened Hopea odorata Roxb in the protected areas of Vietnam Journal of Vietnamese Environment 6(1): 69-76 70.Wickneswari R, Ho WS, Lee KS and Lee CT (2004) Impact of disturbance on population and genetic structure of tropical forest trees For Genet 11, 193-201 71.Terauchi R (1994) A polymorphic microsatellite marker from the tropical tree Dryobalanops lanceolata (Dipterocarpaceae) Jpn J Genet 69: 567576 Tạp chí Cơng nghệ Sinh học 16(3): 1-7, 2018 ĐA DẠNG DI TRUYỀN VÀ THỤ PHẤN CHÉO TRONG QUẦN THỂ DẦU SONG NÀNG (DIPTEROCARPUS DYERI PIERE) Ở RỪNG NHIỆT ĐỚI NÚI THẤP MÃ ĐÀ (ĐỒNG NAI) 1,5 2,4 1 Nguyễn Minh Đức , Nguyễn Minh Tâm , Vũ Đình Duy , Bùi Thị Tuyết Xuân , Đặng Phan Hiền , Cao Thị Việt Nga , Nguyễn Văn Nhị Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Bảo tàng Thiên nhiên Việt Nam, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Đại học Lâm nghiệp Việt Nam Học Viện Khoa học Công nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Center for Nutraceutical and Pharmaceutical Materials, Myongji University, Hàn Quốc  Người chịu trách nhiệm liên lạc E-mail: ngmtam58@gmail.com Ngày nhận bài: 23.3.2018 Ngày nhận đăng: 20.9.2018 TÓM TẮT Dầu song nàng (Dipterocarpus dyeri) loài thực vật phân bố rộng rừng nhiệt đới núi thấp Nam Việt Nam bị đe dọa mức độ quốc gia quốc tế liên quan đến nơi sống bị suy giảm thu hẹp Để bảo tồn loài Dầu song nàng, đánh giá đa dạng di truyền mức độ thụ phấn chéo rừng nhiệt đới Mã Đà thuộc Khu Bảo tồn Thiên nhiên – Văn hóa Đồng Nai sở phân tích cặp mồi microsatellite từ trội chúng có ý nghĩa quan trọng cần thiết Kết phân tích mức độ đa dạng di truyền loài Dầu song nàng rừng nhiệt đới Mã Đà cao Tất locus đa hình số allele trung bình cho locus 4,1 Hệ số gen dị hợp tử quan sát kỳ vọng tương ứng 0,461 0,543 Tương tự, hệ số thụ phấn chéo đa locus trung bình locus lồi Dầu song nàng Mã Đà cao tương ứng 0,884 0,645 Mức độ tự thụ phấn 0,12 Các kết thu phản ánh nơi sống loài Dầu song nàng khu vực Mã Đà phục hồi số lượng cá thể khu vực cao Tuy nhiên, khơng tìm thấy tái sinh loài rừng nhiệt đới Mã Đà việc bảo tồn chuyển vị có vai trò quan trọng để bảo tồn bền vững loài Dầu song nàng khu vực Từ k óa: Bảo tồn, Dầu song nàng, Dipterocarpus dyeri, đa dạng di truyền, thụ phấn chéo, SSR MỞ ĐẦU Họ Dầu (Dipterocarpaceae) họ thực vật phổ biến vùng nhiệt đới Hiện nay, gỗ loài họ Dầu chiếm thị phần lớn thị trường gỗ giới, chúng đóng vai trò quan trọng nhiều quốc gia, chủ yếu nước châu Á đặc biệt vùng Đơng Nam Á Ngồi việc cung cấp gỗ, lồi họ Dầu đem lại nhiều loại sản phẩm có giá trị khác phục vụ đời sống người nhựa chai (Shorea guiso), nhựa cứng (Neobalanocarpus sp., Hopea sp.), nhựa mủ (Dipterocarpus costatus), mỡ bơ (Shorea robusta), camphor (Dryobalanops aromatica), tannin (Dipterocarpus tuberculatus, Hopea odorata) Cronquist (1981) phân chia họ Dầu (Dipterocarpaceae) thành phân họ gồm Dipterocarpoideae, Pakaraimoideae Monotoideae Việt Nam có 40 lồi họ Dầu thuộc chi (Anisoptera, Hopea, Parashorea, Vatica, Dipterocarpus, Shorea), hầu hết loài địa đặc hữu (Nguyễn Hoàng Nghĩa, 2005) Trong năm 1980 1990, giá trị thương mại nhu cầu người dân địa phương, loài họ Dầu bị khai thác mức Việc khai thác nhanh người dân địa phương doanh nghiệp lâm nghiệp, với nơi sống loài Dầu bị thu hẹp phân cắt, làm số lượng cho loài lại khơng nhiều Nơi sống chúng bị thu hẹp suy giảm mạnh Do đó, việc đánh giá mức độ đa dạng di truyền môi trường sống lồi Dầu xem xét cơng việc ưu tiên hoạt động bảo tồn Dầu song nàng (Dipterocarpus dyeri) phân bố rộng rừng nhiệt đới Đông Nam Bộ Tây Nguyên, bao gồm khu Bảo tồn Thiên nhiên - Văn hóa Đồng Nai, rừng phòng hộ Tân Phú, Vườn Quốc gia Cát Tiên (Đồng Nai), Vườn Quốc gia Bù Gia Mập (Bình Phước), Lò Gò – Xa Mát (Tây Ninh), Khu Bảo tồn Thiên nhiên Bình Châu – Phước Bửu (Bà Rịa – Vũng Tàu) số tỉnh khác Tây Nguyên đảo Phú Quốc (Kiên Giang) Loài nằm Sách Đỏ Thế giới (Ashton, 1998) Việt Nam (Bộ Khoa học Công nghệ, 2007) cần phải bảo vệ: CR A1 cd, B1 +2C Trong phạm vi nghiên cứu báo này, tập trung đánh giá mức độ đa dạng di truyền thụ phấn chéo quần thể Dầu song nàng rừng nhiệt đới núi thấp Mã Đà (Vĩnh Cửu, Đồng Nai) sở phân tích cặp mồi thị microsatellite để khám phá chất di truyền hạt giống tốt đáp ứng yêu cầu chất lượng giống phục vụ công tác bảo tồn phát triển bền vững VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Gỗ màu nâu đỏ, cứng Lá đơn mọc cách, phiến hình bầu dục thn, kích thước to dài 15-25 cm, đỉnh nhọn, gốc tù Đối với có lơng mặt Cụm hoa đơn nách lá, có lơng, dài 10-18 cm, 6-8 hoa khơng cuống, 30 nhị Quả hình nón, thuôn dài cm, rộng 2,8 cm, cạnh rõ Quả cánh lớn, dài 20-23 cm, rộng 3-4 cm Quả chín vào cuối tháng hàng năm Mỗi chứa hạt Cây hoa vào khoảng tháng hàng năm chín vào tháng tiếp theo, cuối tháng tháng Địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu tiến hành rừng nhiệt đới núi thấp Mã Đà (Vĩnh Cửu, Đồng Nai), độ cao 129 m, o o tọa độ 11 12’ Bắc 107 09’ Đông Đây khu rừng đặc dụng có diện tích tự nhiên nước ta, với hệ sinh thái đặc trưng Đông Nam Bộ Khu rừng thiết lập năm 2004 trực thuộc Ủy ban nhân dân tỉnh Đồng Nai, với di tích lịch sử Trung ương cục Đơng Nam Bộ, Khu ủy miền Đông Nam Bộ Địa đạo Suối Linh Về thảm thực vật gồm kiểu rừng kín nửa rụng ẩm nhiệt đới, rừng kín rụng ẩm nhiệt đới với loài họ Dầu Dầu rái (Dipterocarpus alatus), Dầu song nàng (D dyeri), Dầu lông (D initricatus), Sao đen (Hopea odorata) số loài khác thuộc họ họ Bồ hòn, họ Sim kiểu rừng kín thường xanh mưa nhiệt đới Rừng thuộc rừng thứ sinh phục hồi sau khai thác chọn vào năm 1980 1990 Vật liệu Dầu song nàng gỗ, cao đến 30 m, đường kính lớn đạt đến 97 cm (40-97 cm), thân thẳng, tròn (Hình 1) Tán hình nón, phân cành cao Vỏ ngồi xù xì, bong thành mảnh nhỏ Hình Quả Dầu (A) (B) song nàng Mã Đà (Đồng Nai) Phương pháp Kh s ực đ a Để đánh giá thông số đa dạng di truyền thụ phấn chéo Dầu song nàng rừng nhiệt đới núi thấp Mã Đà, hạt chín trội chọn, thu thập gieo ươm Vườn ươm Biên Hòa (Trung tâm Lâm nghiệp Biên Hòa, Đồng Nai), đánh số từ SN01 đến SN09 Cây trội chọn ngẫu nhiên theo khoảng cách địa lý tiêu chí đặc điểm hình thái (Quyết định Bộ Lâm nghiệp ban hành Quy phạm kỹ thuật xây dựng rừng giống vườn giống (QPN 15-93)) Hạt từ trội thu thập vào tháng Sau tháng nẩy mầm, sử dụng để phân tích tính đa dạng di truyền thụ phấn chéo trội T c c ết DNA tổng số n ứng PCR DNA tổng số tách chiết từ phương pháp CTAB (Doyle Doyle, 1990) có cải tiến cho phù hợp với điều kiện phòng thí nghiệm Chín mươi bảy mẫu từ trội sử dụng để phân tích thơng số thụ phấn chéo Dầu song nàng Mã Đà Mẫu nghiền cối sứ có sử dụng nitrogen lỏng Nồng độ DNA xác định máy quang phổ kế điện di gel agarose 0,8% Sau loại RNA enzyme RNase, nồng độ DNA pha lỗng đến 10ng/µL Tám cặp mồi SSR sử dụng cho đánh giá đa dạng di truyền khả thụ phấn chéo quần thể (Bảng 1) PCR tiến hành với thể tích phản ứng 25 µL chứa thành phần gồm dung dịch đệm 1x PCR; 2,5 m MgCl2, mM dNTPs; 0,5 pmol cho mồi xuôi ngược; 50 ng DNA tổng số 0,5 U Taq polymerase Quá trình nhân tiến hành máy GeneAmp PCR System 9700 theo chu trình o nhiệt sau: (1) Biến tính ban đầu: 94 C phút; o (2) Biến tính: 94 C phút; (3) Bắt cặp: 54o 56 C phút (tuy thuộc vào cặp mồi); (4) o Kéo dài: 72 C phút; (5) Lặp lại (2) đến (4): o 40 chu kỳ; (6) Phản ứng kết thúc hoàn toàn: 72 C o 10 phút; (7) Giữ sản phẩm C điện di Điện di sản phẩm gel polyacrylamide 8% 40 mL dung dịch đệm 1xTAE điện di Sequi-Gen (BIO-RAD, Mỹ), nhuộm TM GelRed Nucleotic Acid Gel Stain chụp ảnh máy soi gel BioDocAnalyze (BIOMETRA, Đức) Kích thước allele xác định phần mềm Gel-Analyzer GenoSens1850 (Clinx Sci Instruments Co Ltd, Trung Quốc) với thang marker 50 bp DNA (Invitrogen, Đức) Bảng Trình tự cặp mồi SSR đa dạng di truyền Dầu song nàng từ Mã Đà Mồi SSR Trình tự nucleotide cặp mồi (5’-3’) Số nucleot ide lặp lại Tm O ( C) Kích thước allele (bp) N Dipt1 F: CTTCCCTAAATTCCCCAATGTT R: TAATGGTGTGTGTACCAGGCAT Dipt2 HO HE Nguồn trích dẫn (AG)15 55 193-211 0,312 0,354 Isagi et al., 2002 F: AGTTTTATACATCACCGCCAA (GA)17 R: GAAGCCCCTAAGAATTAACCTGA 56 114-142 0,527 Isagi et al., 2002 Dipt3 F: ACAATGAAACTTGACCACCCAT R: CAAAAGGACATACCAGCCTAGC (GA)24 56 224-256 0,474 0,603 0,511 0,566 0,506 0,579 Isagi et al., 2002 Isagi et al., 2002 Isagi et al., 2002 Dipt4 F: TAGGGCATATTGCTTTCTCATC R: CTTATTGCAGTCATCAAGGGAA (AG)15 55 214-256 Dipt5 F: CAGGAGGGGAATATGGAAAA R: AAGTCGTCATCTTTGGATTGC (AC)9 54 120-150 A 0,451 Dipt6 F: ATGCTTACCACCAATGTGAATG R: CTCGCAGCAGAACAACTTTCTA (GA)6 55 170-270 0,521 0,608 Terauch i, 1994 Dipt F: TGGCAAACAAGCTACTGTTCAT R: CATGGGTTTAGCAACCTACACA (TA)8 56 258-286 0,447 0,516 Dipt8 F: ATGTC CATGT TTGAG TG R: CATGG ACATA AGTGG AG (CT)8C 55 A(CT)5 CACCC (CTCA) 3CT(CA )10 170-230 0,468 0,59 Isagi et al., 2002 Ujino et al., 1998 4, 0.461 0.543 Trung bình Ghi chú: Tm: Nhiệt độ bắt cặp, NA: Số allele cho locus, HO: Hệ số gen dị hợp tử quan sát, HE: Hệ số gen dị hợp tử kỳ vọng Như vậy, đa dạng di truyền loài Dầu song nàng Phân tích số liệu Mã Đà cao so với loài dầu khác Việt Để xác định tính đa dạng di truyền Nam, Dầu rái (D alatus) với H = 0,209 H = O E bao gồm số allele cho locus (NA), hệ số gen dị 0,239 (Nguyen Minh Tam et al., 2014); Sao đen (H hợp tử quan sát (HO) gen dị hợp tử kỳ vọng (HE), odorata) với H = 0,366 H = 0,356 (Nguyen Thi O E sử dụng phần mềm GenALEx (Peakall Phuong Trang et al., 2014) Kết tương Smouse, 2006) Phần mềm MLTR (Ritland, 2002) đương với số lồi Dầu khác khu vực Đơng sử dụng để xác định thông số thụ phấn, Nam Á loài Shorea leprosula (H = 0,63 - 0,66, O bao gồm hệ số thụ phấn chéo đa locus (tm), hệ số thụ HE = 0,69 - 0,71; Ng et al., 2004), Parashorea phấn chéo locus (ts),hệ số tự thụ phấn (s), hệ số malaanonan (HO = 0,26, HE = 0,46; Abasolo et al., tương quan hai hệ (rp), hệ số thụ phấn cận 2009) Tuy nhiên, số allele cho locus (NA) lồi nỗn (F) Dầu song nàng thấp so với S leprosula (NA = 11,0 – 11,4; Ng et al., 2004), Dryobalanops aromatic (NA = 5,1; Lim et al., 2001) Kết đa KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN dạng di truyền thấp tìm thấy cho lồi Dầu rái Ba mươi ba allele khác từ cặp mồi (D alatus) Thái Lan, với HO = 0,088, HE = 0,092 microsatellite, với kích thước dao động từ 114 bp (Changtragoon, 2001) Như vậy, ảnh đến 286 bp, từ 97 non trội Dầu song hưởng vào năm 1990, nơi sống bị suy giảm, nàng rừng nhiệt đới núi thấp Mã Đà tỉnh Đồng Nai mức độ đa dạng di truyền quần thể Dầu song xác định Tám locus nghiên cứu cho kết nàng rừng nhiệt đới núi thấp Mã Đà trì mức đa hình (Hình 2) Số allele trung bình 4,1 cho cao Điều lý giải số cá thể locus, dao động từ allele locus Dipt1 quần thể cao, khoảng 500 cá thể trưởng đến allele locus Dipt2, Giá trị đa dạng thành Tuy nhiên, khơng có tái sinh tự nhiên di truyền trung bình lồi Dầu song nàng rừng nhiệt tìm thấy thời gian khảo sát thực địa có đới Mã Đà HO = 0,461 HE = 0,543 Giá trị NA, thể ảnh hưởng độ che phủ tán rừng cao sức sống nẩy mầm yếu HO HE cho locus trình bày Bảng Hình Kết điện di sản phẩm PCR đa hình Dầu song nàng Mã Đà với cặp mồi Dipt2 (A) Dipt8 MK: marker 50 bp; SN1, 2, , 14: mẫu Trên sở phân tích cặp microsatellite 97 giống từ trội thông số thụ phấn loài Dầu song nàng rừng nhiệt đới núi thấp Mã Đà (Bảng 2) Kết hệ số thụ phấn chéo cao mức độ đa locus locus có ý nghĩa Ở mức độ cá thể, giá trị thụ phấn chéo đa locus dao động từ 0,815 trội số đến 1,0 trội số Giá trị locus dao động từ 0,489 trội đến 0,873 trội Ở mức độ quần thể, giá trị thụ phấn đa locus 0,884 locus 0,645 0,87; Murawski et al., 1994), Dryobalanops aromatica (tm = 0,82; Kitamura et al., 1994), Stemonporus oblongifolius (tm = 0,84; Murawski, Bawa, 1994), Shorea leprosula (tm = 0,84; Lee et al., 2000) Kết lồi Dầu song nàng gồm hình thức thụ phấn chéo nhờ trùng gió, tự thụ phấn Thụ phấn chéo chiếm ưu Ngoài ra, hệ số tự thụ phấn thấp loài Dầu song nàng Mã Đà (s) 0,116 Hệ số tương quan quan hệ hệ (cha con) 0,316 hệ số cận noãn trội Mã Đà 0,185 Kết nghiên cứu tương tự với số lồi khác cơng bố Shorea congestiflora (tm = Bả ng Thông số sinh sản Dầu song nàng Mã Đà Mức độ cá thể: Cây trội Số Hệ số thụ phấn chéo đa locus (tm) (SE) Hệ số thụ phấn chéo locus (ts) (SE) Cây trội Cây trội 12 0,852 (0,029) 0,914 (0,034) 0,783 (0,043) 0,612 (0,026) Cây trội 1,0 (0,003) 0,757 (0,028) Cây trội 10 0,827 (0,044) 0,596 (0,019) Cây trội 10 0,901 (0,05) 0,779 (0,053) Cây trội 11 0,815 (0,022) 0,489 (0,034) Cây trội 13 0,903 (0,018) 0,608 (0,064) Cây trội 11 0,825 (0,049) 0,669 (0,055) Cây trội 12 0,924 (0,071) 0,516 (0,081) Mức độ quần thể: Hệ số thụ phấn đa locus (tm) Hệ số thụ phấn locus (ts) 0,884 0,645 Hệ số tự thụ phấn (s=1-tm) 0,116 Hệ số tương quan quan hệ hai hệ (cha con) (rp) 0,316 Hệ số cận noãn trội (F) 0,185 Ghi chú: SE: Độ lệch chuẩn KẾT LUẬN Kết nghiên cứu sinh sản lưỡng tính xuất lồi Dầu song nàng (Dipterocarpus dyeri) với thụ phấn chéo chiếm ưu trì tính đa dạng di truyền cao rừng nhiệt đới núi thấp Mã Đà Tuy nhiên, không xuất tái sinh rừng Mã Đà, để bảo tồn phát triển bền vững loài Dầu song nàng, thu thập hạt từ trội có mức độ thụ phấn chéo cao nhân giống yêu cầu cần phải tiến hành Lời cám ơn: Đề tài hỗ trợ kinh phí Quỹ Nafosted, mã số 106.062017.14 TÀI LIỆU THAM KHẢO Abasolo MA, Fernando ES, Borromeo TH, Hautea DM (2009) Cross-species amplification of Shorea microsatellite DNA markers in Parashorea malaanonan (Dipterocarpaceae) Philippine J of Sci 138(1): 23–28 Ashton P (1998) Dipterocarpus dyeri The IUCN Red List of Threatened Species 1998: e.T33011A9748202 http://dx.doi.org/10.2305/IUCN UK.1998.RLTS.T33011A9748202.en.Downloaded on 13 February 2017 Bộ Khoa học Công nghệ (2007) Sách đỏ Việt Nam, Phần II: Thực vật Changtragoon S (2001) Evaluating genetic diversity of Dipterocarpus alatus genetic resources in Thailand using isozyme gene markers, In In-situ and Ex-situ conservation of commercial tropical trees (Thielges BA, Sastrapradja SD and Rimbawanto A, eds) Gadjah Mada Univ Yogyekarta 349–354 Cronquist A (1981) An integrated system of classification of flowering plants Columbia Univ Press, New York Doyle JJ, Doyle JL (1990) Isolation of plant DNA from fresh tissue Focus 12: 13–15 Isagi V, Kenta T, Nakashizuka T (2002) Microsatellite loci for a tropical emergent tree, Dipterocarpus tempehes V S1 (Dipterocarpaceae) Mol Ecol Not 2(1): 12–13 Kitamura K, Rahman MYBA, Ochiai Y, Yoshimaru H (1994) Estimation of the outcrossing rate on Dryobalanops aromatica Gaertn F In primary and second forests in Brunei, Borneo, southeast Asian Pl Sp Biol 9: 37–41 Lee SL, Wickneswari R, Mahari MC, Zakri AH (2000) Mating system parameters in a tropical tree species, Shorea leprosula Miq (Dipterocarpaceae) from Malaysian Lowland Dipterocarp forest Bitropica 32: 693–702 Lim LS, Wickneswari R, Lee SL, Latiff A (2001) Genetic structure of natural populations of Dryobalanops aromatic Gaertn F (Dipterocarpaceae) in Peninsular Malaysia In Insitu and Ex-situ conservation of commercial tropical trees (Thielges BA, Sastrapradja SD and Rimbawanto A, eds.) Gadjah Mada Univ Yogyekarta, 309–324 Murawski D, Bawa KS (1994) Genetic structure and mating system of Stemonoporus oblongifolius (Dipterocarpaceae) in Sri Lanka Am J Bot 81: 155– 157 Murawski DA, Dayanandan B, Bawa KS (1994) Outcrossing rates of two endemic Shorea species from Sri Lankan tropical rain forests Biotropica 26(1): 23–29 Ng KKS, Lee SL, Koh CL (2004) Spatial structure and genetic diversity of two tropical tree species with contrasting breeding systems and different ploidy levels Mol Ecol Doi: 10.1046/j.1365294X.2004.02094.x Nguyễn Hoàng Nghĩa (2005) Cây Họ Dầu Việt Nam Nhà xuất Nông nghiệp Nguyen Minh Tam, Vu Dinh Duy, Nguyen Minh Duc, Vu Dinh Giap, Bui Thi Tuyet Xuan (2014) Genetic variation in and spatial structure of natural populations of Dipterocarpus alatus (Dipterocarpaceae) determined using single sequence repeat markers Genet Mol Res 13(3): 5378–5386 Nguyen Thi Phuong Trang, Tran Thi Huong, Nguyen Minh Duc, Sierens T, Triest L (2014) Genetic population of threatened Hopea odorata Roxb In the protected areas of Vietnam J Viet Env 6(1): 69–76 Peakall R, Smouse PE (2006) Genalex 6: genetic analysis in excel Population genetic software for teaching and research Mol Ecol Not 6: 208–295 Ritland K (2002) Extensions of models for the estimation of mating systems using n independent loci Heredity 88: 221–228 Terauchi R (1994) A polymorphic microsatellite marker from the tropical tree Dryobalanops lanceolata (Dipterocarpaceae) Japan J Genet 69(5): 567–576 Ujino T, Kawahara T, Tsumara Y, Nagamitsu T, Yoshimaru H, Ratnam W (1998) Development and polymorphism of simple sequence repeat DNA markers for Shorea curtisii and other Dipterocarpaceae species Heredity 81: 422–428 GENETIC DIVERSITY AND OUTCROSSING RATE OF DIPTEROCARPUS DYERI IN MA DA LOWLAND TROPICAL FOREST (DONG NAI) 1,5 2,4 1 Nguyen Minh Duc , Nguyen Minh Tam , Vu Dinh Duy , Bui Thi Tuyet Xuan , DangPhan Hien , Cao Thi Viet Nga , Nguyen Van Nhi Institute of Ecology and Biological Resources, Vietnam Academy of Science and Technology Vietnam National Museum of Nature, Vietnam Academy of Science and Technology Vietnam National University of Forestry Graduate University of Science and Technology, Vietnam Academy of Science and Technology Center for Nutraceutical and Pharmaceutical Materials, Myongji University, Korea SUMMARY Human activities often lead to the disturbed and fragmented habitat and consequently threated species Dipterocarpus dyeri (Dipterocarpaceae) is widely distributed in lowland rainforests in southeast Vietnam Due to over- exploitation and habitat destruction in the 1980s and 1990s, the species is listed as threatened Understanding the genetic variation and mating rate within D dyeri population that occurs in forest patches is necessary to establish effectively conservation strategies for this species To conserve the species in tropical forests, genetic diversity and mating rate were investigated on the basis of eight microsatellites (single sequence repeat, SSR) All of the eight loci were polymorphic A total of 33 different alleles were observed across the screened loci The SSR data indicated high genetic diversities (NA = 4.1; HO = 0.461 and HE = 0.543) and the inbreeding value was high (0.185) The mating system parameters were determined using the mixed mating model and indicated high outcrossing rates (tm = 0.884 and ts = 0.645) The differences of significant tm - ts value indicated that inbreeding contributed to selfing rate for this species in lowland tropical forests of Ma Da This study also indicated the importance of conserving the genetic resources of Dipterocarpus dyeri species in Ma Da rainforests Genetic conservation should derive from correlated outcrossing The conservation strategy should be established an ex-situ conservation site with new big population for this species from all genetic groups, which might improve its fitness under different environmental stresses Keywords: Conservation, Dipterocarpus dyeri, genetic diversity, outcrossing rate, SSRs ... Dầu Song nàng khu rừng cấm, khu bảo tồn thiên nhiên phát triển khu rừng giống để bảo tồn nguồn gen loài 9 1.1.3 Đa dạng di truyền, thụ phấn chéo quần thể loài Dẫn liệu phân tích đa dạng di truyền. .. Khu bảo tồn Thiên nhiên - Văn hóa Đồng Nai, tỉnh Đồng Nai + Mục tiêu bảo tồn loài quý sở nghiên cứu sâu chất di truyền quần thể lồi + Có sở khoa học xác giúp nhà quản lý đưa sách, biện pháp bảo. .. nàng Khu bảo tồn Thiên nhiên - Văn hóa Đồng Nai + Đề xuất số phương án bảo tồn loài họ Dầu loài Dầu Song nàng - Ý nghĩa khoa học thực tiễn: Khoa học: Kết nghiên cứu dẫn liệu khoa học di truyền loài

Ngày đăng: 11/10/2019, 21:21

Nguồn tham khảo

Tài liệu tham khảo Loại Chi tiết
10.Quách Thị Liên, Nguyễn Hoàng Nghĩa, Nguyễn Đức Thành, Nghiên cứu đa dạng di truyền cây Dầu nước (Dipterocarpaceae Alatus) (2009). Tạp chí Công nghệ Sinh học 7(1): 67-74 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Dipterocarpaceae Alatus") (2009). "Tạp chíCông nghệ Sinh học
Tác giả: Quách Thị Liên, Nguyễn Hoàng Nghĩa, Nguyễn Đức Thành, Nghiên cứu đa dạng di truyền cây Dầu nước (Dipterocarpaceae Alatus)
Năm: 2009
11.Hoàng Phú Mỹ và Võ Đại Hải (2013). Đánh giá mô hình rừng trồng phòng hộ hỗn giao giữa Dầu rái, Sao đen và Thanh thất tại huyện Sông Cầu, tỉnh Phú Yên. Tạp chí KHLN 1: 2601-2609 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Tạp chí KHLN
Tác giả: Hoàng Phú Mỹ và Võ Đại Hải
Năm: 2013
13.Nguyễn Minh Tâm, Trần Thị Việt Thanh, Vũ Đình Duy, Nguyễn Lê Anh Tuấn, Trương Hữu Thế, Phạm Quý Đôn, Nguyễn Minh Đức (2015), Đa dạng di truyền loài Dầu mít (Dipterocarpus costatus) ở rừng nhiệt đới núi thấp Tân Phú, tỉnh Đồng Nai. Tạp chí Sinh học, 37(1); 25-30 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Dipterocarpus costatus") ở rừng nhiệt đới núi thấpTân Phú, tỉnh Đồng Nai". Tạp chí Sinh học
Tác giả: Nguyễn Minh Tâm, Trần Thị Việt Thanh, Vũ Đình Duy, Nguyễn Lê Anh Tuấn, Trương Hữu Thế, Phạm Quý Đôn, Nguyễn Minh Đức
Năm: 2015
15.Tô Bá Thanh, Bùi Việt Hải, Phạm Xuân Hoàn (2014). Ảnh hưởng của các yếu tố trồng rừng đến sinh trưởng của rừng trồng Sao đen (Hopea odorata) và Dầu rái (Dipterocarpus alatus) trong các mô hình phục hồi rừng tại khu Bảo tồn Thiên nhiên Dồng Nai. Tạp chí KHLN 3: 3433-3441 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Hopea odorata")và Dầu rái ("Dipterocarpus alatus") trong các mô hình phục hồi rừng tại khuBảo tồn Thiên nhiên Dồng Nai. "Tạp chí KHLN
Tác giả: Tô Bá Thanh, Bùi Việt Hải, Phạm Xuân Hoàn
Năm: 2014
16.Trần Thị Việt Thanh, Trần Thị Liễu, Vũ Thị Thu Hiền, Đinh Thị Phòng, Phí Hồng Hải, La Ánh Dương (2013). Đa dạng di truyền nguồn gen tập đoàn cây Dầu Đọt tím (Dipterocarpus grandiflorus Blco) ở Việt Nam trên cơ sở phân tích chỉ thị ISSR và SSR, Hội nghị Khoa học toàn quốc về sinh thái và tài nguyên sinh vật lần thứ 5, 254-259 Sách, tạp chí
Tiêu đề: (Dipterocarpus grandiflorus Blco) "ở Việt Nam trên cơ sở phântích chỉ thị ISSR và SSR, "Hội nghị Khoa học toàn quốc về sinh thái và tàinguyên sinh vật lần thứ 5
Tác giả: Trần Thị Việt Thanh, Trần Thị Liễu, Vũ Thị Thu Hiền, Đinh Thị Phòng, Phí Hồng Hải, La Ánh Dương
Năm: 2013
17.Trừng Văn Thái, 1986. Báo cáo tổng quát về cây họ Dầu, một họ đặc sắc của khu vực Ấn Độ-Mã Lai. Tạp san KHKTLN phía Nam, 26: 1-11 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Tạp san KHKTLN phía Nam
20.Nguyễn Đức Thành, Nguyễn Thúy Hạnh, Nguyễn Hoàng Nghĩa (2005).Nghiên cứu quan hệ di truyền của một số loài thuộc họ Dầu (Dipterocarpaceae) ở Việt Nam dựa trên đa hình ADN genome và lục lạp. Kỷ yếu Hội nghị toàn quốc “Những vấn đề nghiên cứu cơ bản trong khoa học sự sống”. Nhà xuất bản Khoa học và kỹ thuật, Hà Nội, 1379-1382 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Kỷyếu Hội nghị toàn quốc “Những vấn đề nghiên cứu cơ bản trong khoa học sựsống”
Tác giả: Nguyễn Đức Thành, Nguyễn Thúy Hạnh, Nguyễn Hoàng Nghĩa
Nhà XB: Nhà xuất bản Khoa học và kỹ thuật
Năm: 2005
21.Nguyễn Đức Thành, Nguyễn Thúy Hạnh, Trần Quốc Trọng (2007). Kết quả sử dụng một số chuỗi gen lục lạp trong nghiên cứu đa dạng di truyền và xuất xứ cây lâm nghiệp. Công nghệ sinh học, 5(1): 77-83 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Công nghệ sinh học
Tác giả: Nguyễn Đức Thành, Nguyễn Thúy Hạnh, Trần Quốc Trọng
Năm: 2007
22.Nguyễn Đức Thành, Nguyễn Văn Phượng, Nguyễn Hoàng Nghĩa, 2009. Đa dạng di truyền của loài Sao mạng (Hopea reticulate Tardicu) dựa trên phân tích một số chuỗi DNA lục lạp và chỉ thị RAPD. Công nghệ sinh học,7(2):203-210 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Hopea reticulate "Tardicu) dựa trên phântích một số chuỗi DNA lục lạp và chỉ thị RAPD. "Công nghệ sinh học
23.Nguyễn Thị Phương Trang, Trần Thu Hương, L. Triest, Nguyễn Minh Tâm (2014). Đặc điểm di truyền ba loài sao (Hopea) đang bị đe dọa tuyệt chủng ở Việt Nam. Tạp chí Sinh học, 36(3): 316-322 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Tạp chí Sinh học
Tác giả: Nguyễn Thị Phương Trang, Trần Thu Hương, L. Triest, Nguyễn Minh Tâm
Năm: 2014
24.Bùi Trung (2010). Tìm hiểu tác động của auxin và gibberelline đến khả năng ra rễ của hom giâm Sao đen. Tạp chí Khoa học lâm nghiệp 1: 1-7 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Tạp chí Khoa học lâm nghiệp
Tác giả: Bùi Trung
Năm: 2010
26.Aigner PA (2004). Ecological and genetic effects on demographic processes:pollination, clonality and seed production in Dithyrea maritima, Biol. Cons., 116(1): 27-34 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Biol. Cons
Tác giả: Aigner PA
Năm: 2004
27.Ashton PS (1982). Dipterocarpaceae. In: Van Steenis CGGJ (ed.) Flora Malesiana I (9): 237-552 Sách, tạp chí
Tiêu đề: FloraMalesiana
Tác giả: Ashton PS
Năm: 1982
28.Barrett SCH and Kohn JR (1991). Genetic and evolutionary consequences of small population size in plants: implications for conservation, In: Falk DA and Holsinger KE, Genetics and conservation of rare plants, Oxford University Press, pp. 3-30 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Genetics and conservation of rare plants
Tác giả: Barrett SCH and Kohn JR
Năm: 1991
29.Bawa KS and Ashton PS (1991). Conservation of rare trees in tropical rain forests: a genetic perspective, In: Falk DA and Holsinger KE, Genetics and conservation of rare plants, Oxford University Press, pp. 62-71 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Genetics andconservation of rare plants
Tác giả: Bawa KS and Ashton PS
Năm: 1991
30.Beardmore JA (1983). Extinction, survival and genetic variation, In:Schonewold-Cox CM, Chambers SM, MacBryde B and Thomas L, Genetics and conservation, Cummings Pub. Company INC, pp. 125-151 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Geneticsand conservation
Tác giả: Beardmore JA
Năm: 1983
31.Byers DL and Meagher TR (1992). Mate availability in small populations of plant species with homomorphic sprophytic self-incompatibility, Heredity, 68: 353-359 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Heredity
Tác giả: Byers DL and Meagher TR
Năm: 1992
33.Changtragoon S (2001). Evaluating genetic diversity of Dipterocarpus alatus genetic resources in Thailand Using isozyme gene markers, In: Thielges BA, Sastrapradja SD, Rimbawanto A, (eds) In-situ and ex-situ conservation of commercial tropical trees, Yogyekarta, Japan, 349-354 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Dipterocarpus alatus
Tác giả: Changtragoon S
Năm: 2001
36.Crow JF and Denniston C (1988). Inbreeding and variance effective population numbers, Evolution, 42: 482-495 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Evolution
Tác giả: Crow JF and Denniston C
Năm: 1988
37.Doyle JJ and Doyle JL (1987). A rapid DNA isolation procedure for small qualities of fresh leaf tissue. Phytochem. Bull. 19: 11-15 Sách, tạp chí
Tiêu đề: Phytochem. Bull
Tác giả: Doyle JJ and Doyle JL
Năm: 1987

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w