BÁO CÁO NGHIÊN CỨU VỀ CHẤT PHỤ GIA, Phương pháp iod

BÁO CÁO NGHIÊN CỨU ,VỀ CHẤT PHỤ GIA, Phương pháp iod

1 Phương pháp iod: 1.1 Nguyên tắc: Mẫu thực phẩm sau xử lý phải khử tạp, thủy phân, cho tác dụng với lượng dư thuốc thử F.A F.B để sinh lượng Cu2O tương đương, hòa tan lượng Cu2O tương đương lượng dư dung dịch HCl để sinh lượng clorua bậc tương đương Toàn lượng clorua bậc tác dụng xác với lượng dư Iod pH = 3,8 ÷ 4,2 Chuẩn độ lượng I2 dư dung dịch natrithiosulfat với thị hồ tinh bột điểm cuối chuẩn độ nhận dung dịch màu xanh đen có màu Cu2+ Áp dụng định luật đương lượng với thông số ban đầu để tính tốn kết Phương trình phản ứng: R-CHO + Cu2+ RCOO- + Cu2O↓ + H2O Cu2O + 2HCl  2CuCl + H2O Cu+ + I2 S4O62- + 2I2(xanh đen) 1.2 (xanh Cu2+) Điều kiện xác định: Điều kiện mẫu: Mẫu phải tiến hành đồng nhất, khử tạp thủy phân theo điều kiện quy trình phân tích Điều kiện lượng cân: tính tốn cho dung dịch chuẩn I2 0,1N 10ml phải dư – 5ml Điều kiện hóa chất: F.A F.B: thành phần lượng tính tốn khác Cu2O oxit có tính khử oxit bazơ Là phản ứng trung hòa nên phải dùng axit có tính khử để kết tủa hòa tan Cu phải Cu2+ Trong thực tế người ta phải dùng HCl 10% để hòa tan tủa Khi hòa tan tủa lượng axit khơng dư nhiều cơng đoạn trung hòa lâu Để khắc phục tượng hòa tan tủa thấy tan hết ta cho thêm 1ml HCl dừng Khi trung hòa xong, nâng pH lên ta dùng soda mà khơng dùng NaOH, NH3 Cu tạo phức, phản ứng xảy theo chiều nghịch Khi cho soda tác dụng với HCl giải phóng tạo thành bầu khí ngăn không cho oxi xâm nhập vào I2 không bền nhiệt, ánh sáng nên nồng độ iod khó ổn định phải chuẩn độ trước sử dụng (chuẩn hóa Na2S2O3 K2Cr2O7 sau chuẩn hóa iod) Cho Iod vào phải dư Điều kiện kết tủa Cu2O: pH kết thủa phải lớn 10 ( pH = 13 ÷ 14) loại trừ triệt để oxi hòa tan cách: mẫu + F.A + F.B phải đun sôi phút, thấy khơng có tượng kết tủa chứng tỏ mẫu khơng có đường có đường hungg khơng phải đường khử hóa học mà đường ozit Ta cho mẫu vào F.A F.B khơng cho ngược lại mẫu có đường sinh phản ứng kết tủa Cu+ (cho 10ml F.A + 10ml F.B) F.A + F.B phải dư để đảm bảo số đương lượng gam Cu2O = số đương lượng gam R-CHO Cu2O kết tủa tinh thể, mịn, màu đỏ gạch, khử mạnh Vì khử mạnh nên khơng dễ tiếp xúc với khơng khí rút ngắn thời gian lọc rửa tủa để tránh nguy Cu2O tiếp xúc với khơng khí, nên ta lọc kết tủa luôn bảo vệ lớp nước bề mặt, hoàn tất kết tủa phải gom góc Điều kiện hòa tan tủa: thời điểm phép hòa tan sau đun thấy kết tủa phút, phút Vì thời gian để yên kết tủa hình thành Điều kiện chuẩn độ: Dùng kỹ thuật chuẩn độ ngược phải đảm bảo lượng iod phải dư (căn vào màu nâu) Nếu có màu nâu iod dư, khơng có màu nâu vàng nhạt chứng tỏ Trong phương pháp chất natrithiosulfat iod khơng có độ tin cậy nên phải chuẩn hóa lại Sau cho dung dịch iod vào phải chuẩn không để lâu (dung dịch thiosulfate phải nạp sẵn buret, mở buret tối đa đến màu giảm tới vàng chanh chuẩn giọt Chuẩn nhanh tốt Khi dung dịch từ màu xanh đen qua màu xanh da trời Cu2+ dừng lại) 1.3 Hóa chất – dụng cụ: 1.3.1 Hóa chất: Dung dịch CuSO4 Dung dịch HCl Dung dịch Fehling A Dung dịch Fehling B Dung dịch Na2CO3 Dung dịch I2 Dung dịch K2Cr2O7 Dung dịch Na2S2O3 1.3.2 Dụng cụ: Dụng cụ thủy tinh thông thường 1.4 Mẫu Để yên 10 phút Kiểm tra có lượng acetate chì hay khơng Quy trình xác định: Nghiền nhuyễn giọt PP 0,1% Loại acetate chì dư Na2HPO4 Nếu khơng, định mức 100ml Loại tạp chất acetate chì 10% Lọc Chỉnh pH = 6,5 ÷ Trích ly nhiều lần nước cất nóng Dung dịch 50ml Dung 20ml HCl 5% dịch v Đun cách thủy 15 phút Định mức 100ml Dung dịch F.A + F.B Đun sôi Làm nguội nhanh Trung hòa NaOH 0,1% Tiếp tục đun HCl 5% thêm phút Trung hòa HCl dư NaHCO3 Dung dịch Iod 0,1N + HTB Tính tốn kết 1.5 Màu xanh Cu2+ Tính tốn: %đường = mĐgđường[ Chuẩn iod dư natrithiosulfat 0,1N Trong đó: m: khối lượng mẫu (g) f: hệ số pha loãng F: hệ số chuyển đổi khối lượng Phương pháp sắc ký giấy: 2.1 Định nghĩa: Phương pháp sắc ký giấy, phương pháp sắc ký lớp mỏng, áp dụng kiểm nghiệm chất lượng thuốc để định tính, thử tinh khiết, bán định lượng định lượng Sự tách chất phương pháp sắc ký giấy dựa chủ yếu khác hệ số phân bố chúng hai pha lỏng: Một pha tĩnh pha động Pha tĩnh nước có sẵn sợi celulose giấy, thành phần thân nước từ hỗn hợp dung môi pha động hút chọn lọc vào giấy Pha động hệ dung mơi thích hợp cho tách quy định chuyên luận Mức độ di chuyển chất đặc trưng hệ số di chuyển (Rf) tính tỷ lệ khoảng cách di chuyển chất khoảng cách di chuyển dung mơi: Rf = a/b Trong đó: a khoảng cách di chuyển chất phân tích, b khoảng cách di chuyển dung môi Giá trị Rf nhỏ Trong trường hợp sắc ký liên tục khơng xác định giới tuyến dung môi, người ta dùng hệ số di chuyển Rr Rr tỷ số khoảng cách di chuyển chất phân tích khoảng cách di chuyển chất dùng làm chuẩn so sánh Giá trị Rr nhỏ hay lớn 2.2 Cách tiến hành: Chuẩn bị bình sắc ký: Bình sắc ký bình thủy tinh hình trụ hình hộp dẹt, có kích thước thích hợp, có nắp đậy kín Nắp có lỗ để lắp bình gạn có khố đựng dung mơi Trong bình có giá để máng đựng dung môi treo giấy sắc ký thiết kế thích hợp cho kiểu sắc ký lên hay sắc ký xuống Chuẩn bị dung môi: Thành phần tỷ lệ hệ dung môi quy định chuyên luận Việc trộn thành phần tiến hành bình gạn, sau lắc đều, để yên Nếu có tách lớp gạn lấy lớp pha thân nước, thường lớp dưới, làm dung môi pha tĩnh để bão hoà giấy sắc ký sau chấm chất phân tích, lớp dùng làm dung mơi pha động Nếu dung mơi khơng tách lớp dùng dung mơi để bão hồ giấy sắc ký Chuẩn bị giấy: Giấy sắc ký loại giấy đặc biệt dành riêng cho sắc ký, có bề dày thích hợp Tuỳ theo kích thước bình số lượng vết cần chấm mà cắt khổ giấy hình chữ nhật thích hợp, chiều dài dọc theo thớ giấy Chiều rộng phải nhỏ chiều dài máng dung môi không nhỏ 2,5 cm Bề dài phải tính cho treo giấy vào bình không để đầu chạm vào máng dung môi bão hồ dung mơi Trường hợp bình sắc ký có hình chng úp giấy phải cuộn tròn cố định móc thủy tinh khâu Đường kính cuộn giấy phải nhỏ đường kính đĩa để giấy (sau bão hồ bình rót dung mơi vào đĩa này) nhằm tránh giấy chạm vào thành đĩa Chấm sắc ký: Kẻ đường chì mảnh song song với mép giấy (đường vạch để chấm sắc ký) theo chiều rộng cách mép giấy cm sắc ký lên để cho vết chấm không bị ngập vào dung môi, cm sắc ký xuống để vạch chấm không trùng với đũa thủy tinh đỡ giấy mà thấp cm đặt giấy treo vào máng phần bình Dùng micropipet chia độ tới 0,001 - 0,002 ml mao quản có dung tích xác định (2 μl; μl; 10 μl) để chấm dung dịch chất cần sắc ký thành vết có đường kính khơng q mm Muốn giữ đường kính vết chấm nhỏ, phải chấm nhanh nhiều lần, đợi giọt trước khô chấm tiếp Lượng chấm nồng độ dung dịch chất thử quy định chuyên luận Khi chấm nhiều vết dải giấy vết chấm phải cách vết chấm 30 mm Triển khai sắc ký: Phương pháp sắc ký lên: Rót dung mơi làm pha động vào máng dung môi để lớp dung môi cao 2,5 cm, trường hợp pha tĩnh định (là phần tách lớp phía trộn hỗn hợp dung mơi) rót pha tĩnh vào khe máng dung mơi thành bình sắc ký Đậy kín nắp bình, để n 24 nhiệt độ 20 - 25oC trì nhiệt độ q trình Sau treo giấy chuẩn bị vào bình, đậy nắp, để yên tiếp 30 phút Tiếp theo dùng tay vặn ngồi bình để hạ tờ giấy sắc ký vào máng dung môi cho vạch chấm không ngập vào dung môi Triển khai sắc ký đến thời gian khoảng cách quy định chuyên luận Lấy giấy ra, đánh dấu giới tuyến dung môi để khơ ngồi khơng khí làm khơ khơng khí nóng máy quạt sấy Phải ý tránh ánh sáng suốt trình triển khai Làm vết cách phun thuốc thử màu thích hợp, soi đèn tử ngoại theo quy định chuyên luận Tính giá trị Rf đánh giá kết Phương pháp sắc ký xuống: Cũng tiến hành tương tự sắc ký lên, khác điểm sau đây: Rót dung mơi làm pha tĩnh vào đáy bình, tạo lớp cao khoảng cm; đặt giấy vào máng dung mơi phần bình, dùng đũa thủy tinh để chèn giấy, gác đầu giấy treo qua đũa thủy tinh để không cho giấy chạm vào mép máng chạm vào thành bình Sau thời gian ủeồ baừo hoứa bỡnh vaứ giaỏy theo quy định trên, pha lỗng vào máng đựng dung mơi pha Thường sắc ký xuống áp dụng cho hỗn hợp khó tách phải chạy sắc ký liên tục nên phải tính kết theo Rr  ... lớp cao khoảng cm; đặt giấy vào máng dung mơi phần bình, dùng đũa thủy tinh để chèn giấy, gác đầu giấy treo qua đũa thủy tinh để không cho giấy chạm vào mép máng chạm vào thành bình Sau thời gian... gom góc Điều kiện hòa tan tủa: thời điểm phép hòa tan sau đun thấy kết tủa phút, phút Vì thời gian để yên kết tủa hình thành Điều kiện chuẩn độ: Dùng kỹ thuật chuẩn độ ngược phải đảm bảo lượng... khai sắc ký: Phương pháp sắc ký lên: Rót dung mơi làm pha động vào máng dung môi để lớp dung môi cao 2,5 cm, trường hợp pha tĩnh định (là phần tách lớp phía trộn hỗn hợp dung mơi) rót pha tĩnh