NGHIÊN cứu độc TÍNH và tác DỤNG KÍCH THÍCH MIỄN DỊCH của VIÊN NANG KOVIR TRÊN ĐỘNG vật THỰC NGHIỆM

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI ĐINH THỊ THU HẰNG NGHI£N CứU ĐộC TíNH Và TáC DụNG KíCH THíCH MIễN DịCH CđA VI£N NANG KOVIR TR£N §éNG VËT THùC NGHIƯM Chun ngành : Dược lý độc chất Mã số : NT 62725001 LUẬN VĂN BÁC SĨ NỘI TRÚ NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Phạm Thị Vân Anh HÀ NỘI - 2017 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực luận văn này, nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ động viên quý báu từ Thầy Cô giáo, anh chị Bộ Môn, gia đình bạn bè Bằng tất kính trọng tình cảm chân thành, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới TS Phạm Thị Vân Anh, Trưởng Bộ môn Dược lý, Trường Đại học Y Hà Nội, người thầy hết lòng quan tâm, tận tình bảo trực tiếp hướng dẫn tơi suốt q trình hồn thành luận văn Cơ người truyền cho niềm hứng thú đam mê nghiên cứu khoa học Cơ ln ln giúp đỡ, khích lệ tơi học tập gương sáng nhiệt tình, nhiệt huyết cơng việc Tơi xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Trọng Thông, PGS.TS Nguyễn Thị Ngọc Thanh, PGS.TS Nguyễn Trần Thị Giáng Hương, TS Trần Thanh Tùng, người thầy giúp đỡ, bảo tơi q trình học tập, tạo điều kiện để tơi hồn thành luân văn Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Thầy cô giáo, anh chị kỹ thuật viên Bộ môn Dược lý trường Đại học Y Hà Nội gần gũi, động viên giúp đỡ thời gian qua Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám Hiệu, Phòng Đào tạo sau Đại Học, Trường Đại học Y Hà Nội tạo điều kiện cho tơi hồn thành luận văn Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới gia đình, bạn bè, người ln ủng hộ, giúp đỡ động viên học tập, sống giúp tơi hồn thiện luận văn Một lần xin chân thành cảm ơn Đinh Thị Thu Hằng DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT IL : Interleukin CY : Cyclophosphamid SCID : Severe combined immunodeficiency disease (Bệnh suy giảm miễn dịch phối hợp nặng) HIV : Human immodeficiency virus AIDS : Acquired immune deficiency syndrome JAK : Janus kinase STAT : The signal transducers and activators of transcription (Các yếu tố hoạt hóa dẫn truyền tín hiệu phiên mã) MHC : Major histocompatibility complex (Phức hợp hòa hợp mơ chủ yếu) CD : Cluster of differentiation Fc : Crystalisable fragment IFN : Interferon TNF : Tumor necrosis factor Th1, Th2 : T helper cells type and type Tc : Cytotoxic T lymphocyte CR3 : Complement receptor TLR : Toll-like receptor FDA : Food and Drug Administration ELISA : Enzyme linked immunosorbent assay Ig : Immunoglobulin TNF-α : Tumor Necrosis Factor α WHO : World Health Organization (Tổ chức Y tế Thế giới) FKBP : FK-binding protein CYP : Cytochrom P450 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương đáp ứng miễn dịch 1.1.1 Định nghĩa .3 1.1.2 Phân loại 1.2 Suy giảm miễn dịch lâm sàng 1.2.1 Khái niệm 1.2.2 Phân loại 1.3 Các chất kích thích miễn dịch sử dụng lâm sàng 1.3.1 Các cytokin tái tổ hợp 1.3.2 Hormon tuyến ức 12 1.3.3 Các chất kích thích miễn dịch có nguồn gốc từ vi sinh vật 12 1.3.4 Các chất kích thích miễn dịch có nguồn gốc từ hóa chất .13 1.3.5 Các chất kích thích miễn dịch có nguồn gốc từ thực vật .15 1.4 Tình hình nghiên cứu chất kích thích miễn dịch thực nghiệm .16 1.4.1 Một số tác nhân gây suy giảm miễn dịch thực nghiệm 16 1.4.2 Tình hình nghiên cứu chất kích thích miễn dịch mơ hình thực nghiệm gây suy giảm miễn dịch 21 1.5 Tổng quan viên nang Kovir 23 1.5.1 Thành phần 23 1.5.2 Giới thiệu thành phần viên nang Kovir 23 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .31 2.1 Chất liệu nghiên cứu 31 2.1.1 Thuốc nghiên cứu 31 2.1.2 Dụng cụ, hóa chất nghiên cứu .31 2.2 Đối tượng nghiên cứu 32 2.3 Phương pháp nghiên cứu 32 2.3.1 Nghiên cứu độc tính viên nang Kovir 32 2.3.2 Nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch viên nang Kovir mơ hình suy giảm miễn dịch cyclophosphamid .34 2.4 Xử lý số liệu .37 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .38 3.1 Nghiên cứu độc tính viên nang Kovir động vật thực nghiệm 38 3.1.1 Nghiên cứu độc tính cấp .38 3.1.2 Nghiên cứu độc tính bán trường diễn 38 3.2 Nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch viên nang Kovir mơ hình gây suy giảm miễn dịch hóa chất .51 3.2.1 Kết đánh giá tình trạng chung hệ miễn dịch 51 3.2.2 Ảnh hưởng viên nang Kovir lên đáp ứng miễn dịch tế bào miễn dịch dịch thể .60 Chương 4: BÀN LUẬN .64 4.1 Độc tính viên nang Kovir động vật thực nghiệm 64 4.1.1 Độc tính cấp 64 4.1.2 Độc tính bán trường diễn .65 4.2 Tác dụng kích thích miễn dịch viên nang Kovir mơ hình gây suy giảm miễn dịch cyclophosphamid 71 4.2.1 Mơ hình gây suy giảm miễn dịch cyclophosphamid 71 4.2.2 Lựa chọn chứng dương .73 4.2.3 Ảnh hưởng viên nang Kovir mơ hình gây suy giảm miễn dịch cyclophosphamid .74 KẾT LUẬN 85 KIẾN NGHỊ 87 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Một số thành phần sữa non người bò 25 Bảng 3.1 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến số lượng hồng cầu .39 Bảng 3.2 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến số lượng huyết sắc tố 39 Bảng 3.3 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến hematocrit 40 Bảng 3.4 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến thể tích trung bình hồng cầu 40 Bảng 3.5 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến số lượng bạch cầu .40 Bảng 3.6 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến công thức bạch cầu .41 Bảng 3.7 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến số lượng tiểu cầu 41 Bảng 3.8 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến nồng độ bilirubin toàn phần 43 Bảng 3.9 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến nồng độ albumin 43 Bảng 3.10 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến nồng độ cholesterol toàn phần .44 Bảng 3.11 Kết giải phẫu vi thể lách tuyến ức 52 Bảng 3.12: Ảnh hưởng viên nang Kovir lên công thức bạch cầu máu ngoại vi .59 Bảng 3.13: Ảnh hưởng viên nang Kovir lên nồng độ IL-2 máu ngoại vi 61 Bảng 3.14: Ảnh hưởng viên nang Kovir lên nồng độ IgG máu ngoại vi 63 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến trọng lượng chuột .38 Biểu đồ 3.2 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến hoạt độ AST 42 Biểu đồ 3.3 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến hoạt độ ALT 43 Biểu đồ 3.4 Ảnh hưởng viên nang Kovir đến nồng độ creatinin 45 Biểu đồ 3.5 Ảnh hưởng viên nang Kovir lên trọng lượng lách .51 Biểu đồ 3.6: Ảnh hưởng viên nang Kovir lên số lượng bạch cầu 58 Biểu đồ 3.7: Ảnh hưởng viên nang Kovir đến phản ứng bì với kháng nguyên OA 60 Biểu đồ 3.8: Ảnh hưởng viên nang Kovir lên nồng độ TNF-α máu ngoại vi 62 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cơ chế tác dụng cytokin Hình 1.2 Ảnh hưởng GM-CSF lên tế bào miễn dịch 11 Hình 1.3 Ảnh hưởng GM-CSF lên tế bào đuôi gai tế bào T môi trường xung quanh khối u .11 Hình 1.4 Cơ chế hoạt động cyclosporin tacrolimus lên tế bào lympho T .18 Hình 1.5 Chuột biến đổi gen 21 Hình 1.6 Sơ đồ chuyển hóa alliin 24 DANH MỤC ẢNH Ảnh 3.1 Hình thái vi thể gan chuột lô chứng (chuột số 4) 46 Ảnh 3.2 Hình thái vi thể gan chuột lô chứng (chuột số 3) 46 Ảnh 3.3 Hình thái vi thể gan chuột lô trị (chuột số 92) sau tuần uống thuốc thử 47 Ảnh 3.4 Hình thái vi thể gan chuột lô trị (chuột số 98) sau tuần uống thuốc thử 47 Ảnh 3.5 Hình thái vi thể gan chuột lô trị (chuột số 82) sau tuần uống thuốc thử 48 Ảnh 3.6: Hình thái vi thể thận chuột lô chứng (chuột số 1) sau tuần uống thuốc thử 49 Ảnh 3.7: Hình thái vi thể thận chuột lô trị (chuột số 94) sau tuần uống thuốc thử .49 Ảnh 3.8: Hình thái vi thể thận chuột lơ chứng (chuột số 92) sau tuần uống thuốc thử 50 Ảnh 3.9 Hình thái vi thể thận chuột lơ trị (chuột số 83) sau tuần uống thuốc thử 50 Ảnh 3.10: Hình thái vi thể thận chuột lơ chứng (chuột số 92) sau tuần uống thuốc thử 51 Ảnh 3.7: Hình ảnh vi thể lách chuột lơ chứng sinh học (chuột số 1) .53 Ảnh 3.8: Hình ảnh vi thể lách chuột lơ mơ hình (chuột số 12) 53 Ảnh 3.9: Hình ảnh vi thể lách chuột lô uống levamisol (chuột số 30) 54 Ảnh 3.10: Hình ảnh vi thể lách chuột lô uống Kovir 5,62 g/kg .54 Ảnh 3.11: Hình ảnh vi thể lách chuột lơ uống Kovir 11,24 g/kg 55 Ảnh 3.12: Hình ảnh vi thể tuyến ức chuột lô chứng sinh học 55 Ảnh 3.13: Hình ảnh vi thể tuyến ức chuột lơ mơ hình 56 Ảnh 3.14: Hình ảnh vi thể tuyến ức chuột lô uống levamisol 56 Ảnh 3.15: Hình ảnh vi thể tuyến ức chuột lơ uống Kovir 5,62 g/kg (chuột số 65) .57 Ảnh 3.16: Hình ảnh vi thể tuyến ức chuột lô uống Kovir 11,24 g/kg (chuột số 50).57 ĐẶT VẤN ĐỀ Miễn dịch học lĩnh vực phát triển mạnh mẽ có nhiều triển vọng ngành cơng nghệ y sinh học Một hướng nghiên cứu quan trọng cấp thiết miễn dịch vấn đề liên quan đến phòng ngừa điều trị rối loạn chức miễn dịch: bệnh lý suy giảm miễn dịch viêm mạn tính, suy nhược thể, ung thư; bệnh lý tăng đáp ứng miễn dịch mức bệnh tự miễn, bệnh hệ thống; [1],[2] Vì vậy, điều biến miễn dịch nhằm khơi phục lại cân hệ miễn dịch mục tiêu thuốc điều biến miễn dịch Các chất điều biến miễn dịch gọi chất kích thích miễn dịch làm tăng cường hoạt động chức tế bào miễn dịch ngược lại, làm suy giảm hệ miễn dịch thể gọi chất ức chế miễn dịch [2],[3],[4],[5] Các chất ức chế miễn dịch có vai trò quan trọng điều trị bệnh tự miễn chống thải ghép quan Ngồi ra, chúng sử dụng phổ biến thực nghiệm việc gây mơ hình suy giảm miễn dịch, đặc biệt thuốc, hóa chất cyclophosphamid, corticoid, azathioprin [3],[6],[7] Trong đó, cyclophosphamid tác nhân thường sử dụng nhiều gây ức chế miễn dịch động vật thực nghiệm áp dụng nhiều tác giả nước [8], [9],[10],[11] Dựa vào nguồn gốc, chất kích thích miễn dịch chia thành nhiều loại cytokin tái tổ hợp (interleukin-2, interferon, ), chất kích thích miễn dịch có nguồn gốc hóa chất (như levamisol, imuthiol), nguồn gốc vi sinh vật (như vaccin BCG) hay chất có nguồn gốc từ thực vật (Hạ khơ thảo, Hồng bì, Nhàu, )[1],[6] Việc sử dụng chất kích thích miễn dịch có nguồn gốc hóa học, tổng hợp bán tổng hợp đem lại hiệu cao lâm sàng phòng điều trị bệnh nghiên cứu invitro, invivo Các thuốc điều biến miễn dịch có nguồn gốc hóa học thường có nhiều tác dụng khơng mong muốn, cytokin có chi phí cao q trình điều trị Các chất có nguồn gốc tự nhiên có ưu điểm giá thành an toàn cho người sử dụng Một số lượng lớn 85 KẾT LUẬN Qua kết nghiên cứu độc tính viên nang Kovir tác dụng kích thích miễn dịch mơ hình gây suy giảm miễn dịch hóa chất động vật thực nghiệm xin đưa kết luận: Về độc tính 1.1 Độc tính cấp Viên nang Kovir khơng gây độc tính cấp chuột nhắt trắng cho chuột uống liều dung nạp tối đa 325 g/kg/ngày, gấp 39 lần liều tương đương lâm sàng, khơng có chuột chết, khơng có dấu hiệu bất thường Như vậy, khơng tính LD50 viên nang Kovir theo đường uống chuột nhắt trắng 1.2 Độc tính bán trường diễn Viên nang Kovir dùng đường uống tuần liên tục với mức liều 4,21 g/kg/ngày (tương đương liều điều trị dự kiến người) 12,63 g/kg/ngày (gấp lần tương đương liều điều trị dự kiến người) không ảnh hưởng đến tình trạng chung, thể trọng, chức hệ tạo máu chức gan thận chuột Tuy nhiên, lô chuột dùng viên nang Kovir mức liều, cấu trúc vi thể gan thận có thay đổi so với lô chứng sinh học: tế bào gan tế bào ống thận thối hóa từ nhẹ đến vừa Về tác dụng kích thích miễn dịch Kovir liều 5,62 g/kg 11,24 g/kg uống liên tục ngày có tác dụng kích thích miễn dịch mơ hình gây suy giảm miễn dịch cấp tính CY liều 200 mg lần thông qua số: - Kovir liều 5,62 g/kg (tương đương với liều dự kiến điều trị lâm sang) có tác dụng làm cải thiện số miễn dịch: cải thiện rõ tình trạng tổn thương quan lách, tuyến ức hình ảnh giải phẫu bệnh vi thể; tăng phản ứng bì với kháng nguyên OA; tăng nồng độ IL-2, IgG làm giảm TNF-α máu ngoại vi so với lơ mơ hình 86 - Kovir liều 11,24 g/kg (gấp lần liều tương đương với liều dự kiến điều trị lâm sàng) có tác dụng làm cải thiện số miễn dịch chung đáp ứng miễn dịch dịch thể miễn dịch tế bào: tăng tổng số lượng bạch cầu chung số lượng bạch cầu lympho máu ngoại vi; tăng trọng lượng lách tương đối; cải thiện rõ tình trạng tổn thương quan lách, tuyến ức hình ảnh giải phẫu bệnh vi thể; tăng phản ứng bì với kháng nguyên OA làm giảm nồng độ TNFα máu ngoại vi so với lơ mơ hình 87 KIẾN NGHỊ Từ kết nghiên cứu động vật thực nghiệm tác dụng kích thích miễn dịch Cereneed-caps xin đề xuất kiến nghị sau: - Tiếp tục thực nghiên cứu sâu để tìm hiểu chế tác dụng viên nang Kovir - Triển khai nghiên cứu lâm sàng bệnh nhân suy giảm miễn dịch TÀI LIỆU THAM KHẢO Katzung GB (2011), Basic and Clinical Pharmacology, twelth edition, McGraw-Hill Companies, Inc U.S.Patil, A.V.Jaydeokar and D.D.Bandawane (2012) Immunomodulators: a pharmacological review Int J Pharm Pharm Sci, second edition, 4(1), 30-36 Bộ môn Dược lý (2012), Dược lý học lâm sàng, Trường Đại học Y Hà Nội, Nhà xuất Y học, Hà Nội Priyanka Saroj, Mansi Verma, K K Jha, et al (2012) An overview on immunomodulation J Adv Scient Res, 3(1), 07-12 Jantan I, Ahmad W and Bukhari SN (2015) Plant-derived immunomodulators: an insight on their preclinical evaluation and clinical trials, Front Plant Sci, 655(6) Goodman and Gilman (2010), The pharmacological basis of therapeutics, twelfth edition, McGraw-Hill Companies, Inc Parnham MJ and Nijkamp FP (2005), Principles of immunopharmacology, second edition, Birkhauser Verlag, 377-389 Mohammad Rafiul Haquea, Shahid Hussain Ansaria and Azhar Rashikhbv (2013) Coffea arabica seed extract stimulate the cellular immune function and cyclophosphamide-induced immunosuppression in mice, Iranian Journal of Pharmaceutical Research, 12(1), 101-108 Xinghong Zhao, Yuetian Zhang, Xu Song, et al (2015) Effect of Chuanminshen violaceum polysaccharides and its sulfated derivatives on immunosuppression induced by cyclophosphamide in mice, Int J Clin Exp Med, 8(1), 558-568 10 Nguyễn Văn Rư Quách Thị Hà Vân (2015) Thử nghiệm tác dụng kích thích miễn dịch pidotimod tổng hợp động vật thí nghiệm, Tạp chí Dược học, 55(469), 26-31 11 Phạm Thị Vân Anh (2011), Nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch chống oxy hóa cao Nhàu (Morinda citrifolia L Rubiaceae) động vật thực nghiệm, Trường Đại học Y Hà Nội, Hà Nội 12 Viện dược liệu (2007), Cây thuốc động vật làm thuốc, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 13 Makris A, Thornton CE, Xu B, et al (2005) Garlic increases IL-10 and inhibits TNFalpha and IL-6 production in endotoxin-stimulated human placental explants Placenta, 26(10), 828-834 14 Georgia Schäfer and Catherine H Kaschula (2014) The immunomodulation and anti-inflammatory effects of garlic organosulfur compounds in cancer chemoprevention Anticancer Agents Med Chem, 14(2), 233-240 15 Michał Majewski (2014) Allium sativum: Facts and myths regarding human health Rocz Panstw Zakl Hig, 65(1), 1-8 16 Kaschula CH, Hunter R, Stellenboom N, et al (2012) Structure-activity studies on the anti-proliferation activity of ajoene analogues in WHCO1 oesophageal cancer cells Eur J Med Chem, 50, 236-254 17 Marcel Jenny, Ninfa R Pedersen, Budi J Hidayat, et al (2010) Bovine colostrum modulates immune activation cascades in human peripheral blood mononuclear cells in vitro New Microbiologica, 33, 129-135 18 Biswas P, Vecchi A, Mantegani P, et al (2007) Immunomodulatory effects of bovine colostrum in human peripheral blood mononuclear cells New Microbiologica, 30(4), 447-454 19 NW Solomons (2002) Modulation of the immune system and the response against pathogens with bovine colostrum concentrates European Journal of Clinical Nutrition, 56(3), S24-S28 20 Walter L Hurley and Peter K Theil (2011) Perspectives on immunoglobulins in colostrum and Milk Nutrients, 3(4), 442-474 21 Rodrigo Arreola, Saray Quintero-Fabián, Rocío Ivette López-Roa, et al (2015) Immunomodulation and anti-inflammatory effects of garlic compounds J Immunol Res, 1-13 22 Bộ môn Miễn dịch – Sinh lý bệnh (2011), Sinh lý bệnh miễn dịch, Trường Đại học Y Hà Nội, Nhà xuất Y học, Hà Nội 23 Vũ Triệu An (2001), Miễn dịch học, Nhà xuất Y học, Hà Nội 24 Phan Thị Phi Phi (2007), Một số vấn đề y sinh học cập nhật cho bác sĩ, Nhà xuất Y học, Hà Nội 25 Chatterjee AN, Saha S and Roy PK (2015) Human immunodeficiency virus/acquired immune deficiency syndrome: Using drug from mathematical perceptive World J Virol, 4(4), 356-364 26 B Petrunova, P Nenkova and R Shekerdjiisky (2007) The Role of immunostimulants in immunotherapy and immunoprophylaxis Biotechnology & Biotechnological Equipment, 21(4), 454-462 27 Shyam Narayan Labh and Shubha Ratna Shakya (2014) Application of immunostimulants as an alternative to vaccines for health management in aquaculture International Journal of Fisheries and Aquatic Studies, 2(1), 153-156 28 Agnieszka Sirko, Tomas Vaněk, Anna Góra-Sochacka, et al (2011) Recombinant Cytokines from Plants Int J Mol Sci, 12(6), 3536-3552 29 Dinarello CA (2009) Immunological and inflammatory functions of the interleukin-1 family Annu Rev Immunol, 27, 519-50 30 Cecilia Garlanda, Charles A Dinarello and Alberto Mantovani (2013) The Interleukin-1 Family: Back to the Future Immunity, 39(6), 1003-1018 31 Steven A Rosenberg (2014) IL-2: The First Effective Immunotherapy for Human Cancer J Immunol, 192, 5451-5458 32 Dennis KL, Blatner NR, Gounari F, et al (2013) Current status of interleukin10 and regulatory T-cells in cancer Curr Opin Oncol, 25(6), 637-645 33 Moore KW, de Waal Malefyt R, Coffman RL, et al (2001) Interleukin-10 and the interleukin-10 receptor Annu Rev Immunol, 19, 683-765 34 Richard J., Brian M., June E (2005) IL-15 has stimulatory activity for the induction of B cell proliferation and differentation The American Association of Immunologists, 484-488 35 Shi Y, Liu CH, Roberts AI, et al (2006) Granulocyte-macrophage colonystimulating factor (GM-CSF) and T-cell responses: what we and don't know Cell Res, 16(2), 126-133 36 Kaufman HL, Ruby CE, Hughes T, et al (2014) Current status of granulocytemacrophage colony-stimulating factor in the immunotherapy of melanoma J Immunother Cancer, 2(11), 1-13 37 Lulong Bo, Fei Wang, Jiali Zhu, et al (2011) Granulocyte-colony stimulating factor (G-CSF) and granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GMCSF) for sepsis: a meta-analysis Crit Care, 15(1), R58 38 Hume DA and MacDonald KP (2012) Therapeutic applications of macrophage colony-stimulating factor-1 (CSF-1) and antagonists of CSF-1 receptor (CSF-1R) signaling Blood, 119(8), 1810-1820 39 Bộ môn vi sinh vật (2007), Vi sinh vật y học, Trường đại học Y Hà Nội, Nhà xuất Y học, Hà Nội 40 Bộ Y tế (2009), Dược thư quốc gia, Hội đồng Dược điển Việt Nam, Nhà Xuất Y học, Hà Nội 41 Kiselyov A, Bunimovich-Mendrazitsky S and Startsev V (2015) Treatment of non-muscle invasive bladder cancer with Bacillus Calmette-Guerin (BCG): Biological markers and simulation studies BBA Clin, 4, 27-34 42 Nya EJ and Austin B (2010) Use of bacterial lipopolysaccharide (LPS) as an immunostimulant for the control of Aeromonas hydrophila infections in rainbow trout Oncorhynchus mykiss (Walbaum) J Appl Microbiol, 108(2), 686-694 43 Vaclav Vetvicka (2011) Glucan-immunostimulant, adjuvant, potential drug World J Clin Oncol, 2(2), 115-119 44 Heike Stier, Veronika Ebbeskotte and Joerg Gruenwald (2014) Immunemodulatory effects of dietary Yeast Beta-1,3/1,6-D-glucan Nutr J., 13-38 45 Gordon D Brown, Jurgen Herre, David L Williams et al (2003) Dectin-1 Mediates the Biological Effects of β-Glucans J Exp Med, 197(9),1119-1124 46 Merluzzi VJ, Badger AM, Kaiser CW, et al (1975) In vitro stimulation of murine lymphoid cell cultures by levamisole Clin Exp Immunol, 22(3), 486492 47 Pompidou A, Delsaux MC, Telvi L, et al (1985) Isoprinosine and Imuthiol, two potentially active compounds in patients with AIDS-related complex symptoms Cancer Res, 45(9), 4671s-4673s 48 Phạm Thị Vân Anh, Nguyễn Trọng Thông Vũ Thị Ngọc Thanh (2004) Nghiên cứu ảnh hưởng cao nhàu (Morinda citrifolia L Rubiaceae) động vật thực nghiệm bị suy giảm miễn dịch chiếu tia xạ Tạp chí nghiên cứu Y học, 32(6), 82-86 49 Liou CJ, Li ML and Tseng J (2004) Intraperitoneal injection of ginseng extract enhances both immunoglobulin and cytokine production in mice Am J Chin Med, 32(1), 75-88 50 Tan BK and Vanitha J (2004) Immunomodulatory and antimicrobial effects of some traditional chinese medicinal herbs: a review Curr Med Chem, 11(11), 1423-1430 51 Ko E, Park JW, Rho S, et al (2004) Chung-Yeul-Gue-Soup-Sa-Gan-Tang, traditional Korean medicine, enhances CD4(+) T cell activities and modulates Th1/Th2 lineage development J Pharmacol Sci, 94(4), 359-367 52 Shirani K, Hassani FV, Razavi-Azarkhiavi K, et al (2015) Phytotrapy of cyclophosphamide-induced immunosuppression Environ Toxicol Pharmacol, 39(3), 1262-1275 53 H P Rang, J M Ritter, R J Flower, et al (2015), Rang and Dale’s pharmacology, eighth edition, Elsiver, UK 54 Bộ môn Sinh lý học (2007), Sinh lý học, Trường đại học Y Hà Nội, Nhà xuất Y học, Hà Nội 55 Bộ môn Y học hạt nhân (2007), Bài giảng Y học hạt nhân, Trường đại học Y Hà Nội, Nhà xuất Y học, Hà Nội 56 Nguyễn Văn Đô (1993), Nghiên cứu thay đổi số lượng hồng cầu, bạch cầu tế bào hình thành hoa hồng E bệnh nhân ung thư trước sau điều trị tia xa (Co60), Trường Đại học Y Hà Nội, Hà Nội 57 Schwarz A, Maeda A, Kernebeck K, et al (2005) Prevention of UV radiationinduced immunosuppression by IL-12 is dependent on DNA repair J Exp Med, 201(2), 173-179 58 Huijbers IJ (2017) Generating Genetically Modified Mice: A Decision Guide Methods Mol Biol, 1642, 1-19 59 He H, Messer RJ, Sakaguchi S (2004) Reduction of retrovirus-induced immunosuppression by in vivo Modulation of T Cells during Acute Infection Journal of virology, 11641–11647 60 Hussain A, Shadma W, Maksood A, et al (2013) Protective effects of Picrorhiza kurroa on cyclophosphamide-induced immunosuppression in mice Pharmacognosy Res, 5(1), 30-35 61 Jeklova E, Leva L, Jaglic Z, et al (2008) Dexamethasone-induced immunosuppression: a rabbit model Vet Immunol Immunopathol, 122(3-4), 231-240 62 Phạm Huy Quyến, Phan Thị Phi Phi Phan Thu Anh (1994) Nghiên cứu in vitro tác dụng kích thích miễn dịch chất chiết tồn phần rễ Morinda citrifolia Tạp chí nghiên cứu Y học Việt Nam, 9, 21-26 63 Phạm Huy Quyến (1996), Tác dụng kích thích miễn dịch dịch chiết rễ Nhàu súc vật thực nghiệm, Trường Đại học Y Hà Nội, Hà Nội 64 Nguyễn Thị Vinh Hà (2005) Nghiên cứu thay đổi bạch cầu, hồng cầu tủy xương chuột nhắt trắng bị chiếu tia xạ Y học Việt Nam, 2, 22-25 65 Hussain A, Shadma W, Maksood A, et al (2013) Proanthocyanidins Inhibit UV-induced immunosuppression through IL-12–dependent stimulation of CD8+ effector T cells and inactivation of CD4+ T Cells Cancer Prev Res, 4(2), 238-247 66 Đỗ Tất Lợi (2015), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội 67 Bộ Y Tế (2010) Dược điển Việt Nam IV, Nhà xuất Y học, Hà Nội 68 Rodrigo Arreola, Saray Quintero-Fabián, Rocío Ivette López-Roa, et al (2015) Immunomodulation and anti-inflammatory effects of garlic compounds J Immunol Res, 1-13 69 Kelly GS (2003) Bovine colostrums: a review of clinical uses Alternative Medicine Review, 8(4), 378-394 70 Lidia Elfstrand and Claes-Henrik Florén (2010) Management of chronic diarrhea in HIV-infected patients: current treatment options, challenges and future directions HIV AIDS (Auckl), 2, 219-224 71 Hammon HM1, Steinhoff-Wagner J, Flor J, et al (2013) Lactation Biology Symposium: role of colostrum and colostrum components on glucose metabolism in neonatal calves J Anim Sci, 91(2), 685-95 72 World Health Organization (2000) Working group on the safety and efficacy of herbal medicine Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization 73 Đỗ Trung Đàm (2014), Phương pháp xác định độc tính thuốc, Nhà xuất Y học, Hà Nội 74 El-Naggar SA, Alm-Eldeen AA, Germoush MO, et al (2015) Ameliorative effect of propolis against cyclophosphamide-induced toxicity in mice Pharm Biol, 53(2), 235-241 75 Manepalli S, Gandhi JA, Ekhar VV, et al (2013) Characterization of a cyclophosphamide-induced murine model of immunosuppression to study Acinetobacter baumannii pathogenesis J M ed Microbiol, 62(11), 1747-1754 76 Lawal B, Shittu O K, Oibiokpa F I, et al (2016) Antimicrobial evaluation, acute and sub-acute toxicity studies of Allium sativum Journal of Acute Disease, 5(4), 296-301 77 Zhang X, Wang Y, Liang Q, et al (2014) The Correlation between Chemical Composition, as Determined by UPLC-TOF-MS, and Acute Toxicity of Veratrum nigrum L and Radix paeoniae alba Evid Based Complement Alternat Med, 1-13 78 Li Y, Cai W, Weng X, et al (2015) Lonicerae Japonicae Flos and Lonicerae Flos: A Systematic Pharmacology Review Evid Based Complement Alternat Med, 1-16 79 Nguyễn Thế Khánh, Phạm Tử Dương (2001), Xét nghiệm sử dụng lâm sàng, Nhà xuất Y học, Hà Nội 80 Vũ Đình Vinh (2001), Hướng dẫn sử dụng xét nghiệm sinh hoá Nhà xuất Y học, Hà Nội 81 Bộ mơn Hóa sinh (2007), Hóa sinh, Trường đại học Y Hà Nội, Nhà xuất Y học, Hà Nội 82 Andersen JT, Daba MB, Berntzen G, et al (2010) Cross-species binding analyses of mouse and human neonatal Fc receptor show dramatic differences in immunoglobulin G and albumin binding J Biol Chem, 285(7), 4826-4836 83 Bộ mơn Hóa sinh (2013), Hóa sinh lâm sàng, Trường đại học Y Hà Nội, Nhà xuất Y học, Hà Nội 84 Rana SV, Pal R, Vaiphei K, et al (2015) Garlic hepatotoxicity: safe dose of garlic Trop Gastroenterol, 27(1), 26-30 85 Qi L, Song Y, Wang W, et al (2010) Comparison of immunosuppression induced by different doses of cyclophosphamide in normal mice Wei Sheng Yan Jiu, 39(3), 313-5, 325 86 Gong Y, Wu J and Shi-Tong Li (2015) Immuno-enhancement effects of Lycium ruthenicum Murr polysaccharide on cyclophosphamide-induced immunosuppression in mice Int J Clin Exp Med, 8(11), 20631–20637 87 Nguyễn Thị Vinh Hà, Phạm Huy Quyến, Phan Thị Phi Phi (1994) Về mơ hình gây suy giảm miễn dịch thực nghiệm Kỷ yếu cơng trình nghiên cứu khoa học, 5, 16-17 88 Phạm Thủy Phương, Trương Việt Bình, Phạm Thị Vân Anh cộng (2014) Nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch Hồi xuân hoàn chuột nhắt trắng bị suy giảm miễn dịch cyclophosphamid Tạp chí dược học, 54 (461), 25-30 89 Mahabady M and Varzi H and Shi-Tong Li (2011) Prophylactic effects of levamisole and vitamin E on phenobarbital-induced cleft palate and spina bifida in rat embryos Iran J Pharm Res, 10(1), 135–140 90 Gupta M (2016) Levamisole: A multi-faceted drug in dermatology Indian J Dermatol Venereol Leprol, 82(2), 230-236 91 Patnaik S, Balderia P, Vanchhawng L, et al (2015) Levamisole: Is levamisoleinduced vasculitis a relegated diagnostic possibility? A case report and review of literature Am J Case Rep, 16, 658-662 92 L-Y Chen, Y-L Lin and B-L Chiang (2008) Levamisole enhances immune response by affecting the activation and maturation of human monocytederived dendritic cells Clin Exp Immunol, 151(1), 171-181 93 Phạm Thủy Phương, Trương Việt Bình, Phạm Thị Vân Anh cộng (2014) Nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch Hồi xn hồn mơ hình gây suy giảm miễn dịch cyclophosphamid Tạp chí Dược học, 54(461), 25-30 94 Tamura T and Fujiwara K (1979) IgM and IgG response to sheep red blood cells in mouse hepatitis virus-infected nude mice Microbiol Immunol, 23(3), 177-183 95 Phạm Thủy Phương, Trương Việt Bình, Phạm Thị Vân Anh cộng (2014) Nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch Hồi xn hồn mơ hình gây suy giảm miễn dịch cyclophosphamid Tạp chí Dược học, 54(461), 25-30 96 Iyer S, HogenEsch H and Hem SL (2003) Relationship between the degree of antigen adsorption to aluminum hydroxide adjuvant in interstitial fluid and antibody production Vaccine 21, 1219–1223 97 Morefield GL, Jianga D, Romero-Mendez IZ, et al (2005) Effect of phosphorylation of ovalbumin on adsorption by aluminum-containing adjuvants and elution upon exposure to interstitial fluid Vaccine 23, 1502– 1506 98 Morefield GL, Jianga D, Romero-Mendez IZ, et al (2005) Effect of phosphorylation of ovalbumin on adsorption by aluminum-containing adjuvants and elution upon exposure to interstitial fluid Vaccine 23, 1502– 1506 99 Cavalcanti YV1, Brelaz MC, Neves JK, et al (2012) Role of TNF-alpha, IFNgamma, and IL-10 in the development of pulmonary tuberculosis Pulm Med, 1-10 100 Cavalcanti YV1, Brelaz MC, Neves JK, et al (2012) Role of TNF-alpha, IFNgamma, and IL-10 in the development of pulmonary tuberculosis Pulm Med, 1-10 101 Ohtani T, Nakamura T, Toda K, et al (2006) Cyclophosphamide enhances TNF-a-induced apoptotic cell death in murine vascular endothelial cell FEBS Lett, 580(6), 1597-600 102 Ho CY, Weng CJ, Jhang JJ, et al (2014) Diallyl sulfide as a potential dietary agent to reduce TNF-α- and histamine-induced proinflammatory responses in A7r5 cells Mol Nutr Food Res, 58(5), 1069-1078 103 Lamm DL1 and Riggs DR (2001) Enhanced immunocompetence by garlic: role in bladder cancer and other malignancies J Nutr, 131(3s), 1067S-1070S 104 Kuttan G (2000) Immunomodulatory effect of some naturally occuring sulphur-containing compounds J Ethnopharmacol, 72(1-2), 93-99 105 Marcel Jenny, Ninfa R Pedersen, Budi J Hidayat, et al (2010) Bovine colostrum modulates immune activation cascades in human peripheral blood mononuclear cells in vitro, New Microbiologica, 33, 129-135 106 Walter L Hurley and Peter K Theil (2011) Perspectives on immunoglobulins in colostrum and Milk Nutrients, 3(4), 442-474 107 Kelly GS (2003) Bovine colostrums: a review of clinical uses Alternative Medicine Review, 8(4), 378-394 108 Lidia Elfstrand and Claes-Henrik Florén (2010) Management of chronic diarrhea in HIV-infected patients: current treatment options, challenges and future directions HIV AIDS (Auckl), 2, 219-224 109 Legrand D and Mazurier J A (2010) A critical review of the roles of host lactoferrin in immunity, Biometals, 23(3), 365-376 110 Legrand D, Elass E, Pierce A, et al (2004) Lactoferrin and host defence: an overview of its immuno-modulating and anti-inflammatory properties, Biometals, 17(3), 225-229 111 Biswas P, Vecchi A, Mantegani P, et al (2007) Immunomodulatory effects of bovine colostrum in human peripheral blood mononuclear cells New Microbiologica, 30(4), 447-454 112 Sun HY, Liu BB, Hu JY, et al (2016) Novel cycloartane triterpenoid from Cimicifuga foetida (Sheng ma) induces mitochondrial apoptosis via inhibiting Raf/MEK/ERK pathway and Akt phosphorylation in human breast carcinoma MCF-7 cells Chin Med, 1-11 113 Dong-Yi He and Sheng-Ming Dai (2011) Anti-Inflammatory and Immunomodulatory Effects of Paeonia Lactiflora Pall., a Traditional Chinese Herbal Medicine Front Pharmacol, 2(10), 1-5 114 Shin EM, Zhou HY, Guo LY, et al (2008) Anti-inflammatory effects of glycyrol isolated from Glycyrrhiza uralensis in LPS-stimulated RAW264.7 macrophages Int Immunopharmacol, 8(11), 1524-1532 115 Ma J, Cheng G, Li D, et al (2002) The effects of Radix Puerariae decoction on levels of antibody and interleukin-2 in mice Zhong Yao Cai, 25(10), 731732 116 Yi-ping Guo, Li-gen Lin and Yi-tao Wang (2015) Chemistry and pharmacology of the herb pair Flos Lonicerae japonicae-Forsythiae fructus Chin Med, 10-16 117 Shiow-Yunn Sheu, Yi-Wen Hong, Jui-Sheng Sun, et al (2015) Radix Scrophulariae extracts (harpagoside) suppresses hypoxia-induced microglial activation and neurotoxicity BMC Complement Altern Med, 15-324 118 Kang HS, Lee JY, Kim CJ (2008) Anti-inflammatory activity of arctigenin from Forsythiae Fructus J Ethnopharmacol, 116(2), 305-312 ... độc tính tác dụng phối hợp nhiều thành phần chế phẩm Kovir [17] Vì vậy, chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài Nghiên cứu độc tính tác dụng kích thích miễn dịch viên nang Kovir động vật thực nghiệm ... Đối tượng nghiên cứu 32 2.3 Phương pháp nghiên cứu 32 2.3.1 Nghiên cứu độc tính viên nang Kovir 32 2.3.2 Nghiên cứu tác dụng kích thích miễn dịch viên nang Kovir mơ hình... mục tiêu sau: Đánh giá độc tính cấp độc tính bán trường diễn viên nang Kovir thực nghiệm Đánh giá tác dụng kích thích miễn dịch viên nang Kovir động vật bị gây suy giảm miễn dịch cyclophosphamid