Nghiên cứu so sánh khả năng giải phóng thuốc của vật liệu cellulose nạp Berberine Hydrochloride tạo ra từ Gluconacetobacter xylinus nuôi cấy trong một số môi trường_2

Tài liu lun s phm of 63 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH – KTNN ===o0o=== TRẦN THỊ THU YẾN NGHIÊN CỨU SO SÁNH KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP BERBERINE HYDROCHLORIDE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI CẤY TRONG MỘT SỐ MƠI TRƯỜNG KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học người động vật HÀ NỘI, 5/2019 Footer Page of 63 Tài liu lun s phm of 63 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH – KTNN ===o0o=== TRẦN THỊ THU YẾN NGHIÊN CỨU SO SÁNH KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP BERBERINE HYDROCHLORIDE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI CẤY TRONG MỘT SỐ MƠI TRƯỜNG KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chun ngành: Sinh lý học người động vật Người hướng dẫn khoa học TS CAO BÁ CƯỜNG HÀ NỘI, 5/2019 Footer Page of 63 Tài liu lun s phm of 63 LỜI CẢM ƠN Thực tế cho thấy, thành công gắn liền với hỗ trợ giúp đỡ người xung quanh giúp đỡ hay nhiều, trực tiếp hay gián tiếp Trong thời gian làm khóa luận vừa qua em nhận bảo, giúp đỡ, quan tâm thầy cơ, gia đình bạn bè Với lòng biết ơn vơ sâu sắc, cho phép em gửi lời cảm ơn chân thành tới TS Cao Bá Cường, người tận tình dìu dắt, bảo, giúp đỡ tạo điều kiện cho em để em thực hoàn thành tốt khóa luận tốt nghiệp Tiếp theo, em xin cảm ơn Ban Giám hiệu Trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2, Khoa Sinh – KTNN, Viện NCKH & ƯD, Phòng thí nghiệm sinh lý người động vật, thầy, cô khoa Sinh – KTNN tạo điều kiện tốt để em hồn thành khóa luận Cuối cùng, em xin chân thành cảm ơn giúp đỡ, quan tâm, động viên bạn bè, gia đình suốt q trình hồn thành khóa luận Hà Nội, ngày 20 tháng năm 2019 Sinh viên Trần Thị Thu Yến Footer Page of 63 Tài liu lun s phm of 63 LỜI CAM ĐOAN Trong q trình thực khóa luận tốt nghiệp mình, tơi xin cam đoan: Đề tài tơi khơng chép tài liệu có sẵn Đây cơng trình thân tơi nghiên cứu thực tiễn Kết khóa luận đảm bảo tính xác trung thực Hà Nội, ngày 20 tháng năm 2019 Sinh viên Trần Thị Thu Yến Footer Page of 63 Tài liu lun s phm of 63 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Footer Page of 63 Từ viết tắt Từ đầy đủ G xylinus Gluconacetobacter xylinus BH Berberine Hydrochloride VLC Vật liệu cellulose ĐHSP Đại học Sư phạm MTC Môi trường chuẩn MTD Môi trường dừa MTG Môi trường gạo NCKH & ƯD Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng OD Optical density UV – vis Ultraviolet visible Tài liu lun s phm of 63 MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Đối tượng phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn NỘI DUNG CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đặc điểm, tính chất ứng dụng vật liệu cellulose 1.1.1.Đặc điểm cấu trúc màng cenllulose vi khuẩn 1.1.2 Tính chất vật liệu cellulose 1.1.3 Ứng dụng vật liệu cellulose 1.2 Giới thiệu thuốc Berberine Hydrochloride 1.2.1 Nguồn gốc 1.2.2 Cấu trúc 1.2.3 Tác dụng lý ứng dụng 1.2.4 Chỉ định chống định thuốc Berberine Hydrochloride 1.3 Tình hình nghiên cứu giới Việt Nam 1.3.1 Tình hình nghiên cứu thuốc Berberine Hydrochloride 1.3.2 Tình hình nghiên cứu0.3 vật liệu cellulose Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 Vật liệu nghiên cứu 11 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 11 2.1.2 Nội dung nghiên cứu 11 Footer Page of 63 Tài liu lun s phm of 63 2.1.3 Thiết bị dụng cụ 11 2.1.4 Nguyên liệu – hóa chất 12 2.1.5 Môi trường lên men tạo vật liệu cellulose 12 2.2 Phương pháp nghiên cứu 13 2.2.1 Phương pháp lên men thu vật liệu cellulose từ số môi trường 13 2.2.2 Phương pháp xử lý VLC trước hấp thụ thuốc 13 2.2.3 Đánh giá độ tinh khiết màng 14 2.2.4 Phương pháp xác định đường chuẩn 15 2.2.5 Phương pháp xác định lượng thuốc hấp thụ vào vật liệu cellulose 16 2.2.6 Phương pháp qua môi trường đệm Phosphate buffered saline (PBS) 17 2.2.7 Phương pháp xác định lượng thuốc giải phóng thơng qua hệ thống thiết kế 17 2.2.8 Phương pháp xử lý thống kê 18 2.2.9 Địa điểm nghiên cứu 19 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 20 3.1 Kết tạo màng xử lý VLC từ môi trường khác 20 3.1.1 Thu VLC từ môi trường lên men 20 3.1.2 Quá trình xử lý VLC trước hấp thu thuốc 21 3.1.3 Kiểm tra độ tinh khiết VLC 21 3.2 Khảo sát khả hấp thụ thuốc Berberine Hydrochloride VLC môi trường khác 22 3.3 Tỷ lệ giải phóng thuốc VLC 23 3.3.1 Tỷ lệ giải phóng thuốc màng chuẩn 23 3.3.2 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng nước dừa già 25 Footer Page of 63 Tài liu lun s phm of 63 3.3.3 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng nước vo gạo 27 3.3.4 So sánh tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác 24 pH = 29 3.3.5 So sánh tỷ lệ giải phóng thuốc VLC độ dày khác 24 pH = 6,8 30 3.2.6 So sánh tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác 24 pH = 12 31 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO 34 Footer Page of 63 Tài liu lun s phm of 63 DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Thành phần môi trường lên men tạo VLC 12 Bảng 2.2 Giá trị mật độ quang (OD) dung dịch Berberine Hydrochloride nồng độ (mg/ml) khác (n=3) 15 Bảng 3.1 Lượng thuốc Berberine Hydrochloride hấp thu vào VLC môi trường với độ dày khác thời điểm 22 Bảng 3.2 Hiệu suất hấp thu thuốc Berberine Hydrochloride vào VLC khác với độ dày màng khác thời điểm 23 Bảng 3.3 Tỷ lệ giải phóng thuốc Berberine Hydrochloride (%) từ màng chuẩn môi trường pH khác (n = 3) 23 Bảng 3.4 Tỷ lệ giải phóng BH màng nước dừa già (n = 3) 25 Bảng 3.5 Tỷ lệ giải phóng BH (%) từ màng gạo (n = 3) 27 Bảng 3.6 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác 24 với pH = 29 Bảng 3.7 Tỷ lệ giải phóng thuốc VLC độ dày khác 24 với pH = 6,8 30 Bảng 3.8 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác thời điểm 24 pH = 12 31 Footer Page of 63 Tài liu lun s phm 10 of 63 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc hóa học vật liệu cellulose Hình 1.2 Cơng thức cấu tạo Berberine Hình 1.4 Công thức cấu tạo Berberine Hydrochloride Hình 2.1 Sơ đồ tinh chế thu VLC 14 Hình 2.2 Đồ thị biểu diễn đường chuẩn Berberine Hydrochloride 16 Hình 3.3 VLC lên men từ mơi trường nước vo gạo 21 Hình 3.4 VLC tinh thể thu 21 Hình 3.5 Kết kiểm tra độ tinh khiết VLC 22 Hình 3.6 Tỷ lệ giải phóng thuốc Berberine Hydrochloride từ màng chuẩn với độ dày 0,3 cm 0,5 cm 24 Hình 3.7 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng dừa với độ dày 0,3 cm 0,5 cm 26 Hình 3.8 Tỷ lệ thuốc BH giải phóng từ màng gạo với độ dày 0,3 cm 0,5 cm 28 Hình 3.11 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH vật liệu cellulose độ dày khác thời điểm 24 pH = 29 Hình 3.10 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác 24 pH = 6,8 30 Hình 3.11 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác thời điểm 24 pH = 12 31 Footer Page 10 of 63 Tài liu lun s phm 32 of 63 Hình 3.5 Kết kiểm tra độ tinh khiết VLC 3.2 Khảo sát khả hấp thụ thuốc Berberine Hydrochloride VLC môi trường khác Màng tinh khiết sau tinh chế tiến hành loại bỏ nước 50% Sau ép nước ta tiến hành hấp thụ thuốc, màng cho vào bình chứa 100ml dung dịch Berberine Hydrochloride 10% đặt vào máy lắc tốc độ 180 vòng/phút Và tiến hành lấy mẫu giờ, 1,5 giờ, Dùng máy quang phổ UV – 2045 đo mẫu thu để xác định lượng thuốc hấp thu vào màng Thí nghiệm lặp lại lần từ xác định giá trị OD theo cơng thức (01) (02) Bảng 3.1 Lượng thuốc Berberine Hydrochloride hấp thu vào VLC môi trường với độ dày khác thời điểm Thời gian (giờ) mht màng chuẩn 𝑚ℎ𝑡 màng dừa 0,3 cm 0,5 cm 0,3 cm 0,5 cm 0,3 cm 0,5 cm 2,8129 ± 0,0018 1,4270 ± 0,0026 1,0882 ± 0,0039 1,0749 ± 0,0083 1,0419 ± 0,0026 1,0045 ± 0,0052 22 Footer Page 32 of 63 𝑚ℎ𝑡 màng gạo Tài liu lun s phm 33 of 63 Bảng 3.2 Hiệu suất hấp thu thuốc Berberine Hydrochloride vào VLC khác với độ dày màng khác thời điểm Thời gian (giờ) EE (%) màng chuẩn 0,3 cm 0,5 cm 28,1290 14,2703 ± 0,018 ± 0,0260 EE (%) màng dừa EE (%) màng gạo 0,3 cm 0,3 cm 0,5 cm 10,4189 10,0446 ± ± 0,0258 0,0522 0,5 cm 10,8816 ± 10,703 ± 0,0394 0,0115 3.3 Tỷ lệ giải phóng thuốc VLC 3.3.1 Tỷ lệ giải phóng thuốc màng chuẩn Tỷ lệ thuốc Berberine Hydrochloride giải phóng khỏi màng chuẩn dày 0,3 cm 0,5 cm khoảng thời gian khác pH khác thể bảng 3.3 hình 3.6 Bảng 3.3 Tỷ lệ giải phóng thuốc Berberine Hydrochloride (%) từ màng chuẩn môi trường pH khác (n = 3) Độ pH dày màng (cm) 0,3 Tỷ lệ BH giải phóng (%) 0,5 giờ 4giờ giờ 12 24 28,39 43,26 55,34 58,87 57,43 53,16 53,67 52,85± ± 1,23 ±2,18 ± 1.15 ± 1,19 ± 0.58 ± 1.31 ±2,56 1,78 18,52 31,26 40,31 48,73 39,56 34,78 33,12 32,1 ±0,25 ±1,78 ±0,33 ±0,81 ±0,39 ±1,93 ±0,47 ±1,46 26,31 ± 1,21 31,69 41,96 ±1,40 ±1,52 45,12 37,01 32,78 ±1,49 ±2,61 31,04 31,60 ± 2,33 ±0,94 12,75 22,98 26,90 31,9 22,93 18,9 18,84 15,91 ± 1,02 ±2,32 ±1,22 ±1,96 ±1,43 ±1,22 ±1,12 ±0,88 0,5 0,3 ±1,11 12 0,5 23 Footer Page 33 of 63 Tài liu lun s phm 34 of 63 0,3 23.43 ± 1,35 27,39 33,68 ±1.75 ±2,86 37,62 ±2,53 27,74 26,83 22,89 ± 0,95 ± 3,85 ±2,51 21,92 11,03 14,21 28,34 34,38 21,43 19,72 17,64 16,36 ±1,81 ±1,37 ±0,99 ±0,35 ±1,02 ±0,46 ±1,26 ±1,49 ± 2,72 6,8 0,5 Hình 3.6 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH từ màng chuẩn với độ dày 0,3 cm 0,5 cm Dựa vào sơ đồ 3.6 ta có nhận xét: - Tỷ lệ giải phóng thuốc tăng nhanh khoảng – đầu tiên, sau lượng thuốc Berberine Hydrochloride giải phóng giảm dần, khơng đáng kể Tỷ lệ giải phóng BH từ màng chuẩn (%) - Qua kiểm định thống kê công cụ Microsoft Office Excel 2010 70 60 50 40 30 20 10 0,5 12 24 pH2 0,3cm pH2 0,5cm Thời gian (giờ) pH6,8 0,3cm ph6,8 0,5cm pH12 0,3cm pH 12 0,5cm thu p < 0,05 có ý nghĩa sai khác tỷ lệ giải phóng thuốc màng 0,3 cm 0,5 cm có ý nghĩa thống kê - Mơi trường đệm pH = 2, khả giải phóng thuốc VLC cao mơi trường có pH = 6,8, pH= 12 - Với pH = 2, tỷ lệ giải phóng thuốc cao màng 0,3 cm 0,5 cm thời điểm 58,87% ± 1,19 48,73% ± 0,81 24 Footer Page 34 of 63 Tài liu lun s phm 35 of 63 - Với pH = 6,8, tỷ lệ giải phóng thuốc cao màng 0,3 cm 0,5 cm thời điểm 37,62% ± 2,53 34,38% ± 0,35 - Với pH = 12, tỷ lệ giải phóng thuốc cao màng 0,3 cm 0,5 cm thời điểm 45,12% ± 1,49 31,9% ±1,96 Như vậy, kết luận môi trường pH = 2, pH = 6,8, pH= 12 VLC 0,5 cm có khả giải phóng BH VLC 0,3 cm 3.3.2 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng nước dừa già Tỷ lệ thuốc BH giải phóng khỏi màng nước dừa già dày 0,3 cm 0,5 cm pH khác khoảng thời gian khác thể bảng 3.4 hình 3.7 Bảng 3.4 Tỷ lệ giải phóng BH màng nước dừa già (n = 3) Độ pH Tỷ lệ thuốc BH giải phóng (%) dày màng (cm) 0,3 12 0,5 giờ giờ giờ 12 24 14,8 20,48 34,7 24,2 11,5 10,62 9,74 7,61 ±0,89 ±1,34 ±0,2 ±0,26 ±0,95 ±1,81 ±0,99 9,09 14,5 11,6 9,22 ±0,269 6,74 0,5 15,3 10,28 8,88 ± 0,79 ±0,93 ±0,54 ±0,76 ±0,82 ±0,74 ±0,34 ± 0,45 18,28 ± 0,65 42,99 45,91 50,34 42,8 36,85 36,19 ±0,78 ±0,37 ±0,68 ±0,32 ±0,22 ±0,13 12,36 15,09 29,19 36,71 ± 1,02 ±1,07 ±0,86 ±0,54 ±1,08 ±0,23 ±1,23 ± 0,93 0,3 35,38 ±1,5 0,5 6,8 19,2 32,44 46,11 51,43 ±0,55 ±0,66 13,63 16,1 ±1,03 0,3 22,2 43,9 21,43 20,56 37,2 36,4 ±0,4 ±0,67 ±0,23 ±0,33 ±0,23 ±1,6 30,2 37,8 21,6 20,56 ±1,04 ±0,68 ±0,55 ±1,09 ±0,23 ±1,32 ±1,21 23,3 37,58 19,55 22,42 0,5 25 Footer Page 35 of 63 Tỷ lệ giải phóng BH từ màng dừa (%) Tài liu lun s phm 36 of 63 60 50 40 30 20 10 0.5 12 24 thời gian (giờ) pH2 0,3cm pH2 0,5cm pH6,8 0,3cm pH6,8 0,5cm pH12 0,3cm pH12 0,5cm Hình 3.7 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng dừa với độ dày 0,3 cm 0,5 cm Qua quan sát bảng 3.4 hình 3.7 ta có nhận xét Từ 0,5 đến đầu, tỷ lệ BH giải phóng khỏi màng tăng nhanh Nhưng sau giờ, lượng thuốc giải phóng không đáng kể Qua kiểm định thống kê công cụ Microsoft Office Excel 2010 thu p < 0,05 có ý nghĩa sai khác tỷ lệ giải phóng thuốc màng 0,3 cm 0,5 cm có ý nghĩa thống kê Mơi trường đệm pH = 6,8, khả giải phóng thuốc VLC cao mơi trường có pH = 12, pH= Với pH = 6,8, tỷ lệ giải phóng thuốc VLC giá trị lớn giờ, màng 0,3 cm đạt tỷ lệ 51,43% ± 0,67, màng 0,5 cm đạt tỷ lệ 37,8% ± 0,55 Với pH = 2, tỷ lệ giải phóng thuốc VLC giá trị lớn giờ, màng 0,3 cm đạt tỷ lệ 50,34% ± 0,68, màng 0,5 cm đạt tỷ lệ 36,71% ± 0,54 26 Footer Page 36 of 63 Tài liu lun s phm 37 of 63 Với pH = 12, tỷ lệ giải phóng thuốc đạt giá trị lớn thời điểm giờ, màng 0,3 cm đạt tỷ lệ 34,7% ± 1,34, màng 0,5 cm đạt tỷ lệ 15,3% ± 0,54 Vậy kết luận môi trường pH = 12, pH = 6,8, pH = 2, VLC cm có khả giải phóng thấp VLC 0,3 cm 3.3.3 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng nước vo gạo Trong khoảng thời gian khác nhau, tỷ lệ BH giải phóng khỏi màng dày 0,3 cm 0,5 cm pH khác thể bảng 3.5 hình 3.8 Bảng 3.5 Tỷ lệ giải phóng BH (%) từ màng gạo (n = 3) Độ dày pH màng (cm) 0,3 Tỷ lệ thuốc BH giải phóng (%) 0,5 giờ giờ 12 24 18,0± 31,5± 34,3± 43,9± 49,3± 43,3± 35,99± 36,5± 1,004 2,067 1,064 1,120 1,214 1,871 1,956 1,542 25,8± 28,0± 34 ± 2,623 2,76 1,056 37,5± 1,743 39,4± 3,791 37,5± 1,086 32,23± 3,064 20,1± 2,643 27,6± 28,9± 29,1± 30,1± 32,6± 25,4± 22,23± 21,9± 2,426 2,746 1,739 2,895 1,002 2,541 1,934 1,542 20,1± 22,4± 22,0± 1,334 0,958 1,271 22,5± 2,267 26,5± 2,983 20,6± 2,429 20,6± 1,867 20,5± 1.845 22,0± 35,7± 38,6± 47,8± 53,8± 47,8± 40,03± 36,0± 1,008 2,101 1,102 1,160 1,2 1,911 1,990 1,992 23,8± 32,0± 38,5± 3,068 3,190 1,098 43,9± 1,783 40,5± 3,882 32,0± 1,131 26,63± 3,109 25,8± 2,687 giờ 0,5 0,3 12 0,5 0,3 6,8 0,5 27 Footer Page 37 of 63 Tỷ lệ giải phóng BH từ màng gạo (%) Tài liu lun s phm 38 of 63 60 50 40 30 20 10 0,5 12 24 pH2 0,3cm pH2 0,5cm Thời gian (giờ) pH6,8 0,3cm pH6,8 0,5cm pH12 0,3cm pH12 0,5cm Hình 3.8 Tỷ lệ thuốc BH giải phóng từ màng gạo với độ dày 0,3 cm 0,5 cm Từ số liệu bảng 3.5 hình 3.8 thấy được: Trong lượng thuốc Berberine Hydrochloride giải phóng nhiều Sau đó, lượng thuốc giải phóng giảm dần Qua kiểm định thống kê công cụ Microsoft Office Excel 2010 thu p < 0,05 có ý nghĩa sai khác tỷ lệ giải phóng thuốc màng 0,3 cm 0,5 cm có ý nghĩa thống kê Trong môi trường khảo sát, môi trường đệm pH = 6,8 tỷ lệ màng giải phóng thuốc cao môi trường pH = 2, pH= 12 Với pH = 2, tỷ lệ giải phóng thuốc VLC 0,3 cm đạt giá trị lớn giờ, đạt 49,3% ± 1,214 màng dày 0,5 cm đạt giá trị lớn giờ, đạt 39,4% ± 3,791 Với pH = 12, tỷ lệ giải phóng thuốc BH đạt giá trị lớn giờ, màng 0,3 cm đạt tỷ lệ 32,6% ± 1,002, VLC 0,5 cm đạt tỷ lệ 26,5% ± 2,983 Với pH = 6,8, tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC 0,3 cm đạt giá trị lớn giờ, đạt 53,8 % ± 1,2, màng 0,5 cm đạt giá trị lớn giờ, đạt 43,91% ± 1,783 28 Footer Page 38 of 63 Tài liu lun s phm 39 of 63 3.3.4 So sánh tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác 24 pH = Tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác thể bảng 3.6 hình 3.9 Bảng 3.6 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác 24 với pH = Thời gian (giờ) Màng chuẩn (%) Màng dừa (%) Màng gạo (%) 0,3 cm 0,5 cm 0,3 cm 0,5 cm 0,3 cm 0,5 cm 52,85 32,1 35,38 19,55 36,56 20,11 ± 1,78 ± 1,46 ± 1,5 ± 0,93 ± 1,542 ± 2,643 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH từ VLC(%) 24 60 50 40 30 20 10 Màng chuẩn Màng dừa Màng gạo Các loại màng 0,3 cm 0,5 cm Hình 3.11 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH vật liệu cellulose độ dày khác thời điểm 24 pH = Nhận xét: qua bảng số liệu 3.6 hình 3.9, nhận thấy tỷ lệ giải phóng thuốc màng 0,5 cm thấp 0,3 cm Với môi trường đệm pH = 2, tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng dừa đạt 35,38% thấp so với màng gạo đạt 36,56% thấp so với màng chuẩn đạt 52,85% độ dày màng 0,3 cm Đối với màng có độ dày 0,5 29 Footer Page 39 of 63 Tài liu lun s phm 40 of 63 cm, tỷ lệ giải phóng thuốc màng chuẩn đạt 32.1% cao màng gạo đạt 20,11% cao so với màng dừa đạt 19,55% Như vậy, tỷ lệ giải phóng thuốc màng chuẩn nhiều loại màng độ dày khác Điều chứng tỏ rằng, độ dày màng khác nhau, đặc tính khác khả giải phóng thuốc khác 3.3.5 So sánh tỷ lệ giải phóng thuốc VLC độ dày khác 24 pH = 6,8 Tỷ lệ giải phóng thuốc VLC độ dày khác 24 pH = 6,8 Bảng 3.7 Tỷ lệ giải phóng thuốc VLC độ dày khác 24 với pH = 6,8 Thời gian (giờ) Màng chuẩn (%) Màng dừa (%) Màng gạo (%) 0,3 cm 0,5 cm 0,3 cm 0,5 cm 0,3 cm 0,5 cm 21,92 16,36 36,4 20,56 36,01 25,85 ±2,72 ±1,49 ±1,6 ±1,21 ±1,99 ±2,68 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH loại VLC (%) 24 40 30 20 10 Màng chuẩn Màng dừa Màng gạo Các loại màng 0,3 cm 0,5 cm Hình 3.10 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác 24 pH = 6,8 30 Footer Page 40 of 63 Tài liu lun s phm 41 of 63 Qua bảng số liệu 3.8 hình 3.10, ta nhận thấy tỷ lệ giải phóng thuốc màng 0,5 cm màng 0,3 cm Với mơi trường đệm pH = 6,8, tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng dừa 36,4% cao so với màng gạo đạt 36,01% cao so với màng chuẩn đạt 21,92% độ dày màng 0,3 cm Đối với màng có độ dày 0,5 cm, tỷ lệ giải phóng thuốc màng gạo 25.85% cao so với màng dừa 20.56% cao so với màng chuẩn 16,36% 3.2.6 So sánh tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác 24 pH = 12 Bảng 3.8 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác thời điểm 24 pH = 12 Thời gian (giờ) Tỷ lệ giải phóng thuốc BH loại VLC (%) 24 Màng chuẩn (%) Màng dừa (%) Màng gạo (%) 0,3 cm 0,5 cm 0,3 cm 0,5 cm 0,3 cm 0,5 cm 32,78 ±1,11 15,91 7,61 ± 0,99 9,22 ± 0,45 37,3 20,5 ± 1.845 ± 0,88 ±2,643 40 35 30 25 20 15 10 Màng chuẩn Màng dừa Màng gạo Các loại màng 0,3 cm 0,5 cm Hình 3.11 Tỷ lệ giải phóng thuốc BH VLC độ dày khác thời điểm 24 pH = 12 31 Footer Page 41 of 63 Tài liu lun s phm 42 of 63 Qua quan sát bảng 3.6 hình 3.10, tỷ lệ giải phóng thuốc màng 0,5 cm màng 0,3 cm Tại pH = 12, tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng dừa đạt 9,21% thấp so với màng chuẩn 32,87% thấp so với màng gạo đạt 37,3% xét độ dày màng 0,3 cm Đối với màng có độ dày 0,5 cm, tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng dừa đạt 7,61% thấp so với màng chuẩn đạt 15,91% thấp so với màng gạo đạt 20,5% Như vậy, độ dày khác tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng gạo nhiều Điều chứng tỏ rằng, độ dày màng khác nhau, đặc tính khác khả giải phóng thuốc khác Từ bảng 3.4 đến bảng 3.9 hình 3.6 đến 3.11 ta thấy: Đối với pH = 2, tỷ lệ giải phóng thuốc BH màng 0,5 cm màng 0,3 cm màng chuẩn giải phóng BH nhiều so với màng dừa màng gạo Đối với pH = 12, pH = 6,8, tỷ lệ giải phóng thuốc màng 0,5 cm màng 0,3 cm màng gạo giải phóng nhiều so với màng chuẩn màng dừa Do vậy, kết luận đưa môi trường pH = 12, pH = 6,8, pH = VLC 0,3 cm có khả giải phóng thuốc BH cao VLC 0,5 cm 32 Footer Page 42 of 63 Tài liu lun s phm 43 of 63 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Từ q trình nghiên cứu, chúng tơi thu kết sau: - Thu VLC tinh khiết với độ dày 0,3 cm 0,5 cm - Môi trường pH = 2, màng chuẩn có tỷ lệ giải phóng thuốc BH cao màng gạo màng dừa - Môi trường pH = 6,8, pH = 12, màng gạo có tỷ lệ giải phóng thuốc cao màng chuẩn màng dừa - Màng có độ dày 0,3 cm có khả giải phóng thuốc cao màng có độ dày 0,5 cm Có thể rút màng có độ dày lớn khả giải phóng thuốc nhỏ Kiến nghị Tiếp tục khảo sát thêm khả hấp thu giải phóng thuốc VLC tạo chủng G xylinus từ loại môi trường tự nhiên khác như: dịch hoa quả, nước chè xanh, nước mía, nước dứa,… để mở rộng nguồn nguyên liệu 33 Footer Page 43 of 63 Tài liu lun s phm 44 of 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Bộ Y tế (2002), Dược điển Việt Nam III, Nhà xuất Y học Hà Nội, tr 33 - 35, 178 - 179 phụ lục (PL - 75, 76) Đặng Thị Hồng Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu số đặc tính Sinh học vi khuẩn Acetobacter xylinum chế tạp màng sinh học (VLC) Luận án thạc sỹ Sinh học Đại học Sư phạm Hà Nội, 2007 Đinh Thị Kim Nhung, Nguyễn Thị Thùy Vân, Trần Như Quỳnh (2012), “Nghiên cứu vi khuẩn từ Acetobacter xylinum tạo màng Bacterial Cellulose ứng dụng điều trị bỏng”, Tạp chí Khoa học Cơng Nghệ, 50(4), tr.453-462 Đinh Thị Liên, Vũ Thanh Thảo, Trần Cát Đông, Trần Thành Đạo, Khảo sát tác động kháng staphylococcus aureus phối hợp berberin kháng sinh β-lactam, y học TP Hồ Chí Minh, Tập 15, phụ số 1-2010, tr.437-442 Đỗ Tất Lợi (1999), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Xuất lần thứ VIII, Nhà xuất Y học, tr 195 Hồ Cảnh Mậu, Hoàng Văn Thêm, Nguyễn Thị Lan Hương, Nguyễn Văn Thuận, Nguyễn Cẩm Vân, Nguyễn Tuấn Quang, Nghiên cứu dịnh lượng Berberin chlorid “viên nén đại tràng 105” phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao, Tạp chí y – dược quân số 2-2015 Huỳnh Thị Ngọc Lan, Nguyễn Văn Thanh Nghiên cứu đặc tính màng vật liệu cellulose từ Acetobacter xylinum sử dụng làm màng trị bỏng Tạp chí Dược học số 361/2006, trang 18 - 20 Ngô Văn Thu (2011), “Bài giảng dược liệu”, tập I, Trường đại học Dược Hà Nội Nguyễn Đức Lương (2000), Công nghệ Vi sinh vật tập - - 3, Nhà xuất Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh 34 Footer Page 44 of 63 Tài liu lun s phm 45 of 63 10 Nguyễn Liêm, Chiết xuất Berberin áp lực nóng, Tạp chí Dược học, 1980, Bộ Y tế xuất bản, tr 10 11 Nguyễn Hoài Nam, Võ Phùng Nguyên, Trần Hùng, Tác động Berberin Palmatin trí nhớ hình ảnh khơng gian chuột nhắt, y học TP Hồ Chí Minh, tập 14, Phụ sản số 1-1010, tr 64-72 12 Nguyễn Thị Nguyệt Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinum cho màng Bacterial Cellulose làm mặt nạ dưỡng da Luận án thạc sỹ sinh học Đại học Sư phạm Hà Nội, 2008 13 Nguyễn Văn Hân, Nguyễn Văn Hải, 2017 Chiết xuất berberin từ vàng đắng nước vơi Tạp chí Dược học, 57(1) 14 Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, phương pháp nghiên cứu sinh lý học Thực vật - NXB ĐHQG Hà Nội 15 Phạm Thanh Kỳ cộng (1998), “Bài giảng dược liệu”, tập II, Trường đại học Dược Hà Nội 16 Viện dược liệu (2004), “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, tập I, tập II, Nhà xuất khoa học kỹ thuật 17 Vũ Thị Dương, Nguyễn Trọng điệp, Nguyễn Thị Thùy, Hoàng Văn Lương, Nghiên cứu bào chế viên nén Berberin giải phóng đích đại tràng, tạp chí y – dược đại học quân số 8-2010 Tài liệu tiếng anh 18 Almeida, I.F., et al Màng vật liệu cellulose hệ thống phân phối thuốc, 2013 19 Amin MCIM, Ahmad N, et al (2012), “Bacterial cellulose film coating as drug delivery system: physicochemical, thermal and drug release properties”, Sain Malaysiana, 41 (5), 561 - 20 Brown E Bacterial cellulose Themoplastic polymer nanocomposites, Master of sience in chemical engineering Washington state university, 2007 21 Huang L., Chen X., Nguyen Xuan Thanh, Tang H., Zhang L., Yang G (2013), “Nano-cellulose 3D-networks as controlled-release drug carriers”, 35 Footer Page 45 of 63 Tài liu lun s phm 46 of 63 Journal of Materials Chemistry B (Materials for biology and medicine), 1, pp 2976-2984 22 Jun Yin, Huili Xing, and Jianping Ye, Efficacy of Berberine in Patients with Type Diabetes, May 2009 23 Jun Yin, Jianping Ye, Weiping Jia Effects and mechanisms of Berberine in diabetes treatment, August 2012 24 Lina Fu, Yue Zhang, Chao Li, Zhihong Wu, Qi Zhuo, Xia Huang, Guixing Qui, Ping Zhou and Guang Yang skin tissue repair materials from bacterial cellulose by a multilayer fermantation method, 2012 25 Martindal 34 (2005), volume II, p 1659 26 Ryan Bradley, ND, MPH and Bill Walter, ND, Berberine in Diabetes, April 2012 27 Thesis Homles, Bacterial cellulose, Department of Chemical and process Engineering University of Canterbury Christchurch, New Zealand, 2004, p - 65 28 Trovatti E et al (2011), “Biocellulose membranes as supports for dermal release of lidocaine”, Biomacromolecules, 12, 4162 – 4168 29 Trovatti E et al (2012), “Bacterial cellulose membranes applied in topical and transdermal delivery of lidocaine hydrochloride and ibuprofen: in vitro diffusion studies”, Int J Pharm, 435 (1), 83 – 87 30 White, K K, et al (1989), "Changes in equine carpal joint synovial fluid in response to the injection of two local anesthetic agents " The Cornell veterinarian 79 1, pp 25 - 38 31 Young Kook Yang, Sang Hoon Park, Jung Wook Hwang, Yu Ryang Pyun, and Yu Sam Kim Cellulose production by Acetobacter xylinum BRC5 under agitated condition Journal of Fermentation and Bioengineering, 85 (3), 312 - 317 (1998) 36 Footer Page 46 of 63 ... ===o0o=== TRẦN THỊ THU YẾN NGHIÊN CỨU SO SÁNH KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP BERBERINE HYDROCHLORIDE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI CẤY TRONG MỘT SỐ MƠI TRƯỜNG KHĨA LUẬN... vi nghiên cứu - Đối tượng nghiên cứu: so sánh khả giải phóng thuốc Berberine Hydrochloride VLC lên men từ số môi trường - Vật liệu nghiên cứu: + Môi trường nuôi cấy vi khuẩn G xylinus tạo vật liệu. .. Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu Nghiên cứu so sánh khả giải phóng thuốc Berberine Hydrochloride vật liệu cellulose lên men từ ba môi