Nghiên cứu nhằm xác định liều tiêm và đường tiêm phù hợp của vaccine Ornitin triple trên gà Ta lai nuôi thịt, qua đánh giá hiệu giá kháng thể (HGKT) kháng vi khuẩn Ornithobacterium rhinotracheale (ORT) và phản ứng cục bộ tại vị trí tiêm trên gà sau khi tiêm vaccine. Nghiên cứu tiến hành trên 120 con gà Ta lai 5 tuần tuổi, với 3 liều tiêm vaccine là 0,0 ml (đối chứng), 0,25ml và 0,5ml bằng 2 đường tiêm là đường tiêm dưới da cổ (SC) và tiêm cơ ức (IM). Gà được lấy mẫu máu để xác định HGKT ORT và kiểm tra phản ứng sưng tại vị trí tiêm vaccine. Kết quả cho thấy HGKT kháng vi khuẩn ORT đạt hàm lượng trung bình 25745 (±5957) đến 26458 (±6798) vào 2 tuần sau khi tiêm vaccine và đến 13 tuần tuổi vẫn duy trì ở mức trên 24000 đơn vị titer IDEXX. Không có sự khác biệt về HGKT sau tiêm giữa 2 đường tiêm (SC, IM) và giữa 2 liều tiêm (0,25 ml, 0,5ml). Nghiên cứu cũng cho thấy với cùng một liều tiêm thì đường tiêm IM cho phản ứng sưng thấp hơn so với đường tiêm SC. Với đường tiêm SC thì liều cao hơn sẽ cho phản ứng sưng tại vị trí tiêm nhiều hơn. Như vậy, có thể sử dụng liều 0,25ml và đường tiêm IM để tối ưu việc tiêm phòng vaccine ORT cho gà Ta lai.
HIỆU GIÁ KHÁNG THỂ KHÁNG VI KHUẨN ORNITHOBACTERIUM RHINOTRACHEALE VÀ PHẢN ỨNG TẠI VỊ TRÍ TIÊM CỦA GÀ SAU KHI TIÊM VACCINE ORNITIN TRIPLE Ornithobacterium Rhinotracheale Antibody Titer And Reaction At Injection Site On Chicken Post Vaccination With Ornitin Triple Vaccine Bùi Ngọc Xuân Hà*, Nguyễn Trọng Tuấn, Hồ Đức Việt, Bùi Quang Trí, Cao Phước Uyên Trân, Lê Thị Kim Tuyến, Nguyễn Mạnh Hổ Quách Tuyết Anh BM Giống động vật, Khoa Chăn Nuôi – Thú Y, Trường Đại học Nơng Lâm Tp HCM TĨM TẮT THƠNG TIN Từ khóa Bệnh ORT Vaccine ORT Ornitin triple Titer IDEXX Gà Ta lai nuôi thịt Keywords ORT Disease Vaccine ORT Ornitin triple IDEXX titer Cross-breed colour broilers Tác giả liên hệ: Bùi Ngọc Xuân Hà 16112526.st @hcmuaf.edu.vn Nghiên cứu nhằm xác định liều tiêm đường tiêm phù hợp vaccine Ornitin triple gà Ta lai nuôi thịt, qua đánh giá hiệu giá kháng thể (HGKT) kháng vi khuẩn Ornithobacterium rhinotracheale (ORT) phản ứng cục vị trí tiêm gà sau tiêm vaccine Nghiên cứu tiến hành 120 gà Ta lai tuần tuổi, với liều tiêm vaccine 0,0 ml (đối chứng), 0,25ml 0,5ml đường tiêm đường tiêm da cổ (SC) tiêm ức (IM) Gà lấy mẫu máu để xác định HGKT ORT kiểm tra phản ứng sưng vị trí tiêm vaccine Kết cho thấy HGKT kháng vi khuẩn ORT đạt hàm lượng trung bình 25745 (±5957) đến 26458 (±6798) vào tuần sau tiêm vaccine đến 13 tuần tuổi trì mức 24000 đơn vị titer IDEXX Khơng có khác biệt HGKT sau tiêm đường tiêm (SC, IM) liều tiêm (0,25 ml, 0,5ml) Nghiên cứu cho thấy với liều tiêm đường tiêm IM cho phản ứng sưng thấp so với đường tiêm SC Với đường tiêm SC liều cao cho phản ứng sưng vị trí tiêm nhiều Như vậy, sử dụng liều 0,25ml đường tiêm IM để tối ưu việc tiêm phòng vaccine ORT cho gà Ta lai ABSTRACT The aim of this study was to determine the appropriate dose and administration route of Ornitin triple vaccine in cross-breed colour broilers by evaluating the antibody titer against Ornithobacterium rhinotracheale (ORT) and local reactions at injection sites on chickens after vaccination One hundred and twenty 5-week-old broilers were grouped into vaccine dose groups: 0,0ml (control group), 0,25ml and 0,5ml and with different administration routes: subcutaneous (SC) and intramuscular (IM) injection Blood samples were collected to determine the antibody titer and reactions at injection sites were scored The results showed that the average of ORT antibody titers reached 25745 (± 5957) to 26458 (± 6798) at weeks post vaccination and lasted above 24000 IDEXX titer up to 13 weeks of age No statistically significant difference was found between antibody titer of two administration routes (SC, IM) as well as vaccine doses (0,25ml, 0,5ml) The study found that after a single vaccination with the same injection dose, swelling reactions at sites of IM injection were less severe than those of SC With SC injection, higher dose would produce more severe swelling at injection site In conclusion, for optimal result, in cross-breed colored broilers in Vietnam, ORT vaccination is recommended to be given by single IM injection of 0,25ml of Ornitin Triple vaccine ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh đường hô hấp vấn đề nan giải chiếm tỉ lệ cao bệnh gia cầm Nguyên nhân gây bệnh hơ hấp gia cầm đa dạng, tác nhân vi sinh vật vi rút, vi khuẩn nấm tác nhân liên quan đến vấn đề quản lý trại Trong đó, vi khuẩn Ornithobacterium rhinotracheale (ORT) đóng vai trò quan trọng việc gây hội chứng phức hợp đường hô hấp, tỉ lệ tử vong cao thiệt hại kinh tế lớn cho ngành chăn nuôi gia cầm giới (Umali ctv., 2018) Vi khuẩn ORT có 18 kiểu serotypes (type A đến type R), serotype A phổ biến chiếm 94% (Chin ctv., 2008) Các chủng vi khuẩn ORT đề kháng từ 80% đến 100% kháng sinh thường dùng điều trị bệnh gia cầm ampicillin, ceftiofur, tylosin, spiramycin, lincomycin, tilmicosin, flumequine, enrofloxacin doxycycline (Devriese ctv., 2001) Với tình hình đó, phòng bệnh vaccine xem biện pháp đầy hứa hẹn Năm 2002, Cauwerts ctv thử nghiệm vaccine chống lại vi khuẩn ORT Bỉ cho kết tốt giảm tỉ lệ tử vong tăng suất sản xuất gà Schuijffel ctv (2005) chứng minh khả tạo miễn dịch bảo vệ chéo chống lại serotype khác vi khuẩn ORT Vaccine vi khuẩn thường gây phản ứng mạnh thể gia cầm, mức độ đáp ứng miễn dịch phụ thuộc vào phản ứng mơ vị trí tiêm nồng độ kháng nguyên vaccine (Rodrigo, 2016) Do đó, mục đích nghiên cứu nhằm xác định liều lượng đường tiêm vaccine phù hợp, giảm tối đa phản ứng phụ đạt mức kháng thể bảo hộ cao kéo dài cho gà Ta lai ni thịt VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Bố trí thí nghiệm Thí nghiệm sử dụng 120 gà Ta lai tuần tuổi đánh số chân Bố trí theo kiểu hồn tồn ngẫu nhiên yếu tố thể Bảng Bảng Bố trí thí nghiệm Đường tiêm da (SC) Số chuồn g Số gà/ ô Tổng số gà 0,0m l 0,25m l 0,5m l 2 10 20 Số liệu thu thập quản lý phần mềm MS Excel 2010 (Microsoft, USA) Đường tiêm xử lý với phương pháp phân tích One(IM) way Anova phần mềm Minitab 17.1 0,0m 0,25m 0,5m l l 2 10 10 10 10 20 20 20 20 Vaccine Ortinin triple (Phibro Animal Health, USA) có chất bổ trợ nhũ dầu, hàm lượng kháng nguyên 0,5ml chứa serotype A 109 CFU, serotype B 109 CFU serotype C 109 CFU Vaccine nhà sản xuất khuyến cáo tiêm để phòng lại bệnh hơ hấp vi khuẩn ORT gây Trong nghiệm thức, gà đánh số chân để phân biệt Mẫu máu lấy cố định cho tồn thời gian thí nghiệm gà đánh số Hiệu giá kháng thể (HGKT) kháng vi khuẩn ORT huyết gà xét nghiệm kĩ thuật ELISA với kít thương mại IDEXX ORT Ab Test, USA, mã sản phẩm 99-43600 Theo khuyến cáo kit phương pháp đọc kết thì: mẫu huyết có số titer ≤ 844 âm tính; ≥ 844 dương tính Và HGKT phân theo nhóm bảng Mẫu dương tính chứng tỏ gà chủng ngừa vaccine bị nhiễm với vi khuẩn ORT (IDEXX, USA) Đánh giá phản ứng vị trí tiêm Đánh giá mức độ phản ứng vị trí tiêm vaccine thơng qua kích thước đường kính vùng sưng 120 gà lơ thí nghiệm vào thời điểm 3, 7, 10, 14, 18, 21 28 ngày sau tiêm Đường kính nốt sưng vị trí tiêm đánh giá bốn thang điểm sau: không sưng = điểm, sưng nhỏ 1cm = điểm, sưng từ 1-2 cm = điểm, sưng lớn cm =3 điểm Phương pháp xử lý số liệu Ảnh hưởng liều tiêm đường tiêm đến HGKT kháng vi khuẩn ORT Hiệu giá kháng thể (HGKT) liều tiêm thể Bảng Trước chủng ngừa, gà có kết âm tính tất lơ thí nghiệm (HGKT ≤ 844) Theo khuyến cáo IDEXX, với đàn gà không tiêm chủng vaccine ORT không bị nhiễm vi khuẩn ORT từ mơi trường HGKT âm tính thuộc nhóm (Hình 2) (Bảng 2) Sau chủng ngừa, lơ tiêm vaccine Ornitin triple có gia tăng đáng kể HGKT so với lô đối chứng (P < 0.001) tồn thời gian thí nghiệm HGKT tăng cao lúc tuần tuổi tương đương tuần sau chủng, lô SC-0,25ml, SC-0,5ml, IM0,25ml IM-0,5ml có HGKT trung bình là: 25745, 26458, 26125 26008, lơ đối chứng mức âm tính (209 270 đơn vị titer) Ở tuần tuổi tương tự, phân hóa nhóm rõ rệt lơ đối chứng lơ có tiêm vaccine (Hình 3) Tới 13 tuần tuổi HGKT mức cao, với 28182, 25839, 24533 25827 đơn vị titer cho lô SC-0,25ml, SC-0,5ml, IM0,25ml IM-0,5ml, khác biệt có ý nghĩa so với lô đối chứng 632 672 đơn vị titer Nghiên cứu cho thấy, khơng có khác biệt mặt thống kê HGKT liều tiêm 0,25ml 0,5ml vaccine (P > 0,05) (Bảng 3) Vaccine cần tiêm vị trí để tạo đáp ứng miễn dịch cho thể gia cầm (Bermudez, 2008) Đường tiêm phù hợp phụ thuộc vào loại vaccine Nghiên cứu cho thấy HGKT lơ gà thí nghiệm khơng phụ thuộc vào đường tiêm SC hay đường tiêm IM (P > 0,05) (Bảng 3) Phản ứng sưng vị trí tiêm Trên lơ đối chứng khơng có phản ứng bất thường Lơ có tiêm vaccine, phản ứng sưng bắt đầu tăng cao sau tiêm vaccine 7-10 ngày Với đường tiêm IM, 18 ngày sau tiêm chủng, hết sưng với đường tiêm SC phải 28 ngày sau tiêm chủng hết sưng hẳn (Hình 1) Ta thấy với liều vaccine đường tiêm IM phản ứng sưng hơn, đường tiêm SC liều nhỏ cho phản ứng sưng thấp Điểm KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.0 10 14 18 21 28 Ngày sau tiêm Đối chứng-SC 0,25ml-IM Đối chứng-IM 0,5ml-SC 0,25ml-SC 0,5ml-IM Hình Ảnh hưởng đường tiêm liều tiêm đến phản ứng vị trí tiêm tuần tuổi 15.0 10.0 5.0 0.0 Đối chứng-SC Đối chứng-IM 0,25ml-SC 10 11 12 0,25ml-IM 13 14 0,5ml-SC Hình 2: Phân nhóm HGKT ORT lúc tuần tuổi (trước tiêm vaccine) 15 16 0,5ml-IM 17 18 Bảng 2: Phương pháp phân nhóm HGKT ORT (phần mềm xChekPlus, IDEXX, USA) Nhóm Hiệu giá kháng thể Nhóm Hiệu giá kháng thể 0-844 845 -999 11 14000 -15999 1000 -1999 12 16000 -17999 2000 -2999 13 18000 -19999 3000 -3999 14 20000 -21999 4000 -4999 15 22000 -23999 5000 -5999 16 24000 -27999 6000 -7999 17 28000 -31999 8000 -9999 10000 -11999 10 12000 -13999 18 ≥32000 tuần tuổi 15 10 0 Đối chứng-SC 0,25ml-IM 10 Đối chứng-IM 0,5ml-SC 11 12 13 14 15 16 17 18 0,25ml-SC 0,5ml-IM Hình 3: Phân nhóm HGKT ORT lúc tuần tuổi (sau tiêm vaccine tuần) Bảng Ảnh hưởng đường tiêm liều tiêm đến HGKT sau tiêm vaccine Ornitrin triple Đường tiêm da (SC) tuần tuổi (N = 10) X ±SD CV% Đường tiêm (IM) 0,0ml 0,25ml 0,5ml 0,0ml 0,25ml 0,5ml 198,9 ± 186,8 93,94 177,0 ± 132,3 74,73 197,0 ± 207,6 105,38 155,8 ± 88,0 56,44 196,9 ± 96,7 49,13 201,9 ± 80,5 39,85 P F 0,975 0,16 tuần 209,0 ± 25745 ± 26458 ± 270,1 ± 26125 ± 26008 ± X ±SD 0,000 tuổi 262,0b 5957a 6798a 295,8b 5388a 5290a CV% 76,98 (N = 10) 125,34 23,14 25,69 109,53 20,62 20,34 tuần 224,7 ± 28669 ± 29748 ± 227,5 ± 27168 ± 27985 ± X ±SD 0,000 tuổi 244,4b 2005a 2364a 234,3b 2767a 2665a CV% 520,28 (N = 10) 108,75 6,99 7,95 102,99 10,18 9,52 10 tuần 219,6 ± 24576 ± 27403 ± 361,2 ± 23909 ± 26746 ± X ±SD 0,000 c ab a c b tuổi 222,4 2501 1609 286,9 4467 1150ab CV% 340,39 (N = 10) 24,41 10,18 6,17 79,43 18,68 4,3 12 tuần 856,0 ± 39781 ± 33063 ± 821,0 ± 33788 ± 38160 ± X ±SD 0,000 tuổi 209,0b 8101a 10749a 425,0b 10710a 3462a CV% 29,57 (N = 5) 24,41 20,36 32,51 51,77 31,70 9,07 13 tuần 632,0 ± 28182 ± 25839 ± 672,0 ± 24533 ± 25827 ± X ±SD 0,000 tuồi 233,0b 5003a 7878a 329,0b 8752a 3439a CV% 24,83 (N = 5) 36,91 17,75 30,49 49,00 35,67 13,32 *Các số trung bình hàng có chữ khác khác biệt mặt thống kê (P < 0,05) KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Nghiên cứu cho thấy, có phát triển HGKT kháng vi khuẩn ORT liều tiêm 0,25ml 0,5 ml qua đường tiêm SC, IM Nhưng chưa có khác biệt hiệu giá kháng thể liều tiêm (P > 0,05) Phản ứng cục vị trí tiêm đường tiêm bắp thấp so với đường tiêm da (Hình 1) nên khuyến cáo sử dụng liều 0,25 ml đường tiêm bắp để tối ưu việc chủng ngừa cho gà Đây thí nghiệm bước đầu để thăm dò hiệu giá kháng thể phản ứng phụ vaccine ORT Do đó, cần tiến hành thêm thí nghiệm cơng cường độc để đánh giá khả bảo hộ vaccine [3] TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] [2] Bermudez, A.J (2008) Principles of disease prevention: Diagnosis and Control, Diseases of poultry (12nd ed) Blackwell publishing Press, Ames, Iowa Cauwerts, K., De H.P., Haesebrouck, F., Vervloesem, I., Ducatelle, R (2002) The effect of Ornithobacterium rhinotracheale vaccination of broiler breeder chickens [4] on the performance of their progeny Avian Pathology: Journal of the W.V.P.A 31(6), 619-624 Chin R.P., van Empel P.C.M., and Hafez H.M (2008) Ornithobacterium rhinotracheale infection, Saif Y.M, Fadly A.M., Glisson J.R., McDougald L.R., Nolan L.K., and Swayne D.E (eds.), Diseases of poultry, 12th ed., Blackwell Publishing Ltd., Oxford, United Kingdom, pp.765–774 Devriese, L.A., De Herdt, P., Haesebrouck, F (2001) Antibiotic sensitivity and resistance in Ornithobacterium rhinotracheale strains from Belgian broiler chickens Avian Pathology 30, 197–200 ... Ducatelle, R (2002) The effect of Ornithobacterium rhinotracheale vaccination of broiler breeder chickens [4] on the performance of their progeny Avian Pathology: Journal of the W.V.P.A 31(6),... ORT Ab Test, USA, mã sản phẩm 99-43600 Theo khuyến cáo kit phương pháp đọc kết thì: mẫu huyết có số titer ≤ 844 âm tính; ≥ 844 dương tính Và HGKT phân theo nhóm bảng Mẫu dương tính chứng tỏ gà... thể (HGKT) liều tiêm thể Bảng Trước chủng ngừa, gà có kết âm tính tất lơ thí nghiệm (HGKT ≤ 844) Theo khuyến cáo IDEXX, với đàn gà không tiêm chủng vaccine ORT không bị nhiễm vi khuẩn ORT từ môi