HỆ THỐNG xét nhiệm huyết học CELLDYN SAPPHIRE

Hướng dẫn sử dụng Cell – Dyn Sapphire ABBOTT Hà Nội, 06– 2012 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire ĐẶC ĐIỂM VÀ TÍNH NĂNG KỸ THUẬT CELLDYN SAPPHIRE - Sapphire hệ thống đếm tế bào máu hoàn toàn tự động dựa nguyên lý đo - Hơn 30 thơng số hiển thị - Thể tích mẫu máu sử dụng nhỏ ~117µl - 106 mẫu/ (cho chế độ chạy mẫu đóng) - 69 mẫu/ ( với chạy retic) - chế độ chạy mẫu (với chế độ chạy mẫu đóng) - chế độ chạy mẫu (với chế độ mở) - loại hóa chất sử dụng - Chương trình chuẩn máy tự động - Lưu trữ 25 tập tin QC - Kiểm soát hệ thống online - Hướng dẫn sử dụng online - Ứng dụng miễn dịch - Ứng dụng chế độ dòng mở Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire A TỔNG QUAN VỀ HỆ THỐNG CELLDYN SAPPHIRE I GIỚI THIỆU HỆ THỐNG CELLDYN SAPPHIRE Máy – Bộ phận lưu trữ liệu – Máy in – Hóa chất – Cơng tắc bật/ tắt máy Màn hình phẳng hiển thị - Nút bật/tắt hình – Nút điều chỉnh hình4 Máy tính – Ổ đĩa DVD – Ổ đĩa mềm – Nút bật /tắt máy tính – Bàn phím - Chuột điều khiển – 10 Bộ đọc Bar Code cầm tay – 11 Máy in – 12 Cổng cắm USB II TỔNG QUAN VỀ MÁY CHÍNH Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire Nắp Nắp phải trái Nắp chứa cổng hóa chất vào/ chất thải Bên nắp máy Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire Bên phía nắp trái Bộ phận chuyển đổi trở kháng Buồng đếm Hemoglobin Các van kẹp Bộ phận phân lập đo quang Bộ phận chứa mẫu cho phương pháp đo trở kháng Bộ phận chứa chất thải 1, 2, Bên phía nắp phải Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire Hệ thống Xi lanh Vị trí đắt hóa chất Reticulocyte (đếm tế bào lưới) Hệ thống bơm hút chuyển mẫu Các van kẹp Bộ chuyển mẫu tự động Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire Rack (khay giữ tube mẫu) Bộ phận cảm biến tube sensors Đầu đọc bar code (bar code reader) Bộ phận lắc mẫu Bộ phận trộn mẫu Racks – Khay chứa mẫu - Khay chứa mẫu phù hợp với hầu hết loại ống trữ máu - Có thể chuyển mẫu tự động với từ đến 10 khay chứa mẫu - Hệ thống đọc bar code mẫu để xác định vị trí hút mẫu - Hệ thống tự động xác định bar code khay chứa mẫu ( vị trí tube / số number khay) - Trên khay chứa mẫu có điểm thị báo hiệu máy phân tích xong tất mẫu khay gọi Rack completion Indicator - Các trạm pha loãng Dilution Cups Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire Trạm pha lỗng phía trước Trạm pha loãng (cho WBC NRBCs) Trạm pha lỗng phía sau Trạm rửa hình nón Trạm pha lỗng HGB Trạm khơng sử dụng Trạm pha loãng RETC Trạm pha loãng RBC/PLT Lỗ tràn 10 Lỗ tràn kiểm soát chất lỏng tràn III CÁC TRẠNG THÁI HOẠT ĐỘNG CỦA MÁY Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire Các trạng thái máy hiển thị đèn phía nắp máy phía bên phải ASPIRATING Máy hút mẫu READY Máy trạng thái sẵn sàng để phân tích mẫu BUSY Máy bận LOCKED Nắp bị khóa Máy khơng trạng thái sẵn sàng để phân NOT READY tích mẫu Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire B DUNG DỊCH CHẠY MÁY CELL – DYN SAPPHIRE Có loại dung dịch sử dụng hệ thống CDSapphire Các dung dịch cần bảo quản nhiệt độ phòng, tránh ánh nắng trực tiếp, tránh nguồn nhiệt không trữ lạnh trừ Reticulocyte Reagent I Dung dịch pha loãng (DILUENT/SHEATH) - Dùng để pha loãng máu cho đếm số lượng hồng cầu, tiểu cầu RBC/PLT RETC Duy trì hình dạng ổn định hồng cầu, tiểu cầu RETC suốt q trình đọc Làm ướt tồn hệ thống đường ống nhằm ngăn bọt khí hệ thống Đóng vai trò dung dịch Sheath cho đếm tế bào phương pháp đo quang đếm tế bào phương pháp trở kháng Dung dịch mồi cho xi lanh hệ thống đường ống Rửa đường ống thành phần khác kết thúc chu trình phân tích Rửa trạm pha lỗng RETC, kim hút mẫu lỗ kim II Dung dịch HGB 10 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire III Quy trình bảo dưỡng tuần Quy trình bảo dưỡng tuần bao gồm lau phận đưa mẫu tự động, khay chứa mẫu cần thị khay chứa mẫu để đảm bảo khay chuyển động theo quy trình 1) Gỡ bỏ khay chứa mẫu khỏi phận đưa mẫu tự động Chọn Analyzer> Chọn Special Protocol… Từ khu vực Sample Processor Autoloader cửa sổ SPECIAL PROTOCOL chọn phím Clean Loader Components Chờ đến xuất tin nhắn Status Panel – Cửa sổ trạng thái thị hệ thống tạm ngừng hoạt động để chuẩn bị cho việc lau rửa phận đưa mẫu tự động Gỡ bỏ khay chứa mẫu khỏi nơi chứa khay 2) Lau rửa khay chứa mẫu Lau rửa khay với dung dịch nước Javen 0.5% Không nhúng trực tiếp khay ngập dung dịch nước Javen dung dịch làm hỏng nhãn barcode dán khay chứa mẫu (sử dụng gạc cotton thấm nước Javen 0.5% để lau) Đối với khay chứa mẫu, kéo cần thị lên cao để tiện cho việc lau rửa Lau rửa cần thị với dung dịch nước Javen 0.5% Lau phận chứa khay chứa mẫu máy dung dịch nước Javen 0.5% Lau lại phận với dung dịch tẩy rửa Lau lại phận với nước ấm lau khô chúng giấy ăn vải mềm 3) Lắp đặt lại Autoloader Racks Trượt cần thị vào khay chứa mẫu tự động Đặt lại khay vào phận đưa mẫu tự động Từ khu vực Sample Processor and Autoloader cửa sổ SPECIAL PROTOCOLS, chọn phím Return Loader to Ready Chọn phím Close để đóng cửa sổ SPECIALS PROTOCOLS 42 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire 4) Quy trình rửa xi lanh hóa chất HGB Xi lanh HGB reagent xi lanh 5mL nắm vị trí A2 cửa bên phải máy CD Sapphire Đây xi lanh máy Sapphire cần rửa hàng tuần, xi lanh khác rửa cần thiết Gỡ xi lanh khỏi giá: Chọn Analyzer> từ mục Control Panel Chọn Special Protocols… từ menu Analyzer Từ khu vực Sample Processor and Autoloader cửa sổ SPECIAL PROTOCOLS, chọn phím Syringe Remove Chờ bảng tin nhắn xuất Status Panel thị hệ thống tạm dừng hoạt động chuẩn bị cho việc gỡ xi lanh khỏi giá Mở cửa phía phải máy để tìm khu vực A2 nơi có giá đỡ xi lanh HGB Reagent Gỡ xi lanh HGB Reagent khỏi giá cách kéo thẳng phía trước Tháo dây nối (tubing) xi lanh HGB Reagent, nắm lấy đầu Luer – Lok phía xi lanh Xoay xi lanh theo chiều kim đồng hồ để tháo Đầy pit tơng xi lanh để thải hết hóa chất vào bình thải Làm Xi lanh: Nhúng xi lanh vào cốc nước đề ion để loại bỏ lớp muối cặn Hút nước đề ion vào xi lanh đầy, không gỡ pit tông khỏi xi lanh, hút nhả nước đề ion vài lần Chú ý: Không đẩy hay kéo pit tơng xi lanh khơ làm hỏng pit tông Làm khô phía ngồi xi lanh với giấy thấm Lắp xi lanh lại vào giá: Nối ống dây tubing với xi lanh, đặt đầu Luer-Lok khớp với xi lanh quay xi lanh theo ngược chiều kim đồng hồ chặt tay Lắp lại xi lanh HGB Reagent, đảm bảo ống dây tubing không bị lỏng hay bị xoắn Điều chỉnh vị trí pit tơng cần thiết Vị trí đặt xi lanh khớp hình vẽ: 43 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire Từ khu vực Sample Processor and Autoloader cửa sổ SPECIALS PROTOCOLS, chọn phím Syringe Install… Đảm bảo xi lanh lắp đặt hình vẽ chọn phím OK Đóng nắp phải máy lại Chọn phím Close để đóng cửa sổ SPECIAL PROTOCOLS Khi máy trở lại trạng thái Ready, chạy lại background, đảm bảo thông số chạy background nằm giới hạn cho phép trước chạy control mẫu bệnh nhân Kiểm tra lại máy cách chạy control trước chạy mẫu bệnh phẩm 44 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire IV Quy trình bảo dưỡng hàng tháng 1) Thay dây bơm nhu động (Bơm chuyển mẫu) - Sample Transfer Pump Tubing Replacement Gỡ dây bơm nhu động - Remove Sample Transfer Pump Tubing Chọn Analyzer> Chọn Special Protocols… Từ khu vực Tubing cửa sổ SPECIAL PROTOCOLS, chọn phím Trasfer Pump Remove Chờ đến bảng tin nhắn xuất khu vực Status thị hệ thống tạm ngừng hoạt động chuẩn bị cho việc tháo dây bơm nhu động; sau mở nắp phải máy để tìm vị trí dây bơm nhu động Nhấn vào giữ trục để gỡ tubing khỏi trục quay bơm hình vẽ Gỡ tubing từ hai đầu nối nhựa Thay dây bơm nhu động - Replacing Sample Transfer Pump Tubing Nối tubing vào hình vẽ Đặt tubing vào vị trí cho tubing nằm trục bơm nhu động Đảm bảo tubing không bị gập xoắn Từ khu vực Tubing cửa sổ SPECIAL PROTOCOLS, chọn phím Transfer Pump Install… Đảm bảo tubing lắp đặt chọn phím OK Chọn phím Close để đóng SPECIAL PROTOCOLS Khi máy trở trạng thái Ready, đảm bảo background nằm dải cho phép trước chạy control bệnh phẩm Kiểm tra lại máy cách chạy control trước mẫu bệnh phẩm 45 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire V Các quy trình làm sạch/ thay phận cần 1) Làm kim hút mẫu Kim hút mẫu tự động rửa theo quy trình rửa tự động thực hàng ngày Tuy nhiên, kim hút mẫu cần làm để thông kim kim bị tắc (vì cục máu đơng hay sợi fibrin) Các bước theo quy trình: Chọn Analyzer> Chọn Special Protocols… Chọn phím Aspiration Probe Remove Chọn phím Aspiration Probe Install Chọn phím Close để khỏi cửa sổ SPECIAL PROTOCOLS Khi máy trở trạng thái Ready Status, đảm bảo số đếm background nằm dải cho phép trước chạy mẫu control mẫu bệnh phẩm Kiểm tra hoạt động máy cách chạy control trước chạy mẫu bệnh phẩm 2) Thay kim hút mẫu Abbott khuyến cáo nên thay kim hút mẫu sau 360 chu trình rửa tự động để trì điều kiện hoạt động tối ưu cho Mỗi phòng xét nghiệm tự thiết lập lịch thay kim hút mẫu phù hợp dựa việc ước lượng số chu trình rửa tự động (Autoclean cycles) ngày Số chu trình rửa tự động/ngày Khuyến cáo thay kim hút mẫu sau: Ít tháng Ít tháng Ít 12 tháng Quy trình thay kim hút mẫu bao gồm bước sau: • Tháo kim hút mẫu Kiểm tra khu vực Status Panel để khẳng định máy chế độ đóng (Autoloader mode) Nếu Autoloader thực chạy mẫu cần cho dừng lại theo quy trình Interrupt Autoloader Chọn Analyzer> Chọn Special Protocols… Chờ đến bảng tin nhắn khu vực Status Panel thị hệ thống tạm dừng hoạt động để chuẩn bị cho việc tháo kim hút mẫu Mở nắp máy phải trái, gỡ nắp máy xử lý khỏi máy Giữ kim hút mẫu nằm vòng đệm đẩy nhẹ gần vào vị trí tubing Một tay cầm kẹp tay giữ kim vòng đệm hình vẽ Kéo kim khỏi 46 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire 47 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire G XÉT NGHIỆM CELL DYN IMMUNOPLT (CD61) CELL-DYN ImmunoPlt (CD61) xét nghiệm miễn dịch đếm số lượng tế bào tiểu cầu thực hoàn toàn tự động máy huyết học CD Sapphire Xét nghiệm CD61 mơt tính trội máy CD Sapphire vì: - CD61 sử dụng kỹ thuật kháng thể đơn dòng có độ xác xác đặc biệt nồng độ tiểu cầu thấp - Kỹ thuật kháng thể đơn dòng khơng bị ảnh hưởng diện bạch cầu hồng cầu dễ vỡ CD61 xét nghiệm khuyến cáo sử dụng: - Đếm số tế bào tiểu cầu mẫu bệnh phẩm với nồng độ tiểu cầu thấp - Đếm số tế bào tiểu cầu cần mẫu bệnh phẩm có nồng độ tiểu cầu trung bình - Đếm số tế bào tiểu cầu mẫu bệnh phẩm với nồng độ tiểu cầu thâp có nghi ngờ bị nhiễu thành phần tiểu cầu bạch cầu, hồng cầu vỡ sử dụng phương pháp đo thông thường I CELL-DYN ImmunoPlt (CD61) Reagent 1) Thành phần: Các thành phần thuốc thử CD61 kháng thể đơn dòng (mAb), định CD61 Một chất nhuộm huỳnh quang (Fluorescein isothiocyanate – FITC) gắn kết với mAb Kháng thể đơn dòng mAb dạng đơng khơ (lyophilized) có hình dạng viên bi đóng gói ống đựng máu tiêu chuẩn, minh hoạ Một màng ngăn cách làm thép không gỉ giúp cho viên bi kháng thể đơn dòng ln gắn đáy ống máu Trên ống CD61 dán nhãn có mã vạch 48 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire 2) Đóng gói: Mỗi gói thuốc thử CD61 có chứa túi, túi có 20 ống hình minh hoạ bên Trong mơi túi có gói hút ẩm, gói hút ẩm thị màu xanh chuyển thành màu hoa oải hương túi tiếp xúc với độ ẩm mức 3) Bảo quản Bảo quản độ ổn định thuốc thử CD61 Điều kiện Độ ổn định đảm bảo Túi thuốc thử CD61 (chưa mở) Đến ngày hết hạn ghi nhãn Túi thuốc thử CD61 (đã mở, sau đóng chặt 60 ngày nhiệt độ phòng Ống thuốc thử CD61 sau lấy khỏi túi nhiệt độ phòng Chú ý: - Mở hộp túi chứa ống thuốc thử CD61, cắt túi phía đường nối resealing Lấy ống thuốc thử khỏi túi - Kiểm tra để chắn gói hút ẩm túi màu xanh Nếu chúng chuyển sang màu hoa oải hương, chứng cho thấy túi tiếp xúc với độ ẩm vượt mức cho phép, không nên sử dụng ống thuốc thử - Kiểm tra viên bi kháng thể đơn dòng, thấy có đổi màu bị thu nhỏ (có thể thấy viên bi kháng thể lọt qua lớp màng chắn thép đảo ngược ống thuốc thử Đây chứng cho thấy bất ổn hơặc suy giảm chất lượng bảo quản ống thuốc thử khuyến cáo khơng nên sử dụng ống 49 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire II Quy trình chạy xét nghiệm CD61 máy CD Sapphire 1) Yêu cầu xét nghiệm     Lượng mâu tối thiểu: 1.0 mL Lượng mẫu hút: 182 μL Thời gian hoàn thành xét nghiệm: < 265 giây Xét nghiệm CD61 chạy chế độ chạy mẫu đóng Auto Loader 2) Quy trinh chạy background cho xét nghiệm CD61 Đảm bảo máy hoạt động tốt cách chạy Controls Chạy background chế độ CBC, kiểm tra thông số background phải nằm dải cho phép Đặt ống tube trống lên khay chứa mẫu, tiếp đặt ống chứa thuốc thử CD61 Từ hình chọn Work List Trong cửa sổ Work List chọn Create Entry… Từ Specimen Type> cửa sổ Work List Entry chọn Background, sau chọn CD61 từ SubType> Để xác định ống tube trống cần nhập vị trí đặt ống rack (Ví dụ: 0809, rack số 08 vị trí 09) (Chú ý khơng dùng ống tube trống có gắn barcode) Chọn Save Entry Chọn Close 10 Chọn Run Loader 11 Đảm bảo giá trị background nằm dải cho phép trước chạy QC chạy mẫu bệnh phẩm 50 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire 3) Quy trình chạy QC cho xét nghiệm CD61  Các yêu cầu Quality Control cho xét nghiệm CD61 - Trong ngày làm việc cần chạy hai mức control cho xét nghiệm CD61 kết control phải nằm dải cho phép - Khi thay đổi lot number thuốc thử cần chạy lại control để đảm bảo kết xác - Đối với mức control, hai thông số sau phải nằm dải cho phép cài đặt sẵn: - 61/o: Đây thông số biểu thị tỷ lệ kết CD61 kết PLTo - Dải cho phép: mức bình thường (normal control): 0.9 – 1.1 :Mức thấp (low control): 0.8 – 1.2 - 61mn: Đây thông số biểu thị giá trị trung bình kênh CD61 phát hệ thống huỳnh quang FL1 Dải cho phép: 115 -145  Yêu cầu mẫu bệnh phẩm: - Thể tích tối thiểu: 1.0 mL - Các mẫu bệnh phẩm lấy vào ống tiêu chuẩn có chứa chất EDTA  Chuẩn bị control máu toàn phần cho CD61 - Mẫu control mức bình thường (normal control): Lấy mẫu bệnh phẩm máu tồn phần tươi (lấy mẫu khơng giờ) với nồng độ tiểu cầu từ 200 – 400 x 109/L, nồng độ hồng cầu từ x 1012/L ( để tránh trường hợp báo cờ short sample mức control thấp) cờ báo - Mẫu control mức thấp (low control): Phap lỗng 0.5 mL mẫu bình thường với 1.5 mL hoá chất Diluent/Sheath cho vào ống tube khơng có chứa chất chống đơng  Quy trình chạy QC cho xét nghiệm CD61 Chọn Work List từ hình Trong cửa sổ Work List chọn Create Entry… Chọn Specimen Type> từ cửa sổ Work List Entry, chọn QC, chọn QC File mong muốn từ Sub Type> Từ Test Selection>, chọn CBC + CD61, WBC Extenđe Count [L] Để xác định mẫu bệnh phẩm SID, Chọn Match Specimen Id Đảm bảo QC File có tập tin phù hợp với SID, khơng có cần cài đạt tập tin QC File mẫu patient control Để xác điịnh ống chứa mẫu bệnh phẩm vị trí rack tube, chọn Match RRTT, sau nhập vị trí RRTT (ví dụ: 0809 tương đương với Rack 08 vị trí 09 rack) Chọn Save Entry Bắt đầu lại từ bước cho mức control khác Chọn phím close 10 Đặt ống chứa mẫu bệnh phẩm bà ống chứa thuốc thử CD61 lên rack, ý đặt ống chứa thuốc thử CD61 sau ống chứa mẫu bệnh phẩm rack 11 Chọn Run Loader 51 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire III Quy trình chạy xét nghiệm CD61 với mẫu bệnh phẩm Mục đích Nếu chạy nhiều mẫu bệnh phẩm Các bước Từ Setup> chọn Work List… Từ Specimen Type cửa sổ Work List Setup, chọn Patient Từ Test Selection>, chon CBC + CD61, WBC EXTENDED COUNT [L] Chọn OK Đặt ống chứa mẫu bệnh phẩm ống chứa thuốc thử CD61 lên rack cho ống chứa thuốc thử CD61 đặt sau ống chứa mẫu bệnh phẩm Chọn phím Run Loader Nếu chạy lượng mẫu bênh phẩm Chọn Work List Trong cửa sổ Work List chọn Create Entry… Từ Specimen Type> cửa sổ Work List Entry, chọn Patient Từ Test Selection>, chọn CBC + CD61, WBC EXTENDED COUNT [L] Để xác định mẫu bệnh phẩm SID, Chọn Match Specimen ID Để xác điịnh ống chứa mẫu bệnh phẩm vị trí rack tube, chọn Match RRTT, sau nhập vị trí RRTT (ví dụ: 0809 tương đương với Rack 08 vị trí 09 rack) Chọn Save Entry Bắt đầu lại từ bước cho mức control khác Chọn phím close 10 Đặt ống chứa mẫu bệnh phẩm bà ống chứa thuốc thử CD61 lên rack, ý đặt ống chứa thuốc thử CD61 sau ống chứa mẫu bệnh phẩm rack 11 Chọn Run Loader 52 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire 53 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire 54 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire 55 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire 56 ... soát hệ thống online - Hướng dẫn sử dụng online - Ứng dụng miễn dịch - Ứng dụng chế độ dòng mở Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire A TỔNG QUAN VỀ HỆ THỐNG CELLDYN SAPPHIRE I GIỚI THIỆU HỆ THỐNG CELLDYN. .. thái học toàn vẹn WBC Ly giải RBC làm cho RBC khơng thể nhìn thấy hệ thống quang học máy Nhuộm màu nhanh DNA NRBCs, WBC dễ vỡ bị phá hủy Mồi thuốc thử WBC cho hệ thống xi lanh đường ống Rửa hệ thống. .. thuốc thử Reticulocyte cho hệ thống xi lanh đường ống - Trữ lạnh C o 11 Hướng dẫn sử dụng Cell-Dyn Sapphire C NGUYÊN LÝ HOẠT ĐỘNG I Các hệ thống đọc máy CD Sapphire CD Sapphire sử dụng phương pháp