NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH KỸ THUẬT CHIẾT XUẤT VÀ SỬ DỤNG 2-ACETYL-1-PYRROLINE (2-AP) TRONG LÁ DỨA LÀM CHẤT CHUẨN ĐỂ PHÂN TÍCH 2-AP TRONG GẠO THƠM

Cho đến nay người ta thường xác định chất lượng gạo thơm chủ yếu bằng phương pháp cảm quan truyền thống. Phương pháp này nhanh nhưng không chính xác vì hoàn toàn phụ thuộc vào đánh giá chủ quan khứu giác của con người. Để góp phần tích cực khắc phục tình trạng đó, chúng tôi đã nghiên cứu triển khai các phương pháp SDE-GCFID, SDE-GCMS. Trong quy trình phân tích này, trước hết tiến hành phân tích định lượng 2-AP trong lá dứa để so sánh với hàm lượng 2-AP trong gạo thơm. Bằng phương pháp này, từ năm 2005, 2-AP và một số cấu tử thơm khác trong lúa gạo lần đầu tiên đã được xác định tại Phòng thí nghiệm Hoá Lý, Trung tâm phân tích thí nghiệm Hoá Sinh, Trường Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh. Đến năm 2010, 2-AP trong 3 loại lá dứa già, non, bánh tẻ đã được chiết xuất và phân tích định lượng bằng SDE-GCFID và GCMS. Trên cơ sở đó, 2-AP trong lá dứa đã được sử dụng như là chất chuẩn để phân tích định lượng 2-AP trong gạo thơm. Trong công trình này, giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ) của phương pháp cũng đã được xác định.

J Sci & Devel., Vol 10, No 5: 747- 757 Tạp chí Khoa học Phát triển 2012 Tập 10, số 5: 747- 757 www.hua.edu.vn NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH KỸ THUẬT CHIẾT XUẤT VÀ SỬ DỤNG 2-ACETYL-1-PYRROLINE (2-AP) TRONG LÁ DỨA LÀM CHẤT CHUẨN ĐỂ PHÂN TÍCH 2-AP TRONG GẠO THƠM Phan Phước Hiền*, Trương Thị Bích Liễu Trường Đại học Nơng Lâm Thành phố Hồ Chí Minh Email*: pphien@gmail.com; phuochien@hcmuaf.edu.vn Ngày gửi : 25.05.2012 Ngày chấp nhận : 05.09.2012 TÓM TẮT Cho đến người ta thường xác định chất lượng gạo thơm chủ yếu phương pháp cảm quan truyền thống Phương pháp nhanh không xác hồn tồn phụ thuộc vào đánh giá chủ quan khứu giác người Để góp phần tích cực khắc phục tình trạng đó, chúng tơi nghiên cứu triển khai phương pháp SDE-GCFID, SDE-GCMS Trong quy trình phân tích này, trước hết tiến hành phân tích định lượng 2-AP dứa để so sánh với hàm lượng 2-AP gạo thơm Bằng phương pháp này, từ năm 2005, 2-AP số cấu tử thơm khác lúa gạo lần xác định Phịng thí nghiệm Hố Lý, Trung tâm phân tích thí nghiệm Hố Sinh, Trường Đại học Nơng Lâm Thành phố Hồ Chí Minh Đến năm 2010, 2-AP loại dứa già, non, bánh tẻ chiết xuất phân tích định lượng SDE-GCFID GCMS Trên sở đó, 2-AP dứa sử dụng chất chuẩn để phân tích định lượng 2-AP gạo thơm Trong cơng trình này, giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) phương pháp xác định Từ khoá: SDE-GCFID, SDE-GCMS, giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ), dứa Research on Extraction and Utilization of 2-AP from Pandanus’ Leaf as a Standard for Identification and Quantification of 2-AP in Aromatic Rice ABSTRACT So far fragrance of rice has mainly been determined by the traditional sensory method This evaluation is fast but does not define precisely because it depends entirely on subjective assessment of the evaluator’s olfaction To overcome this shortcoming, the modern physico-chemical methods, SDE-GCFID and SDE-GCMS were employed In these analytical processes, quantitative analysis of 2-AP content in pandan’s leaf was performed to serve as basis for comparison with that in aromatic rice By these methods, since 2005, 2-AP and some other aromatic compounds in aromatic rice have been identified and quantified in the Physicochemical Laboratory, Center for Biological and Chemical analysis and experiment, University of Agriculture and Forestry Ho Chi Minh City In this laboratory from 2010, the content of -AP in the old, mature and young leaves of Pandanus were accurately quantified and used as a standard for quantification of 2-AP in fragrant rice using SDE (or SPME) extraction method combined with GC-FID and GC-MS The limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) of the method were also determined Keywords: Fragrant rice, SDE-GCFID, SDE-GCMS, the limit of detection (LOD), the limit of quantification (LOQ), Pandanus amaryllifolius leaves MỞ ĐẦU Ngày nay, đời sống người dân Việt Nam ngày nâng cao nhu cầu ăn uống thay đổi đáng kể Lương thực gạo có mặt bữa ăn gia đình Nói riêng gạo có nhiều loại khác người dân ưa chuộng gạo thơm Gạo thơm có nhiều giống khác nhau, cấu tử có vai trị định tạo mùi thơm gạo thơm - Acetyl - pyrroline (2-AP) Theo nghiên cứu trước đây, điều mà nghĩ đến 2-AP lại tìm thấy với nồng độ cao dứa (Pandanus amaryllifolius) Lá dứa sử dụng chế biến thực phẩm tươi khơ, thương mại hóa cửa hàng thực phẩm đông lạnh quốc gia Châu Á Ở Việt Nam, từ xa xưa dứa thường sử dụng lúc nấu cơm chế bến nhiều ăn đồ uống 747 Phan Phước Hiền, Trương Thị Bích Liễu khác Hương thơm đặc trưng dứa tạo hợp chất thơm - Acetyl - - Pyrroline mùi thơm chủ yếu gạo thơm (Phan Phươc Hiền & cs., 2009, 2011) Từ sở chúng tơi nghiên cứu chiết xuất sử 2-AP dứa làm chất chuẩn để phấn tích định tình định lượng 2-AP loại gạo thơm VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Vật liệu - Lá dứa thu ấp Tân Q, xã Đơng Hịa, huyện Dĩ An, tỉnh Bình Dương - Gạo thơm: sử dụng giống Nanh Chồn nanh Chồn Bà Rịa Vũng Tàu Viện Khoa học kỹ thuật nông nghiệp miền Nam cung cấp 2.2 Hóa chất dụng cụ         Dicloromethan (Merck - Đức), collidine (2,4,6 - trimethyl pyridine) (Alrich), nước cất, nước khử ion, chất chống tạo bọt (MgSO4 10%), NaCl (Trung Quốc), Na2SO4 (Trung Quốc) KOH (Merck), nước cất Máy bóc vỏ lúa Philips, Rego design No 170851 Thiết bị gia nhiệt Jakie, JK - 579 (Mỹ) Máy làm lạnh Fisher model 10201, serial G52434 (Mỹ) Máy khuấy từ gia nhiệt Bibby, serial 10449 (Mỹ) Máy sắc khí khối phổ 6890 N, serial G1530N (Mỹ) Bình thổi N2 2.3 Phương pháp chiết xuất phân tích 2.3.1 Phương pháp chiết xuất SDE (Simultaneous Distillation Extraction) Sơ đồ thiết bị trích ly 2-AP dứa phương pháp SDE: Mẫu dứa phân thành loại già, non bánh tẻ, rửa nước máy, để khơ Sau cắt nhỏ thành thành đoạn khoảng 1cm đem cân 20g loại Hòa tan muối NaCl vào 350ml nước khử ion, đun 748 thấy xuất hạt muối kết tinh Lúc lượng nước muối khoảng 300ml Lấy 20g dứa cho vào 250ml dung dịch nước muối xay nhuyễn, cho tồn vào bình cầu, thêm 10ml MgSO4 10% để chống tạo bọt Chất nội chuẩn sử dụng phương pháp 2ml collidine µg/ml Đối với mẫu lúa, sau loại bỏ tạp chất (vỏ trấu, cát, sỏi…), đưa vào máy bóc vỏ trấu (Phillips, Rego design No 170851), cân 45g gạo bóc vỏ Cho tồn vào bình cầu với chất chống tạo bọt tiến hành bước dứa Tiến hành trích SDE (Isolation and Concentration of Aroma Compounds, Deborah Roberts and Hugues Brevard, Current Protocols in Food Analytical G1.2.1 - G1.2.9) (Phan Phước Hiền & cs., 2009, 2010, 2011) (Hình 1) Đối với dung môi chiết xuất: Dùng pipet cho lượng dung môi Dichloromethane vào C đến mép vừa chảy tràn qua E Cho nước cất vào C đến mép chảy tràn qua ống D (Hình 1) Vì Dichloromethane khơng hịa tan nước có tỷ trọng nặng nước nên tách lớp nằm đáy C Ta đun bình cầu chứa dung mơi B trước cho dung mơi bão hịa ống ngưng tụ C, sau bắt đầu đun bình cầu A đến nhiệt độ sơi Từ bình cầu A, nước bay lên kéo theo cấu tử bay gạo thơm, lúc với dung mơi bay lên trích cấu tử có độ phân cực phù hợp, tác dụng nhiệt độ thấp thiết bị làm lạnh, phức dung môi - cấu tử bay nước ngưng tụ xuống tách lớp đáy C Thời gian trích li tùy thuộc vào loại mẫu đặc biết mẫu có chứa chất béo, thời gian thường Sau tắt nguồn nhiệt, để nguội khoảng 10 phút, thu hồi phần dung mơi B Cịn phần dung mơi nước C cho vào bình chiết, cho thêm 5ml Dichloromethane Lắc mạnh, chiết thu phần dung môi, làm khan Na2SO4 Dung môi thu hồi thổi khí N2 thể tích giảm xuống khoảng 1ml Lấy 0,1ml dung mơi pha lỗng bình định mức 5ml Bơm 1µl Collidine vào máy GC - MS Nghiên cứu quy trình kỹ thuật chiết xuất sử dụng 2-acetyl-1-pyrroline (2-AP) dứa làm chất chuẩn để phân tích 2-AP gạo thơm Nước lạnh vào Nước ấm Dicloromethane Nước D Lá dứa xay nhuyễn 10ml MgSO4 2ml Collidine µg/ml Nhiệt độ sơi 1,30 E 2ml Dicloromethane Nhiệt độ 65 C C Hình Dụng cụ trích ly SDE 2.3.2 Phân tích dịch chiết thu GCFID GC-MS Điều kiện phân tích thiết bị sắc ký khối phổ HP 6890 N (G1530N) - Agilent Technologies (Mỹ): Inlet: bơm mẫu chế độ khơng chia dịng Giữ điều kiện 2200C phút Thời gian tổng cộng: 38 phút 30 giây 2.3.3 Công thức xác định hàm lượng 2-AP dứa mẫu gạo: Đối với phương pháp SDE Hàm lượng 2-AP xác định theo công thức: Cột: ZB - 5ms 30 m x 0,25 mm x 0,25 µm Nhiệt độ lị: 400C [2-AP]SDE( g/kg)= × Đầu dị MS: 250 C Chương trình nhiệt sắc kí: A: diện tích peak 2-AP Giữ điều kiện đẳng nhiệt 400C phút RF: Response factor: hệ số phản hồi Tăng nhiệt độ 30C/phút 25 phút đến 1150C d: số lần pha loãng 0 Tăng nhiệt độ 30 C/phút đến 220 C m: khối lượng mẫu đem phân tích (kg) 749 Phan Phước Hiền, Trương Thị Bích Liễu KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ta có sắc ký đồ hình 2: 3.1 Xác định peak collidine GC Dựa vào sắc ký đồ ta xác định thời gian lưu colldine 16,627 phút Áp dụng phương pháp phân tích 2-AP Phan Phước Hiền (2009, 2010), sử dụng chất ngoại chuẩn collidine vỉ collidine có tính chất vật lý hóa học tương tự 2-AP có nghĩa chúng có hệ số phản hồi gần Theo phương pháp này, collidine pha loãng nồng độ 10 ppm Bơm µl vào máy GC 3.2 Định tính 2-AP dứa phương pháp SDE kết hợp với GC - MS Sau tiến hành trích ly mẫu dứa phương pháp SDE, dịch trích ly xử lý phân tích hợp chất bay có thiết bị GC -MS ta sắc ký đồ hình 3: Hình Sắc ký đồ phân tích chuẩn collidine 10 ppm - AP Collidine Hình Sắc ký đồ phân tích hợp chất bay có mẫu dứa non 750 Nghiên cứu quy trình kỹ thuật chiết xuất sử dụng 2-acetyl-1-pyrroline (2-AP) dứa làm chất chuẩn để phân tích 2-AP gạo thơm Theo phương pháp này, 2- AP nhận biết sau: dựa vào kết nghiên cứu Bergman (2000), Casey cs (2000), hợp chất 2-AP xuất trước peak chuẩn collidine từ - phút; đặc biệt theo kết nhóm nghiên cứu: (1) Uraiwan Tanchotikul cs (1991), (2) Sugunya Wongponchai cs (2003), (3) Varaporn Sarath (1993) hợp chất 2-AP phân tích qua buồng MS bị bắn phá thành mảnh 43 có khối lượng 43, 68, 83, 111 Kiểm tra kết nghiên cứu này, phân tích mẫu nghiên cứu thiết bị GCMS, thư viện phổ NIST thiết bị cho thấy peak có thời gian lưu Rt 13,052 phút cấu tử 2-AP từ peak cấu tử sau qua buồng MS bị bắn phá thành bốn mảnh có khối lượng 43,68, 83, 111 theo nghiên cứu (Hình 4) 68 Hình Phổ MS hợp chất thời gian lưu 13.052 dứa non 2-AP Collidine - AP Hình Sắc kí đồ phân tích hợp chất bay có mẫu dứa bánh tẻ 751 Phan Phước Hiền, Trương Thị Bích Liễu - AP Collidine Hình Sắc kí đồ phân tích hợp chất bay có mẫu dứa già Như vậy, phương hợp chất 2-AP xác định Rt = 13,052 phút, xuất trước peak collidine 3,57 phút phù hợp với nghiên cứu Bergman (2000), Casey cs (2000) Từ kết qủa này, mẫu dứa gạo thơm khác phân tích định tính định lượng (Hình 6) 3.3 Định lượng 2-AP 2-AP định lượng dựa vào hệ số phản hồi tương đương chất chuẩn collidine Hệ số phản hồi 2-AP ta tính theo chất ngoại chuẩn collidine tính theo công thức sau: Hệ số phản hồi RF = ệ í ố ượ Diện tích peak collidine: 14009069 pA*s Đối với dứa non, diện tích peak 2-AP 58157862 pA*s Từ đó, suy khối lượng 2-AP dứa non bơm vào máy là: m= ệ í = = 0,041514 µg Suy ra, hàm lượng 2-AP dứa non (ng/g): , ∗ = 2,07572 ppb (khối lượng mẫu dứa đưa vào trích ly 20g) Tương tự: Hàm lượng 2-AP dứa bánh tẻ (ng/g): ∗ ∗ Khối lượng collidine bơm vào máy: 0,01µg Suy hệ số phản hồi collidine Hàm lượng 2-AP dứa già (ng/g): ∗ RF = 752 , =1400906900 (pA*s/µg) = 0,737818 ppb ∗ = 1,134134 ppb Nghiên cứu quy trình kỹ thuật chiết xuất sử dụng 2-acetyl-1-pyrroline (2-AP) dứa làm chất chuẩn để phân tích 2-AP gạo thơm Bảng Hàm lượng 2-AP (ng/kg) loại dứa già, bánh tẻ non Diện tích peak (pA*s) Hàm lượng 2-AP (ng/kg) Lá dứa non 58157862 2,07572 Lá dứa bánh tẻ 20672313 737,818 Lá dứa già 31776315 1,134134 Lá dứa 3.4 Xác định LOD LOQ 3.4.1 Phương pháp 1: Dựa ước lượng thị giác Dung dịch chiết bánh tẻ pha loảng lần, 10 lần, 50 lần, 80 lần lần lược phân tích ghi nhận kết tương ứng sắc ký đồ Dựa vào sắc ký đồ mẫu pha loãng 50 lần, ta xác định thị giác nồng độ 2-AP 5,87 ηg/kg, có nghĩa 2-AP phát tin cậy Nếu pha loãng 80 lần thị giác khơng phát - AP Hình Sắc ký đồ GC mẫu dứa bánh tẻ pha loãng 50 lần 3.4.2 Phương pháp 2: Dựa Signal to Noise (tín hiệu nhiễu nền) Xác định tỉ lệ S/N cách so sánh tín hiệu đo từ mẫu với hàm lượng thấp chất phân tích với mẫu trắng thiết lập nồng độ thấp mà chất phân tích phát tin cậy Thơng thường tỷ lệ S/N = sử dụng để tính tốn giới hạn phát Dựa vào sắc ký đồ (Hình 8) mẫu pha lỗng 50 lần, ta tính tỉ lệ S/N: S/N = = 4,83333 >= Ta chấp nhận tỷ lệ hình dạng peak 2-AP nồng độ thấp có tượng doãn chân peak Nếu hạ thấp nồng độ khó xác định peak hợp chất 2-AP 3.4.3 Phương pháp 3: Dựa độ lệch chuẩn tín hiệu hệ số góc Để xác định độ lệch chuẩn hệ số góc, ta dựng đồ thị hiệu chỉnh gồm điểm có diện tích peak nồng độ tương ứng Sau pha loãng lần, 10 lần, 50 lần, tiến hành phân tích GC xác định diện tích peak tương ứng với sắc ký đồ (Bảng 2) 753 Phan Phước Hiền, Trương Thị Bích Liễu S = 2.900 N = 600 Hình Sắc kỹ đồ GC mẫu dứa bánh tẻ pha loãng 50 lần (phóng to) Tương tự, theo cơng thức Butery & cs (1986) trên, ta tính nồng độ 2-AP mẫu pha loãng (Bảng 3) Bảng Diện tích peak 2-AP mẫu pha loãng lần, 10 lần, 50 lần Bảng Nồng độ 2-AP (ηg/kg) mẫu pha loãng Lá dứa bánh tẻ Diện tích peak (pA*s) Nồng độ 2-AP (ηg/kg) Khơng pha lỗng 20672313 737,8198 Pha lỗng lần 8173790 291,7321 Lá dứa bánh tẻ Diện tích peak (pA*s) Pha lỗng 10 lần 1563679 55,80953 Khơng pha lỗng 20672313 Pha loãng 50 lần 164385 5,867092 Pha loãng lần 8173790 Pha loãng 10 lần 1563679 Pha loãng 50 lần 164385 800 y = 4E-05x - 9E-14 R² = ηg/kg 600 400 200 0 10000000 20000000 30000000 diện tích Hình Đồ thị hiệu chỉnh dựa vào diện tích nồng độ 2-AP mẫu bánh tẻ pha loãng 5, 10, 50 lần 754 Nghiên cứu quy trình kỹ thuật chiết xuất sử dụng 2-acetyl-1-pyrroline (2-AP) dứa làm chất chuẩn để phân tích 2-AP gạo thơm Đồ thị xem đường chuẩn khảo sát dựa mẫu có nồng độ chất phân tích khác nhau, giá trị y-intercept đường tuyến tính sử dụng độ lệch chuẩn Cơng thức tính LOD LOQ cho phương pháp này: LOD = 3,3* ơ/S cột giá trị x tương ứng với cột nồng độ 2-AP Và kết độ lệch chuẩn = 4,76456*10-5 Như vậy, ta tính LOD LOQ theo phương pháp là: 4.76456×10^−5 LOD = 3,3× = 3,93 ηg/kg 4×10^−5 4.76456×10^−5 LOQ = 10,0× = 11,911388 ηg/kg 4×10^−5 3.5 Khảo sát hàm lượng 2-AP mẫu gạo Nanh Chồn LOQ = 10* ơ/S Với = độ lệch chuẩn tín hiệu S = hệ số đường hiệu chỉnh Dựa vào đường hiệu chỉnh phương trình ta xác định hệ số đường hiệu chỉnh S = 4*10-5 Để tính độ lệch chuẩn, ta sử dụng phương pháp hồi qui phần mềm MS Excel Có cách tính cho kết tương tự Cách thứ nhất, dùng tính hồi qui (Regression) có sẵn MS Excel Ta cần làm theo bước (wizard) với bảng thống kê sau: Từ xác định độ lệch chuẩn = 4,78*10-5 Cách thứ hai, dùng hàm Steyx (known_y’s, known_x’s) với known_y’s cột giá trị y tương ứng với cột diện tích peak, known_x’s Việc chuẩn bị mẫu gạo giống dứa Sau chuẩn bị mẫu, bơm vào máy sắc ký khí Đối với mẫu Nanh chồn (50 g) peak 2-AP xuất dạng vết, mẫu Nanh chồn (45 g) hàm lượng 2-AP nhiều hơn: Dựa vào sắc ký đồ, ta xác định diện tích peak 2-AP mẫu gạo nanh chồn 263182 pA*s Ta sử dụng đồ thị hiệu chỉnh (hình 10) đường chuẩn hợp chất 2-AP với diện tích nồng đồ tương ứng để xác định hàm lượng 2-AP gạo Như vậy, đối chiếu diện tích peak 2-AP mẫu gạo lên đường chuẩn ta có nồng độ -AP mẫu gạo nanh chồn tương ứng là: [2-AP]nanh chồn 10,52728 ηg/kg = 4*10-5*263182 - 6*10-14 = Bảng Bảng phân tích hồi qui đồ thị hiệu chỉnh (MS Excel) SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R R Square Adjusted R Square Standard Error 4.76E-05 Observations ANOVA df SS MS F Significance F Regression 334939.1348 334939.1 1.47E+14 6.82E-15 Residual 4.57094E-09 2.29E-09 Total 334939.1348 Coefficients Standard Error t Stat P-value Lower 95% Intercept -4.3E-05 3.28512E-05 -1.31241 0.319767 -0.00018 X Variable 3.57E-05 2.94826E-12 12105850 6.82E-15 3.57E-05 755 Phan Phước Hiền, Trương Thị Bích Liễu - AP Hình 10 Sắc ký đồ phân tích hợp chất thơm mẫu gạo nanh chồn Bảng Hàm lượng 2-AP khảo sát mẫu gạo nanh chồn - Hàm lượng 2-AP mẫu gạo nanh chồn 10,52728 ηg/kg mẫu nanh chồn Mẫu gạo Hàm lượng 2-AP (ηg/kg) Nanh chồn Dạng vết Xác định LOD LOQ: Nanh chồn 10,52728 Đối với phương pháp phân tích SDE kết hợp GC sử dụng 2-AP dứa làm chất chuẩn, LOD va LOQ xác định phương pháp sau: KẾT LUẬN Về phân tích định tính 2-AP dứa: Thời gian lưu Rt hợp chất 2-AP xác định phương pháp SDE kết hợp GCFID GC - MS điều kiện phịng thí nghiệm 13,052 phút Hệ số phản hồi 2-AP theo chất ngoại chuẩn collidine 1400906900 pA*s/µg Về phân tích định lượng 2-AP dứa gạo thơm: - Hàm lượng 2-AP dứa thơm Dĩ An, Bình Dương có hàm lượng thấp cụ thể loại dứa non, bánh tẻ, già 2,0757218; 0.7378189; 1,134134 ppb Như vậy, lượng 2-AP diện nhiều dứa non, dứa già dứa bánh tẻ 756 Phương pháp tính LOD (ηg/kg) LOQ (ηg/kg) Dựa ước lượng thị giác 5,87 - Dựa tín hiệu nhiễu 4,833 - Dựa độ lệch chuẩn tín hiệu hệ số góc 3,93 11,91 Trên kết bước đầu ứng dụng phương pháp SDE-GCFID GCMS để chiết xuất sử dụng 2-AP dứa chất chuẩn để phân tích định tính định lượng 2-AP hợp chất thơm khác gạo thơm Do cần khuyến khích tiếp tục nghiên cứu xây dựng thành phương pháp tiêu chuẩn áp dụng rộng rãi việc phân tích đánh giá chất lượng lúa gạo nước ta Nghiên cứu quy trình kỹ thuật chiết xuất sử dụng 2-acetyl-1-pyrroline (2-AP) dứa làm chất chuẩn để phân tích 2-AP gạo thơm TÀI LIỆU THAM KHẢO Casey C Crimm, Christine Bergman, Janis T Delgado and Rolfe Bryant (2001) Screening for - Acetyl - Pyrroline in the Headspace of Rice Using SPME/GC - MS, J Agric Food Chem., 2001, 49(1), tr 245 - 249 David Armbruster, Margaret D.Tillman (1994) Limit of detection (LOD)/ Limit of quantitation (LOQ): Comparison of the Empirical and of the statistical Methods Exemplified with GCMS Assay fo Abuse grugs, Clinical, Chemistry Vol 4/ No pp: 12331238 (1994) Laboratory Management and Utilization Phan Phuoc Hien (2010) Méthodes d’analyse des arômes du riz, Agricultural publishing House Vietnam, 26 international references Phan Phước Hiền, Truong Thị Bích Liễu, Huỳnh Vĩnh Khang, Đỗ Khắc Thịnh (2009) Phân tích so sánh hàm lượng mùi thơm 2-AP dứa (Pandanus amarillifolius) với gạo thơm bàng SPME-GC/GCMS DES-GC/GCMS Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Nông Lâm Lâm nghiệp số 02/2009, tr - 13 Phan Phuoc Hien, Truong Thi Bich Lieu, Nguyen Thi Thu Huong, Huynh Vinh Khang (2009) Analysis and comparison of - Acetyl - 1- pyrroline content in Pandanus’ leaf with aromatic rice by SPME and SDE coupling with GC and GCMS The Analytica Conference 2009, Organized by Vietnam Analytical Science Society (VASS), tr 149 - 156 Paramita Bhattachrjee, Amol Kshirsagar and Rekha S Singhal (2004) Supercritical carbon dioxide extraction of - acetyl - - pyrroline from Pandanus amaryllifolius Roxb, Food Chemistry, 91 (2), June 2005, tr 255 - 259 T Yoshihashi (2002) Quantitative Analysis on Acetyl - - pyrroline of an Aromatic Rice by Stabe Isotope Dilution Method and Model Studies on its Formation during Cooking, Jounal of Food Science, 67 (2), March 2002, tr 619 - 622 757 ... tiêu chuẩn áp dụng rộng rãi việc phân tích đánh giá chất lượng lúa gạo nước ta Nghiên cứu quy trình kỹ thuật chiết xuất sử dụng 2-acetyl-1-pyrroline (2-AP) dứa làm chất chuẩn để phân tích 2-AP gạo. .. - MS Nghiên cứu quy trình kỹ thuật chiết xuất sử dụng 2-acetyl-1-pyrroline (2-AP) dứa làm chất chuẩn để phân tích 2-AP gạo thơm Nước lạnh vào Nước ấm Dicloromethane Nước D Lá dứa xay nhuyễn 10ml... phân tích chuẩn collidine 10 ppm - AP Collidine Hình Sắc ký đồ phân tích hợp chất bay có mẫu dứa non 750 Nghiên cứu quy trình kỹ thuật chiết xuất sử dụng 2-acetyl-1-pyrroline (2-AP) dứa làm chất