Góp phần nghiên cứu bài thuốc đông dược điều trị thiểu năng tuần hoàn não

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯÒNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI DS NGU YỄN T H Ị N H Ư HOA GÓP PHẨN NGHIÊN cứu BÀI THUỐC ĐỒNG Dược ĐIỂU TRỊ THIỂU NĂNG TUẦN HOÀN NÃO m LUẬN ÁN THẠC sĩ Dược HỌC CHUYÊN NGÀNH : Dược LÝ - Dược LÂM SÀNG MÃ SỐ : 3.02.02 Cán hướng dẫn khoa học : PGS.TS Mai Tất TỐ PGS.TS B ế Thị Thuấn HÀ NỘI - 2000 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân th n h cảm ơn P G S T S Mai T ấ t Tố, P G S T S B ế Thị T h u ấ n ìà thầỵ, trực tiếp h n g dẫn n h iệ t tình g iú p đ ỡ tơi thự c n g trình n g h iên cứu nàỵ X in cảm ơn GS Trịnh Văn Bảo, P G S T S Đ Văn Phan, TS L ê Văn Sơn, P G S T S P hạm Q uang Tùng, P G S T S B ùi Kim Liên cù n g tồn th ể th ầ ỵ giáo, cô kỹ th u ậ t viên tro n g m n DưỢc lực, m ô n DưỢc liệu ưà p h ò n g ban T rư ờng Đại học D ược H Nội, m ô n Y sin h học - Di tru yền , m ô n D ược ỉỷ trư n g Đọi học Y ưà m n S in h ìỷ h ọ c H ọ c viện Q uân ỵ g iú p đ ỡ tơi hồn th n h n g trìn h nàỵ Hà Nội, ngày 18 tháng 01 năm 2000 DS NGUYỄN THI NHƯ HOA _ _ _ ^ _ _ w _ CẢC CHŨ V IE T T A T AS : Á nh sáng N /c : Nghiên cứu NST : N hiễm sắc thể p.ư : Phản ứng TNTHN : Thiểu tuần hoàn não TT : Thuốc thử SKG : Sắc ký giấy SKLM : Sắc ký lớp m ỏng MỤC LỰC Trang ĐẶT VẤN ĐỂ .1 PHẦN - TỔNG QUAN 2.1 Một số nét bệiili TNTHN 2.1.1 Sơ giải phẫu sinh lý liên quan đến TNTHN .3 2.1.2 Một số biểu lủm sàng TNTHN 2.1.3 Các thuốc điều trị TNTHN 13 2.2 Các vị thuốc thuốc nghiên cứu điều trị TN TH N 15 PHẦN - NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN u 18 3.1 Nguyên liệ u 18 3.2 Phương pháp nghiên cứu 18 PHẦN - THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 20 4.1 Nghiên cứu thành phần hoá học chế phẩm 20 4.1.1 Định tíiili nhóm chất chíiih 20 4.1.2 Chiết xuất, phân lập nhận dạng coum arin 32 4.2 Nghiên cứu số tác dụng dược lý 37 4.2.1 Nghiên cứii độc tính c p 37 4.2.2 Nghiên cứu độc tính bán cấp 37 4.2.3 Đáiih giá khả gây đột biến chế phẩm, 45 4.2.4 TTiăm dò ảnh hưởng chế phẩm phát triển phôi thai chuột có ch a 48 4.2.5 Nghiên cứu ảnh hirởng chế phẩm hoạt động điện não th ỏ 51 PHẦN -BÀN LUẬN 55 PHẦN - KỂT LUẬN VÀ ĐỂ NGHỊ 58 TẰI LIỆU THAM KHẢO 60 ĐẶT VẤN ĐỂ T ^hiểu tuần hoàn não (TNTHN) hội chứng bệnh lý với biểu lâm sàng khác nhmig có chế bệnh sinh giảm lưu lưọfng tuần hoàn não [26] Thiểu tuần hoàn não thường xẩy người có độ tuổi từ trung niên trở lên, người cao tuổi lao động tií óc Những người bị TNTHN đặc biệt TNTHN mãn tứih khơng điều trị kịp thòi chuyển sang tai biến mạch máu não [17], [26] Theo thống kê Tổ chức Y tế tìiế giói (WHO) tỷ lệ người bị tai biến mạch máu não tạm thời 12 nước phát triển chiếm tìr 0,2-0,5 % dân số [20] Phát điều trị sớm biểu TNTHN hạ thấp tỷ lệ tai biến mạch máu não - hạ thấp tỷ lệ tàn phế tử vong vốn râ't cao (đứng hàng thứ ba sau bệnh ung thư tim mạch) [16], [18] Cho đến nay, điều trị TNTHN nội khoa vãn xu hướng chủ yếu Việt Nam mà giới Điều trị ngoại khoa (loại bỏ mảng xơ vữa, nối mạch ) định số trường hợp có tai biến mạch máu não tạm thời hay thực thụ [26] Điều trị TNTHN nội khoa dùng thuốc biện pháp không đùng thuốc Biện pháp khơng dùng thuốc có chế độ ăn uống, chế độ luyện tâp chế độ lao động, nghỉ ngơi, biện pháp quan tâm điều trị dự phòng [16], [20] Cầc thuốc tân dược điều trị TNTHN có nhiều loại khác vinpocetin, cinnarizin, lucidril, piracetam, v.v Các thuốc có vai trò Tắt lớn việc điều trị TNTHN, ngăn ngừa tai biến mạch máu não Tuy nlìiên, chúng nhiều hạn chế nhiều tiirờiig hợp bệnh thuyên giảm tạm thời (điều trị triệu chứng) Các thuốc tân dược có nguồn gốc hố học nhiều có ảnh hưởng đến gan, thận giá thành thường cao,v.v [26] v ề mặt Y học cổ truyền, chưa có Iihững tài liệu nghiên cứu sâu bệnh daiứi "tai biến mạch máu não", "Nam dưọ'c thần hiệu" Tuệ Tĩnh (thế kỷ XIV) "Âm án, clưong án" Hải Tliượng Lãn ô ng (Thế kỷ x v i n ) đề cập đến số triệu chúiig giống triệu chứiig TNTHN : đầu thống (đau đầu), huyền vững (hoa mắt, chóng mặt), thất miên (mất ngủ), kiện vong (giảm trí nhớ), v.v Trong nhữiig năm gần có số thuốc Đông dược điều trị thiểu tuần hoàn não thuốc hoạt huyết CM2 (Viện Quân y 103) [15], thuốc MD (Viện Y học cổ tmyền Dân rộc Quân đội) [9] Để góp phần làm pliong phú thuốc điều trị TNTHN, tiến hành nghiên cứu thuốc đông dược điều trị TNTHN gồm vị dược liệu sẵn có nước Bài thuốc PGS.TS Mai Tất Tố số cộng nghiên cứii sơ thành phần hoá học, số tác dụng dược lý : tác dụng tim ếch cô lập, tác dụng huyết áp, tác dụng mạch tai thỏ Trong khuôn khổ đề tài này, tiếp tỊic nghiên cứu ; Nghiên cứii thành phần hoá học c h ế phẩm: - Định tính nhóm chất - Chiết xuất phân lập số chất Nghiên cícu số tác dụng dược lý : - Xác địiili độc tính câp, độc tính bán trường diễn - Đánh giá khả gây đột biến chế phẩm nghiên cứii chuột Iihắt trắng - Thăm dò ảnh hưởnt:^ chế phẩm nghiên cứu phát triển phơi thai chuột có chửa - Ảnh hưởng chế phẩm ns^hiẻn cúli hoạt động điện não thỏ PH Ẫ N x TỔNG QUAN 2.1 MỘT SÔ NÉT VỂ BỆNH TNTHN 2.1.1 wSơ giải ph ẫu sinh lý liên q u an đến T N T H N : 2.1.1.1 Sự tưới máu «ão [12], [14], [26] Não tưới máu bỏi cặp động mạch là: Hai động mạch cảnh hai động mạch đốt sống, mạch máu não có tiếp nối phong phú Người ta chia hệ thống nối thơng tuần hồn não ba mức : - Hệ thống nối thông mức I : Giữa động mạch lớn (động mạch cảnh trong, cảnh động mạch đốt sống) + Động mạch cảnh - Động mạch cảnh qua động mạch mắt, động mạch xương đá, động mạch xoang hang + Động mạch đốt sống- Động mạch cảnh qua động mạch chẩm + Động mạch dưổd đòn - Động mạch cảnh qua động mạch cổ lên, cổ sâu - Hệ thống nối thông mức : Giữa động mạch nằm sọ, qua đa giác Willis Đây vùng nối quan trọng việc lưu thông máu hai bán cầu -H ệ thống nối thông mức : (giữa nhánh động mạch vỏ não) Đây tiếp nối nhánh nông động mạch nhánh nông động mạch (động mạch não giữa, não tmớc, não sau) với Bình thường hệ thống nối thơng khơng hoạt động, có biến cố tắc mạch có liai thơng máu não Mặc dù có vòng nối phong phú máu theo hệ thống không chảy lẫn lộn từ khu vực mạch máu sang khu \ạrc mạch máu khác Khi có biến cố tắc mạch, chênh lệch huyết áp bên lành có huyết áp cao dồn máu tới bù cho bên liệt Tuần hoàn não chia làm hai kliu vực tưới máu: + Tuần hoàn ngoại vi : nhánh nông nhánh tận động mạch não giữa, não tiiĩớc, não sau tạo thành, tưới máu cho vỏ não lóp chất trắng vỏ + Tuần hoàn trung tâm : nhánh sau nháiìh tận sâu vào trung tâm não, tưới cho nhân xám tmng ương, sau nơng tận lớp chất trắng vỏ Giữa hai khu vực ngoại vi trung tâm (khu vực nông sau, vùng chất trắng vỏ) khu vực giáp ranh, mạch nối quan trọng gọi vùng tới hạn (critique zone) Tuần hồn ngoại vi có áp lực thấp có phân chia nhánh nối với phong phú, khu vực trung tâm nhánh tận chịu áp lực cao 2.1.1.2.Cung lượìig máu não [26] Qing lượng máu não lượng máu qua não đơn vị thời gian Bình thường cung lượng máu não khoảng 750ml/phút Nếu tính theo phương pháp Kety Schmidt [39] cung lượng máu não tiung bình cho chất xám chất trắng khoảng 55 ml/lOOg/phút lưu lượng cho chất xám cao hỏfn : 79,7ml/100g/phút, chất trắng 20,9ml/100g/phút, tiểu não: 3,3ml/100g/phút, thân não: 29,2 ml/lOOg/phút, đồi thị 103 ml/lOOg/phút Cung lượng khơng biến đổi theo cung lượng íim Khi ngủ, cung lượng tuần hoàn não tới 173% so với thức, thức dậy cung lượng tuần hoàn não giảm đột ngột, trẻ em, cung lượng tuần hoàn não khu vực lớn người lớn, đến khoảng 60 tuổi cung lưọfng tuần hồn não giảm xuống nhanh chóng Tốc độ tuần hoàn qua não nhanh, từ giây máu từ động mạch lớn cổ đến động mạch não, giây thứ hai vào hệ thống mao mạch, thời gian tuần hoàn qua não người lóti trung bìnli từ 6-10 giây, tốc độ tăng theo lứa tuổi Não tiêu thụ oxy 22% (3,3-3,8ml oxy/1 OOg/phút) lượng oxy cung cấp cho toàn thể 5,6 mg glucose/lOOg/phút e6 0,05 > 0,05 p Bảng 16 cho thấy : - Chế phẩm nghiên cứu khơng tác động đến phát triển bình thường phôi thai chuột Các số chuột chuột mẹ, số thai sống hai nhóm khơng có chênh lệch có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) 50 - Tỷ lệ bất thường thai sản thai chết sớm (sẩy thai), thai chết muộn khơng có khác biệt hai Iihóm - Khơng có chuột bị dị tật bẩm siiih hai nhóm 4.2.5 Nghiên cứu ảnh hưỏTig chế phẩm hoạt động điện não thỏ Tiến hành thí nghiệm 10 thỏ khoẻ mạnh, kliơng phân biệt giống đực cái, cân nặng từ 1,8 đến 2,5kg Thỏ ni điều kiện phòng thí nghiệm Sinh lý Học viện Quân Y Dựa theo Atlas Bures cộng (1960) máy địiih vị hãng Medicor (Hungary) tiến hành phẫu thuật cấy điện cực vào số vùng cùa não thỏ: Vùng cảm giác - vận động vỏ não,thể lưới thân não nhân đỏ não Sau đặt điện cực, chờ thỏ làiili hẳn vết mổ trở lại bình thường tiến hành đo điện não.Sau đó,hàng ngày cho thỏ uống chế phẩm nghiên cứu tương đương với liều 0,2g/kg cân nặng Sau ngày uống chế phẩm nghiên cứu liên tục, ghi lại điện não thỏ máy Neuropax - hãng NfflON KOHDEN (Nhật) Đánh giá tác dụng chế phẩm nghiên cứu lên hệ thán kiiih tmng ương qua biến đổi biên độ tỷ lệ thành phần sóng điện não đổ ghi từ vùng cảm giác - vận động vỏ não, thể lưới thân não nhân đỏ não Kết trình bày bảng 17, hình X bảng 18 51 Bảng 17; Biên độ sóng điện não thỏ ghi trước sau khỉ uống ch ế phẩm (tính theo giá trị trung bình) n = 10 Biên độ sóng (ịiV) Vùng ghi điện não Tiiĩớc uống chế phẩm Vỏ não 287,16+41,83 209,66±50,66 0,05 Nhận x é t: - Tiirớc uống chế phẩm thành phần sóng denta chiếm ưu (43% 53 vỏ não, 42% thể lưới 39% Iihân đỏ) - Sau uống chế phẩm ngày thành phần sóng denta điện não đồ ghi cấu tiTÍc não giảm cách có ý nghĩa thống kê (p