Ảnh hưởng của việc bổ sung Curcumin trong thức ăn đến khả năng sinh trưởng và đáp ứng miễn dịch ở gà thịt thương phẩm

Đề cương nghiên cứu khoa học MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Với phát triển nhanh chóng xã hội, mức sống người dân Việt Nam dần cải thiện, với tỷ lệ tiêu thụ thịt trứng đầu người ngày tăng Ngành chăn nuôi gà thịt chiếm tỷ lệ quan trọng sản xuất chăn nuôi Việt Nam Tiêu thụ thịt gà mức kg/người vào năm 2015 dự kiến tăng gấp đôi vào năm 2021 Sản lượng hàng năm khoảng triệu thịt (Stuart Lumb, 2018) Để cải thiện hiệu sản xuất trì sức khỏe động vật, lượng chất kháng sinh thường thêm vào thức ăn dạng chất kích thích tăng trưởng (AMGP) Trong năm gần đây, với việc nghiên cứu sâu vai trò kháng sinh, nhược điểm ngày trở nên bật Biểu là: kháng sinh ức chế tiêu diệt mầm bệnh đồng thời ức chế chí tiêu diệt vi khuẩn có lợi thể, gây bệnh đường tiêu hóa động vật, đặc biệt khủng hoảng vấn đề “kháng kháng sinh” Và ăn phải sản phẩm động vật có chứa kháng sinh gây nguy hiểm trực tiếp đến sức khỏe người Do đó, cách hiệu tìm chất giúp tăng cường chức phòng vệ tự nhiên động vật, tránh sử dụng kháng sinh rộng rãi (Verstegen Wiliams, 2002) Curcumin (Diferuloylmethane), polyphenol tự nhiên, thành phần hoạt tính củ nghệ (Curcuma longa) chất phụ gia quan trọng ngành công nghiệp thực phẩm sử dụng chất chống oxy hóa để ngăn ngừa hư hỏng thực phẩm (Stankovic, 2004) Các nghiên cứu phát chất curcumin có nhiều tác dụng dược lý Sa Das (2008) báo cáo chất curcumin có tác dụng phòng ngừa điều trị bệnh khác nhau; Priyadarsini cs (2003) Miriyala cs (2007) nghiên cứu chất curcumin ngăn chặn phản ứng gốc tự loại bỏ gốc tự dư thừa thể; Hatcher cs (2008) curcumin chất làm gốc tự do, chất cho hydro thể hoạt tính chống oxy hóa Những chức sinh lý độc đáo curcumin làm cho trở thành loại phụ gia thức ăn chức Đặc biệt gà thịt, chế độ ăn bổ sung thêm curcumin giải pháp thay kháng sinh mối quan tâm nhiều người Theo nghiên cứu Allen cs (1998) gà, chế độ ăn bổ sung 1% củ nghệ Võ Phạm Danh Đề cương nghiên cứu khoa học giúp cải thiện tăng cân, giảm tổn thương đường ruột tiết lượng noãn bào Curcumin phát huy tác dụng chống vi trùng tác dụng chống oxy hóa hệ miễn dịch Một nghiên cứu khác Rajput cs (2013) việc bổ sung curcumin mức 200 mg/kg thức ăn giúp tăng cường hiệu suất tăng trưởng, FCR gà thịt Zhang cs (2015) nhận thấy việc bổ sung curcumin giúp ngăn ngừa suy giảm hiệu suất tăng trưởng ảnh hưởng stress nhiệt lên gà Tất điều chứng tỏ curcumin có ảnh hưởng tới khả sinh trưởng đáp ứng miễn dịch gà thịt Vì việc xác định đánh giá hiệu lực, tỷ lệ pha trộn Curcumin phần thức ăn gà thịt để đảm bảo tăng suất khả miễn dịch gà nên vấn đề quan trọng cần thiết Đồng thời, dựa kết thu thập đưa đề nghị ứng dụng thực tế phát triển chăn nuôi gà thịt Việt Nam Xuất phát từ liệu thực tế trên, hướng dẫn PGS TS Chế Minh Tùng, thực đề tài: “Ảnh hưởng việc bổ sung Curcumin thức ăn đến khả sinh trưởng đáp ứng miễn dịch gà thịt thương phẩm” Mục đích đề tài Đánh giá mức độ ảnh hưởng, tỷ lệ pha trộn Curcumin phần thức ăn đến việc tăng suất khả miễn dịch gà thịt Yêu cầu Tiến hành thí nghiệm bổ sung Curcumin vào thức ăn cho gà thịt thương phẩm Theo dõi, ghi nhận khối lượng thể gà, lượng thức ăn tiêu thụ, số túi Bursa, tỷ lệ nuôi sống, độ đồng đàn Lấy máu theo dõi kháng thể, từ đánh giá hiệu Curcumin khả miễn dịch gà thịt Võ Phạm Danh Đề cương nghiên cứu khoa học CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN Giới thiệu gà thịt Gà thịt hay gà lấy thịt hay gà hướng thịt hay gà thịt thương phẩm giống gà lai tạo, chọn lọc để chăn nuôi nhằm mục đích chuyên việc sản xuất thịt gà (Kruchten Tom, 2002) Gà thịt có đặc điểm chung tầm vóc lớn, tốc độ sinh trưởng nhanh, thể có dạng hình khối vng, lơng phát triển khơng ép sát vào thân, màu lông đa dạng, đầu to, cổ ngắn, mỏ to chắc, ngực sâu rộng, lưng dài, rộng, phẳng, đùi lườn phát triển, xương thô, thành thục muộn, ấp bóng cao nên sản lượng trứng thấp (150-170 trứng/năm), khối lượng trứng lớn (58-60 g/quả), thường có ấp trứng cao Tỷ lệ thụ tinh ấp nở thấp Tính tình hiền lành, chậm chạp, tiếng khả cho thịt Được sử dụng nhiều để tạo giống gà chuyên thịt cao sản Đại diện tiêu biểu giống gà Cornish Hình 1: Gà Cornish trống Hình 2: Gà Cornish mái (Nguồn: Pinterest, chia sẻ Melissa Reynolds Jack Poe) Các giống gà thịt gà công nghiệp, tiếng giới gà Ross, Arbor Acres, Cobb, Hubbard, ISA, Lohmann, Hybro Ngồi có gà Tam hoàng, gà Lương Phượng, gà Ri, gà Tàu Vàng, gà Đông Cảo … Gà sống khoảng năm hay hơn, nhiên nuôi gà lấy thịt 4-7 tuần đạt kích cỡ giết thịt (Bessei, 2006) Võ Phạm Danh Đề cương nghiên cứu khoa học Hình Gà Ross (Nguồn: Pinterest, chia sẻ Neysa Summers) Giới thiệu Curcumin Curcumin có nguồn gốc từ Curcuma longa, thành phần củ nghệ, loại gia vị màu vàng sử dụng tiểu lục địa Ấn Độ, khơng cho chăm sóc sức khỏe mà cho việc bảo quản thực phẩm làm thuốc nhuộm màu vàng cho hàng dệt may Curcumin thành phần curcuminoit – chất củ nghệ thuộc họ Gừng (Zingiberaceae) sử dụng gia vị phổ biến Ấn Độ Có hai loại curcuminoit khác desmethoxycurcumin bis-desmethoxycurcumin Các curcuminoit polyphenol chất tạo màu vàng cho củ nghệ Curcumin tồn dạng tautome keto enol Cấu trúc dạng enol ổn định mặt lượng pha rắn dạng dung dịch (Kolev cs, 2005) Curcumin sử dụng để định lượng bo gọi phương pháp curcumin Nó phản ứng với axít boric tạo hợp chất màu đỏ, gọi rosocyanin.Curcumin có màu sáng đậm dùng để tạo màu cho thực phẩm chất phụ gia, biết tới với tên gọi E100 2.1 Lịch sử nghiên cứu Curcumin Từ xa xưa nhiều nước phương Đông phương Tây sử dụng loại gia vị dược liệu trị bách bệnh Tuy nhiên, đến tận bây giờ, khoa học đại nhận nhiều giá trị siêu thực phẩm chức tự nhiên Củ nghệ bắt đầu sử dụng y học Ayurveda Ấn Độ từ khoảng năm 1900 TCN để chữa trị loạt loại bệnh tật (Aggarwal cs, 2007) Nghiên cứu nhà khoa học vào cuối kỷ XX xác định curcumin đóng vai trò quan trọng hoạt tính Võ Phạm Danh Đề cương nghiên cứu khoa học sinh học củ nghệ (Aggarwal cs, 2007) Sau đó, du nhập sang số nước châu Á, châu Phi vùng Caribe Từ đó, người bắt đầu khám phá lợi ích bất ngờ Curcumin sức khỏe củ nghệ lại sử dụng phổ biến Người Ấn Độ dùng củ nghệ làm gia vị phổ biến cà ri dùng thảo dược thuốc Ayurvedic, chữa nhiều bệnh từ viêm khớp muộn 2.2 Cấu trúc hóa học Curcumin Curcumin phân tử đối xứng, gọi diferuloyl methane Tên gọi Curcumin theo tổ chức IUPAC (Liên minh Quốc tế Hóa học Hóa học ứng dụng) (1E, 6E)-1,7-bis (4-hydroxy-3-metoxyphenyl)-1,6-heptadiene-3,5-dione Với cơng thức hóa học: C21H20O6, có khối lượng phân tử 368,38 Cấu trúc Curcumin gồm phần: hai vòng thơm có chứa nhóm phenol o-methoxy, nối với mối liên kết Cacbon bao gồm α, β-không no β-diketone Trong trạng thái tinh thể, Curcumin tồn cấu hình -enol cis, với liên kết cộng hoá trị liên kết kết hydro Nó có cấu trúc gồm ba mạch thẳng kết nối với thô thông qua hai liên kết đôi Trong hầu hết dung môi không phân cực phân cực yếu, dạng enol thường ổn định so với dạng keto Do tiếp hợp mở rộng, đám mây electron có liên kết π phân tử Trong dung dịch tồn đồng phân cis-trans Cấu trúc curcumin xác định lần vào năm 1910 (Kazimierz Kostanecki, J Miłobędzka and Wiktor Lampe) Hình 4: Cấu trúc Curcumin Nguồn: Soheil Zorofchian Moghadamtousi cs, 2014 Võ Phạm Danh Đề cương nghiên cứu khoa học A B Hình 5: Dạng Ketol (A) Enol (B) Curcumin 2.3 Sử dụng Curcumin y học Củ nghệ bắt đầu sử dụng y học Ayurveda Ấn Độ từ khoảng năm 1900 TCN để chữa trị loạt loại bệnh tật (Aggarwal cs, 2007) Nghiên cứu nhà khoa học vào cuối kỷ XX xác định curcumin đóng vai trò quan trọng hoạt tính sinh học củ nghệ (Aggarwal cs, 2007) Dựa nghiên cứu ống nghiệm (in vitro) động vật, nhà khoa học đưa giả thuyết khả chữa bệnh ngăn ngừa bệnh curcumin Hiện tại, tác động chưa xác nhận người Tuy nhiên, năm 2008, nhiều thử nghiệm lâm sàng người thử nghiệm để nghiên cứu tác dụng curcumin việc điều trị bệnh như: viêm tủy, ung thư tụy, hội chứng loạn sản tủy, ung thư ruột kết, bệnh vẩy nến, bệnh Alzheimer (Hatcher cs, 2008) Theo nghiên cứu cho thấy curcumin có tính chất chống ung thư (Aggarwal cs, 2006; Choi cs, 2006), chống ơxi hóa, chống viêm khớp, chống thối hóa, chống thiếu máu cục (Shukla cs, 2008) kháng viêm (Stix Gary, 2007) Khả kháng viêm ngăn chặn tổng hợp sinh học eicosanoit Curcumin làm vơ hiệu hóa tế bào ung thư ngăn chặn hình thành tế bào ung thư Curcumin giúp thể phòng ngừa chống ung thư chất có triển vọng lớn điều trị viêm gan B, C nhiễm HIV Rất nhiều chứng cho thấy curcumin phát triển chức tinh thần, điều tra 1010 người châu Á ăn bột cari vàng độ tuổi 60-93 cho thấy người ăn lần tháng cho kết MMSE cao so với người không ăn Theo quan điểm nhà khoa học, số lớn nghiên cứu cho thấy curcumin có tác dụng tốt cho não, notron, giảm stress, trầm cảm, trạng thái lo âu Curcumin Võ Phạm Danh Đề cương nghiên cứu khoa học can thiệp vào hoạt động chép NF-κB liên kết bệnh viêm ung thư Một nghiên cứu tác dụng Curcumin ung thư năm 2009 cho thấy Curcumin điều chỉnh phát triển tế bào u, bướu thông qua trình phân chia thường xuyên tế bào Curcumin có khả tiêu diệt tế bào mầm ung thư – nguồn gốc bệnh ung thư Vì vậy, nói curcumin cơng ung thư cách tồn diện Curcumin có tác dụng giảm đau, kháng viêm mạnh aspirin, ibuprofen… Do curcumin có khả kích thích tuyến thượng thận tiết cortisone – loại hormon làm giảm sưng tấy dị ứng Ngoài Tinh bột nghệ curcumin thảo dược ưa chuộng việc chăm sóc sắc đẹp cho phụ nữ, đặc biệt tốt với phụ nữ sau sinh 2.4 Nhược điểm curcumin Mặc dù có nhiều ưu điểm tinh chất Curcumin lại có nhược điểm cực lớn khơng tan nước Do đó, độ hấp thu curcumin thấp (chỉ khoảng 2%) để đạt hiệu phải dùng liều lớn liên tục thời gian dài Nhưng theo Kawanishi cs (2005), curcumin giống chất chống oxy hóa khác, dao hai lưỡi Các nghiên cứu lâm sàng người với 2-12g curcumin cho thấy tác dụng phụ buồn nôn, tiêu chảy, rối loạn chuyển hóa sắt chặn protein hepcidin, có khả gây thiếu sắt bệnh nhân mẫn cảm Các nghiên cứu cho thấy nghệ Curcumin gây tăng chảy máu Trong số trường hợp, thuốc tiêm natri curcuminate báo cáo gây nhịp tim chậm hạ huyết áp Ảnh hưởng Curcumin lên gà thịt 3.1 Ảnh hưởng Curcumin lên sinh trưởng gà thịt Việc sử dụng curcumin chế độ ăn uống làm giảm đáng kể tác động tiêu cực stress lạnh lên tăng cân thể FCR so với phần ăn kiểm soát Hiệu suất tăng trưởng FCR gà thịt cải thiện với việc bổ sung bột nghệ chế độ ăn g/kg (Durrani cs, 2006) chế độ ăn g/kg (Salih, 2013) Ahmadi (2010) báo cáo việc bổ sung 0,3 0,6 g/kg nghệ vào chế độ ăn uống bị nhiễm aflatoxin cải thiện tăng cân FCR, không ảnh hưởng đến lượng thức ăn Ngược Võ Phạm Danh Đề cương nghiên cứu khoa học lại, bổ sung chế độ ăn uống với mức bột nghệ khác không ảnh hưởng đến tăng cân (Nouzarian cs, 2006) FCR (Emadi Kermanshahi, 2006) Curcumin gây tăng sản xuất mật tăng cường tiêu hóa chất béo (Al-Sultan Gameel, 2004) , chất tiết lipase, amylase protease đóng vai trò quan trọng việc đẩy nhanh q trình tiêu hóa chất chúng (Platel Srinivasan, 2010), cách cải thiện tiêu thụ sản phẩm tiêu hóa (Hernandez cs, 2004) mang lại hiệu hiệu suất tăng trưởng nguồn cấp liệu tốt Do ảnh hưởng curcumin dẫn xuất việc bảo vệ hemoglobin khỏi trình oxy hóa (Unnikrishnan Rao, 1995), bổ sung chế độ ăn uống với curcumin cải thiện độ bão hòa oxy hemoglobin gà bị stress lạnh so với phần ăn kiểm soát HTC cao số quan trọng tình trạng thiếu oxy máu (Bautista-Ortega cs, 2014) Bổ sung chế độ ăn uống với mức độ khác chất curcumin làm giảm tác dụng phụ stress lạnh phản ánh cách giảm tỷ lệ RV / TV Nó chứng minh bột nghệ làm giảm huyết áp động mạch chuột, tắc nghẽn dòng Ca + ngoại bào ức chế giải phóng Ca 2+ nội bào từ cửa hàng nhạy cảm inositol-1,4,5-triphosphate (Adaramoye cs, 2008) 3.2 Ảnh hưởng Curcumin đến đáp ứng miễn dịch gà thịt Curcumin, biết đến với hiệu điều trị nó, đặc biệt ung thư, công nhận chất điều biến mạnh hệ thống miễn dịch Curcumin chứng minh có tác dụng điều hòa miễn dịch số tế bào quan hệ miễn dịch (Jagetia Aggarwal, 2007) Một số nghiên cứu báo cáo chất curcumin điều chỉnh gia tăng kích hoạt tế bào T Nó báo cáo curcumin làm giảm gia tăng tế bào T gây hợp chất concanavalin A (Con A), phytohemagglutinin (PHA), phorbol-12-myristate-13acetate (PMA) (Ranjan D cs.,2004) Nó chứng minh làm giảm sản xuất IL2 thông qua điều chế đường NFκB (Ranjan D cs, 1998) Nó vừa ức chế vừa kích thích tăng sinh tế bào T tùy thuộc vào bối cảnh liều dùng Nghiên cứu Tomita cs chất curcumin ngăn chặn gia tăng Võ Phạm Danh Đề cương nghiên cứu khoa học tế bào T bị nhiễm HTLV-1 tế bào ATL thơng qua việc bắt giữ chu kỳ tế bào cách điều chỉnh Cyclin D1, Cdk1 Cdc25C cảm ứng apoptosis XIAP điều chỉnh sống sót (Tomita cs, 2006) Một nghiên cứu khác Hussain et al thực tế bào T bạch cầu lymphoblastic cấp tính cho thấy chất curcumin ức chế mục tiêu hoạt hóa PI3-kinase (AKT, FOXO GSK3) tế bào T dẫn đến ức chế tăng sinh khởi phát apoptosis phụ thuộc caspase (Hussain cs, 2006) Tuy nhiên nghiên cứu khác cho tác dụng curcumin tế bào T phụ thuộc vào liều Curcumin liều thấp làm tăng gia tăng tế bào lympho lách, chất curcumin liều cao làm giảm chuột ( Li Liu, 2005) Curcumin chứng minh điều chỉnh hoạt động đại thực bào ức chế tạo ROS đại thực bào Nó thúc đẩy tăng sinh thực bào đại thực bào phúc mạc chuột (Joe Lokesh, 1994) Curcumin có hiệu chống lại dòng tế bào lympho tế bào T tự nhiên kẻ giết người, nơi thúc đẩy trình apoptosis cách điều chỉnh đường NFκB tắc nghẽn BCL-XL, Cyclin D1, (Kim cs, 2005a) Một báo cáo khác cho thấy chất curcumin ngăn chặn biểu kháng nguyên CD80, CD86 lớp II tế bào đuôi gai Curcumin ngăn chặn giải phóng cytokine gây viêm IL1β, IL6 TNFα từ tế bào gai kích thích LPS Curcumin chứng minh điều chỉnh phosphoryl hóa MAPK dịch chuyển hạt nhân NFκB tế bào dendritc ( Kim cs, 2005b) Một số nghiên cứu khác xác nhận chất curcumin có tác dụng tích cực khả miễn dịch chống khối u Varalakshmi báo cáo tiêm kéo dài chất curcumin tác động bất lợi hệ thống miễn dịch, thay vào họ trì mức độ sản xuất cytokine Th1, hoạt động độc tế bào NK tạo loại oxy phản ứng oxit nitric đại thực bào (Varalakshmi cs, 2008) Các nghiên cứu in vivo liên quan đến chuột mang tế bào ung thư cổ tử cung cho thấy tác dụng tương tự chất curcumin hệ miễn dịch Nó chứng minh quyền curcumin chuột mang khối u dẫn đến ức chế apoptosis gây khối u hai tế bào lympho tế bào lympho, khơi phục số lượng tế bào miễn dịch hồi quy Võ Phạm Danh Đề cương nghiên cứu khoa học thành công khối u (Pal cs, 2005) Như vậy, nghiên cứu trước cho thấy số ảnh hưởng tích cực việc sử dụng curcumin thức ăn chăn nuôi Tuy vậy, tác dụng curcumin việc cải thiện suất, sức kháng bệnh đáp ứng miễn dịch tùy thuộc vào liều lượng sử dụng curcumin Hiện nay, Việt Nam chưa có nhiều nghiên cứu liên quan đến việc bổ sung curcumin thức ăn gia cầm Vì vậy, việc nghiên cứu ảnh hưởng curcumin đến suất đáp ứng miễn dịch gà thịt cần thiết Điều góp phần khai thác tối đa lợi ích curcumin để ứng dụng hiệu điều kiện chăn nuôi thực tế hướng tới chăn nuôi bền vững giải pháp giúp vật nuôi tăng trưởng tự nhiên, hướng tới mục tiêu không dùng kháng sinh chất tăng trưởng Võ Phạm Danh 10 Đề cương nghiên cứu khoa học CHƯƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thời gian địa điểm Thời gian: Thí nghiệm thực từ tháng 12/2018 đến tháng 3/2019 Địa điểm: Trại Nghiên cứu Ứng dụng phòng thí nghiệm thuộc Bộ mơn Chăn ni Chun khoa, Khu Thực nghiệm, Trường Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Nội dung phương pháp nghiên cứu 2.1 Thí nghiệm So sánh ảnh hưởng đến tăng trưởng khả đáp ứng miễn dịch đến gà thịt thương phẩm bổ sung Curcumin với hàm lượng khác ✓ Mục tiêu Xác định ảnh hưởng Curcumin đến khả tăng trọng, thể tích lách, gan, nồng độ oxy hóa gan tăng cường kháng thể tuyến giáp gà thịt thương phẩm ✓ Bố trí thí nghiệm Thí nghiệm tiến hành 240 gà, giống Ross ngày tuổi khơng phân biệt giới tính Gà phân chia ngẫu nhiên vào nghiệm thức thức ăn theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên yếu tố Ba nghiệm thức thức ăn gồm: (1) không bổ sung curcumin (lô đối chứng), (2) bổ sung 100 mg curcumin (CRM) (3) bổ sung 250mg curcumin (CRM) Tất tiêm da chủng ngừa bệnh Newcastle ( ND virus) (vaccine căng NDV IV) cúm gia cầm (AI virus) (vaccine căng AIV H5N2) lúc 10 ngày tuổi Mỗi nghiệm thức có chuồng, chuồng có 10 xem lần lặp lại Tổng số có 24 chuồng Thời gian thí nghiệm 42 ngày Sơ đồ bố trí thí nghiệm trình bày Bảng Bảng 2.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm Võ Phạm Danh 11 Đề cương nghiên cứu khoa học Các nghiệm thức thức ăn Đối chứng1 100mg CRM1 250mg CRM1 Số ô chuồng 8 Số gà/ô chuồng 10 10 10 Tổng gà 80 80 80 Gà tiêm chủng ngừa bệnh Newcastle cúm gia cầm 2.2 Thức ăn thí nghiệm Thức ăn tổ hợp từ thực liệu bắp, khô dầu đậu nành, bột trứng, dầu đậu nành, bột đá vôi số chất bổ sung khác Thành phần thực liệu thành phần dưỡng chất tính tốn thức ăn trình bày bảng 2.2 2.3 Thức ăn chia làm loại theo tuổi gà: – 21 22 - 42 ngày tuổi Thức ăn thí nghiệm cho ăn dạng bột không chứa kháng sinh Bảng 2.2 Thành phần thực liệu thức ăn cho gà thịt (Theo N Rajput cs, 2013) Thành phần, g/kg Từ ngày tới ngày 21 Từ ngày 22 đến ngày 42 Ngô 607 660 Bột đậu nành 300 240 Bột gluten ngô 25 30 Dầu đậu nành 28 30,5 Đá vôi 11,9 12 Dicalcium phosphate 17 17 Hỗn hợp khoáng chất 5 Võ Phạm Danh 12 Đề cương nghiên cứu khoa học Natri clorua 3 L -Lysine 1,6 1,5 DL -Methionine 1,5 Bảng 2.3 Thành phần dưỡng chất thức ăn cho gà (Theo N Rajput cs, 2013) Phân tích thành phần hóa học chế độ ăn uống (g/kg) ME (kcal / kg) 3.055 3.120 CP 219,2 196,5 Crude Fat 54,8 61,3 DM 890,7 880,1 Lysine 10.6 9,5 Methionine 4.3 Methionin + cystine 8,2 7.3 Ca 10 9,1 Có sẵn P 4.3 4.0 premix khoáng sản cung cấp sau cho kg chế độ ăn uống: trans -retinyl acetate, 25 mg; cholecalciferol, mg; menadione, 1,2 mg; thiamin, 2,3 mg; riboflavin, mg; nicotinamide, 42 mg; choline clorua, 400 mg; canxi pantothenate, 10 mg; pyridoxin HCl, mg; biotin, 0,04 mg; axit folic, mg; cobalamin, 0,012 mg; Fe (từ sắt sulfat), 82 Võ Phạm Danh 13 Đề cương nghiên cứu khoa học mg; Cu (từ đồng sulfate), 7,5 mg; Mn (từ sulfat mangan), 110 mg; Zn (từ oxit kẽm), 64 mg; I (từ canxi iodat), 1,1 mg; Se (từ natri selenite), 0,28 mg Tính tốn 2.3 Phân tích mẫu thức ăn Thức ăn lấy mẫu giai đoạn cho ăn để phân tích thành phần hóa học Các mẫu thức ăn nghiền lọc qua rây lọc có mắt lưới 1mm trước phân tích phân tích theo phương pháp chuẩn Mẫu thức ăn phân tích chi tiêu vật chất khơ, protein khơ, béo khơ, xơ khơ, khống tổng số, Ca Phospho tổng số Các thành phần dưỡng chất thức ăn phân tích phòng xét nghiệm Invivo, Bình Dương, Việt Nam 2.4 Chuồng ni chăm sóc Gà thí nghiệm ni dưỡng dãy chuồng nuôi Gà nuôi chuồng xi măng, chuồng có kích thước 1,2 m x 1,3 m Mỗi chuồng nuôi 10 gà xem lần lặp lại Mái chuồng tơn, xung quanh chuồng lướt kẽm có rèm che để tránh mưa tạt Nền chuồng xi măng trải lớp trấu dày 5-7 cm Trấu phân hốt dọn vào cuối giai đoạn thí nghiệm Gà cho ăn uống nước tự Việc chăm sóc thao tác gà thực lơ đối chứng trước, sau thay ủng tiếp tục lô cho ăn Curcumin (nhằm trách việc Curcumin bị mang từ lô cần cho ăn sang lô đối chứng) Vào ban đêm ánh sáng mở gà lấy thức ăn Chuồng nuôi thơng thống tự nhiên có phun sương mái nhiệt độ tăng cao vào buổi trưa Gà úm hai tuần đầu, nhiệt độ úm tuần thứ 32℃ tuần thứ 30℃ Trong q trình thí nghiệm, đàn gà chủng ngừa vắc xin để phòng chống số bệnh dịch tả, viêm phế quản truyền nhiễm đậu 2.5 Phương pháp đo lường, lấy mẫu theo dõi tiêu 2.5.1 Khối lượng bình quân tăng trọng hàng ngày Gà cân trước bắt đầu thí nghiệm (1 ngày tuổi) cân tuần để tính khối lượng binh quân (KLBQ) tăng trọng hàng ngày (TTHN) gà Cân Võ Phạm Danh 14 Đề cương nghiên cứu khoa học cá thể gà chuồng Khối lượng bình qn TTHN tính theo cơng thức sau: • KLBQ (g/con) = Tổng khối lượng gà cân được/Tổng số • TTHN (g/con) = Tổng tăng trọng/Tổng số ngày gà diện 2.5.2 Tiêu thụ thức ăn hàng ngày hệ số chuyển hóa thức ăn Lượng thức ăn cho gà ăn thức ăn lại máng ăn ghi nhận tuần tồn giai đoạn thí nghiệm để tính lượng tiêu thụ thức ăn hàng ngày (TTTAHN) Hệ số chuyển hóa thức ăn (HSCHTA) tính theo cơng thức sau: • TTTAHN (g/con) = Tổng lượng thức ăn tiêu thụ/Tổng số ngày gà diện • HSCHTA (kg thức ăn/kg tăng trọng) = Tổng lượng thức ăn tiêu thụ/Tổng tăng trọng gà 2.5.3 Chỉ số túi Bursa Khi kết thúc thí ngiệm 56 ngày tuổi, chọn ngẫu nhiên gà (1 trống mái) từ chuồng để lấy mẫu túi bursa Do vậy, tổng số gà lấy mẫu 32 con, với nghiệm thức 16 (8 trống mái) Chỉ số túi bursa tính dựa theo trọng lượng túi bursa trọng sống gà Theo Sellaoui cs (2012), trọng lượng tương đối túi bursa 0,2% BW gà thịt có trạng thái miễn dịch tuyệt vời 2.5.4 Tỷ lệ nuôi sống Tỷ lệ nuôi sống (TLNS) tính dựa vào số gà cuối kỳ số gà đầu kỳ Những chết bị loại thải xem chết Ngày gà chết hay loại thải khối lượng gà ghi nhận để dựa vào cơng thức tính TTTAHN TTHN Tỷ lệ ni sống tính theo cơng thức sau: • TLNS (%) = (Tổng số gà cuối kỳ/Tổng số gà cuối kỳ) ×100 2.5.5 Độ đồng đàn Gà tất nghiệm thức theo loại cá thể lúc bắt đầu thí nghiệm (1 ngày tuổi) tuần để tính độ đồng đàn (ĐĐĐĐ) Độ đồng đàn Võ Phạm Danh 15 Đề cương nghiên cứu khoa học tỉ lệ số có khối lượng nằm khoảng KLBQ ± (10%×KLBQ) tổng số gà cân nghiệm thức Độ đồng đàn tính theo cơng thức sau: • ĐĐĐĐ (%) = [Số có khối lượng khoảng KLBQ ± (10%×KLBQ)/Tổng số con] × 100 2.5.6 Xác định hàm lượng kháng thể huyết (1) Cách lấy xử lý mẫu Gà thí nghiệm lấy mẫu máu lần (lúc 14, 21, 28, 35 42 ngày tuổi) tĩnh mạch cánh để kiểm tra kháng thể chống NDV AIV Ở 14 ngày tuổi (trước chủng), chọn ngẫu nhiên gà (1 trống mái) từ chuồng (16 gà/nghiệm thức) để lấy mẫu máu lần Những gà đeo số để lấy mẫu máu vào lần 21, 28, 35 42 ngày tuổi Mỗi lấy từ - ml máu cho vào ống nghiệm, để máu đơng nhiệt độ phòng khoảng 30 - 60 phút bảo quản 0C ly tâm Ly tâm ống nghiệm có máu đơng tốc độ 2000 x g 10 phút, chiết lấy huyết thanh, chia nhỏ dung lượng cho vào ống nghiệm 1,5 ml để sau tiến hành xác định hiệu giá kháng thể Mẫu huyết chưa phân tích bảo quản nhiệt độ - 20℃ (2) Xác định hiệu giá kháng thể chống NDV AIV NDV mẫu huyết xét nghiệm phương pháp ELISA Qui trình ELISA thực theo hướng dẫn mô tả xét nghiệm thương mại hãng IDEXX, Mỹ Kết đọc bước sóng 650 nm Đánh giá mẫu âm tính dương tính dựa vào số S/P (mẫu/đối chứng dương) Những mẫu huyết có tỷ lệ S/P ≤ 0,2 coi âm tính, tỷ lệ S/P > 0,2 dương tính Hiệu giá kháng thể tính theo công thức sau: HGKT = 10 1.09(log 10 S/P)+3.36 Hiệu giá kháng thể chống bệnh AIV mẫu huyết xét nghiệm phương pháp ELISA Qui trình ELISA cách tính HGKT chống bệnh AIV tương tự trường hợp xác định HGKT chống bệnh NDV mô tả Võ Phạm Danh 16 Đề cương nghiên cứu khoa học 2.6 Phương pháp xử lý số liệu Số liệu thí nghiệm xử lý số liệu sơ bảng tính Microsoft Excel 2010 sau liệu phân tích ANOVA cách sử dụng tính GLM SPSS 16.0 (SPSS Inc, Chicago, IL) theo sau kiểm tra sau đại học Duncan Sự khác biệt nghiệm thức xác định trắc nghiệm Sự khác biệt đáng kể dựa mức xác suất < 0.05 Võ Phạm Danh 17 Đề cương nghiên cứu khoa học TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Adaramoyen, O A 2008 Involvement of Na-Ca2 exchanger in the endotheli- umin dependent vasorelaxation induced by Curcuma longa L in isolated rat superior mesenteric arteries J Smooth Muscle Res 44:151-158 [2] Aggarwal, B B and S Shishodia 2006 Molecular targets of dietary agents for prevention and therapy of cancer Biochemical Pharmacology (Elsevier) [3] Aggarwal B B., C Sundaram, N Malani and H Ichikawa 2007 Curcumin: the Indian solid gold Adv Exp Med Biol 595:1-75 [4] Ahmadi, F 2010 Ảnh hưởng bột nghệ (Curcuma longa) đến hiệu suất, trạng thái ứng suất oxy hóa số thông số máu gà thịt cho ăn phần có chứa aflatoxin Bl Glob Vet 5:312-317 [5] Allen, P C., H D Danforth and P C Augustine 1998 Dietary modulation of avian coccidiosis Int J Parasitol 28:1131-1140 [6] Al-Sultan, S I and A A Gameel 2004 Histopathological changes in the livers of broiler chicken supplemented with turmeric (Curcuma longa) Int J Poult Sci 3:333336 [7] Bautista-Ortega, J., A Cortes-Cuevas, E A Ellis and C A Ruiz-Feria 2014 Supplemental L-arginine and vitamins E and C preserve xan-thine oxidase activity in the lung of broiler chickens grown under hypobaric hypoxia Poult Sci 93:979-988 [8] Bessei, W 2006 Welfare of broilers: a review World’s Poultry Science Journal 62:455 [9] Choi, H., Y S Chun, S W Kim, M S Kim and J W Park 2006 Curcumin Inhibits Hypoxia-Inducible Factor-1 by Degrading Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Trans-locator: A Mechanism of Tumor Growth Inhibition Mol Pharmacol 70:16641671 Võ Phạm Danh 18 Đề cương nghiên cứu khoa học [10] Durrai, F R., I Mohammed, S Asal, S M Shhail, C Naila and Z Durrani 2006 Effect of different levels of feed added turmeric (Curcuma longa) on the performance of broiler chicks J Agric Biol Sci 1:9-11 [11] Emadi, M and H Kermanshahi 2006 Effect of turmeric rhizome powder on performance and carcass characteristics of broiler chicken Int J Poult Sci 5:10691072 [12] Hatcher, H., R Planalp, J Cho, F M Torti and S V Tori 2008 Curcumin: from ancient medicine to current clinical trials Cell Mol Life Sci 65:1631-1652 [13] Hernandez, F., J Madrid, V Garcia, J Orengo and M D Megias 2004 Influence of two plant extracts on broilers performance, digestibility, and digestive organ size Poult Sci 83:169-174 [14] Jagetia, G C and B B Aggarwal 2007 “Spicing up” of the immune system by curcumin J Clin Immunol 27:19-35 [15] Joe, B and B R Lokesh 1994 Role of capsaicin, curcumin and dietary n-3 fatty acids in lowering the generation of reactive oxygen species in rat peritoneal macrophages Biochim Biophys Acta 1224:255-263 [16] Kim, G Y., K H Kim, S H Lee, M S Yoon, H J Lee, D O Moon, C M Lee, S C Ahn, Y C Park and Y M Park 2005a Curcumin inhibits immunostimulatory function of den-dritic cells: MAPKs and translocation of NF-kappa B as potential targets J Immunol 174:8116-8124 [17] Kim, K., K Ryu, Y Ko and C Park 2005b Effects of nuclear factor-kappaB inhibitors and its implication on natural killer T-cell lymphoma cells Br J Haema-tol 131:59-66 [18] Kolev, M., M Tsonko, Velcheva and A Evelina 2005 DFT and Experimental Studies of the Structure and Vibrational Spectra of Curcumin International Journal of Quantum Chemistry 102:1069-1079 [19] Kruchten and Tom 2002, Nov 27 U S Broiler Industry Structure National Agricultural Statistics Service, Võ Phạm Danh 19 Đề cương nghiên cứu khoa học Agricultural Statistics Board, U S Department of Agriculture Archived from the original on December 29, 2013 Retrieved 2018, Dec [20] Li, X and X Liu 2005 Effect of curcumin on immune function of mice J Huazhong Univ Sci Technol Med Sci 25:137-140 [21] Miriyala, S., M Panchatcharam and P Rengarajulu 2007 Cardioprotective effects of curcumin Adv Exp Med Biol 595:359-377 [22] Nouzrian, R., S A Tabeidian, M Toghyain, G Ghalamkaei and M Toghyani 2011 Effect of turmeric powder on performance, carcass traits, humoral immune re-sponses, and serum metabolism in broiler chickens J Anim Feed Sci 20:389-400 [23] Pal, S., S Bhattacharyya, T Choudhuri, G K Datta, T Das and G Sa 2005 Amelioration of immune cell number depletion and potentiation of depressed detoxification system of tumor-bearing mice by curcumin Cancer Detect Prev 29:470478 [24] Priyadarsini, K I., D K Maity, G H Naik, M S Kumar, M K Unnikrishnan, J G Satav and H Mohan 2003 Role of phenolic O-H and methylene hydrogen on the free radical reactions and antioxidant activity of curcumin Free Radic Biol Med 35:475-484 [25] Rajput, N., N Muhammad, R Yan, X Zhong and T Wang 2013 Effect of Dietary Supplementation of Curcumin on Growth Performance, Intestinal Morphology and Nutrients Utilization of Broiler Chicks J Poultry Sci 50:44-52 [26] Ranjan, D., T D Johnston, G Wu, L Elliott, S Bondada, M Nagabhushan 1998 Cur-cumin blocks cyclosporine A-resistant CD28 costimulatory pathway of human T-cell proliferation J Surg Res 77:174-178 [27] Sa, G and T Das 2008 Anti cancer effects of curcumin: cycle of life and death Cell Div 3:14 Võ Phạm Danh 20 Đề cương nghiên cứu khoa học [28] Sellaoui, S., N Alloui and S Mehenaoui Sand Djaaba 2012 Evaluation of immune status of the chicken using morphometry and histology of the bursa of fabricius J Vet Adv 2:440-443 [29] Stankovic, I 2004 61st Joint expert committee on food additives Chemical and Technical Assessment 1:1-8 [30] Stuart Lumb 2008, Oct 17 Niche broiler production in Vietnam Poultry world Available at: https://www.poultryworld.net/Home/General/2018/10/Niche-broiler- production-in-Vietnam-347492E/ [31] Unnikrishnan, M K and M N A Rao 1995 Curcumin inhibits nitrogen dioxide in-duced oxidation of hemoglobin Mol Cell Biochem 146:35-37 [32] Verstegen, M W and B A Williams 2002 Alternatives to the use of antibiotics as growth promoters for monogastric animals Anim Biol 13:113-127 [33] Zhang, J F., Z P Hu, C H Lu, M X Yang, L L Zhang and T Wang 2015 Dietary curcumin supplementation protects against heat-stress-impaired growth performance of broilers possibly through a mitochondrial pathway J Anim Sci 93:1656-1665 Võ Phạm Danh 21 ... Ảnh hưởng việc bổ sung Curcumin thức ăn đến khả sinh trưởng đáp ứng miễn dịch gà thịt thương phẩm Mục đích đề tài Đánh giá mức độ ảnh hưởng, tỷ lệ pha trộn Curcumin phần thức ăn đến việc tăng... Thí nghiệm So sánh ảnh hưởng đến tăng trưởng khả đáp ứng miễn dịch đến gà thịt thương phẩm bổ sung Curcumin với hàm lượng khác ✓ Mục tiêu Xác định ảnh hưởng Curcumin đến khả tăng trọng, thể tích... chứng tỏ curcumin có ảnh hưởng tới khả sinh trưởng đáp ứng miễn dịch gà thịt Vì việc xác định đánh giá hiệu lực, tỷ lệ pha trộn Curcumin phần thức ăn gà thịt để đảm bảo tăng suất khả miễn dịch