QUÁ TRÌNH SAO CHÉP DNA

Các giả thuyết sao chép DNA Mô hình bảo toàn  Một phân tử hoàn toàn mới được tổng hợp từ một mẫu DNA (mà vẫn chưa được thay đổi) Mô hình bán bảo toàn Mỗi phân tử mới bao gồm một sợi mới được tổng hợp và một chuỗi mẫu Mô hình phân tán  Các phân tử mới được tạo thành từ các phân đoạn DNA mới và cũ DNA helicases cắt cầu nối hydro tách hai mạch của sợi DNA Singlestranded DNA binding proteins giữ cho hai sơi khuôn tách rời RNA tổng hợp đoạn mồi RNA ngắn để các nucleotides sẽ gắn tiếp. DNA polymerase III gắn các nucleotide kéo dài đoạn mồi theo chiều 5’3’ DNA polymerase I cắt đoạn mồi RNA và thay vào đấy DNA DNA ligase nối liền các đoạn DNA thành mạch liên tục 1.Sao chép nhiễm sắc thể ở prokaryotae Để theo dõi sao chép DNA đồng vị phóng xạ Thymidin (tiền chất đặc hiệu cho DNA) được sử dụng. Quá trình sao chép xuất phát từ một điểm ori và triển khai ra cả 2 phía. Khi DNA vòng tròn đang sao chép, quan sát thấy dạng DNA hình con mắt. Chẻ ba sao chép lan dần cuối cùng tạo ra 2 phân tử DNA lai: một mạch có mang dấu phóng xạ (thymidinH3). Có trường hợp sao chép chỉ xảy ra về một phía.

SAO CHÉP DNA Năm 1953 Cấu trúc DNA phát JamesWatson Francis Crick Sau nêu mơ hình DNA, Watson Crick cho hai mạch phân tử DNA đứt ra, mạch trở thành khuôn cho việc tổng hợp mạch Các giả thuyết chép DNA • Mơ hình bảo toàn - Một phân tử hoàn toàn tổng hợp từ mẫu DNA (mà chưa thay đổi) • Mơ hình bán bảo tồn - Mỗi phân tử bao gồm sợi tổng hợp chuỗi mẫu • Mơ hình phân tán - Các phân tử tạo thành từ phân đoạn DNA cũ Thí nghiệm chứng minh có tự nhân đơi theo ngun tắc bán bảo tồn • Ni E.coli nhiều hệ nguồn nitơ đồng vị nặng N15.  • Sau tế bào chuyển sang mơi trường chứa N14  nhẹ  • Bằng  phương  pháp  ly  tâm  trên  thang  nồ ng  độ  CsCl,  các  loại DNA nặng, nhẹ lai tách • Kết sau lần chép phân tử DNA chứa một  nửa mang N15 nữa N14.   • Ở thế hệ II nửa số phân  tử DNA chứa N14 N15, lại DNA chứa hồn tồn N14 • Nói cách khác, hai mạch cũ phân tử DNA ban đầu tách ra, cá làm khuôn để tổng hơp Mỗi phân tử mang mạch cũ mạch Kiểu chép gọi bán bảo tồn (semiconservative) 2) QUÁ TRÌNH SAO CHÉP DNA Sửa sai dựa vào tính tương  đồng (Homology-dependent repair system): • Một hệ thống sửa sai quan trọng phát tính chất bổ sung đối song song mạch đơn DNA để phục hồi đoạn sai hỏng trở lại trạng thái bình thường ban đầu • Trong hệ thống này, đoạn DNA sai hỏng bị cắt bỏ thay đoạn nucleotide tổng hợp bổ sung với sợi khuôn đối diện Sự sửa sai xảy qua sợi khuôn nguyên tắc chép DNA bảo đảm  sửa sai với độ xác cao - giải phóng sai hỏng (error-free) (NUCLEOTID EXCISION REPAIR): nucleotid nhận biết cắt hai vị trí chuyên biệt, Nu thứ kể từ vị trí sai hỏng theo hướng 5', Nu thứ kể từ vị trí sai hỏng theo hướng 3’ Sửa sai chép (BASE EXCITION REPAIR): • Sự cắt bỏ base sai hỏng nhờ enzyme DNA glycosylase Các enzyme nhận biết base bị biến đổi điểm purine hay pyrimidine thủy giải liên kết N-glycosilic nối base với  đường • Rồi enzyme AP endonuclease cắt liên kết đường phosphate gần base bị biến đổi -Hệ thống SOS: kích hoạt DNA bị sai hỏng nặng khơng sở để sửa sai Sửa sai cách lấp nucleotid vào có tỷ lệ sai sót độ đột biến giữ sống Liên quan tới protein LexA RexA -LexA protein chồng lấp lên promoter nhóm gene SOS, ức chế phiên mã gene hệ thống SOS -RexA cắt bỏ protein LexA hệ thống SOS, làm cho gene SOS phiên mã sửa sai hỏng Câu hỏi Quà tặng Câu hỏi Câu 1: Enzyme gyrase có chức gì? A.Tháo xoắn DNA B.Làm đứt liên kết hydro C.Cắt RNA mồi D.Nối đoạn Okazaki Câu hỏi Câu hỏi 2: Enzyme gyrase có tên gọi khác gì? A.Telomeraza B.Single strand binding protein C.Topoisomeraza II D.Polymerase Câu hỏi Câu 3: Enzyme giúp tách mạch DNA để tạo chẻ ba chép: A.Gyrase B.DNA polymerase C.Ligase D.Helicase Câu hỏi Câu 4: Khi tách thành chẻ ba chép, mạch tổng hợp trước: A.Mạch 5’ B.Mạch 3’ C.Tổng lúc D.Mạch Câu hỏi Câu 5: Trong trình chép, mạch tổng hợp liên tục, mạch tổng hợp gián đoạn: A Mạch 5’ tổng hợp liên tục, mạch 3’ tổng hợp gián đoạn B Mạch 3’ tổng hợp liên tục, mạch 5’ tổng hợp gián đoạn C Cả mạch tổng hợp liên tục D Cả mạch tổng hợp gián đoạn ... Enzymes chép DNA IV .Sao chép DNA tế bào 1 .Sao chép nhiễm sắc thể prokaryotae Để theo dõi chép DNA đồng vị phóng xạ Thymidin (tiền chất đặc hiệu cho DNA) sử dụng Quá trình chép xuất phát từ điểm... mạch cũ phân tử DNA ban đầu tách ra, cá làm khuôn để tổng hơp Mỗi phân tử mang mạch cũ mạch Kiểu chép gọi bán bảo tồn (semiconservative) 2) QUÁ TRÌNH SAO CHÉP DNA Các Enzymes chép DNA Các men &... phía Khi DNA vòng tròn chép, quan sát thấy dạng DNA hình mắt Chẻ ba chép lan dần cuối tạo phân tử DNA lai: mạch có mang dấu phóng xạ (thymidin-H3) Có trường hợp chép xảy phía 2 Sao chép nhiễm