Sàng lọc các cây thuốc có tiềm năng điều trị bệnh gút thông qua ức chế xanthin oxidase in vitro

BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI TRẦN NGỌC YẾN CHI SÀNG LỌC CÁC CÂY THUỐC CÓ TIỀM NĂNG ĐIỀU TRỊ BỆNH GÚT THÔNG QUA ỨC CHẾ XANTHIN OXIDASE IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: T.S Nguyễn Thùy Dương T.S Phương Thiện Thương Nơi thực hiện: Bộ môn Dược lực HÀ NỘI - 2013 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khố luận này, tơi nhận đƣợc giúp đỡ nhiều thầy cô, bạn bè ngƣời thân Trƣớc tiên tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Thuỳ Dương TS Phương Thiện Thương, ngƣời thầy quan tâm, giúp đỡ, hƣớng dẫn động viên suốt trình hồn thành đề tài Xin chân thành cảm ơn thầy, cô anh chị kĩ thuật viên Bộ môn Dƣợc lực giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi suốt q trình nghiên cứu thực đề tài Xin chân thành cảm ơn cán phòng đào tạo, mơn, phòng ban khác trƣờng đại học Dƣợc Hà Nội Lời cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình bạn bè, ngƣời ln ln động viên, giúp đỡ đóng góp ý kiến cho tơi hồn thành khố luận Hà Nội, tháng 5, năm 2013 Sinh viên Trần Ngọc Yến Chi MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÍ HIỆU DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƢƠNG TỔNG QUAN .3 1.1 Vài nét bệnh gút & enzym xanthin oxidase 1.1.1 Khái niệm chế bệnh sinh bệnh gút 1.1.2 Mối liên quan bệnh gút enzym xanthin oxidase 1.1.3 Enzym xanthin oxidase 1.2 Một số thuốc dƣợc liệu có tác dụng ức chế XO 1.2.1 Các thuốc ức chế XO đƣợc lƣu hành .7 1.2.2 Các nghiên cứu phát triển dƣợc liệu có tiềm ức chế XO CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG, PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Nguyên liệu nghiên cứu 14 2.2 Phƣơng tiện nghiên cứu 14 2.2.1 Hoá chất, thuốc thử 14 2.2.2 Dụng cụ thiết bị thí nghiệm 15 2.3 Nội dung nghiên cứu .15 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 16 2.4.1 Phƣơng pháp thu thập mẫu thông tin thuốc đƣa vào sàng lọc 16 2.4.2 Phƣơng pháp chiết xuất dƣợc liệu 16 2.4.3 Phƣơng pháp đánh giá ảnh hƣởng mẫu thử lên hoạt độ XO .17 2.4.4 Phƣơng pháp xử lý số liệu 19 3.1 Kết 20 3.1.1 Kết thu thập liệu dƣợc liệu đƣa vào sàng lọc 20 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 3.1.2 Kết sàng lọc tác dụng ức chế XO in vitro dƣợc liệu 44 3.1.3 Xác định IC50 dƣợc liệu tiềm ức chế XO 63 3.2 Bàn luận 63 3.2.1 Về thông tin thuốc đƣa vào nghiên cứu 63 3.2.2 Về kết sàng lọc tác dụng ức chế XO in vitro đĩa Costar 96 giếng 64 3.2.3 Về khả ức chế XO thuốc tiềm 65 KẾT LUẬN .67 Kết luận 67 Đề xuất .67 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÍ HIỆU XO : Xanthin oxidase XDH : Xanthin dehydrogenase Oxh : Oxy hố CCTT : Chƣa có thơng tin ĐHMD : Điều hoà miễn dich HA : Huyết áp Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC CÁC BẢNG STT Ký hiệu 2.1 3.1 Tên bảng Bố trí thí nghiệm giếng Thơng tin dƣợc liệu sàng lọc Trang 18 21 Ảnh hƣởng dịch chiết lên hoạt độ XO in vitro 3.2 nồng độ 100 g/ml, 50 g/ml, 10 g/ml hỗn hợp phản 45 ứng 3.3 IC50 dƣợc liệu tiềm ức chế XO 63 DANH MỤC CÁC HÌNH STT Ký hiệu 1.1 Tên hình Trang Q trình chuyển hố purin thể Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi ĐẶT VẤN ĐỀ Từ lâu, sản phẩm tự nhiên đóng vai trò quan trọng điều trị bệnh Trong hai thập kỉ qua có 30,2 % loại thuốc đƣợc phê duyệt có nguồn gốc từ tự nhiên [72] Cùng với đổi phƣơng pháp điều trị sản phẩm tự nhiên, thuốc chế phẩm chiết xuất từ thực vật đƣợc quan tâm nhiều ƣu điểm so với hoá dƣợc [114] Các thuốc theo y học đại thƣờng có tác dụng nhanh, hiệu tƣơng đối tốt Tuy nhiên, dùng tân dƣợc để điều trị bệnh mạn tính lại bộc lộ nhƣợc điểm nhiều tác dụng không mong muốn giá thành cao dùng lâu dài Gút bệnh rối loạn chuyển hố mạn tính Ngƣời bị bệnh gút phải đối mặt với việc phải sử dụng thuốc thời gian dài gặp nhiều vấn đề mà thuốc tân dƣợc mang lại Do đó, nhiều nghiên cứu thuốc có nguồn gốc từ dƣợc liệu đƣợc đƣa để khắc phục nhƣợc điểm nêu Bệnh gút gắn liền với tăng acid uric máu mục tiêu điều trị làm giảm lƣợng acid uric máu Acid uric huyết sản phẩm cuối q trình chuyển hố purin qua trung gian xanthin oxidase (XO), loại enzym oxy hoá hypoxanthin thành xanthin xanthin thành acid uric Việc sử dụng chất ức chế enzym XO để cản trở hình thành acid uric thể mục tiêu mà nghiên cứu hƣớng tới Với truyền thống lâu đời y học cổ truyền, với kinh nghiệm dân gian sử dụng cỏ làm thuốc từ dân tộc khác nƣớc, Việt Nam có nguồn dƣợc liệu phong phú chƣa đƣợc khai thác nhiều Từ thực tế đó, để góp phần sàng lọc nhằm tìm kiếm dƣợc liệu có khả ức chế XO, bƣớc đầu trình xác định dƣợc liệu tiềm điều trị gút, đề tài: “Sàng lọc thuốc có tiềm điều trị bệnh gút thông qua ức chế xanthin oxidase in vitro” đƣợc thực với ba mục tiêu sau: Thu thập đƣợc thông tin số thuốc Việt Nam có tiềm khai thác 2 Sàng lọc đƣợc thuốc có tiềm điều trị gút thông qua đƣờng ức chế xanthin oxidase in vitro đĩa 96 giếng Xác định IC50 thuốc có tiềm ức chế XO Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Vài nét bệnh gút & enzym xanthin oxidase 1.1.1 Khái niệm chế bệnh sinh bệnh gút 1.1.1.1 Khái niệm Gút bệnh rối loạn chuyển hoá nhân purin, có đặc điểm tăng acid uric máu Tình trạng viêm khớp bệnh gút lắng đọng tinh thể monosolium urat dịch khớp mô [9] 1.1.1.2 Cơ chế bệnh sinh bệnh gút Bệnh gút xuất thể tích luỹ acid uric mức (gấp vài lần bình thƣờng) Nguyên nhân sản xuất acid uric mức giảm thải trừ acid uric Tăng acid uric mức bất thƣờng số hệ enzym tác động vào q trình chuyển hố purin nhƣ tăng hoạt tính phosphoribosyl pyrophosphat (PRPP) synthetase dẫn đến tăng nồng độ PRPP - chất quan trọng trình tổng hợp purin hay thiếu hụt hypoxanthin-guanin phosphoribosyl transferase (HGPRT) - enzym chịu trách nhiệm chuyển guanin thành guanylic acid chuyển hypoxanthin thành inosinic acid Hiện tƣợng giảm thải trừ acid uric thận với hầu hết bệnh nhân gút (8090%) không rõ nguyên nhân (tăng acid uric máu tự phát) Thông thƣờng, sản xuất acid uric cân với thải trừ acid uric khơng bị tích lũy Tuy nhiên, bệnh nhân gút lƣợng thải trừ nhiều so với lƣợng acid uric sinh dẫn đến tăng lƣợng tinh thể natri urat hòa tan máu [36] Khi nồng độ acid uric tăng cao gây lắng đọng tinh thể urat mô tạo nên hạt tophi Khi hạt tophi sụn khớp bị vỡ khởi phát gút cấp, lắng đọng vi tinh thể cạnh khớp, màng hoạt dịch, mô sụn mô xƣơng dẫn đến bệnh xƣơng khớp mạn tính gút Sự có mặt vi tinh thể urat mơ mềm, bao gân tạo nên hạt tophi; viêm thận kẽ tinh thể urat lắng đọng tổ chức kẽ thận; acid uric niệu tăng toan hoá nƣớc tiểu dẫn đến sỏi tiết niệu [9] Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 67 KẾT LUẬN Kết luận Trong khuôn khổ đề tài: “Sàng lọc thuốc có tiềm điều trị bệnh gút thông qua ức chế XO in vitro”, khoá luận thu đƣợc kết sau: Đã thu thập đƣợc thông tin khoa học 202 mẫu thuốc, thuộc 74 họ để đƣa vào nghiên cứu Trong số 202 dịch chiết methanol từ 187 lồi: - Tại nồng độ 100µg/ml có 20 mẫu có tác dụng ức chế XO, có mẫu có tác dụng ức chế > 50% - Tại nồng độ 50µg/ml có 13 mẫu có tác dụng ức chế XO, khơng có mẫu có tác dụng ức chế > 50% - Tại nồng độ 10µg/ml có mẫu có tác dụng ức chế XO, khơng có mẫu có tác dụng ức chế >50% Đã xác định đƣợc IC50 dƣợc liệu tiềm Dịch chiết methanol Lygodium flexuosum có IC50 = 83,6 (47,2 - 129,6) g/ml thể khả ức chế XO mạnh mẫu nghiên cứu Đề xuất Với nghiên cứu in vitro đĩa 96 giếng, khố luận sàng lọc xác định IC50 thuốc có tiềm ức chế XO Do cần có nghiên cứu dƣợc lý thực nghiệm để khẳng định tác dụng thuốc Khoá luận xin đƣa hai đề xuất triển khai nghiên cứu tiếp nhƣ sau: - Mở rộng thêm đối tƣợng dƣợc liệu đƣa vào sàng lọc - Đánh giá tác dụng hạ acid uric huyết Lygodium flexuosum in vivo để định hƣớng cho nghiên cứu sâu dƣợc liệu TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Bộ Y tế (2005), Hoá sinh học, NXB Y học, Hà Nội Bộ Y tế (2007), Dƣợc liệu học tập 2, NXB Y học, Hà Nội Bộ Y tế (2007), Dƣợc lý học tập 2, NXB Y học, Hà Nội Bộ Y tế (2010), Hội thảo dự án bảo tồn nguồn thuốc cổ truyền, tổng kết 12 năm (1997-2009), Viện Dƣợc liệu Nguyễn Thuỳ Dƣơng (2012), Nghiên cứu tác dụng bệnh gút thực nghiệm hy thiêm (Siegesbeckia orientalis L Asteraceace), Luận án Tiến sĩ dƣợc học, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Nguyễn Thị Quỳnh Hoa (2010), Nghiên cứu ảnh hƣởng dịch chiết Hi thiêm (Siegesbeckia orientalis L.) lên hoạt độ xanthin oxidase gan chuột thực nghiệm, Khoá luận tốt nghiệp Dƣợc sĩ đại học, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Nguyễn Quang Huy cộng (2007), “Acid asiatic phân lập từ Sắn thuyền (Syzygium resinosum Gagnep.) tác dụng lên vi khuẩn Streptococcus mutans”, Tạp chí Dƣợc học, 7/2007, 19-22 Phan Anh Huy (2012), Sơ đánh giá tác dụng điều trị đái tháo đƣờng rễ Chóc máu Nam Bộ - Salacia cochinchinensis L., Khóa luận tốt nghiệp Dƣợc sĩ đại học, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Nguyễn Thị Ngọc Lan (2009), “Bệnh Gút (Gút-Gútte)”, Bệnh học nội khoa (sách dùng cho đối tƣợng sau đại học) tập 1,Trƣờng đại học Y Hà Nội, Hà Nội 10 Đỗ Tất Lợi (2005), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội 11 Nguyễn Văn Mùi (2002), Xác định hoạt độ enzym, NXB Khoa học & Kỹ thuật, Hà Nội Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 12 Ninh Thị Phíp, Nguyễn Tất Cảnh, Trần Văn Ơn (2009), “Đánh giá nguồn gen thuốc tắm ngƣời Dao đỏ Sapa, Lào Cai”, Tạp chí Khoa học phát triển, 7(4), 434-42 13 Đào Thị Vui, Nguyễn Trọng Thông, Nguyễn Thƣợng Dong (2007), “Tác dụng bảo vệ hồi phục lt dày mơ hình gây lt indomethacin rễ củ Sâm báo Thanh Hóa (Hibiscus sagittifolius var septentrionalis Gag.), Tạp chí Dƣợc học, 3/2007, 35-45 TIẾNG ANH 14 Agbafor K.N., Nwachukwu N (2011), “Phytochemical analysis and antioxidant property of leaf extracts of Vitex doniana and Mucuna pruriens”, Biochem Res Int., 2011: 459839 15 Agbor G.A et al (2012), “Piper species protect cardiac, hepatic and renal antioxidant status of atherogenic diet fed hamsters”, Food Chem., 134(3), 1354-9 16 Ahmar R et al (2005), “Antioxidant, radical-scavenging, anti-inflammatory, cytotoxic and antibacterial activities of methanolic extracts of some Hedyotis species”, Life Sci., 76(17), 1953-64 17 Al-Khalidi U.A.S, Chaglassian T.H (1965), “The species distribution of xanthine oxidase”, Biochem J., 97, 318-20 18 American Society of Health-System Pharmacist (2011), AHFS Drug Information, American Society of Health-System Pharmacist 19 Anand Swarup K.R et al (2010), “Effect of dragon fruit extract on oxidative stress and aortic stiffness in streptozotocin-induced diabetes in rats”, Pharmacognosy Res., 2(1), 31-35 20 Apaya K.L., Chichioco-Hernandez C.L (2011), “Xanthine oxidase inhibition of selected Philippine medicinal plants”, J Med Plants Res., 5(2), 289-92 21 Borges F., Fernades E., Roleira F (2002), “Progress towards the discovery of xanthine oxidase inhibitors”, Curr Med Chem., 9(2), 195-217 22 Braga F.C et al (2007), “Angiotensin-converting enzyme inhibition by Brazilian plants”, Fitoterapia, 78(5), 353-8 23 British National Formulary (2011), BNF 61, BMJ Group and Pharmaceutical Press 24 Brunton L.L., Lazo J.S., Parker K.L (2006), Goodman & Gilman’s, The Pharmacological basis of therapeutics, 11th ed, The Mc.Graw-Hill Companies 25 Chang C.H et al (1996), “Anti-inflammatory effects of emodin from Ventilago leiocarpa”, Am J Chin Med., 24(2), 139-42 26 Chang W.S., Chiang H.C (1995), “Structure-activity relationship of coumarins in xanthine oxidase inhibition”, Anticancer Res., 15(5B), 196973 27 Chen J.J., Wang T.Y., Hwang T.L (2008), “Neolignans, a coumarinolignan, lignan derivatives, and a chromene: anti-inflammatory constituents from Zanthoxylum avicennae”, J Nat Prod., 71(2), 212-7 28 Chen L.W et al (2010), “Secondary metabolites and antimycobacterial activities from the roots of Ficus nervosa”, Chem Biodivers., 7(7), 1814-21 29 Chin Y.W et al (2006), “Cytotoxic lignans from the stems of Helicteres hirsuta collected in Indonesia”, Phytother Res., 20(1), 62-5 30 Choi BT et al (2003), “Anti-inflammatory effects of aqueous extract from Dichroa febrifuga root in rat liver”, Acta Pharmacol Sin., 24(2), 127-32 31 Cos P et al (1998), “Structure-activity relationship and classification of flavonoids as inhibitors of xanthine oxidase and superoxide scavengers”, J Nat Prod., 61(1), 71-6 32 Cui S.C et al (2012), “Antihyperglycemic and antioxidant activity of water extract from Anoectochilus roxburghii in experimental diabetes”, Exp Toxicol Pathol., epub ahead of print 33 Das B et al (2012), “A preliminary study on anti-inflammatory activity and antioxidant property of Lygodium flexuosum, a climbing fern”, Int J Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi Pharm Pharm Sci., 4(4), 358-61 34 Deng J.Z et al (2005), “(+)-Myristinins A and D from Knema elagans, which inhibit DNA polymerase beta and cleave DNA”, J Nat Prod, 68(11), 1625-8 35 Dhungat S B., Sreenivasan A (1954) , “The use of pyrophosphate buffer for the manometric assay of xanthine oxidase”, J Biol Chem., 208(2), 845-52 36 Dipiro J.T et al (2008), Pharmacotherapy - A pathophysiologic Approach, Mc Graw-Hill 37 Eliza J., Daisy P., Ignacimuthu S (2010), “Antioxidant activity of costunolide and eremanthin isolated from Costus speciosus (Koen ex Retz) Sm.”, Chem Biol Interact., 188(3), 467-72 38 Essien E.E et al (2012), “Chemical composition, antimicrobial, and cytotoxicity studies on S erianthum and S macranthum essential oils”, Pharm Biol., 50(4), 474-80 39 Fang P.L et al (2011), “Lindenane disesquiterpenoids with anti-HIV-1 activity from Chloranthus japonicus”, J Nat Prod., 74(6), 1408-13 40 Filha Z.S et al (2006), “Xanthine oxidase inhibitory activity of Lychnophora species from Brazil (“Arnica”)”, J Ethnopharmacol., 107(1), 79-82 41 Fu L et al (2010), “Antioxidant capacities and total phenolic contents of 56 wild fruits from South China”, Molecules, 15(12), 8602-17 42 Fu R et al (2013), “Antioxidant and anti-inflammatory activities of the phenolic extracts of Sapium sebiferum (L.) Roxb leaves”, J Ethnopharmacol., 147(2), 517-24 43 Gan M et al (2008), “Glycosides from the root of Iodes cirrhosa”, J Nat Prod., 71(4), 647-54 44 González A.G et al (1995), “Xanthine oxidase inhibitory activity of some Panamanian plants from Celastraceae and Lamiaceae”, J Ethnopharmacol., 46(1), 25-9 45 González de Mejía E., Ramírez-Mares M.V (2011), “Ardisia: healthpromoting properties and toxicity of phytochemicals and extracts”, Toxicol Mech Methods, 21(9), 667-74 46 Graham J.G (2000), “Plants used against cancer – an extension of the work of Jonathan Hartwell”, J Ethnopharmacol., 73(3), 347-77 47 Hair P.I., McCormack P.L., Keating G.M (2008), “Febuxostat”, Adis Drugs Profile, 68(13), 1865-74 48 Havlik J et al (2010), “Xanthine oxidase inhibitory properties of Czech medicinal plants”, J Ethnopharmacol., 132(2), 461-5 49 Hayashi T., Smith F.T., Lee K.H (1987), “Antitumor agents 89 Psychorubrin, a new cytotoxic naphthoquinone from Psychotria rubra and its structure-activity relationships”, J Med Chem., 30(11), 2005-8 50 He Z.D et al (2006), “Rourinoside and rouremin, antimalarial constituents from Rourea minor”, Phytochemistry, 67(13), 1378-84 51 Hossain S.J et al (2009), “Phenolic content, anti-oxidative, anti-α-amylase and anti-α-glucosidase activities of Solanum diphyllum L.”, Bangladesh J Bot., 38(2), 139-43 52 Huan M.H et al (2011), “Antioxidant and anti-inflammatory properties of Cardiospermum halicacabum and its reference compounds ex vivo and in vivo”, J Ethnopharmacol., 133(2), 743.50 53 Huang Q et al (2012), “Effect and mechanism of methyl helicterate isolated from Helicteres angustifolia (Sterculiaceae) on hepatic fibrosis induced by carbon tetrachloride in rats”, J Ethnopharmacol., 143(3), 889-95 54 Huang S.S et al (2013), “Antioxidant and anti-inflammatory activities of aqueous extract of Centipeda minima”, J Ethnopharmacol., 147(2), 395405 55 Huong D.T et al (2005), “A new flavone cytotoxic activity of flavonoid constituents isolated from Miliusa balansae (Annonaceae)”, Pharmazie, 60(8), 627-9 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 56 Jeetendra N., Manish B (2011), “Correlation of antioxidant activity with phenolic content and isolation of antioxidant compound from Lygodium flexuosum (L.) SW extracts”, Int J Pharm Pharm Sci., 3(2), 48-52 57 Jin L et al (2012), “Characterization and antioxidant activity of a polysaccharide extracted from Sarcandra glabra”, Carbohydr Polym., 90(1), 524-32 58 Jung S.H et al (2004), “Antioxidant activities of isoflavones from the rhizomes of Belamcanda chinensis on carbon tetrachloride-induced hepatic injury in rats”, Arch Pharm Res., 27(2), 184-8 59 Kan R (2005), “Sweet proteins – potential replacement for artificial low calorie sweeteners”, Nutr J., 4(1), 60 Kanchanapoom T., Otsuka H., Ruchirawat S (2007), “Megastigmane glucosides from Equisetum debile and E diffusum”, Chem Pharm Bull., 55(8), 1277-80 61 Karthikeyan M., Deepa K (2010), “Effect of ethanolic extract of Premna corymbosa (Burm f.) Rottl & Willd leaves in complete Freund's adjuvantinduced arthritis in Wistar albino rats”, J Basic Clin Physiol Pharmacol., 21(1), 15-26 62 Katzung B G., Masters S B., Trevor A J ( 2009), Basic and clinical Pharmacology 11th ed, The McGraw-Hill Companies 63 Khonsung P et al (2011), “Hypotensive effect of the water extract of the leaves of Pseuderanthemum palatiferum”, J Nat Med., 65(3-4), 551-8 64 Kim K.H., Wong B.L (1998), “Pharmacological, electrophysiological and toxicity studies of Limacia scandens Lour (Menispermaceae)”, J Ethnopharmacol., 62(2), 137-48 65 Kittleson M.M., Hare J.M., (2005), “Xanthine oxidase inhibitors: an emerging class of drugs for heart failure”, Eur Heart J., 26(15), 1458-60 66 Ko H.H et al (2004), “Anti-inflammatory flavonoids and pterocarpanoid from Crotalaria pallida and C assamica”, Bioorg Med Chem Lett., 14(4), 1011-4 67 Kong L.D et al (2000), “Inhibition of xanthine oxidase by some Chinese medicinal plants used to treat gout”, J Ethnopharmacol., 73(1-2), 199-207 68 Ku S.K et al (2012), “Effect of Curculigo orchioides on reflux esophagitis by suppressing proinflammatory cytokines”, Am J Chin Med., 40(6), 124155 69 Kuang-Hui Y (2007), “Febuxostat: A novel non-purine selective inhibitor of xanthine oxidase for the treatment of hyperuricemia in gout”, Recent Pat Inflamm Allergy Drug Discover., 1, 69-75 70 Latha L.Y et al (2012), “Pharmacological screening of methanolic extract of Ixora species”, Asian Pac J Trop Biomed., 2(2), 149-51 71 Lee H.J et al (2006), “In vitro anti-inflammatory and anti-oxidative effects of Cinnamomum camphora extracts”, J Ethnopharmacol., 103(2), 208-16 72 Li Y et al (2011), “Virtual and in vitro bioassay screening of phytochemical inhibitors from flavonoids and isoflavones against Xanthine oxidase and Cyclooxygenase-2 for gout treatment”, Chem Biol Drug Res., epub ahead of print 73 Liao J.C et al (2005), “Inhibitory effects of 87 species of traditional Chinese herbs on nitric oxide production in RAW264.7 macrophages, activated with lipopolysaccharide and interferon-γ”, Pharm Biol., 43(2), 158-63 74 Lin C.C et al (1997), “The antiinflammatory and liver protective effects of Boehmeria nivea and B nivea subsp nippononivea in rats”, Phytomedicine, 4(4), 301-8 75 Lin C.M et al (2002), “Molecular modeling of flavonoids that inhibits xanthine oxidase”, Biochem Biophys Res Commun., 294(1), 167-72 76 Liu H et al (2009), “Dimeric 1,4-benzoquinone derivatives and a resorcinol derivative from Ardisia gigantifolia”, Phytochemistry, 70(6), 773-8 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 77 Ly T.N., Shimoyamada M., Yamauchi R (2006), “Isolation and characterization of rosmarinic acid oligomers in Celastrus hindsii Benth leaves and their antioxidative activity”, J Agric Food Chem., 54(11), 378693 78 Mahomoodally F.M et al (2012), “Antioxidant, antiglycation and cytotoxicity evaluation of selected medicinal plants of the Mascarene Islands”, BMC Complement Altern Med., 12, 165 79 Mạkié-Singh N et al (1987), “Spectrophotometric assay of xanthine oxidase with 2,2’-azino-di(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonate) (ABTS) as chromogen”, Clin Chim Acta., 162(1), 29-36 80 Manjrekar P.N., Jolly C.I., Narayanan S (2000), “Comparative studies of the immunomodulatory activity of Tinospora cordifolia and Tinospora sinensis”, Fitoterapia, 71(3), 254-7 81 Manosroi A., Saraphanchotiwitthaya A., Manosroi J (2005), “In vivo immunomodulating activity of wood extracts from Clausena excavata Burm f.”, J Ethnopharmacol., 102(1), 5-9 82 Massey V et al (1970), “On the mechanism of inactivation of xanthine oxidase by allopurinol and other pyrazolo[3,4- d]pyrimidines”, J Biol Chem., 245, 2837–2844 83 Mohan V.R et al (2011), “Anti-inflammatory activity of leaf of Erythropalum scandens Bl Bijdr against carrageenan induced paw edema”, Int J PharmTech Res., 3(1), 24-6 84 Muraoka S (1963), "Studies on xanthine oxidase: II Mechanism of substrate inhibition and its reversal by histamine", Biochim Biophys Acta, 73(1), 2738 85 Nayak S.S., Jain R., Sahoo A.K (2011), “Hepatoprotective activity of Glycosmis pentaphylla against paracetamol-induced hepatotoxicity in Swiss albino mice”, Pharm Biol., 49(2), 111-7 86 Nguyen M.T et al (2004), “Xanthine oxidase inhibitory activity of Vietnamese medicinal plants”, Biol Pharm Bull., 27(9), 1414-21 87 Nguyen M.T et al (2005), “Xanthine oxidase inhibitors from the heartwood of Vietnamese Caesalpinia sappan”, Chem Pharm Bull., 53(8), 984-8 88 Nguyen M.T et al (2006), “Xanthine oxidase inhibitors from the flowers of Chrysanthemum sinense”, Planta Med., 72(1), 46-51 89 Nguyen M.T., Nguyen N.T (2012), “Xanthine oxidase inhibitors from Vietnamese Blumea balsamifera L.”, Phytother Res., 26(8), 1178-81 90 Nguyen M.T., Nguyen N.T (2013), “A new lupane triterpene from Tetracera scandens L., xanthine oxidase inhibitor”, Nat Prod Res., 27(1), 61-7 91 Nguyen-Pouplin J et al (2007), “Antimalarial and cytotoxic activities of ethnopharmacologically selected medicinal plants from South Vietnam”, J Ethnopharmacol., 109(3), 417-27 92 Niu K.Y et al (2013), “New iridoid glycoside and triterpenoid glycoside from Premna fulva”, J Asian Nat Prod Res., 15(1), 1-8 93 Noro T et al ( 1983), “ Inhibitors of xanthine oxidase from the flowers and buds of Daphne genkwa”, Chem Pharm.Bull., 31(11), 3984-7 94 Owen P.L., Johns T (1999), “Xanthine oxidase inhibitory activity of northeastern North American plant remedies used for gout”, J Ethnopharmacol., 64(2), 149-60 95 Pacher P., Nivorozhkin A., Szabó C (2006), “Therapeutic effects of xanthine oxidase inhibitors: Renaissance half a century after the discovery of allopurinol”, Pharmacol Rev., 58, 87 - 114 96 Pathmasiri W et al (2005), “Aryl ketones from Acronychia pedunculata with cyclooxygenase-2 inhibitory effects”, Chem Biodivers., 2(4), 463-9 97 Pawar R.K (2011), “Development and validation of HPLC method for the determination of catechin from Smilax perfoliata Lour root”, Int J Curr Pharm Res., 3(1), 30-4 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 98 Pedersen M.E et al (2009), “Pharmacological screening of Malian medicinal plants used against epilepsy and convulsions”, J Ethnopharmacol., 121(3), 472-5 99 Peng J.N., Feng X.Z., Lian X.T (1998), “Iridoids from Hedyotis hedyotidea”, Phytochemistry, 47(8), 1657-9 100 Phuwapraisirisan P et al (2006), “Reactive radical scavenging and xanthine oxidase inhibition of proanthocyanidins from Carallia brachiata”, Phytother Res., 20(6), 458-61 101 Puangpronpitaq D et al (2008), “Antioxidant activities of polyphenolic compounds isolated from Antidesma thwaitesianum Müll Arg seeds and marcs”, J Food Sci., 73(9), C648-53 102 Quang T.H et al (2012), “Anti-inflammatory and PPAR transactivational effects of secondary metabolites from the roots of Asarum sieboldii”, Bioorg Med Chem Lett., 22(7), 2527-33 103 Raj B et al (2013), “Hepatoprotective and antioxidant activity of Cassytha filiformis against CCl4 induced hepatic damage in rats”, Journal of Pharmacy Research, 7(1), 15-9 104 Rao Y.K et al (2012), “The constituents of Anisomeles indica and their antiinflammatory activities”, J Ethnopharmacol., 121(2), 292-6 105 Ruangnoo S et al (2012), “An in vitro inhibitory effect on RAW 264.7 cells by anti-inflammatory compounds from Smilax corbularia Kunth”, Asian Pac J Allergy Immunol., 30(4), 268-74 106 Sajeesh T., Arunachalam K., Parimelazhagan T (2011), “Antioxidant and antipyretic studies on Pothos scandens L.”, Asian Pac J Trop Med., 4(11), 889-99 107 Sánchez-Lozada L.G et al (2008), “Treatment with the xanthine oxidase inhibitor febuxostat lowers uric acid and alleviates systemic and glomerular hypertension in experimental hyperuricaemia”, Nephrol Dial Transplant 23, 1179 - 1185 108 Singh V.K., Ali Z.A., Siddiqui M.K (1997), “Medicinal plants used by the forest ethnics of Gorakhpur district (Uttar Pradesh), India”, Int J Pharmacogn., 35(3), 194-206 109 Spanou C et al (2012), “Flavonoid glycosides isolated from unique legume plant extracts as novel inhibitors of xanthine oxidase”, PLoS ONE, 7(3): e32214 110 Stephen I.S et al (2012), “Antidiabetic and antioxidant activities of Toddalia asiatica (L.) Lam leaves in streptozotocin induced diabetic rats”, J Ethnopharmacol., 143(2), 515-23 111 Sueyoshi E et al (2007), “Bridelioside, a new lignan glycoside from Bridelia glauca Bl f balansae (Tucht.) Hatusima”, J Nat Med., 61(4), 46871 112 Sui X.Y et al (2011), “Molecular authentication of the ethnomedicinal plant Sabiaparviflora and its adulterants by DNA barcoding technique”, Planta Med., 77(5), 492-6 113 Sun T.T et al (2012), “Smilasides M and N, two new phenylpropanoid glycosides from Smilax riparia”, J Asian Nat Prod Res., 14(2), 165-70 114 Sweeney A.P et al (2001),“Xanthine oxidase inhibitory activity of selected Australian native plants”, J Ethnopharmacol., 75(2-3), 273-7.[124] 115 Sweetman S.C (2009), Martindale, The complete drug reference, 36thed, Pharmaceutical Press 116 Tai B.H et al (2009), “Chrysoeriol isolated from the leaves of Eurya ciliata stimulates proliferation and differentiation of osteoblastic MC3T3-E1 cells”, J Asian Nat Prod Res., 11(9), 817-23 117 Tang W., Xu H., Zeng D., Yu L (2012), “The antifungal constituents from the seeds of Itoa orientalis”, Fitoterapia, 83(3), 513-7 118 Theoduloz C et al (1988), “Xanthine oxidase inhibitory activity of Paraguayan Myrtaceae”, J Ethnopharmacol., 24(2-3), 179-83 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 119 Tripathi P., Chauhan N.S., Patel J.R (2012), “Anti-inflammatory activity of Abutilon indicum extract”, Nat Prod Res., 26(17), 1659-61 120 Ueda J.Y et al (2003), “Constituents of the Vietnamese medicinal plant Streptocaulonjuventas and their antiproliferative activity against the human HT-1080 fibrosarcoma cell line”,J Nat Prod., 66(11), 1427-33 121 Umamaheswari M et al (2007), “Xanthine oxidase inhibitory activity of some Indian medicinal plants”, J Ethnopharmacol., 109(3), 547-51 122 Umar M.I et al (2012), “Bioactivity-guided isolation of ethyl-pmethoxycinnamate, and anti-inflammatory constituent, from Kaempferia galanga L extracts”, Molecules, 17(7), 8720-34 123 Vijayan P et al (2003), “In vitro cytotoxicity and antitumour properties of Hypericum mysorense and Hypericum patulum”, Phytother Res., 17(8), 9526 124 Wang H et al (2008), “In vitro and in vivo antioxidant activity of aqueous extract from Choerospondias axillaris fruit”, Food Chem., 106(3), 888-95 125 Wang K et al (2011), “Macrophyllionium and macrophyllines A and B, oxindile alkaloids from Uncaria macrophylla”, J Nat Prod., 74(1), 12-5 126 Wang X et al (2012), “Phytochemicals and biological studies of plants from the genus Balanophora”, Chem Cent J., 6(1), 79 127 Xiang W et al (2005), “Four new prenylated isoflavonoids in Tadehagi triquetrum”, J Agric Food Chem., 53(2), 267-71 128 Xu J.F et al (2008), “New hepatoprotective coumarinolignoids from Mallotus apelta”, Chem Biodivers., 5(4), 591-7 129 Yang G et al (2012), “Inhibition of lipopolysaccharide-induced nitric oxide and prostaglandin E2 production by chloroform fraction of Cudrania tricuspidata in RAW 264.7 macrophages”, BMC Complement Altern Med., 12, 250-6 130 Yang W.S et al (2013), “Dipterocarpus tuberculatus ethanol extract strongly suppress in vitro macrophage-mediated inflammatory responses and in vivo acute gastritis”, J Ethnopharmacol., 146(3), 873-80 131 Yang X.W et al (1992), “Anti-lipid peroxidative effect of an extract of the stems of Kadsura heteroclita and its major constituent, kadsurin, in mice”, Chem Pharm Bull., 40(2), 406-9 132 Yong Y.K et al (2013), “Clinacanthus nutans extracts are antioxidant with antiproliferative effect cultured human cancer cell lines”, Evid Based Complement Alternat Med., epub 2013 Feb 27 133 Yuk S.S et al (2010), “Antiinflammatory effects of Epimedium brevicornum water extract on lipopolysaccharide-activated RAW264.7 macrophages”, Phytother Res., 24(12), 1781-7 134 Zhang H et al (2013), “Antioxidant activity and physicochemical properties of an acidic polysaccharide from Morindaofficinalis”, Int J Biol Macromol., epub ahead of print 135 Zhang H., Yue J.M (2005), “Hasubanan type alkaloids from Stephania longa”, J Nat Prod., 68(8), 1201-7 136 Zhang L et al (2008), “Antioxidant phenypropanoid glycosides from Smilax bracteata”, Phytochemistry, 69(8), 1398-404 137 Zhang X et al (2013), “Anti-hyperglycemic effects and potential mechanisms of action of the caffeoylquinic acid-rich Pandanus tectorius fruit extract in hamsters fed in high fat-diet”, PLoS ONE, 8(4): e61922 138 Zheng J et al (2013), “Two new steroidal saponins from Selaginella uncinata (Desv.) Spring and their protective effect against anoxia”, Fitoterapia, epub ahead of print 139 Zheng L.B et al (2011), “Antioxidant activity and chemical constituents of essential oil and extracts of Rhizoma Homalomenae”, Food Chem., 125(2), 456-63 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi PHỤ LỤC Phụ lục Các mẫu tên loài STT Mẫu Cây thuốc Mẫu 157 Gai (Bohmeria nivea L Gaud.) Mẫu 14 26 Vĩ giai (Stemonurus coriaceus Miers) Mẫu 71 92 Lục lạc ổi (Crotalaria assamica Benth) Mẫu 98 112 Chẩn (Microdesmis casearifolia) Mẫu 100 179 Muồng truổng (Zanthoxylum avicennae) Mẫu 102 151 Mía dò (Costus speciosus Koenig Sm.) Mẫu 116 170 Thiên niên kiện (Homalomena occulta ) Mẫu 119 185 Con khỉ (Pseuderanthemum palatiferum) Mẫu 128 154 Cƣờm rụng (Ehretia acuminata) 10 Mẫu 131 167 Lá khôi (Ardisia silvestris) Phụ lục Các mẫu loài nhƣng khác phận dùng STT Mẫu Cây thuốc Mẫu 38 169 Mẫu 70 88 Cơm cháy (Sambucus javanica Reinw.) Mẫu 103 140 Vú chó (Ficus heterophyllus L) Mẫu 122 124 Củ gió đất (Balanophora sp.) Mẫu 125 127 Rụt (Hex godajam Colebr ex Well.) Bƣớm bạc campuchia (Mussaenda cambodiana Pierre ex Pitard) ... đƣợc thông tin số thuốc Việt Nam có tiềm khai thác 2 Sàng lọc đƣợc thuốc có tiềm điều trị gút thơng qua đƣờng ức chế xanthin oxidase in vitro đĩa 96 giếng Xác định IC50 thuốc có tiềm ức chế XO... kiếm dƣợc liệu có khả ức chế XO, bƣớc đầu trình xác định dƣợc liệu tiềm điều trị gút, đề tài: Sàng lọc thuốc có tiềm điều trị bệnh gút thông qua ức chế xanthin oxidase in vitro đƣợc thực với... nét bệnh gút & enzym xanthin oxidase 1.1.1 Khái niệm chế bệnh sinh bệnh gút 1.1.2 Mối liên quan bệnh gút enzym xanthin oxidase 1.1.3 Enzym xanthin oxidase 1.2 Một số thuốc