Tạo chế phẩm diệt sâu khoang spodoptera litura từ dịch nuôi cấy vi khuẩn serratia marcescens SH1

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP TẠO CHẾ PHẨM DIỆT SÂU KHOANG Spodoptera litura TỪ DỊCH NUÔI CẤY VI KHUẨN Serratia marcescens SH1 Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn: TS NGUYỄN HOÀI HƯƠNG Sinh viên thực hiện: MSSV: 1211100056 LÊ THỊ NGỌC DUNG Lớp: 12DSH01 TP Hồ Chí Minh, 2016 Đồ án tốt nghiệp LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu đồ án trung thực chưa công bố cơng trình khác Tơi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cám ơn thông tin trích dẫn Luận văn rõ nguồn gốc Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2015 Sinh viên thực luận văn Lê Thị Ngọc Dung Đồ án tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Trong suốt quãng đời học, chưa ngày bố mẹ thơi lo lắng chăm sóc cho con, không biểu hay đơn giản câu nói “con thương bố mẹ” Nhân lúc đây, xin ghi khắc công ơn dưỡng dục bố mẹ, có lúc vơ tình làm bố mẹ buồn, hai không bỏ mặc với khó khăn mà ln dõi theo, giúp đỡ sát cánh bên để trưởng thành đến ngày hôm Bố mẹ chỗ dựa tinh thần vững gặp phải vấn đề khó khăn; động lực để đứng dậy sau lần vấp ngã; bách khoa toàn thư giúp giải vấn đề Và sau Với lòng biết ơn sâu sắc Em xin chân thành cảm ơn toàn thể quý thầy cô trường đại học Công nghệ Tp.Hồ Chí Minh nhiệt tình truyền đạt cho em kiến thức quý giá từ ngày đầu em bước vào giảng đường đại học Đặc biệt, em xin chân thành biết ơn Nguyễn Hồi Hương, người thầy đáng kính, ln quan tâm tận tình dạy để em hồn thành đồ án Và quan trọng cô đưa lời khuyên dạy em cách đối mặt với va chạm sống, trang vàng hành trang sau em Em xin chân thành cảm ơn cô Nguyễn Thị Hai quan tâm có hướng dẫn lúc em tập nuôi sâu khoang cô người cho nguồn nấm bệnh phòng thí nghiệm Em xin chân thành cảm ơn cô Đỗ Thị Tuyến hết lòng giúp đỡ, hỗ trợ em địa điểm quét phổ UV – vis Em xin chân thành cảm ơn thầy Huỳnh Văn Thành, thầy Nguyễn Trung Dũng, cô Nguyễn Trần Thái Khanh tạo điều kiện thuận lợi cho em thực đồ án phòng thí nghiệm Cảm ơn tất bạn lớp 12DSH01 12DSH02 ln động viên, giúp đỡ suốt trình học tập trường Cảm ơn anh Nguyễn Hoàng Anh Kha, anh Lê Quốc Vũ, bạn Vũ Hoàng Minh Ngọc, bạn Kiều Nguyễn Phương Vy, bạn Phan Thị Gìn em Trương Hồi Ngun lớp 13DSH03, em Nguyễn Thị Đồ án tốt nghiệp Băng Khanh, em Nguyễn Trung Hậu, em Lê Thị Ngọc Hân đồng hành sát cánh suốt ngày làm đồ án tố nghiệp Xin chân thành cảm ơn! Tp.Hồ Chí Minh, tháng năm 2016 SVTH: Lê Thị Ngọc Dung Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC BẢNG iv DANH MỤC HÌNH v MỞ ĐẦU .1 Chương 1.TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu thuốc 1.1.1 Khái niệm trừ thuốc sâu trừ sâu sinh sinh học học 1.1.2 Những sản phẩm thuốc trừ sâu sinh học 1.1.3 Những mặt ưu điểm hạn chế thuốc trừ sâu sinh học 1.2 Giới thiệu vi khuẩn Serratia marcescens 1.2.1 Lịch sử phát 1.2.2 Phân loại khoa học Serratia marcescens 1.2.3 Đặc điểm Serratia marcescens .8 1.2.3.1 Đặc điểm sinh lí 1.2.3.2 Đặc điểm sinh hóa 1.2.3.3 Đặc điểm phân bố 11 1.3 Một số hợp chất tổng hợp từ Serratia marcescens 11 1.3.1 Sắc tố 11 1.3.2 Biosurfactants 12 1.3.3 Acid béo 13 1.3.4 Enzyme 13 1.3.5 Yếu tố độc lực Serratia marcescens .13 1.4 Giới thiệu Prodigiosin 14 1.4.1 Khái niệm prodigiosin 14 i Đồ án tốt nghiệp 1.4.2 Cấu trúc đặc điểm prodigiosin 15 1.4.3 Hoạt động sinh học prodigiosin .18 i Đồ án tốt nghiệp 1.5 Tiềm tạo chế phẩm trừ sâu từ prodigiosin từ vi khuẩn Serratia marcescens 19 1.6 Cơ chế tổng hợp prodigiosin Serratia marcescens .20 1.7 Một số nghiên cứu giới 25 1.7.1 Tình hình nghiên cứu Serratia marcescens .25 1.7.2 Tình hình nghiên cứu prodigiosin 25 1.8 Khái quát sâu khoang Spodoptera litura 27 1.8.1 Đặc điểm hình thái 27 1.8.2 Đặc điểm sinh học sinh thái 28 1.8.3 Thiên địch .29 1.8.4 Biện pháp phòng trừ 29 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Thời gian, địa điểm .30 2.1.1 Thời gian 30 2.1.2 Địa điểm 30 2.2 Vật liệu – thiết bị – hóa chất 30 2.2.1 Nguồn vi sinh vật .30 2.2.1.1 Nguồn vi khuẩn Serratia marcescens 30 2.2.1.2 Nguồn vi khuẩn thị 30 2.2.1.3 Nguồn nấm bệnh 31 2.2.1.4 Nguồn sâu khoang Spodoptera litura 31 2.2.2 Mơi trường ni cấy hóa chất .31 2.2.3 Dụng cụ, thiết bị .31 2.3 Bố trí thí nghiệm 33 2.4 Phương pháp nghiên cứu – bố trí thí nghiệm 37 2.4.1 Phương pháp ni sâu phòng thí nghiệm .37 2.4.2 Phương pháp diệt tế bào vi khuẩn Serratia marcescens 37 2.4.2.1 Phương pháp xử lí acid 37 2.4.2.2 Phương pháp xử lí nhiệt 38 ii Đồ án tốt nghiệp 2.4.3 Phương pháp khảo sát hoạt tính sinh học .39 2.4.3.1 Phương pháp định tính enzyme 39 2.4.3.2 Phương pháp khảo sát khả kháng khuẩn 43 2.4.3.3 Phương pháp khảo sát khả kháng nấm 46 2.4.3.4 Khảo sát hiệu lực diệt sâu phương pháp quét 48 2.4.4 Khảo sát thời gian bảo quản canh trường lên men sau xử lí 49 2.4.5 Khảo sát hiệu lực diệt sâu invivo .50 2.4.6 Khảo sát thời gian bảo quản chế phẩm 51 Chương KẾT QUẢ, THẢO LUẬN 53 3.1 Xác định thời gian, độ pH tiêu diệt 100% tế bào vi khuẩn Serratia marcescens từ phương pháp xử lí acid HCl 1N 53 3.2 Xác định thời gian, nhiệt độ tiêu diệt 100% tế bào vi khuẩn Serratia marcescens từ phương pháp xử lí nhiệt độ 60 3.3 Khả tiết enzyme ngoại bào 62 3.3.1 Khả giữ lại enzyme ngoại bào từ phương pháp xử lí acid 62 3.3.2 Khả giữ lại enzyme ngoại bào từ phương pháp xử lí nhiệt độ 66 3.4 Khả kháng khuẩn 68 3.4.1 Khả kháng khuẩn dịch canh trường xử lí phương pháp xử lí acid 68 3.5 Hoạt tính kháng nấm 69 3.5.1 Khả kháng nấm dịch canh trường xử lí phương pháp xử lí acid 69 3.6 Hiệu lực diệt sâu 71 3.6.1 Hiệu lực diệt sâu từ canh trường lên men qua xử lí 71 3.6.2 Hiệu lực diệt sâu từ chế phẩm 73 3.7 Xác định thời gian bảo quan canh trường xử lí .75 3.8 Xác định điều kiện bảo quản chế phẩm .79 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO .85 iii Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Một số đặc điểm sinh hóa Serratia marcescens 10 Bảng 1.2 Xác định cấu trúc số chất đại diện prodigiosin (Williams, 1973) 17 Bảng 1.3 Một số sáng chế prodigiosin 26 Bảng 3.1 Prodigiosin unit/tế bào chủng SH1 60 Bảng 3.2 Khả bảo toàn enzyme ngoại bào canh trường xử lí phương pháp xử lí acid 64 Bảng 3.3 Khả bảo toàn enzyme ngoại bào canh trường xử lí phương pháp xử lí nhiệt 66 Bảng 3.4 Khả kháng khuẩn Escherichia coli Staphylococcus aureus hoạt chất prodigiosin canh trường xử lí 68 Bảng 3.5 Tỉ lệ ức chế nấm Fusarium sp canh trường xử lí 70 Bảng 3.6 Tỉ lệ tử vong sâu khoang tuổi 73 Bảng 3.7 Tỉ lệ tử vong sâu khoang tuổi 75 Bảng 3.8 Tỉ lệ prodigiosin lại sau ngày bảo quản (%) 82 Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Hình dáng màu sắc khuẩn lạc vi khuẩn Serratia marcescens Hình 1.2 Vi khuẩn Serratia marcescens quan sát kính hiển vi (Gillen Gibbs, 2011) Hình 1.3 Cấu trúc hình học phẳng hợp chất prodigiosin (Krishna, 2008) 16 Hình 1.4 Các chất đại diện prodigiosin (Furstner, 2003) 17 Hình 1.5 Hoạt tính kháng khuẩn prodigiosin (Ramina Samira,2009) 19 Hình 1.6 So sánh cụm sinh tổng hợp prodigiosin (cụm pig) từ Serratia ATCC 39.006, Sma 274 cụm sinh tổng hợp undecylprodigiosin (cụm màu đỏ) từ Streptomyces coelicolor A3 (2) (Cerdenor cộng sự, 2001) 22 Hình 1.7 Quá trình sinh tổng hợp prodigiosin (Caspi R, 2014) 24 Hình 1.8 Vòng đời sâu khoang Spodoptera litura 28 Hình 2.1 Quy trình khảo sát khả tiêu diệt tế bào vi khuẩn S.mercescens hoạt tính diệt sâu prodigiosin canh trường xử lí 34 Hình 2.2 Quy trình thử nghiệm khảo sát thời gian tiêu diệt tế bào vi khuẩn S.mercescens 35 Hình 2.3 Quy trình khảo sát hoạt tính sinh học canh trường vi khuẩn sau xử lí acid 36 Hình 2.4 Quy trình khảo sát chế phẩm diệt sâu từ prodigiosin 36 Hình 2.5 Cách bố trí nghiệm thức đĩa thạch mơi trường Lipit 40 Hình 2.6 Cách bố trí nghiệm nghiệm thức đĩa thạch mơi trường Casein 41 Hình 2.7 Cách bố trí nghiệm nghiệm thức đĩa thạch môi trường huyền phù chitin 1% 43 Hình 2.8 Cách bố trí nghiệm nghiệm thức kháng khuẩn đĩa thạch môi trường NA 45 Hình 2.9 Bố trí nghiệm thức kháng nấm đĩa thạch PDA 47 Hình 3.1 Khả tiêu diệt tế bào vi khuẩn Serratia marcescens SH1 thời điểm giờ, 24 pH pH 56 Tỉ lệ Prodigiosin lại Nhiệt độ 2oC 108.0 106.0 104.0 102.0 100.0 98.0 96.0 94.0 92.0 90.0 88.0 86.0 Ngoài Trong Ngoài Trong Ngoài Trong Ngoài Trong Ngoài Trong sáng sáng sáng sáng sáng tối tối tối tối tối Ngày thứ Ngày thứ Ngày thứ Ngày thứ Ngày thứ o Hình 3.16 So sánh tỉ lệ prodigiosin lại canh trường nhiệt độ C Nhiệt độ phòng Tỉ lệ prodigiosin lại 105.0 100.0 95.0 90.0 85.0 80.0 75.0 Ngoài Trong Ngoài Trong Ngoài Trong Ngoài Trong Ngoài Trong sáng sáng sáng sáng sáng tối tối tối tối tối Ngày thứ Ngày thứ Ngày thứ Ngày thứ Ngày thứ Hình 3.17 So sánh tỉ lệ prodigiosin lại canh trường nhiệt độ phòng Tỉ lệ prodigiosin lại Nhiệt độ trời 104.0 102.0 100.0 98.0 96.0 94.0 92.0 90.0 88.0 86.0 84.0 Ngoài Trong Ngoài Trong Ngoài Trong Ngoài Trong Ngoài Trong sáng sáng sáng sáng sáng tối tối tối tối tối Ngày thứ Ngày thứ Ngày thứ Ngày thứ Ngày thứ Hình 3.18 So sánh tỉ lệ prodigiosin lại canh trường ngồi trời 3.8 Xác định mơi trường bảo quan chế phẩm Thí nghiệm tiến hành với mục địc bảo quản prodigiosin chế phẩm biến tính thất yếu tố khách quan càn tốt, giúp đảm bảo hoạt lực diệt sâu chế phẩm o Kết sau q trình trích ly lỏng – lỏng thu kết Ở nhiệt độ -20 C, o thu nhận 8,184 mg/ml, đạt hiệu suất 38,16 Ở nhiệt độ tủ mát (2 C) thu nhận 20,016 o mg/ml, đạt hiệu suất 93,32 Ở nhiệt độ phòng (37 C) thu nhận 18,228 mg/ml, đạt hiệu o suất 84,99 Ở điều kiện môi trường nhiệt độ 60 C thu nhận 7,808 mg/ml, đạt hiệu suất 36,40 Ở điều kiện mơi trường ngồi trời, chế phẩm tiếp xúc trực tiếp với ánh sáng mặt trời thu nhận 3,973 mg/ml, đạt hiệu suất 18,52 Tóm lại, hoạt chất prodigiosin bảo quản tốt điều kiện mát mẻ (2 o C); prodigiosin bị biến tính điều kiện bảo quản ánh sáng mặt trời (ngoài trời) hoạt chất bị biến tính đến 80% lượng prodiosin ban đầu Hình 3.19 Chế phẩm trước sau ngày bảo quản Canh trường vi khuẩn SH1 xử lí với acid 4h, đưa pH thêm phụ gia để tăng độ bám prodigiosin (CMC 1%), tăng khả khuếch tán prodigiosin (Tween 80 0,02%) giảm tiếp xúc trực tiếp prodigiosin với ánh sáng (rỉ đường 1%) Vì vậy, chế phẩm sinh học diệt sâu nồng độ đậm đặc trạng thái huyền phù, sệch lại Nếu đo trực tiếp canh trường với OD 499 dẫn đến sai số, ảnh hưởng kết hiệu suất thu hồi Vì vậy, tiến hành trích ly lỏng – lỏng canh trường xử lí với petroleum ether, đo OD 535 Hình 3.20 Trích ly lỏng – lỏng chế phẩm Sau tiến hành trích ly lỏng – lỏng, để thu lại prodigiosin lại chế phẩm Xử lí thống kê với phần mềm SAS ANOVA với khoảng tin cậy 95%, kết cho thấy sau ngày bảo quản, nồng độ prodigiosin lại mơi trường nhiệt độ tử a mát cao 20,016 mg/ml, nhiệt độ phòng có lượng prodigiosin sau thu hồi b 18,228 mg/ml, môi trường ngồi trời có nồng độ prodigiosin sau thu hồi thấp (Bảng 3.14) Có thể nói, chế phẩm sau bổ sung chất phụ gia có khả o bảo quản ngày điều kiện nhiệt độ mát mẻ (2 C) nhiệt độ phòng (30 o C) Mặc dù bổ sung rỉ đường giúp chế phẩm tránh ánh sáng trực tiếp, tia UV có tia nắng mặt trời làm biến tính gần hồn tồn prodigiosin để chế phẩm mơi trường ngồi trời Bảng 3.14 Giá trị nồng độ prodigiosin sau ngày bảo quản (mg/ml) o Trước cho Bảo quản sau phụ gia ngày c 21,449 8,184 Nhiệt độ mát (2 C) 21,449 20,016 Nhiệt độ phòng 21,449 18,228 Nhiệt độ 60 C 21,449 7,808 Nhiệt độ ngồi trời 21,449 3,973 Nhiệt độ tủ đơng (-20 C) o o 0,2 a 0,5 b 1,7 d 0,1 e 0,1 Dựa vào bảng 3.14, tính hiệu suất bảo quản prodigiosin chế phẩm sau o o o ngày bảo quản điều kiện khác -18 C, C, nhiệt độ phòng, 60 C ngồi trời Từ chọn mơi trường bảo quản tốt cho chế phẩm Qua kết xử o lí thống kê SAS phân tích ANOVA, hiệu suất nhiệt độ C 93,319 2,3 giá trị hiệu suất bảo quản tốt điều kiện khảo sát, đạt giá trị tin cậy 95% Hiệu suất bảo quản nhiệt độ phòng cho giá trị ổn mức 85 7,9 Đạt hiệu suất thấp điều kiện bảo quản nhiệt độ trời với 18,52 0,4 Do ảnh hưởng trực tiếp tia mặt trời làm prodigiosin bị biến tính Vậy nên, việc bảo quản o chế phẩm tốt nên nhiệt độ C (xem bảng phụ lục B) Tỉ lệ prodigiosin lại Khả bảo quản chế phẩm 100.00 90.00 80.00 70.00 60.00 50.00 40.00 30.00 20.00 10.00 0.00 Nhiệt độ tủ đơng (-18oC) Nhiệt độ mát Nhiệt độ phòng Nhiệt độ 60oC Nhiệt độ (2oC) trời Điều kiện bảo quản Hình 3.21 Hiệu suất bảo quản chế phẩm sau ngày theo dõi điều kiện môi o o o trường: -18 C, C, nhiệt độ phòng, nhiệt độ trời nhiệt độ cao (60 C) KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận o Sau canh trường S.marcescens SH1 xử lí nhiệt 65 C, 15 phút, tế bào vi khuẩn bị tiêu diệt hoàn tồn prodigiosin có giá trị OD 535 1,278; nhiên enzyme ngoại bào chitinase, lipase bị bất hoạt hoàn toàn giữ lại phần enzyme protease Sau xứ lý canh trường S.marcescens SH1 HCl 1N pH = giờ, toàn vi khuẩn bị tiêu diệt, pH pH 2, tế bào vi khuẩn Serratia marcescens bị tiêu diệt hồn tồn Riêng pH2 có giá trị OD 499 prodigiosin thời điểm ngưng xử lí với acid 18,00 Khi canh trường S.marcescens xử lí phương pháp acid có ưu điểm so với phương pháp xử lí nhiệt enzyme ngoại bào khơng bị biến tính Vì vậy, phương pháp xử lí acid HCl 1N, đưa pH xử lí biện pháp tiêu diệt tế bào vi khuẩn khả thi phù hợp để thu hợp chất prodigiosin nhằm tạo chế phẩm sinh học diệt sâu Canh trường vi khuẩn S.marcescens xử lí có khả kháng nấm nấm Fusarium sp với tỉ lệ ức chế 53,19%, Canh trường vi khuẩn S.marcescens xử lí khả cạnh tranh lấn át với vi khuẩn gây bệnh Escherichia coli Staphylococcus aureus Hiệu diệt sâu canh trường vi khuẩn S.marcescens chế phẩm sinh học -4 diệt sâu tốt nồng độ pha loãng 10 , tương đương nồng độ prodigiosin 16,5 ng/cm Với canh trường vi khuẩn qua xử lí acid, vòng 72h tỉ lệ sâu tử vong 56,67% đến hết ngày thứ tỉ lệ sâu tử vong đạt 100% Đối với chế phẩm diệt sâu sinh học, tỉ lệ tử vong sâu khoang tuổi 56,67% sau 48h cho ăn phương pháp quét đạt tỉ lệ tử vong 100% vòng 96h, có khả diệt sâu tương đương với thuốc trừ sâu sinh học REASGANT 3.6EC Cả canh trường vi khuẩn sau xử lí chế phẩm sinh học trừ sâu bảo quản o tốt nhiệt độ C, nên tránh ánh sáng trực tiếp từ mặt trời Đối với canh trường vi khuẩn sau xử lí, tỉ lệ prodigiosin lại sau ngày bảo o quan đạt 94,2 hai môi trường ủ tối sáng nhiệt độ C Ở nhiệt độ phòng, hiệu việc bảo quản sáng ủ tối 85,7 85,9 Ở nhiệt độ mơi trường ngồi trời (30 o C) sáng ủ tối 90,3 93,3 o Đối với chế phẩm, môi trường bảo quản tốt C với hiệu suất 93,3, lần o o lượt môi trường nhiệt độ phòng 84,9, nhiệt độ -18 C 60 C 38,6, 36,4; mơi trường ngồi trời 18,5 Từ đây, rút kết chung cho tồn q trình sử dụng phương pháp xử lí acid HCl 1N, pH để tiêu diệt hoàn toàn tế bào vi khuẩn Khả -4 diệt sâu khoang canh trường xử lí pha loãng với nồng độ 10 để đạt hiệu diệt sâu tối ưu Đồng thời bảo quản canh trường chế phẩm điều o kiện nhiệt độ mát mẻ (2 C) mơi trường nhiệt độ bảo quản tối ưu Kiến nghị Tiếp tục khảo sát khả diệt sâu chủng Serratia marcescens SB H B.K h ả o s t s ự ả n h h ng Mở rộng phổ ký chủ cho chế phẩm sinh học diệt ẩ sâu m l ê n t h ự c v ậ t , h n g c ủ a c h ế p m ô i t r TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt: Nguyễn Hiếu Dân (2013) Khảo sát hoạt tính sinh học vi khuẩn Serratia marcescens phân lập từ tuyến trùng EPN hợp chất màu dạng prodigiosin tổng hợp vi khuẩn này, Đồ án tốt nghiệp, trường Đại học Cơng nghệ TP HCM Nguyễn Hồng Anh Kha (2013) Thu nhận sắc tố màu đỏ dạng prodigiosin tổng hợp vi khuẩn phân lập từ tuyến trùng EPN, Đồ án tốt nghiệp, trường Đại học Công nghệ TP HCM Nguyễn Hoài Hương, Nguyễn Hoàng Anh Kha, Nguyễn Hiếu Dân, Nguyễn Thị Hai (2013) Phân lập chủng vi khuẩn từ tuyến trùng EPN khảo sát độc lực chúng sâu khoang Spodoptera litura, Báo cáo khoa học, P1 -16 Nguyễn Hoài Hương, Nguyễn Hoàng Anh Kha(2015) Khả diệt sâu khoang Spodoptera litura vi khuẩn Serratia marcescens phân lập từ tuyến trùng EPN hợp chất thứ cấp prodigiosin vi khuẩn này, Tạp chí phát triển KH & CN, tập 18 Tài liệu tiếng Anh Pryce L Haddix* and Terry F Werner (2000) Spectrophotometric Assay of Gene Expression:Serratia marcescens Pigmentation Lapenda Lins et al (2014), Production and toxicological evaluation of Prodigiosin from Serratia marcescens UCP/WFCC1549 on Mannitol Solid Medium, International Journal of Applied Research in Natural Products, Vol (2), pp 32-38 Kamble K.D, Hiwarale V.D (2012), Prodigiosin production from Serratia marcescens strains obtained from farm soil, INTERNATIONAL JOURNAL OF ENVIRONMENTAL SCIENCES Volume 3, No 1, 2012 Vijayalakshmi et al (2016), Production of Prodigiosin from Serratia marcescens and its antioxidant and anticancer potential, International Journal of Advanced Research in Biological Sciences Volume 3, Issue – 2016, 3(3): 75 – 88 Chidambaram Kulandaisamy et al (2009), An Insightful Overview on Microbial Pigment, Prodigiosin, Electronic Journal of Biology, 2009, Vol 5(3): 49-61 Anuradha V Giri et al (2004), A novel medium for the enhanced cell growth and production of prodigiosin from Serratia marcescens isolated from soil, BMC Microbiology 2004, 4:11 Anita Khanafari, Mahnaz Mazaheri Assadi and Fatemeh Ahmadi Fakhr (2006), Review of Prodigiosin, Pigmentation in Serratia marcescens, Online Journal of Biological Sciences (1): 1-13, 2006 Helvia W Casullo de Araújo, K Fukushima, and Galba M Campos Takaki (2010), Prodigiosin Production by Serratia marcescens UCP 1549 Using RenewableResources as a Low Cost Substrate, Molecules 2010, 15, 6931-6940 Tài liệu có nguồn từ Internet http://bvtvld.gov.vn/quan-ly-thuoc-bao-ve-thuc-vat/tinh-hinh-su-dung-thuoc-bvtv/884dac-diem-cua-hoat-chat-abamectin.html http://www.biocyc.org/META/NEW-IMAGE?type=PATHWAY&object=PWY7547&detail-level=2&orgids=(AAEO224324%20ECOLI)# http://www.bvtvhcm.gov.vn/document.php?id=51&cid=6 http://www.vietlinh.vn/giai-phap-sinh-hoc-huu-co/sinh-hoc-thuoc-tru-sau.asp ... lực diệt sâu chế phẩm từ dịch nuôi cấy xử lý acid Khảo sát ảnh hưởng điều kiện bảo quản lên chế phẩm Kết cấu đồ án Đồ án Tạo chế phẩm diệt sâu khoang Spodoptera litura từ chủng vi khuẩn Serratia. .. pháp tiêu diệt tế bào vi khuẩn Serratia marcescens canh trường lên men Sản xuất chế phẩm diệt sâu từ dịch nuôi cấy Serratia marcescens SH1 phân lập từ tuyến trùng diệt sâu EPN bỏ qua q trình trích... litura từ dịch nuôi cấy vi khuẩn Serratia marcescens SH1 Mục đích nghiên cứu Sản xuất chế phẩm sinh học diệt sâu chứa prodigiosin Nhiệm vụ nghiên cứu Xác định phương pháp tiêu diệt tế bào vi khuẩn