Tuyển chọn vi khuẩn bacillus SP có khả năng đối kháng nấm mốc sinh aflatoxin trên hạt nông sản

Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC DANH MỤC VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ,ĐỒ THỊ, SƠ ĐỒ, HÌNH ẢNH vi MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Tình hình nghiên cứu Mục đích Mục tiêu đồ án Phương pháp nghiên cứu a) Phương pháp luận b) Phương pháp xử lý số liệu Nội dung đồ án Kết cấu đồ án CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Nấm Aspergillus flavus 1.1.1 Hình thái 1.1.2 Sinh thái 1.1.3 Thành tế bào 1.2 Độc tố aflatoxin 11 1.2.1 Lịch sử phát aflatoxin 11 1.2.2 Các loài có khả sinh độc tố 12 1.2.3 Cơ chất môi trường 14 1.2.4 18 Cấu trúc tính chất aflatoxin 1.2.5 Cơ chế gây độc aflatoxin 20 1.2.6 Độc tính aflatoxin 21 1.2.7 24 Giới hạn mức cho phép độc tố aflatoxin i 1.2.8 26 Đồ án tốt nghiệp Tình hình nhiễm độc aflatoxin 1.3 Các phương pháp phát Aflatoxin 27 1.3.1 Phương pháp phát quang sinh học (Hamed K.Abass cộng sự, 2004) 27 1.3.2 Phát đường lý - hoá học 32 i Đồ án tốt nghiệp 1.3.3 Các phương pháp định lượng 35 1.4 Phương pháp khử nhiễm aflatoxin 37 1.4.1 Phương pháp vật lý học 37 1.4.2 Phương pháp hóa học 38 1.4.3 Phương pháp sinh học: 39 CHƯƠNG II: MỤC TIÊU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 41 2.1 Vật liệu – thiết bị – hóa chất 41 2.1.1 Vật liệu 41 2.1.2 Thiết bị dụng cụ 41 2.1.3 Môi trường - Hóa chất 41 2.2 Phương pháp nghiên cứu 43 2.2.1 Mục tiêu 43 2.2.2 Mục đích nghiên cứu 43 2.2.3 Nội dung 43 2.2.4 Phương pháp nghiên cứu 43 2.2.5 Bố trí thí nghiệm 44 3.1 Phân lập nấm sinh aflatoxin từ sản phẩm nông nghiệp 55 3.1.1 Phân lập nấm từ sản phẩm nông nghiệp khảo sát đặc điểm hình thái 55 3.1.2 Khảo sát hình thái nấm phân lập môi trường phân biệt AFPA 57 3.1.3 Khảo sát khả sinh aflatoxin chủng nấm phân lập 58 3.1.4 Định tính aflatoxin phương pháp HPLC 60 3.2 Danh sách chủng vi khuẩn Bacillus spp có sẵn từ nguồn nông sản dễ nhiễm mốc đất trồng 61 3.3 Tuyển chọn vi khuẩn tổng hợp hợp chất kháng nấm sinh aflatoxin 62 3.3.1 Khảo sát vi khuẩn có khả kháng nấm đồng ni cấy với nấm sinh aflatoxin 62 3.3.2 Chọn lọc chủng có khả tổng hợp chất kháng nấm mạnh 65 3.3.3 Phương pháp đối kháng sử dụng dịch ni cấy có tơ nấm làm chất cảm ứng 65 3.4 Khảo sát đặc điểm VK chọn lọc xác định sản phẩm trao đổi chất kháng nấm 68 3.4.1 Khảo sát hình thái, sinh lý, sinh hóa khả sinh enzyme ngoại bào chủng VK chọn lọc 68 3.4.2 Xác định tác nhân đối kháng nấm mốc 71 ii Đồ án tốt nghiệp 3.5 Khảo sát khả sử dụng sản phẩm trao đổi chất chủng CS1b bảo quản hạt phương pháp tạo màng bao 77 KẾT LUẬN, KIẾN NGHỊ 82 Kết luận 82 Kiến nghị 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO 84 PHỤ LỤC Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC VIẾT TẮT AFPA: Aspergillus flavus and parasiticus agar EA: ethyl acetate NA: Nutrient agar NB: Nutrient broth MT: Môi trường PDA: Potato dextrose agar HPLC: High pressure liquid chromatography TLC: Thin layer chromatography UV: Ultraviolet VK: vi khuẩn Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Các thành phần thành tế bào số nấm Bảng 1.2 : Thành phần màng nguyên sinh chất Bảng 1.3: Một số lồi nấm mốc có khả sinh Aflatoxin 13 Bảng 1.4: Ảnh hưởng chủng Asp flavus điều kiện nuôi cấy để sản sinh Aflatoxin 16 Bảng 1.5: Ảnh hưởng đường hexose khác lên lượng Aflatoxin sinh 17 Bảng 1.6:Tính chất hóa lý số aflatoxin 20 Bảng 1.7: Ảnh hưởng Aflatoxin có mặt thức ăn đến biểu bệnh lý vật nuôi 22 Bảng 1.8: Giới hạn aflatoxin số nuớc theo tiêu chuẩn FDA 24 Bảng 1.9: Những quy định tạm thời cho phép thức ăn chăn nuôi nguyên liệu làm thức ăn chăn nuôi Việt Nam 25 Bảng 1.10: Các phương pháp khử nhiễm aflatoxin đường sinh học 39 Bảng 2.1: Thành phần dung dịch sử dụng để làm màng bao đậu phộng 53 Bảng 3.1: Khả sinh aflatoxin nấm mốc phân lập sản phẩm nông nghiệp 59 Bảng 3.2: Danh sách chủng vi khuẩn phân lập 62 Bảng 3.3: Tỉ lệ đối kháng trực tiếp chủng vi khuẩn với chủng nấm 63 Bảng 3.4: Tỉ lệ đối kháng (%) chủng VK tuyển chọn chủng nấm CĐP1 theo phương pháp 66 Bảng 3.5: Đặc điểm nuôi cấy vi khuẩn CS1b 68 Bảng 3.6: Đường kính vòng phân giải chất dịch ni cấy CS1b 70 Bảng 3.7: Kết phân tích định tính chất có dung dịch trích ly 71 Bảng 3.8: Đường kính vòng phân giải chất dịch kết tủa protein từ dịch nuôi cấy CS1b 75 Đồ án nghiệpphát triển hạt đậu phộng Bảng 3.9: Khả ức chế nấm mốc tốt vi khuẩn bao màng chitosan sản phẩm trao đổi chất CS1b 95 Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ,ĐỒ THỊ, SƠ ĐỒ, HÌNH ẢNH Hình 1.1: Hình thái nấm mốc Asp.flavus Hình 1.2: Nấm mốc Asp.flavus hạt đậu phộng Hình 1.3: Cấu tạo Aflatoxin 19 Hình 1.4: Cơ chế tác dụng aflatoxin B1 mức tế bào gan 21 Hình 2.1: Sơ đồ chi tiết phân lập vi nấm sinh aflatoxin từ hạt đậu phộng, đậu nành, cà phê hư hỏng, khảo sát khả sinh aflatoxin chúng 44 Hình 2.2: Sơ đồ bố trí thí nghiệm khảo sát đặc điểm vi khuẩn chọn lọc xác định sản phẩm trao đổi chất có hoạt tính kháng nấm 47 Hình 2.3: Sơ đồ bố trí thí nghiệm khảo sát đặc điểm VK chọn lọc xác định sản phẩm trao đổi chất có hoạt tính kháng nấm 50 Hình 2.4: Sơ đồ thí nghiệm ứng dụng bảo quản hạt đậu phộng màng bao kháng nấm 54 Hình 3.1: Mẫu hạt nuôi cấy môi trường WA 56 Hình 3.2: Các chủng nấm phân lập PDA 57 Hình 3.3: Kết chạy sắc ký mỏng (TLC) chủng vi nấm phân lập phát phát huỳnh quang chiếu tia UV 254 nm 60 Hình 3.4: Kết định tính aflatoxin phương pháp HPLC 61 Hình 3.5: Kết khẳng định khả sinh tính aflatoxin phương pháp tái nhiễm 62 Hình 3.6: Đồ thị biểu diễn khả đối kháng chủng VK Bacillus spp nấm sinh aflatoxin 65 Hình 3.7: Đồ thị biểu diễn khả đối kháng chủng VK tuyển chọn chủng nấm CĐP1 67 Hình 3.8 : Kết đối kháng vi khuẩn CS1b với nấm mốc CĐP1 sau 72 68 Hình 3.9: Hình thái vi khuẩn CS1b 70 án bào tốt nghiệp Hình 3.10: Khả tiết enzyme Đồ ngoại chủng CS1b sau 48 ủ 71 Đồ án tốt nghiệp Hình 3.11: Khảo sát khả đối kháng nấm mốc dịch protein kết tủa từ canh trường nuôi cấy vi khuẩn CS1b 74 Hình 3.12: Phát enzyme thu hồi phương pháp kết tủa sử dụng ethanol phương pháp đĩa thạch 75 Hình 3.13: Khảo sát đối kháng cao ethyl acetate phát triển nấm mốc 77 Hình 3.14: Đồ thị biểu diễn khả đối kháng nấm mốc CĐP1 78 Hình 3.15: Theo dõi trình phát triển nấm mốc vi khuẩn hạt đậu phộng bao gói chitosan kết hợp sản phẩm trao đổi chất vi sinh vật Kết coating đậu 82 vii phộng ngày thứ 10 Đồ án tốt nghiệp Within 2201.33 28 78.619 groups Total (Corr.) 14859.6 41 The StatAdvisor Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 12,3852, tỷ lệ dự toán nhóm với ước tính nhóm P-value F- test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện 14 biến mức độ tin cậy 95,0% Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 66.0b CS1b 64.0b CS1+ 69.7b VK4 61.0b VK01 20.0a VK02 65.0b VK03 55.0b VK05 64.7b VK06 25.0a VK07 68.0b VK08 32.0a VK09 64.3b VK10 29.7a VK11 62.7b C1.4 Đối với chủng nấm ĐN1 17 Đồ án tốt nghiệp I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% CS CS CS V VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK 1a 1b 1+ K4 01 02 03 05 06 07 08 09 10 11 42 46 47 42 13 16 14 21 13 14 10 31 47 53 40 17 21 17 15 10 15 44 34 47 46 14 36 12 21 12 14 11 11 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of Minimum Maximum Range variation CS1a 31.3333 20.232 64.5702% 8.0 44.0 36.0 CS1b 37.0 7.93725 21.452% 31.0 46.0 15.0 CS1 47.0 0.0 0.0% 47.0 47.0 0.0 VK4 47.0 5.56776 11.8463% 42.0 53.0 11.0 VK01 11.6667 3.21455 27.5533% 8.0 14.0 6.0 VK02 25.3333 22.0303 86.9616% 0.0 40.0 40.0 VK03 12.3333 4.50925 36.5615% 8.0 17.0 9.0 VK05 19.3333 2.88675 14.9315% 16.0 21.0 5.0 VK06 14.3333 2.51661 17.5578% 12.0 17.0 5.0 VK07 16.6667 3.78594 22.7156% 14.0 21.0 7.0 VK08 11.3333 1.52753 13.4782% 10.0 13.0 3.0 VK09 10.0 3.4641 34.641% 8.0 14.0 6.0 VK10 12.0 2.64575 22.0479% 10.0 15.0 5.0 VK11 5.0 4.58258 91.6515% 0.0 9.0 9.0 Total 42 21.4524 15.3912 71.7457% 0.0 53.0 53.0 ANOVA Table 18 Đồ án tốt nghiệp Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 7.44 0.0000 Square 7531.07 13 579.313 2181.33 28 77.9048 groups Within groups Total (Corr.) 9712.4 41 The StatAdvisor Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 7,43617, tỷ lệ dự toán nhóm với ước tính nhóm P-value F- test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện 14 biến mức độ tin cậy 95,0% 19 Đồ án tốt nghiệp Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 31.3cd CS1b 37.0de CS1+ 47.0e VK4 47.0e VK01 11.7ab VK02 25.3bcd VK03 12.3ab VK05 19.3abc VK06 14.3ab VK07 16.7abc VK08 11.3ab VK09 10.0a VK10 12.0ab VK11 5.0a C1.5 Đối với chủng nấm ĐN2 I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% CS CS CS V VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK 1a 1b 1+ K4 01 02 03 05 06 07 08 09 10 11 68 45 40 42 12 17 15 0 55 50 57 60 18 16 22 14 14 64 47 50 55 16 17 22 Summary Statistics Count Average Standard deviation CS1a 62.3333 6.65833 Coeff of Minimum Maximum Range variation 10.6818% 20 55.0 68.0 13.0 Đồ án tốt nghiệp CS1b 47.3333 2.51661 5.31678% 45.0 50.0 5.0 CS1 49.0 17.4367% 40.0 57.0 17.0 8.544 VK4 52.3333 9.29157 17.7546% 42.0 60.0 18.0 VK01 5.33333 6.1101 114.564% 0.0 12.0 12.0 VK02 17.0 1.0 5.88235% 16.0 18.0 2.0 VK03 3.0 2.0 66.6667% 1.0 5.0 4.0 VK05 16.0 1.0 6.25% 15.0 17.0 2.0 VK06 14.6667 12.7017 86.6025% 0.0 22.0 22.0 VK07 4.66667 8.0829 173.205% 0.0 14.0 14.0 VK08 7.33333 5.85947 79.9018% 3.0 14.0 11.0 VK09 0.0 0.0 0.0 0.0 VK10 6.66667 3.21455 48.2183% 3.0 9.0 6.0 VK11 1.33333 2.3094 173.205% 0.0 4.0 4.0 Total 42 20.5 107.642% 0.0 68.0 68.0 0.0 22.0667 21 Đồ án tốt nghiệp ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 38.41 0.0000 Square 18904.5 13 1454.19 1060.0 28 37.8571 groups Within groups Total (Corr.) 19964.5 41 The StatAdvisor Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 38,4126, tỷ lệ dự tốn nhóm với ước tính nhóm P-value F- test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện 14 biến mức độ tin cậy 95,0% Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 62.3f CS1b 47.3e CS1+ 49.0e VK4 52.3ef VK01 5.3ab VK02 17.0d VK03 3.0a VK05 16.0cd VK06 14.7bcd VK07 4.7ab VK08 7.3abcd VK09 0.0a 22 Đồ án tốt nghiệp VK10 6.7abc VK11 1.3a C1.6 Đối với chủng nấm ĐN3 I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% CS CS CS V VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK 1a 1b 1+ K4 01 02 03 05 06 07 08 09 10 11 38 28 29 37 12 27 32 31 21 34 34 27 27 31 41 44 32 31 24 31 32 29 29 38 34 29 32 23 25 28 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of Minimum Maximum Range variation CS1A 32.3333 5.50757 17.0337% 27.0 38.0 11.0 CS1B 28.0 3.57143% 27.0 29.0 2.0 CS1 29.6667 1.1547 3.89225% 29.0 31.0 2.0 VK4 38.6667 2.08167 5.38362% 37.0 41.0 4.0 VK1 - 19.5533 -234.64% -27.0 12.0 39.0 1.0 8.33333 VK2 35.0 8.544 24.4114% 27.0 44.0 17.0 VK03 - 5.03322 -14.245% -40.0 -30.0 10.0 35.3333 VK05 31.0 1.73205 5.58726% 29.0 32.0 3.0 VK06 4.33333 4.72582 109.057% -1.0 8.0 9.0 VK07 31.3333 0.57735 1.84261% 31.0 32.0 1.0 VK08 -70.0 -3.77964% -73.0 -68.0 5.0 VK09 22.6667 1.52753 6.73908% 21.0 24.0 3.0 VK10 22.3333 13.2035 59.1203% 8.0 34.0 26.0 2.64575 23 Đồ án tốt nghiệp VK11 31.0 3.0 Total 42 13.7619 31.3383 9.67742% 28.0 34.0 6.0 227.718% -73.0 44.0 117.0 ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 56.76 0.0000 Square 38793.6 13 2984.12 1472.0 28 52.5714 groups Within groups Total (Corr.) 40265.6 41 Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm Chiếc F-tỷ lệ, mà trường hợp 56,7632, tỷ lệ dự toán nhóm với ước tính nhóm Pvalue F-test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện 14 biến mức độ tin cậy 95,0% Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1A 32.3ef CS1B 28.0ef CS1+ 29.6ef VK4 38.6f VK1 0.0c VK2 35.0f VK03 0.0b VK05 31.0ef VK06 4.3d VK07 31.3ef 24 Đồ án tốt nghiệp VK08 0.0a VK09 22.7e VK10 22.3e VK11 31.0ef C1.7 Đối với chủng nấm HCP2 I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% I% CS CS CS V VK VK VK VK VK VK VK VK VK VK 1a 1b 1+ K4 01 02 03 05 06 07 08 09 10 11 64 55 57 59 41 55 36 18 16 21 56 58 60 57 12 61 51 14 39 12 15 21 96 56 59 57 12 54 51 37 12 13 20 Summary Statistics Count Average Standard Coeff of Minimum Maximum Range deviation variation 21.166 29.3972% 56.0 96.0 40.0 CS1a 72.0 CS1b 56.3333 1.52753 2.71158% 55.0 58.0 3.0 CS1 58.6667 1.52753 2.60374% 57.0 60.0 3.0 VK4 57.6667 1.1547 2.00237% 57.0 59.0 2.0 VK01 10.0 3.4641 34.641% 6.0 12.0 6.0 VK02 52.0 10.1489 19.5171% 41.0 61.0 20.0 VK03 1.0 1.73205 173.205% 0.0 3.0 3.0 VK05 52.3333 2.3094 4.41287% 51.0 55.0 4.0 VK06 4.66667 8.0829 173.205% 0.0 14.0 14.0 VK07 37.3333 1.52753 4.09159% 36.0 39.0 3.0 VK08 14.0 24.7436% 12.0 18.0 6.0 VK09 14.6667 1.52753 10.4149% 13.0 16.0 3.0 3.4641 25 Đồ án tốt nghiệp VK10 1.0 1.73205 173.205% 0.0 3.0 3.0 VK11 20.6667 0.57735 2.79363% 20.0 21.0 1.0 Total 42 32.3095 25.3035 78.316% 0.0 96.0 96.0 ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 40.51 0.0000 Square 24925.6 13 1917.36 1325.33 28 47.3333 groups Within groups Total (Corr.) 26251.0 41 The StatAdvisor Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 40,5075, tỷ lệ dự toán nhóm với ước tính nhóm P-value F- test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện 14 biến mức độ tin cậy 95,0% 26 Đồ án tốt nghiệp Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 72.0f CS1b 56.3e CS1+ 58.7e VK4 57.7e VK01 10.0abc VK02 52.0e VK03 1.0a VK05 52.3e VK06 4.7ab VK07 37.3d VK08 14.0bc VK09 14.7bc VK10 1.0a VK11 20.7c C2 Kết đối kháng chủng vi khuẩn chọn lọc với CDP1 C2.1 Sử dụng dịch ly tâm canh trường đồng nuôi cấy I% I% I% I% CS1a CS1b VK4 CS1+ 68 32 64 65 30 63 68 30 63 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff variation 27 of Minimum Maximum Range Đồ án tốt nghiệp CS1a 3.66667 0.57735 15.7459% 3.0 4.0 1.0 CS1b 67.0 2.58515% 65.0 68.0 3.0 VK4 30.6667 1.1547 3.76533% 30.0 32.0 2.0 CS1 63.3333 0.57735 0.911606% 63.0 64.0 1.0 Total 12 41.1667 27.028 65.6552% 3.0 68.0 65.0 1.73205 ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 2140.18 0.0000 Square 8025.67 2675.22 10.0 1.25 groups Within groups Total (Corr.) 8035.67 11 Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 2140.18, tỷ lệ dự tốn nhóm với ước tính nhóm P-value F- test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện biến mức độ tin cậy 95,0% Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 3.7a CS1b 67.0d VK4 30.7b CS1+ 63.3c C2.2 Sử dụng dịch nuôi cấy có bổ sung tơ nấm làm chất cảm ứng có ly tâm 28 Đồ án tốt nghiệp I% I% I% I% CS1a CS1b VK4 CS1+ 59 61 57 61 58 61 58 60 58 60 57 57 Summary Statistics Count Average Standard Coeff deviation of Minimum Maximum Range variation CS1a 58.3333 0.57735 0.989743% 58.0 59.0 1.0 CS1b 60.6667 0.57735 0.951676% 60.0 61.0 1.0 VK4 57.3333 0.57735 1.00701% 57.0 58.0 1.0 CS1 59.3333 2.08167 3.50843% 57.0 61.0 4.0 Total 12 58.9167 1.62135 2.75194% 57.0 61.0 4.0 ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 4.56 0.0382 Square 18.25 6.08333 10.6667 1.33333 groups Within groups Total (Corr.) 28.9167 11 Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 4.56, tỷ lệ dự tốn nhóm với ước tính nhóm P-value F-test nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện biến mức độ tin cậy 95,0% 29 Đồ án tốt nghiệp Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 58.3a CS1b 60.7b VK4 57.3a CS1+ 59.3ab Summary Statistics Count Average Standard Coeff deviation of Minimum Maximum Range variation CS1a 58.3333 0.57735 0.989743% 58.0 59.0 1.0 CS1b 60.6667 0.57735 0.951676% 60.0 61.0 1.0 VK4 57.3333 0.57735 1.00701% 57.0 58.0 1.0 CS1 59.3333 2.08167 3.50843% 57.0 61.0 4.0 Total 12 58.9167 1.62135 2.75194% 57.0 61.0 4.0 ANOVA Table Source Sum of Df Mean Squares Between F-Ratio P-Value 4.56 0.0382 Square 18.25 6.08333 10.6667 1.33333 groups Within groups Total (Corr.) 28.9167 11 Bảng ANOVA chia phương sai liệu thành hai thành phần: thành phần nhóm thành phần nhóm F-Ratio trường hợp 4.56, tỷ lệ dự toán nhóm với ước tính nhóm P-value F-test 30 Đồ án tốt nghiệp nhỏ 0,05, có khác biệt đáng kể mặt thống kê phương tiện biến mức độ tin cậy 95,0% Multiple Range Tests Vi khuẩn CS1a 58.3a CS1b 60.7b VK4 57.3a CS1+ 59.3ab 31 ... 61 3.3 Tuyển chọn vi khuẩn tổng hợp hợp chất kháng nấm sinh aflatoxin 62 3.3.1 Khảo sát vi khuẩn có khả kháng nấm đồng nuôi cấy với nấm sinh aflatoxin 62 3.3.2 Chọn lọc chủng có khả tổng... sinh aflatoxin - Khẳng định khả sinh aflatoxin vi nấm - Sàng lọc, tuyển chọn định danh sơ VK Bacillus - Khảo sát khả đối kháng VK phân lập với vi nấm sinh aflatoxin mạnh - Khảo sát tác nhân đối kháng. .. khả đối kháng chủng VK Bacillus spp nấm sinh aflatoxin 65 Hình 3.7: Đồ thị biểu diễn khả đối kháng chủng VK tuyển chọn chủng nấm CĐP1 67 Hình 3.8 : Kết đối kháng vi khuẩn