Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết methanoltừ cây elephantopus sp

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA CAO CHIẾT METHANOL TỪ CÂY ELEPHANTOPUS SP Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn: Th S Phạm Minh Nhựt Sinh viên thực hiện: Phạm Hữu Tuấn MSSV: 1151110538 Lớp: 11DSH02 TP Hồ Chí Minh, 2015 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đồ án nghiên cứu riêng thực sở lý thuyết, tiến hành nghiên cứu thực tiễn hướng dẫn ThS Phạm Minh Nhựt Các số liệu, kết nêu đồ án trung thực chưa công bố công trình nghiên cứu khác Tơi xin chịu trách nhiệm lời cam đoan Tp Hồ Chí Minh, ngày …… tháng …… năm…… Sinh viên Phạm Hữu Tuấn LỜI CÁM ƠN Trước hết, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Ban Giám Hiệu Trường Đại học Công Nghệ Tp Hồ Chí Minh, q thầy giảng dạy Khoa Công nghệ sinh học - Thực phẩm - Môi trường tất thầy cô truyền dạy kiến thức quý báu cho em suốt năm học vừa qua Qua em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy Phạm Minh Nhựt, người định hướng nghiên cứu, quan tâm, tận tình hướng dẫn giúp đỡ em suốt thời gian làm khố luận tốt nghiệp Bên cạnh em xin cảm ơn thầy Phòng Thí nghiệm Khoa Công nghệ sinh học - Thực phẩm - Môi trường anh chị, bạn bè nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để em hồn thành tốt đề tài Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình ln bên cạnh, động viên lúc khó khăn, nản lòng suốt thời gian học tập, nghiên cứu sống Tp Hồ Chí Minh, ngày……tháng……2015 Sinh viên Phạm Hữu Tuấn Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC TRANG Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục .i Danh sách chữ viết tắt iv Danh sách hình v Danh sách bảng vii MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục đích nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu Elephantopus sp 1.1.1 Nguồn gốc 1.1.2 Phân loại 1.1.3 Đặc điểm số loài thuộc Elephantopus sp 1.1.4 Phân bố 1.1.5 Công dụng 1.2 Cơ chế kháng khuẩn hợp chất từ thực vật 1.2.1 Khái niệm hoạt tính kháng khuẩn hợp chất từ thực vật 1.2.2 Cơ chế kháng khuẩn hợp chất từ thực vật i 1.2.3 Một số hợp chất kháng khuẩn từ thực vật 1.2.4 Tình hình nghiên cứu hoạt tính kháng khuẩn thực vật giới Việt Nam 12 1.3 Ảnh hưởng dung môi tách chiết đến hoạt tính kháng khuẩn thực vật 14 1.4 Giới thiệu số nhóm vi sinh vật gây bệnh 15 1.4.1 Nhóm vi sinh vật gây bệnh tiêu chảy 15 1.4.2 Nhóm vi sinh vật gây bệnh hội da 21 CHƯƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.1 Thời gian địa điểm 27 2.1.1 Thời gian 27 2.1.2 Địa điểm 27 2.2 Vật liệu 27 2.2.1 Nguồn mẫu 27 2.2.2 Vi sinh vật thị 27 2.2.3 Hóa chất, dụng cụ thiết bị 28 2.4 Phương pháp nghiên cứu 29 2.4.1 Phương pháp xử lý tách chiết hợp chất kháng khuẩn 29 2.4.2 Phương pháp tăng sinh vi sinh vật thị 29 2.4.3 Phương pháp pha loãng mẫu 30 2.4.4 Phương pháp bảo quản giữ giống vi sinh vật thị 30 2.4.5 Phương pháp tách phân đoạn từ cao tổng methanol 30 2.4.6 Phương pháp đánh giá hoạt tính kháng khuẩn cao chiết 31 2.4.7 Phương pháp xác định số MIC 32 ii 2.4.8 Phương pháp xác định thành phần hóa học 33 2.4.9 Phương pháp xử lý số liệu 34 2.5 Bố trí thí nghiệm 34 2.5.1 Thí nghiệm 1: Thu nhận cao chiết methanol từ Elephantopus sp 34 2.5.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cao tổng methanol từ Elephantopus sp 36 2.5.3 Thí nghiệm 3: Tách chiết phân đoạn từ cao tổng methanol 75% từ Elephantopus sp 37 2.5.4 Thí nghiệm 4: Đánh giá khả kháng khuẩn phân đoạn cao tổng methanol 38 2.5.5 Thí nghiệm 5: Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) cao tổng methanol Elephantopus sp 39 2.5.6 Thí nghiệm 6: Định tính số thành phần có Elephantopus sp 41 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 45 3.1 Hiệu suất thu hồi cao chiết methanol từ Elephantopus sp 45 3.2 Hoạt tính kháng khuẩn sơ cao tổng methanol từ Elephantopus sp 45 3.3 Nồng độ ức chế tối thiểu cao tổng Elephantopus sp 49 3.4 Định tính sơ thành phần hóa học Elephantopus sp 50 3.5 Hoạt tính kháng khuẩn cao tổng Elephantopus sp qua phân đoạn 53 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 58 4.1 Kết luận 58 4.2 Đề nghị 58 Tài liệu tham khảo 59 iii iv DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT BF: Butanol fraction EF: Ethyl acetate fraction EMB: Eosin Methylene Blue HF: Hexan fraction ME: dịch chiết methanol 75% MIC: Minimum Inhibitory Concentration: Nồng độ ức chế tối thiểu PSMs: Plant Secondary Metabolites TSA: Trypticase Soya Agar TSB: Trypton Soya Broth XLD: Xylose Lysine Deoxycholate WF: Water fraction DANH SÁCH CÁC HÌNH Trang Hình 1.1 Hình thái Elephantopus scaber Hình 1.2 Hình thái Elephantopus mollis Hình 1.3 Hình thái Elephantopus tomentosus Hình 1.4 Các điểm tác động PSMs lên vi khuẩn Gram dương, Gram âm nấm Hình 1.5 Hình thái E.coli kính hiển vi điện tử 15 Hình 1.6 Khuẩn lạc E.coli môi trường EMB 16 Hình 1.7 Hình thái Vibrio kính hiển vi điện tử 17 Hình 1.8 Khuẩn lạc Vibrio mơi trường Chrom agar 17 Hình 1.9 Hình thái Salmonella kính hiển vi điện tử 18 Hình 1.10 Khuẩn lạc Salmonella mơi trường XLD 19 Hình 1.11 Hình thái Shigella kính hiển vi điện tử 20 Hình 1.12 Khuẩn lạc Shigella mơi trường Macconkey 20 Hình 1.13 Hình thái Pseudomonas kính hiển vi điện tử 22 Hình 1.14 Khuẩn lạc Pseudomonas aeruginosa mơi trường thạch thường22 Hính 1.15 Hình thái Enterococcus faecalis kính hiển vi điện tử 23 Hình 1.16 Khuẩn lạc Enterococcus faecalis mơi trường thạch máu BA 24 Hình 1.17 Hình thái Staphylococcus kính hiển vi điện tử 25 Hình 1.18 Khuẩn lạc Staphylococcus aureus mơi trường Baird Parker bổ sung egg yolk 25 Hình 2.1 Hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết methanol 75% (100 mg/ml) chủng Escheriachia coli (trái) Shigella flexneri 37 Hình 2.2 Hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn hexan (20 mg/ml) butanol (50 mg/ml) chủng Escheriachia coli Shigella flexneri 39 Hình 2.3 Hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết methanol 75% (25 mg/ml) chủng Listeria monocytogenes Vibrio alginolyticus (phải) 40 Hình 3.1 Hoạt tính kháng khuẩn cao tổng methanol 75% (100 mg/ml) nhóm Escherichia spp 45 Hình 3.2 Hoạt tính kháng khuẩn cao tổng methanol 75% (100 mg/ml) chủng Shigella flexneri, Salmonella typhii, Vibrio cholerae Vibrio alginolyticus 46 Hình 3.3 Hoạt tính kháng khuẩn cao tổng methanol 75% (100 mg/ml) chủng Listeria monocytogen Pseudomonas aeruginosa 47 Hình 3.4 Thử nghiệm định tính tannin 52 Hình 3.5 Thử nghiệm định tính alkaloid 53 Hình 3.6 Thử nghiệm định tính flavonoid 53 Hình 3.7 Hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn nhóm Escherichia54 Hình 3.8 Hoạt tính kháng khuẩn của phân đoạn chủng Shigella flexneri, Salmonella typhii, Vibrio cholerae Vibrio alginolyticus 54 Hình 3.9 Hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn lên chủng Listeria monocytogenes chủng Pseudomonas aeruginosa 55 vii CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận Cao tổng methanol 75% từ Elephantopus sp có hoạt tính kháng khuẩn chủng vi khuẩn gây bệnh đường ruột bao gồm E coli O157:H7, E coli 0208, E coli, E.coli-ETEC, S typhii, S flexneri, V alginolyticus, V cholerae số chủng vi sinh vật gây bệnh hội khác bao gồm L monocytogenes, P aeruginosa Chỉ số MIC dịch chiết methanol 75% từ Elephantopus sp từ 25 mg/ml đến 100 mg/ml Thành phần hóa học chứa Elephantopus sp bao gồm carbohydrate, alkaloid, flavonoid, sterol, saponin, tannin Phân đoạn hexan từ cao tổng methanol 75% thể hoạt tính kháng khuẩn chủng E coli O157:H7, E coli 0208, E coli, E.coli-ETEC, S flexneri, V alginolyticus, V cholerae Phân đoạn butanol thể hoạt tính kháng khuẩn chủng E coli O157:H7, E coli 0208, E coli, E.coli-ETEC, S flexneri L monocytogenes Phân đoạn ethyl acetate thể hoạt tính chủng E coli O157:H7, E coli 0208, E.coli-ETEC, V cholerae L monocytogenes Cuối phân đoạn nước thể họa tính chủng E coli, S typhii P aeruginosa 4.2 Đề nghị Định danh xác định loài Elephantopus Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn Elephantopus sp nhiều loại dung môi Xác định MIC bằng phương pháp pha lỗng mơi trường lỏng (broth dilution method) Định lượng thành phần hóa học chứa Elephantopus sp TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Chang Tran (2014) Trực khuẩn lỵ (Shigella), Xetnghiemmau, 07-05-2014, xem 1706-2015, link: Trần Quang Cảnh (2012) Trực khuẩn mủ xanh Xetnghiemdakhoa.com 23-09-2012, xem 17-06-2015, link: < http://xetnghiemdakhoa.com/diendan/printthread.php?tid=748> Trần Quang Cảnh (2012) Tụ cầu khuẩn Xetnghiemdakhoa.com 27-06-2012, xem 17-06-2015, link: Trần Văn Cường (2009) Phân lập, xác định đăc tính sinh học E coli, Salmonella gây tiêu chảy cho lợn sau cai sữa nuôi tỉnh Lào Cai đề xuất biện pháp phòng trị Luận văn thạc sĩ nông nghiệp, thú y, trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Nguyễn Thị Hiền ctv (2010) Chất kháng khuẩn thực vật Tiểu luận môn công nghệ chế biến rau trái, Kỹ thuật hóa học Đại học bách khoa TP.HCM Mạnh Hùng (2015) Đại Hoàng ứng dung chế phẩm OPC, Opcpharma, 04/03/2015, xem 17-06-2015, link: Nguyễn Thúy Hương (2011) Phân tích vi sinh thực phẩm, Khoa công nghệ thực phẩm, Đại học công nghiệp thực phẩm TP.HCM Đặng Thị Hoàng Oanh ctv (2006) “Xác định vị trí phân loại khả kháng thuốc kháng sinh vi khuẩn Vibrio phát sáng phân lập từ hậu ấu trùng tơm sú (Penaeus monodon)” Tạp chí Nghiên cứu Khoa học, 42-52, Trường Đại học Cần Thơ Hồng Sầm Hứa Văn Thao (2012) Hoạt tính sinh học saponin với ung thư, TruongSinhThang 17/08/2012, xem 17-06-2015, link: Dương Văn Sĩ (2010) Tìm hiểu vi khuẩn streptococcus faecalis (Enterococcus faecalis), Chuyên đề, Nông học, Đại học Nơng Lâm Nguyễn Hồng Tuấn ctv (2012) Bệnh tả www.thuoc.vn 18-08-2012 xem 17-062015, link: Lê Thị Bích Uyên (2007) Khảo sát hoạt tinh kháng khuẩn kháng nấm chất chiết thô từ lô hội (Aloe vera) hoa phấn (Mirabilis jalapa L.) ni cấy In vitro Khóa luận tốt nghiệp, cơng nghệ sinh học, Đại học nông lâm TP.HCM Nguyễn Thị Như Yến cộng (2011) Pseudomonas flourescens khả tạo độc tố mosquitocidal exotoxin Seminar Công nghệ sinh học-Thực phẩm-Môi trường, Đại học Công Nghệ TP.HCM TÀI LIỆU TIẾNG ANH Aibinu ctv (2007) “In vitro antimicrobial activity of crude extracts from plants Bryophyllum pinnatum and Kalanchoe crenata” Afr J Traditional, Complementary and Alternative Medicines, (3): 338 – 344 Alyokhin A.V, (2002) “Infestation of Elephantopus mollis (Asteraceae) flowerheads by Tetreuaresta obscuriventris (Diptera: Tephritidae) on Kauai, Hawaiian islands” Entomological News, 113(4):247-252 Anees, A., Abbas, F A., Sufia, H., & Lim, H.K (2009) “Extraction, separation and identification of chemical ingredients of Elephantopus scaber using Factorial design of experiment International Journal of chemistry vol.1, No Antara Sen and Amla Batra (2012) “Evaluation of antimicrobial activity of different solvent extracts of medicinal plant: Melia azedarach L” International journal of current pharmaceutical Research Vol 4, I (2): 67-73 Chang-Geun Kang ctv (2011) “Evaluation of Antimicrobial Activity of the Methanol Extracts” Toxicol Res, Vol 27, No 1, pp 31-36 Consolacion, Y.R., Agnes, B.A., & Chien-Chang, S (2009) “Antimicrobial terpenoids from Elephantopus mollis” NRCP Research Journal, 10 (1): 33-38 Doriane E Djeussi ctv (2013) “Antibacterial activities of selected edible plants extracts against multidrug-resistant Gram-negative bacteria” BMC Complementary and Alternative Medicine, 13:164 Ghadir A El-Chaghaby ctv (2011) Evaluation of the antioxidant and antibacterial properties of various solvents extracts of Annona squamosa L leaves Arabian Journal of Chemistry, 7, 227–233 Hammer M.L.A Johns E.A (1993) “Tapping an Amazonian plethora: four medicinal plants of Marajo Island, Para (Brazilourna)” J Ethnopharm 40, 53-75 Ibtisam Mohammed Ababutain (2011) “Antimicrobial Activity of Ethanolic Extracts From Some Medicinal Plant” Australian Journal of Basic and Applied Sciences, 5(11): 678-683 Inta, A ctv (2008) “A comparative study on medicinal plants used in Akha’s traditional medicine in China and Thailand, cultural coherence or ecological divergence?” J Ethnopharmacol 116: 508-517 Jaganath I.B (2000) Herbs the green pharmacy of Malaysia Kuala Lumpur: Vinpress,76−7 Jasmine R Daisy P, (2008) “Effect of crude extract and fraction from Elephantopus scaber on hyperglycemia in Streptozotocin-diabetic rats” Int J Biol Chem 1: 111-116 Murugesan S ctv (2011) “Phytochemical screening and Antimicrobial activity of the leaves of Memecylon umbellatum Burm F”.Journal of Applied Pharmaceutical Science (1): 42-45 Muthumani P ctv (2010) “Anti-diarrhoeal and cardiotonic activity of extracts of Elephantopus scaber linn in experimental animals” Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences Volume Issue Page No Poli A ctv (1992) Preliminary pharmacologic evaluation of crude whole plant extracts of Elephantopus scaber Part I: In vivo studies J Ethnopharmacol 37(1):716 Radulovíc ctv (2013) “Antimicrobial Plant Metabolites: Structural Diversity and Mechanism of Action” Current Medicinal Chemistry, 20, 932-952 Silvia Martins ctv (2013) Antibacterial activity of crude methanolic extract and fractions obtained from Larrea tridentata leaves Industrial Crops and Products, 306– 311 Thatoi H.N, ctv (2008) “Antimicrobial Activity and Ethnomedicinal Uses of Some Medicinal Plants” Similipal Biosphere Reserve, Orissa Asian J of Plant Sci 7: 260-267 Tim Cushnie ctv (2014) “Alkaloids: An overview of their antibacterial, antibiotic- enhancing and antivirulence activities” 44(5), pp 377–386 Wang B ctv (2012) “A new sesquiterpene lactone from Elephantopus tomentosus” J Asian Nat Prod Res 14(7):700-3 Wang L ctv (2004) “Chemical composition of the essentia oil of the Elephantopus scaber from Southern China” Z Naturforsch C, 59(5-6):327-9 Yam, M.F ctv (2009) “Anti-inflammatory and Analgesic Effects of Elephantopus tomentosus Ethanolic Extract” J Acupunct Meridian Stud 2(4):280−287 PHỤ LỤC A: KẾT QUẢ KHÁNG KHUẨN CÂY ELEPHANTOPUS SP Bảng.A.1 Kết kháng khuẩn dịch chiết methanol 75% (100 mg/ml) từ Elephantopus sp L L L ầ ầ ầ Esch eric Escher1 01 ichia 0 Escheric hia En ter Listeria i Lister ia Salmone lla Salmo nella Salmone lla Salm onell Shigella b Shigella fl Shigella s Vibrio al Vibrio ch Vi Vibri o 1 Staph yloco Entero cocc Đường kính giếng thạch lỗ mm Đồ án tốt nghiệp Bảng A.2 Hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn hexan (HF 20 mg/ml), ethyl acetate (EF 40 mg/ml), butanol (BF 50 mg/ml) nước (WF 50 mg/ml)từ phân đoạn methanol 75% H C F h L L L L ủ E s c E s E s E nt er ot L i Liste S a m S a S a 98 1 1 3 E B F F L L L L L L L 3 1 1 9 1 1 2 1 1 7 W F L 1 1 0 1 0 al m Đồ án tốt nghiệp S h S h S h V i V i V i 9 1 1 0 9 p se St a E n Đường kính giếng thạch lỗ mm 1 1 Đồ án tốt nghiệp Bảng A.3 Kết xác định nồng độ ức chế tối thiểu MIC cao tổng methanol 75% từ Elephantopus sp (mm) Chủ ng L EV sc E sc E sc E nt er ot Li st Li st S al S al S al S al S hi S hi S hi L 1 1 L 1 L 1 L 1 L L L L L L L 3 1 9 1 1 3 2 1 8 1 1 1 1 8 Đồ án tốt nghiệp Vi 1 9 8 9 br 4 Vi 1 br Vi br Vi br P 1 se 2 St a E nt Đường kính giếng thạch lỗ mm Đồ án tốt nghiệp Bảng A.4 Hoạt tính kháng khuẩn kháng sinh ciprofloxacin 500 µg/ml 500 µg/ml (mm) Chủ ngL L L L L L 3 E vi 0 1 13 sc 3 E 0 12 12 sc 5 E 0 1 13 sc 3 E 0 30 31 nt 5 Li 0 11 12 st 5 Li 0 1 12 st 2 S 0 11 al S 0 13 12 al 5 S 0 1 12 al S 0 1 al 1 S 0 0 0 hi S 0 1 13 hi 3 S 1 33 32 hi 5 .5 Vi 1 3 br 6 4 Vi 1 22 2 br 3 2 Vi 1 32 33 br 8 .5 Vi 1 2 28 br 1 8 P 0 12 11 12 se 5 St 0 1 12 a 2 E 0 11 12 nt 5 Đường kính giếng thạch lỗ mm Đồ án tốt nghiệp PHỤ LỤC B: KẾT QUẢ XỬ LÝ THỐNG KÊ Kết xử lý phần mềm Statgraphics Centurion XV version 15.1.02 với trắc nghiệm Tukey Bảng B.1 Kết xử lý thống kê hoạt tính kháng khuẩn Escherichia VS Cou V 3nt E.co li E.co li DC 020 DC K DC O15 E.co li E.co li- DC ET Me Ho an X mog 10.6 667 11.1 XX 667 12.3 XX 333 X 13.1 667 X 13.1 667 X 13.3 333 X 17.5 X 31.0 Bảng B.2 Kết xử lý thống kê hoạt tính kháng khuẩn Samonella VS Cou Me Ho V 3nt an mog S.ty 11.3 X phi 333 DC 12.5 X Bảng B.3 Kết xử lý thống kê hoạt tính kháng khuẩn Shigella VS Cou Me Ho V 3nt an mog S.fl 10.6 X exn 667 DC 13.1 X 667 Bảng B.4 Kết xử lý thống kê hoạt tính kháng khuẩn Vibrio VS Cou V 3nt V chol DC chol V algi DC algi Me Ho an X mog 11.6 667 13.3 XX 333 14.8 XX 333 X 16.1 667 Bảng B.5 Kết xử lý thống kê hoạt tính kháng khuẩn Listeria VS Cou Me Ho V 3nt an mog DC 12.1 X 667 X L.m 12.5 ono Bảng B.6 Kết xử lý thống kê hoạt tính kháng khuẩn Psedomonas aegurinosa VS Cou Me Ho V 3nt an mog DC 12.1 X 667 X Pse 13.0 udo Bảng B.7 Kết xử lý số liệu hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn cao chiết methanol Escheriachia Bảng B.7.1 Escherichia 0208 Đồ án tốt nghiệp pha n EF HF BF CIP Cou 3nt 3 Me Ho an X mog 8.83 333 X 9.16 667 9.83 X 333 12.6 X 667 Bảng B.7.2 Escheriachia O15:H7 pha nHF BF EF CIP Cou nt 3 3 Me Ho an mog 9.83 X 333 X 10.0 10.5 X 13.3 X 333 Bảng B.7.3 E coli-ETEC pha n HF BF EF CIP Cou 3nt 3 Me Ho an X mog 13.3 333 15.1 XX 667 X 16.6 667 X 31.3 333 Bảng B.7.4 E coli pha n WF HF BF CIP Cou 3nt 3 Me Ho an X mog 9.16 667 XX 10.6 667 12.5 XX 13.3 X 333 Bảng B.8 Kết xử lý số liệu hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn cao chiết methanol Salmonella pha Cou Me Ho n mog WF 3nt an 10.1 X 667 X CIP 12.5 Bảng B.9 Kết xử lý số liệu hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn cao chiết methanol Shigella pha n HF BF CIP Cou 3nt 3 Me Ho an X mog 8.83 333 X 9.83 333 X 13.1 667 Bảng B.10 Kết xử lý số liệu hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn cao chiết methanol Vibrio Bảng B.10.1 V cholerae pha n EF HF CIP Cou 3nt 3 Me Ho an X mog 9.16 667 X 10.1 667 X 13.3 333 Đồ án tốt nghiệp Bảng B.10.2 V alginolyticus pha Cou Me Ho n mog HF 3nt an 8.83 X 333 X CIP 16.1 667 Bảng B.11 Kết xử lý số liệu hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn cao chiết methanol Psedomonas aegurinosa pha nWF CIP Cou nt 3 Me Ho an X 11.8 mog 333 X 12.1 667 ... định khả kháng khuẩn cao chiết từ Elephantopus sp Bước đầu xác định thành phần hóa học có Elephantopus sp Nội dung nghiên cứu Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn cao chiết methanol phân đoạn từ Elephantopus. .. Elephantopus sp 45 3.2 Hoạt tính kháng khuẩn sơ cao tổng methanol từ Elephantopus sp 45 3.3 Nồng độ ức chế tối thiểu cao tổng Elephantopus sp 49 3.4 Định tính sơ thành phần hóa học Elephantopus. .. Thu nhận cao chiết methanol từ Elephantopus sp 34 2.5.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cao tổng methanol từ Elephantopus sp 36 2.5.3 Thí nghiệm 3: Tách chiết phân